联苯化合物及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：：联苯化合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
：本发明涉及药物化学和药物治疗学领域，具体涉及联苯化合物及其制备方法和用途。糖尿病(diabetesmellitus)是一组由遗传和环境因素相互作用而引起的临床综合症，因胰岛素分泌绝对或相对不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低，引起糖、蛋白、脂肪、水、和电解质等一系列代谢紊乱。临床以高血糖为主要共同标志，久病可引起多个系统损害，病情严重和应激时可发生急性代谢紊乱如酮症酸中毒等。在糖尿病人群中发生冠心病、缺铁性或出血性脑血管病、失明、肢端坏疽等严重并发症均明显高于非糖尿病人群。因此，糖尿病及其并发症已成为严重威胁人类健康的世界性公共卫生问题。目前一般将糖尿病分为两类，I型糖尿病(胰岛素依赖型糖尿病，IDDM)与II型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病，MD匿)。糖尿病中90%以上是11型糖尿病。WH0预计，由于人口老龄化、肥胖、不健康的饮食以及缺乏运动的生活方式，到2025年，糖尿病患者的数目将由1995年的1.35亿上升为3亿。I型糖尿病病人由于第6对染色体短臂上的HLA-D基因决定了遗传易感性，对环境因素，特别是病毒感染或化学毒性物质剌激的反应异常，直接或间接通过自身免疫反应引起胰岛P细胞破坏，以致胰岛素不足。临床特点是起病急，多食、多尿、多饮、体重减轻等症状较明显，有发生酮症酸中毒的倾向，必须依赖胰岛素治疗维持生命。II型糖尿病也有很强的遗传性和环境因素，并呈显著的异质性，发病机制多样而复杂，各病人间存在较大差异。总的来说可概括为胰岛素分泌的相对不足和胰岛素抵抗。对II型糖尿病人，尤其是肥胖性糖尿病患者的系列研究证实，胰岛素抵抗是II型糖尿病发生、发展过程中的关键因素。在研究脂肪细胞和肌肉细胞内胰岛素信号传导途径的基础上，设计开发胰岛素增敏剂，以改善胰岛素抵抗状态，是目前II型糖尿病新药研究的重点，也是其主要方向之一。n型糖尿病的特征是胰岛素敏感组织如骨骼肌、肝、脂肪组织对胰岛素作用的抵抗。虽然其具体机制尚不清楚，但胰岛素信号在其传导通路中的减弱甚至阻断已被证实是直接因素。胰岛素通过与其受体胞外a亚单位结合激活受体胞内13亚单位内在的酪氨酸激酶活性，导致调节结构域中关键的酪氨酸残基自身磷酸化，从而完全激活胰岛素受体酪氨酸激酶活性，胰岛素受体酪氨酸激酶再通过磷酸化其底物将信号传递下去。随着对细胞内胰岛素作用通路中可逆性酪氨酸磷酸化认识的加深，蛋白酪氨酸磷酸酯酶(PTPases)在平衡该通路中相关蛋白酪氨酸磷酸化水平中的作用越来越受到重视。PTPases可能作用于该通路中多个环节，例如将自身磷酸化活化的胰岛素受体(IR)去磷酸化，从而降低受体激酶活性；或将诸如胰岛素受体底物1(IRS-1)、胰岛素受体底物2(IRS-2)、SHC等胰岛素受体的底物中蛋白酪氨酸残基去磷酸化，从而负调控胰岛素作用受体后通路。特定PTPases和胰岛素通路中酪氨酸激酶间酶活性的不平衡可能是引起II型糖尿病胰岛素抵抗的原因。
背景技术：
：因此，通过寻找选择性作用于该通路中PTPases的抑制剂抑制其活性，加强和延长胰岛素信号，成为越来越受重视的治疗II型糖尿病的新途径。PTPases家族包括一系列跨膜(受体型)和胞内(非受体型)酶，参与调控一系列重要生命过程。虽然多种PTPases在胰岛素敏感的组织中有表达，如跨膜的CD45和LAR-PTPase等；胞内的SHPTP1、SHPTP2、PTP1B、PTP1C等，但只有几种PTPases可能作用于胰岛素通路中受体或受体后环节，影响正常胰岛素功能。目前的研究主要集中在LAR-PTPase、SHPTP2和PTP1B。PTP1B是最早被纯化和确定生物学特性的PTPase，全长大约50KD。早期研究证明能在体外有效地将胰岛素受体去磷酸化；将来源于人胎盘的PTP1B显微注射入非洲蟾蛛卵母细胞中，将减少胰岛素诱导的卵母细胞成熟及S6肽磷酸化水平。随后发现PTP1B在所有胰岛素敏感组织中高表达；用渗透休克的方一法给予PTP1B抗体后，小鼠KRC7肝细胞经胰岛素剌激时DNA合成和PI3激酶活性水平显著升高，IR自身磷酸化水平、IR激酶活性水平和IRS-1酪氨酸磷酸化水平也显著升高。最近有研究表明，PTP1B直接与激活状态的IR相互作用；在体外实验中也对IRS-1显示最高的选择性活性；大鼠成纤维细胞中PTP1B的高表达能明显降低配体诱导的IR磷酸化水平；用腺病毒介导基因转染的方法，在胰岛素靶向组织骨骼肌和肝组织的模型细胞L6肌细胞和Fao细胞中高表达PTP1B，明显抑制胰岛素诱导的IR和IRS-1的酪氨酸磷酸化，并显著抑制IRS-1和PI3激酶P85亚单位复合物的形成以及Akt、MAPK的磷酸化水平，而且胰岛素诱导的糖原合成也被抑制(EgawaK.etal.J.Biol.Chem.2001，276(13)，10207-10211)。用同样的方法在另一胰岛素靶向组织脂肪组织的模型细胞3T3-L1细胞中高表达PTP1B，同样明显抑制胰岛素诱导的IR、IRS1和PI3激酶的酪氨酸磷酸化，P42和P44MAPK磷酸化水平也明显降低，而Akt磷酸化水平和活性不受影响(VenableC.L.etal.J.Biol.Chem.2000，275(24)，18318-18326)。PTP1B的高表达对基本的、中等的及最大量胰岛素诱导的葡萄糖转运无影响，对转运的EC5。胰岛素浓度无影响。这些研究证明PTP1B能够负调控胰岛素信号转导通路并主要作用于胰岛素受体。更为重要的实验证据来自PTP1B基因敲除小鼠。Elchebly等报道，运用同源重组的方法产生的PTPIB基因敲除的小鼠生长正常，有生殖力，对胰岛素敏感性显著增强，而且这一增强作用与肝脏和骨骼肌中IR及IRS-1磷酸化水平的增强相关(ElcheblyM.，etal.science,1999，283(5407)，1544-1548)。令人惊奇的是，PTPIB基因敲除的小鼠对食物诱导的体重增加和胰岛素抵抗也有抵抗作用。Klaman等运用大致相同的方法产生的PTPlB基因敲除的小鼠也得到同样的结果，而且发现PTPIB基因敲除的小鼠之所以对食物诱导的体重增加有抵抗作用，是由于脂肪细胞体积的减少，而脂肪细胞的数量并不改变。PTP1B基因敲除的小鼠基本代谢水平和总体能量消耗升高(KlamanL.D.，etal.MolecularandCellularBiology,2000，20(15)，5479-5489)。这些实验更加有力地证明了PTP1B在胰岛素敏感性、能量消耗和脂肪储存方面的重要作用，从而更加明确了它是治疗二型糖尿病和肥胖症的一个潜在药物作用靶点。PTPIB选择性抑制剂的研究已取得了一定的进展，但大多局限于一些肽类或类肽化合物。虽然这些肽类抑制剂具有较强的抑制活性及较高的选择性，但它们是肽类磷酸化合物的事实使其很难成为药物候选化合物。近年来，人们始终试图寻找分子量较小、结构简单、选择性高的非肽类小分子PTPIB抑制剂。一系列非肽类非磷酸化合物类PTP1B抑制剂被报道，但现有化合物存在选择性及生物利用度问题，迄今还无一以PTPIB为药物靶点的药物上市，寻找新的非肽类高效、高选择性PTPIB小分子抑制剂仍然是近年来生物学及创新药物研究的热点。
发明内容本发明的一个目的是提供一系列对蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B有抑制作用的联苯化合物。本发明的另一目的是提供所述化合物的制备方法。本发明的再一目的是提供所述化合物作为蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制剂的用途，即其在制备用于治疗糖尿病或肥胖症的药物中的应用。本发明的联苯化合物具有如下结构通式<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中&为H、CrC4直链或支链烷基、羟基、甲氧基、甲硫基、三氟甲基、苯基或卤素；R2为H、羟基、甲氧基、乙氧基、Q-Q直链或支链烷基、硝基或卤素；R3为H、CrC4直链或支链烷基、三氟甲基或卤素；a:A与对溴苯甲醛反应得B，反应温度为5(TC，溶剂为甲醇；b:B在醋酸钯为催化剂，碳酸钾、碳酸铯或磷酸钾为碱，封管条件下与芳基硼酸反应得C，反应温度为709(TC，溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或二甲亚砜；c:C在醋酸钠或醋酸钾为碱的条件下与2，4-噻唑二酮、2-硫代-4-噻唑酮、2，4，三酮或2-硫代-4，6-噻唑二酮在11013(TC反应得D，溶剂为醋酸。o6-嘧啶在本发明一优选的实施方案中，上述的结构通式中X为具体而言，上述化合物可以通过如下路线1合成路线1:PEG—NH213PEG—NPEG—NR1'v1d如路线1所示，所用的原料la可参考文献方法(Janda，K.D.Org.Lett.2000，2，477-480)制得。a:la与对溴苯甲醛反应得lb，反应温度为5(TC，溶剂为甲醇；b:lb在醋酸钯为催化剂，碳酸钾、碳酸铯或磷酸钾为碱，封管条件下与芳基硼酸反应得lc，反应温度为709(TC，溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或二甲亚砜；c:lc在醋酸钠或醋酸钾为碱的条件下与2，4-噻唑二酮反应得ld，反应温度为110130。C，溶剂为醋酸。o力A在本发明的又一优选实施方案中，上述的结构通式中X为、上述化合物可以通过如下路线2合成路线2:2d如路线2所示，所用的原料2a可参考文献方法(Janda，K.D.Org.Lett.2000，2，477-480)制得。a:2a与对溴苯甲醛反应得2b，反应温度为5(TC，溶剂为甲醇；b:2b在醋酸钯为催化剂，碳酸钾、碳酸铯或磷酸钾为碱，封管条件下与芳基硼酸反应得2c，反应温度为709(TC，溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或二甲亚砜；c:2c在醋酸钠或醋酸钾为碱的条件下与2-硫代-4-噻唑酮(罗丹宁)反应得2d，反应温度为11013(TC，溶剂为醋酸。在本发明的又一优选实施方案中，上述的结构通式中X为o上述化合物可以通过如下路线3合成路线3:3d如路线3所示，所用的原料3a可参考文献方法(Janda，K.D.Org.Lett.2000，2，477-480)制得。a:3a与对溴苯甲醛反应得3b，反应温度为5(TC，溶剂为甲醇；b:3b在醋酸钯为催化剂，碳酸钾、碳酸铯或磷酸钾为碱，封管条件下与芳基硼酸反应得3c，反应温度为709(TC，溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或二甲亚砜；8c:3c在醋酸钠或醋酸钾为碱的条件下与2，4，6-嘧啶三酮反应得3d，反应温度为110130。C，溶剂为醋酸。在本发明的再一优选实施方案中，上述的结构通式中X为o上述化合物可以通过如下路线4合成路线4:如路线4所示，所用的原料4a可参考文献方法(Janda，K.D.Org.Lett.2000，2，477-480)制得。a:4a与对溴苯甲醛反应得4b，反应温度为5(TC，溶剂为甲醇；b:4b在醋酸钯为催化剂，碳酸钾、碳酸铯或磷酸钾为碱，封管条件下与芳基硼酸反应得4c，反应温度为709(TC，溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或二甲亚砜；c:4c在醋酸钠或醋酸钾为碱的条件下与2-硫代-4，6_嘧啶二酮反应得4d，反应温度为11013(TC，溶剂为醋酸。有益效果本发明针对PTP1B设计了一类结构新颖的靶向化合物库；并以PEG为载体，苯胺为无痕连接分子应用于可溶性树脂PEG为载体的组合化学方法对该化合物库进行了合成。其中，部分化合物对PTP1B具有明显的抑制活性，IC5。小于10—6M。具体实施例方式制备实施例实施例1:5-(4-苯基苯亚甲基)-2，4_噻唑二酮(化合物1)p向溶解在100ml二氯甲烷中的10克(2.5mmol)PEG4000滴加1.3ml(15mmol)甲磺酰氯。反应液在室温下搅拌过夜，然后蒸干溶剂用少量二氯甲烷重新溶解粗产品并且在剧烈搅拌下滴入乙醚溶剂中。过滤收集析出的沉淀，用乙醚洗涤，得到白色粉末状固体，收率100%。'HNMR(300MHz,CDC13):S4.38(m，2H)，3.40—3.87(bm，PEG)，3.08(s，3H)将得到的白色粉末，1.04g(7.5mmol)K2C03及1.04g(7.5mmol)4-硝基苯酚溶解在100ml丙酮中，加热回流12小时。滤除不溶物，将滤液中的溶剂蒸干，粗产品用少量二氯甲烷重新溶解并在剧烈搅拌下滴入乙醚溶剂中。过滤收集析出的沉淀，用乙醚，异丙醇洗涤，得到亮黄色粉末状固体，99%。丄HNMR(300MHz，CDC13):S8.00(d，J=9.5Hz，2H)，6.61(d，J=9.5Hz，2H)，4.20(m，2H)，3.37-3.85(bm，PEG)FT-IR(KBr):1510cm—1将上述得到的亮黄色粉末状固体溶于100ml甲醇中，在氩气保护下加入lg10wt%Pd/C。对反应容器进行抽换气后接上一个氢气球。反应容器再次抽空并充入氢气。反应液在室温下反应5小时，滤除不溶物并蒸干滤液中的溶剂，粗产品用少量二氯甲烷重新溶解并在剧烈搅拌下滴入乙醚溶剂中。过滤收集析出的沉淀，用乙醚洗涤，得到棕色粉末状固体，收率96%。丄HNMR(300MHz，CDC13):S6.58(d，J=8.6Hz，2H)，6.48(d，J=8.6Hz，2H)，4.06(m，2H)，3.38—3.81(bm，PEG)FT-IR(KBr):3420，3280cm—1将8.4g(2mmo1)上述棕色粉末和1.1lg(6mmo1)4_溴苯甲醛溶解至30ml甲醇中，反应液在5(TC加热6小时，然后把溶剂蒸干。粗产品用少量二氯甲烷重新溶解并在剧烈搅拌下滴入乙醚溶剂中，过滤收集析出的沉淀，用乙醚洗涤，得到黄色粉末化合物。力画R(300MHz，CDC13):S8.41(s，1H)，7.69-7.75(m，2H)，7.52-7.57(m，2H)，7.12-7.23(m，2H)，6.84—6.94(m，2H)，4.13(m，2H)，3.36—3.85(bm，PEG)FT-IR(KBr):1635，1005cm—1将10ml甲醇加至4.88g(lmmo1)得到的黄色粉末中，293mg苯硼酸(2.4,1)，414mg(3mmo1)碳酸钾以及5mg(lmol%)醋酸钯中。把反应管密封并在8(TC下加热8小时。冷却至室温，并用甲醇稀释，然后滤除不溶物，将滤液中的溶剂蒸干，粗产品用少量二氯甲烷重新溶解并在剧烈搅拌下滴入乙醚溶剂中。过滤收集析出的沉淀，用乙醚和异丙醇洗涤，得到灰色粉末化合物。力画R(300MHz，CDC13):S8.51(s，1H)，7.92-7.96(m，2H)，7.63-7.70(m，4H)，7.37-7.48(m，3H)，7.16-7.24(m，2H)，6.87-6.96(m，2H)，4.15(m，2H)，3.39-3.86(bm，PEG)IR(KBr):1630cm—1称取244mg(0.05mmol)上述得到的灰色粉末状化合物，12mg(0.15mmol)乙酸钠和18mg(0.15mmol)2，4-噻唑二酮，然后加入1.5ml乙酸使其溶解。将反应管密封并在120°C下加热12小时。反应液冷却至室温，倒入8ml水中，过滤收集析出的沉淀，用少量水和甲醇洗涤，得到褐色粉末状固体，收率86%力NMR(300MHz，d6-DMS0):S7.83(m，3H)，7.72(d，J=8.5Hz，2H)，7.66(m，2H)，7.46-7.51(m，2H)，7.38-7.42(m，1H)13CNMR(100MHz，d6_DMS0):S167.91，167.33，141.95，138.94，132.16，131.59，130.89，129.28，128.42，127.56，126.95，123.34EI-MS:m/z281(M)，210，165;HRMS:calcdforC16H11NS02,281.0510;found，281.0510;HPLCPurity(retentiontime):100%(3.66min)实施例2:5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]_2，4_噻唑二酮(化合物2)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>操作过程如同实施例l，不同处在于用对氟苯硼酸代替苯硼酸得到土黄色固体，收率84%。4NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.72-7.79(m，5H)，7.62(d，J=8.1Hz，2H)，7.31-7.25(m，2H)EI-MS:m/z299(M)，228，114;HPLCPurity(retentiontime):96%(3.68min)实施例3:5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]_2，4_噻唑二酮(化合物3)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>操作同实施例l，不同处在于用3，4-亚甲二氧基苯硼酸代替苯硼酸得到黄色固体，收率90%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.80(s，1H)，7.77(d，J=8.2Hz，2H)，7.62(d，J=8.2Hz，2H)，7.23-7.32(m，2H)，7.01(d，J=8.0Hz，1H)，6.06(s，2H)13CNMR(100MHz，d6_DMS0):S168.03，167.42，148.32，147.71，141.71，133.17，131.68，130.87，127.25，123.05，120.94，109.02，107.22，101.51EI-MS:m/z325(M)，254，242，226，149;HRMS:calcdforC17HuNS04，325.0408;found，325.0416;HPLCPurity(retentiontime):98%(3.51min)实施例4:5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]_2，4_噻唑二酮(化合物4)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>操作同实施例l，不同处在于用3，4-二甲氧基苯硼酸代替苯硼酸得到橙色固体，收率85%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.82(d，J=8.2Hz，2H)，7.80(s，1H)，7.63(d，J=8.2Hz，2H)，7.27-7.29(m，2H)，7.05(d，J=8.9Hz，1H)，3.84(s，3H)，3.78(s，3H)13C画R(100MHz，d6-DMSO):S168.23，167.62，149.44，149.38，142.07，131.89，131.64，131.54，130.96，127.24，122.97，119.53，112.44，110.48,55.84EI-MS:m/z341(M)，270，255;HRMS:calcdforC18H15NS04，341.0722;found，341.0728;HPLCPurity(retentiontime):100%(3.30min)WOO]实施例5:5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮(化合物5)操作同实施例l，不同处在于用3，5_二(三氟甲基)苯硼酸代替苯硼酸得到乳白色固体，收率85%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.37(s，2H)，8.11(s，1H)，8.02(d，J=8.7Hz，2H)，7.84(s，lH)，7.71(d，J=8.7Hz，2H)EI-MS:m/z417(M)，346，173;HPLCPurity(retentiontime):100%(4.19min)实施例6:5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]_2，4_噻唑二酮(化合物6)操作同实施例l，不同处在于用3-氯-4-氟苯硼酸代替苯硼酸得到浅黄色固体，收率91%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.94—7.97(m，1H)，7.86(s，1H)，7.83(d，J=8.3Hz，2H)，7.73-7.78(m，1H)，7.67(d，J=8.3Hz，2H)，7.51(m，1H)13CNMR(100MHz，d6_DMS0):S167.75，167.29，139.23，136.65，132.57，131.19，130.66，128.81，127.53，127.48，123.71，120.33，120.21，117.44EI-MS:m/z335/333(1:3，M)，264/262(1:3);HRMS:calcdforC16H9NFSC102，325.0027;found，333.0026;HPLCPurity(retentiontime):98%(3.94min)实施例7:5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮(化合物7)操作同实施例1，不同处在于用4-乙基苯硼酸代替苯硼酸得到白色固体，收率82%。丄HNMR(300MHz，d6_DMS0):S7.80—7.83(m，3H)，7.63—7.67(m，4H)，7.32(d，J=7.9Hz，2H)，2.63(q，J=7.6Hz，2H)，1.19(t，J=7.6Hz，3H)EI-MS:m/z309(M)，238，223;HRMS:calcdforC18H15NS02，309.0823;found，309.0826;HPLCPurity(retentiontime):99%(4.13min)实施例8:5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮(化合物8)操作同实施例l，不同处在于用2-甲基-4-甲氧基苯硼酸代替苯硼酸得到浅褐色固体，收率83%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.82(s，1H)，7.63(d，J=8.5Hz，2H)，7.47(d，J=8.5Hz，2H)，7.16(d，J=8.4Hz，1H)，6.87(d，J=8.4Hz，1H)，6.82(s，1H)，3.76(s，3H)，2.23(s，3H)EI-MS:m/z325(M)，254，242，226;HPLCPurity(retentiontime):98%(3.72min)实施例9:5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮(化合物9)操作同实施例l，不同处在于用3-羟基苯硼酸代替苯硼酸得到粉红色粉末，收率79%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S9.65(s，1H)，7.82(s，1H)，7.77(d，J=8.5Hz，2H)，7.66(d，J=8.5Hz，2H)，7.25-7.31(m，1H)，7.14(d，J=7.9Hz，1H)，7.08(s，1H)，6.80(d，J=8.0Hz，1H)13CNMR(100MHz，d6_DMS0):S167.90，167.38，157.88，142.00，140.31，132.08，131.46，130.75，130.22，127.41，123.29，117.67115.25，113.51;HRMS:calcdforC16HUNS03，297.0459;found，297.0462EI-MS:m/z297(M)，226，113;HPLCPurity(retentiontime):98%(3.03min)实施例10:5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮(化合物10)操作同实施例l，不同处在于用3，4-二氟苯硼酸代替苯硼酸得到浅褐色固体，收率81%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.86(m，1H)，7.83(d，J=8.6Hz，2H)，7.80(s，1H)，7.64(d，J=8.6Hz，2H)，7.56-7.59(m，1H)，7.47-7.53(m，1H)EI-MS:m/z317(M)，246，201，123;HRMS:calcdforC16H9NS02F2，317.0322;found,317.0317;HPLCPurity(retentiontime):100%(3.74min)实施例11:5-(4-苯基苯亚甲基)-2-硫代-4-噻唑酮(化合物11)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>操作同实施例l，不同处在于用2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到褐色固体，收率93%。NMR(300MHz，d6_DMS0):S75(d，J=8.2Hz，2H)，7.74(d，J=8.2Hz，2H)，7.66-7.69(m，3H)，7.46-7.51(m，2H)，7.40(t，J=7.2Hz，1H)13CNMR(100MHz，d6_DMS0):S195.48，169.35，142.24，138.84，132.09，131.46，131.38，129.29，128.52，127.69，126.98，125.29EI-MS:m/z297(M)，210，165;HPLCPurity(retentiontime):100%(4.04min)实施例12:5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮(化合物12)操作同实施例l，不同处在于用对氟苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到褐色固体，收率83%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.77—7.85(m，4H)，7.67(m，3H)，7.32(m，2H);EI-MS:m/z315(M)，228;HPLCPurity(retentiontime):99%(4.00min)实施例13:5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]_2_硫代_4_噻唑酮(化合物13)操作同实施例1，不同处在于用3，4-亚甲二氧基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到褐色固体，收率84%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.77(d，J=8.5Hz，2H)，7.64(s，1H)，7.60(d，J=8.5Hz，2H)，7.22-7.32(m，2H)，7.OO(d，J=8.3Hz，1H)，6.07(s，2H)EI-MS:m/z341(M)，254;HRMS:calcdforC17H11NS203，341.0181;found，341.0170;HPLCPurity(retentiontime):96%(3.89min)实施例14:5-[4-(3，4_二甲氧基苯基)苯亚甲基]_2_硫代_4_噻唑酮(化合物14)操作同实施例l，不同处在于用3，4-二甲氧基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到橙色固体，收率83%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.83(d，J=8.5Hz，2H)，7.66(s，1H)，7.62(d，J=8.5Hz，2H)，7.29(m，2H)，7.04(d，J=9.1Hz，1H)，3.85(s，3H)，3.79(s，3H)EI-MS:m/z357(M)，270，255;HPLCPurity(retentiontime):97%(3.64min)实施例15:5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮(化合物15)操作同实施例l，不同处在于用3，5-二(三氟甲基)苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到黄色固体，收率81%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.40(s，2H)，8.13(s，1H)，8.05(d，J=8.7Hz，2H)，7.73(m，3H)EI-MS:m/z433(M)，346;HPLCPurity(retentiontime):99%(4.48min)实施例16:5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮(化合物16)15操作同实施例1，不同处在于用3-氯-4-氟苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到黄色固体，收率87%。4腿(300MHz，d6_DMS0):S7.96-7.99(m，1H)，7.87(d，J=8.3Hz，2H)，7.74-7.79(m，1H)，7.67(m，3H)，7.52(m，1H)EI-MS:m/z351/349(1:3，M)，264/262(1:3);HRMS:calcdforC16H9NFClS20，348.9798;found，348.9788;HPLCPurity(retentiontime):91%(4.29min)实施例17:5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮(化合物17)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>操作同实施例1，不同处在于用4-乙基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到黄色固体，收率80%。NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.80(d，J=8.6Hz，2H)，7.62-7.66(m，5H)，7.30(d，J=7.9Hz，2H)，2.63(q，J=7.7Hz，2H)，1.19(t，J=7.7Hz，3H)EI-MS:m/z325(M)，238，223;HRMS:calcdforC18H15NS20,325.0595;found，325.0579;HPLCPurity(retentiontime):95%(4.48min)实施例18:5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮(化合物18)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula>操作同实施例l，不同处在于用2-甲基-4_甲氧基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到金黄色固体，收率88%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.70(s，1H)，7.65(d，J=8.6Hz，2H)，7.50(d，J=8.6Hz，2H)，7.18(d，J=8.6Hz，1H)，6.88(d，J=8.6Hz，1H)，6.83(s，1H)，3.77(s，3H)，2.25(s，3H)EI-MS:m/z341(M)，254;HPLCPurity(retentiontime):97%(4.05min)实施例19:5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮(化合物19)操作同实施例1，不同处在于用3-羟基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到褐色固体，收率84%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S9.63(s，1H)，7.78(d，J=8.4Hz，2H)，7.67(m，3H)，7.28(m，1H)，7.15(d，J=7.9Hz，1H)，7.08(s，1H)，6.82(m，1H)EI-MS:m/z313(M)，226;HRMS:calcdforC16H11NS202,313.0231;found，313.0238;HPLCPurity(retentiontime):93%(3.30min)实施例20:5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]_2_硫代_4_噻唑酮(化合物20)操作同实施例l，不同处在于用3，4-二氟苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4-噻唑酮代替2，4-噻唑二酮得到褐色固体，收率84%。4NMR(300MHz，d6_DMS0):S7.91(m，1H)，7.87(m，2H)，7.66-7.68(m，3H)，7.61-7.59(m，1H)，7.50-7.56(m，1H)EI-MS:m/z333(M)，246，201;HPLCPurity(retentiontime):98%(4.05min)实施例21:5-(4-苯基苯亚甲基)-2，4，6-嘧啶三酮(化合物21)操作同实施例l，不同处在于用2，4，6-嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到浅绿色固体，收率92%。NMR(300MHz，d6-DMS0):S8.31(s，1H)，8.24(d，J=8.7Hz，2H)，7.77-7.82(m，4H)，7.48-7.53(m，2H)，7.42(t，J=7.3Hz，1H)13CNMR(100MHz，d6-DMS0):S163.45，161.70，154.44，150.09，143.86，138.92，134.39，131.75，129.23，128.58，127.00，126.27，118.73EI-MS:m/z292(M)，248，215;HRMS:calcdforC17H12N203，292.0848;found，292.0840;HPLCPurity(retentiontime):100%(3.Olmin)实施例22:5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮(化合物22)17操作同实施例1，不同处在于用对氟苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6_嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到乳白色固体，收率89%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.31(s，1H)，8.23(d，J=8.lHz，2H)，7.77-7.86(m，4H)，7.33(m，2H)EI-MS:m/z310(M)，266，215;HPLCPurity(retentiontime):100%(3.Olmin)实施例23:5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮(化合物23)操作同实施例l，不同处在于用3，4-亚甲二氧基苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6-嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到黄色固体，收率85%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.29(s，1H)，8.22(d，J=8.4Hz，2H)，7.75(d，J=8.4Hz，2H)，7.39(s，1H)，7.31(d，J=8.1Hz，1H)，7.03(d，J=8.1Hz，1H)，6.08(s，2H)EI-MS:m/z336(M)，292，215;HPLCPurity(retentiontime):100%(2.90min)实施例24:5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]_2，4，6_嘧啶三酮(化合物24)操作同实施例l，不同处在于用3，4-二甲氧基苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6_嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到橙色固体，收率86%。力NMR(300MHz，d6-DMS0):S8.30(s，1H)，8.26(d，J=8.5Hz，2H)，7.80(d，J=8.5Hz，2H)，7.34-7.36(m，2H)，7.06(d，J=8.8Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.80(s，3H)EI-MS:m/z352(M)，309,255;HPLCPurity(retentiontime):97%(2.72min)实施例25:5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]_2，4，6-嘧啶三酮(化合物25)操作同实施例l，不同处在于用3，5-二(三氟甲基)苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6-嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到乳白色固体，收率88%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.45(s，2H)，8.33(s，1H)，8.22(m，3H)，8.00(d，J=8.6Hz，2H)EI-MS:m/z428(M)，384，215;HPLCPurity(retentiontime):96%(3.56min)实施例26:5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]-2，4，6_嘧啶三酮(化合物26)操作同实施例l，不同处在于用3-氯-4-氟苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6-嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到浅黄色固体，收率90%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.31(s，1H)，8.21(d，J=8.5Hz，2H)，8.03(m，1H)，7.81-7.85(m，3H)，7.54(m，1H)EI-MS:m/z346/344(1:3，M)，302/300(1:3)，215;HPLCPurity(retentiontime):97%(3.22min)实施例27:5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮(化合物27)操作同实施例l，不同处在于用4-乙基苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6_嘧啶三酮代替2，4_噻唑二酮得到白色固体，收率85%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.30(s，1H)，8.24(d，J=8.5Hz，2H)，7.78(d，J=8.5Hz，2H)，7.70(d，J=8.2Hz，2H)，7.34(d，J=8.2Hz，2H)，2.65(q，J=7.5Hz，2H)，1.21(t，J=7.5Hz，3H)EI-MS:m/z320(M)，276，215;HPLCPurity(retentiontime):100%(3.37min)实施例28:5-[4-(2-甲基_4_甲氧苯基)苯亚甲基]_2，4，6_嘧啶三酮(化合物28)操作同实施例l，不同处在于用2-甲基-4_甲氧基苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6-嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到白色固体，收率87%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.31(s，1H)，8.21(d，J=8.5Hz，2H)，7.43(d，J=8.5Hz，2H)，7.20(d，J=8.1Hz，1H)，6.89(d，J=8.1Hz，1H)，6.85(s，1H)，3.78(s，3H)，2.27(s，3H)EI-MS:m/z336(M)，292，215;HPLCPurity(retentiontime):97%(3.04min)实施例29:5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮(化合物29)操作同实施例l，不同处在于用3-羟基苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6-嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到金黄色固体，收率80%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S9.63(s，1H)，8.30(s，1H)，8.22(d，J=8.5Hz，2H)，7.72(d，J=8.5Hz，2H)，7.29(m，1H)，7.18(d，J=7.7Hz，lH)，7.11(s，1H)，6.83(d，J=8.4Hz，1H)EI-MS:m/z308(M)，264，215;HPLCPurity(retentiontime):96%(2.52min)实施例30:5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮(化合物30)操作同实施例l，不同处在于用3，4-二氟苯硼酸代替苯硼酸，2，4，6_嘧啶三酮代替2，4-噻唑二酮得到黄色固体，收率91%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.30(s，1H)，8.21(d，J=8.6Hz，2H)，7.89-7.96(m，1H)，7.82(d，J=8.6Hz，2H)，7.54-7.60(m，1H)，7.47-7.51(m，1H)EI-MS:m/z328(M)，284，215;HPLCPurity(retentiontime):92%(3.07min)实施例31:5-(4-苯基苯亚甲基)-2-硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物31)操作同实施例1，不同处在于用2-硫代-4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到橙色固体，收率90%。力NMR(300MHz，d6-DMS0):S8.32(s，1H)，8.28(d，J=8.OHz，2H)，7.75—7.83(m，4H)，7.45-7.53(m，2H)，7.39-7.43(m，1H)13CNMR(100MHz，d6—DMS0):S178.31，161.77，159.56，155.38，144.36，138.84，134.78，131.76，129.26，128.72，127.06，126.36，118.76EI-MS:m/z308(M)，248，231;HPLCPurity(retentiontime):91%(3.27min)实施例32:5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物32)操作同实施例1，不同处在于用对氟苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到橙色固体，收率86%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.32(s，1H)，8.26(d，J=8.2Hz，2H)，7.78-7.86(m，4H)，7.34(m，2H)EI-MS:m/z326(M)，266，231;HPLCPurity(retentiontime):92%(3.27min)实施例33:5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]_2_硫代_4，6_嘧啶二酮(化合物33)操作同实施例l，不同处在于用3，4-亚甲二氧基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6_嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到深红色固体，收率87%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.30(s，1H)，8.25(d，J=8.5Hz，2H)，7.74(d，J=8.5Hz，2H)，7.32-7.41(m，2H)，7.04(d，J=8.1Hz，1H)，6.09(s，2H)EI-MS:m/z352(M)，292，231;HPLCPurity(retentiontime):96%(3.18min)实施例34:5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物34)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>操作同实施例l，不同处在于用3，4-二甲氧基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6_嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到浅黄色固体，收率86%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.31(s，1H)，8.28(d，J=8.5Hz，2H)，7.81(d，J=8.5Hz，2H)，7.35-7.38(m，2H)，7.06(d，J=8.7Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.81(s，3H)EI-MS:m/z368(M)，308;HPLCPurity(retentiontime):91%(3.OOmin)实施例35:5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物35)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>操作同实施例l，不同处在于用3，5-二(三氟甲基)苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代_4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到褐色固体，收率81%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.47(s，2H)，8.36(s，1H)，8.23(m，3H)，8.01(d，J=8.6Hz，2H)EI-MS:m/z444(M)，384，215;HPLCPurity(retentiontime):93%(3.81min)实施例36:5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]-2_硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物36)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage22</formula>操作同实施例l，不同处在于用3-氯-4-氟苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到金黄色固体，收率88%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.32(s，1H)，8.23(d，J=8.5Hz，2H)，8.04(m，1H)，7.82-7.85(m，3H)，7.54(m，1H)EI-MS:m/z362/360(1:3，M)，302/300(1:3)，231;HPLCPurity(retentiontime):93%(3.52min)实施例37:5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物37)操作同实施例l，不同处在于用4-乙基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到金黄色固体，收率83%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.32(s，1H)，8.27(d，J=8.5Hz，2H)，7.78(d，J=8.5Hz，2H)，7.71(d，J=8.3Hz，2H)，7.35(d，J=8.3Hz，2H)，2.67(q，J=7.5Hz，2H)，1.24(t，J=7.5Hz，3H)EI-MS:m/z336(M)，276，231;HPLCPurity(retentiontime):95%(3.65min)实施例38:5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]_2_硫代_4，6_嘧啶二酮(化合物38)操作同实施例l，不同处在于用2-甲基-4_甲氧基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6_嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到金黄色固体，收率80%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.33(s，1H)，8.24(d，J=8.5Hz，2H)，7.45(d，J=8.5Hz，2H)，7.21(d，J=8.2Hz，1H)，6.90(d，J=8.2Hz，1H)，6.85(s，1H)，3.79(s，3H)，2.28(s，3H)EI-MS:m/z352(M)，292，231;HPLCPurity(retentiontime):92%(3.33min)实施例39:5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]_2_硫代_4，6_嘧啶二酮(化合物39)操作同实施例l，不同处在于用3-羟基苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代-4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到深红色固体，收率82%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S9.62(s，1H)，8.31(s，1H)，8.23(d，J=8.5Hz，2H)，7.73(d，J=8.5Hz，2H)，7.18-7.31(m，2H)，7.12(s，lH)，6.84(m，lH)EI-MS:m/z324(M)，264，231;HPLCPurity(retentiontime):94%(2.76min)实施例40:5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮(化合物40)<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>操作同实施例l，不同处在于用3，4-二氟苯硼酸代替苯硼酸，2-硫代_4，6-嘧啶二酮代替2，4-噻唑二酮得到金黄色固体，收率89%。力NMR(300MHz，d6_DMS0):S8.32(s，1H)，8.24(d，J=8.5Hz，2H)，7.91—7.98(m，1H)，7.83(d，J=8.5Hz，2H)，7.55-7.61(m，1H)，7.48-7.51(m，1H)EI-MS:m/z344(M)，284，231;HPLCPurity(retentiontime):90%(3.34min)蛋白酪氨酸磷酸酯酶IB(PTPIB)的获得及活性测定方法发明人通过同源重组的方法，用大肠杆菌表达系统得到了大量高活性的人源PTPIB活性片段，进一步研究了PTPIB的酶学性质，并根据其酶学性质确定PTPIB筛选体系为30nMGST-PTPlB，2mMpNPP，50mMMopspH6.5，2mMDTT，ImMEDTA。以PTP的PTPs通用抑制剂Na3V04作为阳性抑制剂，检测了Na3V04在PTP1B上的抑制活性，从而证实抑制剂筛选体系的可行性。1.目的蛋白PTP1B的表达及菌的收获与裂解将构建好的PTP1B重组质粒转化至表达型大肠杆菌BL21(DE3)菌株，挑单克隆菌落于含有终浓度100iig/ml氨苄青霉素的LB培养基，37°C，280rpm培养至细菌密度达0D6。。值为0.40.6，加入ImMIPTG诱导，37t:，280rpm表达4小时。8000rpm离心3分钟收获表达细菌，用含有2mMDTT禾PlmMEDTA的PBS(140mMNaC1、2.7mMKCl、10mMNa2HP04、1.8mMKH2P04)洗涤后，加入含有1%TritonX-100的破胞液重悬菌体，冰浴条件下使用超声波破菌。将上述含有GST融合目的蛋白的裂解液于4t:12000rpm15分钟离心两次，收集上清，待分离纯化。2.融合蛋白GST-PTP1B的亲和纯化预先用含有2mMDTT和ImMEDTA的PBS，以510ml/min的流速平衡5ml的GSTrapFF层析柱，以便使目的蛋白在上样过程中始终保持相同的溶液条件；将含有目的融合蛋白的上清液以12ml/min的流速缓慢上样，使目的蛋白充分地结合到亲合树脂上，通过PBS将结合于亲和树脂的杂质蛋白充分洗净，以Bradford法检测蛋白浓度；最后用含有2mMDTT和ImMEDTA的洗脱液(10mM还原型谷胱甘肽和50mMTris-HClpH8.0)，以12ml/min的流速将融合蛋白GST-PTP1B从亲和树脂上洗脱，取较浓蛋白混合，以备下一步脱^!.o3.GST-PTP1B重组蛋白分子筛脱盐及鉴定上述亲和层析是采用底物浓度竞争方法，以高浓度的谷胱甘肽溶液将GST融合蛋白洗脱，所以获得的重组蛋白溶液中含有10mM还原型谷胱甘肽。分子筛纯化的原理是利用大小不同的分子所经的路径不同，导致流出的时间不同，从而使得大小不同的分子得到分离，大分子物质先被洗脱出来，小分子物质后被洗脱出来。采用55mlHiPr印16/10脱盐层析柱一次可上样9ml蛋白。GST融合蛋白上样后，用脱盐缓冲液(50mMTris-HCl，pH8.0)洗脱，以获得去除谷胱甘肽的目的蛋白。以牛血清白蛋白(BSA)作为标准蛋白，采用Bradford法测定蛋白质浓度。在96孔酶标板中加入100ii1反应体系80ii1测活缓冲液，10ill—定浓度的底物pNPP和10ill酶。放入96孔板紫外/可见分光光度计SpectraMAX340中，在3(TC，动态检测3分钟之内405nm的光吸收值变化。反应开始阶段呈线性的酶动力学曲线的斜率即为酶反应初速度(mOD/min)。4.PTP1B抑制活性测定上述纯化并鉴定后的hPTPlB重组蛋白能水解底物pNPP的磷脂键，得到的产物在410nm处有很强的光吸收，因此可以通过直接检测410nm处光吸收的变化以观察酶的活性变化以及化合物对酶活性的抑制情况。标准的测活体系如下10mMTris.Cl，m=7.6，10mMpNPP，2%DMSO，lOOnMhPTPlB。观察指标动态测定波长为410nm处的光吸收，时间为3分钟，其动力学曲线一级反应的斜率作为酶的活性指标。筛选结果是当化合物的浓度为5yg/ml时对酶活性的百分抑制率，抑制活性高于50%时，按常规筛选得出IC5。，阳性对照Na3V04的IC5。为2M。所得化合物活性如表1所示表1<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>35<20-36一29一3730—38、。,<20-39<20-40<20-"-"表示未测ICso如表1所示，该化合物库中的部分化合物对PTP1B具有明显的抑制活性，对化合物的构效关系进行考察，可以看出2-硫代-4-噻唑酮和2，4_噻唑二酮片段对生物活性有利，而2，4，6-嘧啶三酮与2-硫代-4，6-嘧啶二酮片段则对生物活性不利；当苯环片段有取代基时能够在一定程度上提高对PTP1B的抑制活性，部分化合物的IQ。小于10—6M。29权利要求具有如下结构通式的联苯化合物其中R1为H、C1-C4直链或支链烷基、羟基、甲氧基、甲硫基、三氟甲基、苯基或卤素；R2为H、羟基、硝基、C1-C4直链或支链烷基、甲氧基、乙氧基或卤素；R3为H、C1-C4直链或支链烷基、三氟甲基或卤素；R1-R2为X为F2009100448750C0000011.tif,F2009100448750C0000012.tif,F2009100448750C0000013.tif2.根据权利要求l所述的联苯化合物，其特征在于:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>3.根据权利要求1所述的联苯化合物，其特征在于，X为4.根据权利要求1所述的联苯化合物，其特征在于，X为5.根据权利要求1所述的联苯化合物，其特征在于，X为为<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>6.根据权利要求1所述的联苯化合物，其特征在于，所述化合物为5-(4-苯基苯亚甲基)-2，4-噻唑二酮；5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(3，4_亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]-2，4-噻唑二酮；5-(4-苯基苯亚甲基)-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4-噻唑酮；5-(4-苯基苯亚甲基)-2，4，6-嘧啶三酮；5_[4-(4_氟苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮；5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]_2，4，6-嘧啶三酮；5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮；5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮；5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]_2，4，6_嘧啶三酮；5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮；5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮;5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮；5-[4-(3，4-二氟苯基)苯亚甲基]-2，4，6-嘧啶三酮；5-(4-苯基苯亚甲基)-2-硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-(4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-(3，4-亚甲二氧基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-(3，4-二甲氧基苯基)苯亚甲基]_2_硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-[3，5-二(三氟甲基)苯基]苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-(3-氯-4-氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代_4，6_嘧啶二酮；5-[4-(4-乙基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-(2-甲基-4-甲氧苯基)苯亚甲基]_2_硫代-4，6-嘧啶二酮；5-[4-(3-羟基苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮；或5_[4-(3，4_二氟苯基)苯亚甲基]-2-硫代-4，6-嘧啶二酮。7.—种制备权利要求1所述的联苯化合物的方法，其特征在于包括以下步骤PEG柳:ABCa:A与对溴苯甲醛反应得B，反应温度为5(TC，溶剂为甲醇；b:B在醋酸钯为催化剂，碳酸钾、碳酸铯或磷酸钾为碱，封管条件下与芳基硼酸反应得C，反应温度为709(TC，溶剂为甲醇、乙醇、乙腈或二甲亚砜；c:C在醋酸钠或醋酸钾为碱的条件下与2，4-噻唑二酮、2-硫代-4-噻唑酮、2，4，6-嘧啶三酮或2-硫代-4，6-嘧啶二酮在11013(TC反应得D，溶剂为醋酸。8.如权利要求1所述的联苯化合物在制备治疗糖尿病或肥胖症的药物中的应用。全文摘要本发明公开了结构式如下的联苯化合物及其制备方法和用途。通过生物活性测试证明，该化合物能够明显地抑制蛋白酪氨酸磷酸酯酶PTP1B的活性。因此，本发明的联苯化合物可用作蛋白酪氨酸磷酸酯酶的抑制剂而用于预防或对症治疗糖尿病或肥胖症。文档编号C07D239/60GK101768132SQ20091004487公开日2010年7月7日申请日期2009年1月5日优先权日2009年1月5日发明者刘章,张薇,李佳,李静雅,沈竞康,马兰萍申请人:中国科学院上海药物研究所