专利名称：增溶水不溶性试剂的配方及其制备方法
背景技术：
发明领域本发明涉及一种新的增溶组合物，其液体和粉末配方，包含药物化合物的其液体和粉末配方，及其制备方法，其中所述增溶组合物包含9-90％重量的至少一种选自单甘油酯的物质，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，和0-90.9％重量的有机溶剂。
相关技术的描述物质的增溶可用于各种领域。在其中它们的催化剂，反应物，中间体等是水不溶性物质的化学工艺中，这些物质的增溶会影响给定反应的产率和方向。许多具有良好生理活性的药物化合物已知不溶于水并因此具有较低的生物可利用率。由于这些药物化合物的增溶可简化给药路径并增加药物作用，增溶技术在水不溶性药物的商业化中是关键的，并因此在开发增溶技术方面进行了世界范围内的深入研究。环孢菌素和帕尼特西(Taxol)例如是水不溶性药物化合物的良好例子，它由于其低溶解度而不能单独给药。因此，已在开发这些药物化合物自身的同时开发处增溶技术。环孢菌素和帕尼特西商业上可作为Cremophor乳液的预浓缩物而得到。这些配方可在分散在水中时自发形成微乳液(U.S.Pat.No.5,438,072)。
一般来说，增溶配方包括使用脂质作为介质的乳液或微脂粒，和使用聚合物作为介质的聚合物纳米颗粒或聚合物胶束(Langer，R.Nature，392，5-10，1998)。其中，使用脂质作为介质的配方的相对有利之处在于，它们的原料是生物相容性的并因此可广泛应用于医疗领域，包括给药体系。尤其是，乳液是油和水在乳化剂作用下的一种多相混合物。由分散在水中的油组分组成的水包油型乳液广泛用于增溶水不溶性药物化合物。微脂粒配方由具有脂质双层的球形脂质囊组成且水不溶性药物化合物被包封在脂质双层内。
U.S.Pat.No.5,531,925公开了Cubosome，使用脂质作为增溶介质的另一配方，首先由瑞典科学家在20世纪90年代早期开发。Cubosome通过将水合脂质立方相分散在水中而制成。Cubosome的内部包含立方相，其中脂质和水组分构成连续的但分离的三维通道，且在脂质头基团和水之间存在界面。因此，Cubosome分别对于仅能够增溶憎水和亲水药物化合物的常规乳液型或微脂粒型配方是有利的，因为它们可增溶两亲药物化合物以及憎水和亲水药物化合物。
Cubosomes可这样形成首先通过向单甘油酯中加入水和乳化剂而形成非常粘稠的液体立方相，并随后将该混合物分散在水中。利用乳化剂，Cubosome的平均颗粒尺寸为几个微米直径大。因为药物化合物的增溶优选需要亚微米尺寸的颗粒，也可通过施加机械力如微流化而得到亚微米尺寸的颗粒。
但利用机械力制备亚微米尺寸的cubosome颗粒可由于伴随机械工艺的高能量和高温而导致该配方的包封物质或构成成分的物理化学不稳定性。配方工艺也可导致构成成分的水解和氧化，由于该配方的包封物质或构成成分可在微流化工艺的过程中与空气剧烈混合。另外，通过微流化工艺制成的分散的cubosomes可在长时间储存之后经历分散体系的不稳定性并随后由于颗粒的聚集而导致相分离。尽管cubosome型配方相对常规类型的配方具有上述的有利性能，但它们也存在缺点，即，它们不能包封热不稳定的药物化合物。另外，该配方的物理和化学稳定性需要极大地改进以提供成功的给药体系。
本发明的简述本发明的发明人为了解决以上问题进行了深入的研究，最终成功地制备出一种包含单甘油酯，乳化剂和有机溶剂的均相液体配方。
该液体配方可容易分散在水中，无需使用剧烈的机械力，形成低于500nm的颗粒的分散体。均相液体配方物理上是稳定的，因为它是单相液体，而且化学上也是稳定的，因为它不含水且在配方工艺过程中无需物理力。本发明的液体配方因此可长时间储存。
因此，本发明的目的是提供一种能够稳定地增溶物质并长时间稳定地储存的新的增溶组合物，及其制造方法。
本发明的另一目的是提供一种用于所述增溶组合物的液体配方和粉末配方，及其制造方法。
本发明的再一目的是提供一种用于将所述增溶组合物应用于其中加入有药物化合物的给药体系的液体配方和粉末配方，及其制造方法。
附图的简要描述
图1给出了包含利福平的液体配方的释放分布(○本发明，●对照组)。
图2包含溴甲酚绿的液体配方的释放分布(○本发明，●对照组)。
发明详述本发明涉及一种包含9-90％重量的至少一种单甘油酯，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，和0-90.9％重量有机溶剂的增溶组合物。以上组合物通过将至少一种单甘油酯化合物和乳化剂溶解在有机溶剂中并随后去除有机溶剂而制成。
单甘油酯化合物优选从饱和或不饱和C10-C22单甘油酯中选择至少一种。用于本发明的单甘油酯化合物是油酸单甘油酯，单甘油棕榈油酸酯，单甘油肉豆蔻脑酸酯，单甘油反油酸酯，和单甘油芥酸酯，和更优选油酸单甘油酯。
乳化剂优选选自磷脂，非离子表面活性剂，阴离子表面活性剂，阳离子表面活性剂，和胆汁酸。
磷脂优选选自磷脂酰基胆碱(PC)和其衍生物，磷脂酰基乙醇胺(PE)和其衍生物，磷脂酰丝氨酸(PS)和其衍生物或聚合物脂质，其中亲水聚合物结合到脂质头基上。
非离子表面活性剂选自泊咯沙姆(poloxamer)(也称作Pluronic聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物)，脱水山梨醇酯(Span)，聚氧乙烯脱水山梨醇(Tween)或聚氧乙烯醚(Brij)。
阴离子表面活性剂选自磷脂酰基丝氨酸(PS)和其衍生物，磷脂酸(PA)和其衍生物或十二烷基硫酸钠(SDS)。
阳离子表面活性剂选自1，2-二油基-3-三甲基铵丙烷(DOTAP)，二甲基二(十八烷基)溴化铵(DDAB)，N-[1-(1，2-二油基氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化铵(DOTMA)，1，2-二油基-3-乙基胆碱磷酸(DOEPC)或3E-[N-[N’，N’-二甲基氨基)乙烷]氨基甲酰基]胆甾醇(DC-Chol)。
胆汁酸选自胆酸，其盐和衍生物；脱氧胆酸，其盐和衍生物；鹅胆酸，其盐和衍生物；熊去氧胆酸，其盐和衍生物；和石胆酸，其盐和衍生物。
有机溶剂优选选自醇，乙二醇，丙二醇，聚乙二醇(PEG)，二甲基亚砜(DMSO)或这些溶剂的混合物。也可使用同时溶解脂质乳化剂和水不溶性化合物的有机溶剂如丙酮，氯仿，苯，甲苯，乙腈，醇或这些溶剂的混合物。
其它的添加剂可在5％重量内加入以上组合物且例子是脂肪酸，脂肪酸酯和脂肪酸醇。
本发明涉及以上增溶组合物的液体配方。
本发明的液体配方包含9-90％重量的至少一种单甘油酯，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，和9-90.9％重量有机溶剂。以上液体配方通过将1-99％重量以上增溶组合物与1-99％重量有机溶剂进行混合而制成。更具体地说，制造以上液体配方的方法包括(a)将至少一种单甘油酯化合物和至少一种乳化剂完全溶解在有机溶剂中并去除有机溶剂；和(b)通过将以上步骤(a)中的组合与有机溶剂进行混合来制备一种均相液体相。
在以上步骤(a)中，有机溶剂优选选自醇，氯仿，苯，甲苯，乙腈或这些溶剂的混合物，和更优选乙醇。
在以上步骤(b)中，有机溶剂优选选自醇，乙二醇，丙二醇，聚乙二醇(PEG)，二甲基亚砜(DMSO)或这些溶剂的混合物。也可使用同时溶解脂质乳化剂和水不溶性化合物的有机溶剂如丙酮，氯仿，苯，甲苯，乙腈，醇或这些溶剂的混合物。
制造以上液体配方的一个例子如下。
首先，将一种或多种单甘油酯和一种或多种乳化剂完全溶解在有机溶剂如乙醇中，并随后通过在约40℃下在氮气气氛下加热或通过施加低大气压而蒸发溶剂。在此，仍可存在于该混合物中的痕量乙醇不会影响最终配方的性能。向该粘稠液体，即，增溶组合物中加入溶剂如乙醇，丙二醇，乙二醇，聚乙二醇，二甲基亚砜(DMSO)，制备出一种均相混合液体配方。
本发明涉及粉末配方的制造，其中将以上液体配方的分散体冻干。
以上粉末配方通过将包含9-90％重量的至少一种单甘油酯化合物，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，和9-90.9％重量的有机溶剂的以上液体配方，溶解在过量水中并随后冻干而制成。更具体地说，制造以上粉末配方的方法包括以下步骤(a)将液体配方分散在过量水中；和通过选择性加入冷冻保护剂而将所述分散液体在步骤(b)中进行冻干。
冷冻保护剂可用于防止在冻干过程中颗粒在以上配方的分散体中的形态变化，且优选将低于30％(w/v)的量加入该液体配方。冷冻保护剂的优选例子包括糖如甘露糖醇或海藻糖，氨基酸如精氨酸，和蛋白质如白蛋白。本发明涉及增溶液体配方在用于水不溶性或两亲化合物的给药体系中的用途。尤其是，本发明涉及增溶液体配方和粉末配方，及其制造方法。
增溶液体配方包含9-90％重量的至少一种单甘油酯化合物，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，0.001-50％重量的药物化合物和9-90.9％％重量的有机溶剂。
单甘油酯化合物，乳化剂和有机溶剂的种类与上述的相同。
以上增溶配方可包封亲水，憎水和两亲化合物作为药物化合物。
可用于本发明的这些药物化合物的例子是抗病毒药，甾类消炎药物(SAID)，非甾类消炎药物(NSAID)，抗生素，杀真菌剂，维生素，荷尔蒙，视黄酸，前列腺素，前列腺环素，抗癌剂药物，抗代谢药物，缩瞳剂，胆碱能药物，肾上腺素能的拮抗药，抗惊厥剂，抗焦虑剂，大多数安定药，抗抑郁剂，麻醉剂，止痛剂，合成代谢类固醇，雌激素，孕酮，葡萄糖胺聚糖，多核苷酸，免疫抑制剂和免疫刺激剂。尤其是，一般难以增溶的药物化合物如环孢菌素A和帕尼特西，免疫抑制剂和抗癌药物可容易在本发明中增溶。
包含上述药物化合物的增溶液体配方可包封5％重量或更低的其它的常规添加剂，包括脂肪酸及其酯衍生物和其醇衍生物。
制造包含上述药物化合物的增溶液体配方的方法包括(a)将至少一种单甘油酯化合物，至少一种药物化合物和至少一种乳化剂溶解在有机溶剂中并去除有机溶剂；和(b)通过将以上步骤(a)中的组合物与有机溶剂进行混合来制备一种均相液体相。
在以上步骤(a)中，优选的有机溶剂是醇，氯仿，苯，甲苯，乙腈或混合物其中溶剂，和更优选乙醇。
在以上步骤(b)中，优选的有机溶剂是醇，乙二醇，丙二醇，聚乙二醇，二甲基亚砜(DMSO)或这些溶剂的混合物。也可使用同时溶解脂质乳化剂和水不溶性化合物的有机溶剂如丙酮，氯仿，苯，甲苯，乙腈，醇或这些溶剂的混合物。
制造以上液体配方的一个例子如下。
首先，将单甘油酯化合物和乳化剂完全溶解在溶剂如乙醇中并随后通过在约40℃下在氮气气氛下加热或通过施加低大气压而蒸发溶剂。在此，仍可存在于该混合物中的痕量乙醇不会影响最终配方的性能。向该粘稠液体，换句话说，增溶组合物中加入相等量的溶剂如乙醇，乙二醇，丙二醇，聚乙二醇，二甲基亚砜(DMSO)，并最终制备出一种均相混合液体配方。
本发明涉及包含药物组合物的水不溶性增溶粉末配方的制造，其中将由包含水不溶性物质的以上增溶液体配方制成的分散体冻干。
以上粉末配方包含。制造以上粉末配方的方法包括以下步骤(a)将包含9-90％重量的至少一种单甘油酯化合物，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，0.001-50％重量的药物化合物和9-90.9％重量有机溶剂的液体配方分散在过量水中；并通过选择性加入冷冻保护剂而将步骤(b)中的所述分散液体进行冻干。
冷冻保护剂可用于防止在冻干过程中颗粒在以上配方的分散体中的形态变化，且优选将低于30％(w/v)的量加入该液体配方。冷冻保护剂的优选例子包括糖如甘露糖醇或海藻糖，氨基酸如精氨酸，和蛋白质如白蛋白。
本发明的以上配方可利用最低的外力帮助例如简单的用手振荡而容易分散在水中。颗粒的尺寸一般是约200-500nm并根据给定的药物化合物或乳化剂的性能而变化。另外，颗粒中的构成成分和药物化合物不会变质，因为在生成颗粒时无需强机械力。
按照本发明的配方可在室温下在密封状态下长时间储存，而不会发生相分离或配方性能的改变。
如果需要长时间储存，粉末配方是理想的，由于它不与有机溶剂或水分接触。
按照本发明的配方可用于给药体系，由于它们具有持续的药物释放分布(图1和2)。如果将这些配方应用于给药体系，优选使用各种给药路径，包括静脉注射，粘膜给药，口腔给药和鼻腔给药，和更优选口服。
本发明在以下实施例的基础上更详细解释，但它们不应理解为限定本实施例1根据乳化剂(1)量的变化制成的液体配方(1)制造增溶组合物将100毫克油酸单甘油酯和分别15，20，25，30，35和40mg的PluronicF-127加入约1mL乙醇并完全溶解。该混合物中的乙醇通过在氮气气氛下搅拌或通过施加低压而蒸发。仍留在以上混合物中的痕量乙醇不影响配方的制造。
(2)制造液体配方在以上步骤(1)中制成的增溶组合物中，分别加入115，120，125，130，135和140mg乙醇使得乙醇在所得混合物中的最终浓度可以是约50％(w/w)。将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。
(3)如此制成的液体配方的性能分析乳液颗粒的尺寸在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后，通过使用Matvern Zetasizer(Malvern InstrumentLimited，England)来测定。平均颗粒尺寸和多分散性通过三次测定给定的配方而得到(Orr，乳液技术百科全书，1，369-404，1985)。该方法在所有以下实施例中用于测定颗粒尺寸和多分散性。
以上液体配方在水中分散良好，且平均颗粒尺寸是约250nm直径。
同时，将过量的蒸馏水而不是有机溶剂加入作为对照组的按照以上步骤(1)相同制成的增溶组合物。结果，形成具有高粘度的凝胶，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。颗粒尺寸的测定是不可能的，由于配方没有分散在水中。相反，该配方形成在水中飘浮的粘稠凝胶。
实施例2根据乳化剂(2)量的变化制成的液体配方液体配方和分散的液体按照实施例1的步骤(1)相同制成并按照实施例1的相同方法测定它们的颗粒尺寸和多分散性，不同的是向在以上步骤(1)中得到的增溶组合物中分别加入115，120，125，130，135和140mg PEG400而不是乙醇，使得PEG400在所得混合物中的最终浓度可以是约50％(w/w)。在这种情况下，以上配方在水中分散良好，且颗粒尺寸是约250nm。
实施例3根据乳化剂(3)量的变化制成的液体配方液体配方和分散的液体按照实施例1的步骤(1)相同制成并按照实施例1的相同方法测定它们的颗粒尺寸和多分散性，不同的是向在以上步骤(1)中得到的增溶组合物中分别加入269，280，292和303mg丙二醇而不是乙醇，使得PEG400在所得混合物中的最终浓度可以是约70％(w/w)。在这种情况下，以上配方在水中分散良好且颗粒尺寸是约350nm。
实施例1-3的结果汇总于下表1。
表1
结果，在没有将有机溶剂加入液体配方时这些配方不溶解于水，而按照本发明的配方可容易地分散成低于400nm的颗粒。
实施例4根据溶剂(1)量的变化而制成的液体配方(I)制造增溶组合物将10毫克油酸单甘油酯和1.5mg Pluronic F-127加入约0.1mL乙醇并完全溶解。该混合物中的乙醇通过在氮气气氛下搅拌或通过施加低压而蒸发。仍留在以上混合物中的痕量乙醇不影响配方的制造。
(2)制造液体配方在以上步骤(1)中制成的11.5毫克增溶组合物中，加入6.25，9.5，14.5，22.0，34.0，57.5，和129.5微升乙醇使得乙醇在所得混合物中的最终浓度可以是约50％(w/w)。将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。将3毫升的蒸馏水加入2微升如此得到的液体配方中并通过振荡而充分混合。测定颗粒的尺寸以及该分散体的多分散性。在将9.5微升以上的乙醇加入液体配方中时以上液体配方在水中分散良好，同时平均颗粒尺寸为约250hm，而如果将6.25和9.5微升乙醇加入液体配方，该液体配方在水中分散不好。
同时，将过量的蒸馏水而不是乙醇加入作为对照组的按照以上步骤(1)相同制成的增溶组合物。结果，形成具有高粘度的凝胶，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。颗粒尺寸的测定是不可能的，由于该配方没有分散在水中。
实施例5根据溶剂(2)量的变化制成的液体配方液体配方和分散的液体按照实施例4的步骤(1)相同制成并按照实施例1的相同方法测定它们的颗粒尺寸和多分散性，不同的是分别向11.5毫克在以上步骤(1)中得到的增溶组合物中分别加入14.5，22.0，34.0，57.5，和129.5微升PEG400而不是乙醇。在这种情况下，以上配方在水中分散良好且颗粒尺寸是约300nm。
实施例6根据溶剂(3)量的变化制成的液体配方液体配方和分散的液体按照实施例4的步骤(1)相同制成并按照实施例1的相同方法测定它们的颗粒尺寸和多分散性，不同的是分别向11.5毫克在以上步骤(1)中得到的增溶组合物中分别加入14.5，22.0，34.0，57.5，和129.5微升丙二醇而不是乙醇。在这种情况下，以上配方在水中分散良好且颗粒尺寸是约300nm。
实施例4-6的结果汇总于下表2、
表2
实施例7根据乳化剂(4)量的变化而制成的液体配方(I)制造增溶组合物将100毫克油酸单甘油酯和分别15，20，25，30，35和40mg的PEG2000PE加入约1mL乙醇并完全溶解。该混合物中的乙醇通过在氮气气氛下搅拌或通过施加低压而蒸发。仍留在以上混合物中的痕量乙醇不影响配方的制造。
(2)液体配方的制造和性能分析在以上步骤(1)的增溶组合物中，加入115，120，125，130，135和140mg乙醇，使得乙醇在所得混合物中的最终浓度可以是约50％(w/w)。将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后测定。
如果将20mg以上的PEG2000PE加入液体配方，以上液体配方在水中分散良好，且平均颗粒尺寸结果为约350nm，而如果加入低于20mg的PEG2000PE，液体配方在水中分散不好。
同时，将过量的蒸馏水分别加入作为对照组的按照实施例7的以上步骤(1)相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例8根据乳化剂(5)量的变化制成的液体配方液体配方和分散的液体按照实施例7的步骤(1)相同制成并按照实施例7的相同方法测定它们的颗粒尺寸和多分散性，不同的是加入PEG400作为有机溶剂以替代乙醇。如果PEG400的加入量低于15mg，该配方不溶解在水中。如果加入超过15mg的PEG400，以上配方分散良好且颗粒尺寸是约400nm。
实施例9根据乳化剂(6)量的变化制成的液体配方液体配方和分散的液体按照实施例7的步骤(1)相同制成并按照实施例7的相同方法测定它们的颗粒尺寸和多分散性，不同的是分别加入269，280，292，303，315和327mg丙二醇作为有机溶剂以替代乙醇。在这种情况下，所有的液体配方都分散良好，与丙二醇的量无关，且所得颗粒尺寸是约350nm。
实施例7-9的结果汇总于下表3。
表3
实施例10根据乳化剂(1)量的变化而制成的液体配方(I)制造增溶组合物将100毫克油酸单甘油酯和20mg Pluronic F-68加入约1mL乙醇中，溶解完全并随后按照实施例1所述通过去除乙醇而得到增溶组合物。在将120mg乙醇于以上步骤(1)加入增溶组合物中之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是287.3nm且多分散性是0.273。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例11根据乳化剂(2)量的变化制成的液体配方将100毫克油酸单甘油酯和20mg Pluronic F-68加入约1mL乙醇，完全溶解并随后按照实施例1所述通过去除乙醇而得到增溶组合物。在将120mg丙二醇于以上步骤(1)加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是265.0nm且多分散性是0.259。
实施例12根据乳化剂(3)量的变化而制成的液体配方增溶组合物按照实施例10制成，不同的是加入15mg二壬酰基磷脂酰基胆碱(DNPC)替代Pluronic F-68，并随后通过将乙醇加入该增溶组合物而得到液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是505.0nm且多分散性是0.422。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例13根据乳化剂(4)量的变化而制成的液体配方增溶组合物按照实施例10制成，只是加入20mg Tween 20替代PluronicF-68，并随后通过将乙醇加入该增溶组合物而得到液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是264.5nm且多分散性是0.476。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例14根据乳化剂(5)量的变化而制成的液体配方增溶组合物按照实施例10制成，只是加入20mg Tween 80替代PluronicF-68，并随后通过将乙醇加入该增溶组合物而得到液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是234.0nm且多分散性是0.305。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例15根据乳化剂(6)量的变化而制成的液体配方增溶组合物按照实施例10制成，只是加入20mg cremophor EL(EL)替代Pluronic F-68，并随后通过将乙醇加入该增溶组合物而得到液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是218.4nm且多分散性是0.330。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例16根据乳化剂(7)量的变化而制成的液体配方增溶组合物按照实施例10制成，只是加入20mg二油基三甲基铵丙烷(DOTAP)替代Pluronic F-68，并随后通过将乙醇加入该增溶组合物而得到液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是397.1nm且多分散性是0.439。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。实施例10-16的结果汇总于下表4。
表4
实施例17通过使用复合乳化剂(1)而制成的液体配方(1)制造增溶组合物将65毫克油酸单甘油酯，35mg蛋磷脂酰胆硷(卵磷脂，PC)和10mgPluronic F-127加入约1mL乙醇并完全溶解。将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。仍留在以上混合物中的痕量乙醇不影响配方的制造。
(2)液体配方的制造和性能分析在将120mg乙醇于以上步骤(1)加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是351.6nm且多分散性是0.505。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。平均颗粒尺寸是约2117.1nm且多分散性是1.000。
实施例18通过使用复合乳化剂(2)而制成的液体配方将100毫克油酸单甘油酯，15mg PEG2000PE和15mg二肉豆寇基磷脂酰胆硷(DMPC)加入约1mL乙醇并按照实施例17制备增溶组合物。在将120mg乙醇加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是486.7nm且多分散性是0.190。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
实施例19通过使用复合乳化剂(3)而制成的液体配方将100毫克油酸单甘油酯，15mg Pluronic F-127和15mg Tween 20加入约1mL乙醇并按照实施例17制备增溶组合物。在将120mg乙醇加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是275.8nm且多分散性是0.223。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。实施例17-19的结果汇总于下表5。
表5
实施例20包含非水化合物的液体配方的制造按照实施例1制造包含10mg油酸单甘油酯，2mg Pluronic F-127，0.2mg油基醇和约0.1mL乙醇的三种相同的增溶组合物。在将13mg乙醇，丙二醇或PEG 400加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，并将测定的平均颗粒尺寸和多分散性在下表6中给出。同时，将过量的蒸馏水加入作为对照组的按照上述相同制成的增溶组合物。所得凝胶具有高粘度且不分散在水中，而且在偏振光显微镜下观察时表现出各向同性结构。
表6
实施例21包含药物化合物(1)的液体配方的制造按照实施例1的步骤(1)，将100mg油酸单甘油酯，2mg Pluronic F-127以及0.5mg溴甲酚绿加入约1.4mL乙醇，以制造增溶组合物。在将130mg乙醇加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是283.1nm且多分散性是0.583。
实施例22包含药物化合物(2)的液体配方的制造按照实施例1的步骤(1)，将100mg油酸单甘油酯，2mg Pluronic F-127以及0.5mg利福平加入约1.4mL乙醇，以制造增溶组合物。在将130mg乙醇加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是321.3nm且多分散性是0.367。
实施例23包含药物化合物(3)的液体配方的制造按照实施例1的步骤(1)，将100mg油酸单甘油酯，2mg Pluronic F-127以及2mg布比卡因加入约1.4mL乙醇，以制造增溶组合物。在将130mg乙醇加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明，平均颗粒尺寸是317.6nm且多分散性是0.563。
实施例24包含药物化合物(4)的液体配方的制造按照实施例1的步骤(1)，将100mg油酸单甘油酯，2mg Pluronic F-127以及1mg帕尼特西加入约1.4mL乙醇，以制造增溶组合物。在将130mg乙醇加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。乳液颗粒的尺寸和多分散性在通过将2微升如此得到的液体配方加入3mL蒸馏水中进行乳液稀释之后而测定。以上配方在水中分散良好，而且结果表明平均颗粒尺寸0.329.实施例21-24的结果汇总于下表7。
表7
如上表7所示，所有的颗粒表现出小于350nm的尺寸，与药物化合物的种类无关，因此本发明的配方被证实成功地增溶水不溶性药物化合物。
实施例25通过冻干制造粉末配方(1)将100微升在实施例10中制成的液体配方加入1mL 5％海藻糖水溶液中，通过手工振荡而分散并冻干得到粉末配方。分别将约3mg的这些粉末配方分散在3mL蒸馏水中，通过实施例1的相同方法测定颗粒尺寸和多分散性。结果表明，平均颗粒尺寸是388.0nm且多分散性是0.386。
实施例26通过冻干制造粉末配方(2)将100微升在实施例11中制成的液体配方加入1mL 5％海藻糖水溶液中，通过手工振荡而分散并冻干得到粉末配方。分别将约3mg的这些粉末配方分散在3mL蒸馏水中，通过实施例1的相同方法测定颗粒尺寸和多分散性。结果表明，平均颗粒尺寸是395.6nm且多分散性是0.666。
实施例25-26的结果汇总于下表8。
表8
如上表8所示，粉末配方的所有颗粒即使再分散在蒸馏水中也表现出小于400nm的尺寸，因此本发明的配方被证实成功地增溶水不溶性药物化合物。
实验实施例1药物化合物的释放实验1按照实施例1，将140毫克油酸单甘油酯，28mg Pluronic F-127和0.7mg利福平加入约1.4mL乙醇中以制备增溶组合物。在将180mg PEG 400加入增溶组合物之后，将该混合物手工振荡或搁置以完全溶解，制备出液体配方。
分散体通过将250微升以上液体配方与1.75mL蒸馏水混合并手工振荡而制成。该混合物随后加入渗析袋(MWCO＝3,500，Spectra/PorR，SpectrumMedical Industries，Inc.，USA)中，两端系有塞，并放在包含10ml磷酸盐缓冲盐水(PBS，pH＝7.4)的50毫升圆锥形管中。将该圆锥形管放在用于释放实验的37℃振荡水浴中。定期收集位于渗析管外的PBS溶液，通过使用荧光光谱(Oex＝370nm，Oem＝480nm)分析由渗析袋释放的药物化合物的浓度。将其中0.7mg利福平溶解在2ml蒸馏水中的水溶液用作对比。结果表明，超过80％的药物在对照组中在5hr内释放，而按照本发明的液体配方通过在120小时内释放而表现出持续的释放分布。
实验实施例2药物化合物的释放实验2使用与实验实施例1相同制成的液体配方进行释放实验，只是使用0.7mg溴甲酚绿替代利福平。释放的药物由PBS溶液收集并随后分析其在617纳米处的吸光度。将其中0.7mg溴甲酚绿溶解在2ml蒸馏水中的水溶液用作对比。结果表明，超过80％的药物在对照组中在5hr内释放，而按照本发明的液体配方表现出持续的释放分布。
以上实验的结果汇总于下表9。
表9
实验实施例3根据储存时间的药物化合物稳定性试验(1)按照实施例1制成的液体配方的稳定性通过测定由本发明液体配方制成的分散体的尺寸和多分散性而测试。将配方在制备之后立即和在室温储存120天之后分散在水中用于测定。结果示于下表10。
表10
如上表10所示，由本发明配方制成的分散体在制备之后立即和在120天时都保持小颗粒尺寸和窄分布。
实验实施例4根据储存期的药物化合物稳定性试验(2)包含利福平或溴甲酚绿的液体配方按照以上实验实施例1和2制成。以上制成的液体配方的颗粒尺寸和多分散性通过将它们在制造之后立即、和在制造之后30天或120天时分散在蒸馏水中而测定。结果示于下表11。
表11表11
如上表11所示，由本发明配方制成的分散体在制备之后立即和在120天时都保持小颗粒尺寸和窄分布。
如上所述，按照本发明的配方可稳定地增溶给定的药物化合物并在分散在水中时生成低于500nm的匀质颗粒。另外，配方可容易分散在水中而无需任何外力辅助，并可防止相分离，水解和氧化之类的问题，因此适用于给药体系。
权利要求
1.一种增溶组合物，包含9-90％重量的至少一种单甘油酯化合物，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，0-50％重量的至少一种水不溶性物质，0-90.9％重量有机溶剂和0-5％重量的其它的添加剂。
2.根据权利要求1的增溶组合物，其中所述单甘油酯化合物是一种具有碳原子10-22的饱和或不饱和单甘油酯化合物。
3.根据权利要求2的增溶组合物，其中所述单甘油酯化合物是油酸单甘油酯、单甘油棕榈油酸酯、单甘油肉豆蔻脑酸酯、单甘油反油酸酯和单甘油芥酸酯。
4.根据权利要求1的增溶组合物，其中所述乳化剂是磷脂，非离子表面活性剂，阴离子表面活性剂，阳离子表面活性剂或胆汁酸。
5.根据权利要求4的增溶组合物，其中所述磷脂选自磷脂酰基胆碱(PC)和其衍生物，磷脂酰基乙醇胺(PE)和其衍生物，磷脂酰丝氨酸(PS)和其衍生物或其中亲水聚合物结合到脂质头基上的聚合物脂质。
6.根据权利要求4的增溶组合物，其中所述非离子表面活性剂选自泊咯沙姆(Pluronic聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物)，脱水山梨醇酯(脱水山梨醇酯；Span)，聚氧乙烯脱水山梨醇(Tween)或聚氧乙烯醚(Brij)。
7.根据权利要求4的增溶组合物，其中所述阴离子表面活性剂选自磷脂酰丝氨酸(PS)和其衍生物，磷脂酸(PA)和其衍生物或十二烷基硫酸钠(SDS)。
8.根据权利要求4的增溶组合物，其中所述阳离子表面活性剂选自1，2-二油基-3-三甲基铵丙烷(DOTAP)，二甲基二(十八烷基)溴化铵(DDAB)，N-[1-(1，2-二油基氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化铵(DOTMA)，1，2-二油基-3-乙基胆碱磷酸(DOEPC)或3E-[N-[N’，N’-二甲基氨基)乙烷]氨基甲酰基]胆甾醇(DC-Chol)。
9.根据权利要求4的增溶组合物，其中胆汁酸选自胆酸，其盐和衍生物；脱氧胆酸，其盐和衍生物；鹅胆酸，其盐和衍生物；熊去氧胆酸，其盐和衍生物；和石胆酸，其盐和衍生物。
10.根据权利要求1的增溶组合物，其中所述有机溶剂选自醇，乙二醇，丙二醇，聚乙二醇，乙腈，氯仿，苯，甲苯，二甲基亚砜，丙酮或这些溶剂的混合物。
11.根据权利要求1的增溶组合物，其中所述水不溶性物质是亲水，憎水或两亲化合物。
12.根据权利要求4的增溶组合物，其中所述胆汁酸选自抗病毒，甾类消炎药物(SAID)，非甾类消炎药物(NSAID)，抗生素，杀真菌剂，维生素，荷尔蒙，视黄酸，前列腺素，前列腺环素，抗癌剂药物，抗代谢药物，缩瞳剂，胆碱能药物，肾上腺素能的拮抗药，抗惊厥剂，抗焦虑剂，大多数安定药，抗抑郁剂，麻醉剂，止痛剂，合成代谢类固醇，雌激素，孕酮，葡萄糖胺聚糖，多核苷酸，免疫抑制剂和免疫刺激剂。
13.根据权利要求12的增溶组合物，其中所述免疫抑制剂是环孢菌素A。
14.根据权利要求12的增溶组合物，其中所述抗癌剂药物是帕尼特西。
15.根据权利要求1的增溶组合物，其中所述其它的添加剂是脂肪酸，脂肪酸酯和脂肪酸醇。
16.一种制备权利要求1的增溶组合物的方法，其中所述方法包括将至少一种单甘油酯化合物，至少一种乳化剂和至少一种水不溶性物质溶解在有机溶剂中并去除该有机溶剂的步骤。
17.一种液体配方，包含1-99％重量的权利要求的增溶组合物和1-99％重量的有机溶剂。
18.根据权利要求17的液体配方，其中所述有机溶剂选自醇，乙二醇，丙二醇，聚乙二醇，乙腈，氯仿，苯，甲苯，二甲基亚砜，丙酮或这些溶剂的混合物。
19.制备权利要求17的液体配方的方法，其中所述方法包括将权利要求1的所述组合物与有机溶剂进行混合以制备匀质液体配方的步骤。
20.一种粉末配方，通过将权利要求17的所述液体配方与0-30％(w/v)的低温保护剂的分散体进行冻干而制成。
21.在权利要求20中，所述低温保护剂选自糖如甘露糖醇和海藻糖，氨基酸如精氨酸，蛋白质如白蛋白，或这些的混合物。
22.一种制造权利要求20的粉末配方的方法，其中所述方法包括以下步骤(a)将权利要求17的所述液体配方分散在过量水中；和(b)通过选择性加入低温保护剂而将步骤(a)中的所述分散液体进行冻干。
23.一种水不溶性增溶液体配方，包含9-90％重量的至少一种单甘油酯化合物，0.01-90％重量的至少一种乳化剂，0.001-50％重量的至少一种药物化合物，9-90％重量的有机溶剂和0-5％重量的其它的添加剂。
24.根据权利要求23的增溶液体配方，其中所述药物化合物是亲水，憎水或两亲化合物。
25.根据权利要求23的增溶液体配方，其中所述药物化合物选自抗病毒，甾类消炎药物(SAID)，非甾类消炎药物(NSAID)，抗生素，杀真菌剂，维生素，荷尔蒙，视黄酸，前列腺素，前列腺环素，抗癌剂药物，抗代谢药物，缩瞳剂，胆碱能药物，肾上腺素能的拮抗药，抗惊厥剂，抗焦虑剂，大多数安定药，抗抑郁剂，麻醉剂，止痛剂，合成代谢类固醇，雌激素，孕酮，葡萄糖胺聚糖，多核苷酸，免疫抑制剂和免疫刺激剂。
26.根据权利要求25的增溶液体配方，其中所述免疫刺激剂是环孢菌素A。
27.根据权利要求25的增溶液体配方，其中所述抗癌剂药物是帕尼特西。
28.一种制造根据权利要求23的增溶液体配方的方法，其中所述方法包括以下步骤(a)将至少一种单甘油酯化合物，至少一种药物化合物长与至少一种乳化剂溶解在有机溶剂并去除该有机溶剂；和(b)通过将以上步骤(a)中的所述组合物与有机溶剂进行混合而制备出一种匀质液体配方。
29.一种增溶粉末配方，通过加入0-10％(w/v)的低温保护剂对权利要求23的所述增溶液体配方的分散体进行冻干而制成。
30.一种制造权利要求29的增溶粉末配方的方法，其中所述方法包括(a)将权利要求23的所述液体配方分散在过量水中；和(b)通过选择性加入低温保护剂而将步骤(a)中的所述分散液体进行冻干。
全文摘要
本发明涉及一种其中将单甘油酯与乳化剂和溶剂进行混合的无水液体组合物，及其制造方法，更具体地说，涉及一种其中将单甘油酯与水不溶性物质、乳化剂和溶剂进行混合的无水液体组合物，及其制造方法。另外，本发明涉及一种冻干的粉末及其制造方法，其中冻干的粉末通过将该混合液体组合物溶解在水中，加入低温保护剂并随后冻干而制成。在分散过程中，本发明的冻干的液体组合物和粉末可通过用水轻微振荡而自发生成200－500纳米的颗粒，无需强机械力。另外，本发明的冻干的液体组合物和粉末是生化稳定的，因为它们既不含可在储存时造成氧化或水解的水，也不经历相分离。考虑到本发明原料是生物相容的，本发明可用于医疗和药物领域如给药。
文档编号A61K47/42GK1422163SQ01807593
公开日2003年6月4日 申请日期2001年3月13日 优先权日2000年3月13日
发明者郑曙荣, 权翊赞, 郑蕙婵 申请人:韩国科学技术研究院