专利名称：作为聚(adp核糖)聚合酶(parp)抑制剂的酰胺取代的吲唑的制作方法
专利说明作为聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)抑制剂的酰胺取代的吲唑 本发明涉及酰胺取代的吲唑化合物，它们是先前称作聚(ADP核糖)合酶和聚(ADP核糖基)转移酶的聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)的抑制剂。本发明的化合物可用于在DNA修复通道中具有特定缺陷的肿瘤的单药治疗，和作为某些DNA损伤剂(例如抗癌药和放射治疗)的增强剂。另外，本发明的化合物可用于减少细胞坏死(在中风和心肌梗死中)，下调发炎和组织损伤，治疗逆转录病毒感染和防止化疗的毒性。
聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)构成一个含PARP催化域的18种蛋白的超家族(Bioessays(2004)261148)。这些蛋白包括PARP-1、PARP-2、PARP-3、端锚酶-1、端锚酶-2、穹状PARP和TiPARP。其基本成员PARP-1由三个主要的域构成含两个锌指结构的氨基(N)端DNA结合域(DBD)，自动修饰域，和羧基(C)端催化域。
PARP是将NAD+切割成烟酰胺和ADP核糖，从而在靶蛋白上形成长而支化的ADP核糖聚合物的核酶和胞质酶，包括拓扑异构酶、组蛋白和PARP本身(Biochem.Biophys.Res.Commun.(1998)2451-10)。
聚(ADP核糖基)化参与几个生物过程，包括DNA修复，基因转录，细胞周期进程，细胞死亡，染色质功能和基因组稳定性。
已经指出，PARP-1和PARP-2的催化活性会被DNA链断裂迅速激发(见Pharmacological Research(2005)5225-33)。随着DNA受损，PARP-1与单链和双链DNA缺口结合。在正常的生理条件下PARP活性很小，然而在DNA损伤时，PARP活性被立即激活直至500倍。PARP-1和PARP-2都作为缺口感应器起着检测DNA链中断的作用，提供快速信号以停止转录和在损伤部位募集为修复DNA所需之酶。因为癌症治疗中的放疗和很多化疗方法是通过诱发DNA损伤起作用，所以PARP抑制剂可作为癌症治疗的化学和辐射敏化剂。已报道PARP抑制剂在辐射敏化缺氧肿瘤细胞方面有效(US 5,032,617，US 5,215,738和US5,041,653)。
PARP的大多数生物效应与下列因素有关影响靶蛋白的性质和功能的这种聚(ADP核糖基)化过程；在从聚(ADP核糖基)化的蛋白中被切割时赋予特殊的细胞作用的PAR低聚物；PARP与核蛋白物理缔合形成功能性复合物；以及其底物NAD+的细胞水平降低(Nature Review(2005)4421-440)。
除了与DNA修复有关以外，PARP还可以作为细胞死亡的中介体起作用。它在诸如局部缺血和再灌注损伤等病理条件下的过度激活，会造成胞间NAD+的显著缺乏，这会导致几种NAD+依赖性代谢通道的受损并造成细胞死亡(见Pharmacological Research(2005)5244-59)。由于PARP激活，NAD+水平显著下降。过度的PARP激活导致遭受大量DNA损伤的细胞中NAD+的严重缺乏。聚(ADP核糖)的短半寿期造成快的转换率，因为聚(ADP核糖)一旦形成，就被自发活性的聚(ADP核糖)糖基水解酶(PARG)迅速降解。PARP和PARG形成了一个将大量NAD+转化成ADP核糖的循环，造成NAD+和ATP降至正常水平的20％以下。这样一种情形在缺血期间尤其有害，此时氧的缺失已经严重危及细胞能量输出。随后在再灌注期间的自由基产生被设想为组织损伤的主要原因。在缺血和再灌注期间很多器官内通常会发生ATP下降，其一部分可能和聚(ADP核糖)转换造成的NAD+缺乏有关。因此，预期PARP的抑制会保持细胞能量水平，从而增强缺血组织在受伤后存活。因此，作为PARP的抑制剂的化合物可用于治疗由PARP介导的细胞死亡引起的病症，包括神经性病症，例如中风、创伤和帕金森病。
PARP抑制剂已被证实可用于BRCA-1和BRCA-2缺陷肿瘤的特异性杀伤(Nature(2005)434913-916和917-921；以及Cancer Biology&Therapy(2005)4934-936)。
PARP抑制剂还显示出增强抗癌药物的效力(PharmacologicalResearch(2005)5225-33)，包括铂化合物，例如顺铂和卡铂(CancerChemother Pharmacol(1993)33157-162和Mol Cancer Ther(2003)2371-382)。PARP抑制剂还显示出增加拓扑异构酶I抑制剂，例如伊立替康和托泊替康，的抗肿瘤活性(Mol Cancer Ther(2003)2371-382；和Clin Cancer Res(2000)62860-2867)，这已在活体内模型中得到证实(JNatl Cancer Inst(2004)9656-67)。
PARP抑制剂显示出能恢复对替莫唑胺(TMZ)的细胞毒性及抗增生作用的敏感性(见Curr Med Chem(2002)91285-1301和Med Chem RevOnline (2004)1144-150)。这在一些活体外试验模型(Br J Cancer(1995)72849-856；Br J Cancer(1996)741030-1036；Mol Pharmacol(1997)52249-258；Leukemia(1999)13901-909；Glia(2002)4044-54；和ClinCancer Res(2000)62860-2867及(2004)10881-889)及活体内试验模型(Blood(2002)992241-2244；Clin Cancer Res(2003)95370-5379和JNatl Cancer Inst(2004)9656-67)中得到证实。PARP抑制剂还显示出能阻止由选择性N3-腺嘌呤甲基化试剂，例如MeOSO2(CH2)-信息译读分子(Me-Lex)诱发的细胞坏死的出现(Pharmacological Research(2005)5225-33)。
PARP抑制剂显示出起着辐射敏化剂的作用。已报道PARP抑制剂在辐射敏化(缺氧性)肿瘤细胞方面有效，并且阻止肿瘤细胞从放疗后可能致死的(Br.J.Cancer(1984)49(Suppl.VI)34-42；和Int.J. Radiat.Bioi.(1999)7591-100)和亚致死的(Clin.Oncol.(2004)16(1)29-39)DNA损伤中恢复方面有效，估计是由于它们能阻止DNA链断裂后再连接和影响几个DNA损伤信号通道。
PARP抑制剂还显示出可用于治疗急性和慢性心肌病(见Pharmacological Research(2005)5234-43)。例如，业已证实，单次注射PARP抑制剂会减小兔子心脏或骨骼肌的缺血和再灌注引起的梗死面积。在这些研究中，单次注射3-氨基苯甲酰胺(10mg/kg)，无论是闭塞前一分钟，或是再灌注前一分钟，都会造成心脏梗死面积有类似的减小(32-42％)，而另一种PARP抑制剂1，5-二羟基异喹啉(1mg/kg)以相近的程度(38-48％)减小梗死面积。这些结果使得可以合理地推测，PARP抑制剂能预先补救缺血性心脏或骨骼肌组织的再灌注损伤(PNAS(1997)94679-683)。对于猪(Eur.J.Pharmacol.(1998)359143-150和Ann.Thorac.Surg.(2002)73575-581)和犬(Shock.(2004)21426-32)也报道了类似的发现。
PARP抑制剂已被证实可用于治疗某些血管病，脓毒性休克，缺血性损伤和神经毒性(Biochim.Biophys.Acta(1989)10141-7；J.Clin.Invest.(1997)100723-735)。氧自由基DNA损伤导致DNA中的链断裂，它随后为PARP所识别，这一损伤正如PARP抑制剂研究所表明的，是对这些疾病状态起作用的主要因素(J.Neurosci.Res.(1994)3938-46和PNAS(1996)934688-4692)。PARP还被证实在出血性休克的发病机制中起一定作用(PNAS(2000)9710203-10208)。
PARP抑制剂已被证实可用于治疗炎性疾病(见PharmacologicalResearch(2005)5272-82和83-92)。
还已证实，哺乳动物细胞的有效的逆转录病毒感染通过抑制PARP活性而被阻断。重组逆转录病毒载体感染的这种抑制已显示出在各种不同类型的细胞中发生(J.Virology，(1996)70(6)3992-A000)。因此研发了PARP的抑制剂用于抗病毒治疗和癌症治疗(WO 91/18591)。
在体外和体内试验中已经证实，PARP抑制剂能用来治疗或预防自身免疫病，例如I型糖尿病和糖尿病并发症(Pharmacological Research(2005)5260-71)。
曾推测PARP抑制延缓了人类成纤维细胞中老化特征的开始(Biochem.Biophys.Res.Comm.(1994)201(2)665-672和Pharmacological Research(2005)5293-99)。这可能与PARP控制终链调节剂功能的作用有关(Nature Gen.，(1999)23(1)76-80)。
至今为止的绝大多数PARP抑制剂都与酶的烟酰胺结合域相互作用，并且就NAD+而言像是竞争性抑制剂(Expert Opin.Ther.Patents(2004)141531-1551)。烟酰胺的结构类似物，例如苯甲酰胺及衍生物，属于作为PARP抑制剂研究的第一批化合物。然而，这些分子的抑制活性弱，且具有和抑制PARP无关的其它作用。因此，需要提供PARP酶的强有力的抑制剂。
先前已有关于结构上相关的PARP抑制剂的描述。WO 1999/59973公开了与5元杂芳环稠合的酰胺取代的苯环；WO 2001/85687公开了酰胺取代的吲哚；WO 1997/04771、WO 2000/26192、WO 2000/32579、WO 2000/64878、WO 2000/68206、WO 2001/21615、WO 2002/068407、WO 2003/106430和WO 2004/096793公开了酰胺取代的苯并咪唑；WO2000/29384公开了酰胺取代的苯并咪唑和吲哚；EP 0879820公开了酰胺取代的苯并噁唑。
现已出乎意料地发现，本发明的酰胺取代的吲唑表现出特别高的抑制聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)活性的能力。因此本发明化合物特别适合作为PARP-1和/或PARP-2的抑制剂使用。它们还表现出特别好的细胞活性，显示对BRCA1和BRCA2缺陷细胞系的良好的抗增生作用。
本发明提供式I化合物或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体
其中 R1是氢或氟；和 R2是氢或氟。
在一项实施方案中，R1是氢。
在另一实施方案中，R1是氟。
在一项实施方案中，R2是氢。
在另一实施方案中，R2是氟。
在一项实施方案中，R1是氢，R2是氢或氟。
在另一实施方案中，R1是氟，R2是氢或氟。
在另一实施方案中，R1是氢，R2是氢。
在另一实施方案中，R1是氢，R2是氟。
在另一实施方案中，R1是氟，R2是氟。
在另一实施方案中，R1是氢或氟，R2是氢。
在另一实施方案中，R1是氢或氟，R2是氟。
本发明还提供式II化合物或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体
其中R1和R2定义如上。
本发明还提供式III化合物或其可药用的盐或互变异构体
其中R1和R2定义如上。
本发明还提供式IV化合物或其可药用的盐或互变异构体
其中R1和R2定义如上。
在式II、III和IV方面的优选的本体与先前对式I的定义相同，细节上作适当修改。
本发明在其范围内还包括以上式I化合物的N-氧化物。通常，这些N-氧化物可以在任何可利用的氮原子上形成。N-氧化物可以用常规方法形成，例如式I化合物与过硫酸氢钾制剂在湿氧化铝存在下反应。
本发明在其范围内包括以上式I化合物的前药。通常，这些前药应是式I化合物的功能性衍生物，它们在体内容易转化成所需的式I化合物。选择和制备合适的前药衍生物的常规步骤描述于例如“Design ofProdrugs”(ed.H.Bundgaard，Elsevier，1985)中。
前药可以是生物活性物质(“母体药物”或“母体分子”)的药理上失活的衍生物，它需要在体内转化以释放出活性药物，并具有优于母体药物分子的改进的递送性质。在体内转化可以是一些代谢过程的结果，例如羧酸、磷酸或硫酸酯的化学水解或酶促水解，或是敏感官能团的氧化或还原。
本发明的范围包括式I化合物及其盐的溶剂化物，例如水合物。
本发明化合物可以具有不对称中心、手性轴和手性平面(如以下文献中所述E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of CarbonCompounds，John Wiley&Sons，New York，1994，p.1119-1190)，并以外消旋物、外消旋混合物和个别的非对映体的形式，以及所有可能的异构体及其混合物，包括旋光异构体的形式存在，所有这些立体异构体都被包括在本发明之内。此外，本文中公开的化合物可以存在互变异构体，两种互变异构形式都打算包括在本发明的范围之内，即使只描述一种互变异构结构。
本发明化合物可以以不同的异构体形式存在，它们都被本发明涵盖。
本发明化合物可以存在多种不同的多晶形。
在本文中使用时，C1-6烷基代表含1、2、3、4、5或6个碳原子的支链、直链和环形的饱和脂族烃基。例如，“C1-6烷基”具体包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、环丙基、环丁基、环戊基和环己基等。优选的烷基是甲基和乙基。
本发明范围内的具体化合物是 氯化3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐； 2-{4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺； 2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺； 三氟乙酸3-{4-[7-(氨基羰基)-5-氟-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐； 三氟乙酸5-氟-2-(3-氟-4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺； 三氟乙酸3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐； 5-氟-2-(4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺； 氯化(3S)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐； 氯化(3R)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐； (R)-5-氟-2-(4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺； (S)-5-氟-2-(4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺； (R)-5-氟-2-{3-氟-4-哌啶-3-基苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺； (S)-5-氟-2-{3-氟-4-哌啶-3-基苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺； 及其可药用的盐、游离碱或互变异构体。还提供了这些化合物的立体异构体。
本发明的一种具体化合物是氯化3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐，或其可药用的游离碱或互变异构体。还提供了此化合物的立体异构体。
本发明的一种具体化合物是2-{4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺，或其可药用的盐、游离碱或互变异构体。还提供了此化合物的立体异构体。
本发明的一种具体化合物是2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺，或其可药用的盐、游离碱或互变异构体。还提供了此化合物的立体异构体。
本发明的一种具体化合物是三氟乙酸3-{4-[7-(氨基羰基)-5-氟-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐，或其可药用的游离碱或互变异构体。还提供了此化合物的立体异构体。
本发明的一种具体化合物是三氟乙酸5-氟-2-(3-氟-4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺，或其可药用的游离碱或互变异构体。还提供了此化合物的立体异构体。
本发明的一种具体化合物是4-甲基苯磺酸(3S)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐，或其可药用的游离碱或互变异构体。还提供了此化合物的立体异构体。
本发明包括式I化合物的游离碱及其可药用的盐和立体异构体。本发明化合物可以在胺和/或含N杂环部分的N原子处质子化，形成盐。“游离碱”一词是指非盐形式的胺化合物。所包括的可药用盐不仅包括对于本文中所述具体化合物示例举出的盐，而且还包括游离碱形式的式I化合物的所有典型的可药用盐。所述的具体的盐式化合物的游离形式可以用本领域已知的技术分离。例如，该游离形式可以用合式的稀碱水溶液，例如NaOH、碳酸钾、氨和碳酸氢钠稀水溶液，处理该盐来再生。该游离形式可能在某些物理性质(例如在极性溶剂中的溶解度)方面与各自的盐形式稍有不同，但是就本发明而言，该酸式和碱式盐在其它方面与各自的游离形式是药学上等效的。
本发明化合物的可药用盐可以由含有碱性或酸性部分的本发明化合物通过常规的化学方法合成。一般，碱性化合物的盐通过离子交换色谱法制备，或者通过该游离碱与化学计量数量的或过量的所需的成盐无机酸或有机酸在合适的溶剂或各种溶剂混合物中反应制备。类似地，酸性化合物通过与合适的无机或有机碱反应制备。
因此，本发明化合物的可药用盐包括通过碱性的本发明化合物与无机、有机或聚合酸反应形成的本发明化合物的常规的无毒性盐。例如，常规的无毒性盐包括从无机酸，例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、亚硫酸、氨基磺酸、磷酸、亚磷酸、硝酸等衍生的盐，以及从有机酸，例如乙酸、丙酸、琥珀酸、羟基乙酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、双羟萘酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸、棕榈酸、葡糖酸、门冬氨酸、肉桂酸、丙酮酸、乙磺酸、戊酸、三氟乙酸等，制备得到的盐。合适的聚合盐包括由聚合酸例如鞣酸、羧甲基纤维素衍生的盐。本发明的可药用的盐优选含1当量式(I)化合物和1、2或3当量的无机或有机酸。在一项实施方案中，本发明的可药用的盐包含2当量的式(I)化合物和1当量的无机或有机酸。更具体地说，本发明的可药用的盐是三氟乙酸盐、氯化物或甲苯磺酸盐。特别是，本发明的可药用的盐是三氟乙酸盐或氯化物盐。在一项实施方案中，该盐是三氟乙酸盐。在另一实施方案中，该盐是氯化物。在另一实施方案中，该盐是甲苯磺酸盐。
术语甲苯磺酸可以与4-甲基苯磺酸互换使用，而甲苯磺酸盐(toluene sulfonates)也可称作托西酸盐(tosylate)。
当本发明化合物是酸性化合物时，合适的“可药用盐”是指从可药用的无毒性碱(包括无机碱和有机碱)制备的盐。由无机碱衍生的盐包括铝盐、铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、亚锰盐、钾盐、钠盐、锌盐等。特别优选的是铵盐、钙盐、镁盐、钾盐和钠盐。由可药用的有机无毒碱衍生的盐包括以下有机碱的盐伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺(包括天然存在的取代胺)，环胺和碱性离子交换树脂，例如精氨酸、赖氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N，N1-二苄基乙二胺、乙胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、二乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡萄糖、组氨酸、哈胺(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇、二环己胺、丁胺、苄胺、苯基苄胺等。
以上所述的和其它典型的可药用盐的制备在Berg等(1997).J.Pharm.Sci.，“Pharmaceutical Salts”，661-19一文中有更全面的描述。
还应指出，本发明化合物有可能是内盐或两性离子，因为在生理条件下化合物的一个去质子化的酸性部分(例如羧基)可以是阴离子型，此电子电荷可以在内部被质子化的或烷基化的碱性部分(例如季铵氮原子)的阳离子电荷抵消。
本发明化合物可用于利用疗法治疗人或动物身体的方法。
本发明提供用于治疗或预防能够通过抑制聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)得到改善的病症的化合物(参见例如，Nature Review DrugDiscovery(2005)4421-440)。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防能够通过抑制聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)得到改善的病症。
本发明还提供一种用于治疗或预防能够通过抑制聚(ADP核糖)聚合酶(PARP)得到改善的病症的方法，该方法包括对有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
本发明的PARP抑制剂可用于治疗在WO 2005/082368中详举的疾病。
本发明化合物可用于治疗炎性疾病，包括由器官移植排斥引起的病症，例如慢性炎性关节疾病，包括关节炎、类风湿性关节炎、骨关节炎和与骨吸收增加有关的骨病；炎性肠病，例如回肠炎、溃疡性结肠炎、巴雷特综合症、和节段性回肠炎；炎性肺病，例如哮喘、成人呼吸窘迫综合症和慢性阻塞性气道疾病；眼的炎性疾病，包括角膜营养不良、沙眼、盘尾丝虫病、葡萄膜炎、交感性眼炎和眼内炎；慢性炎性牙龈病，包括龈炎和牙周炎；结核病；麻风；炎性肾病，包括尿毒症并发症、肾小球肾炎和肾病；炎性皮肤病，包括硬化性皮炎、银屑病和湿疹；中枢神经系统的炎性疾病，包括神经系统的慢性脱髓鞘病、多发性硬化病、与艾滋病有关的神经变性病和阿尔兹海默病、传染性脑膜炎、脑脊髓炎、帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩侧索硬化和病毒性或自免疫脑炎；糖尿病并发症，包括但不限于，免疫复合物血管炎、系统性红斑狼疮(SLE)；心脏的炎性疾病，例如心肌病、缺血性心脏病、高胆固醇血症和动脉粥样硬化；以及能具有显著的炎性成分的其它各种疾病，包括先兆子痫、慢性肝衰竭、脑和脊髓创伤和多发性器官功能不良综合症(MODS)(多器官衰竭(MOF))。炎性疾病还可以是身体的系统性发炎，例如革兰氏阳性或革兰氏阴性休克、出血性或过敏性休克，或由于癌症化疗响应促炎细胞因子而诱发的休克，例如与促炎细胞因子有关的休克。这些休克可以因作为癌症疗法施用的化疗药物而被诱发。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防炎性疾病。
本发明还提供一种用于治疗或预防炎性疾病的方法，该方法包括对有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防由自然发生的发作和在外科手术期间引起的再灌注损伤，例如肠再灌注损伤；心肌再灌注损伤；由心肺旁路手术、主动脉瘤修复手术、颈动脉内膜切除术或出血性休克造成的再灌注损伤；由器官移植例如心、肺、肝、肾、胰腺、肠和角膜移植造成的再氧合损伤。
因此，本发明提供了一种用于制造治疗或预防再灌注损伤的药物的式I化合物。
本发明还提供一种治疗和预防再灌注损伤的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或含式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防缺血性病症，包括由器官移植引起的缺血性病症，例如稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛、心肌缺血、肝缺血、肠系膜动脉缺血、肠缺血、严重肢体缺血、慢性严重肢体缺血、脑缺血、急性心脏缺血、缺血性肾病、缺血性肝病、缺血性视网膜病、脓毒性休克，以及中枢神经系统的缺血性疾病，例如中风或脑缺血。
因此，本发明提供一种用于制造治疗或预防缺血性病症的药物的式I化合物。
本发明还提供一种用于治疗或预防缺血性病症的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或包含式I化合物的组合物。
本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防中风。
本发明还提供一种用于治疗或预防中风的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防慢性或急性肾衰竭。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防肾衰竭。
本发明还提供一种治疗或预防肾衰竭的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或包含式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防非心血管病的血管疾病，例如外周动脉阻塞、血栓闭塞型脉管炎、雷诺氏病和雷诺氏现象、肌端发绀、红斑性肢痛症、静脉血栓形成、静脉曲张、动静脉瘘、淋巴水肿和脂肪水肿。
因此，本发明提供了一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防心血管病之外的血管疾病。
本发明还提供一种用于治疗或预防心血管病之外的血管疾病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防心血管病，例如慢性心力衰竭、动脉粥样硬化、充血性心衰、循环性休克、心肌病、心脏移植、心肌梗死，以及心律失常，例如心房颤动、室上性心动过速、心房扑动和阵发性房性心动过速。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防心血管病。
本发明还提供一种用于治疗或预防心血管病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或包含式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗和预防糖尿病，包括I型糖尿病(胰岛素依赖性糖尿病)、II型糖尿病(非胰岛素依赖性糖尿病)、妊娠糖尿病、自免疫糖尿病、胰岛素病、由胰腺病造成的糖尿病、与其它内分泌病有关的糖尿病(例如库欣综合症、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、高血糖素瘤、原发性醛固酮增多症或促生长素抑素瘤)、A型胰岛素抗性综合症、B型胰岛素抗性综合症、脂肪增多性糖尿病和由β-细胞毒素诱发的糖尿病。本发明化合物还可用于治疗或预防糖尿病并发症，例如糖尿病性白内障、青光眼、视网膜病、肾病(例如微量白蛋白尿和进行性糖尿病肾病)、多发性神经病、足坏疽、动脉粥样硬化性冠状动脉病、外周动脉病、非酮症高血糖-高渗性昏迷、单神经病、自主神经病、足溃疡、关节问题、皮肤或粘膜并发症(例如感染、胫斑、念珠菌感染或糖尿病性脂性渐进性坏死)、高脂血症、高血压、胰岛素抗性综合症、冠状动脉病、视网膜病、糖尿病神经病、多神经病、单神经病、自主神经病、足溃疡、关节问题、真菌感染、细菌感染和心肌病。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防糖尿病。
本发明还提供一种治疗或预防糖尿病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防癌症，包括实体肿瘤，例如纤维肉瘤、粘液肉瘤、脂肪肉瘤、软骨肉瘤、骨源性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、内皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管内皮肉瘤、滑膜瘤、间皮瘤、尤因肉瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌肉瘤、结肠癌、结肠直肠癌、肾癌、胰腺癌、骨癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、食管癌、胃癌、口腔癌、鼻癌、喉癌、鳞状细胞癌、基底细胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳头状癌、乳状状腺癌、囊腺癌、髓样癌、支气管源性癌、肾细胞癌、肝细胞癌、胆管癌、绒膜癌、精原细胞癌、胚胎癌、维尔姆斯瘤、宫颈癌、子宫癌、睾丸癌、小细胞肺癌、膀胱癌、肺癌、上皮癌、皮肤癌、黑素瘤、成神经细胞瘤和成视网膜细胞瘤；血源性癌症，例如急性成淋巴细胞白血病(“ALL”)、急性成淋巴细胞B-细胞白血病、急性成淋巴细胞T细胞白血病、急性成髓细胞白血病(“AML”)、急性前髓细胞白血病(“APL”)、急性成单核细胞白血病、急性红白血病、急性成巨核细胞白血病、急性髓细胞及单核细胞白血病、急性非淋巴细胞白血病、急性未分化细胞白血病、慢性髓细胞白血病(“CML”)、慢性淋巴细胞白血病(“CLL”)、多毛细胞白血病和多发性骨髓瘤；急性和慢性白血病，例如成淋巴细胞白血病、髓细胞源性白血病、淋巴细胞白血病、髓细胞白血病；淋巴瘤，例如霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、多发性骨髓瘤、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血病、重链病和红细胞增多；CNS和脑癌，例如胶质瘤、纤维性星形细胞瘤、星形细胞瘤、间变型星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、成髓细胞瘤、颅咽管瘤、室管膜瘤、松果体瘤、成血管细胞瘤、听神经瘤、少突胶质瘤、脑膜瘤、前庭神经鞘瘤、腺瘤、转移性脑瘤、脑膜瘤、脊椎瘤和成髓细胞瘤。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防癌症。
本发明还提供一种治疗或预防癌症的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或包含式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗缺乏同源重组(HR)依赖性DNA DSB修复活性的癌症(见WO 2006/021801)。
HR依赖性DNA DSB修复通道通过同源机制修复DNA中双链断裂(DSB)，以恢复连续的DNA螺旋(Nat.Genet.(2001)27(3)247-254)。HR依赖性DNA DSB修复通道的组分包括，但不限于， ATM(NM-000051)，RAD51(NM-002875)，RAD51L1(NM-002877)，RAD51C(NM-002876)，RAD51L3(NM-002878)，DMCl(NM-007068)，XRCC2(NM7005431)，XRCC3(NM-005432)、RAD52(NM-002879)，RAD54L(NM-003579)，RAD54B(NM-012415)，BRCA-1(NM-007295)，BRCA-2(NM-000059)，RAD5O(NM-005732)，MREI 1A(NM-005590)，NBSl(NM-002485)，ADPRT(PARP-1)，ADPRTL2，(PARP02)CTPS，RPA，RPA1，RPA2，RPA3，XPD，ERCC1，XPF，MMS19，RAD51，RAD51p，RAD51C，RAD51D，DMC1，XRCCR，XRCC3，BRCA1，BRCA2，RAD52，RAD54，RAD50，MRE 11，NB51，WRN，BLMKU70，RU80，ATM，ATRCHK1，CHK2，FANCA，FANCB，FANCC，FANCD1，FANCD2，FANCE，FANCF，FANCG，FANCC，FANCD1，FANCD2，FANCE，FANCF，FANCG，RAD1和RAD9。在HR依赖性DNA DSB修复通道中涉及的其它蛋白质包括调节因子，例如EMSY(Cell(2003)115523-535)。
缺乏HR依赖性DNA DSB修复活性的癌症可以含有或者包括一种或多种这样的癌细胞，与正常细胞相比，它们经由通道修复DNA DSB的能力降低或者消失，即，在该一种或多种癌细胞中，HR依赖性DNADSB修复通道的活性可能降低或消失。
在患者缺乏HR依赖性DNA DSB修复活性的癌症的个体的一种或多种癌细胞中，HR依赖性DNA DSB修复通道的一种或多种组分的活性可能消失。HR依赖性DNA DSB修复通道的组分在本领域已被充分确认(例如见，Science(2001)2911284-1289)，包括以上列出的组分。
本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防缺乏HR依赖性DNA DSB修复活性的癌症。
本发明还提供一种治疗或预防缺乏HR依赖性DNA DSB修复活性的癌症的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或包含式I化合物的组合物。
在一项实施方案中，癌细胞缺乏一种或多种表型的HR依赖性DNADSB修复活性，所述表型选自ATM(NM-000051)，RAD51(NM-002875)，RAD51L1(NM-002877)，RAD51C(NM-002876)，RAD51L3(NM-002878)，DMCl(NM-007068)，XRCC2(NM7005431)，XRCC3(NM-005432)，RAD52(NM-002879)，RAD54L(NM-003579)，RAD54B(NM-012415)，BRCA-1(NM-007295)，BRCA-2(NM-000059)，RAD5O(NM-005732)，MREI 1A(NM-005590)，NBSl(NM-002485))，ADPRT(PARP-1)，ADPRTL2，(PARP02)CTPS，RPA，RPA1，RPA2，RPA3，XPD，ERCC1，XPF，MMS19，RAD51，RAD51p，RAD51C，RAD51D，DMC1，XRCCR，XRCC3，BRCA1，BRCA2，RAD52，RAD54，RAD50，MRE11，NB51，WRN，BLMKU70，RU80，ATM，ATRCHK1，CHK2，FANCA，FANCB，FANCC，FANCD1，FANCD2，FANCE，FANCF，FANCG，FANCC，FANCD1，FANCD2，FANCE，FANCF，FANCG，RAD1和RAD9。
在另一实施方案中，癌细胞具有一种BRCA1和/或BRCA2缺陷表型。含这种表型的癌细胞可能缺乏BRCA1和/或BRCA2，即，BRCA1和/或BRCA2在该癌细胞中的表达和/或活性可能减小或消失，例如由于编码核酸中的突变或多态现象，或者由于编码调节因子的基因(例如编码BRCA2调节因子的EMSY基因)的扩增、突变或多态化(Cell(2003)115523-535)。
BRCA-1和BRCA-2是已知的肿瘤抑制剂，其野生型等位片段在杂合载体的肿瘤中常常丧失(Oncogene，(2002)21(58)8981-93；Trends Mol.Med.，(2002)8(12)571-6)。BRCA-1和/或BRCA-2突变与乳腺癌的联系也被充分确认(Exp Clin Cancer Res，(2002)21(3Suppl)9-12)。还已知编码BRCA-2结合因子的EMSY基因的扩增与乳腺及卵巢癌有关。BRCA-1和/或BRCA-2中的突变的载体，其卵巢癌、前列腺癌和胰腺癌的危险也增加。BRCA-1和BRCA-2中的变异的检测是本领域熟知的，在例如EP 699 754、EP 705 903、Genet.Test(1992)175-83、Cancer TreatRes(2002)10729-59、Neoplasm(2003)50(4)246-50、Ceska Gynekol(2003)68(1)11-16中有说明。BRCA-2结合因子EMSY的扩增的测定描述于Cell115523-535中。已证实PARP抑制剂可用于特异性杀伤BRCA-1和BRCA-2缺陷肿瘤(Nature(2005)434913-916和917-920)。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防BRCA-1或BRCA-2缺陷肿瘤。
本发明还提供一种用于治疗或预防BRCA-1或BRCA-2缺陷肿瘤的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
在一项实施方案中，本发明的PARP抑制剂可用于消除BRCA-2缺陷细胞的预防性治疗(见，Cancer Res.(2005)6510145)。
本发明化合物可用于治疗或预防神经变性病，包括，与多谷氨酰胺扩展区有关的神经变性、亨廷顿病、肯尼迪病、脊髓小脑性共济失调，齿状核红核苍白球路易体萎缩(DRPLA)、与蛋白质聚集有关的神经变性、马-约病、阿尔兹海默病、帕金森病、肌萎缩侧索硬化、海棉状脑病、朊病毒相关疾病和多发性硬化病(MS)。
因此，本发明提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物用于治疗或预防神经变性病。
本发明还提供一种用于治疗或预防神经变性病的方法，该方法包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或含有式I化合物的组合物。
本发明化合物还可用于治疗或预防逆转录病毒感染(US 5652260)、视网膜损伤(Curr.Eye Res.(2004)，29403)、皮肤衰老和UV诱发的皮肤损伤(US 5589483和Biochem.Pharmacol(2002)63921)。
本发明化合物可用于治疗或预防早老性老化和延缓与年龄有关的细胞机能不良的发生(Pharmacological Research(2005)5293-99)。
本发明化合物可以按照标准的药学操作，单独地或者与可药用的载体、赋形剂、稀释剂、调节剂、填料、缓冲剂、稳定剂、防腐剂、润滑剂组合于药物组合物中，施用给哺乳动物、优选人类。
本发明化合物可以通过任何方便的给药途径施用给治疗对象，可以是全身/外周或在所希望的作用部位施用，包括但不限于，经口(例如摄食)、局部(包括例如透皮、鼻内、眼部、颊含和舌下)、肺部(例如利用气溶胶经口或鼻的吸入或吹入治疗)、直肠、阴道、肠道外(例如注射，包括皮下、皮内、肌内、静脉内、动脉内、心内、鞘内、脊椎内、囊内、囊下、眼眶内、腹膜内、气管内、表皮下、关节内、蛛网膜下和胸骨内)，以及植入贮库剂(例如皮下或肌内植入)。
治疗对象可以是真核生物、动物、脊椎动物、哺乳动物、啮齿动物(例如豚鼠、仓鼠、大鼠、小鼠)、鼠科动物(例如小鼠)、犬科动物(例如狗)、猫科动物(例如猫)、马科动物(例如马)、灵长目动物、类人猿(如猴或无尾猿)、猴(如狨猴、狒狒)、无尾猿(例如大猩猩、黑猩猩、猩猩、长臂猿)或人。
本发明还提供含有一种或多种本发明化合物和可药用载体的药物组合物。含有活性成分的药物组合物可以是适合口服使用的形式，例如，片剂、糖锭、锭剂、水基或油基混悬剂、可分散的粉剂或粒剂、乳剂、硬或软胶囊，或是糖浆剂或酏剂。预定口服用药的组合物可以根据本领域制造药物组合物的任何已知方法制备，并且这类组合物中可以含有选自甜味剂、风味剂、着色剂和防腐剂的一种或多种试剂，以形成药学上精美而可口的制剂。片剂中含有与适合制造片剂的无毒的可药用赋形剂混合的活性成分。这些赋形剂可以是，例如，惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；成粒剂和崩解剂，例如，微晶纤维素、交联的羧甲基纤维素钠、玉米淀粉或藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是不包衣的，或者可以用已知技术包衣，以遮盖药物的不愉快的味道或延缓在胃肠道中的崩解和吸收，从而提供长时间的持续作用。例如，可以使用水溶性的遮味材料，例如羟丙基甲基纤维素或羟丙基纤维素，或使用延时材料，例如乙基纤维素、乙酸丁酸纤维素。
口服制剂也可以制成硬明胶胶囊的形式，其中活性成分与一种惰性固体稀释剂，例如与碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或制成软明胶胶囊，其中活性成分与水溶性载体(例如聚乙二醇)或油性介质(例如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。
水基混悬剂含有与适合制备水基混悬剂的赋形剂混合的活性物质。这些赋形剂是悬浮剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂可以是天然存在的磷脂，例如卵磷脂，或是氧化烯与脂肪酸的缩合产物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如十六醇聚氧乙烯(17)醚，或是环氧乙烷与衍生自脂肪酸及己糖醇的偏酯的缩合产物，例如山梨醇聚氧乙烯单油酸酯，或是环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如失水山梨醇聚氧乙烯单油酸酯。水基混悬剂还可含有一种或多种防腐剂，例如对羟基苯甲酸乙酯或正丙酯，一种或多种着色剂，一种或多种风味剂，和一种或多种甜味剂，例如蔗糖、糖精或天冬甜素。
油基混悬剂可以通过将活性成分悬浮在植物油(例如花生油、橄榄油、芝麻油或椰子油)中，或悬浮在矿物油(例如液体石蜡)中来制备。油基混悬剂可以含有增稠剂，例如蜂蜡、硬蜡或十六醇。可以加入甜味剂(例如上述的那些)和风味剂以提供可口的口服制剂。这些组合物可以通过加入抗氧化剂如丁基化羟基苯甲醚或α-生育酚来防腐。
适合通过加水制成水基混悬剂的可分散粉剂和粒剂，提供了与分散剂或润湿剂、悬浮剂及一种或多种防腐剂混合的活性成分。合适的分散剂或润湿剂及悬浮剂的实例是上面已提到的那些。其它的赋形剂，例如甜味剂、风味剂和着色剂，也可以存在。这些组合物可以通过加入抗氧化剂(例如抗坏血酸)来防腐。
本发明的药物组合物还可以是油/水乳状液的形式。油相可以是植物油，例如橄缆油或花生油，或是矿物油，例如液体石蜡，或这些油的混合物。合适的乳化剂可以是天然存在的磷脂，例如大豆磷脂，以及由脂肪酸和己糖醇酐衍生的酯或偏酯，例如失水山梨醇单油酸酯，和上述偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如失水山梨醇聚氧乙烯单油酸酯。乳剂中还可含有甜味剂、矫味剂、防腐剂和抗氧化剂。
糖浆剂和酏剂可以用甜味剂(例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖)配制。这类制剂还可含有镇痛剂、防腐剂、矫味剂、着色剂和抗氧化剂。
药物组合物可以是无菌的可注射水溶液的形式。在可以使用的合格的媒液和溶剂中包括水、Ringer溶液和等渗的氯化钠溶液。
无菌的注射制剂也可以是无菌的可注射的o/w微乳液，其中活性成分溶于油相。例如，可以先将活性成分溶在大豆油和卵磷脂的混合物中，然后将该油溶液加到水和甘油的混合物中并加工形成微乳液。
可注射的溶液或微乳液可以利用局部推注加入到患者血流中。或者是，以保持本发明化合物的恒定的循环浓度的方式施用溶液或微乳液可能有利。为了保持这样一种恒定的浓度，可以使用连续静脉内递药装置。这样一种装置的实例是Deltec CADD-PLUSTM5400型静脉内注射泵。
药物组合物可以是用于肌内和皮下给药的无菌注射用水基或油基混悬剂。这种混悬剂可按照已知工艺使用上面已提到的那些合适的分散或润湿剂和悬浮剂配制。无菌的注射制剂也可以是在无毒的肠道外可用的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬浮液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。此外，通常使用无菌的不挥发的油作为溶剂或悬浮介质。为此可以使用任何刺激性小的不挥发油，包括合成的甘油单酯或二酯。另外，脂肪酸(如油酸)可用于制备注射剂。
式I化合物也可以以栓剂的形式用于药物的直肠给药。这些组合物可以通过将药物与合适的无刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在常温下是固体，但在直肠温度下是液体，因此会在直肠中熔化，释放出药物。这类物质包括可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇的混合物及聚乙二醇的脂肪酸酯。
对于局部使用，采用含式I化合物的乳膏、油膏、胶冻剂、溶液剂或混悬剂等。(对于这种用途，局部施用应包括漱口剂和含漱液)。
本发明化合物可以通过局部施用合适的鼻内给药媒剂和递送装置，以鼻内给药形式施用，或者通过透皮途径，使用本领域普通技术人员熟知的透皮贴剂的形式给药。要以透皮递送系统的形式给药，在用药方案的整个期间给药当然应该是连续的而不是间歇的。本发明化合物也可以利用诸如可可脂、甘油明胶、氢化植物油、各种分子量的聚乙二醇的混合物和聚乙二醇的脂肪酸酯等基料，以栓剂形式递送。
当本发明化合物施用给治疗对象时，所选择的剂量水平将取决于多种因素，包括但不限于，具体化合物的活性，个别症状的严重程度，给药途径，用药时间，化合物的排泄速度，治疗的持续时间，联合使用的其它药物、化合物和/或物质，以及患者的年龄、性别、体重、状况、一般健康和先前的医疗史。化合物的数量和用药途径最终将由医师自行决定，但剂量通常会使作用部位处的局部浓度实现所要求的效果而不产生明显的伤害或不利的副反应。
体内施用可以在整个治疗过程中以一剂量连续地或间歇地(例如按适当间隔分次给药)实行。确定最有效的方式和施用剂量的方法是本领域技术人员熟知的，并将随治疗中使用的制剂、治疗的目的、所治疗的靶细胞和所治疗的对象而变。可以实行单次或多次给药，剂量水平和样式由负责治疗的医师选择。
一般来说，活性化合物的合适剂量处在每kg治疗对象体重每天约100μg至约250mg。在活性化合物是盐、酯、前药等的情形，用药量在母体化合物的基础上计算，于是使用的实际重量按比例增加。
本发明化合物还可与抗癌药物或化疗药物联合使用。
本发明化合物可作为化学和辐射敏化剂用于癌症治疗。它们可用于先前进行过或正在进行癌症治疗的哺乳动物的治疗。先前治疗包括先前的化疗、放疗、手术或免疫疗法，例如癌症疫苗。
因此，本发明提供了式I化合物和抗癌药物的联合，用于同时、分别或顺序给药。
本发明还提供式I化合物、放疗和其它化疗药物的联合，用于同时、分别或顺序施用。
本发明还提供一种用于制造药物的式I化合物，该药物在癌症治疗中作为辅剂使用，或通过与电离辐射和其它化疗药物联合，用于强化对肿瘤细胞的作用。本发明还提供式I化合物在制造药物中的应用，该药物在癌症治疗中作为辅剂使用，或者通过与电离辐射和其它化疗药物联合，增强对肿瘤细胞的作用。本发明化合物还可以与电离辐射和其它化疗药物联合使用。
本发明还提供一种化疗或放疗的方法，该方法包括对有需要的患者将有效量的式I化合物或含式I化合物的组合物与电离辐射或化疗药物联合施用。本发明化合物也可以与电离辐射及其它化疗药物联合施用。
在联合疗法中，本发明化合物可以在向需要治疗的对象施用其它抗癌药物之前(例如5分、15分、30分、45分、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周之前)，同时，或之后(例如5分、15分、30分、45分、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周之后)施用。在各式各样的实施方案中，本发明化合物和其它抗癌药物相隔1分、10分、30分、小于1小时、1-2小时、2-3小时、3-4小时、4-5小时、5-6小时、6-7小时、7-8小时、8-9小时、9-10小时、10-11小时、11-12小时、不超过24小时，或不超过48小时给药。
本发明化合物和其它抗癌药物可以加合地或协同增效地起作用。本发明化合物和其它抗癌药物的协同联合使得本发明化合物和其它抗癌药物之一或者二者可使用较低的剂量和/或较少的用药次数，和/或较少次数的施用药物能降低与向治疗对象施用药物有关的任何毒性，而不降低药物在癌症治疗中的效力。此外，协同作用会使这些药物在癌症治疗中的效力提高和/或减小与单独使用任何药物有关的任何有害或不良的副作用。
用来与本发明化合物联合使用的癌症药物或化疗药物的实例可以在下列文献中找到Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T.Devita and S.Hellman(editors)，6th edition(February 15，2001)，LippincottWilliams&Wilkins Publishers。本领域普通技术人员能够根据所涉及的药物和癌症的具体特点判定何种药物的联合会是有用的。这些抗癌药物包括，但不限于，以下药物HDAC抑制剂，雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，类视黄醇受体调节剂，细胞毒性/细胞生长抑制剂，抗增生剂，异戊二烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，HIV蛋白酶抑制剂，逆转录酶抑制剂和其它血管生成抑制剂，细胞增生和生存信号抑制剂，凋亡诱发剂和干扰细胞周期关卡的试剂。本发明化合物在与放射疗法共同施用时特别有效。
“HDAC抑制剂”的实例包括辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA)、LAQ824、LBH589、PXD101、MS275、FK228、丙戊酸、丁酸和CI-994。
“雌激素受体调节剂”是指干扰或抑制雌激素与受体结合的化合物，不管其机制如何。雌激素受体调节剂的实例包括，但不限于，他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟维司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]苯基-2，2-二甲基丙酸酯，4，4’-二羟基二苯甲酮-2，4-二硝基苯腙，和SH646。
“雄激素受体调节剂”是指干扰和抑制雄激素与受体结合的化合物，不管其机制如何。雄激素受体调节剂的实例包括非那雄胺和其它5α-还原酶抑制剂，尼鲁米特，氟他胺，比卡鲁胺、利阿唑和乙酸阿比特龙。
“类视黄醇受体调节剂”指干扰或抑制类视黄醇与受体结合的化合物，不管其机制如何。这类类视黄醇受体调节剂的实例包括贝沙罗汀，维A酸，13-顺维A酸，9-顺维A酸，α-二氟甲基鸟氨酸，ILX23-7553，反-N-(4’-羟基苯基)维A酰胺，和N-4-羧苯基维A酰胺。
“细胞毒性/细胞生长抑制剂”是指主要通过直接干扰细胞发挥功能或者抑制或干扰细胞有丝分裂造成细胞死亡或抑制细胞增生的化合物，包括烷基化试剂，肿瘤坏死因子，嵌入剂，低氧激活的化合物，微管抑制剂/微管稳定剂，有丝分裂驱动蛋白抑制剂，在有丝分裂进程中涉及的激酶抑制剂，抗代谢物，生物响应调节剂，激素/抗激素治疗药物，造血生长因子，单克隆抗体靶向药物，拓扑异构酶抑制剂，蛋白酶体抑制剂和泛素连接酶抑制剂。
细胞毒性剂的实例包括，但不限于，环磷酰胺，苯丁酸氮芥，卡莫司汀(BCNU)，洛莫司汀(CCNU)，白消安，曲奥舒凡，sertenef，恶液质素，异环磷酰胺，他索纳明，氯尼达明，卡铂，六甲蜜胺，泼尼莫司汀，二溴卫矛醇，雷莫司汀，福莫司汀，萘达铂，aroplatin，奥沙利铂，替莫唑胺，甲磺酸甲酯，丙卡巴肼，达卡巴嗪，庚铂，雌莫司汀，甲苯磺酸英丙舒凡，曲磷胺，尼莫司汀，二溴螺氮铵，嘌嘧替派，洛铂，沙铂，甲基丝裂霉素，顺铂，伊罗夫文，右异环磷酰胺，顺-胺二氯(2-甲基吡啶)铂，苄基鸟嘌呤，葡磷酰胺、GPX100，四氯化(顺，反，反)二亚甲基(己烷-1，6-二胺)亚甲基[二胺-铂(II)]双[二胺(氯)铂(II)]，二吖丙啶基精胺，三氧化二砷，1-(11-十二烷基氨基-10-羟基十一烷基)-3，7-二甲基黄嘌呤，佐柔比星，伊达比星，柔红霉素，比生群，米托蒽醌，吡柔比星，吡萘非特，戊柔比星，氨柔比星，多柔比星，表柔比星，抗瘤酮，3’-脱氨基-3’-吗啉基-13-脱氧-10-羟基去甲柔红霉素，安那霉素，加柔比星，依利奈法德，MEN10755和4-去甲氧基-3-去氨基-3-氮杂环丙基-4-甲基磺酰柔红霉素(见WO 00/50032)。其它的实例包括Raf激酶抑制剂(例如Bay43-9006)和mTOR抑制剂(例如Wyeth的CCI-779和Ariad AP23573)。另外的实例是P13K的抑制剂(例如LY294002)。
在一项实施方案中，本发明化合物可以与烷基化试剂联合使用。
烷基化试剂的实例包括，但不限于，氮芥、环磷酰胺、异环磷酰胺、曲磷胺和苯丁酸氮芥；亚硝基脲卡莫司汀(BCNU)和洛莫司汀(CCNU)；烷基磺酸酯白消安和曲奥舒凡；三氮烯类达卡巴嗪、丙卡巴肼和替莫唑胺；含铂复合物顺铂、卡铂、aroplatin和奥沙利铂。
在一项实施方案中，烷基化试剂是达卡巴嗪。达卡巴嗪可以以约150mg/m2(治疗对象的身体表面积)至约250mg/m2的剂量施用给治疗对象。在另一实施方案中，达卡巴嗪以约150-250mg/m2的剂量每天一次向治疗对象静脉内施用连续5天。
在一项实施方案中，烷基化试剂是丙卡巴肼。丙卡巴肼可以以约50mg/m2(治疗对象的身体表面积)至约100mg/m2的剂量施用给治疗对象。在另一实施方案中，丙卡巴嗪以约50-100mg/m2的剂量每天一次向治疗对象静脉内施用连续5天。
在一项实施方案中，烷基化试剂是替莫唑胺。替莫唑胺可以以约150-200mg/m2(治疗对象的身体表面积)的剂量施用给治疗对象。在另一实施方案中，替莫唑胺以约150-200mg/m2的剂量每天一次向动物口服给药连续5天。
抗有丝分裂药物的实例包括同分异构秋水仙碱，软海绵素B，秋水仙碱，秋水仙碱衍生物，海兔毒素10，美登索，利索新，硫秋水仙碱和三苯甲基半胱氨酸。
低氧激活的化合物的实例是替拉扎明。
蛋白酶体抑制剂的实例包括但不限于乳胞素，硼替佐米，epoxomicin和肽醛(例如MG 132、MG 115和PSI)。
微管抑制剂/微管稳定剂的实例包括紫杉醇，硫酸长春地辛，长春新碱，长春碱，长春瑞滨，3，4’-二脱氢-4’-脱氧-8’-去甲长春碱，多西他塞，利索新，多拉司他汀，米伏布林羟乙磺酸盐，auristatin，西马多丁，RPR109881，BMS184476，长春氟宁，念珠藻环肽，2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺，脱水长春碱，N，N-二甲基-L-缬氨酰-L-缬氨酰-N-甲基-L-缬氨酰-L-脯氨酰-L-脯氨酸-叔丁基酰胺，TDX258，埃坡霉素(见例如US 6,284,781和6,288,237)和BMS188797。
拓扑异构酶抑制剂的一些实例是托泊替康，hycaptamine，伊立替康，卢比替康，依沙替康，吉马替康，二氟替康，甲硅烷基喜树碱，9-氨基喜树碱，喜树碱，克立那托，丝裂霉素C，6-乙氧基丙酰-3’，4’-O-外-亚苄基酵酒菌素，9-甲氧基-N，N二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺，1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氢-9-羟基-4-甲基-1H，2H-苯并[de]吡喃并[3’，4’b，7]吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮，勒托替康，7-[2-(N-异丙基氨基)乙基]-(20S)喜树碱，BNP1350，BNPI1100，BN80915，BN80942，磷酸伊托泊苷，替尼泊苷，索布佐生，2’-二甲基氨基-2’-脱氧伊托泊苷，GL331，N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羟基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺，asulacrine，(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羟基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氢呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-二氧杂环戊烯-6-酮，2，3-(亚甲氧基)-5-甲基-7-羟基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶鎓，6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]异喹啉-5，10-二酮，5-(3-氨基丙氨基)-7，10-二羟基-2-(2-羟乙基氨甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮，N-[1-[2-(二乙基氨基)乙氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻吨-4-基甲基]甲酰胺，N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺，6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羟基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司钠；非喜树碱拓扑异构酶-1抑制剂，例如吲哚并咔唑；以及拓扑异构酶-1和II双重抑制剂，例如苯并吩嗪、XR20115761MLN 576和苯并吡啶并吲哚。
在一项实施方案中，拓扑异构酶抑制剂是伊立替康。伊立替康可以以约50-150mg/m2(实验对象身体表面积)的剂量施用给治疗对象。在另一实施方案中，伊立替康以约50-150mg/m2的剂量在第1-5天每天一次静脉内对治疗对象连续给药5天，然后以约50-150mg/m2的剂量在第28-32天每天一次静脉内给药连续5天，然后再以约50-150mg/m2的剂量在第55-59天每天一次静脉内给药连续5天。
有丝分裂驱动蛋白(特别是人类有丝分裂驱动蛋白KSP)的抑制剂的实例在以下专利文献中有描述PCT出版物WO 01/30768，WO01/98278，WO 02/056880，WO 03/050,064，WO 03/050,122，WO03/049,527，WO 03/049,679，WO 03/049,678，WO 03/039460，WO03/079973，WO 03/099211，WO 2004/039774，WO 03/105855，WO03/106417，WO 2004/087050，WO 2004/058700，WO 2004/058148和WO 2004/037171及美国专利申请US 2004/132830和US 2004/132719。在一项实施方案中，有丝分裂驱动蛋白的抑制剂包括但不限于KSP的抑制剂，MKLP1的抑制剂，CENP-E的抑制剂，MCAK的抑制剂，Kif14的抑制剂，Mphosph1的抑制剂和Rab6-KIFL的抑制剂。
“有丝分裂进程中涉及的激酶的抑制剂”包括，但不限于，aurora激酶抑制剂，Polo样激酶(PLK)抑制剂(特别是PLK-1的抑制剂)，bub-1抑制剂和bub-R1抑制剂。
“抗增生药物”包括反义RNA和DNA低聚核苷酸，例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，以及抗代谢药，例如依诺他滨、卡莫氟、替加氟、喷司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟达拉滨、卡培他滨、加洛他滨、十八烷基磷酸阿糖胞苷、fosteabine sodiumhydrate、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他滨、诺拉曲塞、培美曲塞、萘拉滨、2’-脱氧-2’-亚甲基胞苷、2’-氟亚甲基-2’-脱氧胞苷、N-[5-(2，3-二氢苯并呋喃基)磺酰]-N’-(3，4-二氯苯基)脲，N6-[4-脱氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四双烯酰]甘氨酰氨基]-L-甘油-B-L-吡喃甘露庚糖基]腺嘌呤、脱氢膜海鞘素、海鞘素、曲沙他滨、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氢-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩基-L-谷氨酸，氨基蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉诺新，11-乙酰-8-(氨甲酰氧基甲基)-4-甲酰-6-甲氧基-14-氧杂-1，11-二氮杂四环(7.4.1.0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯，苦马豆素、洛美曲索、右雷佐生、蛋氨酸酶、2’-氰基-2’-脱氧-N4-棕榈酰-1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶-2-甲醛缩氨基硫脲。
单克隆抗体靶向治疗药物的实例包括含有附着在癌细胞特异的或靶细胞特异的单克隆抗体上的细胞毒性剂或放射性同位素的治疗药物，其实例包括Bexxar(托西莫单抗)。
“HMG-CoA还原酶抑制剂”是指3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶的抑制剂。可以使用的HMG-CoA还原酶抑制剂的实例包括但不限于洛伐他汀(
见US 4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(
见US 4,444,784、4,820,850和4,916,239)、普伐他汀(
见US 4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)，氟代他汀(
见US 5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)和阿托伐他汀(
见US 5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)。可以在本发明中使用的这些及其它HMG-CoA还原酶抑制剂的结构式描述于M.Yalpani，“Cholesterol Lowering Drugs”，Chemistry &Industry，pp.85-89(1996年5月号)的第87页和US 4,782,082及4,885,314中。这里使用的术语“HMG-CoA还原酶抑制剂”包括具有HMG-CoA还原酶抑制剂活性的所有可药用的内酯和开环酸形式(即，内酯环被打开以形成游离酸)，以及这些化合物的盐和酯形式，因此这些盐、酯、开环酸和内酯形式的使用被包括在本发明的范围内。
“异戊二烯基蛋白转移酶抑制剂”指抑制任何一种异戊二烯基蛋白转移酶及其任何组合的化合物，这些酶包括法呢基蛋白转移酶(FPTase)、I型牻牛儿基牻牛儿基蛋白转移酶(GGPTase-I)，和II型牻牛儿基牻牛儿基蛋白转移酶(GGPTase-II，也称作Rab GGPTase)。
异戊二烯基蛋白转移酶抑制剂的实例可以在以下出版物和专利中找到 WO 96/30343，WO 97/18813，WO 97/21701，WO 97/23478，WO97/38665，WO 98/28980，WO 98/29119，WO 95/32987，U.S.5,420,245，U.S.5,523,430，U.S.5,532,359，U.S.5,510,510，U.S.5,589,485，U.S.5,602,098，欧洲专利0 618 221，欧洲专利0 675 112，欧洲专利0 604 181，欧洲专利0 696 593，WO 94/19357，WO 95/08542，WO95/11917，WO 95/12612，WO 95/12572，WO 95/10514，U.S.5,661,152，WO 95/10515，WO 95/10516，WO 95/24612，WO 95/34535，WO 95/25086，WO 96/05529，WO 96/06138，WO96/06193，WO 96/16443，WO 96/21701，WO 96/21456，WO 96/22278，WO 96/24611，WO96/24612，WO 96/05168，WO 96/05169，WO 96/00736，U.S.5,571,792，WO 96/17861，WO 96/33159，WO 96/34850，WO 96/34851，WO 96/30017，WO 96/30018，WO 96/30362，WO96/30363，WO 96/31111，WO 96/31477，WO 96/31478，WO 96/31501，WO 97/00252，WO97/03047，WO 97/03050，WO 97/04785，WO 97/02920，WO 97/17070，WO 97/23478，WO97/26246，WO 97/30053，WO 97/44350，WO 98/02436，和U.S.5,532,359。
作为异戊二烯基蛋白转移酶抑制剂对血管生成的作用的实例可见European J.of Cancer(1999)，35(9)1394-1401。
“血管生成抑制剂”指抑制新血管形成的化合物，不管其机制如何。血管生成抑制剂的实例包括，但不限于，酪氨酸激酶抑制剂(例如酪氨酸激酶受体Flt-1(VEGFR1)和Flt-1/KDR(VEGFR2)的抑制剂)，表皮衍生的、成纤维细胞衍生的或血小板衍生的生长因子，MMP(基质金属蛋白酶)抑制剂，整联蛋白阻断剂、干扰素-α、白介素-12、多硫酸戊聚糖、环加氧酶抑制剂(包括非甾类消炎药(NSAIDs)，如阿斯匹林和布洛芬及选择性环加氧酶-2抑制剂，如塞来考昔和罗非考昔(PNAS(1992)897384；JNCI(1982)69475；Arch.Opthalmol.(1990)108573；Anat.Rec.(1994)23868；FEBS Letters(1995)37283；Clin，Orthop.(1995)31376；J.Mol.Endocrinol.(1996)16107；Jpn.J.Pharmacol.(1997)75105；Cancer Res.(1997)571625(1997)；Cell(1998)93705；Intl.J.Mol.Med.(1998)2715；J.Biol.Chem.(1999)2749116))，甾类消炎药(例如皮质甾类，盐皮质类固醇，地塞米松，泼尼松，泼尼松龙，甲泼尼龙，倍他米松)，羧基酰胺基三唑，风车子抑碱A-4，角鲨胺，6-O-氯乙酰羰基夫马洁林，沙利度胺，血管生长抑素，肌钙蛋白-1，血管紧张素II拮抗剂(见J.Lab.Clin.Med.(1985)105141-145)，和VEGF的抗体(见Nature Biotechnology(1999)17963-968；Kim等(1993)Nature 362841-844；WO 00/44777和WO 00/61186)。
可以与本发明化合物联合使用的调节或抑制血管生成的其它治疗药物包括调节或抑制凝血和纤维蛋白溶解系统的药物(见Clin.Chem.La.Med.(2000)38679-692中的评述)。这些调节或抑制凝血和纤维蛋白溶解途径的药物实例包括，但不限于，肝素(见Thromb.Haemost.(1998)8010-23)，低分子量肝素和羧肽酶U抑制剂(也称作活性凝血酶可活化的纤维蛋白溶解抑制剂[TAFIa](见Thrombosis Res.(2001)101329-354)。TAFIa抑制剂已在PCT出版物WO 03/013,526和US60/349,925(2002年1月18日提交)中报道。
“干扰细胞周期关卡的试剂”是指抑制转导细胞周期关卡信号的蛋白激酶，从而使癌细胞对DNA损伤剂敏化的化合物。这些试剂包括ATR、ATM、Chk1和Chk2激酶的抑制剂，及cdk和cdc激酶抑制剂，其具体实例是7-羟基星孢素、星孢素、黄酮吡多、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。
“细胞增生和生存信号通道的抑制剂”是指抑制细胞表面受体和这些表面受体的信号转导级联系统下游的药物。这类药物包括EGFR的抑制剂(例如吉非替尼和厄洛替尼)，ERB-2的抑制剂(例如曲妥珠单抗)，IGFR的抑制剂(例如WO 03/059951中公开的那些)，细胞因子受体的抑制剂，MET的抑制剂，P13K的抑制剂(例如LY294002)，丝氨酸/苏氨酸激酶(包括但不限于Akt抑制剂，例如在WO 03/086404、WO03/086403、WO 03/086394、WO 03/086279、WO 02/083675、WO02/083139、WO 02/083140和WO 02/083138中所述)，Raf激酶的抑制剂(例如BAY-43-9006)，MEK的抑制剂(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR的抑制剂(例如Wyeth CCI-779和Ariad AP23573)。这些药物包括小分子抑制剂化合物和抗体拮抗剂。
“调亡诱发剂”包括TNF受体家族成员(包括TRAIL受体)的活化剂。
在一项实施方案中，本发明化合物可用来和选自替莫唑胺、顺铂、卡铂、奥沙利铂、伊立替康和托泊替康的一种或多种，特别是一种、两种或三种药物，联合用于治疗癌症。
本发明化合物还可以与一种或多种以下治疗药物联合用于治疗癌症阿巴瑞克(
)；阿地白介素(
)；阿地白介素(
)；阿仑珠单抗(
)；阿利维A酸(
)；别嘌呤(
)；六甲蜜胺(
)；氨磷汀(
)；阿那曲唑(
)；三氧化二砷(
)；门冬酰胺酶(
)；阿扎胞苷(
)，贝伐珠单抗(
)，贝沙罗汀胶囊(
)；贝沙罗汀凝胶(
)，博来霉素(
)；硼替佐米(
)，白消安静脉注射剂(
)；白消安口服剂(
)；卡鲁睾酮(
)；卡培他滨(
)；卡铂(
)；卡莫司汀(
)，卡莫司汀(
)；含聚苯丙生20的卡莫司汀植入片(Gliadel
)；塞米考苷(
)；西妥昔单抗(
)；苯丁酸氮芥(
)；顺铂(
)，克拉屈滨(
)；氯法拉滨(
)，环磷酰胺(
)；环磷酰胺(Cytoxan
)，环磷酰胺(Cytoxan
)；阿糖胞苷(Cytostar-
)，阿糖胞苷脂质体(
)；达卡巴嗪(DTIC-
)，放线菌素；放线菌素D(
)；达贝泊汀α(
)；柔红霉素脂质体(
)；柔红霉素，道诺霉素(
)；柔红霉素，道诺霉素(
)；地尼白介素-毒素连接物(
)；右雷佐生(
)；多西他赛(
)；多柔比星(Adriamycin
)；多柔比星(
)；多柔比星(Adriamycin PFS
)；多柔比星脂质体(
)；丙酸屈他雄酮(
)；丙酸屈他雄酮(Masterone
)；Elliott B溶液(Eliott’s B
)；表柔比星(
)；阿法依泊汀(
)；厄洛替尼(
)；雌莫司汀(
)；依托泊苷磷酸盐(
)；依托泊苷，VP-16(
)；依西美坦(
)；非格司亭(
)；氟尿苷(动脉内)(
)；氟达拉滨(
)；氟尿嘧啶，5-FU(
)；氟维司群(
)；吉非替尼(
)；吉西他滨(
)；吉妥珠单抗奥佐米星(
)；醋酸戈舍瑞林(
)；醋酸戈舍瑞林(Zoladex
)；醋酸组氨瑞林(Histrelin
)；羟基脲(
)；替伊莫单抗(
)；伊达比星(
)；异环磷酰胺(
)；甲磺酸伊马替尼(
)；干扰素α-2a(Roferon
)；干扰素α-2b(Intron
)，伊立替康(
)；来那度胺(
)；来曲唑(
)；亚叶酸(
)；醋酸亮丙立德(
)；左旋咪唑(
)；洛莫司汀，CCNU(
)；meclorethamine，氮芥(
)；醋酸甲地孕酮(
)；美法仑，L-PAM(
)；巯基嘌呤，6-MP(
)；美司钠(
)；美司钠(Mesnex
)；甲氨蝶呤(
)；甲氧沙林(
)；丝裂霉素C(
)；米托坦(
)；米托蒽醌(
)；苯丙酸南诺龙(Durabolin-
)；奈拉滨(
)；诺莫单抗(
)；奥普瑞白介素(
)；奥沙利铂(
)；紫杉醇(
)；紫杉醇(
)；紫杉醇蛋白结合颗粒(
)；帕利夫明(
)；帕米磷酸(
)；培加酶(Adagen
)；培门冬酶(
)；培非司亭(
)；培美曲塞二钠(
)；喷司他丁(
)；哌泊溴烷(
)；普卡霉素，光神霉素(
)；卟吩姆钠(
)；丙卡巴肼(
)；奎纳可林(
)；拉布立酶(
)；利妥昔单抗(
)；沙格司亭(
)；沙格司亭(
)；索拉非尼(
)；链佐星(
)；舒尼替尼马来酸盐(
)；滑石(
)；他莫昔芬(
)；替莫唑胺(
)；替尼泊苷，VM-26(
)；睾内酯(
)；硫代鸟嘌呤，6-TG(
)；塞替派(
)；托泊替康(
)；托瑞米芬(
)；托西莫单抗(
)；托西莫单抗/[131I]托西莫单抗(
)；曲妥珠单抗(
)；维A酸，ATRA(
)；尿嘧啶氮芥(Uracil Mustard
)；戊柔比星(
)；长春碱(
)；长春新碱(
)；长春瑞滨(
)；伏林司他(
)；唑来磷酸(
)；尼洛替尼(
)和达沙替尼(
)。
本发明还包括与属于选择性COX-2抑制剂的NSAID联合。对于本说明书而言，属于选择性COX-2抑制剂的NSAID是根据细胞或微粒体试验，通过测定对于COX-2的IC50与对于COX-1的IC50之比，确定特异地抑制COX-2超过COX-1至少100倍的那些NSAID。这些化合物包括，但不限于，在以下专利文献中公开的化合物US 5,474,995，5,861,419，6,001,843，6,020,343，5,409,944，5,436,265，5,536,752，5,550,142，5,604,260，5,698,584，5,710,140，WO 94/15932，US 5,344,991，5,134,142，5,380,738，5,393,790，5,466,823，5,633,272和5,932,598，它们都以引用参考的方式并入本文。
在本发明治疗方法中特别有用的COX-2抑制剂是5-氯-3-(4-甲基磺酰基)苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶，或其可药用的盐。
已作为COX-2特异性抑制剂描述并因此可用于本发明的化合物包括但不限于帕瑞考昔，
和
或其可药用的盐。
血管生成抑制剂的其它实例包括，但不限于，内皮生长抑素、ukrain、豹蛙酶、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)环氧乙基]-1-氧杂螺[2，5]辛-6-基(氯乙酰)氨基甲酸酯、乙酰地那林、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲酰)苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鲨胺、风车子抑碱，RPI4610、NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7，7-(羰基双[亚氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亚氨基[N-甲基-4，2-吡咯]羰基亚氨基]双-(1，3-萘二磺酸盐)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]-2-吲哚啉酮(SU5416)。
以上使用的“整联蛋白阻断剂”一词，是指选择性拮抗、抑制或抵制生理配体与αvβ3整联蛋白结合的化合物，选择性拮抗、抑制或抵制生理配体与αvβ5整联蛋白结合的化合物，拮抗、抑制或抵制生理配体与αvβ3整联蛋白和αvβ5整联蛋白这二者结合的化合物，以及拮抗、抑制或抵制表达在毛细内皮细胞上的特殊整联蛋白的活性的化合物。该名词还指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整联蛋白的拮抗剂。该名词还指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、β5α1、α6β1和α6β4整联蛋白任何组合的拮抗剂。
酪氨酸激酶抑制剂的一些具体实例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基异噁唑-4-甲酰胺，3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亚甲基]吲哚啉-2-酮，17-(烯丙胺基)-17-脱甲氧基格尔德霉素，4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-吗啉基)丙氧基]喹唑啉，N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氢-10-(羟甲基)-10-羟基-9-甲基-9，12-环氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3’，2’，1’-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮杂环辛间四烯-1-酮，SH268，三羟异黄酮，STI571，CEP2563，4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲烷磺酸盐，4-(3-溴-4-羟苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉，4-(4’-羟苯基)氨基-6，7二甲氧基喹唑啉，SU6668，STI571A，N-4-氯苯基-4-(4-吡啶甲基)-1-酞嗪胺，和EMD 121974。
在一项实施方案中，本发明化合物可用于治疗或预防由选择性N3-腺嘌呤甲基化试剂例如MeOSO2(CH2)-lexitropsin(Me-Lex)诱发的细胞坏死的出现。
与不是抗癌化合物的化合物的联合也被包括在本发明方法中，例如，本发明化合物与PPAR-γ(即，PPAR-gamma)激动剂和PPAR-δ(即，PPAR-delta)激动剂的联合药物可用于治疗某些癌症。PPAR-γ和PPAR-δ是核过氧化物酶体增殖物激活受体γ和δ。PPAR-γ在内皮细胞上的表达及其在血管形成中的参与在文献中已有报道(见J.Cardiovasc.Phormacol.(1998)31909-913；J.Biol.Chem.(1999)2749116-9121；Invest.Ophthalmol Vis.Sci.(2000)412309-2317)。近来，已指出PPAR-γ激动剂能在体外试验中抑制对VEGF的血管生成响应，曲格列酮和马来酸罗格列酮都抑制小鼠中视网膜新血管生成的发展。(Arch.Ophthamol.(2001)119709-717)。PPAR-γ和PPAR-γ/α激动剂的实例包括，但不限于，噻唑烷二酮(例如DRF2725，CS-011，曲格列酮，罗格列酮和吡格列酮)、非诺贝特、吉非贝齐、氯贝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并异噁唑-6-基)氧]-2-甲基丙酸(公开于USSN 09/782,856)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基苯并二氢呋喃-2-羧酸(公开于USSN 60/235,708和60/244,697)。
本发明的另一实施方案是本发明公开的化合物与抗病毒药(例如核苷类似物，包括更昔洛韦)联合用于治疗癌症。参见WO 98/04290。
本发明的另一实施方案是本发明公开的化合物与基因疗法联合用于治疗癌症。关于治疗癌症的基因方法参见Hall等(Am J Hum Genet(1997)61785-789和Kufe等(Cancer Medicine，第5版，pp 876-889，BCDecker，Hamilton 2000)。基因疗法可用来递送任何肿瘤抑制基因。这类基因的实例包括，但不限于，p53(它可通过重组病毒介导的基因转移来递送，例如见US 6,069,134)、uPA/uPAR拮抗剂(“Adenovirus-MediatedDelivery of a uPA/uPAR Antagonist Suppresses Angiogenesis-DependentTumor Growth and Dissemination in Mice”，Gene Therapy，August(1998)5(8)1105-13)，和干扰素γ(J Immunol(2000)164217-222)。
本发明化合物还可以与固有的多药抗性(MDR)，特别是与转运蛋白的高水平表达有关的MDR的抑制剂联合施用。这种MDR抑制剂包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制剂，例如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853、维拉帕米和PSC833(valspodar)。
本发明的化合物可以与止吐药联合使用，治疗因单独使用或与放疗一起使用本发明化合物可能引起的恶心或呕吐，包括急性、迟发性、后期和早发性呕吐。为预防或治疗呕吐，本发明化合物可以与其它止吐剂联合使用，尤其是神经激肽-1受体拮抗剂，5HT3受体拮抗剂(如昂丹司琼、格拉司琼、托烷司琼和zatisetron)，GABAB受体激动剂(例如巴氯芬)，皮质甾类(如Decadron(地塞米松)、康宁乐、Aristocort、鼻松、Preferid、Benecorten或在US 2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中公开的那些)，抗多巴胺能药，如吩噻嗪(例如丙氯拉嗪、氟奋乃静、硫利达嗪和美索达嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚。在一项实施方案中，选自神经激肽-1受体拮抗剂、5HT3受体拮抗体和皮质类固醇的一种止吐药作为辅剂施用，用来治疗或预防服用本发明化合物可能引起的呕吐。
与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗体在例如以下文献中有充分的描述U.S.5,162,339，5,232,929，5,242,930，5,373,003，5,387,595，5,459,270，5,494,926，5,496,833，5,637,699，5,719,147；EP 0360390，0394989，0428434，0429366，0430771，0436 334，0 443 132，0 482 539，0 498 069，0 499 313，0 512 901，0 512 902，0 514 273，0 514274，0 514 275，0 514 276，0 515 681，0 517 589，0 520 555，0 522 808，0 528 495，0 532 456，0533 280，0 536 817，0 545 478，0 558 156，0 577 394，0 585 913，0 590 152，0 599 538，0 610793，0 634 402，0 686 629，0 693 489，0 694 535，0 699 655，0 699 674，0 707 006，0 708 101，0709 375，0 709 376，0 714 891，0 723 959，0 733 632和0 776 893；PCT专利出版物WO 90/05525，90/05729，91/09844，91/18899，92/01688，92/06079，92/12151，92/15585，92/17449，92/20661，92/20676，92/21677，92/22569，93/00330，93/00331，93/01159，93/01165，93/01169，93/01170，93/06099，93/09116，93/10073，93/14084，93/14113，93/18023，93/19064，93/21155，93/21181，93/23380，93/24465，94/00440，94/01402，94/02461，94/02595，94/03429，94/03445，94/04494，94/04496，94/05625，94/07843，94/08997，94/10165，94/10167，94/10168，94/10170，94/11368，94/13639，94/13663，94/14767，94/15903，94/19320，94/19323，94/20500，94/26735，94/26740，94/29309，95/02595，95/04040，95/04042，95/06645，95/07886，95/07908，95/08549，95/11880，95/14017，95/15311，95/16679，95/17382，95/18124，95/18129，95/19344，95/20575，95/21819，95/22525，95/23798，95/26338，95/28418，95/30674，95/30687，95/33744，96/05181，96/05193，96/05203，96/06094，96/07649，96/10562，96/16939，96/18643，96/20197，96/21661，96/29304，96/29317，96/29326，96/29328，96/31214，96/32385，96/37489，97/01553，97/01554，97/03066，97/08144，97/14671，97/17362，97/18206，97/19084，97/19942和97/21702；和英国专利2266529，2268931，2269170，2269590,2271774，2292144，2293168，2293169，和2302689。
在上述专利和出版物中有对此类化合物的制备的充分说明，它们以参考引用的方式并入本文。
在一项实施方案，与本发明化合物联合使用的神经激肽-1受体拮抗剂选自2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)吗啉，或其可药用的盐，该化合物描述于US 5,719,147中。
本发明化合物还可与用来治疗贫血的药物一起施用。这种贫血治疗剂是例如一种连续红细胞(eythropoiesis)生成受体激活剂(例如依泊汀α)。
本发明化合物还可与用来治疗中性白细胞减少的药物一起施用。这样一种中性白细胞减少治疗药物是例如调节嗜中性粒细胞的生产和功能的造血生长因子，例如人类粒细胞集落刺激因子(G-CSF)，G-CSF的实例包括非格司亭。
本发明化合物还可以与免疫增强药物一起服用，例如左旋咪唑、异丙肌苷和日达仙(Zadaxin)。
本发明化合物还可与二膦酸盐(包括bisphosphonates，diphosphonates，bisphosphonic acids和diphosphonic acids)。二磷酸盐的实例包括但不限于依替膦酸钠(Didronel)，帕米膦酸二钠(Aredia)，阿仑膦酸钠(Fosamax)，利塞磷酸盐(Actonel)，唑来膦酸盐(Zometa)，伊斑膦酸盐(Boniva)，伊卡膦酸盐或英卡膦酸钠，氯膦酸盐，EB-1053，米诺膦酸盐，奈立膦酸盐，吡膦酸盐和替鲁膦酸盐，包括它们的所有可药用的盐、衍生物、水合物及混合物。
因此，本发明的范围包括本发明化合物与电离辐射及/和第二种化合物联合施用，该第二种化合物选自HDAC抑制剂，雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，类视黄醇受体调节剂，细胞毒性/细胞生长抑制剂，抗增生剂，异戊二烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，血管生成抑制剂，PPAR-γ激动剂，PPAR-δ激动剂，抗病毒药，固有多药耐性的抑制剂，止吐药，用于治疗贫血的药物，用于治疗中性白细胞减少的药物，免疫增强药物，细胞增生和生存信号抑制剂，干扰细胞周期关卡的药物，凋亡诱发剂和二膦酸盐。
在提到本发明化合物时，术语“施用”及其变体(例如，“服用”一种化合物)，是指将本发明化合物或其前药引入需要治疗的动物的系统之中。当本发明化合物或其前药与其它一种或多种活性药物(例如细胞毒性剂)联合提供时，“施用”及其变体均应理解为包括本发明化合物或其前药与其它药物同时和顺序引入。
这里使用的“组合物”一词包括含有特定数量的特定成分的产物，以及直接或间接地由特定成分按特定数量组合形成的任何产物。
这里使用的术语“治疗有效量”意味着活性化合物或药剂的数量在组织、系统、动物或人类中产生研究人员、兽医、医生或其它临床医师所寻求的生物或医学响应。
术语“治疗”指治疗患有病理症状的哺乳动物，并且指通过杀伤癌细胞减轻症状的作用，以及造成病症进展被抑制的作用，包括降低进展速度、阻停进食速度、改善症状和治愈病症。还包括作为预防措施(即，预防)的治疗。
这里使用的术语“可药用的”涉及化合物、材料、组合物和/或剂型，在可靠的医学判断的范围之内，它们适合与治疗对象(例如人)的组织接触，而没有过多的毒性、刺激作用、过敏响应或者其它问题或并发症，具有合理的利/害比。各种载体、赋形剂等在与制剂中其它成分相容的意义上也必须是“可接受的”。
术语“辅剂”是指化合物与已知的治疗手段联合使用。这些手段包括在不同类型癌症的治疗中使用的细胞毒性药物方案和/或电离辐射。特别是，已知活性化合物会增强许多癌症化疗药物的效果，这些化疗药物包括在治疗癌症中使用的拓扑异构酶类毒性药物(例如托泊替康、伊立替康、卢比替康)，大多数已知的烷基化试剂(例如DTIC、替莫唑胺)和铂基药物(例如卡铂、顺铂)。
在本发明权利要求的范围内还包括一种治疗癌症的方法，包括将治疗有效量的式I化合物与放射疗法和/或一种化合物联合施用，该化合物选自HDAC抑制剂，雌激素受体调节剂，雄激素受体调节剂，类视黄醇受体调节剂，细胞毒性/细胞生长制剂，抗增生剂，异戊二烯基蛋白转移酶抑制剂，HMG-CoA还原酶抑制剂，血管生成抑制剂，PPAR-γ激动剂，PPAR-δ激动剂，抗病毒药，固有多药抗性的抑制剂，止吐剂，用于治疗贫血的药物，用于治疗中性细胞增多的药物，免疫增强药物，细胞增生和生存信号的抑制剂，干扰细胞周期关卡的药物，凋亡诱发剂和二膦酸盐。
本发明的这些方面及其它方面按照本文中包含的教导将会是显而易见的。
在化学描述和以下的实施例中使用的缩写是 AcCl(乙酰氯)；(BzO)2(苯甲酰过氧化物)；Cbz-Cl(氯甲酸苄酯)；DCM(二氯甲烷)；DIPEA(二异丙基乙胺)；DMF(二甲基甲酰胺)；DMSO(二甲基亚砜)；eq.(当量)；ES(电喷雾)；EtOAc(乙酸乙酯)；EtOH(乙醇)；mol.sieves(分子筛)；HATU[六氟磷酸O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N N，N’，N’-四甲基脲鎓盐]；MeCN(乙腈)；MeOH(甲醇)；MS(质谱法)；MW(微波)；NBS(N-溴代琥珀酰亚胺)；NMMO(N-甲基吗啉-N-氧化物)；NMR(核磁共振)；Pcol(柱压)；iPrOH(异丙醇)；RT(室温)；sat.aq.(饱和水溶液)；SiO2(硅胶)；THF(四氢呋喃)；t-BuOH(叔丁醇)；KOAc(乙酸钾)；MW(微波)；IST
SPE column SCX(International Sorbent Technology
固相萃取柱阳离子交换树脂)；SFC(超临界流体色谱)；TBTU(四氟硼酸O-(1H-苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓盐)；Tcol(柱温)；CDCl3(氘化氯仿)；TLC(薄层色谱)；TFA(三氟乙酸)。
式I化合物可以通过式IA化合物与氨反应制备
其中R1和R2的定义如上，Rx是C1-6烷基，例如甲基。该反应一般在约70℃使用NH3的水溶液在溶剂(如THF)中于密封的反应器(小心)中进行。或者是，可以加入碱，例如NaOH或KOH，将酯水解成相应的羧酸(Rx是氢)，随后在偶联剂(例如HATU或TBTU)和DIPEA存在下于溶剂(如DMF)中加入NH3，反应在室温左右进行。或者是，可以用例如Boc2O将该羧酸活化，形成混合酸酐，然后与碳酸氢铵反应，通常在溶剂如吡啶中进行。或者是，可以在溶剂(例如甲醇)中于约120℃(例如利用微波)下用氨将该酯转化成式IA化合物。
式IA化合物中的哌啶环上的氮原子在以上合成中可以用例如Boc保护。
化合物IA可以通过式IB化合物与叠氮化物反应制备
其中R1、R2和Rx的定义如上。可以使用叠氮化物，例如NaN3，一般是在溶剂(如DMF)中于约90-140℃下进行反应。也可以使用加合物，例如2，6-二甲基吡啶。反应可以在氮气氛下进行。
化合物IB可以通过式IC化合物与式ID化合物缩合来制备
其中R1、R2和Rx定义如上，L1是一个离去基团，例如硝基或卤素，如氟。方法包括在脱水剂(如MgSO4或分子筛)存在下缩合，或在醇溶剂(如乙醇)中回流加热。该反应可以在氮气氛下进行。
式IC化合物可以通过用氧化剂(例如NMMO)氧化式IE化合物制备
其中R1、Rx和L1的定义如上，L2是一个离去基团，例如卤素(如溴)，该反应通常在约室温下于溶剂(如MeCN)中进行。反应可以在氮气氛下进行。
其中L2是溴的式IE化合物可以通过用溴化剂(如NBS)在自由基引发剂(例如苯甲酰过氧化物)存在下氧化式IF化合物制备
其中R1、Rx和L1的定义同上，该反应一般在溶剂(如CCl4)中于回流下进行。反应可以在氮气氛下进行。
其中L1是氟的式IF化合物可以通过以下步骤制备将式IG化合物重氮化
其中R1和Rx的定义如上，随后将该中间体重氮盐分解。例如，重氮化可以用四氟硼酸硝鎓盐在溶剂(如DCM)中于约0℃下进行。然后可以分离出相应的四氟硼酸重氮盐，随后在升高的温度下分解成相应的氟苯衍生物(小心)，例如在溶剂(如二氯苯)中加热至160℃。
其中L1是硝基的式IF化合物可以通过将式IH化合物硝化
其中R1的定义如上，随后进行酯化来制备。硝化反应可以在硝酸盐(例如硝酸钾)和酸(如硫酸)存在下于大约室温下进行。酯化步骤可以在标准条件下进行，例如与式Rx-X的烷基卤化物(其中X是卤素，例如碘)在碱(例如碳酸铯)和溶剂(如DMF)存在下于大约室温下反应。也可以在回流条件下使用式Rx-OH的醇与一种酸性催化剂，例如从AcCl/MeOH原位产生的HCl。然后用氢和催化剂(如碳载钯)将硝基化合物氢化形成相应的苯胺，通常是在醇溶剂例如甲醇中，得到所要的式IF化合物。
或者是，式I化合物可以通过将式IJ化合物还原来制备
其中R1和R2定义如上。此反应可以按照Fowler反应，用酰基氯(例如CBz-Cl)和还原剂(如NaBH4)进行。在碳载钯上氢化，完成反应并除去CBz保护基团。
式IJ化合物可以通过式IK化合物与式IL的3-吡啶硼酸的交叉偶合来制备
其中R1、R2和L2的定义同上。此反应通常在Suzuki偶合条件下进行，例如使用催化剂(如Pd2(dba)3和三(叔丁基)膦)与碱(如碳酸钠)和溶剂(如DMF和水)在约90℃下进行。
式IK化合物可以通过式IM化合物与式IN化合物缩合制备
其中R1、R2和L2定义同上，L3是一个离去基团(例如卤素，如氟)，反应通常在溶剂(如DMF)中于大约180℃下在微波炉中进行。还可以加入碱，例如K2CO3。
式IM化合物的制备方法是，式IO化合物
其中R1和Rx定义同上，与碱(例如KOH或NaOH)在大约室温下反应，将该酯水解成相应的羧酸(Rx是氢)，随后在偶联剂(如HATU、DIPEA和TBTU)存在下于溶剂(DMF)中加入NH3，该反应在大约室温下进行。
式IO化合物可以由式IG化合物出发，通过在溶剂(如1，2-DCE)中于约55℃用试剂(如乙酰氯)将苯胺基团乙酰化来制备。然后可以通过在酸(例如浓盐酸)中用亚硝酸钠处理，一般是在共溶剂(如甲苯和水)存在于约0℃下进行，环化形成所要的吲唑。
在未说明中间体和起始物的合成方法的情形，这些化合物是市场上可购得的，或者可以利用标准方法，或利用以上的合成方法及本文中合成方案和实施例的扩展，从市售商品化合物制备。
式I化合物可以用已知方法或在以上的合成及本文的方案和实施例部分所述的方法，转化成其它的式I化合物。
在本文所述的任何合成序列中，可能必须和/或最好是保护在所关心的任何分子上的敏感或反应活性基团。这可以利用常规的保护基团，例如在Protecting Groups in Organic Synthesis，3rd Edition，Greene，T.W.and Wuts，P.G.M.；WileyInterscience，1999 and Kocienski，P.J.Protecting Groups，Thieme，1994中所述的基团实现。该保护基团可以在适当的后继步骤中用本领域已知的方法除掉。例如，当存在Boc(叔丁氧羰基)或苄基羰基保护基团时，可以通过在大约室温下加入溶剂(如TFA、DCM和/或MeCN)来去除。化合物也可以用标准方法氢化，例如在氢气氛下于溶剂(例如甲醇)中用催化剂(如Pd/C)处理。还可以在大约室温下在HCl和1，4-二氧六环存在下加入EtOAc以除去Boc或苄基羰基保护基团。
本发明化合物按照以下方案制备。化学式内的所有变量均定义同上。
当本发明化合物具有手性中心时，对映体可以用标准的分离方法，例如利用SFC、手性HPLC或用手性酸拆分，从外消旋物中分离出对映体。该分离可以在制造式I化合物的过程中的任何阶段进行。例如，分离可以在最终阶段进行，或者是可以分离出中间体并随后分离出特定的对映体以用于后继反应，得到所要的产物。
方案1 合成本发明化合物的衍生物的一个步骤示于方案1中，其中取代的2H-吲唑用与WO 2005/066136中所述的类似合成途径制备。在将2-硝基-3-甲基苯甲酸衍生物转化成相应的酯以后，用试剂(如N-溴代琥珀酰亚胺和苯甲酰过氧化物)将甲基进行自由基溴化，得到关键的苄基溴衍生物。这一苄基溴化物可以用例如N-甲基吗啉-N-氧化物和分子筛氧化成相应的苯甲醛。在该醛与胺缩合之后，通过用叠氮化钠在高温下处理该关键中间体实现关环，引入最终的氮原子并最终挤压氮原子以提供给吲唑环。还可以向此反应中加入碱，例如二甲基吡啶。该酯最后转化成伯酰胺，得到所要的衍生物。这可以通过将该酯在氨溶液中加热或者通过转化成相应的羧酸后进行酰胺偶合来完成。
方案1 方案2 方案1的一种变型示于以下的方案2中，它使得可以在吲唑核上引入取代基。当所需要的硝基苯甲酸无市售商品时，它们可以通过相应的苯甲酸衍生物的硝化，例如在浓硫酸中用硝酸钾硝化来制备。以上所述的合成操作使相应的苯胺得以形成，它可以通过先将吲唑乙酰化并在浓盐酸中于0℃下用亚硝酸钠环化来成环。或者是，可以用四氟硼酸硝鎓盐将该苯胺重氮化，并将相应的四氟硼酸重氮盐在高温下利用Schiemann反应分解(小心)，形成相应的二氟苯衍生物。按照方案1中所述的合成序列使苄基甲基得以氧化成相应的醛，并通过与一种(杂)酰苯胺偶合和用叠氮化钠环化，加工成所要的吲唑衍生物。
方案2 方案3 另一方法涉及吲唑在后一阶段中的官能化，如方案3中所示。此方法先将吲唑酯转化成相应的甲酰胺，并进行合适的氟(杂)芳基溴的亲核芳族取代。这使溴化衍生物得以制备，该衍生物在Suzuki偶合条件下，例如在碱(如碳酸钠)存在下用三(叔丁基)膦和Pd2(dba)3作为催化剂，进行交叉偶合。然后使用酰基氯(例如CBz-Cl和还原剂(如NaBH4)，通过Fowler反应，实现向所要的哌啶部分的转化。最后经氢化反应可产生相应的哌啶衍生物。
方案3 PARP-1SPA试验 本文所述的示例化合物在此试验中进行试验，发现其IC50值小于5μM，特别是小于50nM。
工作试剂 分析缓冲液100mM Tris pH8，4mM MgCl2，4mM精胺，200mM KCl，0.04％Nonidet P-40(乙基苯基聚乙二醇)。
酶混合物分析缓冲液(12.5μl)，100mM DTT(0.5μl)，PARP-1(5nM，Trevigen 4668-500-01)，水(至35μl)。
烟酰胺-腺嘌呤二核苷酸(NAD)/DNA混合物[3H-NAD](250μCi/ml，0.4μl，Perkin-Elmer NET-443H)，NAD(1.5mM，0.05μl，SIGMA N-1511)，生物素化NAD (250μM，0.03μl，Trevigen 4670-500-01)，活化小牛胸腺(1mg/ml，0.05μl，Amersham Biosciences 27-4575)，水(至10μl)。展开混合物链霉亲合素SPA珠(5mg/ml，Amersham Biosciences RPNQ0007)，溶在500mM EDTA中。
实验设计 反应在96孔微板中进行，最终体积每孔50μl。加入5μl 5％DMSO/化合物溶液，加入酶混合物(35μl)，通过加入NAD/DNA混合物(10μl)起始反应，室温下温育2小时。加入展开混合物(25μl)停止反应，室温下温育15分。用Packard TOP COUNT仪器测量。
在BRCA-1沉默HeLa细胞中的增殖试验 缩写 IMDM(Iscove改进的Dulbecco培养基)；RPMI(Roswell Park MemorialInstitute培养基)；MOI(感染复数)；GFP(绿色荧光蛋白)；PBS(磷酸盐缓冲液)；FCS(胎牛血清)；和DMEM(Dulbecco改进的Eagle培养基)。
本发明化合物还在配对细胞BRCA1wt和BRCA1-(shRNA)HeLa细胞中作了抗增殖试验。该试验表明，PARP抑制剂能够对BRCA缺陷细胞显示出选择性生长抑制作用。这些化合物对BRCA1缺陷细胞的CC50小于5μM，和超出BRCA健全细胞10倍以上的选择性。
此试验是基于活性胞将氧化还原染料(刃天青)转化成荧光终产物(试卤灵)的能力。产生的试卤灵的数量与细胞数目成正比。
细胞系 HeLa shBRCA1-GFP这是以100的感染复数用含有针对BRCA-1的shRNA的慢病毒和对GFP的表达盒转导的HeLa细胞。用Tagman分析测得的BRCA-1沉默超过80％，该细胞稳定地表达GFP。
HeLa THM-GFP这是以感染复数100用不表达任何shRNA的对照载体的HeLa细胞。
方案 -在96孔底部透明黑色板中于90μl培养介质*中按300细胞/孔接种 -在37℃，5％CO2下温育4小时 -每孔加10μl的10X化合物(5％DMSO/H2O) -在37℃、5％CO2下温育168小时 -加入在PBS1x中预稀释1∶1的10μl Celltiter Blue溶液(Promega，G8081) -将该混合物在37℃、5％CO2温育45分 -在室温避光温育15分 -在荧光光度计上读板，ex550nm，em590nm *培养基DMEM(GIBCO，41966-029)，10％FCS(GIBCO，10106-169)，0.1mg/ml青霉素-链霉素(GIBCO，15140-114)，2mM L-谷氨酰胺(GIBCO，3042190) 天然BRCA缺陷细胞系中的增殖试验 本发明化合物还显示出对天然的BRCA-1(MDA-MB-436)和BRCA-2(CAPAN-1)缺陷细胞系的增殖的抑制作用，CC50小于5微摩尔。
增殖试验 将细胞按700细胞/孔接种在96孔板内100μl合适培养基*/孔中。次日加入化合物的系列稀释液，最终体积200μl/孔。各稀释液以三重试样进行试验。
6天后，使用CellTiter-Blue细胞生存试验仪按照制造商(Promega)的说明估算细胞生存力。在Fusion Alpha酶标仪(Packard Bioscience)上读板。
对于低增殖细胞系(即CAPAN-1)，在加入化合物14天后进行增殖试验，在第7天改换培养基一次(抽出每孔中170μl培养基，换成170μl含化合物的新鲜培养基)。
*培养基 MDA-MB-436RPMI(GIBCO)，10％FBS(5％CO2) CAPAN-1IMDM(GIBCO)，20％FBS(5％CO2) 试验化合物在体内肿瘤学模型试验中显示出显著的活性水平。
制备实施例 实施例A 2-苯基-2H-吲哚-7-甲酰胺(A6) 步骤13-甲基-2-硝基苯甲酸甲酯(A1) 0℃下向3-甲基-2-硝基苯甲酸(10当量)在甲醇(0.4M)中的悬浮液逐滴加入AcCl(3.0当量)。将反应混合物在回流下搅拌20小时。减压去掉溶剂，残留物溶于EtOAc中，用NaHCO3饱和水溶液、盐水洗几次，干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到白色固体状的(A1)，将其用于下一步骤，不作进一步的纯化。1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ7.86(1H，d，J＝7.5Hz)，7.53-7.42(2H，m)，3.89(3H，s)，2.36(3H，s).MS(ES)C9H9NO4理论值195，实验值218(M+Na)+. 步骤23-(溴甲基)-2-硝基苯甲酸甲酯(A2) 将(A1)(1.0当量)、(BzO)2(0.06当量)和NBS(1.18当量)在CCl4中的混合物(就A1言为0.2M)在N2气氛下加热回流12小时。将混合物冷却至室温，用DCM稀释，减压浓缩，同时加在SiO2上干燥。残留物用快速柱色谱法在SiO2上纯化，用10∶90的EtOAc/石油醚洗脱，得到所要的(A2)，为白色固体。 1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ7.93(1H，d，J＝7.7Hz)，7.72(1H，d，J＝7.7Hz)，7.57(1H，t，J＝7.7Hz)，4.43(2H，s)，3.88(3H，s).MS(ES)C9H8BrNO4理论值273275，实验值242244(M-MeO)+，227229(M-NO2)+. 步骤33-甲酰基-2-硝基苯甲酸甲酯(A3) 向(A2)(10当量)和
分子筛(15g)在MeCN中的混合物(0.2M)在室温下加入NMMO(2.0当量)，将反应混合物在N2气氛下搅拌1.5小时。然后将混合物用EtOAc稀释，过滤，滤液用水、1N HCl和盐水洗，干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到白色固体状(A3)，它被用于下一步骤，不作进一步的纯化。1H NMR(400MHz，CDCl3.300K)δ9.96(1H，s)，8.26(1H，d，J＝7.9Hz)，8.18(1H，d，J＝7.9Hz)，7.77(1H，t，J＝7.9Hz)，3.93(3H，s).MS(ES)C9H7NO5理论值209，实验值208(M-H)-. 步骤42-硝基-3-[(苯基亚氨基)甲基]苯甲酸甲酯(A4) 将(A3)(1.0当量)和苯胺(1.05当量)在EtOH中的混合物(0.2M)于N2气氛下回流搅拌2小时，直至TCL(己烷/EtOAc＝75∶25)指示反应完成。蒸发溶剂得到(A4)，为白色固体，用于下一步骤前不作进一步的纯化。
1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ8.51(1H，d，J＝7.3Hz)，8.41(1H，s)，8.11(1H，d，J＝7.8Hz)，7.67(1H，t，J＝7.8Hz)，7.43(2H，t，J＝7.8Hz)，7.31(1H，t，J＝7.3Hz)，7.16(2H，d，J＝7.8Hz)，3.94(3H，s). 步骤52-苯基-2H-吲唑-7-羧酸甲酯(A5) 将(A4)(1.0当量)和NaN3(1.05当量)在无水DMF中的混合物(0.3M)于氮气氛和90℃下搅拌过夜。将粗产物减压浓缩，残留物在硅胶上用快速色谱法纯化，使用从10∶90到40∶60的EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到所要的(A5)，为棕色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ8.50(1H，s)，8.12(1H，d，J＝7.0Hz)，7.96-7.90(3H，m)，7.49(2H，t，J＝7.6Hz)，7.38(1H，t，J＝7.4Hz)，7.15(1H，t，J＝7.4Hz)，4.03(3H，s).MS(ES)C15H12N2O2理论值252，实验值253(M+H)+. 步骤62-苯基-2H-吲唑-7-甲酰胺(A6) 将酯(A5)在THF与32％的氨水的混合物中于封管内在70℃加热过夜。减压去除溶剂，残留物用快速色谱法在硅胶上纯化，使用从30∶70至50∶50的EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到所要的(A6)，为白色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO 300K)δ9.33(1H，s)，8.56(1H，bs)，8.16(2H，d，J＝7.9Hz)，8.08-8.00(2H，m)，7.88(1H，bs)，7.63(2H，t，J＝7.7Hz)，7.50(1H，t，7.4Hz)，7.27(1H，t，J＝7.9Hz).MS(ES)C14H11N3O理论值237，实验值238(M+H)+. 代表性实施例 实施例1 氯化3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐(B4) 步骤13-[4-({[3-(甲氧羰基)-2-硝基苯基]亚甲基}氨基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(B1) (B1)按照制备实施例A步骤4所述的一般程序，用3-(4-氨基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯制备，直到TCL(石油醚∶EtOAc＝4∶1)指示反应完成，(B1)不经进一步纯化，直接用下一步骤。
步骤22-{4-[1-(叔丁氧羰基)哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-羧酸甲酯(B2) (B2)按照对于制备实施例A步骤5报道的一般程序制备，粗产物在硅胶上用快速色谱法纯化，使用20-40％EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到所要的(B2)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ8.51(1H，s)，8.13(1H，d，J＝7.1Hz)，7.95(1H，d，J＝8.3Hz)，7.91(2H，d，J＝8.4Hz)，7.39(2H，d，J＝8.4Hz)，7.18(1H，t，J＝7.2Hz)，4.30-4.10(2H，m)，4.00(3H，s)，2.85-2.70(3H，m)，2.11-2.03(1H，m)，1.83-1.75(1H，m)，1.73-1.53(2H，m与H2O信号重叠)，1.48(9H，s).MS(ES)C25H29N3O4理论值435，实验值436(M+H)+. 步骤33-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(B3) 将(B2)在7N NH3/MeOH(0.1M)中于封管内在60℃加热2天。减压浓缩，粗产物用Et2O湿磨，得到所要的产物(B3)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ9.04(1H，br.s)，8.51(1H，s)，8.31(1H，d，J＝6.8Hz)，7.91(1H，d，J＝8.3Hz)，7.84(2H，d，J＝8.2Hz)，7.42(2H，d，J＝8.2Hz)，7.31-7.22(1H，m与CDCl3信号重叠)，5.95(1H，br.s)，4.40-4.05(2H，m)，2.90-2.70(3H，m)，2.15-2.00(1H，m)，1.85-1.75(1H，m)，1.75-1.50(2H，m与H2O信号重叠)，1.48(9H，s).MS(ES)C24H28N4O3理论值420，实验值421(M+H)+. 步骤4氯化3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐(B4) 在搅拌下向(B3)(1.0当量)在EtOAc中的溶液(0.2M)加入4NHCl/1，4-二氧六环溶液(10.0当量)，室温下搅拌反应混合物3小时。减压蒸除溶剂，粗产物用Et2O湿磨纯化，得到所要的(B4)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6.300K)δ9.32(1H，s)，9.12(1H，br.s)，8.87(1H，br.s)，8.55(1H，br.s)，8.13(2H，d，J＝8.6Hz)，8.06(1H，J＝7.0Hz)，8.02(1H，d，J＝8.4Hz)，7.89(1H，br.s)，7.55(2H，d，J＝8.6Hz)，7.27(1H，dd，J＝8.4，7.0Hz)，3.43-3.27(2H，m)，3.17-3.03(2H，m)，3.00-2.85(1H，m)，2.00-1.70(4H，m).MS(ES)C19H21ClN4O理论值320，实验可值321(M+H)+. 实施例2 2-{4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺(C1)和2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺胺(C2) 将实施例1(B4)用手性SFC分离(柱Chiralpak AS-H，1×25mm，流速10ml/min，Tcol35℃，Pcal100巴，调节剂55％(1PrOH+4％Et2NH))，使用CO2作为超临界洗脱剂，得到两种纯对映体。
第一个洗脱的对映体(C1)，保留时间(SFC)4.80min，为白色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ9.28(s，1H)，8.57(br.s，1H)，8.06(d，2H，J＝7.2Hz)，8.04(d，2H，J＝8.4Hz)，7.88(br.s，1H)，7.49(d，2H，J＝8.4Hz)，7.27(dd，1H，J＝8.4，7.2Hz)，3.08-2.94(m，2H)，2.77-2.67(m，1H)，2.64-2.52(m，1H)，1.98-1.90(m，1H)，1.75-1.47(m，4H).MS(ES)C19H20N4O理论值320，实验值321(M+H)+。
将该游离碱转化成氯化(3R)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐，测得的旋光度[α]20D＝+133.3(c0.15，MeOH)。
第二个洗脱的对映体(C2)，保留时间(SFC)6.51min，为白色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ9.28(s，1H)，8.57(br.s，1H)，8.06(d，2H，J＝7.2Hz)，8.04(d，2H，J＝8.4Hz)，7.88(br.s，1H)，7.49(d，2H，J＝8.4Hz)，7.27(dd，1H，J＝8.4，7.2Hz)，3.08-2.94(m，2H)，2.77-2.67(m，1H)，2.64-2.52(m，1H)，1.98-1.90(m，1H)，1.75-1.47(m，4H).MS(ES)C19H20N4O理论值320，实验值321(M+H)+。
将该游离碱转化成氯化(3S)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐，测得的旋光度[α]20D＝-137.9(c 0.145，MeOH)。
实施例3 三氟乙酸3-{4-[7-(氨基羰基)-5-氟-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐(D4) 步骤15-氟-1H-吲唑-7-羧酸甲酯(D1) 向实施例4(E3)(10当量)在1，2-二氯甲烷中的溶液(0.1M)加入AcCl(5当量)并在55℃加热2小时，然后减压除去溶剂。
将得到的白色固体溶于甲苯/水(5∶1，0.1M)中，将溶液冷却至0℃，加入HCl(10当量，37％)，然后慢慢地分批加入NaNO2(10当量)，将混合物在0℃搅拌3小时。有机相用水洗3次，干燥(MgSO4)，减压除去溶剂。
然后将在甲苯中的黄色溶液(0.1M)在90℃加热2小时。蒸发甲苯，得到所要的产物，为红色固体。
1H NMR(400MHz，DMSO，300K)δ13.37(1H，s)，8.23(1H，s)，7.63(1H，dd，J＝8.6Hz，J＝2.5Hz)，7.48(1H，dd，J＝8.6Hz，J＝2.5Hz)，3.66(3H，s).MS(ES+)C9H7FN2O2理论值194，实验值195(M+H)+。
步骤25-氟-1H-吲唑-7-甲酰胺(D2) 将(D1)溶在二氧六环/水(1∶1，0.1M)中，加入KOH(1.5当量)。室温下搅拌12小时后减压除去溶剂。得到的白色固体不经纯化，用于后继的偶合反应。
将该羧酸溶于DMF中(0.1M)，在0℃下加入TBU(1.5当量)。15分钟后加入DIPEA(20当量)和氨(3.0当量，0.5M二氧六环溶液)，将混合物在室温下搅拌36小时。加入EtOAc，有机相用NaHCO3饱和水溶液(3x)和盐水(2x)洗。将有机相干燥，减压蒸发，粗产物用快速色谱法纯化，使用1-20％的MeOH/DCM洗脱，得到白色固体(D2)。MS(ES+)C8H6FN3O理论值179，实验值180(M+H)+。
步骤32-(4-溴苯基)-5-氟-2H-吲唑-7-甲酰胺(D3) 向D2(1.0当量)在DMF中的溶液加入K2CO3(1.3当量)和4-溴氟苯(10.0当量)，将反应混合物在微波条件下于180℃加热20分钟。将反应混合物冷却至定温，用EtOAc稀释。有机相用盐水洗，干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂后得到(D3)，将其在硅胶上用色谱法纯化，用50-70％EtOAc/石油醚洗脱，得到标题化合物，为黄色粉末。 1H NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ9.34(1H，s)，8.50(1H，br.s)，8.17(2H，d，J＝9.0Hz)，8.03(1H，br.s)，7.90-7.80(4H，m).MS(ES+)C14H9BrFN3O理论值334/336，实验值335/337(M+H)+. 步骤45-氟-2-(4-吡啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺(D4) 将(D3)(1.0当量)和吡啶-3-硼酸(1.3当量)在DMF中的混合物(1.0M)与2N Na2CO3溶液(2.0当量)一起用Ar气流脱气30分钟。加入tBu3PH+BF4-(0.05当量)和Pd2(dba)3(0.05当量)，将反应混合物在90℃加热48小时，冷却至室温，加入DCM，有机相用NaHCO3饱和水溶液、盐水洗，干燥(Na2SO4)。将溶液减压浓缩，残留物在硅胶上用色谱法纯化，用50-90％EtOAc/石油醚和10％MeOH/DCM先后洗脱，得到标题化合物，为黄色粉末。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6，300K)δ9.40(1H，s)，9.01(1H，d，J＝1.6Hz)，8.63(1H，dd，J＝4.8，1.6Hz)，8.57(1H，br.s)，8.32(2H，d，J＝8.8Hz)，8.20(1H，d，J＝7.8Hz)，8.10(1H，br.s)，8.01(2H，d，J＝8.8Hz)，7.88-7.82(2H，m)，7.54(1H，dd，J＝7.8，4.8Hz).MS(ES)C19H13FN4O理论值332，实验值333(M+H+). 步骤53-{4-[7-(氨基羰基)-5-氟-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶-1-羧酸苄酯(D5) 在-65℃和搅拌下向(D4)在无水甲醇中的溶液(0.2M)加入NaBH4(1.2当量)，然后逐滴加入Cbz-Cl(1.2当量)。使反应混合物达到室温过夜，然后用水猝灭反应。减压除去甲醇，加入EtOAc。有机相用饱和NaHCO3水溶液洗，干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，得到(D5)，它不作进下纯化，直接用于下一步骤。MS(ES)C27H25FN4O3理论值472，实验值473(M+H+)。
步骤6三氟乙酸3-{4-[7-(氨基羰基)-5-氟-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐(D6) 向(D5)(1.0当量)在MeOH中的溶液(0.2M)加入Pd/C 10％(0.05当量)和HCl(1.0当量)，将反应混合物在H2气氨(1atm)下搅拌48小时。然后将该混合物经硅藻土过滤，减压除去溶剂，得到(D6)，将其用反相RP-HPLC(柱C18)纯化，用水(0.1％TFA)和MeCN作为洗脱剂，将所要的级分冷冻干燥，得到标题化合物(D6)，为白色粉末。
1H NMR(400MHz，CD3CN，300K)δ9.28(1H，s)，8.89(1H，br.s)，8.60-8.50(2H，m)，8.13(2H，d，J＝8.6Hz)，8.09(1H，br.s)，7.90-7.70(2H，m)，7.54(2H，d，J＝8.6Hz)，3.40-3.30(2H，m)，3.20-2.80(3H，m)，2.00-1.90(2H，m)，1.80-1.70(2H，m)，MS(ES)C19H19FN4O理论值338，实验值339(M+H+). 实施例4 三氟乙酸5-氟-2-(3-氟-4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺 步骤15-氟-3-甲基-2-硝基苯甲酸(E1) 在0℃下向3-氟-5-甲基苯甲酸(1.0当量)在浓硫酸中的溶液慢慢加入KNO3(1∶1当量)。室温下搅拌该混合物1小时，然后慢慢倒入冰水中。在搅拌至冰完全熔化后，将白色沉淀过滤，用冷水洗，减压干燥。该白色固体不作进一步纯化，直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz，DMSO，300K)δ14.08(1H，br.s)，7.65(2H，m)，2.30(3H，s)。
步骤25-氟-3-甲基-2-硝基苯甲酸甲酯(E2) 室温下向(E1)和碳酸铯(1.5当量)在DMF中的溶液(0.25M)加入甲基碘(1.0当量)。在搅拌该混合物18小时后，加入盐水，混合物用EtOAc萃取。将有机相干燥(Na2SO4)，减压浓缩。得到的黄色固体用于下一步骤，不作进一步纯化。
1H NMR(400MHz，DMSO，300K)δ7.63(2H，m)，3.83(3H，s)，2.29(3H，s). 步骤32-氨基-5-氟-3-甲基苯甲酸甲酯(E3) 在室温和H2气氛(1atm)下，将(E2)(1.0当量)和Pd/C(10％w/w)在MeOH中的混合物(0.25M)搅拌3天。将混合物经硅藻土过滤，然后减压除去溶剂。得到的白色固体用于后继步骤，不作进一步纯化。
1H NMR(400MHz，DMSO，300K)δ7.29(1H，dd，J＝9.5Hz，J＝3.0Hz)，7.12(1H，dd，J＝9.5Hz，J＝3.0Hz)，6.36(2H，br.s)，3.78(3H，s)，2.11(3H，s). 步骤42，5-二氟-3-甲基苯甲酸甲酯(E4) 0℃下向(E3)(1.0当量)在无水DCM中的溶液(0.4M)分批加入四氟硼酸亚硝鎓盐。在0℃下1小时后加入无水二氟苯(120当量)，将反应混合物慢慢加热至160℃，同时蒸除DCM。3小时后，将混合物冷却至室温，加入EtOAc，有机相用盐水洗2次。用MgSO4干燥后，减压去除溶剂。粗产物用快速色谱法纯化，用1-10％EtOAc/石油醚洗脱，得到(E4)，为黄色油状物。
1H NMR(400MHz，CDCl3，300K)δ7.42(1H，m)，7.06(1H，m)，3.92(3H，s)，2.30(3H，d，J＝2.3Hz). 步骤52，5-二氟-3-甲酰苯甲酸甲酯(E5) (E5)由(E4)按照在制备实施例A步骤2和3中报道的一般程序制备。粗产物用快速色谱法纯化，用1-20％EtOAc/石油醚洗脱，得到白色固体。 1H NMR(300MHz，DMSO，300K)δ10.19(1H，d，J＝2.4Hz)，7.98(1H，m)，7.86(1H，m)，3.89(3H，s).MS(ES+)C9H6F2O3理论值200，实验值201(M+H)+. 步骤6三氟乙酸5-氟-2-(3-氟-4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺(E6) 将(E5)按照制备实施例A步骤4和5中报道的一般程序，用3-(4-氨基-2-氟苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯转化成相应的吲唑。
所形成的2-{4-[1-(叔丁氧羰基)哌啶-3-基]-3-氟苯基}-5-氟-2H-吲唑-7-羧酸甲酯通过在室温下用KOH(1.03当量)在二氧六环/水中的溶液(0.1M)处理12小时，转化成相应的甲酰胺。减压除去溶剂。将该羧酸溶于DMF(0.1M)，加入TBTU(1.5当量)。15分钟后加入DIPEA(2.0当量)和氨(3.0当量，0.5M THF溶液)，将该溶液搅拌36小时。用EtOAc稀释该混合物，有机相用NaHCO3饱和水溶液洗。蒸发溶剂后，残留物用于下一步骤，不作进一步纯化。
为了去保护，将粗产物溶于TFA/DCM(0.1M)，室温下搅拌3小时。蒸除溶剂，得到的残留物用反相HPLC(柱C18)纯化，得到标题化合物(E6)。
1H NMR(400MHz，DMSO，300K)δ9.34(1H，s)，8.90(1H，m)，8.61(1H，m)，8.49(1H，s)，8.18(1H，dd，J＝11.6Hz，2.0Hz)，8.05(2H，m)，7.81(2H，m)，7.63(1H，m)，3.34(3H，m)，3.13(1H，m)，2.94(1H，m)，1.95-1.76(4H，m).MS(ES+)C19H18F2N4O理论值356，实验值357(M+H)+. 实施例5 4-甲基苯磺酸(3S)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐 步骤1(3S)-3-[4-({(1E)-[3-(甲氧羰基)-2-硝基苯基]亚甲基}氨基)苯基]哌啶-1-羧酸叔丁酯(F1) (F1)按照实施例1(B1)中所述，由A3和(3S)-3-(4-氨基苯基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(通过用2当量的L-二苯甲酰酒石酸在甲醇中拆解3-(4-氨基苯基)哌啶和随后进行Boc保护制得)制备。
步骤22-{4-[(3S)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-羧酸(F2) 将(F1)(1当量)和叠氮化钠(1当量)在DCM(0.25M)中浆化，用惰性气体保护，加入2，6-二甲基吡啶(1.0当量)。将混合物加热至内温110℃，保持20小时。将形成的棕色溶液冷却至20℃，加入THF加25wt％的LiCl水溶液。分离两相，有机相用25wt％LiCl水溶液洗3次。向以上的有机溶液中加2.0M NaOH(10当量)，将该混合物在35℃加热20小时，然后冷却至20℃，分离两相。有机层用2.0M盐酸和盐水的混合物洗，分离各层，有机层再用盐水洗，浓缩得到(F2)，不作进一步纯化。
步骤3(3S)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶-1-羧酸叔丁酯(F3) 将F2溶在DCM(0.35M)中，室温下加入碳酸二叔丁酯(1.3当量)和吡啶(1.0当量)。30分钟后加入碳酸氢铵(1.3当量)，继续搅拌20小时。加入1M HCl(5mL/g)，分离各相，有机相用水洗2次，浓缩至小体积。粗制的化合物(F3)经硅胶垫过滤，然后自甲基叔丁基醚中结晶。
步骤44-甲基苯磺酸(3S)-3-{4-[7-(氨基羰基)-2H-吲唑-2-基]苯基}哌啶鎓盐(F4) 将F3溶于THF(0.15M)，加水(THF的5％)。加入对甲苯磺酸一水合物(2.2当量)，将该混合物加热至66℃并搅拌过夜。冷却后过滤分离所要的固体盐，并证实为一水合物(F4)。1H NMR(400MHz，DMSO，300K)δ9.34(1H，s)；9.20(1H，broad s)，8.58(1H，s)，8.14(2H，d，J＝8.8Hz)，8.05(2H，ddd，J＝1.2，7.2，16.8Hz)，7.93(1H，s)，7.52(4H，dd，J＝8.8，16.8Hz)，7.27(1H，dd，J＝6.8，8.0Hz)，7.13(2H，d，J＝8Hz)，3.48(3H，m)，3.10(2H，m)，2.90(1H，m)；2.30(3H，s)，1.89(2H，m)，1.75(2H，m). 以下实施例按照前述实施例的方法制备
权利要求
1.一种式I化合物或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体
其是R1是氢或氟，R2是氢或氟。
2.权利要求1的式II化合物，或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体
其中R1和R2同权利要求1中的定义。
3.权利要求1的式III化合物，或其可药用的盐或互变异构体
其中R1和R2同权利要求1中的定义。
4.权利要求1的式IV化合物，或其可药用的盐或互变异构体
其中R1和R2同权利要求1中的定义。
5.任何前述权利要求的化合物，其中R1是氢，R2是氢或氟。
6.一种权利要求1的化合物，选自
2-(4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺；
2-{4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；
2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；
5-氟-2-(4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺；
5-氟-2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；
5-氟-2-{4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；
5-氟-2-(3-氟-4-哌啶-3-基苯基)-2H-吲唑-7-甲酰胺；
5-氟-2-{3-氟-4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；
5-氟-2-{3-氟-4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；以及它们的可药用盐，互变异构体或立体异构体。
7.权利要求6的化合物，选自
2-{4-[(3R)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；
2-{4-[(3S)-哌啶-3-基]苯基}-2H-吲唑-7-甲酰胺；及其可药用盐或互变异构体。
8.一种药物组合物，其中含有和可药用的载体结合的前述任何权利要求的化合物，或其可药用的盐、互变异构体或立体异构体。
9.权利要求1至7中任一项的化合物，或其可药用的盐、立体异构体、互变异构体和一种抗癌药物同时、分别或顺序地施用。
10.权利要求1至7中任一项的化合物或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体用于治疗。
11.权利要求1至7中任一项的化合物或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体用于制造药物的用途，该药物用于治疗或预防能够通过抑制聚(ADP核糖)聚合酶(PAPR)而改善的病症。
12.权利要求1至7中任一项的化合物或其可药用的盐、立体异构体或互变异构体用于制造药物的用途，该药物用于治疗或预防癌症、炎性疾病、再灌注损伤、缺血性病症、中风、肾衰竭、心血管病、心血管病之外的血管病、糖尿病、神经变性病、逆转录病毒感染、视网膜损伤或皮肤衰老，以及UV诱发的皮肤损伤。
13.权利要求1至7中任一项的化合物或其可药用的盐，立体异构体或互变异构体作为癌症治疗中的化学敏感剂和/或辐射敏感剂的用途。
14.一种治疗或预防癌症、炎性疾病、再灌注损伤、缺血性病症、中风、肾衰竭、心血管病、心血管病之外的血管病、糖尿病、神经变性病、逆转录病毒感染、视网膜损伤或皮肤衰老以及UV诱发的皮肤损伤的方法，该方法包括对需要的患者施用有效量的权利要求1的化合物或含有权利要求1的化合物的组合物。
全文摘要
本发明涉及式(I)化合物及其可药用的盐、立体异构体或互变异构体，该化合物是聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)的抑制剂，因此可用于治疗癌症、炎性疾病、再灌注损伤、缺血性病症、中风、肾衰竭、心血管病、心血管病之外的血管病、糖尿病、神经变性病、逆转录病毒感染、视网膜损伤或皮肤衰老以及UV诱发的皮肤损伤，并可作为癌症治疗的化学敏感剂和/或辐射敏感剂。
文档编号A61K31/4439GK101578279SQ200880001926
公开日2009年11月11日 申请日期2008年1月8日 优先权日2007年1月10日
发明者P·琼斯, J·M·安托里亚安托里亚, R·斯卡佩利, C·舒尔茨-费德姆雷希特 申请人:P.安杰莱蒂分子生物学研究所