)进行结构确证，部分化合物经OK1H-1H COSY、HMQC、HMBC、NOESY进 行结构确证。
[0077] 实施例9
[0078] 本发明还涉及实施例1-8中所述化合物21-84或其盐与有机溶剂或水形成的溶剂 合物。
[0080] 分别称取化合物21、35、42、49、56、63、70、72、79各IOOmg溶于8mL无水乙醇中， 室温下，向其中加入I.O当量的富马酸和7mL无水乙醇，加热至60°C搅拌1分钟后（富马 酸完全溶解），冷却至室温下，继续搅拌两小时，过滤收集沉淀，干燥，分别得到富马酸盐一 乙醇合物（l〇l-l〇9)90_105mg不等；分别称取上述溶剂合物101-109各50mg于60°C下 溶于5mL乙醇和ImL水中，过滤除去不溶物，并在室温下搅拌12小时，过滤收集沉淀，干 燥后，将得到的固体置于25°C、60%相对湿度的条件下，静置两天，得到富马酸盐二水合物 (110-118) 30-40mg不等。经1HNMR、固态13C NMR或比旋光度测试未发现上述溶剂合物中含 手性氨基酸的溶剂合物发生消旋化现象。
[0081] (2) -水合物式I-I?H2O(119-127)的制备
[0082] 分别称取化合物21、35、42、49、56、63、70、72、79各IOmg混悬于IOmL水中，于 28-30°C下搅拌两小时，过滤收集沉淀，将得到固体置于35°C、75%相对湿度的条件下，静置 3天，得到一水合物119-127。
[0083] 上述溶剂合物101-127分别进行了差示热分析/热重分析、元素分析、红外吸收光 谱、固态 13C-NMR分析，以下仅列出差示热重分析数据：使用Thermo plus TG8120差示热重 分析仪（用于测量的样品量分别为3-5mg不等，加热速率：KTC /min，基准物质：氧化铝） 来进行差示热重分析，吸热峰：78. 5-87. 3°C附近有一吸热峰，178. 5-181. 6°C附近有一吸热 峰。
[0084] 实施例10
[0085] 储存稳定性试验
[0086] 在40°C、75%相对湿度的条件下（结果见表1)及50°C敞口容器中，分别对化合物 21、35、101、102、110、111、119、120进行储存，并检测2个月后的储存稳定性。关于储存稳定 性，通过HPLC对初始时和储存2个月后每个试验化合物的纯度进行测量，并对结果进行比 较（具体方法可参见W02009128421A1中记载的方法）。
[0087] 表1在40°C、75%相对湿度的条件下储存稳定性试验
[0088]
[0089]由表1中的测试结果可以看出，溶剂合物具有极其优良的储存稳定性，此外，在 50°C敞口容器中测试试验也显示两个月后溶剂合物的纯度几乎没有变化，而化合物21、35 的纯度降低1. 6% -2. 2%，由此亦可以看出溶剂合物具有超高稳定性的优点，便于长期储 存。
[0090]实施例11
[0091] 本发明测试了所有化合物对呼吸道合胞病毒（RSV)的抑制活性，为了本发明撰写 的方便以及便于更加简明直观的理解本发明，以下仅列出本发明化合物的ESI-MS及呼吸 道合胞病毒（RSV)的抑制活性数据（见表2)。
[0092] 本发明化合物对呼吸道合胞病毒（RSV)的抑制活性按照如下文献方法测试： Zhang,Y.J. ；Stein,D.A. ；Fan,S.M. ；ffang,K.Y. ；Kroeker,A.D. ；Meng,X.J. ；Iversen,P. L. ;Matson，D.O.Vet.Microbiol. 2006, 117(2-4), 117-129 ;或可按照现有技术中其他类似 文献中报道的方法进行测试。本发明所有化合物（21-84)对RSV均具有显著的抑制作用， 其半数有效浓度（EC5tl)在0. 1至120ng/mL，且半数中毒浓度（TC5tl)在1-100yg/mL，抑毒指 数（TI) =TC5tZEC5tl最高达600,可见本发明化合物或其立体异构体、其几何异构体、其溶剂 化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物可用于制备高效低毒的抗RSV感染药物。
[0093] 表2本发明化合物（21-84)的ESI-MS数据及其对呼吸道合胞病毒（RSV)的抑制 活性数据。
[0094]
[0095]
[0097] 表2中"A"表示化合物浓度为0. 1-2. 0ng/mL，"B"表示化合物浓度为10-25ng/mL， "C"表示化合物浓度为50-75ng/mL，"D"表示化合物浓度为90-120ng/mL;"++++"表示LC5tl/ EC5tl在 500-600 之间，"+++"表示LC5Q/EC5Q在 350-450 之间，"++"表示LC5Q/EC5Q在 200-300 之间，" + "表示LC5Q/EC5Q在50-150之间。
[0098] 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考文献，就如同每一篇文献被 单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述内容之后，本领域的技术人员 可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的 范围。
【主权项】
1. 一种式1-2结构的喹啉酮生物碱类化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物，其特征在于式1-2化合物具有如下结构：其中&为羧基端脱掉羟基的氨基酸残基，R2为H、C1-C4烷基、C3-C6环烷基、C1-C4卤 代烷基、C1-C4烷基酰基、C1-C4卤代烷基酰基、C3-C6环烷基酰基、C2-C4烯基、C7-C10芳 基烷基，"--"表示单键或不存在；所述氨基酸为丙氨酸（Ala)、缬氨酸（Val)、亮氨酸 (Leu)、异亮氨酸（lie)、脯氨酸（Pro)、苯丙氨酸（Phe)、色氨酸（Trp)、蛋氨酸（Met)、甘氨酸 (Gly)、丝氨酸（Ser)、苏氨酸（Thr)、半胱氨酸（Cys)、酪氨酸（Tyr)、天冬酰胺（Asn)、谷氨酰 胺（Gin)、赖氨酸（Lys)、精氨酸（Arg)、组氨酸（His)、天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)中的一 种，其中氨基酸的构型为D型、L型、或DL型，氨基酸中的氨基任选被C1-C4烷基、C3-C6环 烷基、C1-C4卤代烷基或C1-C4烷基酰基、C1-C4烷氧基羰基中的一个或两个取代，氨基酸中 的亚烷基或芳基任选被C1-C4烷基、C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4卤代烷基或C1-C4 烷基酰基、羟基、卤素、硝基、氰基中的一个或多个取代。2. 权利要求1所述的式1-2化合物选自如下化合物：3. -种抗病毒剂，其特征在于该抗病毒剂含有权利要求1-2任一项所述的式1-2化合 物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物中 的任一种或几种作为有效成分。4. 一种药物组合物，其特征在于该药物组合物包含权利要求1-2任一项所述的式1-2 化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化 物中的任一种或几种，以及至少一种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。5. -种药物组合物，其特征在于包含权利要求1-2任一项所述的式1-2化合物、其立体 异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物中的任一种或 几种，以及至少一种其他抗病毒药物。6. 权利要求5所述的药物组合物为注射剂、口服制剂、冻干粉针剂、悬浮剂。7. 权利要求1-2任一项所述的式1-2化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备抗病毒药物中的用途。8. 权利要求1-2任一项所述的式1-2化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备治疗和/或预防呼吸道疾病的药物中的 应用。9. 权利要求1-2任一项所述的式1-2化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物在制备治疗和/或预防由RSV引起的疾病的药 物中的应用。10. 权利要求1-2任一项所述的式1-2化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化 物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物的制备方法，其特征在于采用本申请说明书中 方法一至三中任意一种方法或米用实施例卜9中任意一种方法。
【专利摘要】本发明涉及一种喹啉酮生物碱类化合物及其作为抗病毒药物的应用，具体涉及式I-2化合物、其立体异构体、其几何异构体、其溶剂化物、其药学上可接受的盐或其盐的溶剂化物及其作为抗病毒剂的应用。本发明提供的喹啉酮生物碱类化合物具有高效、低毒的特点，具有被开发为抗病毒药物的潜力，尤其是可用于预防和/或治疗RSV感染引起的疾病。
【IPC分类】A61P31/12, C07D401/12, A61K31/4709, A61P11/00, C07D215/22, A61K31/4704, A61P31/14
【公开号】CN104945319
【申请号】CN201510150071
【发明人】陈敏, 于跃
【申请人】于跃
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年3月31日