一种新的睡加内酯类化合物及其制备方法和医药用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于药物技术领域，具体涉及从淡竹叶的干燥茎叶中分离得到的一种睡加 内酯类化合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 植物淡竹叶(Herba Loophatheri)又名碎骨子、山鸡米、迷身草，为禾本科淡竹叶 属多年生草本植物。淡竹叶须根中部膨大为纺锤形肉质块根，黄白色;叶披针形，宽2~3cm， 叶脉平行，有明显小横脉，叶面无毛或有刺毛，边缘有短刚毛；圆锥花序顶生，小穗近于无 柄，排列稍偏穗轴一侧，整个脱落;颖果椭圆形。淡竹叶主要生于山坡林下阴湿处，分布于长 江以南各省区。淡竹叶有清热除烦、利尿的功效，主要用于治疗胸中疾热、咳逆上气、吐血、 热毒风、止消渴、压丹石毒、消痰、治热狂烦闷、中风失音不语、痛头风、止惊悸、瘟疫迷闷、杀 小虫、除热缓脾等症状。药材淡竹叶（Lophatherum gracile Brongn.)为禾本科 (Gramineae)草本植物淡竹叶（Lophatherum gracile Brongn.)的干燥莖叶，有清热泻火、 除烦止渴、利尿通淋之功效。明代李时珍在《本草纲目》称它:甘、寒、无毒、去烦热、利小便、 清心。
[0003] 淡竹叶中含有大量的黄酮类化合物和生物活性多糖及其他有效成分，如酚酸类化 合物、蒽醌类化合物、萜类内酯、特种氨基酸和活性肤、锰、锌、硒等微量元素。淡竹叶中所含 的功能因子主要是黄酮糖苷和香豆素类内酯。其有效成分的含量和生物活性均与银杏叶具 有可比性。
[0004] 现代药理研究表明，淡竹叶中所含的功能因子能清除体内活性氧自由基;诱导生 物体内部的抗氧化酶系的活性;增强机体的抗应激和抗疲劳能力;提高记忆能力，延缓衰老 的进程等。另外，淡竹叶中还含有丰富的叶绿素。研究表明，叶绿素是许多蔬菜抗诱变作用 的重要成分，有抗肿瘤防癌变功效，因叶绿素具有较强的抗氧化功能，这对预防心血管病和 防衰老也有积极作用。
【发明内容】
[0005] 本发明的目的是提供一种从淡竹叶的干燥茎叶中分离得到的一种睡加内酯类化 合物，含其的药物组合物及其制备方法和应用。
[0006] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0007] 具有下述结构式的化合物(I):
[0009]所述的化合物（I)的制备方法，包含以下操作步骤：（a)将淡竹叶的干燥茎叶粉碎， 用70~80 %乙醇热回流提取，合并提取液，浓缩至无醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱 和的正丁醇萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步骤(a)中 乙酸乙酯萃取物用大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇洗脱8个柱 体积，收集70 %洗脱液，减压浓缩得70 %乙醇洗脱浓缩物；（c)步骤(b)中70 %乙醇洗脱浓缩 物用正相硅胶分离，依次用体积比为90:1、60:1、35 :1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗 脱得到5个组分；（d)步骤(c)中组分4用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1、15:1和 5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步骤(d)中组分2用十八烷基硅烷键合的反 相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液， 洗脱液减压浓缩得到纯的化合物(I)。
[0010] 进一步地，步骤(a)中，用75%乙醇热回流提取，合并提取液。
[0011] 进一步地，所述大孔树脂为DlOl型大孔吸附树脂。
[0012] 药物组合物，其中含有治疗有效量的所述的化合物(I)和药学上可接受的载体。
[0013] 所述的化合物(I)在制备神经保护的药物中的应用。
[0014] 所述的药物组合物在制备神经保护的药物中的应用。
[0015] 本发明化合物用作药物时，可以直接使用，或者以药物组合物的形式使用。
[0016] 该药物组合物含有治疗有效量的本发明化合物（I)，其余为药物学上可接受的、对 人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。
[0017] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物组合物以单位体重服用量的形式使用。本发明药物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时，可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时，可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。
【附图说明】
[0018] 图1为化合物(I)结构式；
[0019] 图2为化合物（I)计算E⑶和实验E⑶图。
【具体实施方式】
[0020] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0021 ] 主要材料、试剂来源及仪器类型：
[0022]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷为分析纯，购自上海凌峰化学试剂有限 公司，甲醇，分析纯，购自江苏汉邦化学试剂有限公司。
[0023]实施例1:化合物(I)分离制备及结构确证
[0024] (a)淡竹叶的干燥茎叶（IOkg)粉碎，用75 %乙醇热回流提取(30L X 3次），合并提取 液，浓缩至无醇味（6L)，依次用石油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯（6L X 3次）和水饱和的正丁醇 (6LX3次)萃取，分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(381g)和正丁醇萃取物；（b)步骤 (a)中乙酸乙酯萃取物用DlOl大孔树脂除杂，先用10%乙醇洗脱6个柱体积，再用70%乙醇 洗脱8个柱体积，收集70 %洗脱液，减压浓缩得70%乙醇洗脱浓缩物（125g); (c)步骤(b)中 70 %乙醇洗脱浓缩物用正相硅胶分离，依次用体积比为90:1 (8个柱体积）、60 :1 (8个柱体 积）、35:1 (8个柱体积）、15:1 (10个柱体积)和1:1 (6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得 到5个组分；（d)步骤(c)中组分4(27g)用正相硅胶进一步分离，依次用体积比为20:1(8个柱 体积）、15:1(8个柱体积)和5:1(6个柱体积)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脱得到3个组分；（e)步 骤(d)中组分2(15g)用十八烷基硅烷键合的反相硅胶分离，用体积百分浓度为70 %的甲醇 水溶液等度洗脱，收集8~12个柱体积洗脱液，洗脱液减压浓缩得到纯的化合物（I) (151mg)〇
[0025] 结构确证:无色无定形粉末;HR-ESIMS显示[Μ+Na]+为m/z 591 · 2610,结合核磁特 征可得分子式为C32H4QO9，不饱和度为13。核磁共振氢谱数据δΗ(ppm，DMS〇-d 6，400MHz): H-2 (5.99，dd，J=10.0,2.0)，H-3(6.61，ddd，J=10.0,4.8,2.4)，H-4(2.67，m)，H-4(3.10，m)， H-6(5.47，d，J=6.0)，H-7(2.04，m)，H-7(2.78，m)，H-8(1.95，m)，H-9(2.84，m)，H-ll(1.62， m)，H-ll(2.63，m)，H-12(2.05，m)，H-12(2.76，m)，H-15(5.43，dd，J=9.9,8.0)，H-16(2.78， dd，J=11.2,9.9)，H-16(2.99，dd，J=11.2,8.0)，H-18(4.65，d，J=11.6)，H-18(5.01，d，J =11.6)，H-19(1.20，s)，H-21(5.41，m)，H-21(5.59，m)，H-22(5.42，m)，H-23(2.58，m)，H-23 (3.05，m)，H-27(2.04，s)，H-28(1.87，s)，15-0Ac(2.17，s)，18-0Ac(2.06，s);核磁共振碳谱 数据S c(ppm，DMS〇-d6,125MHz) :204.1 (C，l-C)，128.0(CH，2-C)，145.7(CH，3-C)，33.6(CH2， 4-C)，135.1(C，5-C)，125.8(CH，6-C)，26.2(CH2,7-C)，38.1(CH，8-C)，36.8(CH，9-C)，51.0 (C，10-C)，23.5(CH2，11-C)，26.2(CH2，12-C)，57.8(C，13-C)，79.7(C，14-C)，76.9(CH，15-C)，43.1(CH2，16-C)，61.8(C，17-C)，64.7(CH2，18-C)，19.1(CH 3，19-C)，155.1(C，20-C)， 109.6(CH2,21-C)，71.3(CH，22-C)，33.9(CH2,23-C)，150.7(C，24-C)，121.6(C，25-C)，166.7 (C，26-C)，12.8(CH 3,27-C)，20.4(CH3,28-C)，170.8(C，15-0Ac)，21.5(CH3，15-0Ac)，171.1 (C，18-0Ac)，21.7(CH 3，18-0Ac);碳原子标记参见图UIR光谱表明该化合物含有羟基 (3262cm-双键（1638cm-3和酯基（1741cm-4基团。 1H 谱显示五个甲基信号[δΗ1· 20 (s，H-19)，1.87(s，H-28)，2.04(s，H-27)，2.06(s，18-0Ac)，2.17(s，15-0Ac)]，一个含氧亚 甲基[3财.65((1，了=11.6!^，!1-18)，5.01((1，了=11.6!^，!1-18)]，一个烯属亚甲基[3!15.41 (111，!1-21)，5.59(111，!1-21)]，三个烯烃次甲基质子信号[ 5!15.47((1，了 = 6.0抱，!1-6)，5.99((1(1， 了=10.0,2.0泡，!1-2)，6.61((1(1(1，了=10.0,4.8,2.4抱，!1-3)]，两个含氧次甲基[3!15.42(111， !1-22)和5.44((1(1，1 = 9.9,8.0抱，!1-15)]。130匪1?谱显示32个共振碳信号，五个甲基，八个亚 甲基（一个含氧亚甲基SC64.7,一个烯属亚甲基δ(：109.6)，七个次甲基(三个烯属次甲基δ (：125.8，128.0和145.7;两个含氧次甲基5〇71.3和76.9)，十二个季碳（四个羰基5(：166.7， 170.8,171.1，204.1;四个烯烃季碳δ(：121.6,135.1，150.7,155.1;两个含氧季碳SC61.8， 79.7)。上述核磁数据表明该化合物为五元环结构。核磁数据表明该化合物含有一个包含α， β-不饱和-γ-内酯的九碳侧链单元 RC12.8(CH3,27-C)，20.4(CH3,28-C)，33.9(CH2,23-C)， 71