一种冷榨茶饼制备活性蛋白肽的方法
【专利摘要】一种冷榨茶饼活性肽的制备方法，它利用DHPM、定向酶解冷榨饼粕蛋白，制备蛋白肽溶液，经过滤、浓缩、喷雾干燥得到产品。本发明的积极效果：1、DHPM技术有助于酶切位点的暴露并能加快茶饼蛋白的快速断裂降解，缩短了茶饼蛋白活性肽的制备周期并提高了多肽的得率，增强了其活性。2、定向酶解技术提高酶解效率，直接酶解目标片段多肽大大缩短酶解时间定向酶解产出的多肽，去除了冷榨茶饼的苦味，改善了多肽的口感得到了有效提升，迎合了消费者对“色、香、味”的追求。3、将蛋白酶解和DHPM两道工序合并缩短了加工工序，减少了加工时间、降低了生产成本。
【专利说明】一种冷榨茶饼制备活性蛋白肽的方法
[0001]【技术领域】:
本发明涉及蛋白多肽制备领域，尤其涉及一种动态高压微射流(DHPM)、定向酶解冷榨茶饼制备蛋白多肽的方法。
【背景技术】
[0002]目前，油茶籽在我国的利用基本上局限于榨油，而对榨油后的冷榨茶饼利用不够充分，大都直接被浪费，每年浪费的成百上千吨的冷榨茶饼，只有部分作为燃料、清洗剂等使用，附加值低，造成了严重的资源浪费。冷榨茶饼，由于采用低温压榨技术，蛋白质变性小，活性未被破坏，加工价值较高，经检测茶饼组分，茶饼中含有蛋白质12%-16%，据氨基酸组分分析，茶饼中富含7种是人体必需的氨基酸，仅硫氨基酸含量较少。这7种必需氨基酸的种类和含量在一定意义上可以反映冷榨茶饼蛋白具有极高的营养和经济价值，研究显示蛋白分解后的多肽因具有良好抗氧化、降血压、增强机体免疫力、降血脂和抗菌活性，受到广大消费者所喜爱，多肽活性成就了其在市场上的地位。
[0003]目前，植物性活性肽大部分采用传统酶法制备得到，酶法存在未经任何前处理、生产周期长、反应条件剧烈、易产生苦味肽、酶解效率低等特性。
[0004]
【发明内容】
:
一种冷榨茶饼制备活性蛋白肽的方法，它提高了蛋白的酶解效率，产生出活性和口感更好的多肽，酶解后的冷榨茶饼活性肽去除了原有的苦味。
[0005]本发明是这样来实现的，它采用DHPM联合定向酶解既充分的利用了 DHPM可以激活更多的酶切位点，改变传统酶解的位点，继而产生多肽的分子更小活性更强，酶解后的油茶活性肽去除了原有的苦味，又利用定向酶解技术提高酶解效率，缩短酶解时间，而且将过DHPM和定向酶解同时进行，DHPM辅助酶解大大缩短酶解时间；
本发明通过以下技术方案得以解决:
(1)冷榨茶饼粉碎过目筛；50kg脱脂茶饼按料液重量比1:25-1:40加入蒸馏水、用Imo I/LNaOH 调 pH 值至 10-12、控制温度为 40-60 °C，浸提 2_4h。4000r/min 离心 IOmin,收
集上清液；
(2)在上清液中加入l.0Omol/LHcl,调pH值至4.6使蛋白沉淀。4000r/min离心IOmin,收集蛋白沉淀并喷雾干燥，得到粗冷榨茶饼蛋白；
(3)将干燥后的蛋白配成质量百分比为10%-30%蛋白液然后，加入重量比为2:3的风味蛋白酶和碱性蛋白酶复合酶，DHPM(60-1OOMPa)处理酶解20_40min ；
(4)水解完成后，灭活蛋白酶，将pH调至中性，离心取上清液。
[0006](5)采用膜超滤法分离水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以内的多肽，采用喷雾干燥技术，将多肽溶液制备成粉末，进风温度和出风温度分别为180°C和90°C。
[0007]本发明联合DHPM和定向酶解，提高了多肽的活性和口感，将蛋白酶解和DHPM两道工序合并缩短了加工工序，减少了加工时间、降低了生产成本，具体有益效果为:1、DHPM技术有助于酶切位点的暴露并能加快冷榨茶饼蛋白的快速断裂降解，缩短了冷榨茶饼蛋白活性肽的制备周期并提高了多肽的得率，增强了其活性。2、定向酶解技术提高酶解效率，直接酶解目标片段多肽大大缩短酶解时间定向酶解产出的多肽，去除了冷榨茶饼的苦味，改善了多肽的口感得到了有效提升，迎合了消费者对“色、香、味”的追求。3、将蛋白酶解和DHPM两道工序合并缩短了加工工序，减少了加工时间、降低了生产成本。
【专利附图】
【附图说明】
[0008]图1为本发明的工艺流程图。
[0009]【具体实施方式】:
下面结合附图与【具体实施方式】对本发明作进一步详细描述；
实施例一，如图1所示步骤；
(I)冷榨茶饼粉碎过目筛；50kg脱脂茶饼按料液重量比1:25加入蒸馏水、用I mol/LNaOH调pH值至10、控制温度为40°C，浸提2h，4000r/min离心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入I mol/L Hcl,调pH值至4.6使蛋白沉淀。4000 r/min离心10min,收集蛋白沉淀并喷雾干燥，得到粗茶饼蛋白；
(3)将干燥后的蛋白配成质量百分比为10%蛋白液然后，按重量比2:3加入风味蛋白酶和碱性蛋白酶复合酶，DHPM(60MPa)处理酶解20mi ；
(4)水解完成后，灭活蛋白酶，将pH调至 中性，离心取上清液；
(5)采用膜超滤法分离水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以内的多肽，采用喷雾干燥技术，将多肽溶液制备成粉末。进风温度和出风温度分别为180°C和90°C。
[0010]实施例二，如图1所示步骤；
(1)冷榨茶饼粉碎过目筛；50kg脱脂茶饼按料液重量比1:30加入蒸馏水、用Imol/LNaOH调pH值至11，控制温度为50°C，浸提3h,4000r/min离心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入ImoI/LHcl,调pH值至4.6使蛋白沉淀，4500r/min离心25 min,收集蛋白沉淀并喷雾干燥，得到粗茶饼蛋白；
(3)将干燥后的蛋白配成质量百分比20%蛋白液，然后加入重量比为2:3的风味蛋白酶、碱性蛋白酶复合酶，DHPM(80MPa)处理酶解30min ；
(4)水解完成后，灭活蛋白酶，将pH调至中性，离心取上清液；
(5)采用膜超滤法分离水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以内的多肽，采用喷雾干燥技术，将多肽溶液制备成粉末。进风温度和出风温度分别为180°C和90°C。
[0011]实施例三，如图1所示步骤；
(I)冷榨茶饼粉碎过目筛；50kg脱脂茶饼按料液重量比比1:40加入蒸馏水、用I mol/LNaOH调pH值至12、控制温度为60°C，浸提4h，4000r/min离心IOmin,收集上清液；
(2)在上清液中加入lmol/L Hcl,调pH值至4.6使蛋白沉淀，4000r/min离心IOmin,收集蛋白沉淀并喷雾干燥，得到粗茶饼蛋白；
(3)将干燥后的蛋白配成质量百分比为30%蛋白液然后加入重量比2:3的风味蛋白酶、碱性蛋白酶复合酶，DHPM(IOOMPa)处理酶解40min ；
(4)水解完成后，灭活蛋白酶，将pH调至中性，离心取上清液；
(5)采用膜超滤法分离水解液，收集分子量(MW)在IOkDa以内的多肽，采用喷雾干燥技术，将多肽溶液制备成粉末。进风温度和出风温度分别为180°C和90°C。
【权利要求】
1.一种冷榨茶饼活性蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括以下步骤:(1)冷榨茶饼粉碎过目筛；将50kg脱脂茶饼按料液重量比1:25-1:40加入蒸馏水，用I mol/L 的 NaOH 调 pH 值至 10-12，控制温度为40-601:，浸提 2_4h，4000r/min 离心 IOmin,收集上清液； (2)在上清液中加入l.0Omol/L的盐酸，调pH值至4.6，使蛋白沉淀；然后4000r/min离心lOmin，收集蛋白沉淀并喷雾干燥，得到粗冷榨茶饼蛋白； (3)将干燥后的蛋白配成质量百分比为10%-30%的蛋白液，然后加入重量比为2:3的风味蛋白酶和碱性蛋白酶，DHPM处理酶解20-40min ； (4)水解完成后，灭活蛋白酶，将pH调至中性，离心取上清液； (5)采用膜超滤法分离水解液，收集分子量在IOkDa以内的多肽，采用喷雾干燥技术，将多肽溶液制备成粉末，进风温度和出风温度分别为180°C和90°C。
2.如权利要求1所述的一种冷榨茶饼活性蛋白肽的制备方法，其特征在于，所述的DHPM处理压 强为60-100Mpa。
【文档编号】C12P21/06GK103602712SQ201310512577
【公开日】2014年2月26日 申请日期:2013年10月28日 优先权日:2013年10月28日
【发明者】涂宗财, 马达, 王辉, 刘光宪, 沙小梅, 陈静 申请人:南昌大学