专利名称：一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法
技术领域：
一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，属于磷脂领域。
背景技术：
磷脂主要包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰葡萄糖及磷脂酰丙醇等，天然存在的磷脂大多是这些磷脂的混合物，由于这些磷脂结构的相似性，因而要从混合磷脂里分离制备磷脂酰胆碱单体较为困难。工业上制备的大豆醇溶性磷脂其磷脂酰胆碱含量在45% -55%之间，更高磷脂酰胆碱含量磷脂的制备需要消耗大量醇溶剂进行分级。本发明一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，采用酶技术有效提高产品中磷脂酰胆碱的含量，使大豆醇溶性磷脂中磷脂酰胆碱含量由52.6%提高到61.2%，为提高大豆醇溶性磷脂中磷脂酰胆碱含量提供了一种新的技术途径，满足市场需求。
发明内容
本发明的目的在于提供一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法。大豆醇溶性磷脂溶于氯仿中，加入一定量溶含有2 % -8 %的胆碱溶液，在PH5.6磷脂酶D催化下进行碱基交换，经过2小时 反应，大豆醇溶性磷脂中的磷脂酰乙醇胺等与胆碱进行碱基交换后生成大豆磷脂酰胆碱，从而提高其含量。反应物通过水洗有机相，经脱水脱溶后，用丙酮充分洗涤，分离出丙酮不溶物，干燥得产品。经过HPL测定，产品磷脂酰胆碱含量由52.6%提高到61.2%以上，从而完成了本发明。本发明的技术方案:一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，所用的大豆醇溶性磷脂原料来自于油厂油脂加工的副产品，并经进一步加工所得到的大豆醇溶性磷脂，原料中大豆磷脂酰胆碱含量为52.6%。按大豆醇溶性磷脂:氯仿为1: 10 (W: V)比例配置溶液，加入大豆醇溶性磷脂:水为1: 1(W: V)的溶有2%-8%的胆碱的水溶液，再按大豆醇溶性磷脂:磷脂酶D为1: 40 (W: U)加入磷脂酶D，调节PH5.6，于30°C-40°C搅拌反应2小时，分离出有机相，用三倍量氯仿水洗有机相，真空脱去有机溶剂，残留物用五倍原料量的丙酮洗涤，分离出丙酮不溶物，真空干燥得磷脂酰胆碱含量大于61 %的产品。本发明的有益效果:一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，为酶法提高大豆醇溶性磷脂中磷脂酰胆碱的含量提供了一条新的技术途径，使用该方法可以有效提高大豆醇溶性磷脂中磷脂酰胆碱的含量。
具体实施例方式实施例1将100克大豆醇溶性磷脂溶于1000毫升氯仿，加入100毫升3%胆碱水溶液，再加入4000U磷脂酶D，调节PH5.6，于40°C搅拌反应2小时，分离出有机相，用300毫升水分三次洗涤有机相，真空脱出氯仿，残渣用500毫升丙酮分五次洗涤，收集丙酮不容物，真空干燥得到磷脂酰胆碱含量为61.2%的产品。
实施例2将100克大豆醇溶性磷脂溶于1000毫升氯仿，加入100毫升7%胆碱水溶液，再加入4000U磷脂酶D，调节PH5.6，于30°C搅拌反应2小时，分离出有机相，用300毫升水分三次洗涤有机相，真空脱出氯仿，残渣用500毫升丙酮分五次洗涤，收集丙酮不容物，真空干燥得到磷脂酰胆碱含量为62.5%的产品。实施例3将100克大豆醇溶性磷脂溶于100 0毫升氯仿，加入100毫升3%胆碱水溶液，再加入4000U磷脂酶D，调节PH5.6，于35°C搅拌反应2小时，分离出有机相，用300毫升水分三次洗涤有机相，真空脱出氯仿，残渣用500毫升丙酮分五次洗涤，收集丙酮不容物，真空干燥得到磷脂酰胆碱含量为61.9%的产品。
权利要求
1.一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，其特征是所用的大豆醇溶性磷脂原料来自于油厂油脂加工的副产品，并经进一步加工所得到的大豆醇溶性磷脂，原料中大豆磷脂酰胆碱含量为52.6%。按大豆醇溶性磷脂:有机溶剂为1: 10(W: V)比例配置溶液，所使用的有机溶剂是氯仿。加入大豆醇溶性磷脂:水为1: 1(W: V)的溶有2%-8%的胆碱水溶液，再按大豆醇溶性磷脂:磷脂酶D为1: 40(W: U)加入磷脂酶D，调节PH5.6，于30°C -40V搅拌反应2小时，分离出有机相，用三倍量有机相的水洗有机相，真空脱去有机溶剂，残留物用五倍原料量的丙酮洗涤，分离出丙酮不溶物，真空干燥得磷脂酰胆碱含量大于61%的产品。
2.依据权利要求1所述的一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，其特征是所用有机溶剂为氯仿。
3.依据如权利要求1所述的一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，其特征是胆碱溶液的浓度为2% -8%。
4.依据权利要求1所述的一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，其特征是酶促反应温度为30°C -40°C。
5.依据如权利要求1所述的一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法，其特征是所用的原料为大 豆磷脂酰胆碱含量52.6%的大豆醇溶性磷脂原料。
全文摘要
本发明的目的在于提供一种酶法提高大豆醇溶性中磷脂酰胆碱含量的方法。大豆醇溶性磷脂溶于氯仿中，加入一定量溶含有2％-8％的胆碱溶液，在PH5.6磷脂酶D催化下进行碱基交换，经过2小时反应，大豆醇溶性磷脂中的磷脂酰乙醇胺等与胆碱进行碱基交换后生成大豆磷脂酰胆碱，从而提高其含量。反应物通过水洗有机相，经脱水脱溶后，用丙酮充分洗涤，分离出丙酮不溶物，干燥得产品。经过HPLC测定，产品磷脂酰胆碱含量由52.6％提高到61.2％以上，从而完成了本发明。
文档编号C12P13/00GK103074392SQ20111038210
公开日2013年5月1日 申请日期2011年11月26日 优先权日2011年11月26日
发明者曹栋, 史苏佳, 曹沛 申请人:江南大学