专利名称：：抗微生物线性肽的制作方法
技术领域：
：本发明涉及具有抗微生物活性的线性肽，其对于抵抗植物病原菌特别有效，并且可以用于控制植物病害的组合物中。现有技术植物病原菌引起植物生产中极大的经济重要的损失。其中，我们可以强调，例如，由梨火疫病欧文氏菌(^rw^22'sa/z7//o^ra)，洋丁香叶斑病假单胞菌(/^ei/ifo/z70i2asS7r/z^ae)和辣椒斑点病黄单胞菌(Ja/7f/o历o/2as^es/c"or/s)引起的细菌病害。目前，在欧洲，只有一些产品经批准可用于保护植物对抗细菌病害，这些产品主要基于二价铜衍生物，具有不足的控制功效。直到近些年才在一些国家得到批准的抗生素，如春雷霉素或链霉素，在欧洲目前还没有得到批准。抗生素链霉素和四环素在如美国等国家中得到批准，但在许多病例中，病原体抗性株的出现使得它们使用无效变得明显。在由植物致病真菌引起的真菌病的病例中，尽管存在可利用的活性物质，但是不断需要新的杀真菌剂，这部分是由于抗性以一定频率的出现所引起的。此外，许多最有效的已知抗微生物化合物残留在环境中，这是不利的。近些年来，已经加强了可能影响细菌抗性的新的类型抗生素的制备。其中，我们可以强调从自然界分离的化合物，例如，肽，其存在于植物和动物中，并且其中一些具有抗微生物特性。天蚕素是作为对细菌感染的应答而存在于^/a/a/7力oracecro//a蝴蝶的血淋巴中的抗微生物肽。特别地，天蚕素A是由37个氨基酸形成的线性肽，其具有对抗革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌的有效溶胞活性。然而，因为其具有相当的长度，并且针对蛋白酶降解的稳定性低，推定它生产成本高，因此对于将其用于控制植物病害的应用存在保留。在Ali等的Mol.Plant-MicrobeInteract.，2000，13，847-859中，描述了抵抗一些植物病原菌，如胡萝卜软腐欧文氏菌胡萝卜软腐亚种(i>『//7/<3carofoyorasw6^p.carofopwa)和胡萝卜软腐欧文氏菌黑腐亚种(i"rw//72'(3ca_rc^c>pwasw6早"rose/7〃")的活性肽。它是Cavallarin等首次制得的十一氨基酸多肽(Mol.Plant-MicrobeInteract.,1998，11，218-227)，其由氨基酸序列Trp-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Val-Leu形成，并且C-末端氨基酸具有氨甲酰基团。所述肽是由天然来源的天蚕素A和蜂毒素的肽片段形成的杂合肽。具体而言，由天蚕素A的氨基酸2-8和蜂毒素的氨基酸6-9构成。还没有描述将所述十一氨基酸肽用于抵抗其他植物致病菌，如梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和洋丁香叶斑病假单胞菌的用途，这是特别相关的，因为它们影响具有很大经济重要性的植物，并且迄今为止用于对抗它们的方法是相当无效的。因此，对新的抗微生物化合物仍然存在需求，该化合物具有良好的对抗植物致病菌的功效，特别地，对抗细菌梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和/或洋丁香叶斑病假单胞菌。发明目的本发明的作者研发了新的肽，除了在真核细胞中具有低细胞毒性和对蛋白酶降解的良好稳定性之外，其还容易制备并且能高效率地抑制植物致病菌的生长。本发明的目的是提供具有抗微生物特性的线性肽。本发明的目的还在于所述肽作为抗微生物剂的用途。本发明的目的还在于含有本发明的肽和助剂的控制植物病害的组合物。本发明的另一个目的是预防由细菌引起的植物感染和病害的方法。发明描述ft本发明的目的是提供对应于通式(I)的线性肽X「X2-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile~Leu-Lys-X「Leu-NH2(I)其中X:是氢，乙酰基，对曱苯磺酰基，节基或苯甲酰基。X2是Lys,Tyr，Leu,Phe或Trp，和X3是Lys，Tyr,Val,Phe或Trp,附带条件是特别排除其中Xi是氢，X2是Trp和X3是Val的肽。在该通式中，当t是氢时，其表示为H，乙酰基表示为Ac,对甲苯磺酰基为Ts,千基为Bn,苯甲酰基为Bz。用于该描述中的氨基酸的缩写遵照IUPAC-IUB的生化命名委员会(CommissiononBiochemicalNomenclature)的标准，如描述于BiochemicalNomenclatureandRelatedDocuments(生化命名和相关文件)一书中，第2版，Portland出版社，1992，伦敦[ISBNl-85578-005-4]。因此，Leu是L-亮氨酸，Lys表示L-赖氨酸，lie是L-异亮氨酸，Phe是L-苯丙氨酸，Tyr是L-酪氨酸，Trp是L-色氨酸，Val是L-缬氨酸。根据所述的标准，用氨基酸缩写表示肽，这些氨基酸由表示肽键的短划线来连接。因此，例如，三甘氨肽表示为Gly-Gly-Gly。这需要表示甘氨酸H2N-CH2-COOH的符号Gly有三种不同形式的变型(i)"Gly-，，表示H2N-CH2-CO(ii)"Gly-，，表示HN-CH广CO-，和(iii)"Gly-，，表示H2N-CH2-COOH。因此，当将短划线置于符号右侧时，情况(i)，表示氨基酸羧基的0H基团已经除去，而当将短划线置于符号左侧时，情况(iii)，表示已经从氨基酸的氨基中除去了氢原子；在情况(ii)中，这两种变型都应用于相同的符号上。氨基酸Gly-构成该肽的N-末端，而氨基酸-Gly构成该肽的C-末端。如从通式(I)中可得知的，本发明的所有肽都具有氨甲酰形式的C-末端的氨基酸Leu，由-Leu-冊2来表示。构成本发明的肽的N-末端的氨基酸主要保持氨基没有被衍生化，或其可以用乙酰基，对甲苯磺酰，苯曱酰基或苄基官能化，如通式(I)中所示的。在所述氨基没有被衍生化的情况下，即，当Xi是氢时，在此描述中认为符号H-X-等同于符号X-，这是在上述情况(i)中IUPAC所采用的形式。根据通式(I)限定了本发明的肽的结构。限定本发明的肽的结构的另一种形式由使用氨基酸序列SEQ-ID-NO:1至SEQ-ID—N0:25组成，并且进一步详细说明了它们在肽的N-末端和C-末端所具有的官能化。如所示的，本发明的所有肽都具有形成氨曱酰形式的C-末端的氨基酸。所述序列具有表I中所示的氨基酸8<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>23Leu-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-lle-Leu-Lys-Trp-Leu24Phe-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-lle-Leu-Lys-Trp-Leu25Trp-l_ys-L>eii-Phe-Lys-Lys-ne-l_eu-Lys-Trp-l_eu称为SEQ_ID_N0:15的序列对应于由Cavallarin等Mol.Plant-MicrobeInteract,1998,11，218-227描述的肽的序列，本发明特别排除了其在该序列C-末端的氨甲酰衍生物。在本发明的肽中，优选的是由序列SEQ-ID-NO:1至SEQ-ID-NO:14和SEQ-ID-NO:16至SEQ-ID-NO:25所限定的肽，并且其在C-末端具有氨曱酰基形式的氨基酸。该组中特别优选的是由序列SEQ-ID-NO:6至SEQ-ID一NO:11，SEQ-ID-NO:13,SEQ—ID—NO:16，SEQ-ID-NO:18至SEQ-ID-NO:22和SEQ_ID_NO-25所限定的肽，并且其在C-末端具有氨曱酰基形式的氨基酸。特别优选的是由序列SEQ_ID_NO:6和SEQ_ID_NO:16所限定的肽，并且其在C-末端具有氨甲酰基形式的氨基酸。这两种优选肽中的最后一种具有结构H-Lys-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-1le-Leu-Lys-Phe-Leu-NH2，对应于通式(I)，其中X,是H，X2是Lys,而X3是Phe。还优选的是由序列SEQ_ID_NO:1至SEQ-ID-NO:25所限定的肽，并且其具有用乙酰基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨曱酰基形式的。在该组中，特别优选的是由序列SEQ-ID-NO:16所限定的肽，其具有N-末端乙酰基官能化的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨甲酰基形式的。所述肽具有结构Ac-Lys-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Phe-Leu-NH2，对应于通式(I)，其中X!是乙酰基(Ac)，X是Lys,而乂3是Phe。还优选的是由SEQ-ID—NO:1至SEQ-ID-NO:25所限定的肽，并且其具有用对曱苯磺酰基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨甲酰基形式的。10该组内特别优选的是由SEQ—ID_N0:1，6，11和16所限定的肽，并且其具有用对甲苯磺酰基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨甲酰基形式的。更优选的是由序列SEQ-ID-NO:1所限定的肽，并且其具有用对甲苯磺酰基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨甲酰基形式的。所述肽具有结构Ts-Lys-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Phe-Leu-NH2，对应于通式(I)，其中X!是对曱苯磺酰基(Ts)，Xa是Lys，而X3是Lys。还优选的是由氨基酸序列SEQ-ID-NO:1至SEQ-ID一N0:25所限定的肽，并且其具有用节基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨甲酰基形式的。在该组中特别优选的是由SEQ-ID-NO:15所限定的肽，并且其具有用千基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨甲酰基形式的。所述肽具有结构Bn-Tr对Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-11e-Leu-Lys-Va卜Leu-NH2，对应于通式(I)，其中Xi是苄基(Bn)，X2是Trp，而X3是Val。还优选的是由氨基酸序列SEQ—ID-NO:1至SEQ-ID一N0:25所限定的肽，并且其具有用苯甲酰基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨曱酰基形式的。在该组中特别优选的是由SEQ-ID—NO:1和SEQ一ID—NO:ll所限定的肽，并且其具有用苯甲酰基官能化的N-末端的氨基酸，并且其C-末端氨基酸是氨曱酰基形式的。所述肽具有结构Bz-Lys-:LyS"Leu-Phe-Lys-Lys-Ile"Leu-Lys-Lys-Leu-NH2,对应于通式(I)，其中X!是苯甲酰基(Bz)，X2是Lys,而X3是Lys。本发明中所述的肽由11个氨基酸形成，这使得它们适于使用固相肽合成的常见方法来制备，如R.B.Merrifield.J.Am.Chem.Soc.，1963，85.2149-2154中所述的。其中，我们可以提及使用用氨基官能化的4-甲基-二苯甲胺树脂(MBHA)作为固体支持物。在所述固体支持物上进行结合成肽的不同氨基酸之间偶联的连续反应。所述方法是本领域技术人员公知的并且描述于，例如，S.A.Kates，F.Albericio编辑，Solid-PhaseSynthesis.Apracticalguide(固相合成。实践指南)，MarcelDekker，NewYork,2000[ISBN:0-8247-0359-6]，或K.Burgess编辑，Solid-PhaseOrganicSynthesis(固相有机合成)，Wiley,John&Sons,NewYork,1999[ISBN:0471318256]。当将MBHA树脂用作固体支持物时，通常将所述树脂掺入对酸介质敏感的双官能间隔物中，这使得一旦合成就可以在温和条件下使肽脱锚。例如，合适的双官能间隔物是由SennChemicals公司(瑞士)销售的Fmoc-Rink-Linker(CAS编号:145469-56-3)。所述间隔物，一旦通过其羧基结合到MBHA树脂的氨基上，并且除去了保护基团Fmoc，它就具有游离氨基，其使得可以锚定具有游离羧基的氨基酸。在市场上，可以在SennChemicals公司获得Fmoc-Rink-MBHA,其已经具有掺入的所述间隔物。用于制备本发明的肽的方法可以是例如以下所述的方法。所述方法使用了Fmoc基团(9-芴甲氧羰基)的化学性质作为用于制备本发明的肽的氨基酸的"-氨基的保护物。为了保护赖氨酸(Lys)和色氨酸(Trp)的侧链，使用了叔丁氧羰基(Boc)基团。为了保护酪氨酸(Tyr)的側链，使用了叔丁基(卜Bu)基团。在第一个阶段中，除去存在于双官能间隔物的氨基中的保护基团Fmoc。接着，发生氨基酸亮氨酸的锚定，这是因为具有被Fmoc基团保护的or-氨基。继续进行新的偶联之前，从锚定在树脂上的亮氨酸中除去Fmoc保护基团。重复偶联-去保护循环直至完成肽结构。为了完成氨基酸与锚定于树脂中的肽的偶联反应，通常通过2或3个连续的偶联来进行肽的最后两个氨基酸的掺入。在与从形成该肽的氨基酸侧链除去保护基团的同时，在酸性条件下进行从固体支持物上切除肽。常规分离处理后，荻得本发明具有良好纯度的肽，纯度通常超过90%，通过HPLC测定，以粉末固体的形式，并且通过质傳(ESI-MS)来表征它们。令人惊讶地，已经证实了本发明的肽具有抗微生物活性，其对于抵抗植物的致病微生物特别有效，如细菌梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和/或洋丁香叶斑病假单胞菌。本发明目的的一部分是本发明的肽用于制备抗微生物组合物的用途。优选，本发明的肽用作抗微生物剂来抵抗植物的病原菌。优选，植物致病菌选自梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和/或洋丁香叶斑病假单胞菌。在本发明的肽中，优选用作抗微生物剂来抵抗植物病原菌的是该相同部分中上述的那些优选肽。所述细菌是测定可以用于抵抗植物中由细菌引起的感染和病害的化合物的抗微生物活性的合适指示剂。梨火疫病欧文氏菌是革兰氏阴性细菌，其引起称为梨火疫的病害，其侵袭蔷薇科的植物，其中特别是具有极大经济重要性的果树，如苹果树和梨树，观赏植物，如山梨树，山楂和criping结有果实的花楸树。在欧洲，将该细菌归类为农业中的检疫菌。梨火疫几乎影响所有的植物器官，并且常常涉及患病树木或灌木丛的死亡。目前不存在有效的方法来控制梨火疫，并且为了消灭或减少种菌需要联合采用不同的措施。辣椒斑点病黄单胞菌是革兰氏阴性细菌，其引起茄科植物中称为细菌性果实斑病的病害，茄科植物具有极大的经济重要性，如西红柿和辣椒。该病害侵袭叶，茎和果实，引起其萎蔫或死亡。洋丁香叶斑病假单胞菌是革兰氏阴性细菌，其引起园艺和木质栽培植物如果树中大量称为细菌性坏死的病害。许多情况中，洋丁香叶斑病假单胞菌的致病机理在于它的冰晶核形成活性(IM+)，其加强由于水造成的损害和各种植物毒素，如丁香霉素的产生。优选，可以用本发明的肽处理的植物选自果树，园艺植物和观赏植物。在果树中，我们可以提及仁果(苹果，梨)和核果树(桃树，杏树，李子树，樱桃树)以及香蕉树。在园艺植物中，我们有茄科(西红柿，辣椒，马铃薯)和葫,科(甜瓜，西瓜)。在园艺植物中，有山梨树，康乃馨，山楂和criping结有果实的花楸树。控制植物病害的组合物含有以下成分的控制植物病害的组合物也是本发明目的的一部分-线性肽，其对应于通式(I):X「X2~Lys-Leu-Phe-Lys~Lys-Ile~Leu-Lys-X3~Leu_NH2(I)其中Xi是氢，乙酰基，对甲苯磺酰基，苄基或苯甲酰基。XHys,Tyr，Leu，Phe或Trp，和X3是Lys，Tyr，Val,Phe或Trp,附带条件是特别排除其中t是氢，X2是Trp和X3是Val的肽，和-助剂。在本发明的肽中，优选形成所述控制植物病害的组合物的一部分的是前面称为肽的部分中作为优选的所提及的肽。本发明的控制植物病害的组合物具有良好的抗微生物特性以抵抗植物的病原菌。通常，在抗微生物组合物中，将各种活性成分合并来获得更大功效的更宽作用范围。在这种情况下，本发明的控制植物病害的组合物也可以含有其他抗微生物活性以获得更大的抗微生物功效，如例如，本发明几种肽的组合，或它们与其他不同活性物质的组合。本发明的肽还可以与抗真菌剂结合，并且因此展开更宽的抗微生物作用。构成控制植物病害组合物的一部分的肽的量可以根据如植物类型，植物中病原菌的浓度，病害的蔓延等因素而改变。使用本领域技术人员公知的常规方法可以容易地测定和调节肽的有效浓度。通常，肽的有效浓度为0.01至0.5g/1。在所述控制植物病害组合物中与本发明的肽共存的助剂可以具有几个功能，如，例如，有助于肽的剂量给药，提供容易处理的产品，改善用控制植物病害组合物润湿植物。所述助剂可以选自溶剂，稀释剂，惰性填充剂，润湿表面活性剂，緩沖剂，分散剂，抗结块剂，润滑剂，紫外线辐射过滤剂和/或其混合物。优选，所述助剂选自溶剂，表面活性剂，緩沖剂，紫外线辐射过滤剂和/或其混合物。非常优选，所述溶剂是水。组合物可以呈液体形式或固体形式。例如，在液体制剂的情况中，本发明的组合物可以是即可使用的稀释组合物的形式，或是浓缩剂的形式，其在使用前需要进行稀释，通常用水。在含水液体组合物的情况中，润湿表面活性剂的存在有助于用所述组合物喷雾时植物的润湿。本发明的肽的优点在于它们可以容易地溶解于水中，并且通常可以配制为水溶液，而不需要使用另外的有机溶剂。固体形式的组合物可以是颗粒或粉末形式，其中将本发明的肽和磨碎的惰性填充剂混合，惰性填充刑为例如高岭土，硅藻土，白云石，碳酸钩或滑石。它们也可以以可分散的颗粒或粉末的形式存在，其包括润湿剂来促进其在液体中的分散。15本发明的一部分目的还在于是预防或治疗由细菌引起的植物感染的方法，其包括使植物接触包括本发明肽的控制植物病害组合物。在本发明的方法中，控制植物病害的组合物可以以预防的形式施加于植物来避免由细菌引起的感染和病害的出现。预防性处理在本发明的肽抑制植物病原菌生长的事实中具有其基础。在本发明的方法中，一旦在植物中检测到存在时，控制植物病害的组合物还可以用来治疗所述感染和病害，因为本发明的肽抑制引起所述感染和病害的细菌的生长。在本说明书中，术语感染指的是致病微生物对器官的入侵和破坏，例如，叶，花或果实。因此，这是局部的过程。实际上，术语病害指的是影响植物的过程，其产生症状。优选，本发明的方法用于预防和治疗由植物病原菌引起的感染和病害，病原菌选自梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和/或洋丁香叶斑病假单胞菌。优选，可以用本发明的肽处理的植物选自果树，园艺树木和观赏植物。在本发明的方法中，可以使组合物接触植物的一部分，这些部分选自种子，根，茎，叶或果实，或接触土壤或围绕植物途径的任何生长方法。在本发明的方法中，可以通过任何常规技术使控制植物病害的组合物接触植物，这些技术中应强调的是喷雾，浸渍或灌溉。例如，可以制备本发明的肽的水溶液，并将受影响或易于受影响的植物进行喷雾。如果是来自果树的果实，例如，还可以在采收前或釆收后通过喷雾或浸渍来进行处理。例如，可以使用将肽分散于惰性填充剂中的固体组合物，或通过所述水溶液的喷雾或通过灌溉施加来进行根的处理。生物检验已经通过测定抑制微生物生长需要的最小肽浓度评价了本发明的16肽抵抗植物病原菌的抗微生物活性。通常，所述浓度称为最小抑制浓度(MIC)。这种类型的检验是微生物学中常用的并且是本领域技术人员公知的。所用方法的描述可以在以下文献中找到，例如，M.J.Pelczar，E.C.S.Chan,N.R.Krieg，Microbiology:ConceptsandApplications.(微生物:概念与应用)NewYork:McGraw-Hill,1997。为了评价本发明的肽的所述抗微生物效果，使用了以下的致病菌菌林梨火疫病欧文氏菌PMV6076(INRA，Angers,法国)，辣椒斑点病黄单胞菌2133-2(IVIA，Valencia,西班牙)和洋丁香叶斑病假单胞菌EPS94(IN-TEA，赫罗納大学，西班牙)。已经证实了含有溶解于水中的浓度为2.5至7.5|aM的本发明的肽的组合物能有效抑制细菌的生长，如梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和洋丁香叶斑病假单胞菌。这些结果表明本发明的肽的抗微生物活性的功效，因为Avrahami等的Biochemistry,2001，40，12591-12603中，认为低于50jaM的最小抑制浓度是有意义的。本发明的肽对于抵抗所述细菌比Cavallarin等所述的肽更有效，因为对抗梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和洋丁香叶斑病假单胞菌测试时，这种肽具有超过7.5iiM的最小抑制浓度，这种肽由序列SEQ_ID_N0:15所限定并且其具有氨甲酰基形式的C-末端。肽的溶血活性是真核细胞毒性的指标，并且是接触人体的那些化合物通常被测定的一个特征。如果用本发明的肽处理过的水果或蔬菜含有其残留物并且被人食用，或在施加或制备过程中由操作员操作时，这将是个问题。通过测定将所述肽的溶液接触含有5%体积/体积来自新鲜人血液的红细胞悬浮液的TRIS緩沖液时产生的血红蛋白释放评价了所述的溶血活性。将所述测定的结果表示为对于已知浓度的肽所产生的溶血作用百分比。用于测定溶血活性的方法的描述可以在0ren等，Biochemistry,2000，39，6103-6114和Raguse等，J.Am.Chem.Soc,，172002，124，12774-12785中找到。已经证实了本发明的大部分肽在高于它们抑制植物病原菌生长的活性浓度十倍至一百倍之间的浓度具有显著的溶血活性。肽对蛋白酶降解的稳定性是可以评价肽在合理的半衰期过程中在植物环境中未改变的一个特征。肽可以被植物组织中和植物外的(ephyticic)微生物中存在的蛋白酶所降解。已经通过含有蛋白酶K(Sigma-Aldrich)的TRIS緩沖液中的肽溶液的处理评价了肽对蛋白酶降解的稳定性，并且以不同的时间间隔通过HPLC监控它们的降解。将该降解表示为测定时间间隔后通过HPLC从天然肽的峰面积的减少计算出的降解肽的百分比。测定对蛋白酶的稳定性所用的方法的描述可以在Rozek等，Biochemistry,2003,42，14130-14138中找到。已经证实了本发明的一些肽比Cavallarin等所述的肽对蛋白酶的降解更稳定。接着，为了使前面的描述足够完整的目的，给出了以下的实施例。实施例在以下的实施例中，所用以下缩写Ac:乙酰基；Ac20:乙酸酐；Bn:千基；Boc:叔丁氧羰基；t-Bu:叔丁基；Bz:苯曱酰；MIC:最小抑制浓度；DIAE:N，N-二异丙基乙胺;DMF:N，N-二曱基甲酰胺;EDTA:乙二胺四乙酸；ESI-MS:电喷雾离子化串联质镨；Fmoc:9-芴甲氧羰基；HBTU:N-[1H-苯并三唑(l-基)(二甲基氨基)亚曱基]-N-甲基甜菜碱六氟磷酸盐-N-氧化物；HPLC:高效液相色语；LB:LuriaBertani;MBHA:4-曱基-二苯曱胺；NMP:N-甲基-吡咯烷酮；TFA:三氟乙酸；TIS:三异丙基硅烷；TRIS:三(羟基甲烷)氨基甲烷；TS:对甲苯磺酰基；TSB:胰胨豆胨培养液；UV:紫外线。产品Fmoc-Lys(Boc)-0H，F画-Phe-OH，Fmoc-Leu-OH,Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-0H，Fmoc-Trp(Boc)-0H，Fmoc-Va卜OH，氨基官能化的Fmoc-Rink-MBHA树月旨和HBTU从SennChemicals获得。产品节基氯，苯甲酰氯，三氟乙酸，N-甲基-吡咯烷酮和TIS获自Aldrich。产品甲苯磺酰氯，哌咬和DIAE获自Fluka。以下关于制备肽的方法的指示具有通性-使用具有用Fmoc基团保护的oc-氨基的氨基酸。-对于赖氨酸和色氨酸侧链的保护，使用基团叔丁氧羰基(Boc)。对于酪氨酸侧链的保护，使用基团叔丁基(t-Bu)。-在合并了微孔过滤器的2或5ml注射器中进行反应。-所有转化和洗涤都在25'C下进行，除非另外指出。-以1.Oral/分钟的流速进行HPLC分析，使用Kromasil反相柱(4.6x40mm;粒径3.5jum)。使用0.1%乙腈中0.1。/。含水TFA的线性梯度，在7分钟的时间过程中，使用0.98:0.02至0.98:0.1的比例，使用220nm波长的UV检测。-使用四极Navigator仪器获取ESI-MS光i普；以阳离子模式(ES+)运行，使用30kV的样品电压。-溶剂之间所有的比例都是体积/体积，除非规定是另一种类型的比例。实施例1.-H~Lys~Lys~Leu~Phe~Lys~Lys-Ile~Leu~Lys-Val~Leu-NH2(通式(I)其中X!是氢，X2是Lys和X3是Val)的制备在在其下半部分装有微孔过滤器的2ml容量的注射器中，放入用0.66mmol/g(相当于19.8iamol)氨基官能化的30mgFmoc-Rink-MBHA树脂，并且根据以下的顺序将溶剂装入注射器中来溶胀-洗涤树脂CH2C12(1x20分钟)和DMF(1x20分钟)。表述CH2C12(1x20分钟)指的是1次洗涤用二氯甲烷进行20分钟的情况。每个洗涤阶段后，通过多重真空过滤器(来自PromegaDistribuidora的VacManLaboratoryVacuumManifold)来除去溶剂。溶胀-洗涤树脂后，用哌啶和DMF的混合物(3:7，1x2分钟和1xl0分钟)进行处理，以除去双官能间隔物的氨基中存在的Fmoc基团，然后，用DMF洗涤(6xl分钟)。19接着，用0.lmlDMF中的21mgFmoc-Leu-OH(59ymol)，22mgHBTU(59mio1)和llialDIAE(63|amol)处理树脂。4小时后，用DMF洗涤(6xl分钟)树脂，并且进行检查，茚三酮测试是阴性的(Kaiser等，Anal.Biochem.，1970，34,595-598)。如上所述进行Fmoc基团的去除和随后的洗涤。对于以下四种用基团IT-Fmoc保护的氨基酸重复偶联-去保护循环Fmoc-Va卜OH,Fmoc-Lys(Boc)-0H，Fmoc-Leu-OH和Fmoc-Ile-OH。在每个阶段中，用DMF洗涤(6xl分钟)。掺入第五个氨基酸后，除去Fmoc基团，以相同的方式进行偶联-去保护循环和相应的洗涤，在这些情况中，DMF由NMP替代。结合最后六个用Na-Fmoc基团保护的氨基酸Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Phe-OH和Fmoc-Leu-0H。为了掺入最后两个氨基酸，进行2-3次连续的结合来获得阴性茚三酮测试。除去最后一个偶联的氨基酸的Fmoc基团后，如已经描述过的，用NMP(6x1分钟)和CH2C12(6xl分钟)洗涤树脂，并且获得结合树脂的线性肽H-Lys-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Va卜Leu-Rink-MBHA。接着，在2小时的过程中通过用lmlTFA，水和TIS(95:2，5:2.5)混合物的处理从树脂上分离肽。通过正氮压将滤出液收集于小瓶中。用TFA,水和TIS的混合物(95:2,5:2.5，2x0.5ml)洗涤树脂。合并滤出液并在氮流下几乎蒸发至干，直至获得油状物。用二乙醚沉淀所述油状物，将其离心并滗去醚。该过程重复3或4次。最后，将获得的固体产物溶解于水中并冻干。获得粉末状固体，通过HPLC分析具有超过90%的纯度(停留时间4.39分钟)，并且通过ESI-MS证实其结构。还以更大的规模，使用200mg用0.66mmol/g(相当于132jamole)氨基官能化的Fmoc-Rink-MBHA树脂，使用实施例1中所述的相同方法进行了该肽的合成。实施例2—Ac—Lys—Lys—Leu—Phe—Lys—Lys—Ile—Leu—Lys—Val—Leu—NH2(通式(I)，其中X,是乙酰基(Ac),X2是Lys和Xs是Val)的制备在环境温度下的1小时过程中用0.2ml乙酸酐(Ac20)，吡啶和CH2C12(1:1:1)的混合物处理实施例1中获得的肽酰树脂H"Lys-LyS"Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Val-Leu-Rink-MBHA。然后，用CH2Clr冼涤树脂(6xl分钟)。接着，按照实施例1中所述的方法从树脂分离出肽并分离。通过HPLC测定的所获得肽的纯度为大于90%(停留时间4.59分钟)，并且通过EMI-ES证实其结构。实施例3-Ts-Lys-Lys-Uu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Val-Leu-NH2(通式(I)，其中X:是对甲苯磺酰基(Ts)，X2是Lys和X3是Val)的制备在环境温度下的1小时过程中，用0.2mlCH2Cl2和NMP(9:1)混合物中的对甲苯磺酰基氯(TsCl)(792jamole)和DIAE(1.58mmole)处理实施例1中获得的肽酰树脂H"LyS"Lys-Leu-Phe-Lys"Lys-Ile-Leu-Lys-Val-Leu-Rink-MBHA。然后，用NMP(6x1分钟)洗涤树脂。接着，按照实施例1中所述的方法从树脂分离出肽并分离。通过HPLC测定的所获得肽的纯度为大于90%(停留时间4.59分钟)，并且通过EMI-ES证实其结构。实施例4一Bz-Lys~Lys-Leu-Phe~Lys~Lys-Ile-Leu-Lys-Val-I>eu-NH2(通式(I)，其中X:是苯曱酰基(Bz)，X2是Lys和X3是Val)的制备在环境温度下的1小时过程中，用0.2mlCH2Ch和NMP(9:1)混合物中的苯甲酰氯(BzCl)(792iamole)和DIAE(1.58mmole)处理实施例1中获得的肽酰树脂H"Lys-Lys"Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu"Lys-Val-Leu-Rink-MBHA。然后，用NMP(6xl分钟)洗涤树脂。21接着，按照实施例1中所述的方法从树脂分离出肽并分离。通过HPLC测定的所获得肽的纯度为大于90%(停留时间5.OO分钟)，并且通过EMI-ES证实其结构。实施例5—Bn-Lys-Lys-Leu-Phe-LyS"Lys-Ile-Leu-Lys-Val-Leu-NH2(通式(I)，其中X!是苄基(Bn)，X2是Lys和Xg是Val)的制备在环境温度下的48小时过程中，用0.2mlCH2CL和NMP(9:1)混合物中的千基溴(BnBr)(792jamole)和DIAEU.58mmole)处理实施例1中获得的肽酰树脂H-Lys-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-Val-Leu-Riiik-MBHA。然后，用NMP(6x1分钟)洗涤树脂。接着，按照实施例1中所述的方法从树脂分离出肽并分离。通过HPLC测定的所获得肽的纯度为大于90%(停留时间4.73分钟)，并且通过EMI-ES证实其结构。实施例6-固相中线性肽化学文库的制备设计化学文库来获得125个肽，其对应于通式(I):X广X2-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu"Lys-X3-Leu-NH2(I)其中X,是氢，乙酰基，对甲苯磺酰基，苄基或苯甲酰基。X2是Lys，Tyr，Uu，Phe或Trp，和X3是Lys，Tyr，Val,Phe或Trp，附带条件是从本发明的肽中特别排除其中Xi是氢，t是Trp和X3是Val的肽。在五个适当标记并在下半部分装有微孔过滤器的5ml容积注射器中，放入350mg用0.66mmol/g(相当于231pmole)氨基官能化的Fmoc-Rink-MBHA树脂。根据以下的顺序将溶剂装入注射器中来溶胀-洗涤树脂CH2C12(1x20分钟)和DMF(1x20分钟)。每个洗涤阶段后，通过多重真空过滤器(来自PromegaDistribuidora的VacManLaboratoryVacuumManifold)来除去溶齐寸。溶胀-洗涂树脂后，用哌咬和DMF的混合物(3:7，1x2分钟和1xIO分钟)来处理，以除去双官能间隔物的氨基中存在的Fmoc基团，然后，用DMF洗涤(6xl分钟)。然后，用0.8mlDMF中的245mgFmoc-Leu-0H(693|amol)，263mgHBTU(693jumol)和121y1DUE(693|amol)处理五种树脂。4小时后，用DMF洗涤(6xl分钟)树脂，并且证实茚三酮测试是阴性的(Kaiser,Anal.Biochem.，1970，34，595-598)。接着，如上所述进行Fmoc基团的去除和相应的洗涤。然后，将相应的氨基酸X3与每种树脂偶联:Fmoc-Val-0H，Fmoc-Trp(Boc)-0H，Fmoc-Tyr(Boc)-0H，Fmoc-Phe-0H或F陽-Lys(Boc)-0H，按照用于结合受保护的氨基酸Fmoc-Leu-OH的方法。如上所述进行Fmoc基团的去除和随后的洗涤。对于以下三个氨基酸重复偶联-去保护循环。这样，按顺序偶联了以下残基Fmoc-Lys(Boc)-0H，Fmoc-Leu-0H和Fmoc-Ile-0H。五种树脂的每一种都进行这些结合。在每个阶段种，用DMF进行洗涤(6x1分钟)。五个氨基酸结合后，以相同的方式进行Fmoc基团的去除，偶联-去保护循环和相应的洗涤，在这些情况种，用NMP替代DMF的使用。该程序之后，五种树脂中的每一种按顺序偶联两个Fmoc-Lys(Boc)-OH残基，一个Fmoc-Phe-0H和一个Fmoc-Leu-OH。在每个阶段中，用NMP洗涤(6xl分钟)。对于第十个残基的掺入，需要具有双重偶联来获得阴性茚三酮测试。一旦偶联了笫十个残基，将五个注射器中所含的每一种肽酰树脂分成五个部分。获得25个部分，对应于大约46pmole每种肽酰，放入25个适当标记并在下半部分装有微孔滤器的2ml容积注射器中。然后，如上所述除去Fraoc并进行相应的洗涂。给具有结合相应X2的相同X3氨基酸的五个树脂部分中的每一个都偶联Fmoc-Trp(Boc)-0H，F画-Phe-0H，Fmoc-Tyr(tBu)-0H,Fmoc-Lys(Boc)或Fmoc-Leu-0H。使用0.3mlNMP中的138iamol相应保护的氨基酸Not-Fmoc，138jamolDIAE进行偶联。为了结合这些氨基酸，需要进行双重偶联来获得阴性茚三酮测试。接着，将之前125个部分的每一个分成5个等份。获得125个部分，对应于大约9.2jumol肽酰树脂，放入125个适当标记并在下半部分装有微孔滤器的2ml容积注射器中。接着，如上所述除去Fmoc基团并进行相应的洗涤。从之前25个部分中每一个获得五个树脂部分中的四个，各自通过乙酰化，曱苯磺酰化，苯曱酰化或千基化在N-末端进行衍生。通过在室温下的1小时过程中使用0.2mlAc20，吡咬和CH2C12(1:1:1)的混合处理来进行乙酰化。通过在室温下的1小时过程中使用0.2mlCH2Cl2和NMP(9:1)混合物中的TsCl(368jumol)和DIAE(736jamol)处理来进行甲苯磺酰化。通过在室温下的1小时过程中使用0.2mlCH2Ch和NMP(9:1)混合物中的BzCl(368nmol)和DIAE(736nmol)处理来进行苯甲酰化。通过在室温下的48小时过程中使用0.2mlCH2Cl2和NMP(9:1)混合物中的BnCl(368iamol)和DIAE(736jamol)处理来进行千基化。这些处理后，用NMP洗涤树脂(6xl分钟)。最后，按照实施例1中所述的方法，在相应的注射器中进行125个树脂肽的切除并分离每一种。通过HPLC分析所获得的肽并通过ESI-MS证实它们的结构。所有情况中都获得超过90%的纯度。实施例7—^:生物活性测试测定了本发明的肽对抗以下细菌菌林的抗微生物效果梨火疫病欧文氏菌PMV6076(INRA，Angers，法国)，辣椒斑点病黄单胞菌2133-2(IVIA，Valencia,西班牙)和洋丁香叶斑病假单胞菌EPS94(IN-TEA，UniversitatdeGirona，西班牙)将所有细菌在补充20%甘油体积/体积的Luria-Bertani(LB)培养基中-8(TC存储。在25'C生长24小时后获得梨火疫病欧文氏菌PMV6076和洋丁香叶斑病假单胞菌EPS94的悬浮液，在LB琼脂中25。C培养48小时后获得辣椒斑点病黄单胞菌2133-2的样品。在所有情况中，将它们悬浮于无菌水中，以获得调节至0.2至60nm吸光值的悬浮液，这大约对应于108菌落形成单位。为了测定最小抑制浓度(MIC)，将肽溶解于milli-Q无菌水中，直至IOOOjliM的终浓度，并且将它们通过0.22jam孔径的滤器进行过进行本发明肽的稀释以获得浓度为750,500，250，200，150，125，100,75，50和25/aM的溶液。将20ju1的每个稀释液与20ml相应的细菌指示剂悬浮液和160ja1TSB(胰胨豆胨培养液)液体培养基混合，直至获得微平板每个孔中的200ial总体积。因此，所测试的细菌悬浮液的有效浓度为75，50，25，20，15，12.5，10，7.5，5和2.5|aM。对于每个菌抹，浓度和所研究的肽，进行两次重复。阳性对照含有替代肽的水，而阴性对照含有肽而没有细菌悬浮液。使用MicrobiologyAnalyserBioscreenC(Labsystems)通过600nm处的光密度自动测定微生物生长。将微量平板在25。C培养48小时，每小时测量吸光值之前搅拌20秒钟。每个实验进行两次。作为MIC，取实验终点时产生的细菌生长的最低肽浓度。表II显示了对于本发明不同的肽抵抗梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和洋丁香叶斑病假单胞菌，在25'C培养48小时后，包括MIC的浓度范围，以nM来表示。用通式(I)中出现的参量L，X2和X3来识别表II的肽。此外，表II包括关于实施例6中制得的化学文库的参考数。表II包括比较实施例，其结果对应于Cavallarin等描述的肽，这没有形成本发明的一部分。表II<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>可以证实本发明的肽对于抑制梨火疫病欧文氏菌，辣椒斑点病黄单胞菌和/或洋丁香叶斑病假单胞菌具有良好的功效。此外，本发明肽的功效高于已知肽的，已知肽的结果呈现于上表中第一行，名称为比较实施例。实施例8-溶血活性测试通过测定将肽溶液接触5%体积来自新鲜人血液的红细胞悬浮液时产生的血红蛋白释放来评价本发明的肽的溶血活性。使用VactainerK2E系统(Belliver,英国)和EDTA无菌收集血液，并存储于4'C，少于2个小时。将血液在6000g离心5分钟来分离红细胞。用TRIS緩沖液(10mMTRIS，150mMNaCl，pH7.2)洗涂三次，并将它们重悬浮于TRIS緩冲液中，直至获得含有10%体积红细胞的悬浮液。将肽溶解于TRIS緩沖液中，直至获得IOO，300和500MM的终浓度。对于每个肽和浓度，使用复制品。在96-孑L平板(Micro-Amp⑧，AppliedBiosystems,美国)的每个孔中，将65u110%红细胞悬浮液与65m1肽溶液混合(5%体积红细胞)，并将混合物在37。C搅拌培养1小时。以这种方式，使红细胞悬浮液接受50，150和250)iM的肽浓度。接着，将平板在3500g离心IO分钟，并将80ju1上清液的等份试样转移至具有100个孔的微量平板中(Bioscreen)，用80jalmilli-Q水将其稀释。使用Bioscreen平板阅读仪从540nm处的吸光值测定溶血程度。在含有200iaM蜂毒素(Sigma-Aldrich，西班牙)的TRIS緩冲液中测定完全阳性溶血对照。使用以下等式测定溶血(H)百分比H-100x/(0m-0b)]其中OP作为测量的光学密度用于测定肽浓度，Ob是緩冲液的光学密度，而Om是含有蜂毒素的阳性对照的光学密度。表III显示了溶血活性的结果，对于对应于50，150和250mM的本发明的肽浓度，用根据之前等式计算的溶血百分比来表示。用通式(I)中出现的参量X"X2和Xs来识别表III的肽。此外，表III包括关于实施例6中制得的化学文库的参考号表III<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>在所有情况中，观察到发生显著溶血的浓度为高于本发明的肽具有抗微生物活性的浓度10至IOO倍之间。实施例9-对蛋白酶降解的稳定性测试通过蛋白酶K(Sigma-AldrichCorporation,Madrid,西班牙)的肽消化来测定本发明的肽对蛋白酶降解的稳定性。在室温使用pH7.6的100mMTRIS緩沖液中50yg/ml肽和1yg/ml蛋白酶K的溶液。在5至45分钟之间的时间通过色镨测定肽切除的进展。为此，使用反相C8柱(K醒asil，4.6x40mm;3.5jam粒径)，7分钟的过程中从0.98:0.02至0:1的线性梯度，通过220nm的紫外线吸光值来进行检测。表IV呈现了对蛋白酶降解的稳定性的结果，表示为45分钟后每个肽的降解百分比。用通式(I)中出现的参量XnX2和X3来识别表IV的肽。此外，表IV包括关于实施例6中制得的化学文库的参考数。表IV包括比较实施例，其结果对应于由Cavallarin等所述的肽，这没有形成本发明的一部分表IV参考号X,x2x345分钟内的比较实施例HTrpVal100BP008AcTrpVal100BP077AcLysPhe84BP009TsTrpVal100BP125TsLysLys67BP010BzTrpVal100BP126BzLysLys53BP015HLysVal100BP019HTrpPhe87BP020HTrpTyr85BP033HLeuVal100BP076HLysPhe49BP100HLysTyr6029可以观察到本发明的一些肽比Cavallarin等所述的肽(比较实施例)对蛋白酶降解更稳定。特别地，对应于通式U)的肽，其中X,是氢，X2是Lys和X3是Phe,或X:是苯曱酰基，X2是Lys和X3是Lys,稳定性比比较实施例的肽高两倍。权利要求1.线性肽，其特征在于它们对应于通式(I)X1-X2-Lys-Leu-Phe-Lys-Lys-Ile-Leu-Lys-X3-Leu-NH2(I)其中X1是氢，乙酰基，对甲苯磺酰基，苄基或苯甲酰基，X2是Lys，Tyr，Leu，Phe或Trp，和X3是Lys，Tyr，Val，Phe或Trp，附带条件是特别排除其中X1是氢，X2是Trp和X3是Val的肽。2.根据权利要求1的肽，其特征在于它们由序列SEQ-ID-N0:1至SEQ-ID-N0:14和SEQ-ID-N0:16至SEQ_ID_N0:25来限定，并且在于它们具有氨曱酰基形式的C-末端氨基酸。3.根据权利要求2的肽，其特征在于它们由序列SEQ-ID-N0:6至SEQ-ID—N0:11，SEQ-ID-N0:13，SEQ—ID一N0:16，SEQ-ID-N0:18至SEQ-ID一N0:22和SEQ—ID—N0:25来限定，并且在于它们具有氨曱酰基形式的C-末端的氨基酸。4.根据权利要求3的肽，其特征在于它们由序列SEQ-ID-N0:6和SEQ-ID_N0:16来限定，并且在于它们具有氨曱酰基形式的C-末端的氨基酸。5.根据权利要求1的肽，其特征在于它们由序列SEQ-ID—N0:1至SEQ一ID—NO:25来限定，并且在于它们具有用乙酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨甲酰基形式C-末端的氨基酸。6.根据权利要求5的肽，其特征在于它们由序列SEQ_ID_N0:16来限定，并且在于它们具有用乙酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨甲酰基形式的C-末端的氨基酸。7.根据权利要求l的肽，其特征在于它们由序列SEQ-ID一N0:1至SEQ—ID_N0:25来限定，并且在于它们具有用对甲苯磺酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨甲酰基形式的C-末端的氨基酸。8.根据权利要求7的肽，其特征在于它们由序列SEQ一ID-NO:1，6,11和16来限定，并且在于它们具有用对甲苯磺酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨甲酰基形式的C-末端的氨基酸。9.根据权利要求8的肽，其特征在于它由序列SEQ-ID-N0:1来限定，并且在于它具有用对甲苯磺酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨曱酰基形式的C-末端的氨基酸。10.根据权利要求1的肽，其特征在于它由序列SEQ-ID-N0:1至SEQ_ID_NO:25来限定，并且在于它们具有用千基官能化的N-末端的氨基酸和氨甲酰基形式的C-末端的氨基酸。11.根据权利要求10的肽，其特征在于它由序列SEQ-ID-N0:15来限定，并且在于它们具有用节基官能化的N-末端的氨基酸和氨甲酰基形式的C-末端的氨基酸。12.根据权利要求1的肽，其特征在于它由序列SEQ-ID-NO:l至SEQ-ID_NO:25来限定，并且在于它们具有用苯曱酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨曱酰基形式的C-末端的氨基酸。13.根据权利要求12的肽，其特征在于它由序列SEQ—ID-N0:1和SEQ_ID_N0:11来限定，并且在于它们具有用苯曱酰基官能化的N-末端的氨基酸和氨曱酰基形式的C-末端的氨基酸。14.根据权利要求13的肽，其特征在于它由序列SEQ一ID—N0:1来限定，并且在于它具有用苄基官能化的N-末端的氨基酸和氨曱酰基形式C-末端的氨基酸。15.根椐权利要求1至14任一项的肽用于制备抗微生物組合物的用途。16.根据权利要求15的用途，作为抗微生物剂来抵抗植物的病原菌。17.根据权利要求16的用途，其特征在于该植物的病原菌选自梨火疫病欧文氏菌(^n^/z/aa迈j^orara)，辣椒斑点病黄单胞菌(Ja/f力o/zo/jasres/catorj.a)和'洋丁香叶斑病假单i包菌(尸sewcfo历o/2ass/W/^(Se)。18.根据权利要求16或17的用途，其特征在于所述植物选自果树，园艺树木和观赏植物。19.控制植物病害的组合物，其含有根据权利要求1至14任一项的肽和助剂。20.根据权利要求19的组合物，其特征在于肽浓度为0.01至0.5g/1。21.根据权利要求19或20的组合物，其特征在于所迷助剂选自溶剂，表面活性剂，緩沖剂，紫外线照射过滤剂和/或其混合物。22.根据权利要求21的组合物，其特征在于所述溶剂是水。23.预防和治疗由细菌引起的植物感染和病害的方法，其包括使植物接触根据权利要求19至22任一项的控制植物病害的组合物。24.根据权利要求23的方法，其特征在于所述细菌选自梨火疫病欧文氏菌(frp^'"/aa/ff/7oyora)，辣椒斑点病黄单胞菌(Xsi3Mo迈oi7as7e"'c"or/a)和洋丁香叶斑病假单胞菌(/^e油衡加ss/W/^ae)。25.根据权利要求23或24的方法，其特征在于所述植物选自果树，园艺树木和观赏植物。26.根据权利要求23至25任一项的方法，其特征在于使组合物接触选自以下的植物部分种子，根，茎，叶或果实，或接触土壤或任何围绕植物根部的其他生长介质。27.根据权利要求23至26任一项的方法，其特征在于通过喷雾，浸渍或灌溉使控制植物病害的组合物接触植物。全文摘要本发明涉及新的具有抗微生物活性的线性肽。所述肽由11个氨基酸构成，并且它们具有构成非衍生形式或用乙酰基，对甲苯磺酰基，苄基或苯甲酰基官能化的N-末端的氨基酸氨基。构成所述肽C-末端的氨基酸是氨甲酰形式的。本发明描述了所述肽的合成以及作为抗微生物剂来抵抗植物病原菌的用途。本发明还涉及含有所述肽和助剂的组合物，以及预防和治疗由病原菌引起的植物感染和病害的方法。文档编号C07K14/435GK101466731SQ200780021678公开日2009年6月24日申请日期2007年4月24日优先权日2006年4月28日发明者E·巴多萨罗马乔,E·巴尔达希罗德里格斯,E·蒙特西诺斯塞吉,L·费利乌索利,M·普拉纳斯各拉布莱达,R·费雷马拉贡申请人:赫罗纳大学