注损伤，急性肝衰竭， 肝纤维化，肺纤维化，肾纤维化，系统性纤维化，急性同种异体移植排斥，慢性同种异体移植 肾病，糖尿病肾病，肾小球肾病，心肌病，心力衰竭，心肌缺血，心肌梗死，系统性硬化，热损 伤，烧伤，肥大性疤痕，瘢痕疙瘩，龈炎发热，肝硬化或肿瘤，骨质调节，肌萎缩侧索硬化，多 发性硬化，阿尔茨海默病，帕金森病，卒中，一过性缺血发作或葡萄膜炎；
[0173] 式（I)的化合物，其用于治疗或预防疼痛，动脉粥样硬化，老年性黄斑退化症，糖 尿病性视网膜病，青光眼，视网膜静脉闭塞，早产儿视网膜病，眼缺血综合征，地图样萎缩， 糖尿病，炎症，炎性肠病，缺血-再灌注损伤，急性肝衰竭，肝纤维化，肺纤维化，肾纤维化， 系统性纤维化，急性同种异体移植排斥，慢性同种异体移植肾病，糖尿病肾病，肾小球肾病， 心肌病，心力衰竭，心肌缺血，心肌梗死，系统性硬化，热损伤，烧伤，肥大性疤痕，瘢痕疙瘩， 龈炎发热，肝硬化或肿瘤，骨质调节，肌萎缩侧索硬化，多发性硬化，阿尔茨海默病，帕金森 病，卒中，一过性缺血发作或葡萄膜炎；以及
[0174]用于治疗或预防疼痛，动脉粥样硬化，老年性黄斑退化症，糖尿病性视网膜病，青 光眼，视网膜静脉闭塞，早产儿视网膜病，眼缺血综合征，地图样萎缩，糖尿病，炎症，炎性肠 病，缺血-再灌注损伤，急性肝衰竭，肝纤维化，肺纤维化，肾纤维化，系统性纤维化，急性同 种异体移植排斥，慢性同种异体移植肾病，糖尿病肾病，肾小球肾病，心肌病，心力衰竭，心 肌缺血，心肌梗死，系统性硬化，热损伤，烧伤，肥大性疤痕，瘢痕疙瘩，龈炎发热，肝硬化或 肿瘤，骨质调节，肌萎缩侧索硬化，多发性硬化，阿尔茨海默病，帕金森病，卒中，一过性缺血 发作或葡萄膜炎的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用有效量的式（I)的化合物。
[0175] 本发明特别涉及式（I)化合物，其用于治疗或预防缺血，再灌注损伤，肝纤维化或 肾纤维化，特别是缺血或再灌注损伤。
[0176] 本发明尤其涉及式（I)的化合物，其用于治疗或预防心肌梗死。
[0177] 本发明还尤其涉及式（I)的化合物，其用于治疗或预防老年性黄斑退化症，糖尿 病性视网膜病，青光眼，视网膜静脉闭塞，早产儿视网膜病，眼缺血综合征，地图样萎缩或葡 萄膜炎。
[0178] 本发明还尤其涉及式（I)的化合物，其用于治疗或预防肌萎缩侧索硬化或多发性 硬化。
[0179] 本发明还涉及根据本发明的方法制备的式（I)的化合物。
[0180] 本发明的另一实施方案提供药物组合物或药物，其包含本发明的化合物和治疗惰 性载体，稀释剂或赋形剂，以及使用本发明的化合物制备这种组合物和药物的方法。在一 个实例中，可以将式（I)化合物如下配制：通过在环境温度在合适的PH，并在期望的纯度程 度，与生理学上可接受的载体即在所采用的剂量和浓度对受者无毒的载体混合成盖仑给药 形式。制剂的pH主要取决于具体的用途和化合物的浓度，但是优选在约3至约8范围内的 任意处。在一个实例中，将式（I)化合物在乙酸盐缓冲液中在pH5配制。在另一个实施方 案中，式（I)化合物是无菌的。可以将化合物例如作为固体或非晶组合物，作为冻干的制剂 或作为水溶液储存。
[0181] 以与良好医疗实践相一致的方式将组合物配制，定剂量，和给药。在此考虑的因素 包括所治疗的具体病症，所治疗的具体哺乳动物，个体患者的临床状况，病症的原因，药剂 的输送位置，给药方法，给药的时间安排，和执业医师已知的其他因素。
[0182] 本发明的化合物可以通过任何合适的方式给药，包括口服，局部（包括含服和舌 下），直肠，阴道，经皮，肠胃外，皮下，腹膜内，肺内，皮内，鞘内和硬膜外和鼻内，并且，如果 需要局部治疗，则病灶内给药。肠胃外输液包括肌肉内，静脉内，动脉内，腹膜内，或皮下给 药。
[0183] 本发明的化合物可以以任何方便的给药形式给药，例如，片剂，散剂，胶囊，溶液 剂，分散剂，混悬剂，糖浆剂，喷雾剂，栓剂，凝胶，乳剂，贴剂，等。这样的组合物可以含有药 物制剂中的常规组分，例如，稀释剂，载体，pH调节剂，甜味剂，填充剂，和其他活性剂。
[0184] 典型的制剂通过混合本发明的化合物和载体或赋形剂制备。合适的载体 和赋形剂是本领域技术人员周知的并详述于，例如，Ansel，HowardC.，等，Ansel's PharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems.Philadelphia：Lippincott? Williams&Wilkins，2004 ;Gennaro,AlfonsoR.，等Remington:TheScienceandPractice ofPharmacy.Philadelphia：Lippincott?ffilliams&ffilkins?2000 ；和Rowe，Raymond C.HandbookofPharmaceuticalExcipients.Chicago，PharmaceuticalPress? 2005 ^ 〇 制剂还可以包括一种或多种缓冲剂，稳定剂，表面活性剂，润湿剂，润滑剂，乳化剂，助悬剂， 防腐剂，抗氧化剂，遮光剂（opaquingagent)，助流剂，加工助剂，着色剂，甜味剂，加香剂， 增味剂，稀释剂和其他已知添加剂，以提供药物（即，本发明的化合物或其药物组合物）的 优良存在形式或协助制备药物产品（即，药品）。
[0185] 现将通过以下没有限制性质的实施例说明本发明。 实施例
[0186] 缩写
[0187]MS=质谱；EI=电子电离；ESI=电喷；NMR数据以相对于内标四甲基硅烷的份 /百万（S)报告并且参比于来自样品溶剂（d6-DMS0,除非另外说明）的氘锁信号；偶合常 数（J)以Hertz计，mp=恪点；bp=沸点；DIEA=N-乙基-N-异丙基丙-2-胺；DBU= 1，8_二氮杂二环[5. 4.0]i^一 -7-烯；DCM=二氯甲烷；DMA=二甲基乙酰胺；DMF=二甲基 甲酰胺；DMS0=二甲亚砜；dppf= 1，1'-双（二苯基膦基）二茂铁；HATU= 2-(3H-[l，2,3] 三唑并[4,5-b]吡啶-3-基）-1，1，3,3_四甲基异脲鐵六氟磷酸盐（V);HBTU= 0-苯并 三唑-N，N，N'，N' -四甲基-脲鐵-六氟-磷酸盐；HPLC=LC=高效液相色谱；m-CPBA =间-氯过苯甲酸；Rt=保留时间；TBAF=四-正-丁基氟化铵；TBTU= 0-(苯并三 唑-1-基）-N，N，N'，N' -四甲基-脲镣:-四氟硼酸盐；TEMPO= 2, 2, 6, 6-四-甲基哌啶 1- 氧基；TBME=甲基叔丁基醚，THF=四氢呋喃；TFA=三氟乙酸；tic=薄层色谱法；CAN =CAS登记号。
[0188] 实施例1
[0189] 6-叔丁基-4-(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）_[ (4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑并 [3, 4-d]嘧啶
[0190] 幻5-氨基-1-[(4-甲氧基苯基）甲基]-111-吡唑-4-腈
[0191]
[0192]将[(4-甲氧基苯基）甲基]肼二盐酸盐（CAN412327-07-2,1.0g，4.44mmol)， 2- (乙氧基亚甲基）-丙二腈（CAN123-06-8,0. 542g，4. 44mmol)和DIEA(1. 55mL， 8. 88mmol)合并在乙醇（7mL)中并将反应混合物在100°C搅拌3小时。在冰水中冷却后， 产物沉淀。过滤和干燥产生标题化合物（0. 597g，59% )，为黄色固体；LC-MS(UV峰面积， ESI)87%, 229. 4[MH+] 〇
[0193]b) 5-氨基-1_[ (4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑-4-甲酰胺
[0194]
[0195] 在0-5 °C向氢氧化钾（1. 51g，27mmol)在水（15mL)中的溶液加入过氧化氢 (3. 64mL，119mmol)和 5-氨基-l-[(4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑-4-腈（0? 55g， 2.4mmol)在二〖惡烷（30mL)中的溶液。除去冷却并将反应混合物在环境温度搅拌18小时。 将混合物在水（2x50mL)和乙酸乙酯之间分配；将有机相分离，用Na2S04干燥，过滤并在真空 中浓缩。通过自乙酸乙酯/庚烷结晶纯化粗物质从而提供所需的产物（〇.51g，85%)，为浅 黄色固体；LC-MS(UV峰面积，ESI) 86%，247. 5 [MH+]。
[0196] 〇)5-(2,2-二甲基-丙酰氨基）-1-[(4-甲氧基苯基）甲基]-111-吡唑-4-甲酸酰 胺
[0197]
[0198] 在0°C向5-氨基-1_[(4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑-4-甲酰胺（400mg， 1.62mmol)在DMA(4mL)和THF(6mL)中的溶液加入新戊酰氯（200yL，1.62mmol)和吡啶 (158yL，1. 95mmol)并将混合物在0°C搅拌1. 5小时，继之以在室温搅拌2小时。将混合 物在水（2x30mL)和DCM之间分配；将有机相分离，用Na2S04干燥，过滤并在真空中浓缩。 将粗物质通过急骤色谱法（二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷梯度）纯化从而提供所需的产物 (1.〇7g)，为浅黄色油，其仍含有一些DMA。将该物质在不进行纯化的情况下用于下一步； LC-MS(UV峰面积，ESI) 77%，331. 5 [MH+]。
[0201] 将5-(2, 2-二甲基-丙酰氨基）-1_[(4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑-4-甲酸 酰胺（〇. 54g，1. 63mmol)在氢氧化钠溶液（1N，10mL)中的溶液在80°C搅拌2.5小时。冷却
[0199]d)6_叔丁基-1,5-二氢-1_[(4-甲氧基苯基）甲基]-4H-吡唑并[3,4_d]嘧 啶-4-酮
[0200] 后，加入水（30mL)并将混合物用DCM萃取。将有机相合并，用Na2S04干燥，过滤并在真空中 浓缩。将粗物质通过急骤色谱法（二氧化硅，乙酸乙酯/庚烷梯度）纯化从而提供所需的 产物（154mg，60%，两个步骤），为白色固体；LC-MSOJV峰面积，ESI)95%，313. 5[MH+]。
[0202]e)6_叔丁基-4-氯-1_[(4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑并[3,4_d]嘧啶
[0203]
[0204] 将6-叔丁基-1,5-二氢-1_[(4-甲氧基苯基）甲基]-4H-吡唑并[3,4_d]嘧 啶-4-酮（0? 154g，0.49mmol)，磷酰氯（1.57mL，16.9mmol)和N，N-二乙基苯胺（157yL， 0. 99mmol)的混合物在120°C搅拌4. 5小时。将磷酰氯在真空中除去并将剩余物在水和乙 酸乙酯之间分配；将有机相合并，用Na2S04干燥，过滤并在真空中浓缩从而提供所需的产物 (144mg)，为深绿色油。将该物质在不进行纯化的情况下用于下一步。
[0205]f) 6-叔丁基-4-(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）_1_ (4-甲氧基-苄基）-lH_吡唑并 [3, 4-d]嘧啶
[0206]
[0207] 将6-叔丁基-4-氯_1-[ (4-甲氧基苯基）甲基]-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧 啶（0? 144g，0? 44mmol)，3, 3-二氟吡咯烷盐酸盐（62. 5mg，0? 44mmol)和DIEA(380yL， 2. 18mmol)在DMF(3mL)中的混合物在120°C微波处理1小时。冷却后，将混合物在水和乙 酸乙酯之间分配。将有机相合并，用Na2S04干燥，过滤并在真空中浓缩。将粗物质通过急骤 色谱法（二氧化娃，乙酸乙酯/庚烷梯度）纯化从而提供所需的产物（174mg，87%，两个步 骤），为黄色油；LC-MS(UV峰面积，ESI) 90 %，402. 6 [MH+]。
[0208] 实施例2
[0209] 1-苄基-6-叔丁基-4- (3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶
[0210]
[0211] 类似于实施例lc至lf，使用5-氨基-l-(苯基甲基）-lH-吡唑-4-甲酰胺（CAN 56156-22-0)，新戊酰氯和3, 3-二氟吡咯烷盐酸盐作为起始物料合成标题化合物，并且分 离（96mg)为黄色固体；LC-MS(UV峰面积，ESI) 93%，372. 6 [MH+]。
[0212] 实施例3
[0213] (S)-l_[6-叔丁基-1-[(2_氯苯基）甲基]-1H-吡唑并[3,4_d]嘧啶-4-基]-吡 咯烷-3-醇
[0214]
[0215] 类似于实施例lc至lf，使用5-氨基-1-[(2_氯苯基）甲基]-1H-吡唑-4-甲酰 胺（CAN106898-48-0)，新戊酰氯和（S)-3-羟基吡咯烷（CAN100243-39-8)作为起始物料 合成标题化合物，并且分离（2. 5mg)为无色油；LC-MS(ESI)386. 5[MH+]。
[0216] 实施例4
[0217] 6-叔丁基-1-[(2_氯苯基）甲基]_4-(3,3-二氟-吡咯烷-1-基）-111-吡唑并 [3, 4-d]嘧啶
[0218]
[0219] 类似于实施例lc至lf，使用5-氨基-1-[(2_氯苯基）甲基]-1H-吡唑-4-甲酰 胺（CAN106898-48-0)，新戊酰氯和3, 3-二氟吡咯烷盐酸盐作为起始物料合成标题化合 物，并且分离（16mg)为无色油；LC-MS(UV峰面积，ESI) 74%，406. 5 [MH+]。
[0220] 实施例5
[0221] 6-叔丁基-1-[(2_氯苯基）甲基]-4-乙氧基-1H-吡唑并[3,4_d]嘧啶
[0222]
[0223] 类似于实施例lc至lf，使用5-氨基-1-[(2_氯苯基）甲基]-1H-吡唑-4-甲酰 胺（CAN106898-48-0)，新戊酰氯和乙醇作为起始物料合成标题化合物，并且分离（15mg) 为无色油；LC-MS(UV峰面积，ESI) 83%，345. 5 [MH+]。
[0224] 实施例6
[0225] 6-叔丁基-1-[(2_氯-4-氟苯基）甲基]_4-(3,3-二氟-吡咯烷-1-基）-111-吡 唑并[3, 4-d]嘧啶
[0226] a)6-叔丁基-4- (3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶
[0227]
[0228] 向6-叔丁基-4- (3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1- (4-甲氧基-苄基）-1H-吡唑并 [3,4-(1]嘧啶（0.1748,0.43臟〇1)和了卩厶(870 1^，11.3臟〇1)在0〇1(31111)中的混合物加入 甲磺酸（141yL，2. 17mmol)。将混合物在0°C搅拌1小时并且在室温搅拌1. 5小时。然后， 将混合物用氢氧化钠溶液（2. 5mL，25%，冷却）变成碱性并且在水和DCM之间分配。将有机 相合并，用MgS04干燥，过滤并在真空中浓缩。在不进行进一步纯化的情况下使用剩余物， 135mg的标题化合物，为浅黄色固体；LC-MS(UV峰面积，ESI) 80%，282. 5 [MH+]。
[0229]b) 6-叔丁基-1- (2-氯-4-氟-苄基）-4- (3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1H-吡唑 并[3, 4-d]嘧啶
[0230]
[0231]向 6-叔丁基-4-(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-lH-吡唑并[3, 4-d]嘧啶（30mg， 107ymol)在丙酮（lmL)和DMF(2mL)中的溶液加入2-氯-l-(氯甲基）-4_氟-苯（23mg， 128ymol)和碳酸钾（44mg，318ymol)。将混合物在120°C微波处理45分钟，冷却并在水和 乙酸乙酯之间分配。将有机相合并，通过用CheinElut?过滤来干燥，并且在真空中浓缩。 将剩余物通过制备型HPLC(GeminiNX，水/乙腈梯度）纯化，从而提供标题化合物（13mg， 29% )，为浅黄色油；LC-MS(UV峰面积，ESI) 78%，424. 5 [MH+]。
[0232] 实施例7
F[0235] 类似于实施例6b，使用6-叔丁基_4_(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-lH_吡唑并 [3,4-d]嘧啶（实施例6a)和1-(氯甲基）-2-(三氟甲基）-苯（CAN21742-00-7)作为起 始物料合成标题化合物，并且分离（7mg，14%)为无色油；MS(ESI) 440.6[MH+]。[0236] 实施例8[0237] 6-叔丁基-4-(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1_苯乙基-1H-吡唑并[3, 4-d]嘧啶[0238]
[0233] 6-叔丁基-4-(3,3-二氟-吡咯烷-1-基）-1-[(2-三氟甲基苯基）甲基]-111-吡 唑并[3, 4-d]嘧啶
[0234]
[0239] 类似于实施例6b，使用6-叔丁基_4-(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-lH_吡唑并 [3, 4-d]嘧啶（实施例6a)和（2-溴乙基）-苯（CAN103-63-9)作为起始物料合成标题化 合物，并且分离（l〇mg，24% )为无色油；MS(ESI)386.6[MH+]。
[0240] 实施例9
[0241] 6-叔丁基-4- (3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1- (4-甲基-呋咱-3-基甲基）-1H-吡 唑并[3, 4-d]嘧啶
[0242]
[0243] 向6-叔丁基_4_(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-lH_吡唑并[3, 4-d]嘧啶（实施 例 6a，30mg，107ymol)在THF(0? 3mL)和DMA(0? 5mL)中的溶液加入 3-(氯甲基）-4-甲 基-1，2, 5-噁二唑（28mg，213ymol)和叔丁醇钾（24mg，213ymol)。将混合物在 110°C微波 处理20分钟，冷却并在水和乙酸乙酯之间分配。将有机相合并，通过用ChemElut?过滤来 干燥，并且在真空中浓缩。将剩余物通过制备型HPLC(GeminiNX，水/乙腈梯度）纯化，从而 提供标题化合物（6mg，14% )，为浅黄色油；LC-MS(UV峰面积，ESI) 94. 9%，378. 1855 [MH+]。
[0244] 实施例10
[0245] 6-叔丁基-4-(3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）_1_ (2-甲磺酰基-苄基）-lH_吡唑并 [3, 4-d]嘧啶
[0246]
[0247] 类似于实施例9,使用6-叔丁基-4_(3,3-二氟-吡咯烷-1-基）-lH_吡唑并 [3,4-d]嘧啶（实施例6a)和1-(氯甲基）-2-(甲基磺酰基）-苯（CAN168551-51-7)作为 起始物料合成标题化合物，并且分离（611^，12%)为无色油山(：-1^(群峰面积451)89.3%， 450. 1776 [MH+] 〇
[0248] 实施例11
[0249] 6-叔丁基-4- (3, 3-二氟-吡咯烷-1-基）-1- (2-吡啶-3-基-乙基）-1H-吡唑 并[3, 4-d]嘧啶
[0250]
[0251] 类似于实施例9,使用6-叔丁基-4-(3,3_二氟-吡咯烷-1-基）-lH_吡唑并 [3,4-d]嘧啶（实施例6a)和2-(2-溴乙基）-吡啶（CAN39232-04-7)作为起始物料合成 标题化合物，并且分离（6mg，12% )为无色油；MS(ESI) 387.6[MH+]。
[0252] 实施例12