MS(ES，neg.ion)m/z:419.3[M-H] -[Ri 为 CH(CH3)(CH2CH3)或 CH2CH(CH3)2 的六氢 β 酸 两者为同分异构体目前无法分离]，图1中的2号峰所示。
[0046] 实施例2六氢β-酸单磷酸酯制备过程
[0047]
[0050] MS(ES，neg.ion)m/z:485.3[M-H] -[R^CH(CH3)2 的六氢 β 酸单磷酸酯二乙酯];
[0051 ] MS(ES，neg.ion)m/z:499.4[M-H] -[Ri 为 CH(CH3)(CH2CH3)或 CH2CH(CH3)2 的六氢 β 酸 单磷酸酯二乙酯，两者为同分异构体目前无法分离]。
[0052]实施例3六氢β-酸单磷酸酯二钠盐的合成
[0054] 办为〇1( CH3) 2、CH( CH3) (CH2CH3)或 CH2CH( CH3) 2。
[0055] 取六氢β-酸lOg，溶于30mL二氯甲烷中，加入三乙胺2.4g，搅拌降温至-5~0°C。三 氯氧磷3.7g溶于20mL二氯甲烷中，缓慢滴加到六氢β-酸溶液中，滴毕，搅拌反应lh，TLC监控 反应至终点。反应液升温至室温，搅拌下加入80mL水，混合均匀，分相。有机层用水洗涤 (15mLX3)，无水硫酸钠干燥，减压浓缩除去溶剂得棕色油状物六氢β-酸单磷酸酯9g。
[0056] 六氢β_酸单磷酸酯9g溶解在50mL四氢呋喃中形成溶液。氢氧化钠2.2g溶解在8mL 蒸馏水中冷却至室温，在剧烈搅拌下缓慢滴加到上述溶液中，滴毕，室温反应过夜得混悬 液，抽滤，滤渣用无水乙醇(5mLX3)洗涤得六氢β-酸单磷酸酯二钠盐(米黄色固体)8.1g。
[0057] MS(ES，neg.ion)m/z:485.3[M-Na] -[R^CH(CH3)2 的六氢 β 酸单磷酸酯二乙酯];
[0058] MS(ES，neg.ion)m/z:507.2[M-Na] -[办为01(013)(012013)或 CH2CH(CH3)2 的六氢 β 酸 单磷酸酯二乙酯，两者为同分异构体目前无法分离]。
[0059] 实施例4六氢β-酸单磷酸酯二乙酯的合成
[0060]
[0061 ]办为〇1( CH3) 2、CH( CH3) (CH2CH3)或 CH2CH( CH3) 2。
[0062] 在反应瓶中依次加入六氢β-酸40g，4-二甲氨基吡啶1.2g和无水二氯甲烧200mL， 搅拌溶解，除氧使体系充满氮气，并在冷槽中冷却至〇°C，一次性加入氯磷酸二乙酯25.5g， 搅拌均匀后缓慢滴加三乙胺15.1 g，滴毕后搅拌反应1 h。往反应体系中加入50mL水淬灭反 应，分液漏斗中静置分层，有机层水洗(50mLX3)，无水硫酸钠干燥后浓缩除去溶剂得粗产 物。粗产物在流动相为石油醚/乙酸乙酯(4:1~1:1)梯度洗脱的柱层析分离得六氢β-酸单 磷酸酯二乙酯43g，各组分含量分析如图3所示，其质谱图如图4所示。
[0063] MS(ES，pos · ion)m/z : 543 · SEM+HnRiSaKCHA的六氢β酸单磷酸酯二乙酯]，图3 中的保留时间为21.029的峰；
[0064] ]\^化5 4〇8.1〇11)111/2:557.4[]\?1] + [1?1为01(013)(012013)或01201(013)2的六氢0酸 单磷酸酯二乙酯，两者为同分异构体目前无法分离]，图3中的保留时间为25.167的峰。
[0065] 实施例5六氢β-酸单磷酸酯衍生物的热稳定性试验
[0066]将前述实施例制备的六氢β_酸单磷酸酯衍生物用玉米芯粉配制为终浓度质量分 数2%的预混剂。分别称取待测试样品(预混剂)于坩埚中，于100°C烘箱中处理不同时间后， 称取l.〇g样品（每个样平行制备3份)于具塞锥形瓶中加乙醇50ml，再滴加100yL浓盐酸，超 声提取5min，过滤，滤液转移至50ml量瓶中，乙醇定容至刻度，摇匀，取适量经0.45μπι微孔滤 膜过滤，进行HPLC分析。稳定性结果见表1，结果显示六氢β-酸单磷酸酯衍生物的热稳定性 均有不同程度的提高。
[0067] 表1六氢β-酸单磷酸酯衍生物100°C加热不同时间后主要成分的变化情况
[0068]
[0069] ~实施例6六氢(6-?单磷酸酯衍生物在肉鸡料中的应用效果 '
[0070] 900羽1日龄健康、生长状态相同且体重相近的快大黄羽肉鸡(母苗）按表2随机分 成9个处理组，每组100羽，并分别在每组中添加不同剂量的六氢β-酸、六氢β-酸单磷酸酯、 六氢β酸单磷酸酯二钠盐和六氢酸单磷酸酯二乙酯。试验期笼养，自由采食和自由饮水。 试验期共30天，试验期六氢β-酸单磷酸酯、六氢β酸单磷酸酯二钠盐和六氢β-酸单磷酸酯二 乙酯试验组在试验鸡的增重和料肉比方面均有显著改善，且比相同剂量的六氢酸对动物 的生产性能改进更明显(表3)。
[0071] 表2试验动物分组及添加剂用法、用量
[0072]
[0073]
[0074] 表3六氢β_酸单磷酸酯衍生物及六氢β_酸在鸡料中的应用的试验结果
[0075]
[0076] 实施例7六氢β_酸单磷酸酯衍生物在肉猪料中的应用效果
[0077] 180头体重相近的67日龄杜大长三元杂瘦肉型小猪随机分为9组，每组20头。按表4 每组添加不同种类或剂量的六氢酸单磷酸酯衍生物。试验期自由采食和饮水。试验期共 14天，试验期六氢β-酸单磷酸酯衍生物组在试验猪的增重和料肉比方面均有显著改善。分 组及结果见表4及表5。
[0078] 表4试验动物分组及添加剂用法、用量
[0079]
[0080]表5六氢β-酸单磷酸酯衍生物在猪料中的应用的试验结果 「00811
【主权项】
1. 六氢β-酸单磷酸酯衍生物，其结构式如式(I)所示：其中，Ri 为CH(CH3)2XH(CH3) (CH2CH3)或CH2CH(CH3) 2 ;R2 为H、Na、K、Li、順4+、&-4 直链或支 链烷基。2. 根据权利要求1所述的六氢β_酸单磷酸酯衍生物，其特征在于，R^Na。3. 根据权利要求1所述的六氢β_酸单磷酸酯衍生物，其特征在于，办为&-4直链或支链烷 基。4. 根据权利要求3所述的六氢β-酸单磷酸酯衍生物，其特征在于，RACH2CH3。5. 权利要求1-4任一项所述的六氢β-酸单磷酸酯衍生物在制备动物饲料添加剂中的应 用。6. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的动物饲料添加剂为动物促生长饲料 添加剂。7. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的动物为各个生长阶段的猪、鸡、鸭、 鹅、肉牛、奶牛、羊、鱼、奸、狐、紹或絡。8. 根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的六氢β-酸单磷酸酯衍生物作为动物 饲料添加剂时的用量为饲料质量的〇. 1~200ppm。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述的六氢β-酸单磷酸酯衍生物作为动物 饲料添加剂时的用量为饲料质量的2~25ppm。
【专利摘要】本发明公开了六氢β-酸单磷酸酯衍生物及其在制备动物饲料添加剂中的应用。六氢β-酸单磷酸酯衍生物，其结构式如式(Ⅰ)所示，其中，R1为CH(CH3)2、CH(CH3)(CH2CH3)或CH2CH(CH3)2；R2为H、Na、K、Li、NH4+、C1-4直链或支链烷基。本发明的六氢β-酸单磷酸酯衍生物对畜禽低毒或者无毒，其比目前专利覆盖相关化合物有更高的稳定性及更强的生长促进性能，因此更适合作为饲料用生长促进剂，在养殖行业具有非常好的应用前景。
【IPC分类】A23K20/195, A23K20/105, C07F9/117
【公开号】CN105481893
【申请号】CN201510909460
【发明人】彭险峰, 黄计军
【申请人】广州英赛特生物技术有限公司
【公开日】2016年4月13日
【申请日】2015年12月9日