C)作为参比。
[0040] 图15 :样品酸化和稀释的影响。显示的HPV测定结果（RLU/CO)是将未稀释的、水 或醋酸稀释的样品进行手动AXpH-direct方案时洗脱液部分的结果。利用PEI改性珠。手 动转换（MC)作为参比。
[0041] 图16 :优化珠的量I。显示的HPV测定结果（RLU/CO)是应用不同体积的PEI改性 珠悬浮液的洗脱液部分的结果。手动转换（无珠）作为参比。
[0042] 图17 :优化珠的量II。显示的HPV测定结果（RLU/C0)是应用不同体积的PEI改 性珠悬浮液的洗脱液和上清液部分的结果。手动转换（MC)作为参比。
[0043] 图18 :细胞培养物对照的结合。显示的HPV测定结果（RLU/C0)是应用不同体积 的PEI改性珠悬浮液时，洗脱液和上清液部分的结果。SiHa和HeLa细胞用作样品。手动转 换（MC)作为参比。
[0044] 图19a)和b):干扰物质。显示的所得HPV测定结果（RLU/C0)是向样品添加各种 干扰物质（CJ =避孕胶冻，LJ =润滑剂胶冻，AC =抗真菌药膏，CS =避孕杀精剂，D =冲洗 剂）并应用AXpH-direct方法的。无干扰的相应样品作为参比（w/olnh)。
[0045] 图20 :检出限。显示的所得HPV测定结果（RLU/CO)是使用HPV阳性临床库（库， 稀释液1-5)的样品的不同稀释液并采用手动转换（MC)或AXpH-direct方法的结果。对于 每一稀释液，可以从右侧的表格看出检测为阳性的阳性临床库样品。HPV阴性临床库（阴性 库）作为对照。
[0046] 图21 :细胞构成（cellularity)对细胞结合的影响。显示的所得HPV测定结果 (RLU/CO)是使用HPV阳性临床库的样品的不同稀释液（8x-l/128x)并应用手动转换（MC) 或自动化AXpH-direct方法的结果。HPV阴性临床库（阴性库）作为对照。
[0047] 图22 :洗脱体积的影响。显示的所得HPV测定结果（RLU/CO)是为洗脱应用不同 体积STM/DNR时的结果。手动转换（MC)作为参比。
[0048] 图23 :样品输入体积的影响。显示的所得HPV测定结果（RLU/CO)是使用不同体 积的样品输入时的结果。利用两个不同临床库的样品（库1和库2)。使用AXpH珠，手动转 换（MC)作为参比。
[0049] 图24 :利用PEI改性珠以制备PRESERVCYT?:样品。显示的所得HPV HC测定结 果（RLU/CO)是两个不同的HPV阳性临床库（库1和库2)的结果。手动转换（MC)与2. Oml 样品输入用作参比。
[0050] 图25 :pei改性珠（Preservcytr样本）的结合效率分析。显示的所得HPVHC 测定结果（RLU/CO)是应用不同体积珠悬浮液（珠体积）时，临床库样品的上清液部分和洗 脱液部分的结果。手动转换（MC)与2.0毫升样品输入用作参比。
[0051] 图26 :自动样品制备I ( PR ES ERVC YT?祥本）的珠用量微调。显示的所得HPV HC测定结果（RLU/CO)是应用不同体积的PEI改性珠悬浮液（珠体积）时，HPV低阳性SiHa 细胞（顶部）以及HeLa细胞培养物（底部）的样品的结果。手动转换（MC)与2. 0毫升的 样品输入用作参比。
[0052] 图27 :自动样品制备II ( PRESERVCYTli.样本）的珠用量微调。显示的所得HPV HC测定结果（RLU/CO)是应用不同体积的PEI改性珠悬浮液（珠体积）时，HPV中等/高阳 性SiHa细胞（顶部）以及HeLa细胞培养物（底部）的样品的结果。手动转换（MC)与2.0 毫升的样品输入用作参比。
[0053] 图28 :自动样品制备III ( PRESERVCYT?样本）的珠用量微调。显示的所得 HPV HC测定结果（RLU/CO)是应用不同体积的PEI改性珠悬浮液（珠体积）时，HPV高（顶 部）、中等（中间）以及低（底部）阳性临床库的样品的结果。手动转换（MC)与2.0毫升 的样品输入用作参比。
[0054] 图 29 :自动 AXpH-direct 方法（AXpH)和 RCS (快速捕获系统）（PRESER VCYT& 样本）之间的关系。显示的所得HPV HC测定结果（RLU/C0)是阴性和阳性临床库的样品以 及SiHa细胞培养物样品的结果。HC 2.0测定的执行有所不同。手动转换（MC)与2.0毫升 的样品输入用作参比。
[0055] 图30 :参考HPV HC测定结果（PRESERVCYT?:样本），与手动转换（MC)的 一致性。显示的HPV测定结果是394个独立品的重复结果。为在手动转换（MC)和自动 AXpH-direct方案之间作比较，将各RLU/C0值绘制成一 x-y图。r2是相关系数。
[0056] 图31 :通过提高样品输入量（PRESERVCYTli样本）来增强HPV HC测定灵敏 度。显示的所得HPV测定结果（RLU/C0)是应用不同体积的样品输入时，Caski细胞培养物 的样品和低阳性临床库的样品的结果。手动转换（MC)作为参比。
[0057] 图32a和b :手动转换与AXpH-direct方法的2X2和散点图分析（Scatter plots analysis)。分析了 Prequot SUR.EPATH?样品。
[0058] 图33a和b:手动转换与AXpH-direct方法的2X2和散点图分析。分析了残留 Prequot SUREPATH?样品。
[0059] 发明详述
[0060] 本发明提供一种方法，该方法能够利用阴离子交换表面收集细胞来制备细胞以供 后续靶核酸检测。该方法可用于，例如，实验室研宄和临床诊断目的，包括但不限于病原性 生物或病毒的检测和鉴定，对特定疾病的遗传易感性检测以及用于肿瘤或其他疾病的诊断 领域。尤其是，它可以用于病毒检测领域，特别是HPV的检测。
[0061] 根据第一方面，本发明提供测定细胞样品中靶核酸存在或不存在的方法，所述方 法包括：
[0062] a)在适合于诱导细胞与表面结合的条件下，将含有阴离子交换部分的表面与液体 细胞样品接触；
[0063] b)将含有结合细胞的表面与剩余样品分离以便收集细胞；
[0064] c)从所述细胞释放核酸；
[0065] d)在靶核酸与该靶核酸的特异性探针之间产生杂交体；
[0066] e)检测所述杂交体的存在或不存在。
[0067] 下文详细描述了每个单独的步骤、所使用的材料以及合适的和优选的实施方式。
[0068] 步骤 A)
[0069] 在步骤a)中，在适合于诱导细胞与所述表面结合的条件下，将细胞样品与包含阴 离子交换部分的表面接触。
[0070] 表面
[0071] 用于步骤a)的所述表面是固体或半固体，并且包含阴离子交换部分。本文所用的 术语"表面"尤其指在固相与液相接触时，固相中与液体接触的部分。固相提供的表面提供 (例如携带）阴离子交换部分。阴离子交换部分将在下文详细描述。合适的固相可以由选 自下组的材料制成，或者特别是可在它们的表面包含选自下组的材料：
[0072] -包含或由硅，例如二氧化硅和聚硅酸材料、石英、硼硅酸盐、硅酸盐、硅藻土或玻 璃构成的材料，
[0073] -包含以下聚合物或由以下聚合物构成的材料，例如聚（甲基）丙烯酸酯、聚氨酯、 聚苯乙稀（polystyrene)、聚苯乙稀（polystyrol)、聚丙稀酰胺、二乙稀基苯聚合物、苯乙 稀二乙稀基苯聚合物、聚乙稀、聚丙稀、聚偏二氟乙稀、聚丙稀腈、聚氯乙稀、聚丙稀酸醋、聚 丙烯酰胺、聚甲基丙烯酸酯或甲基丙烯酸甲酯聚合物；
[0074] -包含或由多糖，例如琼脂糖（agarose)、纤维素、葡聚糖或琼脂糖（凝胶） (sepharose)构成的材料；
[0075] -包含或由矿物质构成的材料；
[0076] -包含或由金属氧化物，例如氧化铝、氧化镁、氧化钛或氧化锆构成的材料；
[0077] -包含或由金属，例如金或铂构成的材料；和
[0078] -包含或由上述物质的衍生物构成的材料。
[0079] 此外，固相也可以包含多于一种的上述材料。优选地，含有阴离子交换部分的表面 至少由上述材料之一或它们的混合物构成。适合于阴离子交换层析的任何固相也可用作固 相以提供包含阴离子交换部分，例如用阴离子交换部分官能化的表面。
[0080] 固相的优选形式包括但不限于颗粒，例如珠、膜、过滤器、板、柱、容器和试纸条。根 据一实施方式，包含阴离子交换部分的表面由一容器提供，例如，容器的内表面旨在接收细 胞样品。表面的内表面或其各部分可以用阴离子交换部分作官能化，例如进行涂覆。可以 用阴离子交换部分作官能化的各容器的实例包括但不限于：微管和微板的孔。在该实施方 式中，细胞因所提供的阴离子交换部分而结合于容器（例如孔）的内表面，藉此易于从样品 收集细胞。
[0081] 根据优选的实施方式，表面可由固相提供，所述固相可作为悬浮液提供，并且可以 与液相分离。当与液相（例如基于含细胞液体的细胞学介质，其作为细胞样品实例）接触 时，含有阴离子交换部分的表面与液相接触以便进行细胞结合。含有阴离子交换部分的 表面优选由颗粒提供，所述颗粒在其表面包含阴离子交换部分。所述颗粒的平均尺寸可 以选自如下范围：l〇〇nm-50 μ m、200nm_40 μ m、300nm_35 μ m、400nm_30 μ m、450nm_25 μ m、 500nm_20 μ m、550nm_15 μ m、600nm_12· 5 μ m、650nm_10 μ m、700nm_7· 5 μ m、750nm_5 μ m、 800nm_3. 5 μ m、800nm_3 μ m、800_2, 5 μ m、800nm_2 μ m 和 800nm_l. 5 μ mD 相应尺寸，特别是 较小尺寸的颗粒易于操作并可以很好地重悬于细胞样品中，例如IOym或更小、7. 5 μπι或 更小，优选为5 μπι或更小、2. 5 μπι或更小、或1. 5 μπι或更小。此外，相应的小颗粒能提供较 大表面积，从而可以结合并因此可以从剩