专利名称：一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法
技术领域：
本发明属于植物提取技术领域，涉及一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，尤其是涉 及一种采用萃取技术和大孔树脂提取制备瑞香狼毒总黄酮的方法。
背景技术：
瑞香狼毒(Stellera Chamae jasme. L)，别名断肠草，火柴头花等。多年生草本植 物、根粗大、可入药。有大毒，能散结、逐水、止痛、杀虫。可治疗水气肿胀、淋巴结核、骨结 核。外用可治疥癣、瘙痒、顽固性皮炎、杀虫蝇、灭蛆。瑞香狼毒中的黄酮多为双黄酮类物质， 如狼毒素(chamae jasmin),新狼毒素(neochamae jasmin),异狼毒素(isochamae jasmin), 优狼毒素(euchanmaejasmin)，狼毒色酮(chamaechromone)等。现代研究证明瑞香狼毒中 的黄酮类物质有抑菌、抗氧化、抗肿瘤等作用。作为草原泛滥的毒草之一，可以变废为宝，具 有广大的开发潜力。由于所述黄酮很多都含以下结构，所以这些黄酮分子量接近，溶解性类 似。国内外提取黄酮的方法很多，有水煮法、有机溶剂提取法、酶解法、超临界萃取法、 超声波提取法、微波提取法。分离黄酮的方法有树脂吸附法、高效液相色谱法等。瑞香狼毒 的研究，目前仅限于药理和化学成分研究，提取工艺研究较少，中国专利CN1410424“新狼毒 素A的提取工艺”采用酸碱法提取、萃取、酰化、酸碱法还原制得新狼毒素Α，工艺中主要采 用的是化学手段，需要原料和反应能量的大量消耗。中国专利CN1544433 “瑞香狼毒中新 狼毒素B的提取分离方法及其应用”采用常压连续提取、柱色谱层析得产品，层析处理速度 慢。中国专利“瑞香狼毒植物性双黄酮类农用抑菌剂及其制备方法”采用化学提取，大孔树 脂分离的方法分离双黄酮，分配提取易导致原料浪费。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法。该方法能够得 到较高含量的瑞香狼毒总黄酮，操作简单，便于工业操作。本发明提取技术方案如下—种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，其特征在于，该方法按照下列步骤(1)将瑞香狼毒净制、干燥、粉碎，得粗粉；将粗粉与水按质量比1 1-5混合置于提取釜中，加热提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤渣再用20-50%乙醇超声提取1-2次，每 次0. 5-2小时，合并滤液；(2)滤液加热至50_80°C，搅拌条件下加入碱液，调节pH至8-13，保持10_30分钟， 趁热过滤，滤液在50-80°C，搅拌条件下用酸调节pH至2-5，静置冷却至室温，放置析出沉 淀，抽滤，收集沉淀物；(3)加去离子水分散沉淀物，以石油醚萃取至石油醚萃取层颜色变浅，弃石油醚萃 取液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的树脂柱，饱和吸附后依次用水、30% 乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，干燥即得瑞香狼毒总黄酮。所述步骤(1)中20-50%乙醇溶液用量为滤渣质量的4-10倍。所述步骤O)中碱液为氨水或氢氧化钠水溶液；所述酸为盐酸或硫酸水溶液。所述步骤(3)中加入的石油醚与分散液的体积比为0.5-2 1。所述步骤(3)中大孔树脂为HPD400、HPD500、AB-8中的一种。综上所述，本发明具有的优点1、本发明采用水煎煮和醇超声提取结合，提取充分。2、采用石油醚萃取脱除脂溶性杂质，使上柱液有效去除了杂质，减轻了对树脂吸 附干扰，使树脂对黄酮的吸附能力大大增强，更能适应规模化提取需要。3、大孔树脂分离温度低，有效减少了黄酮成分的分解。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式
具体实施例方式实施例1 将采购的瑞香狼毒全草净制、干燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；称取5kg瑞香狼毒 粉末用15L水加热至70V，提取3次，每次2小时，过滤，保留滤液，滤渣再加入30L50 %乙 醇水溶液超声提取半小时，合并所有滤液，加热至60°C，在搅拌下用氨水溶液调pH至11， 在60°C条件下保持10分钟，趁热过滤得到滤液，滤液在60°C条件下，边搅拌边加入盐酸水 溶液，调节PH至3，冷却至室温，静置析出沉淀，抽滤，收集沉淀物，加去离子水分散沉淀物， 用石油醚(沸程60°C )萃取至石油醚萃取层颜色变浅，每次石油醚用量为分散液体积的1 倍，弃石油醚萃取液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的AB-8大孔树脂柱，饱 和吸附后用水、30%乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，减压浓缩，低温真空干燥粉碎得干粉， 纯度93%。实施例2 将采购的瑞香狼毒全草净制、干燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；称取5kg瑞香狼毒 粉末用23L水加热至80°C，提取2次，每次3小时，过滤，保留滤液，滤渣再加入37L40 %乙 醇水溶液超声提取1小时，合并所有滤液，加热至50°C，在搅拌下用氢氧化钠水溶液调pH至 13，在50°C条件下保持20分钟，趁热过滤得到滤液，滤液在50°C条件下，边搅拌边加入盐酸 水溶液，调节PH至2，冷却至室温，静置析出沉淀，抽滤，收集沉淀物，加去离子水分散沉淀 物，用石油醚(沸程60°C)萃取至石油醚萃取层颜色变浅，每次石油醚用量为分散液体积的 0. 5倍，弃石油醚萃取液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的HPD400大孔树脂柱，饱和吸附后用水、30%乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，减压浓缩，低温真空干燥粉碎得 干粉，纯度95%。实施例3 将采购的瑞香狼毒全草净制、干燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；称取5kg瑞香狼毒 粉末用20L水加热至70°C，提取3次，每次1小时，过滤，保留滤液，滤渣再加入43L30%乙 醇水溶液超声提取1小时，合并所有滤液，加热至80°C，在搅拌下用氨水溶液调pH至8，在 80°C条件下保持15分钟，趁热过滤得到滤液，滤液在80°C条件下，边搅拌边加入硫酸水溶 液，调节PH至5，冷却至室温，静置析出沉淀，抽滤，收集沉淀物，加去离子水分散沉淀物，用 石油醚(沸程60°C )萃取至石油醚萃取层颜色变浅，每次石油醚用量为分散液体积的1. 5 倍，弃石油醚萃取液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的HPD500大孔树脂柱， 饱和吸附后用水、30 %乙醇洗脱，收集30 %乙醇洗脱液，减压浓缩，低温真空干燥粉碎得干 粉，纯度92%。实施例4 将采购的瑞香狼毒全草净制、干燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；称取15kg瑞香狼毒 粉末用30L水加热至80°C，提取3次，每次3小时，过滤，保留滤液，滤渣再加入120L40%乙 醇水溶液超声提取半小时，合并所有滤液，加热至70°C，在搅拌下用氢氧化钠水溶液调pH 至10，在70°C条件下保持30分钟，趁热过滤得到滤液，滤液在70°C条件下，边搅拌边加入盐 酸水溶液，调节PH至4，冷却至室温，静置析出沉淀，抽滤，收集沉淀物，加去离子水分散沉 淀物，用石油醚(沸程60°C)萃取至石油醚萃取层颜色变浅，每次石油醚用量为分散液体积 的2倍，弃石油醚萃取液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的HPD400大孔树脂 柱，饱和吸附后用水、30%乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，减压浓缩，低温真空干燥粉碎得 干粉，纯度65%。实施例5 将采购的瑞香狼毒全草净制、干燥、粉碎，得到瑞香狼毒粉末；称取35kg瑞香狼毒 粉末用170L水加热至70°C，提取2次，每次2. 5小时，过滤，保留滤液，滤渣再加入200L50% 乙醇水溶液超声提取1小时，合并所有滤液，加热至60°C，在搅拌下用氨水溶液条pH至12， 在60°C条件下保持15分钟，趁热过滤得到滤液，滤液在60°C条件下，边搅拌边加入盐酸水 溶液，调节PH至2，冷却至室温，静置析出沉淀，抽滤，收集沉淀物，加去离子水分散沉淀物， 用石油醚(沸程60°C )萃取至石油醚萃取层颜色变浅，每次石油醚用量为分散液体积的 1. 5倍，弃石油醚萃取液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的AB-8大孔树脂 柱，饱和吸附后用水、30%乙醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，减压浓缩，低温真空干燥粉碎得 干粉，纯度93%。
权利要求
1.一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，其特征在于，该方法按照下列步骤(1)将瑞香狼毒净制、干燥、粉碎，得粗粉；将粗粉与水按质量比1 1-5混合置于提取 釜中，加热提取2-3次，每次1-3小时，过滤，滤渣再用20-50%乙醇超声提取1-2次，每次 0. 5-2小时，合并滤液；(2)滤液加热至50-80°C，搅拌条件下加入碱液，调节pH至7.5_13，保持10-30分钟，趁 热过滤，滤液在50-80°C，搅拌条件下用酸调节pH至2-5，静置冷却至室温，放置析出沉淀， 抽滤，收集沉淀物；(3)加去离子水分散沉淀物，以石油醚萃取至石油醚萃取层颜色变浅，弃石油醚萃取 液，水层药液蒸去残留石油醚，缓慢加入预处理好的树脂柱，饱和吸附后依次用水、30 %乙 醇洗脱，收集30%乙醇洗脱液，干燥即得瑞香狼毒总黄酮。
2.如权利要求1所述的一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤(1)中 20-50%乙醇溶液用量为滤渣质量的4-10倍。
3.如权利要求1所述的一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤O)中 碱液为氨水或氢氧化钠水溶液；所述酸为盐酸或硫酸水溶液。
4.如权利要求1所述的一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中 加入的石油醚与分散液的体积比为0.5-2 1。
5.如权利要求1所述的一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中 大孔树脂为HPD400、HPD500、AB-8中的一种。
全文摘要
本发明公开了一种瑞香狼毒总黄酮的制备方法，属于植物提取技术领域。瑞香狼毒中总黄酮由水提、有机溶剂提取、浓缩，除杂，大孔树脂吸附洗脱制备获得。所制得的瑞香狼毒总黄酮中黄酮含量高达90-95％。本方法采用石油醚萃取脱除脂溶性杂质，上柱液有效去除了杂质，减轻了对树脂吸附干扰，使树脂对黄酮吸附能力增强，并且本方法成本低廉，工艺合理，能适应规模化生产。
文档编号A01N65/08GK102078444SQ20101061307
公开日2011年6月1日 申请日期2010年12月30日 优先权日2010年12月30日
发明者张翼, 李法庆, 钱珏 申请人:苏州瑞蓝博中药技术开发有限公司