专利名称：间充质干细胞过滤分离器的制作方法
技术领域：
本实用新型属于医疗器具，特别是涉及一种从人体或动物胎盘、羊膜、脐带等组织中消化、分离、收集间充质干细胞的装置及其使用方法。
背景技术：
随着干细胞与组织工程技术研究、应用的深入发展，干细胞的分离制备作为该领域关键技术之一而日益受到重视。迄今用于医疗领域的白细胞、肿瘤细胞的分离装置发展较快，但间充质干细胞的分离设备很少，目前应用最多的间充质干细胞分离装置是细胞筛网，一般选用的是100目 300目的不锈钢筛网，通过摇晃、搅拌和震荡来达到细胞与消化后的组织块分离的目的，比如人胎盘间充质干细胞的分离，就是先用胶原酶消化新鲜人胎盘组织，再用这种不锈钢筛网筛选消化下来的单个细胞或细胞簇。这种间充质干细胞分离方法的缺陷是①费时费力；②分离效率低；③干细胞成活率低；④干细胞收获量少；⑤由于长时间暴露操作，干细胞污染机会大大增加。因而，现有间充质干细胞分离制备技术需要改进。
发明内容本实用新型的目的就是为了克服以上间充质干细胞分离制备方法的缺陷。实现上述目的的本实用新型的技术方案为干细胞分离制备器由打气球1、除菌过滤器(内置0. 22 μ m滤膜)2、可高压灭菌的橡胶塞3、空气压缩室4、圆锥形不锈钢筛网 (100目 300目)5、除菌过滤器(内置0. 22 μ m滤膜)6、干细胞收集瓶7和稳压口 8组成。 打气球通过自身的橡胶导管与除菌过滤器连接，除菌过滤器的另一端穿过并密封固定在开孔的可高压灭菌的橡胶塞上。橡胶塞密封安装在空气压缩室内，空气压缩室的另一端通过螺丝与干细胞收集瓶连接。圆锥形不锈钢筛网置于干细胞收集瓶内，环筛网网口并与之无缝连接的为一圈不锈钢片，其上下各有一圈密封垫。当空气压缩室与干细胞收集瓶拧紧后， 不锈钢筛网可固定在干细胞收集瓶内。干细胞收集瓶由硼硅酸盐玻璃制成，可进行高压蒸气灭菌。不锈钢筛网和干细胞收集瓶可方便地进行拆卸清洗。干细胞收集瓶的侧面有一个稳压口，通过可高压的硅胶管与另一除菌过滤器连接，用于干细胞分离制备器工作时平衡容器内外气压。本实用新型的技术方案具有的优点包括①各个部件都能方便地进行拆卸、洗涤和灭菌；②独特的圆锥形的细胞筛网设计，既减小了其上流体的表面张力，又增大了承载液体的表面积、体积和液体下层压强，更有利于液体流下，显著提高了间充质干细胞的过滤效率；③间充质干细胞分离制备操作的时间大大缩短，减少了污染发生的机会，提高了间充质干细胞成活率；④处理量大，且分离制备的间充质干细胞数量多、质量好；⑤操作方便，价格低廉，便于推广应用。
[0006]附图是本实用新型的剖视图。图中1.打气球；2.除菌过滤器(内置0.22 μ m滤膜)；3.可高压灭菌的橡胶塞； 4.空气压缩室；5.圆锥形不锈钢筛网(100目 300目)；6.除菌过滤器(内置0.22 μ m滤膜)；7.干细胞收集瓶；8.稳压口。
具体实施方式
本实用新型的安装使用。干细胞分离制备器由打气球1、除菌过滤器(内置0. 22 μ m滤膜)2、可高压灭菌的橡胶塞3、空气压缩室4、圆锥形不锈钢筛网(100目 300目)5、除菌过滤器(内置0. 22 μ m 滤膜)6、干细胞收集瓶7和稳压口 8组成。使用前，可将整个装置分为3部分①打气球1 ； ②连接好的除菌过滤器2和橡胶塞3 ；③连接好的除①和②以外的部分，包括空气压缩室4、 圆锥形不锈钢筛网(100目 300目)5、除菌过滤器(内置0. 22 μ m滤膜)6、干细胞收集瓶 7和稳压口 8。将②和③部分进行高压蒸气灭菌(12rC，30min)。在无菌条件下，通过无菌操作，将经过酶解消化后的用于提取间充质干细胞的原代细胞与组织的混合物加入圆锥形不锈钢筛网5内(注意加入的细胞与组织的混合物不能溢出筛网)，然后将②和③两部分进行连接，再将打气球1和除菌过滤器(内置0. 22 μ m滤膜)2进行连接。使用打气球1打气，细胞与组织的混合物便在自身质量和外界压力作用下进行过滤分离。待过滤分离完后， 拧开空气压缩室4和干细胞收集瓶7之间的螺丝，取出圆锥形不锈钢筛网5，将干细胞收集瓶7内的间充质干细胞进行传代培养或利用其他手段进一步纯化。上述技术方案仅体现了本实用新型技术方案的优选技术方案，本技术领域的技术人员对其中某些部分所可能作出的一些变动均体现了本实用新型的原理，属于本实用新型的保护范围之内。
权利要求1.本实用新型公开了一种间充质干细胞过滤分离器，其特征是包括打气球、除菌过滤器、橡胶塞、空气压缩室、不锈钢筛网、干细胞收集瓶和稳压口，打气球通过自身的橡胶导管与一除菌过滤器连接，该除菌过滤器的另一端穿过并密封固定在开孔的橡胶塞上，橡胶塞密封安装在空气压缩室内，空气压缩室的另一端通过螺丝与干细胞收集瓶连接，不锈钢筛网置于干细胞收集瓶内，环筛网网口并与之无缝连接的为一圈不锈钢片，其上下各有一圈密封垫，当空气压缩室与干细胞收集瓶拧紧后，不锈钢筛网可固定在干细胞收集瓶内，不锈钢筛网和干细胞收集瓶可方便地进行拆卸清洗，干细胞收集瓶的侧面有一个稳压口，通过可高压的硅胶管与另一除菌过滤器连接，用于干细胞分离制备器工作时平衡容器内外气压。
2.根据权利要求1所述的间充质干细胞过滤分离器，其特征在于除菌过滤器内置的滤膜为 0. 22 μ mo
3.根据权利要求1所述的间充质干细胞过滤分离器，其特征在于圆锥形不锈钢筛网的规格为100目 300目。
4.根据权利要求1所述的间充质干细胞过滤分离器，其特征在于不锈钢筛网的形状为圆锥形。
5.根据权利要求1所述的间充质干细胞过滤分离器，其特征在于筛网的制作材料为不锈钢。
6.根据权利要求1所述的间充质干细胞过滤分离器，其特征在于干细胞收集瓶的制作材料为硼硅酸盐玻璃。
专利摘要本实用新型属于医疗器具，是一种间充质干细胞过滤分离器，由打气球、除菌过滤器、橡胶塞、空气压缩室、圆锥形不锈钢筛网、干细胞收集瓶和稳压口组成。其主要特征和优点是①各个部件都能方便地进行拆卸、洗涤和灭菌；②独特的圆锥形的细胞筛网设计，减小了其上流体的表面张力，增大了承载液体的表面积、体积和下层压强，有利于液体流下，显著提高了间充质干细胞的过滤效率；③间充质干细胞分离制备操作时间缩短，减少了污染发生的机会，提高了间充质干细胞成活率；④处理量大，且分离制备的间充质干细胞数量多、质量好；⑤操作方便，价格低廉。可用于从人体或动物胎盘、羊膜、脐带等组织中分离制备间充质干细胞供临床治疗或实验室研究。
文档编号C12M1/00GK202107694SQ20112013940
公开日2012年1月11日 申请日期2011年5月5日 优先权日2011年5月5日
发明者孙晋伟, 张艳梅, 王佃亮 申请人:中国人民解放军第二炮兵总医院