一种新型DPP‑4酶抑制剂及其制备和应用的制作方法

本发明涉及医药领域，具体地，本发明涉及两类新颖的dpp-4抑制剂吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮和吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物，及其制备方法和应用。

背景技术：

糖尿病是一种长期慢性疾病，影响了全球超过3亿人口的健康。世界卫生组织(who)预测，至2030年，糖尿病将会成为世界第7大致死疾病。

人体内存在一种能调节血糖的多肽，称为胰高血糖样多肽-1(glucagon-likepeptide1，glp-1)，glp-1能刺激胰岛素的分泌，从而起到使血糖水平回归正常的作用。人体口服摄取的葡萄糖有50％-70％通过glp-1/胰岛素通路代谢。因此，glp-1是一种重要的降糖多肽。但是glp-1在体内的半衰期极其短暂，大约只有2min。原因是人体内有一种二肽肽酶4(dipeptidylpeptidase4，dpp-4)能迅速降解glp-1，使之失活。因此，通过抑制dpp-4酶的活性，能提高体内glp-1浓度，延长其半衰期，从而起到降血糖的目的。

目前已有一些已上市的dpp-4抑制剂，但有很多副作用，如血糖控制不稳，发生低血糖，甚至有心血管疾病和长期肾病的风险，因此需要利用新机制，研发新型的dpp-4抑制剂，以提高效能和安全性。

技术实现要素：

本发明的一个目的是提供式a化合物、其药学上可接受的盐、制备方法及其用途。

本发明的另一个目的是提供式b化合物、其药学上可接受的盐、制备方法及其用途。

本发明的第一方面，提供一种式a化合物，或其药学上可接受的盐，

其中：

r1选自下组：h、卤素、c2h5onh-、-c2h4onh2、c3h7onh-、-c3h6onh2、-nhc2h4nh2、-nhc3h6nh2、取代或未取代的胺基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的c3-c6环烷基、取代或未取代的5-7元杂环基；其中，所述的杂环基指环的骨架上具有1-3个选自下组的杂原子：n、o或s；

所述的r2为位于苯环结构单元上的一个或多个选自下组的取代基：h、卤素、-cn、取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的c1-c6的烷氧基、-oc6h5、取代或未取代的c2-c6的酰基、-cooh、-no2、-coo-取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的苯基；

且所述的取代指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、胺基、c1-c4烷基(优选c1-c2烷基)、苯基。

在另一优选例中，所述的杂环基为饱和杂环基、部分不饱和杂环基或全部不饱和杂环基。

在另一优选例中，所述的杂环基具有至少一个n原子。

在另一优选例中，所述的r1选自下组：h、卤素、胺基哌啶、哌啶、哌嗪、吗啉、胺基、甲胺基、乙胺基、丙胺基、异丙胺基、-nhc2h4nh2、-nhc3h6nh2、c2h5onh-、-c2h4onh2、c3h7onh-、-c3h6onh2；和/或

所述的r2选自下组：h、卤素、-cn、-ch3、-cf3、-ch2ch3、-ch(ch3)2、-och3、-och2ch3、-och(ch3)2、-oc6h5、-och2c6h5、-och2ch2c6h5、-och2ch2ch2c6h5、-no2、-cooet、-cooh、取代或未取代的苯基。

在另一优选例中，所述式a化合物选自下表：

其中，a1为a2为

本发明的第二方面，提供一种式b化合物，或其药学上可接受的盐，

其中，

x为0或1；

r选自下组：nh、o、s、n(取代或未取代的c1-c4烷基)、取代或未取代的c1-c4亚烷基；

为选自下组的环：苯环、5-7元杂环；其中，所述的杂环指环的骨架上具有1-3个选自下组的杂原子：n、o或s；

r3为选自下组的一个或多个位于环上的取代基：h、卤素、-cn、取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的c1-c6的烷氧基、-oc6h5、取代或未取代的c2-c6的酰基、-oh、-cooh、-no2、-coo-取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的胺基；

r4选自下组：h、卤素、c2h5onh-、-c2h4onh2、c3h7onh-、-c3h6onh2、-nhc2h4nh2、-nhc3h6nh2、取代或未取代的胺基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的c3-c6环烷基、取代或未取代的5-7元杂环基；其中，所述的杂环基指环的骨架上具有1-3个选自下组的杂原子：n、o或s；

且所述的取代指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、胺基、c1-c4烷基(优选c1-c2烷基)、苯基。

在另一优选例中，所述的杂环或杂环基包括饱和环，全部不饱和环(即芳环)或部分不饱和环。

在另一优选例中，所述的r选自下组：nh、n(取代或未取代的c1-c4烷基)、取代或未取代的c1-c4亚烷基；和/或

所述的r4选自下组：h、卤素、胺基哌啶、哌啶、哌嗪、吗啉、胺基、甲胺基、乙胺基、丙胺基、异丙胺基、-nhc2h4nh2、-nhc3h6nh2、c2h5onh-、-c2h4onh2、c3h7onh-、-c3h6onh2。

在另一优选例中，所述式b化合物选自下表：

其中，a1为a2为a3为

在另一优选例中，所述的化合物中，r1、r2、r3、r4、r和中任一个分别为本申请实施例所述具体化合物中所对应的基团。

本发明的第三方面，提供一种如本发明的第一方面所述的式a化合物的制备方法，所述的方法包括以下步骤：

(a)在惰性溶剂中，用式i-a化合物与式i-b化合物反应，得到式i'化合物；

和任选的步骤：用式i'化合物制备得到式a化合物；

其中，x为卤素；

r1'选自下组：h、卤素、c2h5onh-、-c2h4onh2、c3h7onh-、-c3h6onh2、-nhc2h4nh2、-nhc3h6nh2、取代或未取代的胺基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的c3-c6环烷基、取代或未取代的5-7元杂环基；其中，所述的杂环基指环的骨架上具有1-3个选自下组的杂原子：n、o或s；

r2'为位于苯环结构单元上的一个或多个选自下组的取代基：h、卤素、-cn、取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的c1-c6的烷氧基、-oc6h5、取代或未取代的c2-c6的酰基、-cooh、-no2、-coo-取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的苯基；

且所述的r1与r1'是相同或不同的；

且所述的r2与r2'是相同或不同的；

且所述的取代指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、胺基、c1-c4烷基(优选c1-c2烷基)、苯基。

在另一优选例中，所述步骤(a)中，惰性溶剂为dmf。

在另一优选例中，所述步骤(a)在碱性条件下进行，所述碱选自下组：碳酸钾，碳酸铯或n，n-二异丙基乙胺、或其组合。

在另一优选例中，所述步骤(a)在加热条件下进行，较佳地，反应温度为90-120℃。

在另一优选例中，所述方法还包括步骤(a1)：

在惰性溶剂中，用式i-c化合物进行反应，得到式i-a化合物。

在另一优选例中，所述步骤(a1)在碱性条件下进行，较佳地，所述碱性条件为1n氢氧化钠水溶液。

在另一优选例中，所述步骤(a1)在加热条件下进行，较佳地，所述加热条件为90℃。

在另一优选例中，所述的方法还包括步骤(a2)：

在惰性溶剂中，用式1化合物进行反应，得到式i-c化合物。

本发明的第四方面，提供一种如本发明的第二方面所述的式b化合物的制备方法，所述的方法包括以下步骤：

(b)在惰性溶剂中，用式i-d化合物与式i-e化合物反应，得到式i"化合物；

和任选的步骤：用式i"化合物制备得到式b化合物；

其中，x为0或1；x为h；

r'选自下组：nh、o、s、n(取代或未取代的c1-c4烷基)、取代或未取代的c1-c4亚烷基；

为选自下组的环：苯环、5-7元杂环；其中，所述的杂环指环的骨架上具有1-3个选自下组的杂原子：n、o或s；

r3'为选自下组的一个或多个位于环上的取代基：h、卤素、-cn、取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的c1-c6的烷氧基、-oc6h5、取代或未取代的c2-c6的酰基、-oh、-cooh、-no2、-coo-取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的胺基；

r4'选自下组：h、卤素、c2h5onh-、-c2h4onh2、c3h7onh-、-c3h6onh2、-nhc2h4nh2、-nhc3h6nh2、取代或未取代的胺基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的c3-c6环烷基、取代或未取代的5-7元杂环基；其中，所述的杂环基指环的骨架上具有1-3个选自下组的杂原子：n、o或s；

且所述的r与r'是相同或不同的；

且所述的r3与r3'是相同或不同的；

且所述的r4与r4'是相同或不同的；

且所述的取代指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、胺基、c1-c4烷基(优选c1-c2烷基)、苯基。

在另一优选例中，所述惰性溶剂为二氯甲烷。

在另一优选例中，所述步骤(b)在碱性条件下进行，所述碱为有机碱，较佳地，所述碱为三乙胺。

本发明的第五方面，提供一种药物组合物，包括：(i)本发明的第一方面所述的式a化合物或其药学上可接受的盐、本发明的第二方面所述的式b化合物或其药学上可接受的盐；(ii)药学上可接受的载体。

本发明的第六方面，提供一种本发明的第一方面所述的式a化合物或其药学上可接受的盐、本发明的第二方面所述的式b化合物或其药学上可接受的盐的用途，用作：

1)制备dpp-4酶抑制剂。

2)制备与dpp-4酶的活性或表达量相关的疾病的药物组合物。

在另一优选例中，所述的与dpp-4酶的活性或表达量相关的疾病为糖尿病。

本发明的第七方面，提供一种dpp-4抑制剂，所述的dpp-4抑制剂包括：如本发明的第一方面所述的式a化合物或其药学上可接受的盐、本发明的第二方面所述的式b化合物或其药学上可接受的盐；和任选的药学上可接受的载体。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

具体实施方式

本发明人经过长期而深入的研究发现，通过分析酶dpp-4的结构特征及其与小分子化合物作用模式，首次意外研发出结构新颖的吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮和吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物，并进行体外dpp-4酶抑制活性测试，分析其构效关系。所述化合物可用作dpp-4抑制剂，用于抗糖尿病作用。基于上述发现，发明人完成了本申请。

术语

在本发明中，除非特别说明，术语“取代”指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、胺基、c1-c4烷基(优选c1-c2烷基)、苯基。

术语“c1-c6的烷基”指具有1至6个碳原子的直链或支链烷基，非限制性地包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和已基、或类似基团；优选乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。术语“c1-c4烷基”和“c1-c2烷基”具有类似的含义。

术语“c3-c6环烷基”指在环上具有3至6个碳原子的环状烷基，非限制性地包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、或类似基团。

术语“c1-c6的烷氧基”指具有1至6个碳原子的直链或支链烷氧基，非限制性地包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基和丁氧基、或类似基团。

术语“c2-c6的酰基”指具有“-co-(c1-c5烷基)”结构的基团，非限制性地包括甲基酰基、乙基酰基、丙基酰基、异丙基酰基、丁基酰基、异丁基酰基、仲丁基酰基、叔丁基酰基、或类似基团。

术语“5-7元杂环基”是指在环上含有1至3个选自n、o和s中的杂原子的饱和、部分不饱和或完全不饱和(芳环)的5-7元环基，如哌啶、哌嗪、吗啉、或类似基团。

术语“卤素”指f、cl、br和i。

在本发明中，除非特别指出，所用术语具有本领域技术人员公知的一般含义。

吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮衍生物

本发明提供了一种具有如式a所示结构的吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮衍生物，或其药学上可接受的盐，

其中，r1和r2定义同前。

本发明的式a化合物优选为如下具体化合物：

吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物

本发明提供了一种具有如式b所示结构的吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物，或其药学上可接受的盐，

其中，r3、r4、r和定义同前。

本发明的式b化合物优选为如下具体化合物：

本发明提供了式a化合物或式b化合物的药学上可接受的盐，具体地为式a化合物或式b化合物与无机酸或有机酸反应形成常规的药学上可接受的盐。例如，常规的药学上可接受的盐可通过式a化合物或式b化合物与无机酸或有机酸反应制得，所述无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、胺基磺酸和磷酸等，以及所述有机酸包括柠檬酸、酒石酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、萘磺酸、乙磺酸、萘二磺酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、富马酸、琥珀酸、丙酸、草酸、三氟乙酸、硬酯酸、扑酸、羟基马来酸、苯乙酸、苯甲酸、水杨酸、谷氨酸、抗坏血酸、对胺基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸和羟乙磺酸等。或者式a化合物或式b化合物与无机碱形成的钠盐、钾盐、钙盐、铝盐或铵盐等；或者式a化合物或式b化合物与有机碱形成的甲胺盐、乙胺盐或乙醇胺盐等。

式a化合物的制备方法

本发明提供了式a化合物制备方法，包括以下步骤：

其中，x为卤素；

r为位于苯环结构单元上的一个或多个选自下组的取代基：h、卤素、-cn、取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的c1-c6的烷氧基、-oc6h5、取代或未取代的c2-c6的酰基、-cooh、-no2、-coo-取代或未取代的c1-c6的烷基、取代或未取代的苯基；且所述的取代指基团上的一个或多个氢原子被选自下组的取代基取代：卤素、胺基、c1-c4烷基(优选c1-c2烷基)、苯基。

反应条件如下：

i)在惰性溶剂中，3-氨基吡唑与丙二酸二乙酯反应得到二酮1。

在另一优选例中，所述惰性溶剂为醇类，较佳地，所述惰性溶剂为乙醇。

在另一优选例中，所述反应在回流温度下进行。

ii)中间体二酮1在三氯氧磷作用下生成二卤代物2。

iii)在惰性溶剂中，二卤代物2反应成中间体3。

在另一优选例中，所述反应在碱性条件下进行，较佳地，所述碱性条件为1n氢氧化钠水溶液。

在另一优选例中，所述反应在加热条件下进行，较佳地，所述加热条件为90℃。

iv)中间体3与不同的卤苄化合物在惰性溶剂中在碱作用下反应成中间体4。

在另一优选例中，所述碱为碳酸钾，碳酸铯或n，n-二异丙基乙胺中的一个。

在另一优选例中，所述反应在加热条件下进行，较佳地，反应温度为90-120℃。

v)中间体4与不同环状仲胺类在惰性溶剂中在碱作用下反应分别得到化合物5和中间体8。

在另一优选例中，所述惰性溶剂为n，n-二甲基甲酰胺。

在另一优选例中，所述碱为有机碱，较佳地，所述碱为n，n-二异丙基乙胺。

在另一优选例中，所述反应在加热条件下进行，较佳地，反应温度为90-120℃。

vi)在酸性条件下，中间体8反应成化合物9.

在另一优选例中，所述酸性条件为1n盐酸溶液或者三氟乙酸与二氯甲烷以1：10v/v比例配成溶液。

式b化合物的制备方法

本发明提供了式b化合物的制备方法，包括以下步骤：

其中各基团定义同上。

反应条件如下：

i)中间体2与各种胺类在惰性溶剂中在碱的作用下进行反应得到中间体9。

在另一优选例中，所述惰性溶剂为二氯甲烷。

在另一优选例中，所述碱为有机碱，较佳地，所述碱为三乙胺。

ii)反应条件与上述制备式a化合物中反应条件v相似。

dpp-4抑制剂

如本文所用，术语“dpp-4抑制剂”指能够用于抑制二肽肽酶4的化合物。

药物组合物及其用途

本发明还提供了一种药物组合物，它包含安全有效量范围内的活性成分，以及药学上可接受的载体。

本发明所述的“活性成分”是指本发明所述的式a化合物或其药学上可接受的盐、式b化合物或其药学上可接受的盐。

本发明所述的“活性成分”和药物组合物可用作dpp-4酶抑制剂。

“安全有效量”指的是：活性成分的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg活性成分/剂，更佳地，含有10-200mg活性成分/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个药片。

“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。

“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分以及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。

药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。

在另一优选例中，本发明式a化合物或式b化合物可与大分子化合物或高分子通过非键合作用形成复合物。在另一优选例中，本发明式a化合物或式b化合物作为小分子还可通过化学键与大分子化合物或高分子相连接。所述大分子化合物可以是生物大分子如高聚糖、蛋白、核酸、多肽等。

本发明的活性成分或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)等。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。

在这些固体剂型中，活性成分与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：

(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；

(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；

(c)保湿剂，例如，甘油；

(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；

(e)缓溶剂，例如石蜡；

(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；

(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；

(h)吸附剂，例如，高岭土；和

(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。

所述的固体剂型还可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。

用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性成分外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。

除了活性成分外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。

用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。

使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选20～500mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。

本发明另外涉及所述式a化合物或其药学上可接受的盐、式b化合物或其药学上可接受的盐在dpp-4酶抑制剂和与dpp-4酶的活性或表达量相关的疾病方面的应用。

本发明的另一方面提供了一种dpp-4酶抑制剂，其包含选自上述式a化合物或其药学上可接受的盐、式b化合物或其药学上可接受的盐，以及任选地一种或多种药学上可接受的载体。

本发明的化合物和组合物用于治疗和预防与dpp-4酶的活性或表达量相关的疾病，如糖尿病。

因此，本发明的另一方面提供了上述式a化合物或其药学上可接受的盐、式b化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗与dpp-4酶的活性或表达量相关的疾病中的药物用途。

本发明的另一个方面提供了一种治疗与dpp-4酶的活性或表达量相关的疾病的方法，其包括向需要该治疗的患者给药选自上述式a化合物或其药学上可接受的盐、式b化合物或其药学上可接受的盐。

本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。

本发明的主要优点

1.本发明提供了两类结构新颖的化合物，一个是以式a为代表的吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮衍生物，另一个是以式b为代表的吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物。它们的合成路线设计合理，原料易得，适于应用。

2.本发明提供的式a和式b化合物可以用于dpp-4抑制剂及治疗糖尿病。

3.本发明提供的式a和式b化合物有较高的活性，最低ic50值可≤0.1μm。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。

除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。

实施例15-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮(3)的制备

将1g5,7-二氯吡唑[并1,5-a]吡啶悬浮于25ml1n氢氧化钠水溶液中加热至90℃，搅拌0.5h。用薄层色谱检测反应，反应完成后冷却反应液至室温。用1nhcl溶液调节溶液使ph＝2，得到悬浮液，静置过滤后得到5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮(0.9g，产率＝99％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δppm5.90(s,1h)，6.21(br.s.,1h)，8.00(br.s.,1h)。

实施例24-(2-氰基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

将400mg(2.36mm)5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮3、462mg(2.36mm)2-氰基溴苄和0.8ml(4.72mm)二异丙基乙胺溶解于5mldmf溶液中加热至80℃搅拌过夜，使用薄层色谱监测反应，反应完成后，反应液冷却并加入100ml乙酸乙酯，用20ml水洗有机相3次，用饱和食盐水干燥。有机相减压蒸馏得到粗产品。使用柱层析分离纯化粗产品，洗脱组成石油醚：乙酸乙酯2：1。得到标题产品400mg(产率＝60％)。核磁：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.10-6.17(m,1h)，6.22(s,2h)，6.42(d,j＝3.52hz,1h)，7.37-7.51(m,1h)，7.54-7.65(m,2h)，7.70(d,j＝7.83hz,1h)，8.03(d,j＝3.52hz,1h)。

实施例34-苄基-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

参照实施例2方法得到标题产物(产率＝68.56％)。核磁：¹hnmr(chloroform-d)δ:7.61-7.73(m,1h)，7.34(br.s.,3h)，7.24(br.s.,2h)，6.31-6.41(m,1h)，6.08(s,1h)，5.97(s,2h)。

实施例44-(4-甲基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

参照实施例2方法得到标题产物(产率＝31.59％)。核磁：¹hnmr(chloroform-d)δ:7.65(d,j＝3.1hz,1h)，7.14(s,5h)，6.35(d,j＝3.1hz,1h)，6.08(s,1h)，5.92(s,2h)，2.33(s,3h)。

实施例54-(4-硝基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

参照实施例2方法得到标题产物(产率＝45.91％)。核磁：¹hnmr(chloroform-d)δ:8.20(d,j＝8.6hz,3h),7.79(d,j＝3.5hz,1h),7.36(d,j＝8.6hz,2h),6.47(d,j＝3.1hz,1h),6.08(br.s.,1h),6.07(s,2h)。

实施例64-(4-甲酸乙酯基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

参照实施例2方法得到标题产物(产率＝51.11％)。核磁：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm1.39(q,j＝7.04hz,3h),4.29-4.45(m,2h),4.45-4.68(m,1h),5.43(d,j＝7.04hz,1h),7.16(s,1h),7.27-7.40(m,1h),7.53(d,j＝7.83hz,1h)。

实施例74-(2-氟苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

参照实施例2方法得到标题产物(产率＝61.07％)。核磁：¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.06(s,2h),6.10(s,1h),6.35(d,j＝2.74hz,1h),6.96-7.20(m,3h),7.28-7.36(m,1h),7.47(t,j＝7.43hz,1h),7.78(br.s.,1h)。

实施例84-(2-硝基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮的制备

参照实施例2方法得到标题产物(产率＝61.07％)。核磁：¹hnmr(chloroform-d)δppm8.20(d,j＝8.6hz,3h),7.79(d,j＝3.5hz,1h),7.36(d,j＝8.6hz,2h),6.47(d,j＝3.1hz,1h),6.08(br.s.,1h),6.07(s,2h)。

实施例9(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(2-氰基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a1)

100mg(0.35mm)4-(2-氰基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮、70mg(0.35mm)n-叔丁氧羰基-3-胺基哌啶和0.12ml(0.7mm)二异丙基乙胺溶解于3mldmf中加热至120℃过夜。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，冷却反应液至室温，加入20ml乙酸乙酯，有机层用5ml水洗3次。有机相用饱和食盐水干燥后，用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏后得到粗产品。粗产品用柱层析色谱分离纯化得到(r)-5-(n-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶-1-基)-4-(2-氰基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮。(产率＝31.74％)¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.10-6.17(m,1h),6.22(s,2h),6.42(d,j＝3.52hz,1h),7.37-7.51(m,1h),7.54-7.65(m,2h),7.70(d,j＝7.83hz,1h),8.03(d,j＝3.52hz,1h),3.64(d,j＝10.6hz,1h),3.25(d,j＝12.5hz,1h),1.91-2.15(m,2h),1.79-1.89(m,1h),1.66-1.79(m,1h),1.50-1.61(m,2h),1.28(s,3h),1.11-1.22(m,1h),0.83-1.00(m,1h)；质谱m/z：(m+h)449.2。

将40mg(r)-5-(n-叔丁氧羰基-3-氨基哌啶-1-基)-4-(2-氰基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮溶解于10ml二氯甲烷中搅拌并加入1ml三氟乙酸。反应在室温下搅拌3小时。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，加入10ml二氯甲烷，有机相用5ml1n氢氧化钠水溶液洗一次，用5ml水洗3次后，用饱和食盐水干燥。有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，使用柱层析分离纯化得到标题产物。(产率＝61.15％)¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.10-6.17(m,1h),6.22(s,2h),6.42(d,j＝3.52hz,1h),7.37-7.51(m,1h),7.54-7.65(m,2h),7.70(d,j＝7.83hz,1h),8.03(d,j＝3.52hz,1h),3.64(d,j＝10.6hz,1h),3.25(d,j＝12.5hz,1h),1.91-2.15(m,2h),1.79-1.89(m,1h),1.66-1.79(m,1h),1.11-1.22(m,1h),0.83-1.00(m,1h)。

实施例10(r)-5-(哌嗪基-1-基)-4-(2-氰基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a2)

200mg(0.70mm)4-(2-氰基苄基)-5-氯吡唑并[1,5-a]吡啶-7(4h)-酮、60mg(0.70mm)和0.23ml(1.4mm)二异丙基乙胺溶解于3mldmf中加热至120℃搅拌过夜。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，加入10ml二氯甲烷，有机相用5ml1n氢氧化钠水溶液洗一次，用5ml水洗3次后，用饱和食盐水干燥。有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，使用柱层析分离纯化得到标题产物。(产率＝5.88％)¹hnmr(chloroform-d)δ:8.23(d,j＝8.2hz,1h),8.05-8.19(m,2h),8.02(s,1h),7.75(t,j＝7.4hz,1h),7.57-7.71(m,1h),7.53(d,j＝8.2hz,1h),7.31-7.48(m,1h),3.64-3.71(m,2h),3.52-3.64(m,4h),3.51(d,j＝4.7hz,1h),3.36-3.47(m,2h)。

实施例11(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-苄基吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a3)

参照实施例9得到标题产物(产率＝22.7％)。1hnmr(chloroform-d)δ:7.44(d,j＝3.5hz,1h),7.28(br.s.,1h),7.14-7.24(m,2h),6.01(d,j＝3.1hz,1h),5.70-5.84(m,2h),5.43(s,1h),4.16(d,j＝12.5hz,1h),3.91(d,j＝12.9hz,1h),3.72(q,j＝6.8hz,1h),3.29-3.41(m,1h),3.12-3.29(m,2h),2.08(br.s.,1h),1.69-1.83(m,2h),1.42-1.57(m,1h)。

实施例12(r)-5-(哌嗪基-1-基)-4-苄基吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a4)

参照实施例10得到标题产物(产率＝31.6％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm3.44(t,j＝4.89hz,2h),3.55-3.67(m,5h),5.31(s,1h),5.84(s,2h),6.10(d,j＝3.52hz,1h),7.27-7.33(m,6h),7.53(d,j＝3.13hz,1h),8.12(s,1h)。

实施例13(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(4-硝基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a7)

参照实施例9得到标题产物(产率＝59.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.48(d,j＝8.2hz,1h),8.18-8.44(m,1h),3.81(br.s.,1h),3.65(d,j＝10.2hz,1h),3.25(br.s.,1h),3.07(br.s.,1h),1.91-2.17(m,1h),0.89(t,j＝6.5hz,1h)。

实施例14(r)-5-(哌嗪基-1-基)-4-(4-硝基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a8)

参照实施例10得到标题产物(产率＝19.78％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.32(d,j＝8.2hz,1h),8.05-8.23(m,3h),7.60(d,j＝8.2hz,1h),3.66-3.71(m,2h),3.59-3.66(m,3h),3.57(s,1h),3.48-3.54(m,2h),3.44(s,1h),3.35-3.42(m,2h)。

实施例15(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(4-甲酸乙酯基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a9)

参照实施例9得到标题产物(产率＝22.7％)。¹hnmr(dmso-d6)δ:7.83-8.01(m,3h),7.56(d,j＝7.8hz,1h),7.35-7.50(m,2h),4.28(t,j＝7.0hz,2h),4.10(d,j＝4.7hz,1h),3.93(s,1h),1.87-2.01(m,2h),1.42(br.s.,1h),1.23-1.31(m,5h),0.75-0.86(m,1h)。

实施例16(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(4-甲酸基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a10)

将26mg(0.065mm)(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(4-硝基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a9)和4mg氢氧化钠溶解于5ml乙醇与5ml水组成的溶液中，并加热至90℃搅拌3小时。使用薄层色谱监测反应。反应完成后浓缩反应液，用1n盐酸溶液酸化溶液使ph＝2。溶液使用二氯甲烷萃取，收集有机层，干燥后浓缩得到粗产品。粗产品使用柱层析分离纯化得到标题产物(产率＝20.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.04(br.s.,1h),7.70(d,j＝7.4hz,1h),7.59(br.s.,2h),7.47(br.s.,1h),6.42(br.s.,1h),6.22(s,2h),6.14(s,1h),2.36(s,1h),2.25(br.s.,1h),2.03(br.s.,1h),0.80-0.93(m,6h)。

实施例17(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(2-氟苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a11)

参照实施例9得到标题产物(产率＝32.3％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.06(s,2h),6.10(s,1h),6.35(d,j＝2.74hz,1h),6.96-7.20(m,3h),7.28-7.36(m,1h),7.47(t,j＝7.43hz,1h),7.78(br.s.,1h),4.09-4.27(m,1h),3.93(d,j＝12.1hz,1h),3.58(br.s.,1h),3.25-3.50(m,1h),2.28(br.s.,3h),2.14(br.s.,1h),1.53(br.s.,1h),1.22-1.31(m,3h)。

实施例18(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-4-(2-硝基苄基)吡唑[1,5-a]-7(4h)-吡啶酮(a12)

参照实施例9得到标题产物(产率＝32.3％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.23(d,j＝8.2hz,1h),8.05-8.19(m,2h),8.02(s,1h),7.75(t,j＝7.4hz,1h),7.57-7.71(m,1h),7.53(d,j＝8.2hz,1h),7.31-7.48(m,1h),3.64-3.71(m,2h),3.52-3.64(m,4h),3.51(d,j＝4.7hz,1h),3.36-3.47(m,2h)。

实施例195-氯-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

200mg(1mm)5,7-二氯-吡唑并[1,5-a]吡啶、162mg(1mm)1,2-二氨基-4-硝基苯和85mg(2mm)60％氢化钠溶解于3mldmf中室温搅拌过夜。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，加入30ml水得到沉淀物。过滤收集沉淀物得到粗产品。使用柱层析分离纯化粗产品(产率＝88.％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.87(br.s.,1h),7.74(t,j＝10.0hz,2h),6.13(br.s.,1h)。

实施例205-氯-7-(2,4-二氟苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝83.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.06(s,1h),8.01(br.s.,1h),7.42-7.56(m,1h),6.98-7.12(m,2h),6.53(s,1h),6.05(s,1h)。

实施例215-氯-7-(2-氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝70.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.79-7.91(m,1h),7.28-7.47(m,2h),7.21(d,j＝8.2hz,1h),3.78(br.s.,1h),1.93(br.s.,1h),1.75(br.s.,1h),1.42(s,5h),1.20-1.36(m,3h)。

实施例225-氯-7-(2,4-二氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm5.68(s,1h),6.56(s,1h),7.38(t,j＝8.02hz,1h),7.53(d,j＝8.22hz,2h),8.00(br.s.,1h),8.10(s,1h)。

实施例235-氯-7-(3-氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝37.5％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.79-7.91(m,1h),7.28-7.47(m,2h),7.21(d,j＝8.2hz,1h),3.78(br.s.,1h),1.93(br.s.,1h),1.75(br.s.,1h),1.42(s,5h),1.20-1.36(m,3h)。

实施例245-氯-7-n-甲基苯胺基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.96(s,1h),7.35-7.47(m,3h),7.31(s,1h),7.19(d,j＝7.8hz,2h),6.49(s,1h),6.00(s,1h),3.82(s,3h)。

实施例255-氯-7-(2-氯-3-氟苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.19(s,1h)6.54(s,1h)7.29(d,j＝6.26hz,2h)7.47(d,j＝5.87hz,1h)8.07(br.s.,2h)。

实施例265-氯-7-(2-胺基-4-硝基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.12(br.s.,1h),7.89(d,j＝20.0hz,1h),7.67-7.78(m,2h),7.44(d,j＝8.6hz,1h),6.16(d,j＝18.8hz,1h)。

实施例275-氯-7-(4-甲氧基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm3.85(s,3h),6.07(s,1h),6.48(s,1h),7.00(d,j＝8.22hz,2h),7.25(s,1h),7.29(s,1h),8.03(s,2h)。

实施例285-氯-7-(2-硝基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm6.61(s,1h),6.67(s,1h),7.38(t,j＝7.83hz,1h),7.77-7.91(m,2h),8.16(s,1h),8.32(d,j＝8.61hz,1h),10.64(br.s.,1h)。

实施例295-氯-7-(n-(1-胺基-4-甲基吡啶)基)吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝99.9％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.03-8.10(m,1h),7.28-7.33(m,2h),6.47-6.54(m,1h),6.23(s,1h),2.42(s,3h)。

实施例305-氯-7-(2-甲氧基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝75.2％)。1hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm3.93(s,3h),6.40(s,1h),6.52(s,1h),7.01-7.15(m,2h),7.49(d,j＝7.43hz,1h),8.08(s,1h),8.32(br.s.,1h)。

实施例315-氯-7-(2-乙基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝75.8％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.96(s,1h),7.35-7.47(m,3h),7.31(s,1h),7.19(d,j＝7.8hz,2h),6.49(s,1h),6.00(s,1h),3.82(s,3h)。

实施例325-氯-7-苄胺基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝94.5％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm4.48(d,j＝5.48hz,2h),5.87(s,1h),6.35(s,1h),7.16(s,1h),7.23(d,j＝6.65hz,2h),7.28-7.35(m,2h),7.87(s,1h)。

实施例335-氯-7-(4-羟基苄胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝82.1％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm4.50(d,j＝5.48hz,1h),4.70(d,j＝5.48hz,1h),5.99-6.04(m,1h),6.45(s,1h),6.86(d,j＝8.22hz,2h),7.37(s,1h),7.98(s,1h),8.21(br.s.,1h)。

实施例345-氯-7-(n-(1-胺基-4-氟吡啶)基)吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝80.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.85(br.s.,1h),8.35(br.s.,1h),8.06(s,1h),7.86-7.99(m,1h),7.54(br.s.,1h),7.07(d,j＝9.0hz,1h),6.57(s,1h)。

实施例355-氯-7-(n-(1-胺基-4-氯吡啶)基)吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝88.2％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.86(br.s.,1h),8.42(br.s.,1h),7.96-8.10(m,1h),7.93(br.s.,1h),7.71(br.s.,1h),7.02(d,j＝16.4hz,1h),6.55(br.s.,1h)。

实施例365-氯-7-(2,4-二氯苄胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝70.4％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.98(d,j＝2.0hz,1h),7.46(s,1h),7.25(d,j＝7.4hz,1h),6.87(br.s.,1h),6.45(d,j＝2.0hz,1h),5.91(s,1h),4.64(d,j＝6.3hz,2h)。

实施例375-氯-7-(2,4-二氯苯乙胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝90％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.97(s,1h),7.45(s,1h),7.12-7.26(m,2h),6.53(br.s.,1h),6.44(s,1h),5.98(s,1h),3.67(q,j＝6.7hz,2h),3.10-3.27(m,2h)。

实施例385-氯-7-(n-(3-胺基吡咯)基)吡唑并[1,5-a]吡啶的制备

参照实施例18得到标题产物(产率＝60％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.07(s,1h),7.62(s,1h),7.13(s,1h),6.53(d,j＝1.6hz,1h),6.26(s,1h)。

实施例395-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b1)

将100mg(0.36mm)5-氯-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶、73mg(0.36mm)n2-叔丁氧羰基-3-胺基哌啶和94mg(0.73mm)二异丙基乙胺溶解于3mldmf中加热至120℃过夜。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，冷却反应液至室温，加入20ml乙酸乙酯，有机层用5ml水洗3次。有机相用饱和食盐水干燥后，用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏后得到粗产品。粗产品用柱层析色谱分离纯化得到21mg5-n1-(n2-叔丁氧羰基-3-胺基哌啶基)-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶。¹hnmr(chloroform-d)δ:6.58-6.71(m,1h),3.88(br.s.,1h),3.68(br.s.,1h),2.32(s,1h),1.88(br.s.,1h),1.71(br.s.,1h),1.65(br.s.,3h),1.59(br.s.,1h),1.40-1.49(m,6h)。

将21mg5-n1-(n2-叔丁氧羰基-3-胺基哌啶基)-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶溶解于10ml二氯甲烷中搅拌并加入1ml三氟乙酸。反应在室温下搅拌3小时。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，加入10ml二氯甲烷，有机相用5ml1n氢氧化钠水溶液洗一次，用5ml水洗3次后，用饱和食盐水干燥。有机相用无水硫酸钠干燥后浓缩，使用柱层析分离纯化得到标题产物(产率＝44.09％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.85(s,1h),7.36(br.s.,2h),6.56-6.73(m,1h),6.10(s,1h),4.13(d,j＝12.1hz,1h),3.87(d,j＝12.9hz,1h),2.89-3.08(m,1h),2.85(d,j＝12.1hz,1h),2.33(s,1h),1.86-2.11(m,5h),1.76(d,j＝12.9hz,1h),1.53(d,j＝10.6hz,1h),0.83-0.95(m,1h)。

实施例405-n1-哌嗪基-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b2)

将80mg(0.29mm)5-氯-7-(2-胺基-4-甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶、25mg(0.29mm)n2-叔丁氧羰基-3-胺基哌啶和76mg(0.58mm)二异丙基乙胺溶解于3mldmf中加热至120℃过夜。使用薄层色谱检测反应。反应完成后，冷却反应液至室温，加入20ml乙酸乙酯，有机层用5ml水洗3次。有机相用饱和食盐水干燥后，用无水硫酸钠干燥，减压蒸馏后得到粗产品。粗产品用柱层析色谱分离纯化得到标题产品(产率23.28％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.09(s,1h),7.88(s,1h),7.08(d,j＝7.8hz,1h),6.69(s,1h),6.64(d,j＝7.8hz,1h),6.14(s,1h),5.28(br.s.,1h),3.86(br.s.,1h),3.55-3.73(m,5h),3.51(br.s.,2h),3.36-3.47(m,2h),2.33(s,2h)。

实施例415-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2,4-二氟苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b3)

参照实施例38得到标题产物(产率＝20％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.87(s,1h),7.47(d,j＝5.9hz,1h),6.91-7.09(m,2h),6.11(s,1h),5.58(s,1h),4.15(d,j＝12.1hz,1h),3.92(d,j＝13.3hz,1h),3.06(br.s.,1h),2.88-3.01(m,1h),1.92-2.11(m,3h),0.78-0.94(m,3h)。

实施例425-n1-哌嗪基-7-(2,4-二氟苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b4)

参照实施例39得到标题产物(产率＝35.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.95-8.09(m,2h),7.88(s,1h),7.40-7.51(m,1h),6.95-7.13(m,2h),6.13(s,1h),5.46(s,1h),3.56-3.62(m,3h),3.39-3.45(m,3h),3.05-3.11(m,2h)。

实施例435-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b5)

参照实施例38得到标题产物(产率32.3％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.52(d,j＝7.8hz,1h),7.40(t,j＝7.4hz,1h),3.79(d,j＝11.7hz,1h),3.60-3.73(m,1h),1.93(br.s.,1h),1.38(s,1h),0.89(t,j＝6.5hz,1h)。

实施例445-n1-哌嗪基-7-(2-氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b6)

参照实施例39得到标题产物(产率35.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.91(s,1h),7.55(t,j＝8.8hz,2h),7.38(t,j＝7.6hz,1h),7.22(d,j＝7.4hz,1h),6.16(s,1h),5.77(s,1h),3.69(br.s.,4h),3.06(br.s.,4h)。

实施例455-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b7)

参照实施例38得到标题产物(产率63.3％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.87(s,1h),7.43-7.56(m,1h),7.27-7.37(m,1h),6.13(s,1h),5.13(s,1h),4.06-4.23(m,1h),3.58(d,j＝12.9hz,1h),3.38-3.51(m,1h),3.33(br.s.,1h),3.13(t,j＝10.6hz,1h),1.98-2.11(m,2h),1.76(d,j＝10.2hz,1h),1.52-1.70(m,1h),0.79-0.94(m,3h)。

实施例465-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(3-氯苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b8)

参照实施例38得到标题产物(产率10.8％)。1hnmr(chloroform-d)δ:7.79-7.91(m,1h),7.28-7.47(m,2h),7.21(d,j＝8.2hz,1h),3.78(br.s.,1h),1.93(br.s.,1h),1.75(br.s.,1h),1.20-1.36(m,3h)。

实施例475-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2,5-二甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b9)

参照实施例38得到标题产物(产率10.8％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.83(s,1h),7.14-7.24(m,2h),7.06(d,j＝7.4hz,1h),6.11(s,1h),5.39(s,1h),5.31(s,1h),4.21(d,j＝12.1hz,1h),3.53(br.s.,1h),3.40(d,j＝12.9hz,1h),3.30(br.s.,1h),3.09(br.s.,1h),2.36(s,3h),2.26(s,3h),1.98-2.10(m,1h),1.76(br.s.,1h),1.27-1.38(m,2h).。

实施例485-n1-哌嗪基-7-(2,5-二甲基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b10)

参照实施例39得到标题产物(产率8.5％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.11(s,1h),7.90(s,1h),7.61(s,1h),7.21(d,j＝19.2hz,1h),7.10(d,j＝7.8hz,1h),6.12-6.22(m,1h),5.36(s,1h),3.63(dt,j＝14.9,5.1hz,4h),3.40-3.57(m,4h),2.38(s,3h),2.28(s,3h)。

实施例495-n1-(3-胺基哌啶基)-7-n-甲基苯胺基吡唑并[1,5-a]吡啶(b11)

参照实施例38得到标题产物(产率22.3％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.80(br.s.,1h),7.52(d,j＝7.4hz,1h),7.46(d,j＝6.7hz,1h),6.35(br.s.,1h),5.02(br.s.,1h),4.24(d,j＝13.3hz,2h),3.99(br.s.,2h),3.79-3.93(m,1h),3.51(br.s.,1h),3.31(br.s.,1h),2.13(br.s.,1h),1.97-2.10(m,1h),1.93(br.s.,1h),1.51-1.70(m,2h),0.81-0.94(m,1h).。

实施例505-n1-哌嗪基-7-n-甲基苯胺基吡唑并[1,5-a]吡啶(b12)

参照实施例39得到标题产物(产率25.2％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.13(s,1h),7.77-7.87(m,1h),7.35(t,j＝7.6hz,2h),7.08-7.24(m,3h),6.16(s,1h),5.69-5.86(m,1h),3.69-3.83(m,2h),3.61-3.69(m,4h),3.51-3.60(m,2h),3.43-3.51(m,1h).。

实施例515-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-氯-3-氟苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b13)

参照实施例38得到标题产物(产率38.3％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.38(d,j＝5.5hz,1h),7.18-7.26(m,1h),3.56-3.79(m,1h),3.02-3.17(m,1h),1.98-2.10(m,2h),1.70-1.76(m,1h),1.57-1.66(m,1h),1.45-1.49(m,1h),1.41(br.s.,1h),1.33-1.38(m,1h),0.88(t,j＝6.3hz,1h).。

实施例525-n1-哌嗪基-7-(2-氯-3-氟苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b14)

参照实施例39得到标题产物(产率36.0％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.13(s,1h),7.89(s,1h),7.74-7.86(m,1h),7.45(d,j＝5.5hz,1h),6.16(s,1h),5.65(s,1h),3.63-3.72(m,3h),3.57(d,j＝4.7hz,2h),3.48(d,j＝5.1hz,2h).。

实施例535-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-胺基-4-硝基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b15)

参照实施例38得到标题产物(产率89％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.02-8.28(m,4h),6.92(d,j＝9.0hz,1h),6.54-6.68(m,2h),5.89(s,1h),2.30(t,j＝7.6hz,1h),2.02(d,j＝5.5hz,1h),1.60-1.69(m,1h),1.40-1.50(m,1h),0.89(t,j＝6.5hz,2h).。

实施例545-n1-哌嗪基-7-(2-胺基-4-硝基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b16)

参照实施例39得到标题产物(产率36.1％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.12(br.s.,1h),7.89(d,j＝20.0hz,1h),7.67-7.78(m,2h),7.44(d,j＝8.6hz,1h),6.16(d,j＝18.8hz,1h),4.16-4.30(m,2h),3.65(dd,j＝16.4,5.9hz,3h),3.57(d,j＝5.9hz,1h),3.46(br.s.,1h).。

实施例555-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(4-甲氧基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b17)

参照实施例38得到标题产物(产率77.8％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.83(br.s.,1h),7.25(br.s.,2h),6.99(d,j＝7.4hz,2h),6.10(br.s.,1h),5.57(s,1h),4.16(d,j＝11.7hz,1h),3.86(s,3h),3.47-3.66(m,1h),3.37-3.47(m,1h),3.33(br.s.,1h),3.14(t,j＝10.0hz,1h),2.03(br.s.,1h),1.77(br.s.,2h),1.56(br.s.,1h),1.34-1.43(m,1h),0.78-0.97(m,1h).。

实施例565-n1-哌嗪基-7-(4-甲氧基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b18)

参照实施例39得到标题产物(产率73.7％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.79-7.93(m,1h),7.68(br.s.,1h),6.98(d,j＝7.4hz,2h),6.07-6.15(m,1h),5.56(d,j＝4.7hz,1h),3.85(s,3h),3.48-3.56(m,4h),2.80-3.01(m,3h),2.55(br.s.,2h).。

实施例575-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-硝基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b19)

参照实施例38得到标题产物(产率79.1％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm0.88(d,j＝7.04hz,2h),1.36-1.45(m,1h),1.55-1.72(m,1h),1.77-1.88(m,1h),2.20-2.32(m,1h),2.85-3.02(m,2h),3.14(t,j＝10.56hz,1h),3.99(d,j＝13.30hz,1h),4.19(d,j＝10.56hz,1h),6.16(s,1h),6.23(s,1h),7.18-7.24(m,1h),7.71(t,j＝7.63hz,1h),7.84(d,j＝8.22hz,1h),7.94(s,1h),8.28(d,j＝8.22hz,1h)。

实施例585-n1-哌嗪基-7-(2-硝基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b20)

参照实施例39得到标题产物(产率73.7％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm2.94-3.11(m,4h),3.53-3.76(m,4h),6.17(d,j＝4.70hz,2h),7.23(s,1h),7.69(s,1h),7.83(d,j＝8.22hz,1h),7.94(s,1h),8.27(d,j＝8.22hz,1h)。

实施例595-n1-(3-胺基哌啶基)-7-n-(1-胺基-4-甲基吡啶)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b21)

参照实施例38得到标题产物(产率91.7％)。¹hnmr(dmso-d6)δ:9.92(s,1h),8.25(br.s.,1h),8.01(br.s.,2h),7.94(s,1h),7.68(s,1h),7.63(d,j＝8.2hz,1h),7.49(d,j＝8.2hz,1h),6.06(s,1h),4.40(d,j＝10.6hz,1h),3.89(d,j＝12.9hz,1h),3.20(br.s.,2h),2.27(s,2h),2.00(d,j＝8.2hz,2h),1.84(br.s.,1h),1.59(d,j＝7.0hz,1h),0.80-0.91(m,1h).。

实施例605-n1-哌嗪基-7-n-(1-胺基-4-甲基吡啶)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b22)

参照实施例39得到标题产物(产率73.7％)。¹hnmr(dmso-d6)δ:9.92(s,1h),8.25(br.s.,1h),8.01(br.s.,2h),7.94(s,1h),7.68(s,1h),7.63(d,j＝8.2hz,1h),7.49(d,j＝8.2hz,1h),6.06(s,1h),2.94-3.11(m,4h)3.53-3.76(m,4h).。

实施例615-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-甲氧基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b23)

参照实施例38得到标题产物(产率44.1％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:8.08(br.s.,1h),7.88(s,1h),7.57(d,j＝6.7hz,1h),7.16(d,j＝7.8hz,1h),7.04-7.09(m,1h),7.00(d,j＝8.2hz,1h),6.12(s,1h),3.92(s,2h),3.68-3.86(m,1h),1.91(br.s.,1h),1.14-1.33(m,2h).。

实施例625-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(2-乙基苯胺)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b24)

参照实施例38得到标题产物(产率44.1％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.83(s,1h),7.37(br.s.,2h),7.28-7.34(m,2h),6.11(s,1h),5.46(s,1h),4.19(d,j＝11.7hz,1h),3.60(d,j＝12.9hz,1h),3.19-3.42(m,2h),3.06(br.s.,1h),2.68(q,j＝7.0hz,2h),2.01(br.s.,1h),1.74(br.s.,1h),1.66(d,j＝9.8hz,1h),1.43-1.59(m,1h),1.15-1.43(m,6h),0.89(br.s.,1h).。

实施例635-n1-(3-胺基哌啶基)-7-苄氨基吡唑并[1,5-a]吡啶(b25)

参照实施例38得到标题产物(产率43.7％)。¹hnmr(400mhz,chloroform-d)δppm1.46(br.s.,4h),1.74(br.s.,1h),1.91(br.s.,1h),3.74(br.s.,1h),4.55(d,j＝5.48hz,1h),7.29-7.45(m,3h).。

实施例645-n1-(3-胺基哌啶基)-7-(4-羟基苄氨)基吡唑并[1,5-a]吡啶(b26)

参照实施例38得到标题产物(产率60.5％)。¹hnmr(chloroform-d)δ:7.74-7.86(m,1h),7.09-7.24(m,2h),6.71-6.86(m,2h),6.03-6.14(m,1h),5.31(s,2h),4.41(d,j＝4.7hz,1h),3.57-3.87(m,3h),3.28-3.57(m,2h),3.11(s,1h),1.97-2.15(m,1h),1.92(br.s.,1h),0.81-0.95(m,1h)。

实施例65(r)-5-(3-氨基哌啶-1-基)-7-n-(3-胺基吡唑基)吡唑并[1,5-a]吡啶(b27)

参照实施例38得到标题产物(产率80.1％)。¹hnmr(cdcl3)δ:8.07(d,j＝2.3hz,1h),7.87(d,j＝2.0hz,1h),7.55-7.63(m,1h),6.78(s,1h),6.24(d,j＝2.3hz,2h),4.85(br.s.,1h),3.78(br.s.,3h),3.63(br.s.,2h),1.94(br.s.,2h),1.83(br.s.,2h),1.54-1.75(m,6h).。

实施例665-(吗啉-1-基)-7-n-(3-胺基吡唑基)吡唑并[1,5-a]吡啶(b28)

参照实施例39得到标题产物(产率:51.6％)。¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δppm3.45(br.s.,3h),3.58-3.71(m,4h),5.98(s,1h),6.25(s,1h),7.01(s,1h),7.63(s,1h),7.85(s,1h)。

实施例67体外测定吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮和吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物对人dpp-4酶抑制活性

使用dmso溶解各个化合物(终浓度<10mm)，将化合物溶解在缓冲液中(20mmtris，ph7.4；20mmkcl；0.1mg/mlbsa)。将人dpp-4蛋白(终浓度0.1nm)加入上述溶液中，孵育10分钟。使用ap-afc(终浓度10μm)激活反应。反应终体积为100μl。使用酶标仪(激发光400nm；吸收光505nm)读取吸收率。根据标准数学模型计算半数抑制率(ic50)。

表1吡唑并[1,5-a]吡啶-(4h)-酮衍生物对人dpp-4抑制活性

a，其中a1为a2为

注：表中a为ic50≤0.1μm，b为0.1μm＜ic50≤0.5μm，c为0.5μm＜ic50≤5μm，d为＞5μm

表2吡唑并[1,5-a]吡啶衍生物对人dpp-4抑制活性

其中，a1为a2为a3为

在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。