专利名称：百合组织培养诱导成芽的方法
技术领域：
本发明涉及植物组织培养，具体地说是百合组织培养诱导成芽的方法。
背景技术：
植物组织培养是指在离体的条件下，将植物体的一部分，如一小段茎、一小块叶、甚至一个细胞，接种在培养基上，使它们重新形成一个完整植株的方法。组织培养的步骤有培养基的制作与接种材料的消毒、接种、植株诱导、生根和移栽。
其中常用的培养基为MS培养基，其配方为
百合花卉靠无性繁殖法繁殖，病毒逐代传递积累，危害日趋严重。分离花卉植物0.1-0.5毫米大小的生长点，培养得到的基本上是无病毒苗；去病毒后，植株生长势强，花朵变大，色泽鲜艳，抗逆能力提高，产花数量上升。这一技术将被广泛应用。现在的百合组织培养中增殖扩繁都是以丛生芽或愈伤组织的切割分离转移到新的培养基上进行继代培养，增加数量；但是现有的百合组培苗诱导分化中均采用上述常见的MS培养基，其中激素BA浓度为1.0mg/l，生长素NAA浓度为0.1mg/l，其芽的诱导率一般为76％，诱导率较低，而其分化后芽的扩繁系数通常也不高于4，扩繁系数不高。
发明内容
本发明的目的在于提供一种诱导率高、扩繁系数高的百合组织培养诱导成芽的方法。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为百合组织培养诱导成芽的方法，将百合植株经过消毒灭菌后，取茎尖组织接种于组培培养基(如；MS培养基)中培养，培养基中激素BA浓度为0.4～1.5mg/l，NAA浓度为0.1～0.5mg/l，茎尖组织直接分化出芽。
所述培养是在2000～3000LX每天12～14小时的光照，20～26℃的条件下培养，经过25～40天的培养；培养基中BA浓度较佳为0.4～0.6mg/l，最好为0.5mg/l；NAA浓度较佳为0.3～0.5mg/l，最好为0.5mg/l。
本发明的优点为采用改进的MS培养基，百合组培苗诱导分化速度快，缩短了百合形成商品球的时间；诱导率高(可达到92.7％)，而其分化后芽的扩繁系数高达6.2，芽长势好，有利于对百合进行下一步的继代培养操作。
具体实施例方式
实施例1百合组织培养诱导成芽的方法1)当百合芽长5～10cm时，取其茎尖分生组织，接种于MS培养基中，附加入BA(6-苄基氨基嘌呤)0.5mg/l、NAA(萘乙酸)0.5mg/l和蔗糖30g/l进行诱导；在2000～3000LX(本实施例为2000LX)每天12～14小时(本实施例为14小时)的光照条件下，20～26℃的温度条件下，30～40天后(本实施例为30天)，直接诱导出许多致密的不定芽，如果延长培养时间，则直接形成芽丛；将不定芽切割分离后重复转入上述培养基中，每25～35天(本实施例为30天)转接一次，可以大量增殖，形成许多高约2～3cm的小苗；平均扩繁系数可达6.2。
2)观察其不同激素浓度配比对百合芽的诱导作用效果将百合植株经过消毒灭菌后，取茎尖组织接种于以下实验改进的MS培养基中，培养基为MS+BA+NAA；经过30天的培养后，其长势情况如下表1-2。
a.在BA为0.5mg/l时，不同浓度的NAA含量对分化百合芽的诱导。
表1
从上表中可以看出当BA浓度及其他条件不变时，NAA浓度在0.3～0.5之间时百合芽的分化数量还可以，而最好的则属NAA 0.5mg/l；NAA浓度越大，芽分化的数量越多。
b.在NAA为0.5mg/l时，不同浓度的NAA含量对分化百合芽的影响。
表2
从上表中可以看出当NAA浓度及其他条件不变时，BA浓度在0.4～0.6之间时百合芽的分化数量还可以，而最好的则属BA 0.5mg/l；在0.4～0.5之间时，BA浓度越大，芽分化的数量越多，BA浓度超过0.5时，BA浓度越大，芽分化的数量越少。
从上表1-2可以看出，在百合组织培养诱导成芽的过程中，主要激素浓度配比的影响较大。其最佳的百合诱导成芽培养基为MS+BA 0.5mg/l+NAA 0.5mg/l，诱导率高达92.7％，分化后芽的扩繁系数高达6.2，芽长势好。
由于常规的MS培养基和WPM培养基均可在百合组织培养过程中应用，并且它们的组成成份中各组份的用量相差较大，而在本发明中起突出诱导作用的为BA和NAA，而对于改进的MS培养基中各组份用量无需严格限定，本发明组织培养中可采用改进的MS组成如下表3所示，其中还应添加有硝酸钾(KNO3)1000～1900mg/L、磷酸二氢钾(KH2PO4)170-340mg/L、碘化钾(KI)0.75～0.83mg/L和氯化钴(CoCl2)0.025～0.5mg/L，或添加有Ca(NO3)2·4H2O 350-556mg/L和K2SO4990～1450mg/L。
表3
权利要求
1.百合组织培养诱导成芽的方法，其特征在于将百合植株经过消毒灭菌后，取茎尖组织接种于组培培养基中培养，培养基中激素BA浓度为0.4～1.5mg/l，NAA浓度为0.1～0.5mg/l，茎尖组织直接分化出芽。
2.按照权利要求1所述百合组织培养诱导成芽的方法，其特征在于所述培养是在2000～3000LX每天12～14小时的光照，20～26℃的条件下培养，经过25～40天的培养，茎尖组织直接分化出芽。
3.按照权利要求1所述百合组织培养诱导成芽的方法，其特征在于所述培养基中BA浓度为0.4～0.6mg/l，NAA浓度为0.3～0.5mg/l。
4.按照权利要求1所述百合组织培养诱导成芽的方法，其特征在于所述培养基中BA浓度为0.5mg/l，NAA浓度为0.5mg/l。
全文摘要
本发明涉及植物组织培养，具体地说是百合组织培养诱导成芽的方法，将百合植株经过消毒灭菌后，取茎尖组织接种于组培培养基中培养，培养基中激素BA浓度为0.4～1.5mg/l，NAA浓度为0.1～0.5mg/l，茎尖组织直接分化出芽。本发明的优点为采用改进的MS培养基，百合组培苗诱导分化速度快，缩短了百合形成商品球的时间；诱导率高(可达到92.7％)，而其分化后芽的扩繁系数高达6.2，芽长势好，有利于对百合进行下一步的继代培养操作。
文档编号A01H4/00GK1903019SQ200510046958
公开日2007年1月31日 申请日期2005年7月29日 优先权日2005年7月29日
发明者潘利军 申请人:潘利军