专利名称：Cyp2c19基因扩增用引物对、含有其的cyp2c19基因扩增用试剂及其用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于扩增CYP2C19基因的引物对、含有其的CYP2C19基因扩增用试剂及其用途。
背景技术：
细胞色素P450是被归类为超家族的酶类，存在多个亚家族(例如CYP1A、CYPIB, CYP2C、CYP2D、CYP2E、CYP3A等)。已知，其中，作为人类CYP2C亚家族的同工酶的CYP2C19 为与药物代谢相关的酶。而且，已经通过对CYP2C19底物药物(抗癫痫剂)即(S)-美芬妥英(S-M印)代谢极低的酶缺陷者(PMs)证明了编码CYP2C19的基因(CYP2C19基因)的突变。作为与该PMs有关的重要的基因多态性，已知有CYP2C1肿2和CYP2C19*3。前者为外显子5的鸟嘌呤(681位)变为腺嘌呤的突变，成为剪接缺陷(splicing defect)的原因， 遗传信息的翻译起始位点改变。后者为外显子4的鸟嘌呤(636位)成为腺嘌呤的突变，由于变成终止子，翻译在突变位点被中断。对包括日本人在内的亚洲人解析这两种多态性，几乎100%可以判断PMs，另夕卜，即便是白种人中也存在约85%，因此认为是与人种无关的主要的多态性。另外，对于这些CYP2C19基因多态性(CYP2C1肿2和CYP2C19*3)，已知除了上述 PMs之外，对例如催眠镇静剂安定代谢为N-脱甲基体(去甲安定)，奥美拉唑(0ΡΖ)、兰索拉唑、雷贝拉唑等质子泵阻碍剂(PPI)、抗癫痫剂苯妥英(PHT)、三环系抗抑郁剂丙咪嗪、催眠镇静剂海索比妥、疟疾治疗药氯胍、肌肉松弛剂卡立普多等的代谢也有影响。特别是有报告指出；对于作为PPI的一种的0ΡΖ，这些CYP2C19基因多态性(CYP2C1肿2和CYP2C19*3)作为药物应答通过并用0ΡΖ、克拉霉素和阿莫西林三种药物，提高了幽门螺杆菌的除菌率。因此研究CYP2C19基因的两种多态性CYP2C1肿2和CYP2C19*3，对于预测药物所产生的副作用、决定显示更优良效果的药物给药条件是极为重要的。另外，作为在基因水平解析所有疾病的原因、个体间的疾病易感性(易患疾病)、 个体间的药效的不同等的方法，广泛地进行点突变、所谓的单核苷酸多态性(SNP)的检测。 点突变的通常检测方法可以举出；(1)利用PCR(聚合酶链反应)扩增试样的目标DNA的相当于检测对象序列的区域，再对其全基因序列进行解析的直接测序法；(2)利用PCR扩增试样的目标DNA的相当于检测对象序列的区域，通过随上述检测对象序列有无目标突变而切断作用不同的限制酶，将该扩增产物切断，进行电泳从而进行分型的RFLP解析；(3)使用目标突变位于3’末端区域的引物进行PCR，通过有无扩增来判断突变的ASP-PCR法等。但是，这些方法例如必须进行由试样提取的DNA的精制、电泳、限制酶处理等，因此需要功夫和成本。另外，进行PCR后，有必要暂时开启反应容器，因此有上述扩增产物混入到之后的反应体系内、解析精度降低的顾虑。而且，由于自动化困难，因此无法解析大量的样品。另外，上述(3)的ASP-PCR法，还存在特异性低的问题。由该问题出发，近年来作为点突变的检测方法，正在实施对由目标核酸和探针形成的双链核酸的融解温度(Tm)进行解析的方法。这种方法由于通过Tm解析或上述双链的融解曲线的解析来进行，因此称作融解曲线解析。其为如下的方法。即，首先使用与含有检测目标的点突变的检测对象序列互补的探针，形成检测试样的目标单链DNA与上述探针的杂交体(双链DNA)。接着，对该杂交形成体实施加热处理，通过吸光度等的信号的变动来检测随着温度上升的杂交体的解离(融解)。然后，根据该检测结果决定Tm值，从而判断有无点突变。在杂交形成体的同源性越高时Tm值越高、同源性越低时Tm值越低。因此，对于含有点突变的检测对象序列和与其互补的探针形成的杂交形成体，预先求得Tm值(评价标准值)，测定检测试样的目标单链DNA和上述探针的Tm值(测定值)。上述测定值与评价标准值相同时，则可以判断为匹配、即目标DNA存在点突变，测定值低于评价标准值时，则可以判断为错配、即目标DNA上不存在点突变。而且，通过该方法还可以实现自动化。但是，对于利用这种Tm解析的检测方法，存在PCR中必需特异且高效地扩增含有检测目标位点的区域的问题。特别是，细胞色素P450如上所述是被归类为超家族的酶类， 在属于同一亚家族(CYP2C亚家族)的分子种类中，存在同源性非常高的同工酶，编码它们的序列也极为类似。因此在PCR中，有CYP2C19以外的同工酶的编码基因也被扩增的顾虑。另外，其它同工酶的编码基因也被扩增的情况，也成为例如CYP2C19基因的特定多态性 (CYP2C19M或CYP2C19*； )解析(非专利文献1和非专利文献幻中解析结果可靠性降低的原因。而且，象这样，由于解析1个样品上也需要大量的劳力，因此还具有解析大量样品并不实用的问题。非专利文献1 =PMID :8195181 J Biol Chem. 1994 Jun 3 ；269 (22) :15419-22.非专利文献2 =PMID :7969038 Mol Pharmacol. 1994 Oct ；46 (4) :594-8.
发明内容
发明要解决的课题因此，本发明的目的在于提供用于利用基因扩增法特异地扩增CYP2C19基因的目标区域的引物对。用于解决课题的方法为了达成上述目的，本发明的引物对，其特征在于，其为用于利用基因扩增法扩增 CYP2C19基因的引物对，含有下述引物对(1)和O)中的至少1个引物对。引物对(1)包含含有下述(Fl)的寡核苷酸的正向引物和含有下述(Rl)的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(Fl)与序列号1的碱基序列中的、以第1341位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、 朝向5’方向至第25 41个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基(A)为3’末端(Rl)与序列号1的碱基序列中的、以第1442位的鸟嘌呤碱基(G)作为第1碱基、
6朝向3’方向至第19 M个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第 1442位的鸟嘌呤碱基(G)互补的胞嘧啶碱基(C)作为3’末端引物对O)包含含有下述(F》的寡核苷酸的正向引物和含有下述(似)的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(F2)与序列号1的碱基序列中的、以第143位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、 朝向5’方向至第23 37个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基(A)为3’末端(R2)与序列号1的碱基序列中的、以第231位的胸腺嘧啶碱基(T)作为第1碱基、朝向3’方向至第18 30个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第231位的胸腺嘧啶碱基(T)互补的腺嘌呤碱基(A)作为3’末端另外，本发明的基因扩增用试剂，其特征在于，是用于利用基因扩增法扩增 CYP2C19基因的试剂，含有上述本发明的CYP2C19基因扩增用引物对。本发明的扩增产物的制造方法，其特征在于，其为利用基因扩增法制造CYP2C19 基因的扩增产物的方法，包含下述(I)工序。(I)以试样中的核酸作为模板，使用本发明的CYP2C19基因扩增用引物对，在反应液中扩增上述CYP2C19基因的工序本发明的多态性解析方法，其特征在于，其为解析CYP2C19基因的检测对象位点的多态性的方法，包括下述(i) (iv)工序。(i)利用本发明的扩增产物的制造方法，在反应液中扩增CYP2C19基因中含有检测对象位点的区域的工序(ii)准备反应液的工序，所述反应液含有上述(i)工序的扩增产物和能够与上述检测对象位点杂交的探针(iii)改变上述反应液的温度，测定上述扩增产物与上述探针的杂交形成体显示融解状态的信号值的工序(iv)由伴随温度变化的上述信号值的变动，决定上述检测对象位点的多态性的工序发明效果利用本发明的引物对，可以在反应液中特异且高效地扩增CYP2C19基因中含有检测目标的多态性(CYP2C1肿2或CYP2C19*3)发生位点的目标区域。因此，与上述的现有方法不同，可以减少功夫和成本。另外，由于如此特异地扩增CYP2C19基因中含有发生特定的多态性的检测对象位点的区域，再通过例如使用与含有检测对象位点的检测对象序列互补的探针，可以使用上述反应液直接进行Tm解析、将上述多态性分型。另外，由于可以在一个反应液中进行上述目标区域的扩增、多态性的分型，因此还能够实现操作的自动化。而且， 当使用本发明的引物对时，例如即便是含有杂质的试样(例如全血或口腔粘膜等)，也可以省略预处理、更为迅速且简单地进行扩增反应。另外，当使用本发明的引物对时，可以以优于以往的扩增效率进行扩增反应，因此还能够缩短扩增反应。因而，利用本发明的引物对、 含有其的试剂以及使用它们的扩增产物的制造方法，可以迅速且简单地解析CYP2C19基因的多态性，因此在医疗领域中极为有效。
图1为表示本发明实施例1的Tm解析结果的图表。图2为表示本发明实施例2的Tm解析结果的图表。
具体实施例方式〈CYP2C19基因扩增用引物对〉本发明的CYP2C19基因扩增用引物对如上所述，其特征在于，含有上述引物对 ⑴和⑵中的至少1个引物对。通过含有至少任1个引物对，例如可以特异地扩增CYP2C19 基因中的特定目标区域。本发明的CYP2C19基因扩增用引物对例如可以仅含有上述引物对(1)和(2)中的任一种，还可以含有引物对(1)和( 两者。在后叙述，利用引物对(1)能够特异地扩增的目标区域为CYP2C19基因中含有多态性CYP2C1肿2发生位点的区域，利用引物对O)能够特异地扩增的目标区域为CYP2C19基因中含有多态性CYP2C19*3发生位点的区域。如上所述，已知CYP2C19基因的这两种多态性全部为对药物代谢具有影响的多态性，因此重要的是不仅对任一种进行研究，还要对全部两种进行研究。但是，以往方法具有在一个反应体系内无法解析多个序列的问题。认为这是由于如上所述，CYP2C存在多个同工酶，因此在PCR中，CYP2C19以外的同工酶的编码基因也被扩增。因而，为了研究CYP2C19 基因的两种多态性(CYP2C1肿2和CYP2C19*3)的全部两种，有必要在各自的反应体系中分别扩增含有各个多态性发生位点的区域，分别对所得扩增产物进行解析。如此，在以往的方法中，难以仅将CYP2C基因中的CYP2C19基因作为模板、且在CYP2C19基因中仅特异地扩增分别含有上述多态性发生位点的两种目标区域。而且，由于解析1个样品也需要大量劳力， 因此具有解析大量样品并不实用的问题。与此相反，通过本发明的CYP2C19基因扩增用引物对，即便是含有上述引物对(1)和( 全部两种时，也可以在同一反应液中同时且特异地扩增各个目标区域。因此，与上述以往方法不同，可以减少功夫和成本。另外，由于可以在同一反应液中特异地扩增2个目标区域，通过使用例如与各个目标区域的检测对象序列互补的探针，可以使用上述反应液直接进行Tm解析，分别对上述两种多态性进行分型。如此， 由于可以在同一反应液中解析CYP2C19基因的两种多态性，本发明的CYP2C19基因扩增用引物对例如在含有引物对(1)和O)的任一种时当然优选，在含有两种时也优选。使用这种CYP2C19基因引物对，当然可以扩增1个目标区域，当同时扩增2个目标区域时，则可以较以往更为高效地进行CYP2C19基因的多态性解析。予以说明，以下有时将正向引物称作F引物、将反向引物称作R引物。上述引物对(1)如上所述，为包含含有下述(Fl)的寡核苷酸的正向引物和含有下述(Rl)的寡核苷酸的反向引物的一对引物对。(Fl)与序列号1的碱基序列中的、以第1341位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、 朝向5’方向至第25 41个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基(A)为3’末端(Rl)与序列号1的碱基序列中的、以第1442位的鸟嘌呤碱基(G)作为第1碱基、 朝向3’方向至第19 M个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第1442位的鸟嘌呤碱基(G)互补的胞嘧啶碱基(C)作为3’末端序列号1所示的碱基序列是含有人10号染色体的CYP2C19基因的外显子4和外显子5的基因组DNA序列，序列号1中，1 161的区域表示外显子4、1323 1449的区域表示外显子5，二者之间为内含子。上述引物对(1)为用于扩增含有序列号1的第1342位 第1441位的区域的DNA 链及其互补链的引物对。已知该区域内的第1361位的碱基(序列号1的第1361位碱基)存在对CYP2C19的功能具有影响的点突变(1361G、1361A)，该多态性为上述的CYP2C19*2。本发明中，该位点的多态性在为纯合子时用1361G/G、1361A/A表示，在为杂合子时用1361G/A 表示。予以说明，序列号1的第1361位的碱基相当于CYP2C19基因的mRNA中外显子5的第681位碱基，因此CYP2C1肿2多态性例如还可以表示为681G/G、681A/A、681G/A。以下，将该引物对(1)也称作“CYP2C1肿2用引物对”。予以说明，在仅解析CYP2C1肿2的多态性时， 可以仅使用CYP2C1肿2用引物对。本发明中，引物对(1)的Fl引物和Rl弓丨物，只要决定DNA聚合酶的扩增起始点的 3'末端碱基满足上述条件即可。如此，通过固定各引物的3’末端的碱基，可以充分地防止引物对(1)结合在例如类似的其它同工酶的基因(例如CYP2C8、CYP2C9、CYP2C17、CYP2C18
基因等)上。这样，Fl引物和Rl引物只要其3'末端的碱基被固定即可，因此各引物的长度本身并无特别限定，可以适当调整至普通的长度。作为引物长度的一例，例如为13 50mer 的范围、优选为14 45mer、更优选为15 40mer。作为具体例，上述Fl引物优选为如下的寡核苷酸与序列号1的碱基序列中的、以第1341位的腺嘌呤碱基(A)作为第1碱基、朝向5，方向至第25 41个碱基(优选第27 38个碱基、更优选第四 34个碱基)的区域序列相同的至少一个寡核苷酸。另外，上述Rl引物优选是如下的寡核苷酸与序列号1 的碱基序列中的、以第1442位的鸟嘌呤碱基(G)作为第1碱基、朝向3’方向至第19 M 个碱基(优选第20 23个碱基、更优选第20 22个碱基)的区域互补的至少一个寡核苷酸。予以说明，由于Fl引物和Rl引物的3'末端被固定，因此由引物延伸的区域如上所述例如为序列号1的第1342 第1441区域，所得扩增产物的整个长度随所用引物的长度而改变。另外，Rl引物可以是与序列号1所示的碱基序列并非完全互补的寡核苷酸、Fl引物可以是与上述碱基序列的互补链并非完全互补的寡核苷酸。即，各引物中除3’末端的碱基以外的部分中，可以与完全互补的寡核苷酸有1个 5个碱基不同。以下举出Fl引物和Rl引物的具体例子，本发明并非限于此。另外，对这些Fl引物和Rl引物的组合并无任何限定，这些中，特别优选包含含有序列号3或序列号12的寡核苷酸的F1’引物和含有序列号20或序列号22的寡核苷酸的R1’引物的引物对(1’)。 予以说明，下表中的“Tm(°C )”是下表的序列和与其完全互补的序列杂交时的Tm(°C )， 通过MELTCALC软件(http://www.meltcalc. com)，使参数为寡核苷酸浓度0. 2 μ M、钠当量(Naeq.)50mM而计算的数值(以下相同)。上述Tm值例如通过目前已知的MELTCALC 软件(http://www.meltcalc.com)等计算，另外，还可以通过邻接法(Nearest Neighbor Method)决定(以下相同)。表 1
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权利要求
1.一种用于检测CYP2C19基因的多态性的探针，其特征在于，其是含有下述寡核苷酸(1)的探针和含有下述寡核苷酸O)的探针的组合， 寡核苷酸(1)与序列号1中的、以第1373位的胞嘧啶碱基(C)作为第1碱基、朝向5’ 方向至第16 观个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述胞嘧啶碱基作为3’末端；寡核苷酸O)与序列号1中的、以第146位的胞嘧啶碱基(C)作为第1碱基、朝向3’ 方向至第18 25个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述胞嘧啶碱基作为5’末端， 和与序列号1中的、以第150位的胞嘧啶碱基(C)作为第1碱基、朝向3’方向至第14 19个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述胞嘧啶碱基作为5’末端中的至少一种寡核苷酸。
2.根据权利要求1所述的探针，其中，所述寡核苷酸(1)为序列号53 65的任一寡核苷酸。
3.根据权利要求2所述的探针，其中，所述寡核苷酸(1)为序列号61和64的任一寡核苷酸。
4.根据权利要求1所述的探针，其中，所述寡核苷酸( 为序列号66 79的任一寡核苷酸。
5.根据权利要求4所述的探针，其中，所述寡核苷酸( 为序列号69和76的任一寡核苷酸。
6.根据权利要求1所述的探针，其中，所述寡核苷酸(1)为序列号61的寡核苷酸，所述寡核苷酸( 为序列号69的寡核苷酸。
7.根据权利要求1所述的探针，其中，所述寡核苷酸(1)为序列号64的寡核苷酸，所述寡核苷酸( 为序列号76的寡核苷酸。
8.根据权利要求1所述的探针，其中，所述探针为荧光标记探针。
9.根据权利要求8所述的探针，其中，所述探针为末端的胞嘧啶残基被标记的荧光标记探针。
10.一种用于检测CYP2C19基因的多态性的试剂，其特征在于，其包含权利要求1所述的含有所述寡核苷酸(1)的探针和含有所述寡核苷酸( 的探针。
11.根据权利要求10所述的试剂，其进一步含有用于扩增CYP2C19基因的引物对(1) 和(2)，引物对⑴包含含有下述(Fl)的寡核苷酸的正向引物和含有下述(Rl)的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(Fl)与序列号1的碱基序列中的、以第1341位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、朝向 5’方向至第25 41个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基㈧为3’末端(Rl)与序列号1的碱基序列中的、以第1442位的鸟嘌呤碱基(G)作为第1碱基、朝向3’方向至第19 M个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第1442 位的鸟嘌呤碱基(G)互补的胞嘧啶碱基(C)作为3’末端引物对⑵包含含有下述(^)的寡核苷酸的正向引物和含有下述(似)的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(F2)与序列号1的碱基序列中的、以第143位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、朝向 5’方向至第23 37个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基㈧为3’末端(R2)与序列号1的碱基序列中的、以第231位的胸腺嘧啶碱基⑴作为第1碱基、朝向3’方向至第18 30个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第 231位的胸腺嘧啶碱基(T)互补的腺嘌呤碱基(A)作为3’末端。
12.根据权利要求11所述的试剂，其中，所述引物对(1)和( 分别为下述引物对(1’) 和⑵)，引物对(1，)包含含有下述(Fl’ )的寡核苷酸的正向引物和含有下述(Rl’ )的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(F1’)含有序列号3的碱基序列的寡核苷酸和含有序列号12的碱基序列的寡核苷酸中的至少一种寡核苷酸(Rl’ )含有序列号20的碱基序列的寡核苷酸和含有序列号22的碱基序列的寡核苷酸中的至少一种寡核苷酸引物对(2’ )包含含有下述(F2’ )的寡核苷酸的正向引物和含有下述(R2’ )的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(F2’ )含有序列号27的碱基序列的寡核苷酸和含有序列号32的碱基序列的寡核苷酸中的至少一种寡核苷酸(R2’ )含有序列号40的碱基序列的寡核苷酸和含有序列号48的碱基序列的寡核苷酸中的至少一种寡核苷酸。
13.根据权利要求12所述的试剂，其中，所述引物对(1)包含含有序列号12和3的至少一个寡核苷酸的正向引物；和，含有序列号22和20的至少一个寡核苷酸的反向引物，所述引物对( 包含含有序列号32和27的至少一个寡核苷酸的正向引物；和，含有序列号48和40的至少一个寡核苷酸的反向引物。
14.一种多态性解析方法，其特征在于，其为解析CYP2C19基因中的检测对象位点的多态性的方法，包括下述(i) (iv)工序，(i)以试样中的核酸作为模板，在反应液中扩增CYP2C19基因中含有检测对象位点的区域的工序，( )准备反应液的工序，其中所述反应液含有上述(i)工序的扩增产物和、权利要求1 所述的含有所述寡核苷酸(1)的探针和含有所述寡核苷酸O)的探针，(iii)改变所述反应液的温度，测定所述扩增产物与所述各探针的杂交形成体显示融解状态的信号值的工序，(iv)由伴随温度变化的所述信号值的变动，决定所述检测对象位点的多态性的工序。
15.根据权利要求14所述的多态性解析方法，其中，在所述(i)工序中，在扩增反应之前，向所述反应液中添加权利要求1所述的含有所述寡核苷酸(1)的探针和含有所述寡核苷酸⑵的探针。
16.根据权利要求14所述的多态性解析方法，其中，在所述(i)工序中，使用下述引物对(1)和(2)在反应液中进行所述CYP2C19基因的扩增，引物对⑴包含含有下述(Fl)的寡核苷酸的正向引物和含有下述(Rl)的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(Fl)与序列号1的碱基序列中的、以第1341位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、朝向 5’方向至第25 41个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基㈧为3’末端(Rl)与序列号1的碱基序列中的、以第1442位的鸟嘌呤碱基(G)作为第1碱基、朝向 3’方向至第19 M个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第1442 位的鸟嘌呤碱基(G)互补的胞嘧啶碱基(C)作为3’末端引物对⑵包含含有下述(^)的寡核苷酸的正向引物和含有下述(似)的寡核苷酸的反向引物的一个引物对(F2)与序列号1的碱基序列中的、以第143位的腺嘌呤碱基㈧作为第1碱基、朝向 5’方向至第23 37个碱基的区域序列相同的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以上述腺嘌呤碱基㈧为3’末端(R2)与序列号1的碱基序列中的、以第231位的胸腺嘧啶碱基⑴作为第1碱基、朝向3’方向至第18 30个碱基的区域互补的至少一个寡核苷酸，该寡核苷酸以与上述第 231位的胸腺嘧啶碱基(T)互补的腺嘌呤碱基(A)作为3’末端。
17.根据权利要求14所述的多态性解析方法，其中，所述试样为生物试样。
18.根据权利要求17所述的多态性解析方法，其中，所述生物试样为全血。
19.根据权利要求18所述的多态性解析方法，其中，所述反应液中全血试样的添加比例为0.1 0.5体积％。
全文摘要
本发明提供一种引物对，其为用于利用基因扩增法扩增CYP2C19基因中的含有检测目标位点的目标区域的引物对，其能够特异地扩增上述区域。使用分别包含含有序列号12和序列号32的碱基序列的正向引物和含有序列号22和序列号48的碱基序列的反向引物的2对引物对。通过使用该引物对，可以在同一反应液中同时扩增CYP2C19基因的分别含有两种多态性(CYP2C19基因*2、CYP2C19*3)发生位点的2个区域。
文档编号C12N15/11GK102277424SQ20111020000
公开日2011年12月14日 申请日期2007年11月30日 优先权日2006年11月30日
发明者吉永由纪, 间岛智史 申请人:爱科来株式会社