二环杂芳族化合物的制作方法
【专利摘要】式I化合物（其中X1、X2、X3、X4、X5、R1、R2、R3、R4、R5和R6具有在权利要求1中指出的含义）是激酶抑制剂，且除了别的用途以外，可以用于治疗肿瘤。
【专利说明】二环杂芳族化合物
[0001]发明背景
本发明的目的在于找到具有有价值性质的新化合物，特别是能用于制备药物的那些。
[0002]本发明涉及对激酶(特别是酪氨酸激酶)的信号转导的抑制、调节和/或调控起作用的化合物，进一步涉及包含这些化合物的药物组合物，并且涉及所述化合物用于治疗激酶诱导的疾病的用途。
[0003]具体地，本发明涉及抑制、调节和/或调控酪氨酸激酶的信号转导的化合物，涉及包含这些化合物的组合物，并且涉及使用其治疗哺乳动物中的酪氨酸激酶诱导的疾病和病症(诸如癌症、肿瘤生长、动脉硬化、由于年龄造成的黄斑变性、糖尿病视网膜病变、炎性疾病等)的方法。
[0004]酪氨酸激酶是一类催化蛋白质底物中的腺苷三磷酸的末端磷酸向酪氨酸残基转移的酶。有人认为，在许多细胞功能中酪氨酸激酶通过底物磷酸化在信号转导中发挥重要作用。尽管信号转导的准确机制仍不清楚，但是已经证实酪氨酸激酶是在细胞增殖、致癌作用和细胞分化中的重要因素。
[0005]可以将酪氨酸激酶分类为受体型酪氨酸激酶或细胞内酪氨酸激酶。受体型酪氨酸激酶具有细胞外部分、跨膜部分和细胞内部分，`而细胞内酪氨酸激酶仅为细胞内的。
[0006]细胞内酪氨酸激酶由多个亚族组成，包括Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/Fps、Fak、Jak、Ack和UMK。这些亚族中的每一个被进一步细分为不同受体。关于细胞内酪氨酸激酶的更详细讨论，参见Bolen的论文《^0职8:2025-2031 (1993)，其通过引用并入本文。
[0007]受体型酪氨酸激酶和细胞内酪氨酸激酶二者都涉入导致许多致病性病症(包括癌症、银屑病和超免疫应答)的细胞信号传递途径。
[0008]本发明涉及作为FAK (粘着斑激酶)抑制剂的化合物。
[0009]FAK (由PTK2基因编码)是非受体酪氨酸激酶，其整合来自整联蛋白和生长因子-受体的信号。已经报道FAK在调节细胞存活、生长、扩散、迁移和侵袭中发挥作用(McLean等人2005，Nat Rev Cancer 5:505-515)。此外，借助在多个酪氨酸残基上的憐酸化调节和激活FAK。已经记录了 FAK mRNA和/或蛋白质在许多人肿瘤中的过表达，包括乳腺癌、结肠癌、甲状腺癌和前列腺癌(Owens等人.1995, Cancer Research 55: 2752-2755;Agochiya 等人.1999，Oncogene 18: 5646-5653; Gabarro-Niecko 等人.2003，CancerMetastasis Rev.22:359-374)。更重要的是，有证据表明，与正常组织相比，磷酸化的FAK在恶性组织中增加(Grisaru-Granovsky 等人.2005，Int.J.Cancer 113: 372-378)。
[0010]已经证实，RNAi对FAK的抑制或显性-阴性FAK的表达会在人乳腺-和黑素瘤细胞系中诱导粘附力缺失和细胞死亡，并在卵巢癌细胞中增加多西他赛介导的细胞凋亡(Beviglia 等人 2003，Biochem J.373:201-210, Smith 等人 2005，Melanoma Res.15:357-362，Haider 等人 2005，Clin.Cancer Res.11:8829-8836)。但是，已证实正常人成纤维细胞或永生化哺乳动物细胞(MCF10A)中FAK的抑制不是粘附缺失或细胞凋亡的起因(Xu等人.1996 Cell Growth and Diff 7:413-418)。还已经证实,通过显性阴性表达抑制FAK会降低肿瘤生长，并消除同系大鼠模型中哺乳动物腺癌细胞的肺转移(vanNimwegen 等人 2005，Cancer Res.65:4698-4706)。同样，通过 shRNA 抑制 FAK 会抑制肺转移，并使同系小鼠模型中的致死率降低40% (Mitra等人2006，Oncogene 25: 4429-4440)。在该研究中，野生型的瞬态再表达(但并非无激酶活性的FAK)导致shRNA表型的重新突变。在小鼠-4T1-癌细胞中通过显性阴性表达抑制FAK会减少小鼠中的肿瘤生长和血管生成(Mitra 等人，2006, Oncogene 25:5969-5984)。
[0011]此外，FAK催化活性的缺失(FAK-/-细胞与无激酶活性的FAK的重构)会减少小鼠中的v-Src肿瘤的生长并减少血管生成。
[0012]因此，有确凿证据表明，FAK活性的抑制会诱导细胞凋亡、粘附力的缺失、细胞生长和转移的抑制，并且这样的抑制会减少血管生成。因此，抑制FAK活性的化合物可用于治疗癌症。
[0013]根据本发明的化合物也在丝氨酸/苏氨酸-激酶Η)Κ1、ΙΚΚε和TBKl的抑制中表现出某种作用。
[0014]PDKl使AGC蛋白激酶家族的亚组，包括PKB、SGK、S6K和PKC同种型磷酸化和活化。这些激酶参与ΡΙ3Κ信号转导途径，并且控制基本的细胞功能如存活、生长和分化。因此，PDKl是各种代谢、增殖和生命维持作用的重要调节剂。
[0015]IKK ε和TBKl是彼此高度同源的且与其它IkB激酶高度同源的丝氨酸/苏氨酸激酶。这2种激酶在先天性免疫系统中起整合作用。双链RNA-病毒被Toll-样受体3和4以及RNA-解旋酶RIG-1和MDA-5识别，并导致TRIF-TBK1/IKK ε -1RF3信号级联的激活，这导致I型干扰素应答。
[0016]在2007年，Boehm和同事将IKK ε描述为新的乳腺癌癌基因[J.S.Boehm等人，Cell 129，1065-1079, 2007]。研`究了 354种激酶与MAPK激酶Mek的激活形式一起重演Ras-转化表型的能力。在这里将IKK ε鉴别为协作致癌基因。另外，该作者能够证实，IKBKE在众多乳腺癌细胞系和肿瘤样品中存在扩增和过表达。借助于RNA干扰来减少乳腺癌细胞中的基因表达会诱导细胞凋亡和减少其增殖。Eddy和同事在2005年得到了类似的发现，该发现强调了 IKK ε在乳腺癌疾病中的重要性[S.F.Eddy等人，CancerRes.2005; 65(24)， 11375-11383]。
[0017]在2006年首次报道了 TBKl的促肿瘤发生效应。在包含251，000种cDNA的基因文库的筛选中，Korherr等人同样鉴别出3种基因TRIF、TBK1和IRF3，它们通常作为促血管生成因子涉入先天性免疫防御[C.Korherr等人，PNAS，103，4240-4245，2006]。
[0018]在2006 年，Chien 和同事[Y.Chien 等人，Cell 127，157-170，2006]公开称，使用致癌Ras仅可有条件地转化TBKl-/-细胞，这使人想到TBKl在Ras介导的转化中的涉入。此外，他们能够证实，RNAi介导的TBKl的击倒会触发MCF-7和Panc-1细胞的细胞凋亡。Barbie和同事最近公开称，TBKl在众多具有突变的K-Ras的癌细胞系中至关重要，这使人想到，TBKl干预可以在相应肿瘤中具有治疗重要性[D.A.Barbie等人，Nature Letters
1-5， 2009]ο
[0019]因此，特异性地抑制、调节和/或调控FAK信号转导的小化合物的鉴定是所希望的，并且是本发明的目标。
[0020]已经发现，式I化合物及其盐具有非常有价值的药理学性质，同时具有良好的耐受性。
[0021]此外，本发明涉及本发明的一种或多种化合物在治疗和/或预防疾病、优选本文描述的疾病中的用途，所述疾病由FAK引起、介导和/或传播。
[0022]通常将本文讨论的疾病分为两组:过度增生性和非过度增生性疾病。在这方面，将银屑病、关节炎、炎症、子宫内膜异位症、瘢痕形成、良性前列腺增生、免疫疾病、自身免疫疾病和免疫缺陷疾病视为非过度增生性疾病。在这方面，可将脑癌、肺癌、鳞状上皮细胞癌、膀胱癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、肾癌、结直肠癌、乳腺癌、头癌、颈癌、食道癌、妇科癌症、甲状腺癌、淋巴瘤、慢性白血病和急性白血病视作癌性疾病，它们都通常被视作过度增生性疾病。具体地，癌性细胞生长是本发明靶向的疾病。因此本发明的主题是在所述疾病的治疗和/或预防中作为药物和/或药物活性成分的本发明的化合物和本发明的化合物用于制备治疗和/或预防所述疾病的药物的用途，以及治疗所述疾病的方法，所述方法包括给需要这种给药的患者施用本发明的一种或多种化合物。
[0023]可以证明，根据本发明的化合物在活体内具有抗增生作用。给患有过度增生性疾病的患者施用根据本发明的化合物，例如用于抑制肿瘤生长，用于减轻伴随淋巴增生性疾病出现的炎症、用于抑制移植排斥或由组织修复造成的神经损伤等。本化合物适合用于预防或治疗目的。本文所用的术语“治疗”用于表示防止疾病和治疗已有疾病。通过在产生显性疾病之前施用根据本发明的化合物，实现防止增生，例如用于防止肿瘤生长、阻止转移性生长、减少伴随心血管外科手术出现的再狭窄等。或者使用所述化合物用于通过稳定或改善患者的临床症状来治疗持续性疾病。
[0024]宿主或患者可以属于任何哺乳动物物种，例如灵长类动物，特别是人类；啮齿动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔子；马、牛、狗、猫等。动物模型对实验研究有意义，其中它们为人类疾病的治疗提供模型。
[0025]通过体外测试，可以确定特定细胞对用根据本发明的化合物处理的易感性。通常将细胞培养物与根据本发明的化合物在不同的浓度下结合一段足够长的时间，常常在约I小时至I周之间，以使活性剂能诱导细胞死亡或抑制细胞迁移。可以使用从活组织检查样品培养得到的细胞用于体外试验。然后计数处理后残留的细胞。
[0026]剂量根据所用的具体化合物、具体疾病、患者状态等而改变。治疗剂量通常足以显著地减少靶组织中不希望的细胞群体，而同时维持患者的生存力。通常继续治疗直到细胞负荷已经产生显著的降低，例如降低至少约50%，并且可以继续治疗直到在体内基本上不再检测到不希望的细胞。
[0027]为了鉴别激酶抑制剂，可利用各种测定系统。在亲近闪烁分析法(Sorg等人，J.0f Biomolecular Screening, 2002, 7, 11-19)和闪板测定法中，使用 YATP 测定了作为底物的蛋白质或肽的放射性磷酸化。在抑制性化合物的存在下，不可检测到放射性信号或可检测到放射性信号减少。此外，可利用均匀时间分辨荧光共振能量转移(HTR-FRET)和突光偏振(FP)技术作为测定方法(Sills等人，J.0f Biomolecular Screening, 2002,191-214)。
[0028]其它非放射性ELISA测定方法使用特异性磷酸-抗体(磷酸_AB)。磷酸-AB仅结合磷酸化的底物。可以使用第二过氧化物酶结合的抗绵羊抗体通过化学发光来检测这种结合(Ross 等人，2002，Biochem.J., 366: 977 - 981)。[0029]存在很多伴随细胞增殖和细胞死亡(细胞凋亡)的失调而出现的疾病。感兴趣的病症包括但不限于下述的那些。根据本发明的化合物可用于治疗一系列不同的病症，其中平滑肌细胞和/或炎症细胞增殖和/或迁移进入血管内膜层中，导致该血管的血流受限，例如在新生内膜闭塞性病变的情况下。感兴趣的闭塞性移植物血管疾病包括动脉粥样硬化、移植后冠状血管疾病、静脉移植狭窄、吻合口周围假体再狭窄(per1-anastomotischeProsthesenrestenose)、血管成形术或支架置入后再狭窄等。
【背景技术】
[0030]在WO 2003/035065 中和 WO 2006/114180 中描述了其它二环杂环。
[0031]在WO 2009/105498和WO 2008/115369中将吡啶衍生物描述为FAK抑制剂。
[0032]在WO 2004/056807和WO 2010/055117中描述了用于防治癌症的其它嘧啶衍生物。
【发明内容】
[0033]本发明涉及式I化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物
【权利要求】
1.式I化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物
2.根据权利要求1所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物，其中 Ar表示被(CH2)nOA和/或Het3单-或二-取代的苯基。
3.根据权利要求1或2所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物，其中 Het表示被A或=0单取代的吡唑基或二氢吲哚基。
4.根据权利要求1-3中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物 其中 Het1表示被A、OH、NR7SO2A和/或=0单-、二 -或三-取代的吡啶基、吡唑基或二氢吲噪基。
5.根据权利要求1-6中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物 其中
Ar1 表示被 Hal、(CH2) nCN、NH2、NHA, NA2、(CH2) nC0NR7 和 / 或 NR7SO2A 单-或二 -取代的苯基。
6.根据权利要求1-5中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物 其中 Het2表示被A、NR7S02A、Het3和/或=0单-或二 -取代的下述基团:吡啶基、噁二唑基、二氢吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、6，7-二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶基、吲哚啉基或吡唑基。
7.根据权利要求1-6中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物 其中 Ar2表示被以下取代基单_、二 _、三_、四-或五-取代的苯基:Hal、A、(CH2)nOH, (CH2)n0A、COOA, NH2、NHA、NA2, (CH2)nCONH2, (CH2)nCONHA, (CH2)nCONA2, CONHHet3, COHet3, Het3 和 /或 NHCOHet3， 或茚满基，其可以被=0取代。
8.根据权利要求1-7中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物 其中 Het3表示未被取代的或者被A、(CH2)nN(R7)JP /或=0单-或二-取代的下述基团:哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基。
9.根据权利要求1-8中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物 其中 X1表示C或N, X2表示C或N, X3表示C或N,X4表示C或N, X5表示C或N， R1在X1 = N时不存在 或者
表示 NH (CH2) nHet 或 NH (CH2) nAr, R2在X2 = N时不存在 或者 表示H或Het1, R3在X3 = N时不存在， 或者 表示 H、CN、A、Hal、Cyc、OH 或 0A, R4在X4 = N时不存在 或者
表示 H、NH (CH2) Jet1、O (CH2) nHet\NH (CH2) nArJ、- = -Ar1、(CH2) nArJ 或 NH-Cyc， R5在X5 = N时不存在 或者 表示H或Hal,
R6 表示 H、Ar2、A、Het2, COHet3, CONH2, CONHA, CONA2 或 Cyc, R7表示H或具有1、2、3或4个C原子的烷基， Het表示吡唑基或二氢吲哚基，它们中的每一个被A或=0单取代， Ar表示被(CH2)nOA和/或Het3单-或二-取代的苯基， Het1表示吡啶基、吡唑基或二氢吲哚基，它们中的每一个被A、OH、NR7SO2A和/或=0单-、二-或三-取代，
Ar1 表示被 Hal、(CH2) nCN、NH2、NHA, NA2、(CH2) nC0NR7 和 / 或 NR7SO2A 单-或二 -取代的苯基， Het2表示吡啶基、噁二唑基、二氢吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、6，7- 二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶基、吲哚啉基或吡唑基，它们中的每一个被A、NR7SO2A, Het3和/或=0单-或二-取代， Ar2表示被以下取代基单_、二 _、三_、四-或五-取代的苯基:Hal、A、(CH2)nOH, (CH2)n0A、COOA, NH2、NHA、NA2, (CH2)nCONH2, (CH2)nCONHA, (CH2)nCONA2, CONHHet3, COHet3, Het3 和 /或 NHCOHet3， 或茚满基，其可以被=0取代， Het3表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基，它们中的每一个是未被取代的，或者被A、(CH2) nN (R7) 2 和 / 或=0 单-或二-取代， A表示具有1-10个C原子的直链或支链烷基，其中1-7个H原子可以被F替代，和/或其中I个或2个不相邻的CH-和/或CH2-基团可以被O、NH和/或NA’替代， A’表示具有1-6个C原子的直链或支链烷基， Cyc表示具有3、4、5、6或7个C原子的环状烷基，其是未被取代的或者被CON(R7)2或NR7SO2A单取代，Hal 表示 F、CUr 或 I， n表示0、1或2, 前提条件是， a)X\X2、X3和X4中的至少I个表示N，且最多2个同时表示N， b)如果X1= N,那么X4关N且R4关H， c)如果X4= N， 那么X1 ? N。
10.根据权利要求1-9中的一项或多项所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物其中 X1表示N， X2表不C， X3表不C， X4表示C， X5表示C， R1不存在 R2表示H或Het1,
R3 表示 H、CN、A、Hal、Cyc、OH 或 0A,
R4 表示 H、NH (CH2) Jet1、O (CH2) nHet\NH (CH2) nArJ、- = -Ar1、(CH2) nArJ 或 NH-Cyc， R5表示H或Hal,
R6 表示 H、Ar2、A、Het2, COHet3, CONH2, CONHA, CONA2 或 Cyc， R7表示H或具有1、2、3或4个C原子的烷基， Het表示吡唑基或二氢吲哚基，它们中的每一个被A或=0单取代， Ar表示被(CH2)nOA和/或Het3单-或二-取代的苯基， Het1表示吡啶基、吡唑基或二氢吲哚基，它们中的每一个被A、OH、NR7SO2A和/或=0单-、二-或三-取代，
Ar1 表示被 Hal、(CH2) nCN、NH2、NHA、NA2、(CH2) nC0NR7 和 / 或 NR7SO2A 单-或二 -取代的苯基， Het2表示吡啶基、噁二唑基、二氢吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、噁唑基、异噁唑基、6，7- 二氢-5H-环戊二烯并[b]吡啶基、吲哚啉基或吡唑基，它们中的每一个被A、NR7SO2A, Het3和/或=0单-或二-取代， Ar2表示被以下取代基单_、二 _、三_、四-或五-取代的苯基:Hal、A、(CH2)nOH, (CH2)n0A、COOA, NH2、NHA、NA2, (CH2)nCONH2, (CH2)nCONHA, (CH2)nCONA2, CONHHet3, COHet3, Het3 和 /或 NHCOHet3， 或茚满基，其可以被=0取代， Het3表示哌啶基、吡咯烷基、吗啉基或哌嗪基，它们中的每一个是未被取代的，或者被A、(CH2) nN (R7) 2 和 / 或=0 单-或二-取代， A表示具有1-10个C原子的直链或支链烷基，其中1-7个H原子可以被F替代，和/或其中I个或2个不相邻的CH-和/或CH2-基团可以被O、NH和/或NA’替代， A’表示具有1-6个C原子的直链或支链烷基，Cyc表示具有3、4、5、6或7个C原子的环状烷基，其是未被取代的或者被CON(R7)2或NR7SO2A单取代， Hal 表示 F、CUr 或 1， η表示O、1或2。
11.选自以下的根据权利要求1所述的化合物及其可药用盐、互变异构体和立体异构体，包括它们的所有比例的混合物:
12.用于制备时I化合物及其可药用盐，互变异构体和立体异构体的方法、在所述I化合物中 X1表示N，
X2、X3、X4、X5 表示 C， Hal 表示 Cl、Br 或 I, L表不甲娃烷基保护基， 且 R\R2>R3>R5具有在权利要求1中指出的含义， 与式IIIa或IIIb的化合物反应 H2N(CH2)nHet1 IIIaH2N(CH2)nAr1 IIIb, 其中Het^Ar1和η具有在权利要求1中指出的含义， 和/或 将式I的碱或酸转化成它的盐之一。
13.药物，其包含至少一种式I化合物和/或其可药用的盐、互变异构体和立体异构体、包括它们的所有比例的混合物，以及包含任选的赋形剂和/或佐剂。
14.式I化合物及其可药用的盐、互变异构体和立体异构体、包括它们的所有比例的混合物，其用于治疗以下病症:肿瘤、癌症、肿瘤形成、-生长和-扩散、动脉硬化、眼疾病诸如年龄引起的黄斑变性、脉络膜新生血管化和糖尿病视网膜病变、炎性疾病、关节炎、血栓形成、纤维化、肾小球肾炎、神经变性、银屑病、再狭窄、伤□愈合、移植排斥、代谢病和免疫系统疾病、自身免疫疾病、肝硬化、糖尿病和血管疾病。
【文档编号】C07D471/04GK103748095SQ201280040780
【公开日】2014年4月23日 申请日期:2012年7月26日 优先权日:2011年8月23日
【发明者】T.海因里希, F.罗迪希, C.埃斯达尔, M.克里尔, H.格赖纳 申请人:默克专利股份公司