一种酶解人参的制备及其在化妆品、食品中的用途
【专利摘要】本发明涉及一种酶解人参的制作工艺，具体地说是采用纤维素酶与β-淀粉酶相结合的方法增加人参中精氨酸单糖苷（AF）、精氨酸双糖苷（AFG）的含量，是一种新的人参加工品，同时还公开了酶解人参在保肝、抗紫外防辐射及抗疲劳的功效，本发明的酶解人参可应用于化妆品及食品中。属于中药加工技术，属保健食品、化妆品应用领域。
【专利说明】一种酶解人参的制备及其在化妆品、食品中的用途
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种酶解人参的制作工艺，具体地说是采用纤维素酶与β-淀粉酶相结合的方法增加人参中精氨酸单糖苷(AF)、精氨酸双糖苷(AFG)的含量，是一种新的人参加工品，同时还公开了酶解人参在保肝、抗紫外防辐射及抗疲劳的功效，本专利发明的酶解人参可应用于化妆品及食品中。属于中药加工技术，属保健食品、化妆品应用领域。
【背景技术】
[0002]精氨酸衍生物AF与AFG是人参中的精氨酸与还原糖(葡萄糖、麦芽糖)反应的产物，是梅拉德反应的中间产物，于上个世纪末首先在红参中发现并鉴定的【1，2】。药理学研究表明【3】氨基酸衍生物AF、AFG具有改善皮肤质地、延缓皮肤衰老，抑制TNF-α产生，抑制环氧合酶2，抗衰老，促进I /IV型胶原蛋白的产生，转谷氨酰胺酶激活的作用，并且能促进透明质酸和NO产生。酶解人参是人参的一种加工品，其中氨基酸衍生物AF、AFG的含量较未酶解人参高。在酶解过程中加入了纤维素酶，纤维素酶能够分解植物的细胞壁使更多的有效物质溶出【4】,酶解人参中人参总阜苷的含量也较未酶解人参多,现代药理表明人参阜苷具有抗氧化、美白、抗衰老的作用。β -淀粉酶(1，4-a-D-glucan maltohydrolase,EC3.2.1.2)是一种外切型糖化酶，作用于淀粉时，能从α-1，4糖苷键的非还原性末端顺次切下一个麦芽糖单位，产生麦芽糖及大分子的界限糊精【5】。淀粉酶分解直链淀粉的主要产物是麦芽糖，分解支链淀粉的产物主要是麦芽糖和大分子的β -界限糊精，这为酶解人参中AFG的增加提供了物质基础。
[0003]目前通过人参酶解增加还原糖，使AF、AFG的含量增加的研究较少，本发明公开了一种制备酶解人参的加工工艺及酶解人参保肝、防紫外抗辐射和抗疲劳等作用，及其在化妆品、保健食品中的应用。
【发明内容】
[0004]本发明公开了一种酶解法制备的人参，酶解人参中AF、AFG及人参总皂苷含量均较未酶解人参高。
[0005]本发明公开了酶解人参在化妆品、保健食品中的应用。
[0006]本发明公开的酶解法制备的人参，是通过以下方法制备的:
1)取一定量人参粉末(80目)，调节料液比1:10~1:20,ph5~5.5，按400:1~500:1加入纤维素酶，酶解2~3h，100°C灭活；
2)调节ρΗ5.2~5.8，按40g~50g: ?μL(50万u/mL)加入β -淀粉酶，酶解24~36h后高温灭活，将酶解后的人参粉末70°C烘干，即得。
[0007]本发明所述的酶解人参在保肝食品中的应用。
[0008]本发明所述的酶解人参在抗紫外辐射化妆品中的应用。
[0009]本发明所述的酶解人参在抗疲劳食品中的应用。
[0010]本发明与人参相比其积极效果在于:采用纤维素酶与β-淀粉酶共同酶解相结合的方法所制备出的酶解人参，不仅增加了人参皂苷的量，而且大幅度增加了精氨酸衍生物AF与AFG的量。具有保肝、抗紫外防辐射及抗疲劳等作用，可用于化妆品及保健食品领域。本发明操作方法简单，可行，适用于大批量的工业化生产。
[0011]以下采用高效液相法对酶解人参进行质量评定。
[0012]实验例I
本发明工艺制备酶解人参中精氨酸衍生物AF、AFG的分析
1.1实验材料和方法
1.1.1实验材料
人参采自珲春地区五年生鲜人参；酶解人参采用人参粉末为原料按本发明工艺制作；AF、AFG标品为本实验室自制，纯度>98% ;异硫氰酸苯酯(PITC)及三乙胺(TEA)，色谱纯，以上均为美国艾杰尔公司提供；色谱级正己烷，天津市光复精细化工研究所；色谱甲醇和色谱乙腈，美国Tedia ;其他常规化学试剂(分析纯)，北京化工厂。
[0013]1.1.2实验方法
1.1.2.1 HPLC-UV 分析条件
Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪 (SPD-20A紫外检测器，LC-20AT泵，CT0-10AS VP柱温箱，LC-solution工作站)日本岛津公司。KQ-250DB型超声波清洗器(昆山超声仪器有限公司)；Venusi1-AA氨基酸分析专用柱(5 μ m,4.6_X 250mm),柱温40°C ;检测波长254nm ；流动相A:醋酸钠缓冲溶液(pH6.5)-乙腈溶液；流动相B:乙腈-水(体积比为4:1)溶液；线性梯度洗脱程序:0.0min, 0%B ；4min, 3%B ；16min, 10%B ;流速 1.0mL/min。
[0014]1.1.2.2对照品溶液的制备与衍生
准确称取AF标准品0.015g水溶解定容至10mL，取ImL置于2mL离心管中，加入三乙胺乙腈溶液100 μ L，异硫氰酸苯酯乙腈溶液50 μ L，混匀，室温放置lh，然后加入正己烷400 μ L,振摇后放置IOmin,取下层溶液,0.2 μ m滤膜过滤,取20 μ L进行色谱分析。
[0015]准确称取AFG标准品0.015g水溶解定容至10mL，取ImL置于2mL离心管中，以下衍生步骤同上，室温放置lh，然后加入正己烷400 μ L，振摇后放置lOmin，取下层溶液，
0.2 μ m滤膜过滤，取20 μ L进行色谱分析。
[0016]1.1.2.3样品溶液的制备与衍生
准确称取人参、酶解人参粉末(40目)1.0g，分别加入20mL甲醇浸泡过夜，过滤，残渣加入20mL水,(250W, IOOkHZ)提取3次,每次30min,过滤,合并滤液,低压旋转浓缩至干,蒸懼水水溶解移至IOmL容量瓶中，定容。分别用移液器取ImL加入2mL离心管内，分别加入三乙胺乙腈溶液100 μ L、异硫氰酸苯酯乙腈溶液100μ L，混匀，室温放置lh，然后加入正己烷400 μ L,振摇均匀放置IOmin,取下层溶液,0.2 μ m滤膜过滤,取20 μ L进样分析(η=3)。
[0017]1.2 HPLC-UV 分析结果
结果从人参及酶解人参中精氨酸衍生物AF及AFG的HPLC-UV(见附图1、附图2)可知，与人参比较，酶解人参中精氨酸衍生物AF与AFG分别增加了 2.3%,84.5%。
[0018]实验例2
本发明制备酶解人参中总皂苷含量的检测
2.1实验材料和方法2.1.1实验材料
人参采自珲春地区五年生鲜人参；酶解人参采用人参粉末为原料按本发明工艺制作;标准品人参皂苷Rbl、Rb2、Re、Rd、Re、Rf、Rg1, Rb3购自中国药品生物制品检定所；色谱乙腈，美国Tedia ；Shimadzu LC-20A高效液相色谱仪(SH)-20A紫外检测器，LC-20AT泵，CTO-1OAS VP柱温箱，LC-solution工作站)，日本岛津公司
2.1.2实验方法
2.1.2.1待测试样品的制备
分别准确称取人参、酶解后的人参粉末(过80目筛)各1.0g，置于具塞锥形瓶中，加入50mL甲醇，超声提取(250W，IOOkHZ)提取2次，每次30min，过滤，合并滤液，减压浓缩，并用甲醇定容至25mL容量瓶中，摇匀，过0.2 μ m滤膜，待HPLC-UV测定。
[0019]2.1.2.2 HPLC分析条件的建立
依利特Hypersil 0DS2 (4.6 mmX250 mm, 5 μ m)色谱柱；流动相:乙腈与水梯度洗脱，0-24min, 18.5-22% 乙腈;24_26min，26-32% 乙腈;30_50min, 32-33.5% 乙腈；50_55min，33.5-38% 乙腈;55-65min，38-40%。流速 lmL/min;检测波长:203nm ;柱温:30°C ;进样量20 μ L0
[0020]2.2实验结果
人参及酶解人参中皂苷含量结果见表1，其常规人参总皂苷分别为16.7mg/g、19.3mg/
go人参及酶解人参HPLC-UV图(见附图3、4)
表1人参及酶解人.参中人参阜苷含量 _
【权利要求】
1.一种利用纤维素酶与淀粉酶相结合的酶解人参制备工艺，包括以下步骤: 1)取一定量人参粉末(80目)，调节料液比1:10~1:20,pH5~5.5，按400:1~500:1加入纤维素酶，酶解2~3h，100°C灭活。 2)调节pH5.2~5.8，按40g~50g: ?μL (50万u/ml) β -淀粉酶，酶解24~36h后高温灭活，将酶解后的人参粉末70°C烘干，即得。
2.权利要求1所述的方法制备的酶解人参具有保肝作用，可应用于保护肝脏的保健食品O
3.权利要求1所述的方法制备的酶解人参具有抗紫外防辐射作用，可用于防晒化妆品O
4.权利要求1所述的的方法制备的酶解人参具有较强的抗疲劳作用，可作为保健食品应用。
【文档编号】A23L1/29GK103893051SQ201210584107
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2012年12月28日 优先权日:2012年12月28日
【发明者】郑毅男, 李永娟, 胡同童 申请人:郑毅男