切木聚糖酶或内切木聚糖酶）、25%w/ w的纤维素酶(外切纤维素酶或纤维二糖水解酶）、15 % w/w的半纤维素酶、10 % w/w的α淀粉 酶、15 % w/w的β-葡聚糖酶、5 % w/w的α-半乳糖苷酶和5 % w/w的葡糖氧化酶，可选地连同赋 形剂)添加至一个烧瓶中。把另一个烧瓶当作对照。将两个烧瓶放置在维持于70°C的水浴中 直到汁液的温度达到70°C。在约70°C下保持烧瓶约10分钟。在约10分钟之后，将烧瓶冷却至 约28°C(环境温度)此后使用氧化钙(石灰）中和测试和对照烧瓶(在pH7下）。此后塞住烧瓶 并且允许在l〇〇°C下放置45-50分钟。此后冷却烧瓶并且在其中的内容物过滤并检测ICUMSA (糖品统一分析方法国际委员会）。
[0139] g)使用酶共混物组合物'G'：
[0140]将100ml甘蔗汁液/糖汁液等分放入两个锥形烧瓶中。记录初始汁液的pH。将约 30ppm的酶共混物' G '（其包括25 % w/w的木聚糖酶(外切木聚糖酶）、20 %w/w的纤维素酶(纤 维二糖水解酶）、15%w/w的半纤维素酶、10%w/w的α淀粉酶、15%w/w的β-葡聚糖酶、5%w/w 的α-半乳糖苷酶和5%w/w的葡糖氧化酶、0. lw/w的抗坏血酸和4.9%w/w的赋形剂(麦芽糊 精、气相二氧化硅））添加至一个烧瓶中。把另一个烧瓶当作对照。将两个烧瓶放置在维持于 70°C的水浴中直到汁液的温度达到70°C。在约70°C下保持烧瓶约10分钟。在约10分钟之后， 将烧瓶冷却至约28°C(环境温度)此后使用氧化钙(石灰）中和测试和对照烧瓶(在pH7下）。 此后塞住烧瓶并且允许在l〇〇°C下放置45-50分钟。此后冷却烧瓶并且在其中的内容物过滤 并检测ICUMSA(糖品统一分析方法国际委员会）。
[0141] 实施例3:
[0142] 评估ICUMSA的步骤:
[0143 ]对于颜色的分析，使用ICUMSA方法GS 1 /3-7。将甘蔗汁液/糖汁液样品稀释以获得 白利糖度(Brix)5.0。利用稀释的HCl/NaOH调整pH至7.0。通过0.45μπι膜过滤样品并且针对 作为空白的蒸馏水在420nm处测量吸收率。
[0144] 随后按照下式估算颜色：
[0145] ICUMSA颜色={吸收率/(比色杯路径长度X甘蔗糖汁液/糖汁液的浓度）}χ1000。
[0146] 糖的颜色是糖中存在杂质的指示。ICUMSA越高则在糖中的杂质越高并且因此品质 越低。按照糖212-1999的Codex标准，用于种植或磨碎的白糖的ICUMSA的限度是〈150。
[0147] (如上所述的实验室规模实验中利用酶共混物' G '处理的净化的汁液的）ICUMSA结 果：
[0148] 本公开的初步结果示出了在未处理的甘蔗汁液/糖汁液中的颜色是28758ICUMSA 单位并且在亚硫酸化之后降至144661〇]]\^4单位。颜色减少为49.7%。通过添加酶共混物 'G '，在甘蔗汁液/糖汁液中的颜色减少至9561 ICUMSA单位，这代表了当与未处理的汁液相 比较时颜色减少66.7 % (图2)。与亚硫酸化相比，利用酶的颜色另外减少为18 %。这表明本 公开可以用于替代制糖过程中硫而且还促进更好的脱色。
[0149] 表3:利用硫和利用酶共混物'G'处理的甘蔗汁液参数的比较。
[0150] _
[0151] 实实施例4:
[0152] a)使用酶共混物组合物'A'在工厂规模下基于酶的硫替代方法的验证：
[0153] 在三种酶共混物剂量水平：15、30,和45ppm(W/v)下实施大规模试验测试。在剂量 范围从lppm至70ppm，最佳剂量在15ppm至45ppm之间的情况下，将包含各自50% (w/w)浓度 的木聚糖酶（外切木聚糖酶或内切木聚糖酶)和纤维素酶(外切纤维素酶或纤维二糖水解 酶）的酶共混物，即酶共混物组合物A (表2)添加至混合的汁液中接着研磨从而使反应时间 最大化。此后按照典型的净化步骤处理汁液。
[0154] 在具有标准吸入系统的五研磨机串联中实施汁液提取。将来自压碎机和第一研磨 机的汁液(未稀释的甘蔗汁液)合并从而形成初级汁液。当温度是大约40°C时，将酶共混物 添加至汁液收集罐中混合的汁液。随后加热汁液并花费大约2-3分钟到达其中温度是约60 °〇至7〇1的亚硫酸化罐。在主要的操作条件下，混合的汁液需要2至2.5分钟之间以进入亚 硫酸化罐。在亚硫酸化罐中的停留时间是约7-10分钟并且不超过15分钟并且温度范围在60 °〇至7〇1之间并且不超过80°C或不低于50°C。随后将汁液冷却至约28°C(环境温度）。添加 石灰乳(氢氧化钙）以将汁液pH从近似地约5.0-5.5升高至约7.1至7.2。因此酶共混物在基 本上100%的活性水平下具有约12-15分钟的反应时间。没有添加硫。随后将石灰汁液栗入 存储罐随后栗入汁液加热器，在那里温度升高至约100°C-105°C从而失活酶共混物。在约 7.1至7.2并不超过7.5的pH下，可用的反应时间是约14至16分钟。添加商购的阴离子絮凝剂 (BASF)从而加速在净化器中的泥浆和其他微粒和胶体物质的沉降。净化器停留时间是约80 至90分钟。该步骤之后接着可选的步骤:通过膜过滤，使用过滤机压滤或离心作用或它们的 任何组合进行过滤。随后将清澈的上清液（净化的汁液）栗入蒸发器站（evaporator station)从而浓缩，然后开始煮糖。
[0155] 收集混合的汁液、清澈的汁液和最后的糖的样品并分析不同的参数。这些参数与 在亚硫酸化期间所收集的样品相比较。获得产量显著改善连同压滤机泥浆减少而不损害最 终糖的颜色。在汁液净化步骤中完全消除硫，导致另外的节省（因为使用低能量以及使用较 少量的石灰来获得类似于亚硫酸化的结果）。
[0156] b)使用酶共混物组合物'B'在工厂规模下基于酶的硫替代方法的验证：
[0157] 在15、30,和45ppm剂量下将包含木聚糖酶(40%w/w的外切木聚糖酶或内切木聚糖 酶）、纤维素酶(40 % w/w外切纤维素酶或纤维二糖水解酶)和半纤维素酶(20 % w/w)的酶共 混物，即酶共混物组合物B (表2)添加至混合的汁液中接着研磨从而使反应时间最大化。此 后按照典型的净化步骤处理汁液。
[0158] 在具有标准吸入系统的五研磨机串联中实施汁液提取。将来自压碎机和第一研磨 机的汁液(未稀释的甘蔗汁液)合并以形成初级汁液。当温度是大约40°C时，将酶共混物添 加至汁液收集罐中混合的汁液。随后加热汁液并花费大约2-3分钟到达其中的温度是约60 的亚硫酸化罐。在主要的操作条件下，混合的汁液要求在2至2.5分钟之间进入亚硫酸化罐。 在亚硫酸化罐中的停留时间是约7分钟并且温度是约60°C。随后将汁液冷却至约25°C(环境 温度）。添加石灰乳(氢氧化钙)从而将汁液pH值从近似地约5.0-5.5升高至约7.1至7.2。因 而酶共混物在基本上100%的活性水平下具有约12分钟的反应时间。没有添加硫。随后将石 灰汁液栗入存储罐随后栗入汁液加热器，在那里温度升高至约l〇〇°C从而失活酶共混物。在 约7.1至7.2并不超过7.5的pH下，可用的反应时间是约14分钟。添加商购的阴离子絮凝剂 (BASF)从而加速在净化器中的泥浆和其他微粒和胶体物质的沉降。净化器停留时间是约80 分钟。该步骤之后接着以下步骤:通过膜过滤，使用过滤机压滤或离心作用或它们的任何组 合进行过滤。随后将清澈的上清液(净化的汁液)栗入蒸发器站从而浓缩，然后开始煮糖。
[0159] 收集混合的汁液、清澈的汁液和最后的糖的样品并分析不同的参数。这些参数与 在亚硫酸化期间所收集的样品相比较。获得产量的显著改善连同压滤机泥浆减少而不损害 最终糖的颜色。在汁液净化步骤中完全消除硫，导致另外的节省（因为使用低能量以及使用 较少量的石灰以获得类似于亚硫酸化的结果）。
[0160] c)使用酶共混物组合物' C'在工厂规模下基于酶的硫替代方法的验证：
[0161 ] 在约15ppm、30ppm和45ppm剂量下将包含木聚糖酶(40 % w/w的外切木聚糖酶或内 切木聚糖酶）、纤维素酶(40%w/w外切纤维素酶或纤维二糖水解酶）、半纤维素酶（10%w/w) 和β葡聚糖酶(10%w/V)的酶共混物，即酶共混物组合物C(表2)添加至混合的汁液中接着研 磨从而使反应时间最大化。此后按照典型的净化步骤处理汁液。
[0162]在具有标准吸入系统的五研磨机串联中实施汁液提取。将来自压碎机和第一研磨 机的汁液(未稀释的甘蔗汁液)合并以形成初级汁液。当温度是大约40°C时，将酶共混物添 加至汁液收集罐中混合的汁液。随后加热汁液并花费大约2-3分钟到达其中的温度是约70 °C的亚硫酸化罐。在主要的操作条件下，混合的汁液要求在2至2.5分钟之间进入亚硫酸化 罐。在亚硫酸化罐中的停留时间是约10分钟并且温度是约70°C。随后将汁液冷却至约30°C (环境温度）。添加石灰乳（氢氧化钙）从而将汁液pH值从近似地约5.0-5.5升高至约7.1至 7.2。因而酶共混物在基本上100 %的活性水平下具有约15分钟的反应时间。没有添加硫。随 后将石灰汁液栗入存储罐随后栗入汁液加热器，在那里温度升高至约l〇5°C从而失活酶共 混物。在约7.1至7.2并不超过7.5的pH下，可用的反应时间是约16分钟。添加商购的阴离子 絮凝剂(BASF)从而加速在净化器中的泥浆和其他微粒和胶体物质的沉降。净化器停留时间 是约90分钟。该步骤之后接着可选的步骤:通过膜过滤，使用过滤机压滤或离心作用或它们 的任何组合进行过滤。随后将清澈的上清液(净化的汁液)栗入蒸发器站从而浓缩，然后开 始煮糖。
[0163] 收集混合的汁液、清澈的汁液和最后的糖的样品并分析不同的参数。这些参数与 在亚硫酸化期间所收集的样品相比较。获得产量的显著改善连同压滤机泥浆减少而不损害 最终糖的颜色。在汁液净化步骤中完全消除硫，导致另外的节省（因为使用低能量以及使用 较少量的石灰以获得类似于亚硫酸化的结果）。
[0164] d)使用酶共混物组合物' D '在工厂规模下基于酶的硫替代方法的验证：
[0165] 在约15ppm、30ppm和45ppm剂量下将包含木聚糖酶（30%w/w的外切木聚糖酶或内 切木聚糖酶）、纤维素酶（30%w/w外切纤维素酶或纤维二糖水解酶）、半纤维素酶(20%w/ w)、α淀粉酶（10 %w/w)和β葡聚糖酶（10 % w/w)的酶共混物，即酶共混物组合物D(表2)添加 至混合的汁液中接着研磨从而使反应时间最大化。此后按照典型的净化步骤处理汁液。
[0166] 在具有标准吸入系统的五研磨机串联中实施汁液提取。将来自压碎机和第一研磨 机的汁液(未稀释的甘蔗汁液)合并以形成初级汁液。当温度是大约40°C时，将酶共混物添 加至汁液收集罐中的混合汁液。随后加热汁液并花费大约2-3分钟到达其中温度是约60°C 至70°C的亚硫酸化罐。在主要的操作条件下，混合的汁液要求在2至2.5分钟之间进入亚硫 酸化罐。在亚硫酸化罐中的停留时间是约15分钟并且温度是约80°C。随后将汁液冷却至约 28°C (环境温度）。添加石灰乳(氢氧化钙)从而将汁液pH值从近似地约5.0-5.5提高至约7.1 至7.2。因而酶共混物在基本上100%的活性水平下具有约12-15分钟的反应时间。没有添加 硫。随后将石灰汁液栗入存储罐(holding tank)随后栗入汁液加热器，在那里温度升高至 约100°C_105