动物合格证号:辽实条合字1号与辽实质合字008。
[0063] 试验方法:取预先选好的小白鼠30只，全部用脱毛剂脱毛，脱毛面积约占全身1/3。 次日禁食不禁水17小时，按体重随机分三组，每组10只，雌、雄各半，组1作为高剂量组，整体 脱毛区涂抹本发明药剂〇.5g，相当于25g/kg，组2作为低剂量组，1/3脱毛区涂抹本发明药剂 〇.17g，相当于8.5g/kg，组3作为对照组，整体脱毛区涂抹95%医用酒精0.5ml，给药后立即 观察动物出现的反应。
[0064] 试验结果:给药5-10分钟后，组1受试白鼠表现出对刺激反应过敏的兴奋状态，出 现乱蹦乱跳现象，有部分白鼠呈殴斗状态，持续2-3小时后逐渐恢复正常;组2受试白鼠仅见 给药部位皮肤抖动，因药物刺激所致;组3对照组受试白鼠未出现异常反应。给药后观察7 天，受试白鼠均能恢复健康，未见其他异常改变。
[0065] 试验结论:小白鼠皮肤涂抹给药，与剂量为25g/kg时，受试动物可出现过敏性的兴 奋状态;剂量为8.5g/kg时，受试动物未见异常改变，临床给药途径与本次试验一致，成人临 床试验剂量每敷两贴共〇. 〇834g/kg，组2剂量8.5g/kg是成人临床试验剂量的101倍，由此可 看出，成人同时敷2贴，每贴2.5g是安全的。
[0066]试验3.豚鼠皮肤过敏试验
[0067] 试验目的：通过豚鼠皮肤重复接触受试药物后，观察受试药物对机体免疫系统影 响在皮肤上的反应，了解药物对皮肤有无过敏反应及其程度，为临床用药的安全性提供参 考。
[0068] 受试药物:本发明为中药膏药剂型，成黑褐色，有粘性、溶于酒精，不溶于水。溶媒 对照为95 %医用酒精。
[0069]阳性对照组:2，4-二硝基氯代苯，天津化学试剂一厂，批号:940127。
[0070]受试动物:体重250_300g白色短毛豚鼠，由中国医科大学实验动物中心提供，实验 动物合格证号:辽实条合字1号与辽实质合字008。
[0071] 试验方法：
[0072] 1)取预先选好的豚鼠40只，按体重随机分四组，每组10只，雌、雄各半，组1涂抹受 试药物，组2涂抹阳性对照品，组3涂抹溶媒95%医用酒精，组4为空白对照组。在给药前24小 时，将受试动物背部两侧用脱毛剂脱毛，脱毛剂为硫化钠与普通浆糊1:10混匀，脱毛区为每 侧3*3cm 2。受试豚鼠分笼常规饲养。
[0073] 2)致敏接触:将本发明发酵中药制剂涂抹于组1每只豚鼠的左侧脱毛区，0.2g/只， 阳性对照品1%浓度的2,4_二硝基氯代苯涂抹于组2每只豚鼠的左侧脱毛区，0.2ml/只，溶 媒95%医用酒精涂抹于组3只豚鼠的左侧脱毛区，0.2ml/只，蒸馏水精涂抹于组4豚鼠的左 侦概毛区，0.2ml/只。持续6小时后，将组1、组2皮肤上的药物拭去。第7天、第14天，按照同样 方法重复试验。
[0074] 3.激发接触:于末次致敏给药后14天，以致敏接触同样方法，将上述各组受试药物 涂抹于右侧脱毛区，其中组2涂抹药物改为0.1 %浓度的2，4-二硝基氯代苯。6小时后，拭去 涂抹于组1、组2豚鼠皮肤上的药剂，即刻观察，再于涂抹药物后24、48、72小时分别观察过敏 反应情况，并记录反应数，如表1。
[0075] 试验结果:各组受试动物均未见水肿形成，其中组2皮肤可见红斑形成；
[0076] 表1各组受试豚鼠 72小时内出现的皮肤过敏反应数
[0077]
[0078]
[0079] 由上表可见，阳性对照品的致敏发生率为100%，受试药物与95%医用酒精和蒸馏 水一样，致敏发生率为〇 %。
[0080] 结论:根据文献致敏性评价标准（中华人民共和国卫生部药政管理局《中药新药研 究指南》，P211)评价，本发明的发酵中药制剂涂抹给药对豚鼠皮肤无致敏性。
[0081] 试验4.镇痛作用试验
[0082] 受试药物:本发明为中药膏药剂型，成黑褐色，有粘性、溶于酒精，不溶于水。将此 发酵中药制剂用95%医用酒精调成糊状，供试验用。
[0083]其他药物：阳性对照药去痛片，沈阳市康卫制药厂产;致痛剂，冰乙酸，东北制药总 厂一分厂，批号870401;脱毛剂，硫化钠，天津化学试剂六厂产，批号921118,与普通浆糊混 匀。
[0084]受试动物：昆明种封闭群小白鼠，由中国医科大学实验动物中心提供，实验动物合 格证号:辽实条合字1号与辽实质合字008。
[0085]试验方法:选取18-22g健康小白鼠40只，禁食不禁水17小时，按体重随机分4组，每 组10只，雌、雄各半，将40只白鼠背部脱毛剂脱毛，组1为空白对照组，涂抹适量95%医用酒 精，组2为低剂量组，涂抹5g/kg剂量的受试药物，组3为高剂量组，涂抹10g/kg剂量的受试药 物，组4为用阳性对照药去痛片灌胃给药，用量为0.66g/kg，给药45分钟后，向所有受试小白 鼠腹腔注射〇. 7 %冰乙酸溶液0.2ml/只致痛，稳定5分钟，记录10分钟内各组小白鼠的扭体 反应次数，用t检验法比较各组平均扭体反应次数的差异显著性，检测受试药物的镇痛作 用，结果见表2。
[0086]表2受试药物对小白鼠扭体反应次数的影响
[0088] 试验结果:本发明配制的发酵中药制剂在皮肤上涂抹10g/kg，能明显减少冰醋酸 所致的小白鼠扭体反应次数，具有镇痛作用。
[0089] 临床试验
[0090] 1.1-般资料:为测试本发明所述的发酵中药制剂治疗功效，申请人经过1年时间， 选择患者200例做临床试验，患者分别出现明显的中风后遗症、脑动脉硬化、脑萎缩、外伤淤 血、四肢麻木、高血压、骨质增生、腰间盘突出、跌打瘀肿及癌症疼痛疾病，重度患者出现局 部瘫痪。
[0091] 1.2患者病状：
[0092]轻度：病症初期，患者呈现间歇性不适感，不适部位以具体患病处为主，一般不影 响睡眠吃饭，能够正常生活，只是出现初期症状。
[0093]中度:患者疼痛不适感明显，呈连续性，持久不减，影响睡眠吃饭及正常生活。
[0094]重度:剧烈疼痛或成瘫痪状，伴有机体功能紊乱现象，需要药物止痛。
[0095] 1.3使用方法:将本发明配制的中药膏，每次贴七天，十天换一次，三次为一个疗程 (4g/贴），通常轻度患者2个疗程便有改善，中度、重度患者需长时间敷用，具有稳定和缓解 之功效。
[0096] 1.4疗效标准:参照临床相关标准拟定：1)完全缓解，疼痛、病状完全消失，睡眠吃 饭生活恢复正常;2)部分缓解，疼痛明显减轻，睡眠吃饭生活基本正常;3)稳定，病症无明显 缓解，但也没有加重;4)进展，病症不但没有缓解反而加重。
[0097]治疗结果
[0099]根据长时间对患者的追踪，发现本发明所调配的制剂对身体症状为麻木、胀痛、肌 肉乏力乃至瘫痪有良好效果，无毒副作用，有效缓解症状。
【主权项】
1. 一种发酵中药制剂，其特征在于:将侧耳在中药原料中发酵所得，所述中药原料按重 量份数计：红花20-40份、血竭20-40份、三七20-40份、乳香20-40份、没药20-40份、川乌15-35份、草乌15-35份、松节20-40份、马钱子20-40份、马勃15-35份、细辛15-35份、自然铜15-35份、姜黄20-40份、灵芝15-35份、干漆20-40份、乌蛇20-40份、木瓜20-40份、土木鳖10-30 份、冰片1〇 _30份、儿茶1-10份和王不留行20-40份;所述侧耳为Pleurotus sp.，已于2014年 4月14日保藏在"中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心"，保藏编号为CGMCC No.9060〇2. 按照权利要求1所述的发酵中药制剂，其特征在于:所述中药原料按重量份数计，红 花20份、血竭20份、三七20份、乳香20-40份、没药20-40份、川乌15-35份、草乌15-35份、松节 20-40份、马钱子20份、马勃15份、细辛15份、自然铜15份、姜黄20份、灵芝15份、干漆20份、乌 蛇20份、木瓜20份、土木鳖10份、冰片10份、儿茶1份和王不留行20份。3. 按照权利要求1所述的发酵中药制剂，其特征在于：所述发酵中药制剂作为外用药 物，可以制成膏状、锭剂、贴剂或丸剂。4. 按照权利要求1所述的发酵中药制剂的制备方法，其特征在于， (1) 按重量份数计，将红花20-40份、血竭20-40份、三七20-40份、乳香20-40份、没药20-40份、川乌15-35份、草乌15-35份、松节20-40份、马钱子20-40份、马勃15-35份、细辛15-35 份、自然铜15-35份、姜黄20-40份、灵芝15-35份、干漆20-40份、乌蛇20-40份、木瓜20-40份、 土木鳖10-30份、冰片10-30份、儿茶1-10份和王不留行20-40份的中药原料混合，待用； (2) 将侧耳接种到上述中药原料中发酵，所得发酵物调成糊状即为发酵中药制剂； 所述侧耳(Pleurotus sp.)，已于2014年4月14日保藏在"中国微生物菌种保藏管理委 员会普通微生物中心"，保藏编号为CGMCC No.9060。5. 按权利要求4所述的发酵中药制剂的制备方法，其特征在于:所述步骤(2)将侧耳按 质量百分比为1-5%的量接种于中药原料中，并在35-65°C下发酵1-7天。6. 按权利要求1所述的发酵中药制剂的应用，其特征在于:所述发酵中药制剂作为制备 瘫痪的药物。7. 按权利要求6所述的发酵中药制剂的应用，其特征在于:所述发酵中药制剂作为能够 治疗中风后遗症、脑动脉硬化、脑萎缩、外伤淤血、四肢麻木、高血压、骨质增生、腰间盘突 出、跌打瘀肿及癌症所引起的瘫痪的药物。
【专利摘要】本发明涉及一种中药制剂，属于中药领域，具体地说是一种以中草药为原料配制的骨病的发酵中药制剂及其制备方法和应用。将侧耳在中药原料中发酵所得，所述中药原料按重量份数计：红花20-40份、血竭20-40份、三七20-40份、乳香20-40份、没药20-40份、川乌15-35份、草乌15-35份、松节20-40份、马钱子20-40份、马勃15-35份、细辛15-35份、自然铜15-35份、姜黄20-40份、灵芝15-35份、干漆20-40份、乌蛇20-40份、木瓜20-40份、土木鳖10-30份、冰片10-30份、儿茶1-10份和王不留行20-40份。本发明的产品无毒副作用，配制方法操作简单，可大规模生产。CGMCC No.906020140414
【IPC分类】A61K31/045, A61K33/26, A61P25/00, A61P9/12, A61P9/10, A61K35/583, A61K36/9066, A61P19/08, A61P29/00
【公开号】CN105617262
【申请号】CN201610064462
【发明人】李业明, 李兴尧
【申请人】李兴尧
【公开日】2016年6月1日
【申请日】2016年1月28日