[0021] 图 1 是 HC-PSl (A)、HC-PS2 ⑶和 HC-PS3 (C)的 HPGPC 色谱图，其中，
[0022] TSK-GEL GMPWXL 凝胶柱 300 X 7. 6mm ;洗脱液：0· 2M NaCl ;流速：0· 8ml/min。
[0023] 图 2 是 HC-PSl (A)、HC-PS2 ⑶和 HC-PS2 (C)的 HPCE 色谱图，其中，
[0024] 高效毛细管柱60cmX 75 μ m ;缓冲液：0· Olmol/L硼酸-KOH缓冲液pH 10。
[0025] 图3是硫酸化的（A)、羟乙基化的（B)、羧甲基化的（C)的HC-PSl的IR光谱图。
[0026] 图4是硫酸化的（A)、羟乙基化的（B)、羧甲基化的（C)HC-PS2的IR光谱图。
[0027] 图5是硫酸化的（A)、羟乙基化的（B)、羧甲基化的（C)HC-PS3的IR光谱图。
【具体实施方式】
[0028] 实施例1制备鱼腥草多糖HC-PSl、HC-PS2和HC-PS3
[0029] 鱼腥草药材5Kg粉碎，以95%乙醇冷浸提取，滤过，用热水提取3次，滤过，合并提 取液，浓缩，离心，上清液加入4倍体积的95%乙醇，静置，离心去上清，沉淀以水复溶，减压 回收，除去乙醇；复溶液再以三氯醋酸去游离蛋白，离心，上清液调至中性，透析，浓缩，冷冻 干燥即得粗多糖。粗多糖〇. 5g加蒸馏水溶解，离心，上清液分次用DEAE-cellulose柱（Cl 1 型，30 X 2. 5cm)层析进行初步分离。以蒸馏水、0. 4、0. 8、1. 2和2. Omol/L的NaCl溶液洗脱， 洗脱体积大于2倍柱体积（约300mL)，流速为0. 8mL/min，收集各流份，隔管检测490nm (硫 酸-苯酚法显色后）下的吸光度值。根据糖显色反应和紫外检测的结果合并相同流分，浓 缩，透析及冷冻干燥得5个次级组分：!11，!12，!13，!14和!15。活性跟踪结构显示!13和!14有很 好的抗补体活性（H3 的 CHm值为 0· 05±0· 011mg/mL ;H4 的 CH 5。值为 0· 06±0· 012mg/mL);
[0030] 将H3 (IOOmg)加蒸馏水溶解，离心，上清液分次用Sephacryl S-400柱 (100X2. 5cm)层析分离。蒸馏水洗脱，流速为0. 8mL/min，收集各流分，隔管检测490nm (硫 酸-苯酚法显色后）下的吸光度值，活性跟踪各管馏分。根据检测结果合并相同流分，浓缩 及冷冻干燥得多糖H3-PS1 (14. 21mg)和H3-PS2 (12. 48mg)，将H3-PS1和H3-PS2分别加蒸馏 水溶解，离心，上清液分别分次用S印hacryl S-300柱（100 X 1.6cm)层析分离。蒸馏水洗 脱，流速为0. 8mL/min，收集各流分，隔管检测490nm(硫酸-苯酸法显色后）下的吸光度值， 活性跟踪各管馏分，根据检测结果合并相同流分，浓缩及冷冻干燥得多糖HC-PSl (3. 42mg) 和 HC-PS2(3. Ilmg);
[0031] 将H4 (50mg)加 0. 15mol/L的NaCl溶液溶解，离心，上清液分次用Superdex-200柱 (100 X I. 6cm)层析分离，0· 15mol/L·的NaCl溶液洗脱，流速为0· 8mL/min，收集各流分。隔管 检测490nm(硫酸-苯酚法显色后）下的吸光度值，活性跟踪各管馏分，根据检测结果合并 相同流分，浓缩及冷冻干燥得多糖HC-PSl (2. 53mg)、HC-PS2 (2. 48mg)和HC-PS3 (2. 56mg);
[0032] 经高效凝胶渗透色谱法（HPGPC)和高效毛细管电泳法（HPCE)检测HC-PSl、HC-PS2 和HC-PS3均为均一的成分（如图1~2所示）。
[0033] 实施例2鱼腥草多糖（HC-PS1、HC-PS2和HC-PS3)的结构表征
[0034] (1)分子量的测定
[0035] 采用 TSK-GEL GMPWXL 凝胶柱（300 X 7. 6mm)，流动相为 0· Olmol/LNaCl，流速 0. 8mL/min，柱温 25°C，由标准曲线（T 系列的 Dextran)计算得，HC-PS1、HC-PS2 和 HC-PS3 分子量分别为 274530Da ;7928Da 和 216384Da ;
[0036] (2)元素分析结果
[0037] HC-PSl ：C,31. 99% ；H,5. 17% ；N, I. 39%,
[0038] HC-PS2 ：C,39. 17% ；H,5. 35% ；N, I. 87%,
[0039] HC-PS3 ：C,36. 23% ；H,5. 21% ；N, I. 47% ；
[0040] (3)比旋度
[0041] HC-PSl :[α ]D2〇-30. 0(c 0· 3，H20) ;HC_PS2 :[α ]D2〇-12. 8 (c 0· 3，H20) ;HC_PS3 : [a ]D20-62. 8 (c 0. 3, H2O)；
[0042] (4)总糖、糖醛酸、蛋白及硫酸基含量测定
[0043] 硫酸-苯酚法测定HC-PSl总糖含量为94. 60 % ;HC-PS2总糖含量为93. 10 % ; HC-PS3总糖含量为93. 73% ;
[0044] 间羟联苯法测定HC-PS1的糖醛酸含量为24. 08 % ;HC-PS2的糖醛酸含量为 65. 64% ;HC-PS3 的糖醛酸含量 20. 19% ;
[0045] 考马斯亮蓝法测定HC-PSl的蛋白含量为1. 41% ;HC-PS2的蛋白含量为1. 89% ; HC-PS3的蛋白含量为1.53% ;
[0046] BaCl2比浊法测定HC-PSl、HC-PS2和HC-PS3均不含硫酸基；
[0047] (5)糖组成分析
[0048] HC-PS1、HC-PS2和HC-PS3分别经2mol/L TFA于IKTC全水解得到的产物，先后 进行NaBH4还原，醋酐乙酰化制备成阿尔迪醇乙酸酯衍生物，进行气相组成分析（Blakeney AB jHarris PJjHenry RJj et al. A simple and rapid preparation of alditol acetates for monosaccharide analysis. Carbohydr Res. 1983,113:291-299)；
[0049] HC-PSl是主要由七种单糖组成的杂多糖，糖残基摩尔比为 Rha:Ara:Man:Glc:GlcA:Gal:GalA = L 0:3. 0:3. 9:2. 5:2. 4:6. 1:3. 0,此外还含有少量的 Xyl ；
[0050] HC-PS2是主要由五种单糖组成的杂多糖，糖残基摩尔比为 Man: Glc: GlcA: Gal: GalA = I. 0: 0· 3: L 7: 0· 7:4. 6,此外还含有少量的 Rha，Ara 和 Xyl ;
[0051] HC-PS3是主要由五种单糖组成的杂多糖，糖残基摩尔比为 Man: Glc: GlcA: Gal: GalA = I. 0: 0· 5: 0· 4: L 2: 0· 4,此外还含有少量的 Rha，Ara 和 Xyl ;
[0052] (6)甲基化分析
[0053] 参照文献方法（Needs PW, Selvendran RR. Avoiding oxidative degradation during sodium hydroxyl/dimethyl-iodide mediated carbohydrate methylation in dimethyl sulfoxide. Carbohydr Res. 1993,245:1-10)分别对HC-PS1、HC-PS2和HC-PS3进 行甲基化，甲基化后的产物用90%甲酸解聚，2mol/L TFA全水解，NaBH4还原和醋酐乙酰化 制成部分甲基化的阿尔迪醇乙酸酯衍生物，然后进行GC-MS分析；
[0054] 结合标准图谱判断，HC-PSl主要连接方式有：末端、1，5-连接的阿拉伯糖等， 1，3, 6-连接和1，4, 6-连接的甘露糖等，末端、1，4-连接、1，3-连接、1，3, 6-连接、1，4, 6-连 接的葡萄糖等，有末端、1，4-连接和1，6-连接的半乳糖等，1，4-连接的半乳糖醛酸等，此外 还含有少量末端连接的鼠李糖，其中以末端连接的阿拉伯糖，1，4, 6-连接的甘露糖和末端、 1，4-连接的半乳糖（或半乳糖醛酸）为主；
[0055] HC-PS2主要连接方式有：末端连接的阿拉伯糖等，末端、1，6_连接和1，4, 6-连 接的甘露糖等，1，4-连接、1，3-连接和1，6-连接的葡萄糖等，1，4-连接的葡萄糖醛酸等， 末端、1，4-连接、1，3, 4-连接、1，4, 6-连接、1，3, 6-连接的半乳糖等，末端、1，4-连接、 1，3, 4-连接的半乳糖醛酸等，此外还含有少量末端连接的鼠李糖，其中以1，4-连接的葡萄 糖（或葡萄糖醛酸）和末端、1，4-连接、1，3, 4-连接的半乳糖（或半乳糖醛酸）为主；
[0056] HC-PS3主要连接方式有：末端、1，5-连接的阿拉伯糖等，1，3, 4-连接、1，4, 6-连 接和1，3, 6-连接的甘露糖等，末端、1，4-连接、1，3-连接和1，4, 6-连接的葡萄糖等，末端、 1，4