一种制备耐盐嫁接苗的方法
【专利摘要】一种制备耐盐嫁接苗的方法，属于农林生物【技术领域】。选育耐盐植物可以开发利用低产盐碱地，具有良好的经济效益与生态效益。通过功能基因组比对，克隆耐盐相关基因；构建耐盐基因的植物表达载体；选择农艺性状表现良好、适应性强、对接穗性状有良好主要的物种做砧木种源；通过农杆菌介导或其他手段转化该砧木种子；筛选与鉴定耐盐砧木幼苗；培育非转基因幼苗；耐盐转基因幼苗为砧木靠接、芽接或劈接非转基因接穗；培育嫁接苗，获得耐盐转基因种苗。
【专利说明】一种制备耐盐嫁接苗的方法
【技术领域】
[0001]一种制备耐盐嫁接苗的方法，属于农林生物【技术领域】。可以广泛应用于农林、园艺等方面。
【背景技术】
[0002]我国拥有大量的盐碱地有待开发。选育耐盐碱植物新品种与改良土壤等是利用盐碱地的主要手段。有些生物具有天然的抗盐特性，它们拥有大量的耐盐基因，通过转基因手段可以获得转基因耐盐新品种。但由于公众对转基因食品安全、转基因植物花粉对环境的可能影响等担忧，转基因品种的推广受到了一定的限制。仅利用转基因耐盐材料作为砧木，非转基因材料作为接穗，从接穗上收获农产品等，就可以避免人们对这方面的担忧。
【发明内容】
[0003]通过功能基因组比对，克隆耐盐相关基因；构建耐盐基因的植物表达载体；选择农艺性状表现良好、适应性强、对接穗性状有良好主要的物种做砧木种源；通过农杆菌介导或其他手段转化该砧木种子；筛选与鉴定耐盐砧木幼苗；培育非转基因幼苗；耐盐转基因幼苗为砧木靠接、芽接或劈接非转基因接穗；培育嫁接苗，获得耐盐转基因种苗。
【具体实施方式】
[0004]1.通过功能基因组比对，克隆耐盐基因。
[0005]甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)来自于耐盐植物。该酶催化形成的小分子能改善细胞膜的耐盐能力。依据GenBank提供的核苷酸序列，两端引入各引入一个限制性内切酶识别学列，设计相关引物，从该耐盐植物基因组中PCR基因BADH片段；链接、测序比对正确，获得完整BADH基因。
[0006]2.构建耐盐基因的植物表达载体。
[0007]采用植物表达载体pCAMBIA1301，在其多克隆位点引入:35S启动子-BADH基因-Nos终止子外源DNA片段。T-DNA左右边界内含潮霉素抗性基因的完整表达框。表达载体通过热激法转入LB4404根瘤农杆菌中。
[0008]3.选择农艺性状表现良好、适应性强、对接穗性状有良好主要的物种做砧木种源。
[0009]购买了国内6个西瓜的主栽品种，在天津种植，观察它们的耐盐耐旱、抗病等性状，结果见表1 由此表1科长，2号作为砧木种源较好。
[0010]表1六个西瓜品种的农艺性状比较
[0011]
【权利要求】
1.选择农艺性状优良、适应性强的物种作为砧木种源，通过转基因手段，获得并鉴定转基因耐盐种子，经培育后，其幼苗和成体均可作为耐盐砧木。
2.采用非转基因种子培育的幼苗或 芽体作为接穗，通过靠接、芽接或劈接等方式与转基因耐盐砧木进行嫁接，培育耐盐嫁接苗。
【文档编号】A01G1/06GK103757051SQ201410058433
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2014年2月20日 优先权日:2014年2月20日
【发明者】李兴林 申请人:天津科技大学