一氧化氮合酶抑制剂及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：一氧化氮合酶抑制剂及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的异硫脲类化合物、它们的制备方法、含有这些化合物的药用组合物以及它们的医疗用途，特别是作为一氧化氮合酶抑制剂的用途。
近年来在研究NOS抑制剂方面取得了不少进展，其中，含有异硫脲结构的化合物具有较好的NOS抑制活性(Southan GJ，Szabo C.Biochem Pharmacol.1996，51383-394)。1997年，Shearer BG等(Shearer BG，et al.J Med Chem.1997，40(12)1901-1905)报道S-乙基-N-取代苯基异硫脲具有较强的NOS抑制作用，且对nNOS具有选择性，但它们在体内消除迅速，影响了其应用价值。
本发明设计并合成的一系列含有(取代)苯并咪(噻)唑-2-巯基的异硫脲类化合物，通式如下 其中R1可以表示氢、氯、溴、甲基或甲氧基；R2表示氢、C1-4的烷基或苯基；R3表示C1-4的烷基、烯丙基或(取代)苄基；X表示氮或硫。
优选的化合物为R1表示氢、氯或甲氧基；R2表示氢、甲基、丙基或苯基；R3表示甲基、乙基、正丁基、烯丙基、苄基或取代苄基(取代基可以为2-Cl、2-Br、2-CN、2-NO2、4-Cl、4-Br、4-CN、4-NO2、3，4-亚甲二氧基)；X表示氮或硫。
更为优选的化合物为R1表示氢或甲氧基，R2表示甲基或正丙基，R3表示甲基、乙基、正丁基、苄基或4-氰基苄基。
根据本发明，药学上可接受的盐包括与下列酸形成的酸加成盐盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、苯磺酸上述通式的化合物及其药学上可接受的盐可以是S-甲基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-1)S-乙基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-2)S-正丁基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-3)S-烯丙基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-4)S-苄基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-5)S-对氯苄基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-6)S-对氰基苄基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-7)S-对硝基苄基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-8)S-(3，4-二甲氧基苄基)-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-9)S-(3，4-亚甲二氧基苄基)-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-10)S-甲基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-11)S-乙基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-12)S-正丁基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-13)S-烯丙基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-14)S-苄基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-15)S-对氯苄基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-16)S-对氰基苄基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-17)S-对硝基苄基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-18)S-(3，4-亚甲二氧基苄基)-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-19)S-甲基-1-甲基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-20)S-乙基-1-甲基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-21)S-正丁基-1-甲基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-22)S-甲基-1-正丙基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-23)S-乙基-1-正丙基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-24)S-正丁基-1-正丙基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-25)S-甲基-1-苯基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-26)S-乙基-1-苯基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-27)S-正丁基-1-苯基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-28)S-烯丙基-1-苯基-4-[3-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-29)S-甲基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-30)S-乙基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-31)S-正丁基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-32)S-烯丙基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-33)S-苄基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-34)S-对氰基苄基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-35)S-对硝基苄基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-36)S-甲基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-37)S-乙基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-38)S-正丁基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-39)S-烯丙基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-40)S-甲基-1-甲基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-41)S-正丁基-1-甲基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-42)S-苄基-1-甲基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-43)S-乙基-1-正丙基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-44)S-正丁基-1-正丙基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-45)S-乙基-1-苯基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-46)S-正丁基-1-苯基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-47)S-甲基-1-甲基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-48)S-正丁基-1-甲基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-49)S-对硝基苄基-1-甲基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-50)S-乙基-1-正丙基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-51)S-正丁基-1-正丙基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-52)通式(I)化合物的制备方法如下当R2为氢，R3为C1-4的烷基、烯丙基、苄基或取代苄基时，制备方法如下 当R2为C1-4的烷基或苯基，R3为C1-4烷基、烯丙基、苄基或取代苄基时，制备方法如下 其中X表示氮或硫，溶剂A是非质子极性溶剂，溶剂B是丙酮或乙腈，溶剂C是丙酮、C1-4醇、乙腈或N，N-二甲基甲酰胺，Y代表卤素。
上述制备方法中非质子极性溶剂优选乙腈、硝基甲烷、硝基乙烷、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜。
药理测试结果表明，通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐对体外巨噬细胞中iNOS均有不同程度的抑制作用，因此，式(I)化合物及其药学上可接受的盐可以用于治疗与iNOS抑制剂有关的临床病症。这些病症包括败血性休克、肠炎、风湿性关节炎、糖尿病、大脑缺血损伤和早老性痴呆等。
部分化合物的药理活性测试方法如下取昆明种雌性小鼠10只，腹腔注射2％滑石粉混悬液0.4ml/只，48h后，腹腔注射BCG(卡介苗，bacillus calmette-guerin)0.4ml和rTNF 10万单位，5d后，将小鼠颈椎脱臼处死，立即腹腔注射5ml 37℃预热的HBSS溶液，轻揉腹部3～5min。用75％酒精消毒腹部皮肤，剪开一个小口，吸出腹腔内液体，再用1ml HBSS溶液(Hank’s balanced salt solution withoutCa2+，Mg2+)冲洗腹腔一次。将吸出的液体和冲洗液合并，转移至硅化的离心管中，10000rpm离心5min，弃上清液，沉淀之细胞用25ml预热的DMEM培养基重悬，转移至24孔细胞培养板上(1ml/孔)，37℃，5％CO2培养4h后，显微镜下可见贴壁的巨噬细胞。仔细吸去培养孔中的DMEM培养基，轻轻沿孔壁加入37℃预热的HBSS溶液1ml/孔，然后加入每孔0.1mol/L L-arginine，LPS 20ug，rTNF100单位，给药孔每孔加入10ul药液，对照孔加入10ul溶剂。37℃，5％CO2培养20h，每孔取培养上清液500ul，-70℃保存。
取上述保存样品，室温下融化，按试剂盒方法测定NO含量。样品中NO的含量，代表巨噬细胞中iNOS的活性。由给药孔的NO含量和对照孔的NO含量，按下式计算iNOS活性抑制的百分率 由3个浓度药物的iNOS活性抑制率，用Logit法计算出每个药物的IC50值。
以上药理活性测试方法参照文献报道的方法(Zhu D.Y，Li R.，Liu G.Q.etal..Life Sci，1999，65(14)PL221-231)。部分化合物药理测试结果如下CompoundIC50(mol/L) Compound IC50(mol/L)氨基胍 2.3×10-6I-21 8.9×10-5I-1 9.1×10-6I-22 ＞10-5I-2 2.2×10-5I-23 1.2×10-6I-3 6.7×10-6I-24 7.9×10-6I-4 8.5×10-6I-25 3.3×10-6I-5 1.3×10-5I-26 3.6×10-5I-6 9.3×10-6I-27 8.1×10-5I-7 2.2×10-5I-28 7.5×10-6I-8 8.7×10-6I-29 2.1×10-5
I-9 1.8×10-5I-30 3.0×10-7I-108.7×10-6I-31 3.2×10-7I-114.0×10-5I-32 5.0×10-7*I-127.7×10-6I-33 6.2×10-6I-137.7×10-5I-34 4.4×10-7*I-143.9×10-5I-35 1.6×10-7*I-158.2×10-5I-36 6.5×10-6I-163.4×10-5I-37 6.5×10-5I-179.1×10-5I-38 1.9×10-6*I-183.4×10-5I-39 8.7×10-8*I-192.1×10-5I-40 1.1×10-6*I-206.6×10-6氨基胍阳性对照药，iNOS选择性抑制剂，目前处于III期临床研究阶段，用于治疗糖尿病。
一种治疗与NO合酶抑制剂有关的疾病的药物组合物，其中含有治疗有效量的通式(I)化合物和药学上可接受的载体。所述药物组合物可以是片剂、胶囊、注射剂等制剂学上常规的制剂形式。
例1S-甲基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-1)的制备2-(4-硝基苯硫基)苯并咪唑(III-1)将2-巯基苯并咪唑9.5g(63.3mmol)，无水乙腈60ml，粉末氢氧化钠2.53g(63.3mmol)，对硝基氯苯9.98g(63.3mmol)和PEG-400 1.0g加入耐压瓶中，电磁搅拌下置于120℃油浴中反应28h，冷却，抽滤，冷乙腈洗涤二次，再水洗至pH7，得黄色固体(III-1)15.1g(87.9％)，mp 185～186℃。1HNMR(90MHz，CDCl3+DMSO-d6)，δ(ppm)7.17～7.32(2H，m，ArH)，7.47～7.62(4H，m，ArH)，8.04～8.20(2H，m，ArH)2-(4-氨基苯硫基)苯并咪唑(IV-1)将还原铁粉10g(179mmol)和95％乙醇200ml加入三颈瓶中，机械搅拌下滴加10％HCl 8.4ml，10min后，加入化合物(III-1)11.3g(41.7mmol)，升温至55℃，反应4h，用40％NaOH调pH8.5～9.5，加活性炭脱色10min，趁热抽滤，铁泥用95％乙醇洗涤二次，滤液减压浓缩，得淡黄色晶体(IV-1)9.3g(92.5％)，mp 234～237℃。1HNMR(90MHz，CD3COCD3)，δ(ppm)5.11(3H，br s，NH)，6.68～6.78(2H，m，ArH)，7.04～7.14(2H，m，ArH)，7.32～7.41(4H，m，ArH)1-苯甲酰基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(V-1)将硫氰酸铵2.36g(31.0mmol)和无水丙酮20ml加入三颈瓶中，机械搅拌下于5min内滴入苯甲酰氯3.54g(25.2mmol)，回流20min后，缓慢滴加化合物(IV-1)5.0g(20.7mmol)与无水丙酮50ml组成的悬浮液，继续回流12h，冷却，抽滤，依次用丙酮和水洗涤，得黄色固体(V-1)8.2g(97.8％)，mp 216～218℃。1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)5.64(1H，s，NH)，6.91～8.16(13H，m，ArH)，11.5(1H，s，-C6H5-NH-CS-)，12.9(1H，s，-NH-CO-C6H5)N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VI-1)将化合物(V-1)8.1g(200mmol)，THF 90ml，2mol/L NaOH 22ml混合，搅拌回流5.5h，减压蒸除THF，加水22ml，反应液趁热经活性炭滤过，滤液用1mol/LHCl调pH8.5，抽滤，水洗得淡黄色固体(VI-1)4.6g(76.5％)，mp 196～198℃。IR(cm-1)3340，3265，3169(NH)，3075，3052(ArH)，1619，1587，1518，1495(C＝C，C＝N)，1404(咪唑)，813(ArH，对二取代)，744(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)7.08～7.23(2H，m，ArH)，7.14～7.53(8H，m，ArH+NH2)，9.83(2H，br s，NH)MS(LC/MSD(+)70V，m/z)323.0([M+Na]+)，301.1([M+H]+，base peak)将化合物(VI-1)0.6g(2.0mmol)和无水丙酮8ml混合，搅拌下滴加碘甲烷0.375ml(0.855g，6.0mmol)，回流6h，冷却，抽滤，丙酮洗涤得淡黄色晶体(I-1)0.8g(90.5％)，mp 186～187℃。IR(cm-1)3300(NH)，3126～2710(NH3+)，3098(ArH)，2953，2835(CH)，1704(C＝N)，1629，1583，1552(C＝C，C＝N)，1425，1403(咪唑)，748(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)2.12(3H，s，-S-CH3)，7.15～7.68(8H，m，ArH)，7.68～9.60(4H，br，+NH3+NH)MS(SCI 70eV，m/z)315(M+1)，298(M-16)，284，142(base peak)Anal(C15H14N4S2·HI；C％，H％，N％)Req 40.73，3.42，12.67 Found 40.56，3.50，12.44例2S-乙基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-2)的制备以化合物(VI-1)和碘乙烷(摩尔比1∶3)为原料，类似化合物(I-1)的方法，得淡黄色晶体(I-2，54.8％)，mp148～150℃。IR(cm-1)3443，3407(NH)，3135～2835(+NH3)，3082(ArH)，2977，2930(CH)，1628，1546，1524(C＝C，C＝N)，1426，1403(咪唑)，1269(-SCH2-)，749(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)1.38(3H，t，J＝7.33Hz，-S-CH2-CH3)，3.30(2H，q，J＝7.08Hz，-S-CH2-)，7.16～7.58(8H，m，ArH)，7.58～9.80(4H，br，+NH3+NH)MS(SCI 70eV，m/z)329(M+1)，312(M-16)，284，254，242(base peak)Anal(C16H16N4S2.HI；C％，H％，N％)Req 42.11，3.75，12.28 Found 41.89，3.84，12.06例3S-正丁基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-3)的制备以化合物(VI-1)和碘代正丁烷(摩尔比1∶3)为原料，类似化合物(I-1)的方法，得淡黄色晶体(I-3，62％)，mp 176～177℃IR(cm-1)3149～2734(+NH3)，3077(ArH)，2958，2928(CH)，1627，1587，1544，1516(C＝C，C＝N)，1422，1407(咪唑)，1269(-SCH2-)，737(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)0.95(3H，t，J＝6.48Hz，-S-(CH2)3-CH3)，1.33～1.77(4H，m，-S-CH2-CH2CH2-CH3)，3.26(2H，t，J＝7.02Hz，-S-CH2-)，7.14～7.67(8H，m，ArH)，7.7～10.0(4H，br，+NH3+NH)MS(SCI 70eV m/z)357(M+1)，284，242，184，57(base peak)Anal(C18H20N4S2·HI；C％，H％，N％)Req 44.63，4.37，11.57 Found 44.36，4.55，11.29例4S-烯丙基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-4)的制备以化合物(VI-1)和烯丙基溴(摩尔比1∶1.2)为原料，类似化合物(I-1)的方法，得淡黄色晶体(I-4，35.6％)，mp 184～186℃IR(cm-1)3444(NH)，3140～2710(+NH3)，2970(CH)，1635，1582，1554(C＝C，C＝N)，1423，1403(咪唑)，1269(-SCH2-)，745(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.07(2H，d，J＝6.75Hz，-S-CH2-)，5.23～5.57(2H，m，＝CH2)，5.7～6.1(1H，m，-S-CH2-CH＝CH2)，7.25～7.80(8H，m，ArH)，8.78(4H，br s，+NH3+NH)MS(SCI 70eV，m/z)341(M+1)，324(M-16)，284(base peak)，242Anal(C17H16N4S2·HBr；C％，H％，N％)Req 48.46，4.07，13.30 Found 48.13，4.09，13.17例5S-对氰基苄基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-7)的制备以化合物(VI-1)和对氰基溴苄(摩尔比1∶1.2)为原料，类似化合物(I-1)的方法，得粗品，用甲醇重结晶得白色晶体(I-7，60.5％)，mp 182～184℃IR(cm-1)3461，3289(NH)，3110～2770(+NH3)，3062(ArH)，2955(CH)，2237(CN)，1636，1583，1553，1500(C＝C，C＝N)，1440，1401(咪唑)，1267(-SCH2-)，738(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.76(2H，s，-S-CH2-)，7.15～7.92(12H，m，ArH)，7.92～10.8(4H，br，+NH3+NH)MS(LC/MSD(+)70V，m/z)416.1([M+H]+，base peak)Anal(C22H17N5S2·HBr；C％，H％，N％)Req 53.23，3.65，14.11 Found 52.96，3.63，13.78例6S-对硝基苄基-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-8)的制备以化合物(VI-1)和对硝基溴苄(摩尔比1∶1.2)为原料，类似化合物(I-1)的方法，得淡黄色晶体(I-8，87.2％)，mp 186～188℃IR(cm-1)3380，3276(NH)，3 168～2700(+NH3)，3072(ArH)，2967，2851(CH)，1624，1600，1577(C＝C，C＝N)，1520，1342(NO2)，1413(咪唑)，1267(-SCH2-)，855(ArH，对二取代)，746(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.78(2H，s，-S-CH2-)，5.69(4H，br，+NH3+NH)，7.14～7.30(4H，m，ArH)，7.48～7.78(6H，m，ArH)，8.07～8.26(2H，m，ArH)MS(LC/MSD(+)70V，m/z)436.1([M+H]+，base peak)Anal(C21H18BrN5O2S2；C％，H％，N％)Req 48.84，3.51，13.56 Found 48.68，3.49，13.16例7S-(3，4-亚甲二氧基苄基)-N-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-10)的制备以化合物(VI-1)和3，4-亚甲二氧基氯苄(摩尔比1∶1.2)为原料，类似化合物(I-1)的方法，得粗品，用无水甲醇精制得白色晶体(I-10，53.1％)，mp192～193℃IR(cm-1)3430(NH)，3140～2765(+NH3)，3070(ArH)，2949，2893(CH)，1651，1590，1559，1502，1488(C＝C，C＝N)，1417，1403(咪唑)，1269(-SCH2-)，1249，1039(ArOR)，822(ArH，对二取代)，747(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.59(2H，s，-S-CH2-)，5.99(2H，s，-O-CH2-O-)，6.82～7.65(11H，m，ArH)，7.65～10.2(4H，br，+NH3+NH)MS(ESI(+)70V，m/z)457.0([M+Na]+)，435.1([M+H]+，base peak)Anal(C22H18N4O2S2·HCl；C％，H％，N％)Req 56.10，4.07，11.90 Found 55.89，3.87，11.64
例8S-甲基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-11)的制备2-(4-硝基苯巯基)苯并噻唑(III-2)将2-巯基苯并噻唑7.7g(46.0mmol)、无水乙腈37ml、粉末氢氧化钠1.9g(47.5mmol)、对硝基氯苯7.25g(46.0mmol)和PEG-400 0.9g加入耐压瓶中，电磁搅拌下置于120℃油浴中反应20h，冷却，抽滤，冷乙腈洗涤二次，再用水洗至pH7，得桔黄色固体(III-2)11.1g(83.6％)，mp 114～116℃1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)7.35～7.50(2H，m，ArH)，7.70～7.98(4H，m，ArH)，8.17～8.30(2H，m，ArH)2-(4-氨基苯巯基)苯并噻唑(IV-2)将还原铁粉6.9g(123mmol)和95％乙醇150ml加入三颈瓶中，机械搅拌下滴加10％HCl 6ml，10min后，加入化合物(III-2)8.4g(29.1mmol)，升温至55℃，反应3.5h，用40％NaOH调pH8.5～9.5，加活性炭脱色10min，趁热抽滤，铁泥用95％乙醇洗涤二次，滤液减压浓缩，得淡黄色晶体(IV-2)6.9g(91.7％)，mp110～111℃1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.56(2H，br s，NH2)，6.68～6.77(2H，d，ArH)，7.11～7.43(4H，m，ArH)，7.60～7.80(2H，m，ArH)1-苯甲酰基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]硫脲(V-2)将硫氰酸铵3.3g(43.4mmol)和无水丙酮20ml加入三颈瓶中，机械搅拌下于5min内滴加苯甲酰氯6g(42.7mmol)，回流20min后，缓慢滴加化合物(IV-2)11g(42.6mmol)和无水丙酮130ml组成的溶液，继续回流6.5h，冷却，抽滤，依次用丙酮和水洗涤，得淡黄色固体(V-2)16.8g(93.7％)，mp 191～193℃1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)7.25～8.02(13H，m，ArH)，9.11(1H，br s，-C6H5-NH-CS-)，12.89(1H，br s，-CS-NH-CO-)N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]硫脲(VI-2)将化合物(V-2)5.0g(11.9mmol)和10％NaOH 50ml混合，搅拌下于80℃反应3.5h，加水100ml，冷却，抽滤，水洗涤，得淡黄色固体(VI-2)3.2g(85％)，mp 158～160℃IR(cm-1)3416，3234，3156(NH)，3058，3041(ArH)，2981(CH)，1616，1572，1500(C＝C，C＝N)，1424(噻唑)，811(ArH，对二取代)，758(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)7.25～7.50(4H，m，ArH)，7.58～7.86(6H，m，ArH+NH2)，9.98(1H，br s，NH)MS(LC/ESI(+)/MSD 70V，m/z)340.0([M+Na]+)，318.0([M+H]+，base peak)将化合物(VI-2)0.6g(1.89mmol)和无水丙酮10ml混合，搅拌下加入碘甲烷0.53ml(1.21g，8.52mmol)，回流7h，冷却，抽滤，丙酮洗涤得白色晶体，将上述白色晶体溶于DMF 5ml，经活性炭过滤，滤液用5％NaOH调pH9，冷却，抽滤，依次用水和冷丙酮洗涤，得白色固体(I-11)0.4g(63.8％)，mp 112～115℃IR(cm-1)3349，3285(NH2)，3062(ArH)，2925，2897(CH)，1639，1574(C＝C，C＝N)，1425(噻唑)，863(ArH，对二取代)，753(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)2.42(3H，s，-S-CH3)，3.61(2H，br，NH2)，7.05～7.82(8H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)331(M+)，284(base peak)，257，241，167Anal(C15H13N3S3；C％，H％，N％)Req 54.35，3.95，12.68 Found 54.22，4.03，12.49例9S-乙基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-12)将化合物(VI-2)0.5g(1.58mmol)和无水丙酮8ml混合，搅拌下加入碘乙烷0.64ml(1.24g，7.94mmol)，回流8h，冷却，抽滤，丙酮洗涤，得浅黄色晶体(I-12)0.65g(87.2％)，mp 163～165℃IR(cm-1)3255～2771(+NH3)，3065，3049(ArH)，2924，2825(CH)，1625，1581，1519(C＝C，C＝N)，1423(噻唑)，1227(-SCH2-)，758(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)1.42(3H，t，J＝7.47Hz，-CH2CH3)，3.35(2H，q，J＝7.32Hz，-S-CH2-CH3)，7.23～7.50(4H，m，ArH)，7.76～7.85(4H，m，ArH)，9.53(3H，br s，+NH3)MS(SCI 70eV，m/z)346(M+1)，300，284，258，241，156(base peak)Anal(C16H15N3S3·HI；C％，H％，N％)Req 40.59，3.41，8.88 Found 40.32，3.46，8.64例10S-苄基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-15)的制备以化合物(VI-2)和氯苄为原料(摩尔比1∶1.2)，类似化合物(I-12)的方法，得淡黄色固体，用无水甲醇重结晶，得类白色晶体(I-15，64.3％)，mp155～157℃IR(cm-1)3458，3382，3085～2790(NH，+NH3)，3058(ArH)，2982，2931(CH)，1638，1581，1555(C＝C，C＝N)，1428(噻唑)，1235(-SCH2-)，753(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.75(2H，s，-S-CH2-)，7.37～7.47(9H，m，ArH)，7.74～7.84(4H，m，ArH)，10.2(3H，br，+NH3)MS(ESI(+)70V，m/z)430.0([M+Na]+)，408.0([M+H]+，base peak)Anal(C21H17N3S3·HCl·H2O；C％，H％，N％)Req 54.59，4.36，9.09 Found 54.94，4.38，8.91例11S-对氯苄基-N-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲盐酸盐(I-16)的制备以化合物(VI-2)和对氯氯苄为原料(摩尔比1∶2.5)，类似化合物(I-12)的方法，得类白色晶体(I-16，80％)，mp 157～158℃IR(cm-1)3456，3393(NH)，3099～2767(+NH3)，3056(ArH)，2981，2937(CH)，1637，1584，1556(C＝C，C＝N)，1426(噻唑)，1233(-SCH2-)，839(ArH，对二取代)，753(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)4.75(2H，s，-S-CH2-)，7.27～7.53(8H，m，ArH)，7.72～7.98(4H，m，ArH)，10.2(3H，br，+NH3)MS(ESI(+)70V，m/z)442.0([M+H]+，base peak)Anal(C21H17ClN3S3·HCl·0.5H2O；C％，H％，N％)Req 51.74，3.93，8.62 Found51.67，3.95，8.32例12S-甲基-1-甲基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-20)的制备1-甲基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-1)将化合物(IV-1)4.0g(16.6mmol)和无水乙醇60ml混合，加入异硫氰酸甲酯2.0g(27.4mmol)，搅拌回流11h，活性炭脱色，滤液适当浓缩，加乙酸乙酯适量，冷却，抽滤，乙酸乙酯洗涤，得浅黄色固体(VII-1)4.5g(86.3％)，mp194～196℃。IR(cm-1)3337，3174(NH)，3050(ArH)，2961(CH)，1581，1550，1527，1491(C＝C，C＝N)，1411(咪唑)，827(ArH，对二取代)，748(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)3.05(3H，d，-NH-CH3)，6.56(2H，br，-HNCSNH-)，7.11～7.26(2H，m，ArH)，7.40～7.57(6H，m，ArH)，9.38(1H，br s，NH)MS(LC/MSD(+)70V，m/z)353.0([M+K]+)，337.1([M+Na]+)，315.0([M+H]+，base peak)MS(EI 70eV，m/z)284，283，282(base peak)，241，224Anal(C15H14N4S2·0.5H2O；C％，H％，N％)Req 55.70，4.67，17.32 Found 55.75，4.47，17.56将化合物(VII-1)0.3g(0.95mmol)和无水丙酮6ml混合，电磁搅拌下加入碘甲烷0.18ml(0.41g，2.86mmol)，回流7h，柱层析分离(洗脱剂苯∶乙酸乙酯∶三乙胺＝9∶1∶0.5)，得白色固体(I-20)0.15g(47.9％)，mp180～182℃IR(cm-1)3378 (NH)，3030(ArH)，2956(CH)，1600，1578，1482(C＝C，C＝N)，1408(咪唑)，837(ArH，对二取代)，750(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)2.3 1(3H，s，-S-CH3)，2.96(3H，s，-N-CH3)，6.92～7.02(2H，m，ArH)，7.11～7.25(4H，m，ArH)，7.39～7.58(4H，m，ArH+NH)MS(EI 70eV，m/z)328(M+)，281(base peak)，265，240，149Anal(C16H16N4S2；C％，H％，N％)Req 58.51，4.91，17.06 Found 58.38，4.86，16.82例13S-甲基-1-正丙基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-23)的制备1-正丙基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-2)以化合物(IV-1)和异硫氰酸正丙酯(摩尔比1∶1.66)为原料，类似化合物(VII-1)的方法，得浅黄色固体(VII-2，91.5％)，mp186～188℃IR(cm-1)3261(NH)，3051(ArH)，2960，2930，2871(CH)，1607，1578，1551，1493(C＝C，C＝N)，1406(咪唑)，752(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)0.95(3H，t，J＝7.33Hz，-NH-CH2CH2CH3)，1.40～1.75(2H，m，-NH-CH2-CH2-CH3)，3.45(2H，m，-NH-CH2-)，7.08～7.19(2H，m，ArH)，7.43～7.52(6H，m，ArH)，9.29(1H，br s，NH)MS(LC/MSD(+)70V，m/z)365.1([M+Na]+)，343.1([M+H]+，base peak)Anal(C17H18N4S2；C％，H％，N％)Req 59.62，5.30，16.36 Found 59.62，5.49，16.24以化合物(VII-2)和碘甲烷(摩尔比1∶3)为原料，类似化合物(I-20)的方法，柱层析分离(洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝3∶1∶0.3)，得白色晶体(I-23，48.0％)，mp168～171℃。IR(cm-1)3348(NH)，2956，2867(CH)，1598，1579，1483(C＝C，C＝N)，1412(咪唑)，1270(-SCH2-)，751(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)0.96(3H，t，J＝7.08Hz，-NCH2CH2CH3)，1.45～1.70(2H，m，-N-CH2CH2-CH3)，2.31(3H，s，-S-CH3)，3.32(2H，t，J＝7.33Hz，-S-CH2-CH2-)，6.92～7.02(2H，m，ArH)，7.11～7.25(4H，m，ArH)，7.40～7.58(4H，m，ArH+NH)MS(EI 70eV，m/z)356(M+)，341，309(base peak)，265，252，240，224，149Anal(C18H20N4S2；C％，H％，N％)Req 60.64，5.65，15.72 Found 60.35，5.42，16.05例14S-正丁基-1-正丙基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-25)的制备以化合物(VII-2)和碘代正丁烷(摩尔比1∶3)为原料，类似化合物(I-20)的方法，柱层析分离(梯度洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝3～1∶1∶0.15～0.1)，得白色固体(I-25，57.3％)，mp86～89℃。IR(cm-1)3363(NH)，3059(ArH)，2957，2928，2876(CH)，1597，1577(C＝C，C＝N)，1413(咪唑)，1268(-SCH2-)，750(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CD3COCD3+CDCl3)，δ(ppm)0.84～1.01(6H，m，-NCH2CH2CH3+-SCH2CH2CH2CH3)，1.15～1.80(6H，m，-SCH2CH2CH2CH3+-NCH2CH2CH3)，2.79(2H，t，J＝7.32Hz，-SCH2CH2-)，3.32(2H，t，J＝7.32Hz，-N-CH2-CH2-)，6.82～6.92(2H，m，ArH)，7.07～7.17(2H，m，ArH)，7.39～7.92(6H，m，ArH+NH)MS(EI 70eV，m/z)398(M+)，342，308，282，265(base peak)，240，224，150Anal(C21H26N4S2；C％，H％，N％)Req 63.28，6.58，14.06 Found 63.53，6.70，14.17例15S-甲基-1-苯基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-26)的制备1-苯基-3-[4-(苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-3)
将化合物(IV-1)3.0g(12.4mmol)和无水乙腈50ml混合，加入异硫氰酸苯酯2.8g(20.7mmol)，搅拌回流20h，冷却，抽滤，乙腈洗涤，得淡黄色固体(VII-3)4.2g(89.6％)，mp 210～212℃IR(cm-1)3259(NH)，3028(ArH)，2956，2873(CH)，1589，1539(C＝C，C＝N)，1408(咪唑)，751(ArH，邻二取代)1HNMR(300MHz，DMSO-d6+CD3COCD3)，δ(ppm)7.60～7.64(3H，m，ArH)，7.78～7.84(2H，m，ArH)，8.0～8.10(6H，m，ArH)，8.20～8.25(2H，m，ArH)，10.3(3H，m，NH)MS(LC/MSD ESI(+)70V，m/z)399.2([M+Na]+)，377.2([M+H]+，base peak)将化合物(VII-3)0.3g(0.80mmol)和无水丙酮5ml混合，电磁搅拌下加入碘甲烷0.15ml(0.34g，2.40mmol)，回流反应10.5h，柱层析分离(洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.1)，得浅灰黄色晶体(I-26)0.1g(32.1％)，mp82～84℃。IR(cm-1)3380(NH)，3054(ArH)，2958，2926，2869(CH)，1689，1620，1577，1491(C＝N，C＝C)，1432(咪唑)，1268(-SCH2-)，832(ArH，对二取代)，743(ArH，邻二取代)，694(ArH，单取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)2.37(3H，d，-SCH3)，6.84～7.01(3H，m，ArH)，7.12～7.15(2H，m，ArH)，7.25～7.29(2H，m，ArH)，7.34～7.51(4H，m，ArH)，7.61～7.62(1H，m，ArH)，7.74～7.76(1H，m，ArH)，8.80～8.94(1H，d，NH)，12.5(1H，br，NH)MS(LC/MSD ESI(+)70V，m/z)413.3([M+Na]+)，391.3([M+H]+，base peak)Anal(C21H18N4S2；C％，H％，N％)Req 64.59，4.65，14.35 Found 64.45，5.01，14.03例16S-甲基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢碘酸盐(I-30)的制备1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-4)将化合物(IV-2)3.0g(11.6mmol)和无水乙醇60ml混合溶解，电磁搅拌下加入异硫氰酸甲酯1.70g(23.2mmol)，回流16h，活性炭脱色，滤液减压回收溶媒，加乙酸乙酯3ml，正己烷6ml，冷却，抽滤，得类白色晶体(VII-4)3.3g(85.7％)，mp 150～152℃。IR(cm-1)3296，3179(NH)，2995(CH)，1593，1575，1545，1526，1458(C＝C，C＝N)，983(噻唑)，758(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)3.14(3H，d，J＝4.64Hz，HNCH3)，6.53(1H，br，NH)，7.24～7.41(4H，m，ArH)，7.47～7.88(4H，m，ArH)，8.51(1H，br s，NH)MS(LC/MSD(-)70V，m/z)330.0([M-H]-，base peak)MS(EI 70eV，m/z)300，299(base peak)，267，258，241，166Anal(C15H13N3S3；C％，H％，N％)Req 54.35，3.95，12.68 Found 54.47，3.95，12.99将化合物(VII-4)0.33g(1.0mmol)和无水丙酮6ml混合，电磁搅拌下加入碘甲烷0.19ml(0.43g，3.03mmol)，回流14h，蒸发部分丙酮，冷却，抽滤得类白色晶体，用甲醇/丙酮重结晶，得白色晶体(I-30)0.25g(53.0％)，mp 192～194℃。IR(cm-1)3044(ArH)，2977，2870(CH)，2840～2750(+NH2)，1611，1588，1502，1488(C＝C，C＝N)，1425，1007(噻唑)，763(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，DMSO-d6+CDCl3)，δ(ppm)2.72(3H，s，-S-CH3)，3.2(3H，s，-N-CH3)，7.30～7.49(4H，m，ArH)，7.58～7.88(4H，m，ArH)，9.45(2H，br，+NH2)MS(EI 70eV，m/z)345(M+)，298(base peak)，282，265，257，240，167Anal(C16H15N3S3·HI；C％，H％，N％)Req 40.59，3.41，8.88 Found 40.57，3.25，9.05例17S-乙基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-31)的制备将化合物(VII-4)0.33g(1.0mmol)和无水丙酮6ml混合，电磁搅拌下加入碘乙烷0.24ml(0.46g，2.95mmol)，回流15h，柱层析分离(洗脱剂环己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.1)，得白色晶体(I-31)0.2g(55.6％)，mp 121～123℃。IR(cm-1)3267(NH)，3070(ArH)，2970，2920(CH)，1608，1574，1525，1480，1461(C＝C，C＝N)，1409，1190(-SCH2-)，1006(噻唑)，835(ArH，对二取代)，754(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)1.26(3H，t，J＝7.57Hz，-S-CH2CH3)，2.72(2H，q，J＝7.32Hz，-S-CH2CH3)，2.96(3H，s，N-CH3)，4.60(1H，br，NH)，6.97～7.07(2H，m，ArH)，7.20～7.39(2H，m，ArH)，7.57～7.90(4H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)359(M+)，342，302，298(base peak)，282，257，241，167Anal(C17H17N3S3；C％，H％，N％)Req 56.79，4.77，11.69 Found 56.63，4.81，11.76例18S-正丁基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-32)的制备以化合物(VII-4)和碘代正丁烷(摩尔比1∶3)为原料，类似化合物(I-31)的方法，得白色晶体(I-32，64.5％)，mp136～138℃。IR(cm-1)3287(NH)，2927(CH)，1607，1578，1514，1480，1454(C＝C，C＝N)，1425，1008(噻唑)，1409，1191(-SCH2-)，838(ArH，对二取代)，758(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)0.89(3H，t，J＝6.35Hz，-S-CH2CH2CH2CH3)，1.20～1.70(4H，m，-SCH2CH2CH2CH3)，2.69(2H，t，J＝6.83Hz，-S-CH2-)，2.96(3H，s，N-CH3)，4.50(1H，br，NH)，6.96～7.10(2H，m，ArH)，7.20～7.45(2H，m，ArH)，7.54～7.89(4H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)387(M+)，331，298，282，257，164(base peak)Anal(C19H21N3S3；C％，H％，N％)Req 58.88，5.46，10.84 Found 59.11，5.52，11.03例19S-苄基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-34)的制备以化合物(VII-4)和氯苄(摩尔比1∶1.2)为原料，类似化合物(I-31)的方法，柱层析分离(梯度洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝4～3∶1∶0.15)，得类白色晶体(I-34，65.4％)，mp 158～161℃。IR(cm-1)3310(NH)，2957，2927，2870(CH)，1606，1575，1514，1481(C＝C，C＝N)，1424，1009(噻唑)，1191(-SCH2-)，839(ArH，对二取代)，761(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)2.90(3H，s，N-CH3)，3.96(2H，s，S-CH2-)，4.50(1H，br，NH)，6.97～7.07(3H，m，ArH)，7.22～7.39(6H，m，ArH)，7.55～7.88(4H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)421(M+)，364，297(base peak)，281，269，254，241，163Anal(C22H19N3S3；C％，H％，N％)Req 62.67，4.54，9.97 Found 62.42，4.56，9.85例20S-对氰基苄基-1-甲基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-35)的制备以化合物(VII-4)和对氰基溴苄(摩尔比1∶1.2)为原料，类似化合物(I-31)的方法，柱层析分离(梯度洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝3～1.5∶1∶0.15)，得白色晶体(I-35，74.1％)，mp 122～125℃。IR(cm-1)3294(NH)，2970(CH)，2227(CN)，1609，1573，1511，1480(C＝C，C＝N)，1423，1006(噻唑)，1191(-SCH2-)，838(ArH，对二取代)，756(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)2.89(3H，s，N-CH3)，4.02(2H，s，S-CH2-)，4.70(1H，br，NH)，6.94～7.04(2H，m，ArH)，7.21～7.45(4H，m，ArH)，7.55～7.87(6H，m，ArH)MS(LC/ESI(+)/MSD 70V，m/z)469.0([M+Na]+)，447.0([M+H]+，base peak)MS(SCI 70eV，m/z)413，297(base peak)，281，269，241，163Anal(C23H18N4S3；C％，H％，N％)Req 61.85，4.06，12.54 Found 61.46，4.06，12.40例21S-乙基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-38)的制备1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-5)以化合物(IV-2)和异硫氰酸正丙酯(摩尔比1∶2.5)为原料，无水乙腈为溶剂，类似化合物(VII-4)的方法，得浅黄色固体(VII-5，82.7％)，mp 122～124℃。IR(cm-1)3253，3173(NH)，3068，2956，2930(CH)，1605，1597，1542，1523，1459(C＝C，C＝N)，1004(噻唑)，833(ArH，对二取代)，757(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)0.94(3H，t，J＝7.56Hz，-HN-CH2CH2CH3)，1.52～1.77(2H，m，-NH-CH2CH2CH3)，3.60(2H，q，J＝6.84Hz，-HN-CH2-)，6.51(1H，br，NH)，7.24～7.47(4H，m，ArH)，7.63～7.89(4H，m，ArH)，8.63(1H，br s，NH)MS(LC/MSD(-)70V，m/z)358.0([M-H]-，base peak)MS(EI 70eV，m/z)300，299(base peak)，267，258，241，166Anal(C17H17N3S3；C％，H％，N％)Req 56.79，4.77，11.69 Found 56.57，4.79，11.55以化合物(VII-5)和碘乙烷(摩尔比1∶2.6)为原料，类似化合物(I-31)的方法，柱层析分离(洗脱剂环己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.1)，得淡黄色晶体(I-38，58.0％)，mp 102～105℃。IR(cm-1)3284(NH)，2964，2927(CH)，1606，1576，1519，1481(C＝C，C＝N)，1423，1007(噻唑)，1248(-SCH2-)，838(ArH，对二取代)，759(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)0.96(3H，t，J＝7.57Hz，N-CH2CH2CH3)，1.27(3H，t，J＝7.57Hz，SCH2CH3)，1.49～1.74(2H，m，N-CH2CH2CH3)，2.73(2H，q，J＝7.32Hz，S-CH2-)，3.33(2H，t，J＝7.08Hz，N-CH2-)，4.60(1H，br，NH)，6.96～7.06(2H，m，ArH)，7.19～7.45(2H，m，ArH)，7.56～7.89(4H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)387(M+)，358，326，284(base peak)，257，241，167Anal(C19H21N3S3；C％，H％，N％)Req 58.88，5.46，10.84 Found 58.62，5.72，10.67例22S-正丁基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-39)的制备以化合物(VII-5)和碘代正丁烷(摩尔比1∶3)为原料，类似化合物(I-31)的方法，柱层析分离(洗脱剂环己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.1)，得淡黄色晶体(I-39，60.1％)，mp 92～95℃。IR(cm-1)335 1(NH)，2964，2929，2871(CH)，1606，1577，1479(C＝C，C＝N)，1425，1006(噻唑)，1249(-SCH2-)，839(ArH，对二取代)，757(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)0.89(3H，t，J＝6.84Hz，S-CH2CH2CH2CH3)，0.96(3H，t，J＝6.83Hz，N-CH2CH2CH3)，1.20～1.80(6H，m，SCH2CH2CH2CH3+NCH2CH2CH3)，2.69(2H，t，J＝7.33Hz，SCH2-)，3.33(2H，t，J＝7.32Hz，NCH2-)，4.70(1H，br，NH)，6.97～7.10(2H，m，ArH)，7.19～7.47(2H，m，ArH)，7.56～7.89(4H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)415(M+)，359，326，299，284(base peak)，257，241，167Anal(C21H25N3S3；C％，H％，N％)Req 60.68，6.06，10.11 Found 60.49，6.22，9.94例23S-烯丙基-1-正丙基-3-[4-(苯并噻唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-40)的制备以化合物(VII-5)和烯丙基溴(摩尔比1∶2.5)为原料，类似化合物(I-31)的方法，柱层析分离(洗脱剂环己烷∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.1)，得淡黄色晶体(I-40，60.0％)，mp90～92℃。IR(cm-1)3292(NH)，2966，2928(CH)，1606，1575，1513，1480(C＝C，C＝N)，1424，1010(噻唑)，837(ArH，对二取代)，758(ArH，邻二取代)1HNMR(90MHz，CDCl3)，δ(ppm)0.96(3H，t，J＝7.08Hz，N-CH2CH2CH3)，1.42～1.73(2H，m，NCH2CH2CH3)，3.23～3.44(4H，m，NCH2-+SCH2-)，4.75(1H，br，NH)，5.14～5.35(2H，m，＝CH2)，5.67～6.10(1H，m，SCH2CH＝)，6.96～7.06(2H，m，ArH)，7.20～7.47(2H，m，ArH)，7.57～7.88(4H，m，ArH)MS(EI 70eV，m/z)399(M+)，384，342，284，257，241，167(base peak)Anal(C20H21N3S3；C％，H％，N％)Req 60.11，5.30，10.52 Found 59.88，5.46，10.43例24S-甲基-1-甲基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-41)的制备2-(4-硝基苯硫基)-5-甲氧基苯并咪唑(III-3)将2-巯基-5-甲氧基苯并咪唑10g(0.056mol)，对硝基氯苯8.8g(0.056mol)，无水乙腈50ml，氢氧化钠粉末2.2g(0.056mol)，PEG-600 lg依次加入耐压瓶中，密封，于外温120℃左右电磁搅拌下反应30h，冷至室温，抽滤，冷乙腈洗，得淡黄褐色固体(III-3)13.5g(79.9％)，mp145～150℃2-(4-氨基苯硫基)-5-甲氧基苯并咪唑(IV-3)将铁粉6.8g(0.12mol)与95％乙醇135ml混合，再加入10％HCl 5.7ml，机械搅拌10min后加入化合物(III-3)6.9g(0.028mol)，加毕，升温至内温60℃，反应9h后，滴加40％氢氧化钠溶液至pH8～9，加入适量活性碳，搅拌15min，趁热抽滤，滤液减压浓缩，冷却，抽滤得粗品，用乙酸乙酯重结晶(加少量保险粉)，得浅棕色晶体(IV-3)2.9g(52％)，mp147～148℃。1-甲基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-6)将化合物(IV-3)1.7g(6.27mmol)及无水乙醇20ml混合，搅拌下加入异硫氰酸甲酯0.54g(7.40mmol)，回流15h，冷却，抽滤，粗品用乙醇重结晶，得淡黄色晶体(VII-6)1.7g(79.1％)，mp186～188℃。IR(cm-1)3338(NH)，3175，3147(ArH)，1545，1527，1490，1410(C＝C，C＝N)，1153(C-O-C)，825(ArH，对二取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)2.93(3H，d，NCH3)，3.77(3H，S，OCH3)，6.77～7.49(7H，m，ArH)，7.76(1H，br s，NH)，9.57(1H，br s，NH)，12.48(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)367([M+Na]+)，345.1([M+H]+，base peak)Anal(C16H16N4OS2；C％，H％，N％)Req 55.79，4.68，16.26 Found 55.55，4.68，15.94
将化合物(VII-6)0.3g(0.875mmol)和无水乙腈5ml混合，搅拌下加入碘甲烷0.37g(2.62mmol)，回流7h，柱层析分离[洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝1∶1.5∶0.125]，得白色固体(I-41)。mp70～72℃。IR(cm-1)3412(NH)，2928(CH)，1607，1578，1481，1409(C＝C，C＝N)，1200，1153(C-O-C)1HNMR(300MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)2.30(3H，s，SCH3)，2.77(3H，d，NCH3)，3.76(3H，s，OCH3)，6.61～7.44(7H，m，ArH)，12.48(2H，br s，NH)MS(SCI 70eV，m/z)359([M+1]+)，311(M-SCH3)，195(base peak)Anal(C17H18N4OS2；C％，H％，N％)Req 56.96，5.06，15.63 Found 57.24，5.55，14.48例25S-正丁基-1-甲基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-42)的制备将化合物(VII-6)0.3g(0.875mmol)，无水丙酮5ml和碘丁烷0.48g(0.3ml)混合，回流8h，柱层析分离[洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝1∶1.5∶0.125]，得白色晶状物(I-42)。mp74～76℃。IR(cm-1)3392，3218(NH)，3043(ArH)，2952(CH)，1610，1577，1481，1407(C＝C，C＝N)，1269(SCH2)，1198，1152(C-O-C)，835(ArH，对二取代)1HNMR(300MHz，CD3COCD3)，δ(ppm)0.86(3H，t，CH3)，1.36(2H，m，CH2)，1.52(2H，m，CH2)，2.82(2H，t，SCH2)，2.88(3H，s，NCH3)，3.79(3H，s，OCH3)，6.77～6.92(4H，m，ArH)，7.36～7.48(3H，m，ArH)MS(LC/ESI(+)MSD 70eV，m/z)423.1([M+Na]+)，401.1([M+H]+，base peak)Anal(C20H24N4OS2；C％，H％，N％)Req 59.97，6.04，13.99 Found 59.72，6.21，13.74例26S-乙基-1-正丙基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-44)的制备1-正丙基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-7)将化合物(IV-3)1.5g(5.54mmol)和无水乙醇20ml混合，搅拌下加入异硫氰酸丙酯0.67g(9.2mmol)，回流22h。减压蒸除乙醇，加乙酸乙酯溶解，然后滴加适量正己烷，冷却，抽滤，得类白色固体(VII-7)1.1g(53.4％)，mp144～148℃IR(cm-1)3360(NH)，3193(ArH)，2960，2929(CH)，1533，1491，1402(C＝C，C＝N)，1154(C-O-C)，826(ArH，对二取代)1HNMR(300MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)0.93(3H，t，CH3)，1.62(2H，m，CH2)，3.56(2H，t，NCH2)，3.85(3H，s，OCH3)，6.80～7.68(7H，m，ArH)，7.80(1H，br s，NH)，9.58(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)395.0([M+Na]+)，373.1([M+H]+，base peak)Anal(C18H20N4OS2；C％，H％，N％)Req 58.04，5.41，15.04 Found 58.31，5.55，14.86将化合物(VII-7)0.3g(0.806mmol)，无水丙酮5ml和碘乙烷0.63g(0.36ml)混合，回流5h，柱层析分离[洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.1]，得白色粉末(I-44)。mp146～148℃。IR(cm-1)3454(NH)，3043，(ArH)，2954(CH)，1606，1580，1479(C＝C，C＝N)，1165(C-O-C)，822(ArH，对二取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)0.88(3H，t，CH3)，1.15(3H，t，CH3)，1.56(2H，m，CH2)，2.81(2H，q，SCH2)，3.20(3H，m，NCH2)，3.76(3H，s，OCH3)，6.75～7.44(7H，m，ArH)，12.41～12.45(1H，m，NH)MS(LC/ESI(+)MSD 70eV，m/z)423.1([M+Na]+)，401.1([M+H]+，base peak)Anal(C20H24N4OS2；C％，H％，N％)Req 59.96，6.04，13.99 Found 60.12，6.14，14.13例27S-乙基-1-苯基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-46)的制备1-苯基-3-[4-(5-甲氧基苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-8)将化合物(IV-3)1.8g(6.64mmol)和无水乙腈20ml混合，搅拌下加入异硫氰酸苯酯1.04g(7.77mmol)，回流18h。冷至室温，抽滤，用乙腈充分洗涤，得淡黄褐色固体(VII-8)1.4g(收率52％)。1HNMR(300MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)3.54(3H，s，OCH3)，6.56～7.28(7H，m，ArH)，7.35～7.38(5H，m，ArH)，9.19-9.23(1H，m，NH)，9.62(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)429.1([M+Na]+)，407.0([M+H]+)，293.0(base peak)Anal(C18H20N4OS2；C％，H％，N％)Req 62.04，4.46，13.78 Found 61.82，4.61，13.47以化合物(VII-8)和碘乙烷(摩尔比1∶5)为原料，按类似化合物(I-41)的方法合成。经柱层析分离[洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝1∶1.5∶0.1]，得淡黄色油状物(I-46)。mp166～170℃。IR(cm-1)3402(NH)，2930(CH)，1621，1576，1491(C＝C，C＝N)，1152(C-O-C)，824(ArH，对二取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)1.16(3H，t，CH3)，2.86(2H，q，SCH2)，3.81(3H，s，OCH3)，6.75～7.74(12H，m，ArH)，9.20～9.23(1H，m，NH)，12.33～12.38(1H，m，NH)，12.46～12.50(1H，m，NH)Anal(C23H22N4OS2；C％，H％，N％)Req 63.57，5.10，12.89 Found 63.42，4.99，13.17例28S-甲基-1-甲基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-48)的制备对氯乙酰苯胺(VIII)将对氯苯胺51.2g(0.4mol)加入120ml冰醋酸中，搅拌下升温至60℃，固体全溶，缓慢滴加醋酐46.4g(0.44mol)，滴完后回流1h，放冷析晶，抽滤，石油醚洗，得白色针状结晶(VIII)62g(收率91％)。mp175～176℃(文献值177～179℃)。邻硝基对氯乙酰苯胺(IX)将化合物(VIII)51g(0.3mol)溶于120ml醋酐中，冰浴冷却至15℃以下，缓慢滴加发烟硝酸5ml，保持内温低于15℃，滴毕搅拌2h，将反应液倾入900ml冰水中，抽滤，水洗，得黄色固体(IX)60g(收率93％)。邻硝基对氯苯胺(X)将化合物(IX)64g(0.3mol)投入55％硫酸180ml中，加热回流约0.5h，至固体完全消失，稍冷后将反应液倾入700ml冰水中，用10％氢氧化钠调pH至8～9，放置数小时，过滤，得橙红色固体(X)46.6g(收率90％)。mp104℃(文献值117～119℃)对氯邻苯二胺盐酸盐(XI)将化合物(X)4g(0.023mol)投入95％乙醇50ml中，加0.3g钯炭，催化氢化，待停止吸氢将反应液迅速过滤，滤液用浓HCl调pH2～3，然后浓缩至干，得粉红色固体(XI)4.5g(收率75％)。2-巯基-5-氯苯并咪唑(XII)将氢氧化钠2.3g(0.056mol)投于95％乙醇40ml和水8ml中，搅拌溶解后于36℃以下滴加二硫化碳1.3ml(0.022mol)，加毕搅0.5h，然后加入化合物(XI)4g(0.019mol)，加热回流12h，反应完毕冷至70℃，加活性炭脱色15min，趁热过滤，滤液加入65℃热水100ml，用36％醋酸调pH8，静置数小时，抽滤，水洗，少量醇洗，得浅棕色固体(XII)2.8g(收率81％)。2-(4-硝基苯硫基)-5-氯苯并咪唑(III-4)将化合物(XII)4g(0.022mol)，无水乙腈30ml，粉末氢氧化钠0.9g(0.023mol)，对氯硝基苯3.4g(0.022mol)及PEG-600 1ml加入耐压瓶中，充N2保护，电磁搅拌下于120℃油浴中反应42h，冷却，抽滤，滤液浓缩，放置，抽滤，冷乙腈洗3次，再水洗至中性，得黄色固体(III-4)3g(收率45％)，mp186～167℃2-(4-氨基苯硫基)-5-氯苯并咪唑(IV-4)将还原铁粉1.6g(0.029mol)和95％乙醇40ml混合，搅拌下加入10％HCl1.1ml，10min后加入化合物(III-4)2g(6.65mmol)，升温至60℃反应4h，反应毕冷至40℃，用40％氢氧化钠调pH8～9，活性炭脱色10min，趁热抽滤，铁泥用95％乙醇洗两次，滤液略浓缩，直接用于下一步反应。1-甲基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-9)将异硫氰酸甲酯加入上一步反应所得溶液中(摩尔比1∶1.17)，回流反应10h，析出大量固体，抽滤，乙醇洗，得淡黄色粉末(VII-9)1.3g(收率87％)，mp218～220℃IR(cm-1)3350(NH)，3178，3147(ArH)，1545，1527，1491，1396(C＝C，C＝N)，826(ArH，对二取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)2.93(3H，s，NCH3)，7.15～7.60(7H，m，ArH)，7.87(1H，br s，NH)，9.79(1H，br s，NH)，12.80(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)371.0([M+Na]+)，349.1([M+H]+，base peak)Anal(C15H13N4S2Cl；C％，H％，N％)Req 51.64，3.76，16.06 Found 51.76，3.59，15.79将化合物(VII-9)0.3g(0.86mmol)和无水丙酮5ml混合，电磁搅拌下加入碘甲烷0.16ml(2.58mmol)，加热回流8h，反应液经柱层析分离[洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝1.5∶1∶0.1]，得淡黄色固体(I-48)，mp86～88℃。IR(cm-1)3393，3234(NH)，3019(ArH)，2924(CH)，1608，1576，1479，1409(C＝C，C＝N)，837(ArH，对二取代)1HNMR(300MHz，CDCl3)，δ(ppm)2.67(3H，s，SCH3)，3.05(3H，s，NH3)，7.10～7.16(3H，m，ArH)，7.38～7.50(4H，m，ArH)MS(ESI(+)70V，m/z)385.0([M+Na]+)，363.0([M+H]+，base peak)Anal(C16H15N4S2Cl；C％，H％，N％)Req 52.95，4.17，15.44 Found52.79，4.22，15.23例29S-(4-硝基苄基)-1-甲基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲氢溴酸盐(I-50)的制备将化合物(VII-9)0.2g(0.52mmol)和无水丙酮4ml混合，电磁搅拌下加入对硝基溴苄0.37g(1.7mmol)，回流9h，冷却，抽滤，丙酮洗，得类白色固体(I-50)，mp210～212℃IR(cm-1)3437(NH)，3068(ArH)，2933(CH)，1607，1582，1531(C＝C，C＝N)，858(ArH，对二取代)1HNMR(300MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)3.05(3H，s，NCH3)，4.63(2H，s，S-CH2-Ph)，7.22～7.66(9H，m，ArH)，8.23～8.25(2H，m，ArH)，9.80(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)506.1([M+Na]+)，484.0([M+H]+，base peak)Anal(C22H18N5S2ClO2·2HBr；C％，H％，N％)Req 40.92，3.12，10.84Found40.89，3.06，10.54例30S-乙基-1-正丙基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]异硫脲(I-51)的制备1-正丙基-3-[4-(5-氯苯并咪唑-2-巯基)苯基]硫脲(VII-10)按类似化合物(VII-9)的方法，将制备化合物(IV-4)所得溶液和异硫氰酸丙酯反应(摩尔比1∶2.5)，得淡黄色固体(VII-10)，mp180～182℃IR(cm-1)3366(NH)，3193(ArH)，2962(CH)，1581，1533，1491，1394(C＝C，C＝N)，827(ArH，对二取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)0.89(3H，t，CH3)，1.55(2H，m，CH2)，3.42(2H，s，NCH2)，7.15～7.58(7H，m，ArH)，7.95(1H，br s，NH)，9.68(1H，br s，NH)，12.80(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)399.1([M+Na]+，base peak)，377([M+H]+)将化合物(VII-10)0.2g(0.53mmol)和无水丙酮5ml混合，搅拌下加入碘乙烷0.21ml(2.63mmol)，加热回流9h，反应液经柱层析分离[洗脱剂石油醚(60～90℃)∶乙酸乙酯∶三乙胺＝2∶1∶0.2]，得淡黄色固体(I-51)，mp56～58℃。IR(cm-1)3439(NH)，3068(ArH)，2960，2927(CH)，1610，1577，1479，1400(C＝C，C＝N)，835(ArH，对二取代)1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)0.88(3H，t，CH3)1.15(3H，t，CH3)，1.56(2H，m，CH2)，2.81(2H，m，CH2)，3.20(2H，q，SCH2)，3.33(2H，s，NCH2)，6.77～7.49(7H，m，ArH)，12.61(1H，br s，NH)MS(ESI(+)70V，m/z)405.1([M+H]+，base peak)Anal(C19H21N4S2Cl；C％，H％，N％)Req 56.35，5.23，13.83 Found56.01，5.29，13.68
权利要求
1.通式(I)的化合物及其药学上可接受的盐 其中R1表示氢、氯、溴、甲基或甲氧基；R2表示氢、C1-4的烷基或苯基；R3表示C1-4的烷基、烯丙基、苄基或取代苄基；X表示氮或硫。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中取代苄基的取代基可以是2-Cl、2-Br、2-CN、2-NO2、4-Cl、4-Br、4-CN、4-NO2、3，4-亚甲二氧基、3，4-二甲氧基。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中R1表示氢，R2表示氢，R3表示乙基，X表示氮。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中R1表示氢，R2表示正丙基，R3表示正丁基，X表示硫。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的化合物，药学上可接受的盐包括与下列酸形成的酸加成盐盐酸、氢溴酸、硫酸、柠檬酸、酒石酸、磷酸、乳酸、丙酮酸、乙酸、马来酸、苯磺酸。
6.通式(I)化合物的制备方法，包括以下步骤当R2为氢，R3为C1-4的烷基、烯丙基、苄基或取代苄基时，制备方法如下 当R2为C1-4的烷基或苯基，R3为C1-4烷基、烯丙基、苄基或取代苄基时，制备方法如下 其中X表示氮或硫，溶剂A是非质子极性溶剂，溶剂B是丙酮或乙腈，溶剂C是丙酮、C1-4醇、乙腈或N，N-二甲基甲酰胺，Y代表卤素。
7.根据权利要求6所述的方法，其中非质子极性溶剂是乙腈、硝基甲烷、硝基乙烷、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜。
8.一种药物组合物，其中含有治疗有效量的通式(I)化合物和药学上可接受的载体。
9.权利要求1-5中任一项所定义的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与NO合酶抑制剂有关的临床疾病的药物中的用途。
10.按照权利要求9的方法，其中所述临床疾病可以是败血性休克、肠炎、风湿性关节炎、糖尿病、大脑缺血性损伤或早老性痴呆。
全文摘要
本发明涉及新的通式为(I)的化合物，其中R
文档编号A61K31/4164GK1428336SQ0215726
公开日2003年7月9日 申请日期2002年12月27日 优先权日2002年12月27日
发明者徐云根, 华维一, 朱东亚, 罗穗 申请人:中国药科大学