一种基因工程菌及其在制备莱鲍迪甙A中的应用的制作方法

文档序号:12816868阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明公开了一种基因工程菌及其在制备莱鲍迪甙A中的应用,首先构建得到产甜叶菊糖基转移酶UGT76G1和UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶UGPase的基因工程菌,它是在组成型表达甜叶菊糖基转移酶UGT的重组菌基础上,过表达UDP‑葡萄糖焦磷酸化酶UGPase,增加糖基化反应的糖基供体量。然后建立全细胞催化反应体系,将甜菊甙转化为莱鲍迪甙A。菌用量浓度为1~10g/L;葡萄糖用量20~120g/L;底物甜菊糖甙的用量为1~20g/L,催化反应过程中,对细胞催化剂进行表面活性剂处理,增加了细胞通透性,大幅提高了莱鲍迪甙A的产量。本发明利用胞内UDPG的合成途径,提高胞内UDPG糖基共体量,避免其额外添加、实现再生循环,酵母的培养和重组酶的表达同时进行,缩短了重组菌培养及重组酶表达的周期。

技术研发人员:李艳;李阳阳;周伯雅;严明;陈可泉;郝宁;张竹山;于青海;陈剑波
受保护的技术使用者:南京工业大学;兴化格林生物制品有限公司
技术研发日:2017.03.03
技术公布日:2017.07.07
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