本发明属于药物有效成分含量的测定技术领域，具体涉及一种测定药品中含硫H2受体拮抗剂类药物含量的方法。
背景技术：
H2受体拮抗剂，又称H2受体阻断药，可用于治疗致病性胃肠道高分泌状况，如卓-艾综合征、良性活动性胃溃疡、短期治疗活动性十二指肠溃疡和胃食管反流的短时间缓解等，常见的这类药物有：西咪替丁、法莫替丁和盐酸雷尼替丁等，这种药物中大多数含硫，可以被氧化剂氧化成亚砜，所以具有还原性。
目前，测定这类药物的方法有很多，如高效液相色谱法、电化学法、毛细管电泳法、质谱法、近红外光谱法和紫外-可见分光光度法等，但是它们都存在各自的局限性，比如一般都比较费时，毛细管电泳法对反应条件要求较高，紫外-可见分光光度法灵敏度较低。
技术实现要素：
本发明解决的技术问题是提供了一种专属性强、操作简单快捷、干扰物质少、灵敏度高且检测结果稳定的测定药品中含硫H2受体拮抗剂类药物含量的方法。
本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种测定药品中含硫H2受体拮抗剂类药物含量的方法，其特征在于具体步骤为：
(1)标准曲线的绘制，分别准确移取多组2mL质量浓度低于10mg/L且质量浓度已知的含硫H2受体拮抗剂类药物标准溶液置于10mL的比色管中，再分别加入2mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的N-溴代丁二酰亚胺溶液、0.5mL摩尔浓度为0.5mol/L的盐酸溶液和1mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的亚甲基蓝溶液，静置5min后分别加入3mL摩尔浓度为1.0×10-2mol/L的β-环糊精，再静置2min后分别置于荧光光谱仪中以652nm为最大激发波长，683nm为最大发射波长，分别测定混合溶液的荧光强度F，依照上述实验方法，测定空白组即不加含硫H2受体拮抗剂类药物溶液的荧光强度F0，计算得到ΔF＝F-F0，并用ΔF对含硫H2受体拮抗剂类药物质量浓度绘制标准曲线；
(2)待测药品中含硫H2受体拮抗剂类药物含量的测定，将含硫H2受体拮抗剂类药物的药品研磨、精密称重并溶解稀释成含硫H2受体拮抗剂类药物的待测溶液，将2mL含硫H2受体拮抗剂类药物的待测溶液置于10mL的比色管中，再加入2mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的N-溴代丁二酰亚胺溶液、0.5mL摩尔浓度为0.5mol/L的盐酸溶液和1mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的亚甲基蓝溶液，静置5min后加入3mL摩尔浓度为1.0×10-2mol/L的β-环糊精，再静置2min后置于荧光光谱仪中以652nm为最大激发波长，683nm为最大发射波长，测定含硫H2受体拮抗剂类药物的待测溶液的荧光强度F1，计算得到ΔF1＝F1-F0，并根据步骤(1)绘制的标准曲线计算得到待测溶液中含硫H2受体拮抗剂类药物的质量浓度，然后根据得到的待测溶液中含硫H2受体拮抗剂类药物的质量浓度、待测溶液的体积及药品的质量计算得到药品中含硫H2受体拮抗剂类药物的含量。
进一步优选，所述含硫H2受体拮抗剂类药物为西咪替丁、法莫替丁或盐酸雷尼替丁。
进一步优选，所述荧光光谱仪测定过程中的温度保持在0℃。
本发明与现有技术相比具有以下有益效果：
1、本发明利用氧化剂N-溴代丁二酰亚胺与含硫H2受体拮抗剂类还原性药物发生氧化还原反应，将含硫H2受体拮抗剂类还原性药物中的硫氧化成亚砜，选择性较强，反应较为灵敏；
2、本发明利用荧光法间接测定含硫H2受体拮抗剂类还原性药物，灵敏度较高，操作简单，不需要复杂的大型仪器；
3、本发明利用β-环糊精作增敏剂和催化剂，通过主客体相互作用与亚甲基蓝形成包合物，可以在更低浓度下间接测定含硫H2受体拮抗剂类还原性药物的含量，大大降低了此类药品的检测限；
4、本发明的测定方法对实际样品进行检测过程，进行50次平行测定，得出相对标准偏差小于2％，表明该方法重现性较好，稳定性较高，灵敏度较高。
附图说明
图1是MB在NBS、NBS/β-CD、NBS/CIM和NBS/CIM/β-CD中的荧光光谱图。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的上述内容做进一步详细说明，但不应该将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明上述内容实现的技术均属于本发明的范围。
通过对比多种H2受体拮抗剂类还原性药物的分子结构式，发现H2受体拮抗剂类还原性药物的结构式中大多数含硫，代表性的此类药物有西咪替丁、法莫替丁和盐酸雷尼替丁。西咪替丁的结构式如式(Ⅰ)所示，法莫替丁的结构式如式(Ⅱ)所示，盐酸雷尼替丁的结构式如式(Ⅲ)所示。
通过研究发现此类药品中大多数含硫，这种形式存在的硫能被氧化剂N-溴代丁二酰亚胺(NBS)中的氨基氧化成亚砜，剩余的N-溴代丁二酰亚胺能氧化亚甲基蓝，β-环糊精对未参加反应的亚甲基蓝具有荧光增强作用，可使其荧光强度增强近2倍，通过测定亚甲基蓝的荧光强度间接测定此类还原性药物的含量。另外，β-环糊精的空腔大小和疏水性使其特别容易包合荧光试剂亚甲基蓝，属于一种超分子自组装，能大大增强亚甲基蓝的荧光强度。利用β-环糊精(β-CD)作为敏化剂，通过主客体相互作用与亚甲基蓝(MB)形成包合物，可以在更低浓度下间接测定含硫H2受体拮抗剂类还原性药物的含量。
本发明测定过程的实验方法为：(1)标准曲线的绘制，分别准确移取多组2mL质量浓度低于10mg/L且质量浓度已知的含硫H2受体拮抗剂类药物标准溶液置于10mL的比色管中，再分别加入2mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的N-溴代丁二酰亚胺溶液、0.5mL摩尔浓度为0.5mol/L的盐酸溶液和1mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的亚甲基蓝溶液，静置5min后分别加入3mL摩尔浓度为1.0×10-2mol/L的β-环糊精，再静置2min后分别置于荧光光谱仪中以652nm为最大激发波长，683nm为最大发射波长，分别测定混合溶液的荧光强度F，依照上述实验方法，测定空白组即不加含硫H2受体拮抗剂类药物溶液的荧光强度F0，计算得到ΔF＝F-F0，并用ΔF对含硫H2受体拮抗剂类药物质量浓度绘制标准曲线；(2)待测药品中含硫H2受体拮抗剂类药物含量的测定，将含硫H2受体拮抗剂类药物的药品研磨、精密称重并溶解稀释成含硫H2受体拮抗剂类药物的待测溶液，将2mL含硫H2受体拮抗剂类药物的待测溶液置于10mL的比色管中，再加入2mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的N-溴代丁二酰亚胺溶液、0.5mL摩尔浓度为0.5mol/L的盐酸溶液和1mL摩尔浓度为1.0×10-4mol/L的亚甲基蓝溶液，静置5min后加入3mL摩尔浓度为1.0×10-2mol/L的β-环糊精，再静置2min后置于荧光光谱仪中以652nm为最大激发波长，683nm为最大发射波长，测定含硫H2受体拮抗剂类药物的待测溶液的荧光强度F1，计算得到ΔF1＝F1-F0，并根据步骤(1)绘制的标准曲线计算得到待测溶液中含硫H2受体拮抗剂类药物的质量浓度，然后根据得到的待测溶液中含硫H2受体拮抗剂类药物的质量浓度、待测溶液的体积及药品的质量计算得到药品中含硫H2受体拮抗剂类药物的含量。
实施例1
西咪替丁的检测
本实施例选择市售的西咪替丁药片(中美天津史克制药有限公司)作为待测样品，对其中的西咪替丁(CIM)含量进行检测。
依照实验所述方法进行实验后，在荧光光谱仪上，分别绘制MB在NBS、NBS/β-CD、NBS/CIM、NBS/CIM/β-CD中的荧光光谱图(如图1所示)。该方法包括三个阶段，第一阶段为过量已知的NBS与CIM之间的氧化还原反应，此阶段中CIM被消耗殆尽；第二阶段，剩余的NBS与过量已知的MB之间的氧化还原反应，此阶段中剩余的NBS被消耗殆尽；第三阶段，β-CD与剩余的MB之间发生包合反应，形成较稳定的包合产物，β-CD的疏水空腔增强剩余MB的荧光强度，在最大激发波长为652nm条件下测定CIM的含量。图中曲线1、曲线3的响应值分别为F和F0。由图1可看出，加入β-CD之后，MB的荧光强度显著增强(由曲线3和曲线4可看出)。在一定范围内，CIM的加入，消耗了部分NBS，减少了NBS与MB之间的反应，体系的荧光强度又得到进一步增强(由曲线2和曲线4可看出)，实验结果证明β-CD可以作为此体系的增敏剂，此方法可以在0.05mg/L的较低浓度下测定CIM的含量，其反应过程的反应机理如下：
取西咪替丁(中美天津史克制药有限公司)5片(每片含0.2g西咪替丁)，研磨均匀后测定其质量，精密称取其质量的十分之一细粉(约相当于西咪替丁100mg)，用小烧杯充分溶解后，震荡摇匀，滤过，然后用二次去离子水定容至100mL的容量瓶中，精密移取容量瓶中的1.0mL，移液于100mL的容量瓶中，稀释至刻度，震荡摇匀后作为样品溶液。依照上述实验方法对实际样品进行测定，同时与紫外-可见分光光度法进行比较，并进行加标回收实验，结果如表1所示。
表1实际样品中西咪替丁含量的测定
实施例2
法莫替丁的检测
本实施例选择市售的法莫替丁药片(中国广东彼迪药业有限公司)作为待测样品，对其中的法莫替丁含量进行检测。
取片剂法莫替丁(中国广东彼迪药业有限公司)10片，每片约含法莫替丁20mg，研磨均匀后称其质量，精密称取其质量的二分之一细粉(约相当于法莫替丁100mg)，用小烧杯充分溶解后转移到100mL的干净容量瓶中，用二次去离子水稀释至容量瓶刻度，震荡均匀，过滤，精密量取滤液0.25mL，置于500mL量瓶中，加二次水稀释至刻度，震荡均匀之后作为样品溶液。利用上述实验方法对法莫替丁进行测量，同时与高效液相色谱法进行比较，并进行加标回收实验，结果见表2所示。
表2实际样品中法莫替丁含量的测定
实施例3
盐酸雷尼替丁的检测
本实施例选择市售的取盐酸雷尼替丁胶囊(汇仁制药有限公司)作为待测样品，对其中的盐酸雷尼替丁含量进行检测。
取盐酸雷尼替丁胶囊(汇仁制药有限公司)4粒，测量其平均装量，内容物混合均匀，精密称取其质量的六分之一(约相当于盐酸雷尼替丁100mg)，用小烧杯充分溶解后转移到100mL的干净容量瓶中，用二次去离子水稀释至容量瓶刻度，震荡均匀，过滤，精密量取滤液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加二次水稀释至刻度，震荡均匀之后作为样品溶液。利用上述实验方法对其进行测量，同时与其它方法进行比较，并进行加标回收实验，结果如表3所示。
表3实际样品中盐酸雷尼替丁含量的测定
以上实施例描述了本发明的基本原理、主要特征及优点，本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明原理的范围下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进均落入本发明保护的范围内。