专利名称：：转移抑制剂的制作方法
技术领域：
：本发明涉及副作用减小的转移抑制剂。癌症的手术治疗中遇到的最大困难之一是手术后复发。在许多情况下，转移是复发的主要诱因。转移包括一系列复杂的反应，包括从原发性病灶分离癌细胞，然后浸润到周围组织中，并且在身体的远距离部位增殖，从而形成继发性、转移病灶。即使从原发性病灶分离出来后，癌细胞受附近存在的细胞外基质阻碍不能进一步扩散，这些细胞外基质含有糖蛋白，如各种胶原蛋白，纤连蛋白和昆布多糖(laminins)、蛋白聚糖等。另一方面，癌细胞分裂并降解细胞外基质结构并迁移，同时充分利用它们自身或间质细胞分泌的各种蛋白酶和糖苷酶。按这种方式从原发性病灶分离出来的癌细胞侵入维管结构，然后迁移到远处器官，浸润到血管内皮的基底膜中，最后在远处组织中定位增殖。因此，转移的抑制在癌症治疗中起着重要作用。为这一目的，已经开发了多种转移抑制剂，如血小板聚集抑制剂、基质金属蛋白酶抑制剂以及粘着因子抑制剂。但是，这并没有为抑制转移提供任何有效的方法。本发明的目的在于提供转移抑制剂，其含有作为活性成分的化合物，该化合物没有任何副作用，并且表现出安全性增高和高效的转移抑制活性，而不象通常已知的化疗药物那样。本发明人从提高安全性的安全角度出发，注意到食用植物中含有的天然存在的化合物显示出的生理活性，并且在寻找一种即使是在口服给药后也诱发对转移的抑制活性的化合物时，进行了广泛的调查研究。结果发现了以下列化学式存在的熊果酸，其广泛分布于各种植物中，如苹果、柿子和梨，其能够通过口服或静脉给药方法抑制转移，我们根据这一发现进行了进一步的累积研究，结果完成了本发明本发明涉及转移抑制剂，其含有熊果酸或其盐作为活性成份。熊果酸可以是游离酸或药学上可接受的盐如钠和钾盐的形式。熊果酸或其盐可以给予成年病人的每日剂量范围是10mg至3,000mg，优选约500mg，口服，或胃肠外给药，例如，注射给药，如果需要的话。熊果酸或其盐可以直接按原样给予患者或者加工成适宜的剂型给药。这样的剂型的具体例子包括内服的药物制剂，如一般的粉末、颗粒、片剂、胶囊和液体(包括糖浆)，可以按照常用的方法将熊果酸与常用的添加剂结合在一起制备这些药物制剂。在内服的药物制剂情况下，通常已知的药物制剂的成分或组分可用作这样的添加剂，如赋形剂(如淀粉和乳糖)、粘合剂(如纤维素和聚乙烯吡咯烷酮)、崩解剂(如羧甲基纤维素)、润滑剂(如硬脂酸镁)、包衣剂(如羟乙基纤维素)、调味剂、着色剂、防腐剂和水乳化剂。熊果酸属于一种三萜烯，如上面给出的化学式所示，并且其毒性显著降低，可以安全地给予患者，可以用事实证明其在体外对培养细胞的增殖不起任何副作用，并且其广泛用作药物或食用乳化剂。根据本发明的熊果酸表现出令人满意的转移抑制活性，从下面所述的测试实施例可见这一点，并且其可用作针对各种癌症，如恶性黑素瘤、子宫肌瘤、食管癌、皮肤癌、胃癌、肺癌、小肠和大肠癌、胰腺癌、乳腺癌和膀胱癌，以及恶性肿瘤，如绒毛膜癌、脑瘤、淋巴肉瘤和白血病的转移抑制剂。本发明提供了毒性很低、可以口服或注射给予患者的转移抑制剂，即一种副作用得以降低的新型药物，从而为癌症的医学治疗和药学工业做出了很大贡献。下列实施例详细地说明了本发明。测试实施例1熊果酸对培养细胞增殖的影响(a)测试方法将人正常成纤维细胞和B16F10恶性黑素瘤悬浮液(5×104细胞)培养2天，然后分别在0.1μM和1μM熊果酸的存在下以及无熊果酸的存在下培养24小时。收集细胞，并记下他们的数目来确定熊果酸对细胞增殖的影响。(b)测试结果测试结果示于表1，其表明浓度为1μM和0.1μM的熊果酸对黑素瘤细胞的增殖没有任何影响。表1熊果酸对培养细胞的影响</tables>注增殖率(％)以用熊果酸处理过的增殖细胞的数目对没用熊果酸处理过的增殖细胞数目的比值表示。实施例1按照下列配方制备转移抑制药物制剂内服制剂熊果酸300mg羧甲基纤维素钠50mg纯水加至总量为10ml可注射的溶液熊果酸250mg芝麻油加至总量为5ml实施例2抑制恶性黑素瘤转移的小鼠试验(a)测试方法每组含有10只动物的几组小鼠静脉给予B16F10恶性黑素瘤细胞的悬浮液。注射黑素瘤细胞后7至13天期间，每天向小鼠口服给予含熊果酸的口服制剂一次，同时每天向动物腹膜内给予可注射的溶液一次，在第14天切除肺以检查各组中已定位于肺的转移病灶的数目。用下列化学式所表示的齐墩果醇酸进行同样的试验，并墩果醇酸在不同的位置上含有熊果酸的29-位甲基基团，其也和熊果酸一样属于五环三萜烯。(b)测试结果上面的试验结果列于表2中，其表明腹膜内和口服给药后，同不给予熊果酸治疗的对照组相比较，熊果酸显著降低了黑素瘤细胞在肺中的转移。另一方面，即使所给剂量为300mg/kg，齐墩果醇酸仍没有表现出显著的转移抑制作用。表2熊果酸抑制转移的结果注显著性试验*，p＜0.10，针对对照组**，p＜0.05，针对对照组权利要求1.一种转移抑制剂，其含有熊果酸或其盐作为活性成分。2.如权利要求1所要求的转移抑制剂，其适于口服给药或注射来使用。3.如权利要求2所要求的转移抑制剂，对于成人患者其每日剂量的范围是10mg至3,000mg。全文摘要本发明提供了一种新的毒性程序较低的转移抑制剂，其含有熊果酸或其盐作为活性成分，其可以口服或通过注射来向患者给药，从而使患者能接受手术后不卧床治疗。文档编号C07J63/00GK1157716SQ96114489公开日1997年8月27日申请日期1996年11月15日优先权日1995年11月16日发明者石川弘伦,渡边朋子,西室悟司,广田满申请人:日本化学研究股份有限公司