中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中屯、保藏，保 藏号为；CGMCCNo. 7968。本发明的菌株的细胞形态及生理生化特征见表1。本实施例的解 淀粉芽抱杆菌CD-17菌株的16SrDNA基因序列和gy巧基因序列见"
【发明内容】
"。
[0026] 用本发明的植物伤根修复和防病的CD-17菌株制备的微生物制剂，其制备方法包 括W下步骤：
[0027] (A)菌液的获得
[002引挑取事先在PDA固体培养基上培养好的CD-17菌株单菌落斑，接种于装有5mL PD液体培养液（PDA培养基不加琼脂）的容积为20mL的S角瓶中，于30°C、200rpm条件下培养 16h，将培养液5mL全部接种于装有400mL PD培养液的容积为lOOOmL的S角瓶中，200巧m、 30°C条件下培养16h ;把所得的400mL培养液接种于装有20L培养液的容积为3化的发酵罐 (镇江东方GUS-30)，2化发酵培养液中固容物含量为；黄豆粉lOOg、水溶性淀粉200g、庶糖 25g、酵母粉25gXaC0320g、MnS04l. Og，设置发酵条件为；溶氧100%，揽拌速度为35化pm，发 酵温度33°C，发酵时间2化，抑7. 0-7. 2 ;
[0029] 炬）微生菌剂的加工
[0030] 微生物菌剂的加工步骤；（1)将上述发酵液在8000巧m条件下离屯、lOmin，弃 上清，沉淀物用1000血20%丙S醇溶液（V/V)重新悬浮（20%丙S醇溶液中溶有16克 N&Cl)，测定悬浮液的活芽抱含量，根据测定结果用20%丙S醇溶液（V/V)调节悬浮液的活 芽抱数至终芽抱含量为1. 0-2.8Xl〇i°c化/mL; (2)在上述调节好的悬浮液中按40g/L(W/V) 的用量加入膜化小麦粉，并揽拌均匀，得成品微生物制剂的活芽抱数约为1.OXl(Tc化/mL， 置5 °C低温保存。
[0031] 实施效果
[0032] (1)CD-17微生物菌剂对草替枯萎病的田间防治试验
[0033] 试验处理方法；本试验在江苏省镇江市云兔草替合作社大棚种植园进行，草替品 种为"宁玉"。药剂处理；（1)CD-17微生物菌剂100倍液；（2) 1. 0Xl(Tc化/g枯草芽抱杆菌 可湿性粉剂100倍液；（3)对照用清水。将草替苗从苗圃上挖出洗净根部±壤，将洗净的草 替苗根部浸入上述药剂处理中3分钟后移载；在移栽后将处理和对照的草替上诱草替枯萎 病菌分生抱子液（1. 0X105c化/mL) 100血/株。每处理浸400棵草替苗，试验设4重复，于 2013年9月6日移栽，移栽后60d检查并计算防效。
[0034] 结果；田间试验结果（表2)表明，CD-17微生物菌剂100倍液浸根处理对草替枯 萎病的防治效果为92. 35%，相比之下枯草芽抱杆菌可湿性粉剂100倍液浸根对草替枯萎 病的防治效果只为68. 81%，两药剂间达到统计水平差异。
[0035] 表2. CD-17微生物菌剂对草替枯萎病的田间防治试验结果
[0036]
[0037] 注；不同大写字母表示P<0. 01。
[003引（2)CD-17微生物菌剂对草替黄萎病的田间防治试验
[0039] 试验处理方法；本试验在江苏省镇江市云兔草替合作社大棚种植园进行，草替品 种为"宁玉"。药剂处理；（1)CD-17微生物菌剂100倍液；（2) 1. 0Xl(Tc化/g枯草芽抱杆菌 可湿性粉剂100倍液；（3)对照用清水。将草替苗从苗圃上挖出洗净根部±壤，将洗净的草 替苗根部浸入上述处理中3分钟后移载；在移栽后将处理和对照的草替上诱草替黄萎病菌 分生抱子液（1. 0X105c化/mL) 100血/株。每处理浸400棵草替苗，试验设4重复，于2013 年9月6日移栽，移栽后60d检查并计算防效。
[0040] 结果；田间试验结果（表如表明，CD-17微生物菌剂100倍液浸根处理对草替黄 萎病的的防治效果为84. 71%，相比之下枯草芽抱杆菌可湿性粉剂100倍液浸根对草替黄 萎病的防治效果只为40. 06%，两药剂间达到统计水平差异。
[0041] 表3.CD-17微生物菌剂对草替黄萎病的田间防治试验结果
[0042]
[0043] 注；不同大写字母表示P<0. 01。
【主权项】
1. 一株解淀粉芽孢杆菌菌株，其分类命名为解淀粉芽孢杆菌CD-17 MaciBy1S ⑶-17)，其已在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保 藏，保藏号为：CGMCC No. 7968。2. 根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌菌株，其特征在于该菌株的16S rDNA基因序 列如SEQ ID NO: 1所示。3. 根据权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌菌株，其特征在于该菌株的^^基因序列如 SEQ ID NO:2 所示。4. 权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌菌株在防治草莓枯萎病和黄萎病上的应用。5. -利用权利要求1所述解淀粉芽孢杆菌菌株制备而成的微生物制剂。6. -种制备权利要求5所述的微生物制剂的方法，其特征在于包括以下步骤： (A)菌液的获得 挑取事先在PDA固体培养基上培养好的CD-17菌株单菌落斑，接种于装有5 mL 液 体培养液（PDA培养基不加琼脂）的容积为20 mL的三角瓶中，于30 °C、200 rpm条件下培 养16 h，将培养液5 mL全部接种于装有400 mL 培养液的容积为1000 mL的三角瓶中， 200 rpm、30°C条件下培养16 h;把所得的400mL培养液接种于装有20 L培养液的容积为 30L的发酵罐； B微生菌剂的加工 (1) 将步骤(A)所得发酵液在8000 rpm条件下离心10min,弃上清，沉淀物用1000 mL 20%丙三醇溶液（V/V)重新悬浮，测定悬浮液的活芽孢含量，根据测定结果用20%丙三醇溶 液（V/V)调节悬浮液的活芽孢数至终芽孢含量为I. 0-2. 8X 1010 cfu/mL ; (2) 将上述步骤（1)调节好的悬浮液中按40 g/L (W/V)的用量加入胰化小麦粉，并搅 拌均匀，得成品微生物制剂的活芽孢数约为1.0X1010 cfu/mL，置5 °C低温保存。
【专利摘要】本发明为一种解淀粉芽孢杆菌CD-17菌株（其在CGMCC的保藏编号为CGMCC No.7968）及发酵液制备成微生物制剂的方法。该制剂在修复植物伤根的同时能有效防治草莓枯萎病和黄萎病。CGMCC No.796820130726
【IPC分类】C12N1/20, A01N63/02, A01P3/00, C12R1/07
【公开号】CN104988100
【申请号】CN201510456183
【发明人】杨敬辉, 陈宏州
【申请人】江苏丘陵地区镇江农业科学研究所
【公开日】2015年10月21日
【申请日】2015年7月29日