一种油樟组织培养的方法与流程

文档序号:12309411阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种油樟组织培养的方法,包括诱导培养、增殖培养、生根培养、炼苗四个步骤,其特征在于:所述的诱导培养步骤使用启动培养基、增殖培养步骤使用继代培养基、生根培养步骤使用生根培养基,所述的启动培养基、继代培养基与生根培养基中均含有改良MS培养基;所述的改良MS培养基在原MS培养基大量元素中加入1430mg/L的NaH2PO4,并更改KNO3浓度为1600mg/L、NH4NO3浓度为720mg/L,其余物质不变;所述的改良MS培养基在原MS培养基有机物质中加入泛酸钙1.2mg/L,并更改盐酸吡哆醇浓度为2.0mg/L、盐酸硫胺素浓度为3mg/L、烟酸浓度为10mg/L,其余物质不变。

2.根据权利要求1所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的诱导培养、继代培养与生根培养步骤进行时,温度控制在26℃±2℃,光照强度为1500~2000lx,光照时间为每天10~12h,培养周期为30d~40d。

3.根据权利要求1所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的启动培养基为改良MS培养基+6BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+核黄素3mg/L+抗坏血酸1.5mg/L+白糖30g/L+卡拉胶5.4g/L,所述的启动培养基pH值为5.8~6.0。

4.根据权利要求1所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的继代培养基为改良MS培养基+6BA1.5~1.8mg/L+NAA0.3~0.5mg/L+IBA0.3~0.5mg/L+核黄素3mg/L+L-半胱氨酸6mg/L+生物素0.2mg/L+抗坏血酸1.5mg/L+糖30g/L+卡拉胶5.4g/L,所述的继代培养基pH值为5.8~6.0。

5.根据权利要求1所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的生根培养基为改良MS培养基+IBA0.5~0.9mg/L+NAA0.02~0.05mg/L+活性炭0.1~0.2g/L+白糖30g/L+卡拉胶5.4g/L,所述的生根培养基pH值为5.8~6.0。

6.根据权利要求1或2所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的诱导培养步骤为将表面灭菌处理后的油樟外植体,用手术刀和镊子将其切割成长0.8~1.2cm的茎段,每个茎段带一个腋芽,斜插接种到启动培养基上,培养室的温度控制在26℃±2℃,光照强度为1500~2000lx,光照时间为每天10~12h,培养周期为30d~40d。

7.根据权利要求6所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的外植体为健康油樟的基部萌芽条上选取的当年生幼嫩枝条。

8.根据权利要求1或2所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的继代培养步骤为将继代苗切割成芽丛或带腋芽茎段接种到继代培养基上,每瓶接种芽丛或茎段不少于5个,每个芽丛芽数不少3个,每隔30d~40d将继代苗转接至新继代培养基,继代培养代数控制在30代内,培养室的温度控制在26℃±2℃,光照强度为1500~2000lx,光照时间为每天10~12h。

9.根据权利要求1或2所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的生根培养步骤为选择增殖培养30d~40d后,高3.0cm以上,叶片正常展开的芽苗,通过无菌操作切取2.5cm左右的顶芽,接种到生根培养基上;每瓶接种单芽15个,培养室的温度控制在26℃±2℃,光照强度为1500~2000lx,光照时间为每天10~12h,培养时间为15d~25d。

10.根据权利要求1所述的一种油樟组织培养的方法,其特征在于:所述的炼苗步骤为当组培苗高度达到3.0cm以上,根长达1.0~1.5cm时,将组培苗从培养室移至炼苗温室或大棚进行炼苗,时间为10~15d,采用自然散射光,光照强度控制在5000~10000Lx,环境温度为20~32℃。

当前第2页1 2 3 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1