可计数盒及PCR检测试剂盒的制作方法

本实用新型涉及生物检测技术领域，尤其涉及一种可计数盒及PCR检测试剂盒。

背景技术：

动物疫病是一个多年来一直困扰畜牧养殖业的重大难题，每年因为动物疫病而对动物进行隔离、扑杀和销毁等产生的损失，已经严重制约了畜牧养殖业的发展，此外，患有疫病的动物也影响其他动物和人类的公共安全。所以做好动物疫病监测，已经成为动物疫控的重要工作内容。

目前动物疫病检测手段主要有胶体金法、酶联免疫法、PCR法。其中胶体金法和酶联免疫法主要是确认动物是否感染患病，或者是否免疫成功；而PCR法则是从基因水平上筛查动物体内是否含有能引起动物疫病的病毒基因(发病和不发病，只要含有病毒基因都能检测出来)，从而能够更早地监测出动物现有的和潜在的发病情况，便于提前预防和治疗，保障畜牧业健康发展，促进社会公共卫生安全。

目前的PCR试剂盒一般都是多头份每盒的量，即每个盒子可以检测多份样本。很多时候，一个完整的PCR试剂盒不能一次使用完，需要分多次使用，下次使用时不能准确确定上次使用的日期，以及剩下的试剂还能检测多少头份的样本，这样会给后续的工作带来很大的不便。

即，现有的盒子不能够对盒内试剂的用量及使用日期等进行记录。

技术实现要素：

本实用新型的目的在于提供一种可计数盒及PCR检测试剂盒，以解决现有技术中存在的现有的盒子不能够对盒内试剂的用量及使用日期等进行记录的技术问题。

本实用新型提供的可计数盒，包括盒体和与所述盒体相匹配的盒盖，所述盒盖包括盖板和插接板，所述盖板包括铰接边和插接边，所述插接边与所述铰接边位于所述盒盖的相对两边，所述铰接边与所述盒体开口一面的一个侧边铰接，所述插接板设于所述插接边上，所述盒盖面向所述盒体开口的一面铰接有计数板；所述盖板面向所述计数板一面设有卡接槽，所述计数板面向所述盖板的一面固设有卡接块，所述卡接块与所述卡接槽相匹配。

进一步的，所述计数板沿所述插接边长度方向铰接于所述插接板内侧一面，且所述计数板与所述插接板的铰接处靠近所述插接边。

进一步的，所述盒体与所述插接板相对应的侧壁上开设有豁口。

进一步的，所述盒盖面向所述计数板的一面开设有容纳槽，所述计数板形状与所述容纳槽相对应，且所述计数板转动可镶嵌于所述容纳槽内。

本实用新型可计数盒的有益效果为：

本实用新型提供的可计数盒，包括盒体和盒盖，盒盖通过盖板上的铰接边与盒体铰接，使用时，通过绕铰接边转动盖板实现盒盖与盒体的关闭和打开，其中，当盒体上盖上盒盖时，盖板与盒体的开口上表面贴合，插接板插入盖板与盒体侧壁之间的缝隙里，从而实现盒盖的扣紧。当需要使用盒体内的物品时，将插接板从缝隙中拔出，向上推动盖板打开盒盖，盒盖上的计数板露出，使用者可以将计数板转动到适合的角度，在其上进行记录使用头份及使用日期，记录完成后，将计数板转回原位，计数板与盒盖紧贴，将盒盖盖紧即可，操作简单，记录精确，方便后续试剂的计划使用。

当盒盖扣紧在盒体上时，计数板上的卡接块卡接在盖板上的卡接槽内，从而将计数板贴紧固定卡接在盖板上，打开盒盖时，计数板贴紧盒盖并随盒盖转动，需要使用计数板时，将计数板上的卡接块脱离卡接槽，对计数板进行转动即可；计数板使用完毕后，转动计数板贴紧盒盖，卡接块卡接在卡接槽内，计数板被固定在盒盖上，从而减少甚至避免在转动盒盖的过程中，计数板受重力作用发生转动，对使用者拿取盒体内物品的影响，同时也减少计数板自由一端将盒体内物品碰坏情况的发生。

本实用新型的另一个目的在于提供一种PCR检测试剂盒，包括上述可计数盒，所述盒体内固设有衬垫，所述衬垫与所述盒体相匹配，所述衬垫上设有多个容器放置孔，所述容器放置孔内插有容器，该PCR检测试剂盒具有上述可计数盒的所有技术效果，这里不再赘述。

进一步的，所述标识部沿所述计数板的长度方向设有数行、数列。

进一步的，所述标识部为圆形标识部，且所述圆形标识部沿所述计数板的长度方向设有五行，每行十个。

进一步的，所述容器放置孔为六个，六个所述容器放置孔内均插有容器，六个所述容器分别为阴性对照容器、阳性对照容器、反应液容器、引物探针容器、酶容器和无核酸水容器。

进一步的，所述盒体开口一端的内壁开设有镶嵌槽，所述衬垫镶嵌于所述镶嵌槽内。

进一步的，所述盒体内腔的底部固设有定位板，所述定位板上设有定位槽，所述定位槽与所述衬垫上的容器放置孔相对应。

本实用新型PCR检测试剂盒的有益效果为：

本实用新型提供的PCR检测试剂盒，在上述可计数盒的盒体内设有衬垫，衬垫上设有容器放置孔，容器放置孔内插有容器，容器内可以根据需要装有不同的试剂。使用过程中，当容器内的试剂一次未使用完时，可以在计数板上记录已经使用的头份，剩下试剂的头份，以方便后期使用时对用量的计划使用，操作便捷，记录精确。

附图说明

为了更清楚地说明本实用新型具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本实用新型的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本实用新型实施例一提供的可计数盒的结构示意图；

图2为本实用新型实施例二提供的PCR检测试剂盒中计数板折好贴紧盒盖的结构示意图；

图3为本实用新型实施例二提供的PCR检测试剂盒中计数板折出的结构示意图；

图4为本实用新型实施例二提供的PCR检测试剂盒中衬垫的结构示意图。

图标：1－盒体；2－盒盖；3－计数板；4－衬垫；5－标识部；21－盖板；22－插接板；211－铰接边；212－插接边；41－容器放置孔。

具体实施方式

下面将结合附图对本实用新型的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。

在本实用新型的描述中，需要说明的是，术语“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。

在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。

实施例一

本实施例提供一种可计数盒，如图1所示，包括盒体1和与盒体1相匹配的盒盖2，盒盖2包括盖板21和插接板22，盖板21包括铰接边211和插接边212，插接边212与铰接边211位于盒盖2的相对两边，铰接边211与盒体1开口一面的一个侧边铰接，插接板22设于插接边212上，盒盖2面向盒体1开口的一面铰接有计数板3；盖板21面向计数板3一面设有卡接槽，计数板3面向盖板21的一面固设有卡接块，卡接块与卡接槽相匹配。

本实施例提供的可计数盒，包括盒体1和盒盖2，盒盖2通过盖板21上的铰接边211与盒体1铰接，使用时，通过绕铰接边211转动盖板21实现盒盖2与盒体1的配合和分离，其中，当盒体1上盖上盒盖2时，盖板21与盒体1的开口上表面贴合，插接板22插入盖板21与盒体1侧壁之间的缝隙里，从而实现盒盖2的扣紧。当需要使用盒体1内的物品时，将插接板22从缝隙中拔出，向上推动盖板21打开盒盖2，盒盖2上的计数板3露出，使用者可以将计数板3转动到适合的角度，在其上进行记录，记录完成后，将计数板3转回原位，计数板3与盒盖2紧贴，将盒盖2盖紧即可。当可计数盒内装有多头份试剂时，可以在计数板3上记录下已使用的头份以及使用的日期等，操作简单，记录精确，方便后续试剂的计划使用。

当盒盖2扣紧在盒体1上时，计数板3上的卡接块卡接在盖板21上的卡接槽内，从而将计数板3贴紧固定卡接在盖板21上，打开盒盖2时，计数板3贴紧盒盖2并随盒盖2转动，需要使用计数板3时，将计数板3上的卡接块脱离卡接槽，对计数板3进行转动即可；计数板3使用完毕后，转动计数板3贴紧盒盖2，卡接块卡接在卡接槽内，计数板3被固定在盒盖2上，从而减少甚至避免在转动盒盖2的过程中，计数板3受重力作用发生转动，对使用者拿取盒体1内物品的影响，同时也减少计数板3自由一端将盒体1内物品碰坏情况的发生。

上述卡接槽也可以为与卡接块相匹配的通孔；除上述卡接结构外，为了将计数板3可拆卸式固定在盒盖2上，还可以在计数板3自由一端固设有磁铁，并在盒盖2上相应的位置也固设磁铁，使用计数板3时，将计数板3拉下；不使用计数板3时，通过磁铁将计数板3吸引在盖板21上。

具体的，计数板3与盒盖2内壁贴紧即可，可以将计数板3铰接在盒盖2内壁上，铰接方向不限，只要确保铰接后的计数板3贴紧盒盖2内壁，尺寸不会超出盒盖2即可；也可以将计数板3铰接在插接板22内壁，此时，为了保证计数板3不影响盒盖2的扣紧，需要将计数板3铰接在靠近插接边212的位置，且铰接处沿铰接边211长度方向设置。计数板3与盒盖2的铰接方式也可以有很多方式(盒盖2与盒体1的铰接方式也可以为多种)，如，计数板3为具有一定弯折性时(如：一张厚度较小的纸板)，可以将计数板3一端固定在盒盖2上，使用时，直接对计数板3施力对其进行改变角度即可；当计数板3为刚性材料时，可以将计数板3的端部通过其他部件铰接在盒盖2上。此外，还可以将计数板3与盒盖2之间设置为可拆卸式铰接，当一个计数板3使用完以后，可以将其拆卸下来更换一个新的计数板3，从而实现可计数盒的重复使用，节省能源消耗、降低使用成本。

本实施例中，如图1所示，计数板3可以沿插接边212长度方向铰接于插接板22内侧一面，且计数板3与插接板22的铰接处靠近插接边212。这里是将计数板3铰接于盒盖2的插接板22上的一种具体情况，需要记录时，可以打开盒盖2，将计数板3转出，并使计数板3的下端架在盒体1上，计数板3被夹紧在盒盖2和盒体1之间，稳定性强，在计数板3上记录时更加便捷。计数板3的其他使用过程上文已经做了详细描述，这里不再赘述。

本实施例中，可以在盒体1与插接板22相对应的侧壁上开设有豁口。当需要打开盒盖2将插接板22拔出时，可以将手指在豁口处按压插接板22将其拔出，增强可计数盒的实用性。

考虑到计数板3对盒盖2与盒体1扣紧度的影响，本实施例中，还可以在盒盖2面向计数板3的一面开设有容纳槽，计数板3形状与容纳槽相对应，且计数板3转动可镶嵌于容纳槽内。不使用计数板3时，转动计数板3，计数板3与盒盖2贴紧时可以镶嵌于容纳槽内，即，计数板3的存在不会增加盒盖2与计数板3的厚度总和，从而不会影响盒盖2与盒体1之间的扣紧。

实施例二

本实施例提供一种PCR检测试剂盒，如图2和图3所示，包括实施例一所述的可计数盒，盒体1内固设有衬垫4，衬垫4与所述盒体1相匹配，衬垫4上设有多个容器放置孔41，容器放置孔41内插有容器。

本实施例提供的PCR检测试剂盒，在实施例一所述的可计数盒的盒体1内设有衬垫4，衬垫4上设有容器放置孔41，容器放置孔41内插有容器，容器内可以根据需要装有不同的试剂。使用过程中，当容器内的试剂一次未使用完时，可以在计数板3上记录已经使用的头份，剩下试剂的头份，以方便后期使用时对用量的计划使用，操作便捷，记录精确。具体的，衬垫4可以选用高密性发泡材料制成。

本实施例中，如图2和图3所示，可以在计数板3背离盖板21一面设有标识部5，标识部5沿计数板3的长度方向设有数行、数列。计数板3上设置多个标识部5，使用前，试剂装在容器内，容器插在衬垫4上的容器放置孔41内，容器上会标注其内盛装试剂的头份，即，试剂可以用来检测样本的份数；使用时，每检测一份样本，使用一头份试剂，就在计数板3的一个标识部5上做一个记号，这样可以准确记录使用试剂的头份，不会因为重复操作而记错使用头份，计数简单准确。当盒体1容器内的试剂一次未用完时，可以根据计数板3上的记录确定下次使用需要携带的PCR检测试剂盒的盒数。

具体的，本实施例中，如图2－图4所示，标识部5可以为圆形标识部，且圆形标识部沿计数板3的长度方向设有五行，每行十个。该计数板3主要应用于盒体1内盛装试剂头份小于50份的情况。圆形标识部形状简单，排列起来视觉整齐，且生产时，压制圆形标识部的部件为相应的圆柱状，生产圆柱状部件的精度和费用要低于其他形状部件。此外，标识部5也可以为其他任意形状，如正方形、菱形、横线等。

本实施例中，如图2－图4所示，容器放置孔41可以为六个，六个容器放置孔41内均插有容器，六个容器分别为阴性对照容器、阳性对照容器、反应液容器、引物探针容器、酶容器和无核酸水容器。该设置主要针对动物疫病的PCR检测，初始时，六个容器内分别盛装有对应动物疫病的试剂；检测时，取样本2μL、反应液10μL、引物探针1.8μL、酶0.5μL、无核酸水5.7μL，将20μL混合液置于培养基中，其中，样本为待检测动物的样本基因、反应液包含dNTP、引物探针包含引物和探针、酶根据实际需要可以包括逆转录酶、Taq聚合酶等：

第一步：将培养基置于45℃温度15min，此阶段样本RNA在培养基中进行逆转录，得到相应的DNA模板；

第二步：将培养基反应条件设置为温度95℃、时间2min，上一步得到的DNA模板在此阶段进行变性，双链DNA解离成单链DNA；

第三步：将培养基反应条件设置为温度60℃、时间1min，此阶段为DNA模板与引物的退火，引物与DNA模板单链的互补序列配对结合；

第四步：将培养基反应条件设置为温度95℃、时间15s，此阶段为引物的延伸，DNA模板－引物结合物在Taq聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，以靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与DNA模板链互补的半保留复制链。

如此循环40次，并于60℃时设置采集荧光信号。其中，引物包括上游引物和下游引物，为一小段单链DNA，逆转录过程中，作为DNA复制的起始点，引导后续DNA的合成；探针上携带有荧光基团，探针完整时检测不到荧光，与上游引物和下游引物之间的目的基因结合，PCR扩增过程中，探针被切断，可以检测到荧光，扩增得到的目的基因越多，那么探针被切断的也越多，检测到的荧光也越多。该方法适用于病毒基因为RNA的检测，如果病毒基因为DNA则可以去掉第一步的RNA逆转录，并适当调整反应温度和反应时间。

同样地对阳性对照和阴性对照进行相同的实验，随后对阳性对照、阴性对照和样本的检测结果进行判定，其中，阳性对照为肯定能出现预期结果的对照组、阴性对照为肯定不会出现预期结果的对照组，具体的针对动物疫病，阳性对照为含有疫病病毒的对照组、阴性对照则不含有疫病病毒：

1、阳性对照：CT值＜30并有明显的扩增曲线；阴性对照：无CT值或者CT值＞37，线性为直线或者轻微斜线，无明显扩增曲线。以上要求需同时满足，否则本次实验无效，需要重新进行；

2、样本CT值＜30并有明显的扩增曲线，样本为阳性；

3、样本CT值＞37并无扩增曲线，样本为阴性；

4、30＜样本CT值＜37可疑，需重复检测；若第二次检测CT值仍为30～37并有明显扩增曲线则判定样本为阳性，否则样本为阴性。

其中，在生物学中，CT值是指PCR扩增过程中，荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的阈值所对应的循环次数。

具体的，该PCR检测试剂盒内装有上述试剂时，需要置于－20℃条件下保存。

为了确保衬垫4设于盒体1内的稳固性，本实施例中，可以在盒体1开口一端的内壁开设有镶嵌槽，衬垫4镶嵌于镶嵌槽内。衬垫4镶嵌于镶嵌槽内，与盒体1的结合度较好，不会发生相对移动，且稳定性强，进一步增强移动过程中衬垫4对容器的固定保护作用。

本实施例中，还可以在盒体1内腔的底部固设有定位板，定位板上设有定位槽，定位槽与衬垫4上的容器放置孔41相对应。放置容器时，将容器向下插入衬垫4上的容器放置孔41内，直到容器底部置于定位槽中，容器上部由容器放置孔41进行固定，底部被定位槽固定，在移动过程中，不会发生倾斜，从而增强容器的稳定性，也增强PCR检测试剂盒的使用性。具体的，定位板可以选用海绵定位板，在海面定位板上挖有定位槽；定位板还可以由软质发泡材料制成，软质发泡材料是以塑料(PE、EVA等)、橡胶(SBR、CR等)等为原材料，加以催化剂、泡沫稳定剂、发泡剂等辅料，通过物理发泡或交联发泡，使塑料和橡胶中出现大量细微泡沫，体积增加，密度减少，软质发泡材料质量轻、柔软度好，具备缓冲、吸音、吸震、保温、过滤等功能，可以对容器进行固定、缓冲减震。

最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本实用新型的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本实用新型进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本实用新型各实施例技术方案的范围。