新的灯盏乙素类化合物及其应用的制作方法

专利名称：：新的灯盏乙素类化合物及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明属于医药
技术领域：
，涉及新的灯盏乙素类化合物及其应用，具体涉及新的羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物及其在防治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑梗塞、脑缺血及由脑缺血引起的其它各种疾病等中的应用。技术背景现代药理学研究表明灯盏花素(其中主要的成分是灯盏乙素)能降低外周阻力、减少心肌耗氧量、促进侧枝循环、抑制血小板聚集、改善心脑血管循环、增加心脑血管血流量。临床上主要用于治疗脑血栓、脑血栓后遗症、脑梗塞、中风后瘫痪、冠心病、心绞痛等疾病。但灯盏花素口服生物利用度很低，不能使药物发挥疗效；且因其在水中溶解度很小，制成注射剂难度较大。现在临床上使用的灯盏花素注射液因其纯度有限，容易发生不良反应。解决灯盏花素的水溶性问题是新药研究领域的一个重要课题。
发明内容本发明的目的是针对上述现有技术存在的缺陷和不足，提供一种既可以克服灯盏乙素水溶性不好，难以用常规方法制成注射剂、且不良反应较多的缺点，又不降低灯盏乙素药效的新药。使之成为治疗心脑血管系统疾病之有效良药，在改善心脑血管系统功能及防治大脑老化、增强免疫功能、延缓衰老、提髙生活质量等方面发挥最佳作用。本发明进一步的目的是提供羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物及其制剂在制药领域中的应用，特别是在制备用于防治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑缺血引起的其它功能障碍等疾病的药物中的应用。本发明中化合物的结构如通式(I)所示，式中R^是H或烷基，&、R2、R3是羟乙(丙、丁)基或H,其中在lR2、R冲至少有一个是羟乙(丙、丁)基。OR，O(I)本发明中化合物的合成方法可通过如下技术方案予以实施(1)将灯盏花素和水混合，加热，加入NaOH(灯盏花素与NaOH的摩尔比为l:O，通入环氧乙烷，在40-100匸条件下反应2-IO小时，冷却，滤过，滤液减压浓缩，得羟乙基灯盏乙素的粗品。(2)将羟乙基灯盖乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检查，合并相同流份，减压浓缩至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。(3)以3-溴丙醇代替环氧乙烷为试剂，釆用上述类似的方法即可获得羟丙基灯盏乙素。(4)以4-溴丁醇代替环氧乙烷为试剂，釆用上述类似的方法即可获得羟丁基灯盏乙素。合成产物5，6,4'-三羟乙基灯盏乙素为黄色粉末，分子式C27H3。015;4'-羟乙基灯盏乙素为黄色粉末，分子式C23H22013;6-羟乙基灯盏乙素为黄色粉末，分子式C23H22013;4',6-二羟乙基灯盏乙素为黄色粉末，分子式C25H26014。其中合成产物5,6，4'-三羟乙基灯盏乙素的结构如下式所示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>5，6，4'-三羟乙基灯盏乙素以上四个合成产物的丽R数据如表1所示。表l羟乙基灯盏乙素类化合物的^和"C-丽R数据(DMS0-d,TMS)<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>本发明的化合物不但水溶性很好，可以非常方便地制成水溶性注射剂或冻干粉针，而且动物试验结果表明其疗效与灯盏花素相当，具有抗心脑缺血、缺氧作用，能够用于防治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑缺血及由脑缺血引起的其它功能障碍等疾病。具体实施方式下面的实施例可以帮助本领域的技术人员更全面地理解本发明。但不以任何方式限制本发明。实施例l:4'-羟乙基灯盏乙素的制备方法于50。C条件下，将10g灯盏乙素、10ml水、0.86g氢氧化钠加入到反应瓶中，通入氮气除氧气；然后通入环氧乙烷，反应5小时。冷却，滤过，滤液减压浓缩，得羟乙基灯盏乙素的粗品。将羟乙基灯盏乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检查，合并相同流份，减压浓缩至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。HPLC检测4'-羟乙基灯盏乙素含量为75%。实施例2:制备6-羟乙基灯盖乙素的方法于60。C条件下，将10g灯盏乙素、10ml水、0.9g氢氧化钠加入到反应瓶中，通入氮气除氧气；然后通入环氧乙烷，反应5小时。冷却，滤过，滤液减压浓缩，得羟乙基灯盏乙素的粗品。将羟乙基灯盏乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检査，合并相同流份，减压浓縮至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。HPLC检测6-羟乙基灯盏乙素含量为70%。实施例3:制备4',6-二羟乙基灯盏乙素的方法于65X:条件下，将10g灯盏乙素、10ml水、1.6g氢氧化钠加入到反应瓶中，通入氮气除氧气；然后通入环氧乙烷，反应8小时。冷却，滤过，滤液减压浓缩，得羟乙基灯盏乙素的粗品。将羟乙基灯盏乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检查，合并相同流份，减压浓缩至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。HPLC检测4',6-羟乙基灯盏乙素含量为80%。实施例4:制备5，6，4'-三羟乙基灯盏乙素的方法于75r条件下，将10g灯盏乙素、10ml水、3.2g氢氧化钠加入到反应瓶中，通入氮气除氧气；然后通入环氧乙烷，反应8小时。冷却，滤过，滤液减压浓縮，得羟乙基灯盏乙素的粗品。将羟乙基灯盏乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检查，合并相同流份，减压浓缩至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。HPLC检测5，6,4'-羟乙基灯盏乙素含量为80%。实施例5:制备4',6-二羟丙基灯盏乙素的方法于70。C条件下，将10g灯盏乙素、10ml水、2.Og氢氧化钠、9.0g3-溴丙醇加入到反应瓶中，反应10小时。冷却，滤过，滤液减压浓缩，得羟丙基灯盏乙素的粗品。将羟丙基盏乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检查，合并相同流份，减压浓缩至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。HPLC检测4',6-二羟丙基灯盏乙素含量为73%。实施例6:制备4'，6-二羟丁基灯盏乙素的方法于75。C条件下，将10g灯盏乙素、10ml水、2.Og氢氧化钠、10.0g4-溴丁醇加入到反应瓶中，反应10小时。冷却，滤过，滤液减压浓缩，得羟丁基灯盏乙素的粗品。将羟丁基灯盏乙素粗品用水溶解，通过大孔吸附树脂色谱柱吸附后，用水洗脱，收集水洗脱部分，通过薄层色谱检查，合并相同流份，减压浓缩至干，用乙醇溶解，加入活性炭脱色，回收溶剂即得。HPLC检测4',6-二羟丁基灯盏乙素含量为65%。实施例7:急性心肌缺血小鼠常压耐缺氧试验取健康昆明种小鼠60只，雌雄兼用，体重20d2g,随机分为6组正常对照组、模型对照组、羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物2.6mg/kg、5.2mg/kg、10.4mg/kg组和灯盏花素注射液5.2mg/kg组。分别尾静脉注射药物，对照组尾静脉注射等容积生理盐水，各组给药容积均为IOml/kg。给药后5分钟后除正常对照组注射等容积生理盐水外，各组小鼠腹腔注射异丙肾上腺素IOmg/kg,各组给药容积均为IOml/kg,IO分钟后立即将小鼠放入盛有15g钠石灰的250ml磨口广口瓶，凡士林密封，以最后一次呼吸为指标，观察并记录各组动物存活时间，实验结果用Excel统计处理，经t检验判断显著性。由实验结果可知，与模型对照组比较，高剂量的羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物(10.4mg/kg)能够提高急性心肌缺血小鼠常压耐缺氧能力，与模型对照组相比存活时间显著延长，结果见表2。__表2急性心肌缺血小鼠常压耐缺氧存活时间_<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>"""模型对照组与正常对照组比较，###P<0.001给药组与模型对照组比较，*p<0.05实施例8:异丙肾上腺素致大鼠心肌缺血试验取180-220gWistar大鼠70只，雄性，随机分为7组正常对照组、模型对照组、羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物尾静脉注射给药组1.82mg/kg、3.64mg/kg、7.28mg/kg三组，羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物灌胃给药组IO.80mg/kg,阳性对照组静脉给予灯盏花素注射液3.64mg/kg。适应性词养两天后，于试验前一天用20。/。乌拉坦麻醉后背位固定，用针型电极与RM6240CD型多道生理信号釆集处理系统相连，记录动物正常标II导联心电图。各组动物连续给药三天，正常对照组静脉给予等容积的生理盐水，各组给药容积均为IOml/kg，在第3天和第4天给药后5分钟，分别腹腔注射异丙肾上腺素2mg/kg,记录第二次注射异丙肾上腺素后30秒、l分、2分、5分、IO分、20分各时间点的心电图，测量ST段偏移基线的高度，每个时间点测量5个连续波形取平均值。以总偏移值均值为衡量心肌缺血损伤程度的指标，实验结果用Excel统计处理，经t检验判断显著性。由实验结果可知，与模型对照组比较，中、高剂量的羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物(3.64mg/kg、7.28mg/kg)静脉注射能够显著降低异丙肾上腺素导致的心电图ST段偏移的亳伏数，结果见表3。表3异丙肾上腺素致心肌缺血大鼠心电图ST段偏移值<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>模型对照组与正常对照组比较，#P<0.05给药组与模型对照组比较，*p<0.0526.70###27.0531.9241.50*43.08*实施例9:5，6，4'-三羟乙基灯盏乙素水溶解度试验表45,6，4'-三羟乙基灯盏乙素和灯盏乙素水溶解度试验结果样品水溶解度(mg/L)*灯盏乙素87.95,6，4'-三羟乙基灯盏乙素32565.8*测试温度37°C试验结果表明5,6，4'-三羟乙基灯盏乙素水溶解度满足常规方法制成注射剂的要求。同样其他的羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物试验也有着类似的结果。权利要求1.新的灯盏乙素类化合物，其特征在于其结构通式如(I)所示，式中R4是H或烷基。全文摘要本发明属于医药
技术领域：
，涉及新的灯盏乙素类化合物及其应用，具体涉及治疗心脑血管系统疾病的新的灯盏乙素类化合物。本发明所述的羟乙(丙、丁)基灯盏乙素类化合物的通式为(I)，式中R₄是H或烷基，R₁、R₂、R₃是羟乙(丙、丁)基或H，其中在R₁、R₂、R₃中至少有一个是羟乙(丙、丁)基。该类化合物主要用于防治心脑血管疾病、老年痴呆症、脑梗塞、脑缺血及由脑缺血引起的其它各种疾病等。文档编号C07H17/00GK101220065SQ200810010208公开日2008年7月16日申请日期2008年1月24日优先权日2008年1月24日发明者华会明,李占林,皎白,兰苏,裴月湖申请人:沈阳药科大学