专利名称：新型哌啶衍生物的制作方法
技术领域：
本发明涉及通式1的新的3-(哌啶基-烷基-脲基)-喹啉衍生物及其在药物组合物的制备中作为活性成分的用途。本发明还涉及该化合物制备方法、包含一种或多种通式1化合物的药物组合物，并特别涉及它们作为神经激素的拮抗体的用途。
背景技术：
尿压素II是一种被认为是最聚潜力的已知血管收缩剂的11-氨基酸环肽神经激素，并且效力高达内皮素-1的28倍以上。尿压素II的作用是通过G蛋白-偶联受体，即UT受体(又称为GPR14或SENR)，的活化来介导的(Ames RS等，“Human urotensin-II is a potent vasoconstrictor and agonist for the orphanreceptor GPR14”，Nature(1999)401，282-6。Mori M.，Sugo T.，Abe M.，ShimomuraY.，Kurihara M.，Kitada C.，Kikuchi K.，Shintani Y.，Kurokawa T.，Onda H.，Nishimura O.，Fujino M.，“Urotensin II is the endogenous ligand of aG-protein-coupled orphan receptor，SENR(GPR14)”，Biochem.Biophys.Res.Commun.，(1999)265，123-9。Liu Q.，Pong SS.，Zeng Z.等，“Identification ofurotensin II as the endogenous ligand for the orphan G-protein-coupled receptorGPR14”，Biochem.Biophys.Res.Commun.，(1999)266，174-178。)。尿压素II及其受体被保存在从进化上讲相对疏远的各个物种之中，并对该系统显示出重要的生理作用(Bern HA，Pearson D.，Larson BA.，Nishioka RS.，“Neurohormonesfrom fish tailsthe caudal neurosecretory system.I.Urophysiology and the caudalneurosecretory system offishes”，Recent Prog.Horm.Res.(1985)41，533-552)。在广盐性鱼类中，尿压素II具有一种渗透调节作用，并且在哺乳动物尿压素II发挥潜在的和复合的血液动力学作用。对尿压素II的响应依赖于所研究的解剖组织来源和组织的种属。(Douglas SA，Sulpizio AC，Piercy V，Sarau HM，Ames RS，Aiyar NV，Ohlstein EH，Willette RN.，“Differential vasoconstrictor activity of humanurotensin-II in vascular tissue isolated from the rat，mouse，dog，pig，marmoset andcynomolgus monkey”Br.J.Pharmacol.(2000)131，1262-1274。Douglas，SA，Ashton DJ，Sauermelch CF，Coatney RW，Ohlstein DH，Ruffolo MR，Ohlstein EH，Aiyar NV，Willette R，“Human urotensin-II is a potent vasoactive peptidepharmacological characterization in the rat，mouse，dog and primate”，J.Cardiovasc.Pharmacol.(2000)36，Suppl 1S163-6)。
和其他的神经激素一样，尿压素II除了具有血管作用特性之外，还具有生长刺激和致纤维化作用。尿压素II提高了平滑肌细胞增殖，并刺激了胶原合成(Tzandis A等，“Urotensin II stimulates collagen synthesis by cardiac fibroblastsand hypertrophic signaling in cardiomyocytes via G(alpha)q-and Ras-dependentpathways”，J.Am.Coll.Cardiol.(2001)37，164A。Zou Y，Nagai R和YamazakiT，“Urotensin II induces hypertrophic responses in cultured cardiomyocytes fromneonatal rats”，FEBS Lett(2001)508，57-60)。尿压素II对激素的释放进行调节(Silvestre RA等，“Inhibition of insulin release by urotensin II-a study on theperfused rat pancreas”，Horm Metab Res(2001)33，379-81)。尿压素II对心房和心室肌细胞具有直接的作用。(Russell FD，Molenaar P和O’Brien DM，“Cardiostimulant effects of urotensin-II in human heart in vitro”，Br.J.Pharmacol.(2001)132，5-9)。尿压素II是通过癌细胞产生的，并且其受体也是在这些细胞表达的。(Takahashi K等，“Expression of urotensin II and urotensin IIreceptor mRNAs in various human tumor cell lines and secretion of urotensin II-likeimmunoreactivity by SW-13 adrenocortical carcinoma cells”，Peptides(2001)22，1175-9；Takahashi K等，“Expression of urotensin II and its receptor in adrenaltumors and stimulation of 淍亡 of cultured tumor cells by urotensin II”，Peptides(2003)24，301-306；Shenouda S等，“Localization of urotensin-IIimmunoreactivity in normal human kidneys and renal carcinoma”，J HistochemCytochem(2002)50，885-889)。尿压素II及其受体发现于脊髓和脑组织中，并且在老鼠中的尿压素II脑室间浸渍导致行为变化(Gartlon J等，“Central effectsof urotensin-II following ICV administration in rats”，Psychopharmacology(Berlin)(2001)155，426-33)。
尿压素II的调节异常与人类的疾病相关。在高血压病人、心力衰竭病人、糖尿病病人、和等待肾移植的病人中可以检测到升高了的尿压素II的循环水平(Totsune K等，“Role of urotensin II in patients on dialysis”，Lancet(2001)358，810-1；Totsune K等，“Increased plasma urotensin II levels in patients withdiabetes mellitus”，Clin Sci(2003)104，1-5；Heller J等，“Increased urotensinII plasma levels in patients with cirrhosis and portal hypertension”，J Hepatol(2002)37，767-772)。
预期具有阻滞尿压素II的作用的能力的物质能够以用于各种疾病的治疗中。WO2001/45694、WO2002/78641、WO2002/78707、WO2002/79155、WO2002/79188、WO2002/89740、WO2002/89785、WO2002/89792、WO2002/89793、WO2002/90337、WO2002/90348和WO2002/90353揭露某些作为尿压素II受体拮抗体的磺酰胺，及其用于治疗与尿压素II失调现象相关的疾病的用途。WO2001/45700和WO2001/45711公开了某些作为尿压素II受体拮抗体的吡咯烷或哌啶，及其用于治疗与尿压素II失调现象相关的疾病的用途。这些衍生物与本发明的化合物的区别在于它们并不包括带有4-哌啶类残基(moiety)的脲衍生物。WO2002/047456和WO2002/47687公开了某些作为尿压素II受体拮抗体的2-氨基-喹啉，及其用于治疗与尿压素II失调现象相关的疾病的用途。WO2002/058702公开了某些作为尿压素II受体拮抗体的2-氨基喹啉，及其用于治疗与尿压素II失调现象的疾病的用途。这些衍生物与本发明的化合物的区别在于它们在喹啉环的4-位并不带有一个取代的脲官能团。WO2001/66143公开了某些作为尿压素II受体拮抗体的2，3-氢-1H-吡咯并[2，3-b]喹啉-4-胺衍生物，WO2002/00606公开了某些用作尿压素II受体拮抗体的联苯化合物，并且WO2002/02530也公开了某些用作尿压素II受体拮抗体的化合物，WO02/076979和WO03/048154公开了某些作为尿压素II受体拮抗体的喹啉衍生物，及其用于治疗与尿压素II失调现象的疾病的用途。
EP 428434公开了某些作为神经激肽和P物质拮抗剂的烷基脲基吡啶。WO99/21835公开了某些作为H+-腺苷三磷酸酶和骨吸收抑制剂的脲基喹啉。WO01/009088公开了作为CCR-3受体的抑制剂的杂芳基脲。JP-96/061621g公开了某些所有这些脲基吡啶衍生物在它们的组成上不同于本发明的化合物。本发明包括N-(2-(3-取代的哌啶-1-基-乙基)-N’-吡啶-4-基脲衍生物，该衍生物是一种新型物质组合物，并且可以用作尿压素II受体拮抗剂。
发明内容
本发明涉及通式1化合物。
通式1其中Py表示在2位被-NR1R2单取代的吡啶-4-基；在2位被-NR1R2以及在6位被低级烷基或芳基-低级烷基双取代的吡啶-4-基；未取代的喹啉-4-基；在2位被低级烷基单取代的喹啉-4-基；在2位被低级烷基以及在6、7或8位被卤素、低级烷基或芳基-低级烷基二取代的喹啉-4-基；X表示R3R4NCO-。
R1和R2独立地表示氢；低级烷基；或芳基-低级烷基；R3和R4独立地表示氢；低级烷基；芳基；芳基-低级烷基；被芳基二取代的低级烷基；或与R3和R4所连接的氮原子一起作为环原子形成吡咯烷、哌啶或吗啉环；以及光学纯的对映体或非对映体、对映体或非对映体的混合物、非对映的消旋物、和非对映的消旋物的混合物；以及它们的药学上可接受的盐、溶剂配合物和形态学形式。
在通式1的定义中，术语“芳基”表示取代或未取代的芳香环或杂环系统，其包括五员或六员芳环、或者稠合五-六或六-六芳环系统。优选的基团是例如2-呋喃基、2-噻吩基、苯基、2-甲基苯基、2-联苯基、2-甲氧基苯基、2-苯氧基苯基、2-氯苯基、2-溴苯基、2-异丙基苯基、2-氟苯基、2-甲基磺酰基苯基、2-氰基苯基、2-三氟甲基苯基、3-甲基苯基、3-联苯基、3-苯氧基苯基、3-甲氧基苯基；3-氯苯基、3-溴苯基、3-氟苯基、3-氰基苯基、3-三氟甲基苯基、3-羧基苯基、4-甲基苯基、4-乙基苯基、4-异丙基苯基、4-苯氧基苯基、4-三氟甲基苯基、4-三氟甲氧基苯基、4-苯氧基苯基、4-甲氧基苯基、4-氰基苯基、4-羟基苯基、4-乙酰基氨基苯基、4-甲磺酰基苯基、4-正丙基苯基、4-异丙基苯基、4-叔丁基苯基、4-正戊基苯基、4-联苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-溴-2-乙基苯基、4-氟苯基、2，4-二氟苯基、4-正丁氧基苯基、2，6-二甲氧基苯基、3，5-双-三氟甲基苯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、1-萘基、2-萘基、4-(吡咯-1-基)苯基、4-苯甲酰基苯基、5-二甲基氨基萘-1-基、5-氯-3-甲基噻吩-2-基、5-氯-3-甲基-苯并[b]噻吩-2-基、3-(苯基磺酰基)-噻吩-2-基、2-(2，2，2-三氟乙酰基)-1-2，3，4-四氢异喹啉-7-基、4-(3-氯-2-氰基苯氧基)苯基、2-(5-苯甲酰氨基甲基)硫代苯基、4，5-二氯噻吩-2-基、5-喹啉基-；6-喹啉基、7-喹啉基、8-喹啉基、(2-乙酰基氨基-4-甲基)噻唑-5-基、或1-甲基咪唑-4-基。
在通式1的定义中，术语“低级烷基”表示含有1～8个碳原子的饱和直链、支链或环取代基，包含甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、正戊基、正己基、正辛基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环丙基甲基等等。优选的低级烷基是甲基、乙基和正丙基。
术语“被芳基二取代的低级烷基”是指其中两个氢原子被上述定义的芳基所取代的上述定义的低级烷基。“被芳基二取代的低级烷基”的优选的实例是二苯基甲基、2，2-二苯基乙基和1-苯甲基-2-苯基-乙基。
术语“芳基-低级烷基”是指其中一个氢原子被上述定义的芳基所取代的上述定义的低级烷基。芳基-低级烷基的优选的实例为苯甲基、苯乙基和3-苯基丙基。
术语“卤素”包括氟、氯、溴或碘。
本发明还包括通式1化合物的药学上可接受的盐。这包括与无机酸或有机酸，诸如氢卤酸，如盐酸或氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、马来酸、酒石酸、甲磺酸、对甲苯磺酸等所形成的盐，或者在式1化合物本质上为酸性的时，与无机碱，诸如碱金属或碱土金属碱，例如钠、钾、或钙盐等所形成的盐。通式1的化合物还可以两性离子的形式存在。
本发明包含通式1的化合物的各种溶剂化配合物。溶剂化作用可以作为例如最初无水通式1的化合物的吸湿性的结果而发生于制造过程中、或可单独发生。
本发明还包括通式1的化合物及其盐和溶剂化配合物的各种形态学形式，例如晶体形式。特别是同种异态可能显示出不同的溶解特性、稳定性特征等，并且全部包括在本发明的范围内。
通式1化合物还可以具有一个或多个不对称碳原子并且可以被制备成光学纯的对映体或非对映体、对映体或非对映体的混合物、非对映消旋物、和非对映消旋物的混合物的形式。本发明包含所有这些形式。可以通过立体选择性合成、或者以已知的方式，即，通过柱色谱、薄层色谱法、HPLC、结晶等分离混合物，从而制备这些混合物。
一组优选的通式1的化合物为其中X表示芳基-NR4CO-或芳基低级烷基-NR4CO-，并且R4和Py具有通式1中所给出的含义的化合物。
另一组优选的通式1的化合物为其中Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位被低级烷基单取代的喹啉-4-基，并且X具有通式1中所给出的含义的化合物。
另一组优选的通式1的化合物为其中Py表示在2位被R1R2N-单取代的喹啉-4-基，并且其中R1表示芳基-低级烷基、R2表示低级烷基、X具有通式I所给出的含义的化合物。
另一组优选的通式1的化合物为其中Py表示在2位被R1R2N-取代的喹啉-4-基，并且其中R1表示氢、R2和X具有通式I所给出的含义的化合物。
一组特别优选的通式1的化合物为其中X表示芳基-NR4CO-或芳基-低级烷基-NR4CO-、Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位被低级烷基单取代的喹啉-4-基、并且R4具有通式I所给出的含义的化合物。
另一组特别优选的通式1的化合物为其中X表示芳基-NR4CO-或芳基-低级烷基-NR4CO-、Py表示在2位被R1R2N-取代的吡啶-4-基的化合物，其中R1表示芳基-低级烷基并且R2表示低级烷基，并且R4具有通式1所给出的含义的化合物。
另一组特别优选的通式1的化合物为其中X表示芳基-NR4CO-或芳基低级烷基-NR4CO-、Py表示在2位被R1R2N-取代的吡啶-4-基，并且其中R1表示氢，并且R2和R4具有通式1所给出的含义的化合物。
优选的通式1的化合物的实例选自下述化合物
由于所述的化合物具有抑制尿压素II的作用的能力，因此它们可被用于治疗与血管收缩、增殖相关的疾病或者其他的与尿压素II的作用相关的疾病的治疗。这类疾病的实例为高血压、动脉粥样硬化、咽痛或心肌缺血、充血性心力衰竭、心功能不全、心脏心律不齐、肾缺血、习惯性的肾病、肾衰竭、中风、脑血管痉挛、脑缺血、麻痹性痴呆、偏头痛、蛛网膜下出血、糖尿病、糖尿病性动脉病、糖尿病性肾病、结缔组织疾病、肝硬化、哮喘、慢性阻塞性肺病、高空肺水肿、雷诺氏(Raynaud’s)综合症、门静脉高压症、甲状腺功能障碍、肺水肿、肺性高血压症、或肺纤维化。它们还可以用于气囊或支架血管成形术后的再狭窄的预防、用于癌症、前列腺肥大、勃起功能障碍、听力丧失、黑内障、慢性支气管炎、哮喘、革兰氏阴性败血病、休克、镰刀形红细胞贫血病、镰状细胞急性胸综合症、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼的治疗，糖尿病并发症、血管或心脏手术或器官移植后的并发症、环孢子菌素治疗的并发症、疼痛、成瘾症、精神分裂症、阿滋海默(Alzheimer)病、焦虑症、强迫观念与行为疾病、癫痫患者癫痫发作、紧张症、抑郁症、麻痹性痴呆、神经性肌肉障碍、神经变性的疾病、以及其他的与尿压素II或尿压素II受体的调节异常相关的疾病的治疗和预防。
这些组合物可以是经肠道给药形式或者经口给药形式(例如片剂、糖锭剂、胶囊、乳剂、溶液或悬浮液)、经鼻给药形式(例如喷雾剂或气溶胶)、或者直肠给药形式(栓剂)。这些化合物还可以是肌肉注射、非肠道或静脉形式给药的，例如血管注射剂溶液的形式。
这些药物组合物可以包含式1化合物以及它们的药学上可接受的盐与制药工业中常见的无机和/或有机赋形剂，例如乳糖、玉米或其衍生物、滑石、硬脂酸或这些材料的盐的组合。
对于胶囊剂而言，可以使用植物油、蜡、脂肪、液体或半液体多元醇等。对于溶液和糖浆制剂而言，使用例如水、多元醇、蔗糖、葡萄糖等。血管注射剂是使用例如水、多元醇、醇、甘油、植物油、卵磷脂、脂质体等来制备的。栓剂是使用天然或氢化的油、蜡、脂肪酸(脂肪)、液体或半液体醇来制备的。
该组合物另外还可包含防腐剂、稳定性改性剂、粘度改善剂或调节剂、溶解度改善剂、甜味剂、染料、味道改善剂、用于改变该渗透压的盐、缓冲剂、抗氧化剂等。
通式1的化合物还与一种或多种有治疗价值的物质组合使用，这些有治疗价值的物质包括例如α-和β-阻滞剂，如苄胺唑啉、苯氧苯扎明、阿替洛尔、萘异丙促胺、噻吗洛尔、美托洛尔、卡替洛尔、卡维地洛等；血管扩张剂如肼酞嗪、米诺地尔、二氮嗪氟司喹南等；钙离子拮抗剂，如地尔硫卓、硝吡胺甲酯、尼莫地平、异搏定、利心平等；血管紧张肽转化酶-抑制剂，如西拉普利、甲巯丙脯酸、依托普利、赖诺普利等；钾通道活化剂，如吡那地尔、chromakalim等；血管紧张素受体拮抗体，如洛沙坦、缬沙坦、坎地沙坦、依贝沙坦、依普沙坦、替米沙坦和他索沙坦等；利尿剂，如双氢氯噻嗪、氯噻嗪、丙酮醇酰胺、丁尿胺、呋喃苯胺酸、美托拉宗、氯噻酮等；抗交感神经药物，例如甲基多巴、克隆尼丁、胍那苄、利血平等；内皮素受体拮抗剂，如博森坦(bosentan)、替唑生坦、达卢生坦、阿曲生坦、enrasentan或sitaxsentan等；抗高血脂剂，如洛弗斯特丁、普伐他汀、氟伐他汀、阿伐他汀、西立伐他汀、斯伐他汀等；及其他用于治疗高血压、心血管疾病或上述其他病症的药物。
可以根据具体的情况在很大范围内调整剂量。通常，对体重约70kg的成年人而言，日剂量应在大约1mg～大约3g的范围内，优选大约3mg～大约1g，特别优选大约5mg～大约300mg。该剂量优选应该是每天等量服用1～3剂。通常，儿童应当接收适应于他们的体重和年龄的较低剂量。
本发明的化合物的一般制备方法可以使用本领域通常已知的方法，根据如下反应序列制备通式1化合物。为了简明和清楚起见，有时仅仅对几个得到通式1的化合物的可能的合成路线进行了描述。
对于通式1的化合物的合成，可以使用方案A至E中所述的一般合成路线。在方案A至E中所使用的通用基团X、Py、R1、R2、R3和R4具有上述通式1的相同定义。在试验部分对所使用的其他缩写进行了定义。在一些实例中，通用基团X可能与方案A至E中所示的集合不相容，并因而需要使用保护基。保护基的使用是本领域所公知的(参阅例如“Protective Groups in Organic Synthesis”，T.W.Greene，P.G.M.Wuts，Wiley-Interscience，1999)。出于该讨论的目的，假定在需要时就使用这种保护基。
通式1的化合物。
按照方案A所示的方法制备这些化合物。
方案A 方案A中的通式结构I的3-取代的-哌啶或者是市售的外消旋形式或光学活性形式，或者通过本领域的已知方法制备的外消旋的或光学活性的形式。方案A通式结构II的卤代烷基脲是按照下方案E的方法制备的。使用通式结构II的卤代烷基脲对通式结构I的哌啶的N-烷基化是在极性溶剂(例如四氢呋喃)中、在低于化学计量的量的碘盐(例如NaI)以及略微化学计量过量的酸清除剂(例如NaHCO3)的存在下完成的，从而得到通式1的目标化合物。
或者，通式1的化合物是按照方案B来制备的。
方案B 通式结构III的胺与通式结构V的异氰酸酯发生反应，得到最终的通式1的化合物。或者，通式结构III的胺与通式结构IV的脲的发生反应，得到最终的通式1的化合物。通式结构V的异氰酸酯以及通式结构VI的脲的制备如下方案D所述。通式结构III的胺制备如下方案E所述。
或者，通式1的化合物是按照方案C来制备的。
方案C 外消旋的或光学活性的通式结构VI的哌啶-3-羧酸酯是市售的或者可以通过本领域已知的方法来制备。通式结构II的卤代烷基脲是按照下方案E来制备的。通式结构VI的烷基哌啶-3-羧酸酯与通式结构II的卤代烷基脲在极性溶剂(例如四氢呋喃)中、在低于化学计量的量碘盐(例如NaI)以及略微化学计量过量的酸清除剂(例如NaHCO3)的存在下发生反应，随后在酸性条件下(例如与HCl水溶液反应)将酯水解。所得到的通式结构VII的化合物通过在例如极性溶剂(如DMF)中、在略微化学计量过量的偶联剂(例如碳二亚胺)的存在下，与市售的或已知的胺VIII反应，转化成最终的通式1的化合物。
方案A、B、C中所使用的合成中间体。如上述通式1所定义的包含基团Py的合成中间体是通过方案D所示的方法得到的。
方案D 通式结构IX的羧酸是市售的或者通过已知的方法制备的。与二苯基磷酰基叠氮化物的反应得到酰基叠氮，然后通过库尔提乌斯(Curtius)重排得到在原位反应中使用的通式结构V的异氰酸酯。通式V的异氰酸酯与通式X的胺的反应得到通式IV的脲。通式结构V的异氰酸酯在酸清除剂(例如DIPEA)的存在下与卤代乙胺盐酸盐反应得到通式结构II的脲。通式结构V的异氰酸酯与叔丁醇反应得到相应的氨甲酰基酯，然后使用酸的水溶液(例如HCl)水解，得到通式结构X的胺。通式结构X的胺与市售的异氰酸氯乙基酯在极性非质子溶剂(例如四氢呋喃)的存在下反应，得到通式结构II的脲。
通式结构III的合成中间体是通过方案E所示的方法得到的。
方案E
图A中的通式结构I的3-取代的-哌啶或者是市售的外消旋形式或光学活性形式，或者通过本领域的已知方法制备的外消旋的或光学活性的形式。方案E中的通式结构XI的卤代烷基氨基甲酸酯是市售的，或者通过本领域已知的方法制备。使用通式结构XI的卤代烷基氨基甲酸酯对通式结构I的哌啶的N-烷基化是在极性溶剂(例如THF)中、在略微化学计量过量的酸清除剂(例如DIPEA)的存在下完成的，从而得到通式结构XII的化合物。通过本领域已知的方法，例如在溶剂(例如CH2Cl2)中使用TFA切断所得到的氨基甲酸酯，得到通式结构III的中间体伯胺衍生物。
现在通过一些非限制性的实施例对本发明的上述一般性说明进行进一步的说明。
发明实施例略语表BSA 牛血清清蛋白CDI N，N-羰基二咪唑DIPEA 二异丙基乙胺DMF 二甲基甲酰胺DMSO二甲亚砜DPPA二苯基磷酰基叠氮化物EDC N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐EDTA乙二胺四乙酸ESI 电子喷雾离子化EtOAc 乙酸乙酯Hex 己烷HOBt1-羟基苯并三唑AcOH 乙酸HPLC高效液相色谱LC-MS 液相色谱-质谱LDA 二异丙基酰胺锂MeOH 甲醇min 分钟MHz 兆赫MS 质谱NMR 核磁共振
ppm百万分之一PBS磷酸缓冲盐水sat. 饱和的T3P 1-丙基膦酸环酐TBTU 2-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲溴化物TEA三乙胺TFA三氟乙酸THF四氢呋喃TLC薄层色谱tR保留时间反应通常是在惰性气氛(例如N2)在空气干燥的玻璃器皿中进行的。所使用的溶剂是从市场上购买的。蒸发是在旋转的蒸发器中，减压条件下在50℃的水浴温度中进行的。LC-MS表征是在使用ESI的Finnigan HP1100平台上进行的，并使用Navigator AQK检测器进行正离子检测。分析型液相色谱分离是通过方法A、或者在特别说明时通过方法B来进行的。方法A包括一个30×4.6毫米大小的C18柱以及一个包含溶于水中(包含0.04％TFA)的2～95％CH3CN(包含0.013TFA)的1分钟梯度、流速为0.45mL/min的流动相。方法B包括一个30×4.6mm大小的C18柱以及一个包含含有1％甲酸的CH3CN-水(1∶9)的等浓度流动相。保留时间(tR)的单位为min.。TLC是在预涂布硅胶60F254玻璃板(Merck)上进行的。制备HPLC是在Varian/Gilson平台上使用大小为60×21的C18柱以及包含溶于含有0.05％的甲酸的水中的梯度为2～95％的CH3CN的流动相中进行的。
实施例11-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸甲基-苯基-酰胺1A.1-(2-氯-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲
在室温下向4-氨基-2-甲基喹啉(12.6g，80mmol)的THF(480mL)溶液中加入2-氯乙基异氰酸酯(10.2mL，120mmol)。在室温下将反应混合物搅拌40小时。加入MeOH(100mL)，并继续搅拌1小时。蒸发反应混合物并将残渣溶于CH2Cl2中。使用1N HCl(250mL)振荡有机层，并通过过滤收集所得到的沉淀。使用CH2Cl2(100mL)、饱和NaHCO3(2×100mL)、以及水(4×100mL)洗涤固体。在室温下在HV下对所得到的固体干燥14小时，得到标题化合物。
1B.1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸乙基酯 在70℃下在密闭容器中将哌啶甲酸乙酯(10mmol)、1-(2-氯-乙基)-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲(10mmol)、NaHCO3(20mmol)、NaI(0.5mmol)和THF(70mL)的混合物搅拌6天。过滤反应混合物，蒸发至干燥，并通过制备HPLC纯化该残渣得到标题混合物。
1C.1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸 在50℃下将溶于6N-HCl水溶液(20mL)的1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸乙基酯(5.5mmo)搅拌15小时。蒸发反应混合物，干燥残渣，得到二盐酸盐形式的标题混合物。
1D.1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸甲基-苯基-酰胺
在室温下向1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸二盐酸盐(64.25mg，0.15mmol)、TEA(0.07mL，0.5mmol)和N-甲基苯胺(11mg，0.1mmol)溶于DMF(0.6mL)的悬浮液中加入T3P(50％，溶于EtOAc，0.07mL，0.12mmol)。将混合物搅拌15小时，使用饱和Na2CO3(5mL)冷激反应并使用CH2Cl2(3×10mL)萃取。干燥有机相(Na2SO4)，并过滤、蒸发，并使用制备HPLC纯化残渣得到标题化合物。
通过类似方法制备下述化合物。括号中的值是通过上述试验部分中所述的分析方法B得到的。
实施例17体外生物学表征使用下述测试步骤展示通式1的化合物对尿压素II的作用的抑制活性。
1)结合到横纹肌肉瘤细胞株上的人类[125I]-尿压素II的抑制使用人类衍生的TE-671横纹肌肉瘤细胞(Deutsche Sammlung vonMikroorganismen und Zellkulturen，细胞株#_ACC-263)，通过改良自整体细胞内皮素结合试验(Breu V等，“In vitro characterization of Ro-46-2005，a novelsynthetic non-peptide antagonist of ETA and ETB receptors”，FEBS Lett.，1993，334，210～214)的方法实施人类[125I]-尿压素II的整体细胞结合。
该试验是在250μL Dulbecco’s改性的Eagle介质，pH值7.4(GIBCO BRL，CatNo 31885-023)中在聚丙烯微量滴定板(Nunc，CatNo 442587)中进行的，其中所述的介质包括25mM HEPES(Fluka，CatNo 05473)、1.0％ DMSO(Fluka，CatNo 41644)和0.5％(w/v)BSA馏分V(Fluka，CatNo 05473)。通过在20℃下使用20pM的人类[125I]尿压素II缓慢振荡4小时孵化300'000悬浮细胞(Anawa Trading SA，Wangen，Switzerland，2130Ci/mmol)并提高未标记拮抗剂的浓度。最小或最大结合分别来源于使用或未使用100nM未标记的U-II的样品。4小时孵化期后，在GF/C过滤板上过滤细胞(Packard，CatNo6005174)。干燥滤板，然后向每个管(well)中加入50μL的闪烁鸡尾酒(Packard，MicroScint 20，CatNo 6013621)。在一个微板计数器(Packard Bioscience，TopCount NXT)中计算过滤板。
全部测试化合物均溶解或稀释于100％的DMSO中。在将缓冲液加入到测试中之前先将其稀释十倍。在测试中的DMSO的最后浓度是1.0％，这一浓度被发现不会对结合产生干扰。IC50值被定义为抑制50％的[125I]人类U-II的特异性结合的拮抗剂的浓度。如上所述，特异性结合是指在最小和最大结合之间的差异。测得未标记的人类U-II的IC50值为0.206nM。在该试验中，测得本发明的化合物的IC50值为10～1000nM。
2)在离体老鼠胸主动脉上的人类尿压素II-诱导的收缩的抑制对成年Wistar大鼠进行麻醉并抽血。切除近身体中央的胸廓的主动脉降部，解剖并切取一个3～5mm的环通过轻轻摩擦内膜表面除去内皮。将该环悬浮于10mL充满Krebs-Henseleit溶液的离体器官浴槽中(单位mM；NaCl 115，KCl4.7，MgSO41.2，KH2PO41.5，NaHCO325，CaCl22.5，葡萄糖10)在37℃下保存并使用95％的O2和5％的CO2吹风。向该Krebs-Henseleit溶液加入抗炎吲哚酸(10-5M)以避免类二十烷酸的产生。将该环拉伸至1g的静止张力。使用测力传感器(法国巴黎EMKA Technologies SA公司生产)测量等长收缩力的变化。在一段平衡期之后，将该环与KCl(60mM)轻轻接触。在使用测试化合物或其载体孵化10分钟后，加入累积剂量的人类尿压素II(10-12M～10-6M)。衡量功能性拮抗作用作为对尿压素II的最大收缩的抑制。
权利要求
1.通式1化合物 通式1其中Py表示在2位被-NR1R2，单取代的吡啶-4-基；在2位被-NR1R2以及在6位被低级烷基或芳基-低级烷基双取代的吡啶-4-基；未取代的喹啉-4-基；在2位被低级烷基单取代的喹啉-4-基；在2位被低级烷基以及在6、7或8位被卤素、低级烷基或芳基-低级烷基二取代的喹啉-4-基；X表示R3R4NCO-；R1和R2独立地表示氢；低级烷基；或芳基-低级烷基；R3和R4独立地表示氢；低级烷基；芳基；芳基-低级烷基；被芳基二取代的低级烷基；或与R3和R4所连接的氮原子一起作为环原子形成吡咯烷、哌啶或吗啉环；以及光学纯的对映体或非对映体、对映体或非对映体的混合物、非对映的消旋物、和非对映的消旋物的混合物；以及它们的药学上可接受的盐、溶剂配合物和形态学形式。
2.通式1的化合物，其中X表示芳基-NR4CO-或芳基-低级烷基-NR4CO-，并且R4和Py具有通式1中所给出的含义。
3.通式1的化合物，其中Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位被低级烷基单取代的喹啉-4-基，并且X具有通式1中所给出的含义。
4.通式1的化合物，其中Py表示在2位被R1R2N-取代的喹啉-4-基，并且其中R1表示芳基-低级烷基、R2表示低级烷基、X具有通式I所给出的含义。
5.通式1的化合物为其中Py表示在2位被R1R2N-取代的喹啉-4-基，并且其中R1表示氢、R2和X具有通式I所给出的含义。
6.通式1的化合物，其中X表示芳基-NR4CO-或芳基-低级烷基-NR4CO-、Py表示未取代的喹啉-4-基或在2位被低级烷基单取代的喹啉-4-基、并且R4具有通式I所给出的含义。
7.通式1的化合物，其中X表示芳基-NR4CO-或芳基-低级烷基-NR4CO-、Py表示在2位被R1R2N-取代的吡啶-4-基的化合物，其中R1表示芳基-低级烷基并且R2表示低级烷基，并且R4具有通式1所给出的含义。
8.通式1的化合物为其中X表示芳基-NR4CO-或芳基-低级烷基-NR4CO-、Py表示在2位被R1R2N-取代的吡啶-4-基，其中R1表示氢，并且R2和R4具有通式1所给出的含义。
9.如权利要求1～8任一项所述的化合物，其选自如下化合物所组成的组1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸甲基-苯基-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸萘-2-基酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸萘-1-基酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸苯甲基酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸苯乙基-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸苯甲基-甲基-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸甲基-苯乙基-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸(4-苯基-丁基)-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸苯甲基-苯基-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸(3-氯-苯基)-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸(2-氯-苯基)-甲基-酰胺1-{2-[3-(4-苯甲基-哌啶-1-羰基)-哌啶基-1-基]-乙基}-3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸苯甲基-苯乙基-酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸4-溴-苯甲基酰胺1-{2-[3-(2-甲基-喹啉-4-基)-脲基]-乙基}-哌啶-3-羧酸(3-苯基-丙基)-酰胺1-[2-(3-喹啉-4-基-脲基)-乙基]-哌啶-3-羧酸二乙基酰胺
10.一种药物组合物，其包含如权利要求1～9任一项所述的化合物和常见的载体材料和辅助剂，其用于治疗与尿压素II或尿压素II受体的调节异常相关的病症、或者与血管或心肌功能障碍相关的病症，所述的病症包括高血压、动脉粥样硬化、咽痛或心肌缺血、充血性心力衰竭、心功能不全、心脏心律不齐、肾缺血、习惯性的肾病、肾衰竭、中风、脑血管痉挛、脑缺血、麻痹性痴呆、偏头痛、蛛网膜下出血、糖尿病、糖尿病性动脉病、糖尿病性肾病、结缔组织疾病、肝硬化、哮喘、慢性阻塞性肺病、高空肺水肿、雷诺氏(Raynaud’s)综合症、门静脉高压症、甲状腺功能障碍、肺水肿、肺性高血压症、或肺纤维化。
11.一种药物组合物，包含如权利要求1～9任一项所述的化合物以及常见的载体材料和辅助剂，其用于包括如下疾病的治疗气囊或支架血管成形术后的再狭窄、癌症、前列腺肥大、勃起功能障碍、听力丧失、黑内障、慢性支气管炎、哮喘、革兰氏阴性败血病、休克、镰刀形红细胞贫血病、镰状细胞急性胸综合症、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼的治疗，糖尿病并发症、血管或心脏手术或器官移植后的并发症、环孢子菌素治疗的并发症、疼痛、成瘾症、精神分裂症、阿滋海默(Alzheimer)病、焦虑症、强迫观念与行为疾病、癫痫患者癫痫发作、紧张症、抑郁症、麻痹性痴呆、神经性肌肉障碍、神经变性的疾病。
12.如权利要求1～9任一项所述的化合物与其他的药学活性物质结合用于治疗包括下述疾病的用途高血压、动脉粥样硬化、咽痛或心肌缺血、充血性心力衰竭、心功能不全、心律不齐、肾缺血、慢性肾病、肾衰竭、中风、脑血管痉挛、脑缺血、麻痹性痴呆、偏头痛、蛛网膜下出血、糖尿病、糖尿病性动脉病、糖尿病性肾病、结缔组织疾病、肝硬化、哮喘、慢性阻塞性肺病高空肺水肿、雷诺氏(Raynaud’s)综合症、门静脉高压症、甲状腺功能障碍、肺水肿、肺性高血压症、或肺纤维化、气囊或支架血管成形术后的再狭窄、癌症、前列腺肥大、勃起功能障碍、听力丧失、黑内障、慢性支气管炎、哮喘、革兰氏阴性败血病、休克、镰刀形红细胞贫血病、镰状细胞急性胸综合症、血管球性肾炎、肾绞痛、青光眼的治疗，糖尿病并发症、血管或心脏手术或器官移植后的并发症、环孢子菌素治疗的并发症、疼痛、成瘾症、精神分裂症、阿滋海默(Alzheimer)病、焦虑症、强迫观念与行为疾病、癫痫发作、紧张症、抑郁症、麻痹性痴呆、神经性肌肉障碍、或神经变性的疾病。
13.如权利要求1～9任一项所述的化合物与其他的药学活性物质结合的用途，所述药物活性物质包括ACE抑制剂、血管紧张素II受体拮抗体、内皮素受体拮抗体、抗利尿激素拮抗剂、β-肾上腺素能拮抗剂、α-肾上腺素能拮抗剂、抗利尿激素拮抗剂、TNFα拮抗剂、或者过氧化氢酶增殖子活化剂受体调节剂。
14.一种通过服用权利要求10和11任一项所述的药物组合物以治疗遭受如权利要求10～13任一项所述的病症的病人的方法。
全文摘要
本发明涉及新的哌啶衍生物及其通式I的相关化合物以及它们在药物组合物的制备中作为活性成分的用途。本发明还涉及该化合物制备方法、包含一种或多种那些通式1化合物的药物组合物，并特别涉及它们作为神经激素的拮抗体的用途，具体作为尿压素II拮抗体的用途。
文档编号C07D401/14GK1784394SQ200480012297
公开日2006年6月7日 申请日期2004年5月4日 优先权日2003年5月8日
发明者哈米德·艾萨维, 克里斯托夫·宾克特, 马丁内·克洛泽尔, 博里斯·马蒂斯, 克劳斯·米勒, 奥利弗·内勒, 米夏埃尔·舍茨, 约尔格·韦尔克, 托马斯·韦勒 申请人:埃科特莱茵药品有限公司