, 1. 55 (m, 2H), 1. 17-1. 50 (m, 22 H), 1. 15(m, 2H), 0? 82(t, 3H)。
[0028] N-(间甲氧基苄基）-十六碳酰胺3，虫匪1?(4001抱，〇)(：13)，8:7.26(111，111)，6. 85 (m. 3H)，5. 91 (br，1H)，4. 40 (d，2H，J= 5. 6Hz)，3. 81 (s，3H)，2. 23 (dd，2H)，1. 67 (m，2H)， 1. 27-1. 47 (m，24H)，0? 91 (t，3H)。
[0029] N-苄基-9-氧代-12E-十八碳烯酰胺 4,虫NMR(400MHz，CDC13)，S:7. 35 (m, 2H) ，7. 27 (m. 3H)，5. 82 (br，1H)，5. 41-5. 36 (m，2H)，4. 44 (d，2H，J= 5. 6Hz)，2. 38-2. 43 (m，2H)， 2. 28-2. 32 (m，2H)，2. 01-2. 05 (m，2H)，1. 27-1. 57 (m，20H)，0? 89 (t，3H)。
[0030] N-苄基-9-氧代-12Z, 15Z-十八碳二烯酰胺 5,虫NMR(400MHz，CDC13)，S: 7. 32 (m，2H)，7. 24 (m. 3H)，5. 77 (br，1H)，5. 29-5. 40 (m，4H)，4. 42 (d，2H，J= 5. 6Hz)， 2. 78 (dd，2H)，2. 21-2. 45 (m，8H)，2. 07 (m，2H)，1. 27-1. 57 (m，12H)，0? 95 (t，3H)。
[0031] N-苯基-13-氧代-9Z, 11Z-十八碳二烯酰 6/HNMR(400MHz，CDC13),S:7.33(m, 2H), 7. 25 (m. 3H), 7. 12 (dd. 1H), 6. 15 (m. 2H), 6. 05 (d. 1H), 5. 78 (br, 1H), 4. 42 (d, 2H,J= 5. 6Hz)，2. 53 (mm, 2H)，2. 21-2. 45 (m，4H)，1. 27-1. 57 (m，18H)，0? 90 (t，3H)。
[0032] 实施例2
[0033] 将植物玛咖粉碎成40-60目玛咖粉，称取120克植物玛咖粉，装入多级逆流萃取 装置中，再加入1200ml的80 %的乙醇-甘氨酸水溶液，进行多级逆流萃取4小时，对萃取 物进行过滤，滤液在真空（0.05-0.IMPa)下浓缩，55°C左右减压浓缩得植物玛咖酰胺粗品 16. 5 克。
[0034] 取柱长为450mm，内径为45mm的玻璃色谱柱，装250mlDM301大孔吸附树酯，将 上述玛咖酰胺粗品样品上样于层析柱柱顶，然后分别用流动相50%、60%、70%、80%、 90 %的乙醇-水溶液进行梯度洗脱，TLC板跟踪，在真空（0.05-0.IMPa)下浓缩，用无水 乙醇带水，分别得到57mgN-苄基-5-氧代-6E，8E-十八碳二烯酰胺（纯度96.6% )、 29mgN-苄基-十六碳酰胺（纯度96. 2 % )、22mgN-(间甲氧基苄基）-十六碳酰胺（纯度 95. 8 % )、13mgN-苄基-9-氧代-12E-十八碳烯酰胺（纯度95. 8 % )、12mgN-苄基-9-氧 代-12Z，15Z-十八碳二烯酰胺（纯度96. 7 % )、10mgN-苯基-13-氧代-9Z，11Z-十八碳二 烯酰（纯度95.3% )。
[0035] 实施例3
[0036] 将植物玛咖药材粉碎成40-60目的玛咖粉，称取120克玛咖酰胺粉，装入多级逆 流萃取装置中，再加入1200ml的80%的乙丙醇-磷酸水溶液，进行常温多级逆流萃取2小 时，取出萃取物进行过滤，滤液在真空（0.05-0.IMPa)下浓缩，30°C左右减压浓缩得玛咖酰 胺粗品14. 3克。
[0037] 取柱长为450mm，内径为45mm的玻璃色谱柱，装350mlDA-201大孔吸附树酯，将 上述玛咖酰胺粗品上样于层析柱柱顶，然后分别用流动相50 %、60 %、70 %、80 %、90 %的乙 醇-水溶液进行梯度洗脱，TLC板跟踪，在真空（-0.6-0.IMPa)下浓缩，用无水乙醇带水，分 别得到51mgN-苄基-5-氧代-6E，8E-十八碳二烯酰胺（纯度96.1%)、27mgN-苄基-十六 碳酰胺（纯度95. 4 % )、26mgN-(间甲氧基苄基）-十六碳酰胺（纯度95. 4 % )、1lmgN-苄 基-9-氧代-12E-十八碳烯酰胺（纯度96. 7% )、10mgN-苄基-9-氧代-12Z，15Z-十八碳 二烯酰胺（纯度96.9% )、8mgN-苯基-13-氧代-9Z，11Z-十八碳二烯酰（纯度95.6% )。
[0038] 本发明采用多级逆流萃取工艺制备纯化玛咖酰胺类单体化合物，用乙醇-乙酸、 乙醇-磷酸、乙醇-甘氨酸的水溶液配制的醇-酸水溶液，对植物玛咖粉进行多级逆流萃取 提取获得玛咖酰胺粗品，再选用D101型、DA-201型或DM-301型大孔吸附树酯进行分离纯 化获得高纯的玛咖酰胺类单体化合物，工艺流程简单，可操作性强，成本低，提取率高，适用 于批量制备。
[0039] 以上已以较佳实施例公开了本发明，然其并非用以限制本发明，凡采用等同替换 或者等效变换方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1. 一种从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤A :将植物玛咖粉碎成玛咖粉，加入4-10倍的70%-95%体积浓度的醇-酸水溶液， 进行多级逆流萃取提取2-5小时，提取液过滤后在30-60°C度下减压浓缩得玛咖酰胺粗品； 步骤B :大孔吸附树脂分离纯化：将玛咖酰胺粗品加入到大孔吸附树脂层析柱中进行 梯度洗脱，洗脱液分别收集、进行TLC跟踪，得到N-苄基-5-氧代-6E，8E-十八碳二烯酰胺、 N-苄基-十六碳酰胺、N-(间甲氧基苄基）-十六碳酰胺、N-苄基-9-氧代-12E-十八碳烯 酰胺、N-苄基_9_氧代-12Z, 15Z-十八碳二稀酰胺、N-苯基-13-氧代-9Z, IlZ-十八碳二 烯酰洗脱液，分别减压浓缩后分别得各玛咖酰胺类单体化合物。2. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述醇-酸水溶液为乙醇-乙酸水溶液、乙醇-磷酸水溶液、乙醇-甘氨酸水溶液中的 一种或几种。3. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述醇-酸水溶液的PH值为3. 5-6. 5。4. 根据权利要求3所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述醇-酸水溶液的PH值为4. 5-5. 5。5. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述减压浓缩的真空度为〇. 05-0.1 MPa。6. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述玛咖粉的粒度为20-80目。7. 根据权利要求6所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述玛咖粉的粒度为40-60目。8. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述大孔吸附树脂为DlOl型、DA-201型或DM-301型大孔吸附树脂。9. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述梯度洗脱中玛咖酰胺粗品上样量与大孔吸附树脂质量比为1:30-100。10. 根据权利要求1所述的从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，其特征在 于：所述梯度洗脱的洗脱液梯度设置为体积浓度分别为46-52%的乙醇-水溶液，56-62%的 乙醇-水溶液，66-72%的乙醇-水溶液，76-82%的乙醇-水溶液和88-92%的乙醇-水溶 液。
【专利摘要】本发明公开了一种从玛咖中提取纯化玛咖酰胺单体化合物的方法，将植物玛咖粉碎成玛咖粉，加入醇-酸水溶液进行多级逆流萃取提取，提取液过滤后减压浓缩得玛咖酰胺粗品；大孔吸附树脂分离纯化，梯度洗脱，收集洗脱液，分别减压浓缩后分别得各玛咖酰胺类单体化合物。利用玛咖酰胺类化合物在弱酸条件下具有良好稳定的物化性质，采用在醇-酸水溶液进行多级逆流萃取法，醇-酸水溶液能够在提取时保护玛咖酰的有效成分，大大提高玛咖植物中有效成分的提取率，大孔吸附树脂均可反复利用，以乙醇-水溶液作为溶剂，经济实用，可以方便高效地获取高纯度玛咖酰胺类单体化合物，各单体化合物纯度达95%以上，工艺简单、操作简便，成本低，适于批量生产。
【IPC分类】C07C231/24, C07C235/76, C07C233/18, C07C235/74
【公开号】CN105111098
【申请号】CN201510568193
【发明人】徐德锋
【申请人】江苏慧博生物科技有限公司
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月8日