1.鉴定橡胶树棒孢霉落叶病病原菌Corynespora cassicola的CAS5亚型毒素菌株专用引物,是由序列1和序列2组成的引物对。
2.一对引物在鉴定橡胶树棒孢霉落叶病病原菌Corynespora cassicola的CAS5亚型毒素菌株中的应用,它们是由序列1和序列2组成的引物对。
3.鉴定橡胶树棒孢霉落叶病病原菌Corynespora cassicola的CAS5亚型毒素菌株的方法,包括下述步骤:
待测样品DNA为模板,用权利要求1所述的引物进行PCR扩增;
鉴定步骤1)所述的PCR扩增产物的大小,将扩增产物中含有一个350bp的DNA特异性扩增片段的待测样品鉴定为含有CAS5亚型Corynespora cassiicola的菌株。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应体系为25μL,包括:待测样品DNA,上游正向引物和下游反向引物的浓度均为0.4μmoll-1,dNTP 0.2μmoll-1,2.5μL含15mM MgCL2的10×PCR缓冲液;Taq DNA聚合酶添加终浓度为0.05U/μL,加双蒸水补足到25μL。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,PCR反应程序为:95℃预变性3min;94℃变性30s,52℃退火30s,72℃延伸45s,30个循环;72℃延伸5min。