酵母和1g氯化钠溶于IL去离子水中，调节pH值为7左右。高温高压灭菌后保存。用接种环将菌株成团泛菌属MH接入得到的10mL培养基溶液中。之后将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。随后，吸取ImL活化后菌液转接至已灭菌的10mL的培养基中，再次将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。取50mL对数期菌液于离心管中，在8000rpm条件下离心5分钟。结束后，去除上清液，收集管内底部的细胞。将收集得到的细胞分散至50mL已灭菌的去掉NaCl的LB培养基中。加入一定量的硝酸银溶液，使溶液中银离子的最终浓度达到ImM。将混合溶液置于摇床中，在30°C，150rpm的条件下培养Sh后，即可得到银纳米颗粒。
[0027]实施例2金纳米颗粒
[0028]称取1g蛋白胨、5g酵母和1g氯化钠溶于IL去离子水中，调节pH值为7左右。高温高压灭菌后保存。用接种环将菌株成团泛菌属MH接入得到的10mL培养基溶液中。之后将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。随后，吸取ImL活化后菌液转接至已灭菌的10mL的培养基中，再次将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。取50mL对数期菌液于离心管中，在8000rpm条件下离心5分钟。结束后，去除上清液，收集管内底部的细胞。将收集得到的细胞分散至50mL已灭菌的PBS缓冲液中。加入一定量的氯金酸溶液，使溶液中金离子的最终浓度达到1.8mM。将混合溶液置于摇床中，在30°Ca50rpm的条件下培养4h后，即可得到金纳米颗粒。
[0029]实施例3钯纳米颗粒
[0030]称取1g蛋白胨、5g酵母和1g氯化钠溶于IL去离子水中，调节pH值为7左右。高温高压灭菌后保存。用接种环将菌株成团泛菌属MH接入得到的10mL培养基溶液中。之后将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。随后，吸取ImL活化后菌液转接至已灭菌的10mL的培养基中，再次将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。取50mL对数期菌液于离心管中，在8000rpm条件下离心5分钟。结束后，去除上清液，收集管内底部的细胞。将收集得到的细胞分散至50mL已灭菌的PBS缓冲液中。加入一定量的硝酸钯溶液，使溶液中钯离子的最终浓度达到2mM。将混合溶液置于摇床中，在30°Ca50rpm的条件下培养Sh后，即可得到钯纳米颗粒。
[0031]实施例4砸纳米颗粒
[0032]称取1g蛋白胨、5g酵母和1g氯化钠溶于IL去离子水中，调节pH值为7左右。高温高压灭菌后保存。用接种环将菌株成团泛菌属MH接入得到的10mL培养基溶液中。之后将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。随后，吸取ImL活化后菌液转接至已灭菌的10mL的培养基中，再次将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h。取50mL对数期菌液于离心管中，在8000rpm条件下离心5分钟。结束后，去除上清液，收集管内底部的细胞。将收集得到的细胞分散至50mL已灭菌的LB培养基中。加入一定量的亚砸酸钠溶液，使溶液中砸离子的最终浓度达到2mM。将混合溶液置于摇床中，在30°Ca50rpm的条件下培养4h后，即可得到砸纳米颗粒。
【主权项】
1.一种纳米颗粒制备方法，其特征在于按照下述步骤进行: (1)菌株活化及接种:用接种环将菌株成团泛菌属IMH接入已灭菌的培养基溶液，将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h，随后吸取ImL活化后菌液转接至新鲜得到的培养基溶液，再次将溶液置于摇床中，在30°C，150rpm条件下震荡培养12h ; (2)细胞收集:将步骤(I)中得到的菌液在已灭菌的氛围下，转移至离心管内，在转速为SOOOrpm的条件下离心5分钟，离心结束后弃去上清液，收集离心管内下部菌体； (3)银原位还原:将步骤(2)中得到的菌体分散至去掉NaCl的LB培养基中，加入浓度为ImM的银离子，反应8h，得到粒径为10nm的银纳米颗粒； (4)金原位还原:将步骤(2)中得到的菌体分散至PBS缓冲液中，加入浓度为1.SmM的金离子，反应4h，得到粒径为30nm的金纳米颗粒； (5)钯原位还原:将步骤(2)中得到的菌体分散至PBS缓冲液中，加入浓度为2mM的钯离子，反应8h，得到粒径为50nm的钯纳米颗粒； (6)砸原位还原:将步骤(2)中得到的菌体分散至LB培养基中，加入浓度为2mM的砸离子，反应4h，得到粒径为SOnm的钯纳米颗粒。2.如权利要求1所述的一种纳米颗粒制备方法，步骤(I)中培养基的配制方法为:称取Ig蛋白胨，0.5g酵母和Ig氯化钠溶于10mL去离子水中，调节pH值为7。3.如权利要求1所述的一种纳米颗粒制备方法，步骤(I)中灭菌方法为:将配好的培养基置于灭菌锅中，在120°C下，高温灭菌20min，之后室温下冷却保存。4.如权利要求1所述的一种纳米颗粒制备方法，得到的菌体OD600= 1.005.如权利要求1所述的一种纳米颗粒制备方法，步骤⑶中，去掉NaCl的LB培养基的配制方法为:lg蛋白胨和0.5g酵母溶于10mL去离子水中，调节pH值为7。6.如权利要求1所述的一种纳米颗粒制备方法，步骤(4-5)中，PBSbuffer的配制方法为:称取磷酸二氢钾0.27g，磷酸氢二钠1.42g，氯化钠Sg和氯化钾0.2g，加去离子水约800mL充分搅拌溶解，然后加入浓盐酸调pH至7.4，定容至1L。
【专利摘要】本发明利用蛋白胨、酵母和NaCl配制培养基，培养菌株成团泛菌属IMH细胞。收集菌体细胞后将其根据所需合成纳米颗粒的不同分散至不同的培养体系中，加入适当浓度的金属离子。反应数小时后，根据反应时间不同可分离收集得到不同粒径的金属纳米颗粒材料。整个工艺具有绿色环保、操作简便且成本低廉的特点，得到的纳米颗粒材料在催化、吸附和检测等诸多方面具有广阔的应用前景。
【IPC分类】C12P3/00, C12R1/01
【公开号】CN105112453
【申请号】CN201510601633
【发明人】景传勇, 刘文婧, 杜晶晶
【申请人】中国科学院生态环境研究中心
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月19日