专利名称：腔肠素衍生物及其使用方法
技术领域：
本发明提供用于测定酶的存在和活性的化合物和方法。背景
酶的存在和活性可用于确定细胞的健康状况和代谢状态。酶还可以是特定细胞类型的标记物，因为某些酶的存在和活性通常是特定细胞的特征。例如，某些酶的活性通常可用于区分细菌、植物或动物来源的细胞或区分产生这种酶的组织的身份。糖苷酶(也称为糖苷水解酶)催化糖苷键水解以产生两种更小的糖。糖苷酶是十分常见的酶，其在自然界中的作用包括在抗细菌防御策略中(例如，溶菌酶)、在发病机理中(例如，病毒神经氨酸酶)和在正常细胞功能中(例如，参与N-连接糖蛋白生物合成的修剪甘露糖苷酶)使诸如 纤维素和半纤维素的生物质降解。在细菌和原核生物中，发现糖苷酶同时作为细胞内和细胞外酶，其主要参与营养获取。糖苷酶在细菌中的一种重要形式是半乳糖苷酶(LacZ)，其参与在大肠杆菌(疋co7i)中的操纵子的表达的调控。在高等生物中，糖苷酶被发现存在于内质网和高尔基体中，糖苷酶在这些位置参与N-连接糖蛋白的加工，并且在溶菌酶中作为参与碳水化合物结构的降解的酶。缺乏特殊溶酶体糖苷酶可导致许多的溶酶体贮积症，造成发育问题或死亡。糖苷酶在体内参与糖原的生物合成和降解。糖苷酶与糖基转移酶一起形成用于糖苷键合成和断裂的主要催化机器。黄递酶是一种普遍存在的黄素结合酶，其催化用作氢受体的各种化合物从二 -和三-磷基吡啶核苷酸(即，NADH、NADPH)的还原形式发生还原。细胞能量代谢是一个复杂的过程，其允许细胞通过一系列酶催化和化学反应来储存能量。细胞能量代谢的一个必需方面是细胞的还原-氧化态。活细胞的代谢状态以及酶活性和/或代谢物浓度的测定可以通过测定氧化还原定义辅助因子NAD (P) /NAD (P)H来确定。
发明概要在一个方面，本发明提供式(I)的化合物:
权利要求
1.一种式(II)的化合物:
2.一种式(I)的化合物:
3.一种式(III)的化合物:
4.一种式(IV)的化合物:
5.根据权利要求1、2和4中任一项所述的化合物， 其中R2为
6.根据权利要求5所述的化合物，其中 r2为
7.根据权利要求5所述的化合物，其中R2为C2_5直链烷基。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其中R8为、
9.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，其中R8是苄基。
10.根据权利要求1-9中任一项所述的化合物，其中V是S。
11.一种检测酶的存在或量的方法，其包括: 使预计含有所述酶的样品与根据权利要求ι- ο中任一项所述的化合物接触；和 检测所述样品的发光度。
12.根据权利要求11所述的方法，其中将所述发光度量化。
13.根据权利要求11所述的方法，其中预计所述样品含有第二种酶，包括 使所述样品与根据权利要求1-10中任一项所述的第二种化合物接触，其中所述第二种化合物含有所述第二种酶的底物；和检测所述样品的发光度。
14.一种在体内检测酶的存在的方法，其包括: 将根据权利要求ι- ο中任一项所述的化合物施用于转基因动物；和 检测发光度。
15.—种检测酶的存在的方法，其包括: 将根据权利要求ι- ο中任一项所述的化合物施用于动物； 从所述动物获得样品；和 检测所述样品的发光度。
16.一种化合物，其选自由以下组成的组:
全文摘要
本发明提供作为非发光酶的底物和发光酶的前底物的腔肠素衍生物。本发明还提供一种使用所述衍生物的方法。
文档编号C07D487/04GK103180324SQ201180052806
公开日2013年6月26日 申请日期2011年11月2日 优先权日2010年11月2日
发明者D.H.克劳伯特, P.梅森黑默, J.安奇, W.周 申请人:普罗美加公司