[0066] 此外，根据本发明可得到二酮哌嗪的总量为900 μ g/100g以上、优选 1000 yg/100g以上、更优选2000 yg/100g以上、特别优选5000 yg/100g以上的植物提 取物。应予说明，只要没有特别声明，本说明书中二酮哌嗪的总量表示Cyclo(Ala-Gln)、 Cyclo (His-Pro)、Cyclo (Ala-Ala)、Cyclo (Gly-Pro)、Cyclo (Ser-Tyr)、Cyclo (Pro-Thr)、 Cyclo(His-Phe)、Cyclo (Ala-Pro)、Cyclo(Phe-Ser)、Cyclo(Gly-Leu)、Cyclo(Gly-Phe)、 Cyclo (Pro-Pro)、Cyclo (Gly-Trp)、Cyclo (Asp-Phe)、Cyclo (Val-Pro)、Cyclo (Pro-Tyr)、 Cyclo(Met-Pro)、Cyclo (Met-Met)、Cyclo(Val-Val)、Cyclo(Leu-Pro)、Cyclo(Trp-Tyr)、 Cyclo (Phe-Pro)、Cyclo(Leu-Trp)、Cyclo(Phe-Trp)、Cyclo(Leu-Phe)、Cyclo(Leu-Leu)及 Cyclo (Phe-Phe)的总量。
[0067] 通常，Bx高的提取物意味着以高浓度含有来自原料的各种物质（例如，苦味成 分），不仅其本身不适合作为饮料，而且由于对香味、舌头触感等有影响故而也不适合添加 到饮料中。因此，考虑到在饮料中添加时，优选Bx低的提取物。根据本发明可得到大量包含 作为生理活性物质的二酮哌嗪且Bx低的植物提取物，即可得到二酮哌嗪的含量与Bx之比 高的植物提取物。具体而言，可得到上述二酮哌嗪的总量（单位：μ g/l〇〇g)与白利度（Bx) 之比为900(48/10(^/^〇以上、优选1000(以8/10(^/^〇以上、更优选2000(以8/100 8/ Bx)、进一步优选5000( μ g/lOOg/Βχ)的植物提取物。提取物中的二酮哌嗪的上限没有特 别限制，只要考虑二酮哌嗪的溶解性等来适当设定即可，通常为1000mg/100g以下、优选 500mg/100g以下、更优选200mg/100g以下左右。
[0068] 将植物体作为原料应用本发明的制造方法得到植物提取物时，由于不伴随发酵故 而副产物少，而且进行前提取时可溶性成分少，具有苦味极少的香味的特征。
[0069] 由于这样的植物提取物的香味良好，也没有沉淀、浑浊等，外观也优异，故而即使 不实施特殊的后处理，也可直接用于提取物、调味料、饮料等。此外，本发明的植物提取物还 存在下述优点：无论是否以高含量包含二酮哌嗪，由于Bx相对较低，故而在饮食物（尤其是 饮料）中的配合量较少也可，饮食物设计的自由度增加。尤其是，可直接配合于茶饮料、咖 啡饮料、大豆饮料、果汁饮料等以植物提取液或榨汁液等作为主成分配合而得的饮料或风 味水饮料、矿物质饮料、碳酸饮料等的清凉饮料中利用。例如，将本发明的植物提取物配合 到饮料中时，可得到二酮哌嗪的总量成为10 μ g/100g以上、优选20 μ g/100g以上、更优选 40 μ g/100g以上、进一步优选60 μ g/100g以上的饮料，且不呈现苦味的风味良好的饮料。
[0070] 按照添加的饮食物的形态，根据本发明所得到的植物提取物还可进行澄清处理 等。此时，出于没有油分、存在纤维质等的理由，还存在可易于进行澄清这样的优点。
[0071] 作为本发明植物提取物的适合的方式，可例示茶提取物、大豆提取物及麦芽提取 物。以下，关于上述提取物进行详述。
[0072](茶提取物）
[0073] 本说明书中提到的"茶提取物"是指对茶叶进行提取处理所得到的茶提取物。作 为成为提取原料的茶叶，可使用采用茶树（学名：Camellia sinensis)所制造的茶叶的叶、 茎等的进行提取而可饮用的部位。此外，其形态也不限制于大叶、粉状等。关于茶叶的收获 期，也可根据所期望的香味来适当选择。
[0074] 本发明所得到的高浓度含有二酮哌嗪的植物提取物（茶提取物）的特征在于，通 过不经过发酵过程来制造可抑制副产物的生成，从而可得到香味良好的植物提取物。从该 香味的观点出发，茶叶优选使用煎茶、番茶、焙茶、玉露、冠茶、甜茶等蒸制的不发酵茶（绿 茶）或嬉野茶、青柳茶、各种中国茶等的釜炒茶等的不发酵茶。
[0075] 本发明者测定了将市售的茶叶进行提取所得到的茶提取物中的二酮哌嗪浓度。其 结果，确认了在发酵茶中包含极微量（〇~200 μ g/lOOg/Bx左右），此外在绿茶中几乎不包 含（参照表1，测定方法与后述的实施例1相同）。
[0079] 另一方面，本发明的荼提取物以10 μ g/100g/Bx以上的浓度含有作为以往 的荼类所不包含的二酮哌嗪的 Cyclo (Ala-Gln)、Cyclo (Ala-Ala)、Cyclo (Ser-Tyr)、 Cyclo(Gly-Trp)、Cyclo(Val-Val)、Cyclo(Trp-Tyr)、Cyclo(Leu-Trp)及 Cyclo(Phe-Phe) 中的任意一个以上。
[0080] 此外，本发明的荼提取物以0. lppm/Bx(10ug/100g/Bx)以上的浓度分别含有 Cyclo(Ala-Gln)、Cyclo (His-Pro)、Cyclo(Ala-Ala)、Cyclo(Gly-Pro)、Cyclo(Ser-Tyr)、 Cyclo(Pro-Thr)、Cyclo (His-Phe)、Cyclo(Ala-Pro)、Cyclo(Phe-Ser)、Cyclo(Gly-Leu)、 Cyclo(Gly-Phe)、Cyclo (Pro-Pro)、Cyclo(Asp-Phe)、Cyclo(Val-Pro)、Cyclo(Pro-Tyr)、 Cyclo(Met-Pro)、Cyclo(Leu-Pro)、Cyclo(Phe-Pro)、Cyclo (Leu-Phe)及 Cyclo(Leu-Leu)〇 优选以0. 2ppm/Bx以上、更优选0. 3ppm/Bx以上、进一步优选0. 4ppm/Bx以上、特别优 选0. 5ppm/Bx以上的浓度分别含有上述二酮哌嗪的荼提取物。进而，能够以0. lppm/ Βχ(10 μ g/100g/Bx)以上、优选(λ 2ppm/Bx以上、更优选(λ 3ppm/Bx以上的浓度分别含有 Cyclo(Gly-Trp)、Cyclo(Val-Val)、Cyclo(Trp-Tyr)、Cyclo(Leu-Trp)、Cyclo(Phe-Trp)及 Cyclo (Phe-Phe)〇
[0081] 作为苦味强的二酮哌嗪，已知有作为咖啡饮料中的二酮哌嗪的Cyclo (Leu-Pro)、 Cyclo (Phe-Pro)(参照日本特开2010-166911号公报）、作为酪蛋白的分解处理物的 CyCl〇(LeU-Trp)(蛋白质研究奖励会肽研究所报（日语原名：蛋白質研究奨励会 卜''研究所報），No. 2,1974)。本发明的茶提取物虽然含有上述具有强烈苦味的二酮哌 嗪，但提取物自身几乎没有苦味。制备含有与茶提取物为相同浓度的Cyclo (Leu-Pro)、 Cyclo(Phe-Pro)及Cyclo(Leu-Trp)的水溶液时，由于可感觉到强烈的苦味，故而认为共 存的其他二酮哌嗪、来自茶的成分可加成或协同减少Cyclo(Leu-Pro)、Cyclo(Phe-Pro)及 Cyclo (Leu-Trp)的苦味。尤其是，相对于 Cyclo (Leu-Leu)与 Cyclo (Leu-Phe)的总量（A) 的具有苦味的二酮哌嗪 Cyclo (Leu-Pro)、Cyclo (Phe-Pro)及 Cyclo (Leu-Trp)的总量（B) 的比例[(B)ΛΑ)]成为1.0以下（优选0.8以下、更优选0.6以下、特别优选0.4以下）的 茶提取物为不伴随以苦味为代表的味道的含二酮哌嗪提取物，可直接配合于饮食品（尤其 是饮料）。
[0082] 茶提取物中单位Βχ的二酮哌嗪的总量为900 yg/100g/Bx以上、优选900~ 30000 μ g/100g/Bx、更优选 2000 ~25000 μ g/100g/Bx、特别优选 5000 ~20000 μ g/100g/ Bx。成为这样的浓度范围时，对制造附加有二酮哌嗪所具有的功能（生理活性等）的饮食 品有利。
[0083] 这样的茶提取物可通过将茶叶中的蛋白质进行分解处理来制备茶肽并将其在液 体中进行高温高压处理来简便地制造。茶叶中包含约25%丰富的蛋白质（五订日本食品标 准成分表）。因此，只要将该茶叶蛋白质用蛋白酶等的酶进行分解处理，则理应可得到茶肽， 但即使使蛋白酶作用于茶叶也无法得到那么多的茶肽。由于茶叶中总蛋白质的80%以上为 不溶性蛋白质，故而优选使蛋白质分解酶高效作用于茶叶所包含的蛋白质来得到茶肽。具 体而言，进行从茶叶去除水溶性蛋白质的前处理后，使蛋白酶等的蛋白质分解酶作用于该 提取残渣来制备茶肽。即，本发明的茶提取物可通过依次进行以下工序来高效分解水不溶 性蛋白质从而简便地制造高浓度含有二酮哌嗪的茶提取物。
[0084] (a)将茶叶用水提取并回收提取残渣的工序，
[0085] (b)在水的存在下使内切型蛋白酶作用于提取残渣从而将茶叶蛋白质分解并得到 包含茶肽的液体的工序，
[0086] (c)将包含茶肽的液体进行高温高压处理得到反应液的工序，及
[0087] (d)将反应液进行固液分离处理来回收包含二酮哌嗪的液体的工序
[0088] 或，
[0089] (a)将茶叶用水提取并回收提取残渣的工序，
[0090] (b)在水的存在下使内切型蛋白酶作用于提取残渣从而将茶叶蛋白质分解并得到 包含茶肽的液体的工序，
[0091] (d'）将包含茶肽的液体进行固液分离处理来回收包含茶肽的液体的工序，及
[0092] (C'）将包含茶肽的液体进行高温高压处理得到包含二酮哌嗪的反应液的工序。
[0093] 各工序的条件如前所述，在工序（a)的前提取中，还可使用在茶饮料的制造等中 进行提取处理所得到的茶叶渣等的提取残渣。以往，茶叶中的水不溶性茶蛋白质不作为营 养源利用，例如，日本国内的绿茶饮料制造时产生的超过2. 2万吨的提取残渣基本被作为 未利用资源而废弃，上述茶提取物的制造方法对以往被废弃的茶叶渣的有效利用也有效。
[0094] 根据该方法可制造高浓度含有Cyclo (Leu-Leu)、Cyclo (Leu-Phe)及 Cyclo(Ala-Ala)的茶提取物。具体而言，相对于茶提取物中的二酮哌嗪总量，成为 Cyclo (Leu-Leu)为 10% 以上（重量基准）、Cyclo (Leu-Phe)为 10% 以上、Cyclo (Ala-Ala) 为7 %以上的提取物。将它们以浓度表示时，成为分别为5. Oppm/Bx (500 μ g/1 OOg/Bx) 以上、优选8. 0ppm/Bx以上、更优选10. 0ppm/Bx以上的浓度的茶提取物。它们的上限为 50.0 ppm/Βχ以下、优选40.0 ppm/Βχ以下、更优选35. Oppm/Βχ以下、进一步优选30. 0ppm/Bx 以下左右。
[0095] 此外，发现通过多次反复进行工序（a)中的茶叶的水提取（前提取）， Cyclo(Leu-Leu)、Cyclo(Leu_Phe)及 Cyclo(Phe-Phe)的浓度显著提高。因此，该方法对 Cyclo(Phe-Phe)的制造也有利。本发明者确认含有3. Oppm/Βχ以上通过该方法所得到的 Cyclo (Phe-Phe)的茶提取物具有学习积极性改善作用。
[0096] 可是，已知具有疏水性官能团的二酮哌嗪通过环状化，与直链肽相比其疏水 性提高。CyCl〇(Phe-Phe)为疏水性最高的成分，将上述茶提取物进行加速保存试验 (55°C、2周），结果确认可稳定维