专利名称：化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3-O-β-D ...的制作方法
化合物(20R, 24R) -24，25-16，23-23，27-三环氧-12- ZJ先 氧基-9，19-环羊毛留烷-3-0- β -D-吡喃木糖甙在制药中
的应用所属领域本发明属于药物学领域，具体地，涉及ー种从升麻中提取的化合物DA即(20R，24R) -24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3_0_ β -D-吡喃木糖式[(20R,24R)-24，25-16，23-23，27-triepoxy-12-acetoxyl-9,19-CycIoIanostano1-3-0-β -D-xylopyranoside]在制备抗肿瘤药物中的应用,特别是在制备抗乳腺癌的药物中的应用。
背景技术：
升麻是我国十分常用的著名中药，主要为毛茛科植物三叶升麻Cimicifugaheracleifolia Kom、兴安升麻 C. dahurica Maxim、升麻或绿升麻 C. foetida L.的干燥根茎。这三种药用植物的根茎，已经作为中药升麻药材，收载入《中华人民共和国药典》(2010年版)。升麻具有发表透疹，清热解毒，升举阳气的功效；常被用于风热头痛，齿痛，ロ疮，咽喉肿痛，麻疫不透，阳毒发斑，脱肛，子宫脱垂等病症。升麻Cimicifuga foetida L.主要产于云南、贵州、四川、湖北等地，是大量栽培或野生的常用中药材。同属植物黑升麻(Cimicifuga racemosa L.),又称蛇根草,在欧美国家也有很长的使用历史。印地安人饮用煎煮的黑升麻药汁解除疲劳，治疗喉痛、关节炎与毒蛇咬伤等症，同时也用于治疗一些妇科疾病，并在1820-1926年被收入到美国药典。英国也将黑升麻载入英国草药典，1749年Linnaeus将黑升麻收入《Materia Medica》，20世纪初成为顺势疗法的主要药物之一。升麻属植物的化学成分和药理活性研究一直是国内外研究热点。近十年来从其中分离得到三萜及其苷类、苯丙素类、色酮及其他类型化合物200多个。国际上对升麻中化学成分的研究主要集中在其三贴皂苷类成份上，对其药理活性研究则以类雌激素、抗骨质疏松为主。在德国、日本、美国等发达国家都分别开发出了治疗更年期综合症和骨质疏松症的药物。与国际上研究的热点不同，本发明为了拓展升麻三萜化合物研究的新领域，充分利用云南省升麻资源，开发其新用途。
发明内容
本发明g在提供一种从升麻中提取的化合物DA即(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛留烷-3-0-β -D-吡喃木糖甙[(20R, 24R) -24,25-16，23-23，27-triepoxy-12-acetoxyl-9,19-CycIoIanostano1-3-0-β -D-xylopyranoside]在制备抗肿瘤药物中的应用，以及化合物DA的制备方法。
本发明的上述目的是用下面的技术方案加以实现的化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3-0-β -D-吡喃木糖甙在制备抗肿瘤药物中的应用。
化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基_9，19-环羊毛甾烷-3-0-0 -D-吡喃木糖甙在制备抗乳腺癌药物中的应用。化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基_9，19-环羊毛甾烧-3-0-0-D-卩比喃木糖式的制备方法,取升麻Cimicifuga foetida L.干燥根莖，粉碎后用80%甲醇提取三次，每次4小时；80%甲醇提取液过滤除去药渣后，减压浓缩至蒸不出甲醇；再加一定量的水稀释之后，用石油醚萃取2-3次，回收石油醚后，浓缩得到石油醚提取部位；然后水层再用氯仿萃取2-3次，回收氯仿，浓缩得到氯仿提取部位；氯仿提取部位用硅胶柱层析分离，洗脱液用40 I的氯仿甲醇或氯仿丙酮反复洗脱，洗脱后结晶纯化得化合物(20R, 24R) -24， 25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基_9，19-环羊毛甾烧-3-0- ^ -D-卩比喃木糖式。化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基_9，19-环羊毛甾烧-3-0-0-D-卩比喃木糖式的制备方法,取升麻Cimicifuga foetida L.干燥根莖，粉碎后用80 %的甲醇水溶液90°C回流提取3次，提取液除去大部分甲醇后，分别用石油醚，氯仿，正丁醇萃取；回收溶剂后，得石油醚部分、氯仿部分、正丁醇部分；氯仿部分用硅胶拌样，硅胶层析；用I : 0，40 1,20 1,10 I的氯仿甲醇梯度洗脱，TLC检测合并相同部分，得到四个组分Fr. A-D;其中Fr. B硅胶拌样，硅胶层析柱，常压层析分离，用40 I氯仿甲醇反复洗脱层析，得到化合物(20R, 24R) -24, 25-16, 23-23, 27-二环氧-12-乙酸氧基-9,19-环羊毛留烷-3-0-0 -D-吡喃木糖甙。本发明的化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基-9，19-环羊毛留烷-3-0-0 -D-吡喃木糖甙(简称DA)可直接作为药物使用，其余辅料为药物学上可接受的，对人和动物无毒和惰性的药用载体或赋形剂。所述的药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、超填料以及药物制品辅剂。将所述的有效提取物或有效部位以单位体重服用量的形式使用。本发明的药物可经口服和口腔喷雾两种形式给药。口服可用其固体或液体制剂，如粉剂、片剂、糖衣片剂、胶囊、酊剂、糖浆、滴丸剂
坐寸o口腔喷雾可用其固体或液体制剂。本发明药物可用于治疗和预防抗肿瘤，特别用于治疗乳腺癌疾病。本发明药物具有疗效非常显著，起效快，服药量低，方便患者等优点。
图I :各个组别裸鼠照片，图IA模型对照组；图IB他莫昔芬组；图IC化合物DA高剂量；图ID化合物DA中剂量；图IE化合物DA低剂量；图2 :各个组别肿瘤照片，图2A模型对照组；图2B他莫昔芬组；图2C化合物DA高剂量；图2D化合物DA中剂量；图2E化合物DA低剂量。
具体实施例方式下面结合附图，用本发明的实施例来进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此来限定本发明。
实施例1 :化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3-0-β -D-吡喃木糖甙(DA)的分离制备1、植物特征和样品来源绿升麻Cimicifuga foetida L.分布于我国西藏、云南、四川、甘肃、陕西、河南西部和山西等省份。生于海拔1700-3500米间阴湿的山地林缘林中或路旁的草丛中。为多年生草本植物，根状茎粗壮，坚实而稍带木质，外皮黒色，生多数细根。茎単一，常高大，直立，圆柱形，通常在上部少数分枝。叶为一回至三回三出或近羽状复叶，有长柄；小叶卵形、菱形或狭椭圆形，边缘具有粗锯齿。花序为总状花序，通常2-30条集成圆锥状花序。花毎年7-8月开放，白色，花瓣状，倒卵状圆形。种子少数，椭圆形至狭椭圆形，黄褐色，通常四周生膜质的鳞翅，背、腹面的横向鳞翅明显或不明显，9-10月成熟。升麻(Cimicifuga foetida L.)植物样品2006年采自云南省丽江市玉龙县；植物标本由中科院昆明植物研究所裴盛基研究员鉴定。2、化合物DA的分离制备干燥升麻根茎10公斤，粉碎后用80%的甲醇水溶液90°C回流提取3次，提取液除去大部分甲醇后，分别用石油醚，氯仿，正丁醇萃取。回收溶剂后，得石油醚部分50克，氯仿部分900克，正丁醇部分500克。氯仿部分900克用I公斤硅胶拌样，I公斤硅胶层祈。氯仿甲醇(I 0,40 1,20 1,10 I)梯度洗脱，TLC检测合并相同部分，得到四个组分Fr.A-D。其中Fr.B(300克)，300克硅胶拌样，I公斤硅胶层析柱，常压层析分离，用氯仿甲醇(40 I)反复洗脱层析，得到化合物DA(LOg)。3.化合物DA的结构表征化合物DA =C37H56O10,无色针晶，mp 253-254 で，[a ]D = -61. 2。(c = O. 255，CHCl3-CH3OHd I))。氢核磁共振谱数据δ (ppm)(溶剂 Py_d5) :5. 10 (1H，brd, J = 5. 3Hz，12-H)；4. 23 (1H, brd, J = 6. 7Hz,16-H),4. 05(1H, d, J = 10. 4Hz，26-H)，4. 04(1H，s，24-H)，3. 62 (1H, d, J = 10. 4Hz,26-H) ,3. 44 (1H, dd, J = 10. 8，3. 4Hz，3_H) ；1. 45 (3H, s，27_H)，I. 40 (3H, s, 18-H), I. 29 (3H, s，29-H)，I. 00 (3H，d, J = 6. 7Hz，21-H)，0. 99 (3H，s，30_H)，0. 83 (3H, s，28-H)，0. 52 (1H, d, J = 3. 8Hz, 19-H)，0. 19 (1H, d, J = 3. 8Hz, 19-H)。12_C0CH3部分2. 12 (3H, s，2，-COCH3)。木糖部分:4. 83 (1H, d, J = 7. 2Hz，I，-H)，4· 04 (1Η, t, J =10·4Ηζ，2’ -H), 4. 10(lH，t，J = 8·6Ηζ，3’ -H)，4· 20 (lH，m，4’ -H) ;3.71(lH，t，J = 10. 4Hz,5’ -H)，3. 35 (1Η, dd, J = 4· 2，10. 4Ηζ，5’ -H)。碳核磁共振谱数据δ (ppm)(溶剂 Py_d5) 105. 9 (s, 23-C)，88. I (d，3_C)，77. 0 (d，12-C)，74. 5 (d, 16-C)，68. I (t, 26—C)，62. 5 (s, 25—C)，62. 3 (d, 24—C)，56. 2 (d, 17—H)，48. 8 (s, 13-C) ,47. 9(s, 14-H)，47. 0 (s，5_C)，45. 6 (d，8_C)，44. 2(t, 15-C)，41. 22(s，4_C)，37. 6(t,22-C) ,36. 6(t, 11—C), 31. 9 (t, 1_C), 29. 9 (t, 2_C), 29. 8 (t, 19—C), 26. 7 (s, 10-C)，25. 7 (t, 7-C), 25. 7 (q, 29—C), 23. 3 (d, 20—C) ,21. 3 (q,21-C), 20. 3 (t, 6_C), 20. I (s, 9_C)，19. 6(q，28_C)，15. 3(q，30_C)，14. 3 (q, 18-C)，13. 4(q，27_C)。12_C0CH3 部分:171. 6 (s，CO)，21. 6 (q, COCH3)。木糖部分:107. 5 (d，I，_C)，75. 6 (d，2，_C)，78. 6 (d，3，_C)，71. 2 (d，4，_C)，67. l(t，5，-C)。
4.化合物DA的化学结构
权利要求
1.化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3-0-β -D-吡喃木糖甙在制备抗肿瘤药物中的应用。
2.化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3-0- β -D-吡喃木糖甙在制备抗乳腺癌药物中的应用。
3.化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烧-3-0-β-D-卩比喃木糖式的制备方法,取升麻Cimicifuga foetida L.干燥根莖,粉碎后用80%甲醇提取三次，毎次4小吋；80%甲醇提取液过滤除去药渣后，减压浓缩至蒸不出甲醇；再加一定量的水稀释之后，用石油醚萃取2-3次，回收石油醚后，浓缩得到石油醚提取部位；然后水层再用氯仿萃取2-3次，回收氯仿，浓缩得到氯仿提取部位；氯仿提取部位用硅胶柱层析分离，洗脱液用40 I的氯仿甲醇或氯仿丙酮反复洗脱，洗脱后结晶纯化得化合物(20R，24R) -24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾焼-3-0- β -D-卩比喃木糖式。
4.化合物(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-こ酰氧基-9，19-环羊毛甾烧-3-0-β-D-卩比喃木糖式的制备方法,取升麻Cimicifuga foetida L.干燥根莖,粉碎后用80 %的甲醇水溶液90°C回流提取3次，提取液除去大部分甲醇后，分别用石油醚，氯仿，正丁醇萃取；回收溶剂后，得石油醚部分、氯仿部分、正丁醇部分；氯仿部分用硅胶拌样，硅胶层祈；用I : 0，40 1,20 1,10 I的氯仿甲醇梯度洗脱，TLC检测合并相同部分，得到四个组分Fr. A-D;其中Fr. B硅胶拌样，硅胶层析柱，常压层析分离，用40 I氯仿甲醇反复洗脱层析，得到化合物(20R, 24R) -24, 25-16, 23-23, 27-ニ环氧-12-こ酸氧基-9,19-环羊毛留烷-3-0-β -D-吡喃木糖甙。
全文摘要
一种从升麻中提取的化合物DA即(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-三环氧-12-乙酰氧基-9，19-环羊毛甾烷-3-O-β-D-吡喃木糖甙[(20R，24R)-24，25-16，23-23，27-triepoxy-12-acetoxyl-9，19-Cyclolanostanol-3-O-β-D-xylopyranoside]在制备抗肿瘤药物中的应用，特别是在制备抗乳腺癌的药物中的应用，以及化合物DA的制备方法。
文档编号A61P35/00GK102614208SQ20121004430
公开日2012年8月1日 申请日期2012年2月25日 优先权日2012年2月25日
发明者周琳, 年寅, 李忠荣, 王海燕, 邱明华, 陆璐 申请人:中国科学院昆明植物研究所