丙肝病毒ns3丝氨酸蛋白酶的大环抑制剂的制作方法

专利名称：丙肝病毒ns3丝氨酸蛋白酶的大环抑制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的丙肝病毒(″HCV″)蛋白酶抑制剂，含有一种或几种这样的抑制剂的药物组合物，制备这样的抑制剂的方法和使用这样的抑制剂治疗丙肝和相关疾病的方法。本发明另外公开作为HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶抑制剂的新的大环化合物。本申请要求2003年9月26日申请的美国临时专利申请系列号No.60/506,637的优先权利益。
背景技术：
丙肝病毒(HCV)是(+)-有义单链RNA病毒，已经推断它是非-甲，非-乙肝炎(NANBH)，特别是与血液相关的NANBH(BB-NANBH)的主要致因物质(参见，国际专利申请公开No.WO 89/04669，等于US2003162167)。NANBH区别于其他类型的病毒诱导的肝病，例如甲肝病毒(HAV)，乙肝病毒(HBV)，丁肝病毒(HDV)，巨细胞病毒(CMV)和埃巴病毒(EBV)，并且区别于肝病的其他形式，例如酒精中毒和原发性胆汁肝硬化。
最近，多肽加工和病毒复制需要的HCV蛋白酶得以鉴定，克隆并表达(参见，例如，美国专利No.5,712,145)。这种大约3000个氨基酸的蛋白质从氨基末端至羧基末端包含，核壳蛋白(C)，包膜蛋白(E1和E2)和几种非结构蛋白(NS1，2，3，4a，5a和5b)。NS3是大约68kda的蛋白质，由HCV基因组大约1893个核苷酸编码，并且具有两个不同的结构域(a)由大约200个N-末端氨基酸构成的丝氨酸蛋白酶结构域；和(b)蛋白质C-末端RNA-依赖性ATP酶结构域。认为NS3蛋白酶是胰凝乳蛋白酶家族的一员，因为蛋白质序列、总的三维结构和催化机理类似。其他胰凝乳蛋白酶-样酶是弹性蛋白酶，因子Xa，凝血酶，胰蛋白酶，纤溶酶，尿激酶，tPA和PSA。HCV NS3丝氨酸蛋白酶负责多肽(蛋白质)在NS3/NS4a，NS4a/NS4b，NS4b/NS5a和NS5a/NS5b连接点处的蛋白水解作用，因此负责在病毒复制期间产生四种病毒蛋白质。这使得HCV NS3丝氨酸蛋白酶成为抗病毒化疗的吸引人的靶物。本发明化合物能抑制这种蛋白酶。它们还能调节丙肝病毒(HCV)多肽的加工。
已经测得NS4a蛋白质，一种大约6kda多肽，是NS3丝氨酸蛋白酶活性的辅因子。NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶对NS3/NS4a连接的自动切割发生在分子内(即，顺式)，而其他切割位点在分子间进行(即，反式)。
对HCV蛋白酶天然切割位点的分析揭示P1存在半胱氨酸和P1′存在丝氨酸，并且这些残基在NS4a/NS4b，NS4b/NS5a和NS5a/NS5b连接中严格保守。NS3/NS4a连接在P1包含苏氨酸在P1′包含丝氨酸。假设NS3/NS4a处Cys→Thr取代作用解释顺式要求而不是在该连接处反式处理。参见，例如，Pizzi等(1994)Proc.Natl.Acad.Sci(USA)91888-892，Failla等(1996)Folding & Design135-42。NS3/NS4a切割位点还比其他位点更耐受诱变。参见，例如，Kollykhalov等(1994)J.Virol.687525-7533。还发现该切割位点上游区中酸性残基是有效切割需要的。参见，例如，Komoda等(1994)J.Virol.687351-7357。
报道的HCV蛋白酶的抑制剂包括抗氧化剂(参见，国际专利申请公开No.WO 98/14181)，一些肽类和肽类似物(参见，国际专利申请公开No.WO 98/17679(等于US2002032175)，Landro等(1997)Biochem.369340-9348，Ingallinella等(1998)Biochem.378906-8914，Lainas-Brunet等(1998)Bioorg.Med.Chem.Lett.81713-1718)，以70-氨基酸多肽水蛭抑制剂c为基础的抑制剂(Martin等(1998)Biochem.3711459-11468，从人胰腺分泌胰蛋白酶抑制剂(hPSTI-C3)和minibody库(MBip)选择抑制剂亲和性(Dimasi等(1997)J.Virol.717461-7469)，cVHE2(一种″camelized″可变结构域抗体片段)(Martin等(1997)Protein Eng.10607-614)，和α1-抗胰凝乳蛋白酶(ACT)(Elzouki等)(1997)J.Hepat.2742-28)。最近有人公开了设计来选择性破坏丙肝病毒RNA的核糖核酸酶(参见，BioWorld Today 9(217)4(1998年11月10日))。
还可以参考PCT公开No.WO 98/17679，1998年4月30日公开(Vertex Pharmaceutical Incorporated)；WO 98/22496，1998年5月28日公开(等于US6018020和US5866684；F.Hoffmann-La Roche AG)；和WO 99/07734，1999年2月18日公开(等于US6143715；BoehringerIngelheim Canada Ltd.)。
肝硬变和肝细胞癌诱导中涉及HCV。目前对于HCV感染患者的预后不好。HCV感染比其他类型的肝炎更难以治疗，因为没有免疫性或与HCV感染相关的缓和。当前数据表明肝硬化诊断之后四年存活率小于50％。诊断有局部可切除肝细胞癌的患者五年存活率是10-30％，而局部不可切除肝细胞癌的那些患者五年存活率是1％。
参考WO 00/59929(等于US2004002448和US6,608,027；受让人Boehringer Ingelheim(加拿大)Ltd.；2000年10月12日公开)，其公开了下式的肽衍生物 参考A.Marchetti等，Synlett，S1，1000-1002(1999)，其描述HCVNS3蛋白酶的抑制剂的双环类似物的合成。其中公开的化合物具有下面的结构 还参考W.Han等，Bioorganic & Medicinal Chem.Lett，(2000)10，711-713，其描述包含烯丙基和乙基官能团的一些α-酮基酰胺，α-酮基酯和α-二酮的制备。
还参考WO 00/09558(受让人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公开)，它公开了下式的肽衍生物
其中定义了各个要素。那个系列的作为例子的化合物是 还参考WO 00/09543(等于US2002016442和US2002037998；受让人Boehringer Ingelheim Limited；2000年2月24日公开)，它公开了下式的肽衍生物
其中定义了各个要素。那个系列的作为例子的化合物是 目前对丙肝的治疗包括干扰素-α(INFα)和与利巴韦林和干扰素的联合治疗。参见，例如，Beremguer等(1998)Proc.Assoc.Am.Physicians110(2)98-112。这些治疗方法苦于低持续响应速度和时常的副作用。参见，例如，Hoofnagle等(1997)N.Engl.J.Med.336347。目前，对于HCV感染没有疫苗。
进一步参考WO 01/74768(等于US 2003236242；受让人VertexPharmaceuticals Inc)2001年10月11日公开，它公开了作为丙肝病毒NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂的下面通式(R如其中定义)的一些化合物 上面提到的WO 01/74768中公开的具体化合物具有下面的结构式
PCT公开WO 01/77113；WO 01/081325；WO02/08198；WO02/08256；WO 02/08187；WO 02/08244；WO 02/48172；WO 02/08251；和2002年1月18日申请的未决美国专利申请顺序号No.10/052,386公开了作为丙肝病毒NS-3丝氨酸蛋白酶抑制剂的各种类型的肽和/或其他化合物。
对于HCV感染新的治疗和疗法有着需求。对于用于治疗或预防或减轻丙肝的一个或几个症状的化合物有着需求。
对于治疗或预防或减轻丙肝的一个或几个症状的方法有着需求。
对于使用这里提供的化合物调节丝氨酸蛋白酶，特别是HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的活性的方法有着需求。
对于使用这里提供的化合物调节HCV多肽的加工的方法有着需求。
发明概述在很多实施方案中，本发明提供HCV蛋白酶的新的一类抑制剂，含有一种或几种这样的化合物的药物组合物，含有一种或几种这样的化合物的药物制剂的制备方法，和治疗或预防HCV或者减轻丙肝的一个或几个症状的方法。还提供了调节HCV多肽和HCV蛋白酶相互作用的方法。这里提供的化合物中能抑制HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶活性的化合物是优选的。本申请公开了具有式1所示通式结构的化合物
结构式1或者所述化合物的药学可接受盐或溶剂合物，其中(1)R1是-C(O)R5或-B(OR)2；(2)R5是H，-OH，-OR8，-NR9R10，-C(O)OR8，-C(O)NR9R10，-CF3，-C2F5，-C3F7，-CF2R6，-R6，-C(O)R7或NR7SO2R8；(3)R7是H，-OH，-OR8，或-CHR9R10；(4)R6，R8，R9和R10可以相同或不同，各自独立地选自H，烷基，烯烃基，芳基，杂烷基，杂芳基，环烷基，芳基烷基，杂芳基烷基，R14，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)OR11，-[CH(R1’)]pC(O)OR11，-[CH(R1’)]pC(O)NR12R13，-[CH(R1′)]pS(O2)R11，-[CH(R1’)]pC(O)R11，-[CH(R1’)]pS(O2)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)(R′)，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)R11，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)R11，-[CH(R1’)]pCH(OH)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)OR11，-C(O)N(H)CH(R2’)C(O)OR11，-C(O)N(H)CH(R2’)C(O)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)R′，
-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)CH(R3’)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)N(H)CH(R5’)C(O)OR11，和-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)N(H)CH(R5’)C(O)NR12R13；其中R1’，R2’，R3’，R4’，R5’R12，R12和R13可以相同或不同，各自独立地选自H，卤原子，烷基，芳基，杂烷基，杂芳基，环烷基，烷氧基，芳氧基，烯烃基，炔烃基，烷基-芳基，烷基-杂芳基，杂环烷基，芳基-烷基和杂芳烷基；或者R12和R13连接在一起使得这样的化合是环烷基，杂环烷基，芳基或杂芳基；R14存在或不存在，如果存在，则选自H，烷基，芳基，杂烷基，杂芳基，环烷基，烷基-芳基，烯丙基，烷基-杂芳基，烷氧基，芳基-烷基，烯烃基，炔烃基和杂芳烷基；(5)R和R′存在或不存在，如果存在，则可以是相同或不同的，各自独立地选自H，OH，C1-C10烷基，C2-C10烯烃基，C3-C8环烷基，C3-C8杂环烷基，烷氧基，芳基氧，烷硫基，芳基硫，烷基氨基，芳基氨基，氨基，酰胺基，芳基硫氨基，芳基羰基氨基，芳基氨基羧基，烷基氨基羧基，杂烷基，烯烃基，炔烃基，(芳基)烷基，杂芳基烷基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，卤原子，(环烷基)烷基，芳基，杂芳基，(烷基)芳基，烷基杂芳基，烷基-杂环基和(杂环烷基)烷基，其中所述环烷基由3-8个碳原子和0-6个氧原子、氮原子、硫原子或磷原子构成，并且所述烷基有0-6个碳原子；(6)L′是H，OH，烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，环烷基，或杂环基；(7)M′是H，烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，环烷基，芳基烷基，杂环基或氨基酸侧链；或者L′和M′连接在一起形成环结构，使得下式代表的结构式1的部分 (加上编号1和2分别表明一些碳原子和一些氮原子的位置)由结构式2代表 结构式2其中在结构式2中E存在或不存在，如果存在，则是C，CH，N或C(R)；J存在或不存在，并且当J存在时，J是(CH2)p，(CHR-CHR′)p，(CHR)p，(CRR′)p，S(O2)，N(H)，N(R)或O；当J不存在并且G存在时，L直接连接标记的位置2的氮原子；P是0至6的数；L存在或不存在，并且当L存在时，L是C(H)或C(R)；当L不存在时，M存在或不存在；如果M存在而L不存在，则M直接地并且独立地连接E，并且J直接地并且独立地连接E；G存在或不存在，并且当G存在时，G是(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p或(CRR′)p；当G不存在时，J存在并且E直接连接标记的位置1的碳原子；Q存在或不存在，并且当Q存在时，Q是NR，PR，(CR＝CR)，(CH2)p，(CHR)p，(CRR′)p，(CHR-CHR′)p，O，NR，S，SO，或SO2；当Q不存在时，M是(i)直接连接A或者(ii)是L上一个独立的取代基，所述独立的取代基选自-OR，-CH(R)(R′)，S(O)0-2R或-NRR′或者(iii)不存在；当Q和M两个都不存在时，A直接连接L，或者A是E上独立的取代基，所述独立的取代基选自-OR，-CH(R)(R′)，S(O)0-2R或-NRR′或者A不存在；A存在或不存在，如果存在，则A是O，O(R)，(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p，(CRR′)p，N(R)，NRR′，S，S(O2)，-OR，CH(R)(R′)或NRR′；或者A连接M形成环烷基，脂肪族或杂环桥；M存在或不存在，当M存在时，M是卤原子，O，OR，N(R)，S，S(O2)，(CH2)p，(CHR)p(CHR-CHR′)p，或(CRR′)p；或者M连接A形成环烷基，脂肪族或杂环烷基桥；(8)Z′由下面所示(i)，(ii)，(iii)，(iv)或(v)代表(i) 结构式A其中R44选自 并且R77选自


其中R78选自甲基，乙基，异丙基，叔丁基和苯基；(ii) 结构式B其中R79选自 结构式C其中砜环任选地被烷基和环烷基取代；(iv)下面的部分

(v)下面的部分 其中W是-C(＝O)-或-S(O2)-；Z是O或N；并且Y选自




其中Y11选自H，-C(O)OH，-C(O)OEt，-OMe，-Ph，-OPh，-NHMe，-NHAc，-NHPh，-CH(Me)2，1-三唑基，1-咪唑基和-NHCH2COOH；Y12选自H，-C(O)OH，-C(O)OMe，-OMe，F，Cl和Br；Y13选自下面的部分 Y14是MeS(O2)-，-Ac，-Boc，-jBoc，-Cbz，或-Alloc；Y15和Y16可以是相同或不同的，并且各自独立地选自烷基，芳基，杂烷基，和杂芳基；Y17是-CF3，-NO2，-C(O)NH2，-OH，-C(O)OCH3，-OCH3，-OC6H5，-C6H5，-C(O)C6H5，-NH2，或-C(O)OH；和
Y18是-C(O)OCH3，-NO2，-N(CH3)2，F，-OCH3，-C(H2)C(O)OH，-C(O)OH，-S(O2)NH2，或-N(H)C(O)CH3；(9)X由结构式4代表 结构式4其中在结构式4中，a是2，3，4，5，6，7，8或9；b，c，d，e和f可以是相同或不同的，各自独立地是0，1，2，3，4或5；A是C，N，S或O；R29和R29’独立地存在或不存在，如果存在，则可以是相同或不同的，各自独立地是一个或两个取代基，独立地选自H，卤原子，烷基，芳基，环烷基，环烷基氨基，环烷基氨基羰基，氰基，羟基，烷氧基，烷硫基，氨基，-NH(烷基)，-NH(环烷基)，-N(烷基)2，羧基，-C(O)O-烷基，杂芳基，芳烷基，烷基芳基，芳烯烃基，杂芳烷基，烷基杂芳基，杂芳烯基，羟基烷基，芳基氧，芳烷氧基，酰基，芳酰基，硝基，芳基氧羰基，芳烷氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，芳基硫，杂芳基硫，芳烷基硫，杂芳烷基硫，环烯烃基，杂环基，杂环烯基，Y1Y2N-烷基-，Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以是相同或不同的并且独立地选自氢，烷基，芳基和芳烷基；或者R29和R29’连接在一起使得化合成0-6个碳原子的脂肪族或杂脂肪族链；R30存在或不存在，如果存在，则是一个或两个取代基，独立地选自H，烷基，芳基，杂芳基和环烷基；(10)结构式1中的D由结构式5代表 结构式5
其中在结构式5中，R32，R33和R34存在或不存在，如果存在，则独立地是一个或两个取代基，独立地选自H，卤原子，烷基，芳基，环烷基，环烷基氨基，螺烷基，环烷基氨基羰基，氰基，羟基，烷氧基，烷硫基，氨基，-NH(烷基)，-NH(环烷基)，-N(烷基)2，羧基，-C(O)O-烷基，杂芳基，芳烷基，烷基芳基，芳烯烃基，杂芳烷基，烷基杂芳基，杂芳烯烃基，羟基烷基，芳基氧基，芳烷氧基，酰基，芳香烃酰基，硝基，芳基氧羰基，芳烷氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，芳基硫，杂芳基硫，芳烷基硫，杂芳烷基硫，环烯烃基，杂环基，杂环烯烃基，Y1Y2N-烷基-，Y2Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以相同或不同，并且独立地选自氢，烷基，芳基，和芳烷基；或者R32和R34连接在一起使得化合形成环烷基的一部分；g是1，2，3，4，5，6，7，8或9；h，i，j，k，l和m可以是相同或不同的，并且各自独立地是0，1，2，3，4或5；和A是C，N，S或O，(11)条件是，在结构式1中，当结构式2 结构式2是
并且W′是CH或N，排除下面两种情况(i)和(ii)有条件的排除(i)Z′不是-NH-R36，其中R36是H，C6芳基，C10芳基，杂芳基，-C(O)-R37，-C(O)-OR37或-C(O)-NHR37，其中R37是C1-6烷基或者C3-6环烷基；和有条件的排除(ii)R1不是-C(O)OH，-C(O)OH的药学可接受盐，-C(O)OH的酯或者-C(O)NHR38，其中R38选自C1-8烷基，C3-6环烷基，C6芳基，C10芳基，或C7-16芳烷基。
本发明的另一个特征是含有至少一种结构式1的化合物(或者其盐，酯，溶剂合物或异构体)作为活性成分和药学可接受载体或赋形剂的药物组合物。
本发明还提供结构式1的化合物的制备方法，以及治疗例如HCV，AIDS(后天性免疫缺陷综合征)，和相关疾病这样的疾病的方法。这样的治疗方法包括对患有一种或几种上述疾病或者一种或几种相关疾病的患者施用治疗有效量的至少一种结构式1的化合物或者含有至少一种结构式1的化合物的药物组合物。
还公开了至少一种结构式1的化合物在制备用于治疗HCV，AIDS，和相关疾病的药物中的用途。
还公开了治疗丙肝病毒相关疾病的方法，包括施用有效量的一种或几种本发明化合物。
在另一个实施方案中，提供了调节丙肝病毒(HCV)蛋白酶活性的方法，包括将HCV蛋白酶接触一种或几种本发明化合物以及治疗或预防HCV，或者减轻丙肝的一个或几个症状的方法，包括施用有效量的一种或几种本发明的化合物。这样的调节，治疗，预防或减轻也能用本发明的药物组合物或制剂来实现。不局限于理论，相信HCV蛋白酶可以是NS3或NS4a蛋白酶。本发明化合物能抑制这样的蛋白酶。它们还能调节丙肝病毒(HCV)多肽的加工。
本发明的描述除非另有说明，如这里使用的下面的术语在本说明书和权利要求书中自始至终应该理解是具有下面的意义″患者″包括人和动物。
″哺乳动物″意思是人和其他哺乳动物。
″烷基″指可以是直链或支链的并且链中具有大约1至大约20个碳原子的脂肪族烃基。优选的烷基链中包含大约1至大约12个碳原子。更优选的烷基链中包含大约1至大约6个碳原子。支链意思是一个或几个低级烷基，例如甲基，乙基或丙基与线性烷基链连接。″低级烷基″指可以是直链或支链的链中有大约1至大约6个碳原子。烷基可以被一个或几个相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤原子，烷基，芳基，环烷基，氰基，羟基，烷氧基，烷硫基，氨基，-NH(烷基)，-NH(环烷基)，-N(烷基)2，羧基，和-C(O)O-烷基。合适的烷基的非限制性例子包括甲基，乙基，正丙基，异丙基，和叔丁基。
″炔烃基″指可以是直链或支链的并且链中包含大约2至大约15个碳原子的包含至少一个碳-碳三键的脂肪族烃基。优选的炔烃基链中包含大约2至大约12个碳原子；更优选链中包含大约2至大约4个碳原子。支链意思是一个或几个低级烷基，例如甲基，乙基或丙基与线性炔烃基链连接。″低级炔烃基″指可以是直链或支链的链中有大约2至大约6个碳原子。合适的炔烃基的非限制性例子包括乙炔基，丙炔基，2-丁炔基，3-甲基丁炔基。术语″取代的炔烃基″指炔烃基可以被一个或几个相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自烷基，芳基，和环烷基。
″脂肪族″意指并包括直链或支链的烷，烯或炔碳原子链。脂肪族基团可以任选地被一个或几个相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自H，卤代，卤原子，烷基，芳基，环烷基，环烷基氨基，烯烃基，杂环，炔烃基，环烷基氨基羰基，羟基，硫基，氰基，羟基，烷氧基，烷硫基，氨基，-NH(烷基)，-NH(环烷基)，-N(烷基)2，羧基，-C(O)O-烷基，杂芳基，芳烷基，烷基芳基，芳基烯烃基，杂芳烷基，烷基杂芳基，杂芳基烯烃基，杂烷基，羰基，羟基烷基，芳基氧，芳烷氧基，酰基，硝基，氨基，酰胺基，酯，羧酸芳基氧羰基，芳烷氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，烷硫基，芳基硫，杂芳基硫，芳烷基硫，杂芳烷基硫，环烯烃基，杂环基，杂环烯基，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，磺酰胺，亚砜，砜，磺酰基脲，磺酰基，酰肼，异羟肟酸酯，S(烷基)Y1Y2N-烷基-，Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以是相同或不同的并且独立地选自氢，烷基，芳基，和芳烷基。
″杂脂肪族″指包含至少一个杂原子的别的脂肪族基团(例如氧，氮或硫)。术语杂脂肪族包括取代的杂脂肪族。
″芳基″指包括大约6至大约14个碳原子，优选大约6至大约10个碳原子的芳香单环或多环环系统。芳基可以任选地被一个或几个相同或不同的如这里定义的″环系统取代基″取代。合适的芳基的非限制性例子包括苯基和萘基。
″杂烷基″意思是如上定义的烷基，其中一个或几个氢原子被选自N，S，或O的杂原子取代。
″杂芳基″指含有大约5至大约14个成环原子，优选大约5至大约10个成环原子的芳香族单环或多环环系统，其中成环原子中的一个或几个是除了碳原子的元素，例如氮，氧或硫，单独的或化合的。优选的杂芳基含有大约5至大约6个成环原子。″杂芳基″能任选地被一个或几个相同或不同的这里定义的″环系统取代基″取代。杂芳基根名前面的前缀氮杂，氧杂或硫杂指分别作为成环原子存在的至少一个氮原子，氧原子或硫原子。杂芳基的氮原子可以任选地被氧化为相应的N-氧化物。合适的杂芳基非限制性例子包括吡啶基，吡嗪基，呋喃基，噻吩基，嘧啶基，吡啶酮(包括N-取代的吡啶酮类)，异唑基，异噻唑基，唑基，噻唑基，吡唑基，呋咱基，吡咯基，吡唑基，三唑基，1，2，4-噻二唑基，吡嗪基，哒嗪基，喹喔啉基，2，3-二氮杂萘基，羟基吲哚基，咪唑并[1，2-a]吡啶基，咪唑并[1，2-b]噻唑基，苯并呋咱基，吲哚基，氮杂吲哚基，苯并咪唑基，苯并噻吩基，喹啉基，咪唑基，噻吩并吡啶基，喹唑啉基，噻吩并嘧啶基，吡咯并吡啶基，咪唑并吡啶基，异喹啉基，苯并氮杂吲哚基，1，2，4-三嗪基，苯并噻唑基等等。术语″杂芳基″还指部分饱和的杂芳基部分，例如四氢异喹啉基，四氢喹啉基等。
″芳烷基″或″芳基烷基″指芳基-烷基-基团，其中芳基和烷基如前定义。优选芳烷基包括低级烷基。合适的芳烷基非限制性例子包括苄基，2-苯乙基和萘甲基。与母体部分连接的键直达烷基。
″烷基芳基″指烷基-芳基-基团，其中烷基和芳基如前定义。优选烷基芳基包括低级烷基。合适的烷基芳基的非限制性例子是甲苯基。与母体部分连接的键直达芳基。
″环烷基″指包含大约3至大约10个碳原子，优选大约5至大约10个碳原子的非芳香单环或多环系统。优选的环烷基环包含大约5至大约7个成环原子。环烷基可以任选地被一个或几个相同或不同的如上定义的″环系统取代基″取代。合适的单环环烷基的非限制性例子包括环丙基，环戊基，环己基，环庚基等等。合适的多环环烷基的非限制性例子包括1-萘烷，降冰片烷基，金刚烷基等等，以及部分饱和的物质，例如2，3-二氢化茚基，四氢萘基等等。
″卤原子″指氟，氯，溴或碘。优选的是氟，氯，和溴。
″环系取代基″指与例如置换环系上的可利用的氢原子的芳香或非芳香环系连接的取代基。环系取代基可以是相同或不同的，各自独立地选自烷基，烯烃基，炔烃基，芳基，杂芳基，芳烷基，烷基芳基，杂芳烷基，杂芳基烯烃基，杂芳基炔烃基，烷基杂芳基，羟基，羟基烷基，烷氧基，芳基氧，芳烷基氧，酰基，芳香烃酰基，卤原子，硝基，氰基，羧基，烷氧羰基，芳基氧羰基，芳烷氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷硫基，芳基硫，杂芳基硫，芳烷基硫，杂芳烷基硫，环烷基，杂环基，，-C(＝N-CN)-NH2，-C(＝NH)-NH2，-C(＝NH)-NH(烷基l)，Y1Y2N-，Y1Y2N-烷基-，Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可以是相同或不同的并且独立地选自氢，烷基，芳基，环烷基和芳烷基。″环系取代基″还指同时置换环系上两个邻接的碳原子上的两个可获得的氢原子(每个碳上一个H)的单一部分。这样的部分的例子是亚甲基二氧，亚乙基二氧，-C(CH3)2-和形成下面结构的部分 ″杂环基″或″杂环烷基″或″杂环″指含有大约3至大约10个成环原子，优选大约5至大约10个成环原子的非芳香饱和单环或多环环系，其中环系中一个或几个原子是碳以外的元素，例如氮，氧或硫原子，单独地或化合地。环系中没有邻接的氧和/或硫原子。优选的杂环基包含大约5至大约6个成环原子。杂环基根名前面的前缀氮杂，氧杂或硫杂指分别作为成环原子存在的至少一个氮原子，氧原子或硫原子。杂环基环中的所有-NH可以被保护，例如作为-N(Boc)，-N(CBz)，-N(Tos)基团等等；这样的保护作用也认为是本发明的一部分。杂环基可以任选地被一个或几个相同或不同的如上定义的“环系取代基”取代。杂环基的氮原子或硫原子可以任选地被氧化为相应的N-氧化物，S-氧化物或S，S-二氧化物。合适的单环杂环基环非限制性例子包括哌啶基，吡咯烷基，哌嗪基，吗啉基，硫代吗啉基，噻唑烷基，1，4-二氧戊环基，四氢呋喃基，四氢噻吩基，内酰胺或内酯等等。
应该注意到本发明的含有杂原子的环系中，与N，O或S邻接的碳原子上没有羟基，以及在与另一个杂原子邻接的碳原子上没有N或S基团。因此，例如，在下面的环中 没有-OH与标记2和5的碳直接连接。
还应该注意，互变异构形式，例如下面的部分 被认为在本发明的一些实施方案中是等同的。
″炔烃基烷基″指炔烃基-烷基-基团，其中炔烃基和烷基如上所述。优选的炔烃基烷基包含低级炔烃基和低级烷基。与母体部分连接的键直达烷基。合适的炔烃基烷基的非限制性例子包括炔丙基甲基。
″杂芳烷基″指其中杂芳基和烷基如上定义的杂芳基-烷基-基团。优选的杂芳烷基包含低级烷基。合适的杂芳烷基的非限制性例子包括吡啶基甲基，和喹啉-3-基甲基。与母体部分连接的键直达烷基。
″羟基烷基″指其中烷基如上定义的HO-烷基-基团。优选的羟基烷基包含低级烷基。合适的羟基烷基的非限制性例子包括羟甲基和2-羟乙基。
″酰基″意思是H-C(O)-，烷基-C(O)-，或环烷基-C(O)-基团，其中各种基团如先前描述的。与母体部分连接的键直达羰基。优选的酰基包含低级烷基。合适的酰基的非限制性例子包括甲酰基，乙酰基，和丙酰基。
″芳香烃酰基″指芳基-C(O)-基，其中芳基如前定义。与母体部分连接的键直达羰基。合适的基团的非限制性例子包括苯甲酰基和1-和2-萘酰基。
″烷氧基″指烷基-O-基，其中烷基如前所述。合适的烷氧基的非限制性例子包括甲氧基，乙氧基，正丙氧基，异丙基氧基，和正丁氧基。与母体部分连接的键直达醚氧。
″芳基氧″指芳基-O-基团，其中芳基如上定义。合适的芳基氧基团的非限制性例子包括苯氧基和萘氧基。与母体部分连接的键直达醚氧。
″芳烷基氧″指芳烷基-O-基团，其中芳烷基如上描述。合适的芳烷基氧基团的非限制性例子包括苄基氧和1-或2-萘甲氧基。与母体部分连接的键直达醚氧。
″烷硫基″指烷基-S-基团，其中烷基如前所述。合适的烷硫基的非限制性例子包括甲硫基和乙硫基。与母体部分连接的键直达硫基。
″芳基硫″指芳基-S-基团，其中芳基如上定义。合适的芳基硫基团的非限制性例子包括苯硫基和萘硫基。与母体部分连接的键直达硫。
″芳烷基硫″指芳烷基-S-基团，其中芳烷基如上定义。合适的芳烷基硫基团的非限制性例子包括苄基硫基。与母体部分连接的键直达硫。
″烷氧羰基″指烷基-O-CO-基团。合适的烷氧羰基的非限制性例子包括甲氧羰基和乙氧羰基。与母体部分连接的键直达羰基。
″芳基氧羰基″指芳基-O-CO-基团。合适的芳基氧羰基的非限制性例子包括苯氧羰基和萘氧羰基。与母体部分连接的键直达羰基。
″芳烷氧羰基″指芳烷基-O-C(O)-基团。合适的芳烷氧羰基的非限制性例子是苄氧羰基。与母体部分连接的键直达羰基。
″烷基磺酰基″指烷基-S(O2)-基团。优选的基团是其中烷基是低级烷基的那些。与母体部分连接的键直达磺酰基。
″芳基磺酰基″指芳基-S(O2)-基团。与母体部分连接的键直达磺酰基。
术语″取代的″指特定原子上一个或几个氢原子被选自指定基团的基团置换，条件是指定原子的正常化合价在存在的环境下不超出，并且取代作用产生稳定的化合物。只有这样的化合产生稳定的化合物时取代基和/或变相的化合才是允许的。所谓″稳定化合物″或″稳定结构″意思是足以稳定到从反应混合物分离成有用纯度程度并且配制成有效治疗药物的化合物。
术语″任选地被取代的意思是被特定基团，原子团或部分任意取代。
针对化合物的术语″分离的″或″以分离形式″指从合成工艺或天然来源或者它们的组合分离之后所述化合物的物理状态。针对化合物的术语″纯化的″或″以纯化形式″指从纯化过程或这里描述的或者本领域技术人员公知的方法，具有足以用这里描述的或本领域技术人员公知的标准分析技术表征的纯度获得之后的所述化合物的物理状态。
还应该注意，假设这里的说明书，方案，实施例和表中带有不饱和化合价的任何碳原子和杂原子具有足够数目的氢原子来满足化合价。
当称化合物中的功能团″被保护″时，意思是当让化合物反应时，这个基团是以被修饰形式以阻止在被保护位点发生不期望的反应。本领域技术人员对合适的保护基团是公认的或者参考标准教科书，例如，T.W.Greene等，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York。
在任何构成部分或者在结构式1中，当任何变项(例如芳基，杂环，R2，等)存在一次以上时，每次存在时它的定义独立于其他发生地方处它的定义。
如这里使用的，术语″组合物″意在包括含有特定量特定成分的产物，以及由特定量特定成分混合而直接或间接得到的任何产物。
本发明的化合物的前体药物，和溶剂合物也包括在其中。这里使用的术语″前体药物″指对受治疗者施用时，通过代谢或化学过程经历化学转化，得到结构式1的化合物或其盐和/或溶剂合物的药物前体化合物。T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs ad Novel Delivery Systems(1987)A.C.S.专题研讨会第14卷，以及在Bioreversible Carriers inDrug Design，(1987)Edward B.Roche，编著，American PharmaceuticalAssociation and Pergamon出版社出版，中提供了前体药物的讨论，这两篇文献在此引作参考。
″溶剂合物″指本发明的化合物与一个或几个溶剂分子的物理缔合。这种物理缔合涉及不同程度的离子和共价键键合，包括氢键。在某些情况下，溶剂合物能被分离，例如当结晶固体的晶格中掺入一个或几个溶剂分子时。″溶剂合物″包括溶液相和可分离的溶剂合物。合适的溶剂合物的非限制性例子包括乙醇化物，甲醇化物等等。″水合物″是其中溶剂分子是H2O的溶剂合物。
″有效量″或″治疗有效量″指描述有效抑制针对的病症从而产生期望的治疗性，减轻性，抑制性或预防性效果的本发明的化合物或组合物的量。
结构式1的化合物能形成盐，所述盐也在本发明的范围之内。除非另有说明，引用这里的式1的化合物时理解是包括引用其盐。这里使用的术语″盐″指与无机酸和/或有机酸形成的酸性盐，以及和无机碱和/或有机碱形成的碱性盐。另外，当式1的化合物即包含碱性部分，例如但不限于吡啶或咪唑，也包含酸性部分，例如但不限于羧酸时，可以形成两性离子(″内盐″)并且包括在这里使用的术语″盐″中。药学可接受(即无毒的，生理可接受的)盐是优选的，但是其他盐也是有用的。例如通过使式1的化合物在基质中与一定量的酸或碱反应，例如等当量的，可以形成式1的化合物的盐，盐在基质中形成沉淀或者在水基质中形成沉淀之后冷冻干燥。
举例的酸加成盐包括乙酸盐，抗坏血酸盐，苯甲酸盐，苯磺酸盐，硫酸氢盐，硼酸盐，丁酸盐，柠檬酸盐，樟脑酸盐，樟脑磺酸盐，富马酸盐，盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，乳酸盐，马来酸盐，甲磺酸盐，萘磺酸盐，硝酸盐，草酸盐，磷酸盐，丙酸盐，水杨酸盐，琥珀酸盐，硫酸盐，酒石酸盐，硫代氰酸盐，甲苯磺酸盐，等等。另外，例如下面的文献中讨论了普遍认为适合从碱性药物化合物形成药学有用的盐的酸P.Stahl等，Camille G.(编著)Handbook of Pharmaceutical Salts.Properties，Selection and Use.(2002)ZurichWiley-VCH；S.Berge等，Journal ofPharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.ofPharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等，The Practice ofMedicinal Chemistry(1996)，Academic Press，New York；和The OrangeBook(Food & Drug Administration，Washington，D.C.网站)。这些公开物在此引作参考。
举例的碱性盐的例子包括铵盐，碱金属盐，例如钠盐，锂盐，和钾盐，碱土金属盐，例如钙盐和镁盐，与有机碱(例如有机胺)的盐，例如苄二环己基胺，叔丁基胺，和与氨基酸例如精氨酸，赖氨酸等的盐。碱性含氮的基团可以被下面的试剂季胺化例如低级烷基卤化物(例如甲基，乙基，和丁基氯化物，溴化物和碘化物)，硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯，二乙酯，和二丁酯)，长链卤化物(例如癸基，月桂基，和十八烷基氯化物，溴化物和碘化物)，芳烷基卤化物(例如苄基和苯乙基溴)，和其他。
所有这样的酸性盐和碱性盐都是本发明范围内的药学可接受盐，并且认为所有的酸性和碱性盐等价于为了本发明目的的相应的化合物的自由形式。
本发明的一种或几种化合物还可以以溶剂合物存在或者任选地转化为溶剂合物。溶剂合物的制备是普遍公知的。因此，例如，M.Caira等，J.Pharmaceutical Sci，93(3)，601-611(2004)描述了抗真菌fluconazole的乙酸乙酯以及水的溶剂合物的制备。E.C.van Tonder等，AAPS Pharm Sci Tech.，5(1)，第12章(2004)；和A.L.Bingham等，Chem.Commun.，603-604(2001)描述了溶剂合物，半溶剂合物，水合物等的相似制备。典型的非限制性方法包括将本发明化合物溶解于高于室温的期望量的期望溶剂(有机溶剂或水或它们的混合物)中，以足够形成结晶的速度将溶液冷却，然后通过标准方法分离。利用分析技术，例如红外色谱，证明溶剂(或水)在结晶中以溶剂合物(或水合物)存在。
式1的化合物，其盐，溶剂合物，酯和前体药物可以以它们互变异构形式存在(例如，作为酰胺或亚氨醚)。所有这样的互变异构体在这里是本发明的一部分。
本发明化合物(包括化合物的盐，溶剂合物和前体药物以及前体药物的盐和溶剂合物)的所有立体异构体(例如，几何异构体，旋光异构体等等，例如由于各种取代基上不对称碳原子而可以存在的那些，包括对映异构体(其甚至可以不存在不对称碳原子)，旋转异构体，阻转异构体，和非对映体，都包括在本发明范围内，象位置异构体(4-吡啶基和3-吡啶基)。本发明的化合物的各立体异构体可以，例如，是基本上没有其他异构体的，或者可以与所有其他，或者选择的其他立体异构体混合成，例如消旋体。本发明的手性中心可以具有IUPAC 1974建议书定义的S或R构型。术语″盐″，″溶剂合物″，″前体药物″等的使用意在同等适用于本发明化合物的对映异构体，立体异构体，旋转异构体，互变异构体，位置异构体，外消旋体或前体药物的盐，溶剂合物和前体药物。
式1化合物的多晶形，和式1化合物的盐，溶剂合物和前体药物的多晶形也包括在本发明内。
一般情况下，本申请中结构式上箭头→和←指涉及的结构式与其母体结构式结构中所示点的各个连接点。
在一个实施方案中，本发明公开了作为HCV蛋白酶，特别是HCVNS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的抑制剂的式1的化合物，或者其药学可接受衍生物，其中各种定义如上所述。
在另一个实施方案中，R1是酮酰胺，酸，酮酸，酮酯，酮醛，二酮，硼酸或三氟酮。
在另一个实施方案中，本发明公开了式1的化合物，其结构式2代表结构式1的部分 是结构式2 其中箭头→和←指结构式2与结构式1所示点的连接点，并且G和J可以存在或不存在，如果存在，可以是相同或不同的，并且独立地选自(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p，和(CRR′)p；
A和M可以存在或不存在，如果存在，可以是相同或不同的，并且独立地选自O，S，S(O2)，N(R)，(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p，和(CRR′)p；或者A和M连接在一起形成环烷基或杂环桥；和Q可以存在或不存在，如果存在，则是(CH2)p，N(R)，O，S，S(O2)，(CHR)p，或(CRR′)p。
当Q不存在时，则M或A之一不存在，剩余的那个(存在的)A或M能任选地形成带有在结构式1中的碳C(R)或C(R′)环烷基或杂环结构。下面的一些结构给出一些代表性例子。
在本发明的一个实施方案中，结构式2代表的部分选自下面的结构
其中n＝0-4。
在本发明的另一个实施方案中，结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构
在本发明的另一个实施方案中，结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构 其中X′是H，F，Cl或Br。
在本发明的另一个实施方案中，结构式2代表的结构式1的部分 结构式2
是 Q可以存在或不存在，如果Q不存在，则M直接连接A。
在本发明的另一个实施方案中，结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构 在本发明的另一个方面中，结构式2代表的结构式1的部分 结构式2是
在本发明的另一个方面中，结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构 在本发明的另一个方面中，结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构
在本发明的另一个方面中，结构式2代表的结构式1的部分 结构式2是 并且R20选自下面的结构
在本发明的另一个方面中，结构式2代表的结构式1的部分 结构式2是 并且R21和R22可以相同或不同并且独立地选自下面的结构
在本发明的另一个方面中，L和M不存在，并且J直接连接E。
在本发明的另一个方面中，L，J和M不存在并且E直接连接N。
在本发明的另一个方面中，G和M不存在。
在本发明的另一个方面中，M′是
在本发明的另一个方面中，X选自下面的结构 并且R55是烷基，环烷基，氨基甲酸酯或脲；并且n＝0-5。
在本发明的另一个方面中，X选自下面的结构 在本发明的另一个方面中，R1是酮酰胺，酮醛，二酮，酮酸或酮酸酯。
在本发明的另一个实施方案中，R1是-C(O)C(O)NR9R10；R9是H；并且R10是H，-R14，-[CH(R1’)]pC(O)OR11，-[CH(R1’)]pC(O)NR12R13，-[CH(R1’)]pS(O2)R11，-[CH(R1’)]pS(O2)NR12R13，
-[CH(R1’)]pC(O)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)C(H)(R2’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)C(H)(R2’)C(O)NR12R13，或-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2)(R′)。
在本发明的另一个实施方案中，R10是H，-R14，-CH(R1’)C(O)OR11，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)R11，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)NR12R13，或-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)(R′)；R1’是H或烷基；并且R2’是苯基，取代的苯基，杂原子取代的苯基，环烷基，杂环烷基，哌啶基或吡啶基。
在本发明的另一个实施方案中，R1’是H。
在本发明的另一个实施方案中，R11是H，甲基，乙基，烯丙基，叔丁基，苄基，α-甲基苄基，α，α-二甲基苄基，1-甲基环丙基或1-甲基环戊基；R′是羟甲基或-CH2C(O)NR12R13；R2’独立地选自下面的结构
其中U1和U2可以相同或不同，并且独立地选自H，F，-CH2C(O)OH，-CH2C(O)OMe，-CH2C(O)NH2，-CH2C(O)NHMe，-CH2C(O)NMe2，叠氮基，氨基，羟基，取代的氨基和取代的羟基；U3和U4是相同或不同，并且独立地选自O或S；U5是烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂烷基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基羰基，芳基羰基，杂烷基羰基，杂芳基羰基，烷氧羰基，芳基氧羰基，杂芳基氧羰基，烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，或杂芳基氨基羰基或者它们的组合；NR12R13选自下面的 U6是H，OH，或CH2OH，并且R14选自H，-CH3，Et，正丙基，甲氧基，环丙基，n-丁基，1-丁-3-炔，苄基，α-甲基苄基，苯乙基，烯丙基，1-丁-3-烯基，-OCH3和环丙基甲基。
在本发明的另一个实施方案中，R1选自下面的结构
在本发明的另一个方面中，D和X一起形成二价C7-C12没有支化的烃连接链，形成14-19元大环的一部分。
在本发明的另一个方面中，D和X一起形成C8或C9没有支化的烃连接链，形成15或16元杂环的一部分。
在本发明的另一个方面中，D和X一起形成二价C7-C12没有支化的烯连接链，形成具有一个不饱和度的14-19元大环的一部分。
在本发明的另一个方面中，D和X一起形成C8或C9没有支化的烯连接链，形成具有一个不饱和度的15或16元杂环的一部分。
在本发明的另一个方面中，D和X一起形成二价C2-C12没有支化的脂肪族链，形成9-19元杂环的一部分。
在本发明的另一个方面中，D选自下面的结构 在本发明的另一个方面中，下面代表的结构式1的部分 选自下面的结构
在本发明的另一个实施方案中，Z′选自
在本发明的另一个实施方案中，W是C＝O。
在本发明的另一个实施方案中，Z是N。
在本发明的另一个实施方案中，Y选自下面的部分

其中Y17是CF3，NO2，C(O)NH2，OH，NH2或C(O)OH；并且Y18是F或C(O)OH。
在本发明的另一个实施方案中，Y选自下面的结构

其中Y17是CF3，NO2，C(O)NH2，OH，NH2或C(O)OH；并且Y18是F或C(O)OH。
在本发明的另一个实施方案中，Y选自下面的结构
在本发明的另一个实施方案中，Y选自下面的结构 W′是N或O；
R23是H，烷基，芳基，杂芳基，环烷基或杂环烷基，其中各个所述芳基，杂芳基，环烷基，杂环烷基可以被烷基部分取代；R24是H，烷基，芳基，杂芳基，环烷基或杂环烷基，其中各个所述芳基，杂芳基，环烷基，杂环烷基可以被烷基部分取代；或者R23和R24一起形成含有碳环或杂环的环；R25是H，烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，烷基氨基，芳基氨基，杂烷基氨基或环烷基，R26选自H，氨基甲酸酯，磺酰胺，烷基羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基，磺酰基，杂烷基磺酰基，芳基氧羰基，杂烷氧羰基，杂芳基氧羰基，烷基氨基羰基，芳基氨基羰基和脲；R27是H，烷基，环烷基，芳基或杂芳基；R28是H，烷基，杂烷基，芳基或杂芳基；和X′-O-是醚，酯或氨基甲酸酯。
在本发明的另一个实施方案中(a)结构式2代表的式1的部分 结构式2是
(b)R1选自下面的结构
其中R″＝H， (c)Z′由下面所示的(i)，(ii)，或(iii)之一代表(i) 结构式A其中R44选自 并且R77选自

其中R78选自甲基，乙基，异丙基，叔丁基和苯基；(ii) 结构式B
其中R79选自 结构式C其中砜环任选地被烷基和环烷基取代；和(d)下式代表的式1的部分 选自下面的结构
并且n＝0至3。
下面的化合物是本发明实施方案的非限制性代表







本发明的另一方面提供了用于治疗与HCV相关疾病的含有作为活性成分的式1的化合物的药物组合物。该组合物一般含有药学可接受载体。这种组合物可以含有一种或几种另外的试剂，例如抗病毒剂，干扰素或PEG化干扰素等。优选的抗病毒剂是利巴韦林并且优选的干扰素是α-干扰素。
治疗与HCV蛋白酶相关疾病的方法包括对需要这样治疗的患者施用治疗有效量的式1的化合物，或者含有治疗有效量的式1的化合物的药物组合物。给药可以是口服或皮下。
式1的化合物可以用于生产治疗与HCV蛋白酶相关疾病的药物，例如，该方法包括使式1的化合物与药学可接受载体密切接触。本发明的这些和其他方面将在下面进一步详细描述。
在上面描述的实施方案中，本发明公开了作为HCV蛋白酶的抑制剂，特别是HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的式1的化合物，捉其药学可接受衍生物，其中各种定义如上所述。
在另一个实施方案中，本发明提供含有本发明肽作为活性成分的药物组合物。药物组合物一般另外含有药学可接受载体稀释剂，赋形剂或载体(这里统称作载体材料)。因为它们的HCV抑制活性，这样的药物组合物具有治疗丙肝和相关疾病的用途。HCV抑制活性还能带来本发明的化合物和/或组合物用于治疗与HCV相关或相联系疾病(例如艾滋病等)的用途。
在另一个实施方案中，本发明公开了含有本发明化合物作为活性成分的药物组合物的制备方法。在本发明的药物组合物和方法中，一般以与根据想要的给药方式合适地选择的合适的载体材料混合施用活性成分，即口服片剂，胶囊(固体填充的，半固体填充的或液体填充的)，构成粉末剂，口服凝胶，酏剂，可分散颗粒剂，糖浆，混悬剂等等，与经典药学惯例吻合。例如，对于片剂或胶囊形式口服给药，活性药物成分可以与任何口服无毒药学可接受惰性载体混合，例如乳糖，淀粉，蔗糖，纤维素，硬脂酸镁，磷酸二钙，硫酸钙，滑石，甘露糖醇，乙醇(液体形式)等。此外，当期望或需要时，混合物中还可以掺入合适的粘合剂，润滑剂，崩解剂和着色剂。粉末剂和片剂可以含有大约5％至大约95％本发明组合物。
合适的粘合剂包括淀粉，明胶，天然糖，谷类甜料，天然的和合成的树胶，例如阿拉伯胶，藻酸钠，羧甲基纤维素，聚乙二醇和蜡。润滑剂中，这些剂型中使用的可以提到硼酸，苯甲酸钠，乙酸钠，氯化钠等等。崩解剂包括淀粉，甲基纤维素，瓜尔胶等等。
适当时还可以含有甜味剂和矫味剂和防腐剂。下面更详细地讨论上面提到的一些术语，即崩解剂，稀释剂，润滑剂，粘合剂等等。
另外，可以将本发明的组合物配制成持续释放形式，提供速度控制释放的任何一种或几种成分或活性成分，以达到最佳治疗作用，即HCV抑制活性等。合适的持续释放的剂型包括含有几层充满活性成分的不同崩解速度或受控释放聚合体基质的层合片剂和含有这样的充满的或制成胶囊的多孔聚合体基质的成型的片剂形式或胶囊。
液体形式制剂包括溶液，混悬剂和乳剂。作为例子可以提到用于肠胃外注射的或者加了用于口服溶液，混悬剂和乳剂的甜料和调和剂的水或水-丙二醇溶液。液体形式制剂还可以包括用于鼻内给药的溶液。
适合吸入的气雾剂制剂可以包括溶液和粉末形式的固体，其可以与药学可接受载体，例如惰性压缩气体，例如氮气，混合。
为了制备栓剂，首先熔解低熔点蜡，例如脂肪酸甘油酯，例如椰子油，的混合物，并且通过搅拌或类似混合将活性成分均匀分散在其中。然后将熔融均匀混合物倒入适当大小模子中，让冷却从而固化。
还包括在使用之前立刻转化为口服或肠胃外给药的液体形式制剂的固体形式制剂。这样的液体剂型包括溶液，混悬剂和乳剂。
本发明的化合物还可以经皮送递。经皮组合物可以采取乳膏，洗剂，气雾剂和/或乳剂的形式并且能包括在本领域为此目的常规的基质型或贮存型透皮贴中。
本发明的化合物还可以口服，静脉内，鼻内或皮下给药。
本发明的化合物还可以包括单位剂型的制剂。在这样的剂型中，制剂再分成含有适量活性成分，例如实现期望目的的有效量，的合适大小的单位剂量。
制剂单位剂量中本发明活性成分的量一般可以根据特定应用而变化或调节，从大约1.0毫克至大约1,000毫克，优选从大约1.0毫克至大约950毫克，更优选从大约1.0毫克至大约500毫克，典型地从大约1毫克至大约250毫克。使用的实际剂量可以根据患者年龄，性别，体重和要治疗的病症的严重程度而变化。这样的技术是本领域技术人员公知的。
一般情况下，每天可以1或2次施用含有活性成分的人口服剂型。给药量和次数根据临床医生判断来调节。对于口服给药，一般建议日用量方案范围是每天大约1.0毫克至大约1000毫克，一次或分开给药。
下面说明一些有用术语胶囊剂-指由甲基纤维素，聚乙烯醇，或变性明胶或淀粉制成的用于支持或包含含有活性成分的组合物的特定容器或外壳。硬壳胶囊一般由相对高凝胶强度骨架和猪皮明胶的混合物制成。胶囊本身可以含有少量染料，不透明物，增塑剂和防腐剂。
片剂-指含有活性成分和合适的稀释剂的压制或模成型固体剂型。将通过湿性造粒，干性造粒或通过压缩而获得的混合物或颗粒物压制，能制备片剂。
口服凝胶-指分散在或溶解在亲水性半固体基质中的活性成分。
用于勾兑的粉末剂指含有活性成分和在水或液中能悬浮的合适的稀释剂的粉末混合物。
稀释剂-指通常构成组合物或剂型的主要部分的物质。合适的稀释剂包括糖类，例如乳糖，蔗糖，甘露糖醇和山梨糖醇；从小麦、玉米、水稻和马铃薯得到的淀粉；和纤维素，例如微晶纤维素。组合物中稀释剂的量范围可以是组合物总重量的大约10％至大约90％，优选大约25％至大约75％，更优选大约30％至大约60％重量比，更优选大约12％至大约60％。
崩解剂-指向组合物中加入以帮助它破碎(崩解)并且释放药物的物质。合适的崩解剂包括淀粉；″凉水可溶解的″改性淀粉，例如羧甲基钠淀粉；天然和合成树胶，例如槐树豆胶，梧桐胶，瓜尔胶，黄耆胶和琼脂；纤维素衍生物，例如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠；微晶纤维素和交联微晶纤维素，例如sodium croscarmellose；藻酸盐，例如藻酸和藻酸钠；粘土，例如膨润土；和泡腾剂混合物。组合物中崩解剂的量范围可以是组合物重量的大约2％至大约15％，更优选大约4％至大约10％重量比。
粘合剂-指将粉末粘合或“胶合”在一起使得它们通过形成颗粒而内聚在一起的物质，这样作为制剂中的″粘合剂″。粘合剂会增强稀释剂或膨胀剂中已经获得的内聚强度。合适的粘合剂包括糖类，例如蔗糖；从小麦、玉米、水稻和马铃薯获得的淀粉；天然树胶，例如阿拉伯胶，明胶和黄耆胶；海藻衍生物，例如藻酸，藻酸钠和藻酸铵钙；纤维素材料，例如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠和羟丙基甲基纤维素；聚乙烯吡咯烷酮；和无机物，例如硅酸铝镁。组合物中粘合剂的量范围可以是组合物重量的大约2％至大约20％，更优选大约3％至大约10％重量比，更优选大约3％至大约6％重量比。
润滑剂-指加入剂型中在压制之后使片剂，颗粒剂等通过减小摩擦或磨损而从模子或模上释放下来的物质。合适的润滑剂包括金属硬脂酸盐，例如硬脂酸镁，硬脂酸钙或硬脂酸钾；硬脂酸；高熔点蜡；和水溶性润滑剂，例如氯化钠，苯甲酸钠，乙酸钠，油酸钠，聚乙二醇和亮氨酸。通常在压制之前的最后步骤加入润滑剂，因为它们必须存在于颗粒的表面上，在片剂和片剂压片机之间。组合物中润滑剂的量的范围可以是组合物重量的大约0.2至大约5％，优选大约0.5至大约2％，更优选大约0.3至大约1.5％重量比。
助流剂-防止碎裂并改进造粒的流动特征，使得流动平滑并均匀的材料。合适的助流剂包括二氧化硅和化石。组合物中助流剂的量的范围可以是组合物总重量的大约0.1％至大约5％，优选大约0.5％至大约2％重量比。
着色剂-对组合物或剂型提供颜色的赋形剂。这样的赋形剂可以包括食品级染料和吸附在合适的吸附剂例如粘土或氧化铝上的食品级染料。着色剂的量可以是组合物重量的大约0.1％至大约5％，优选大约0.1％至大约1％重量比。
生物可利用率-指与标准物或对照物相比，施用的剂型被吸收到身体循环中的活性药物成分或治疗部分的比例和程度。
制备片剂的常规方法是公知的。这样的方法包括干性方法，例如直接压片和通过压缩压制造粒，或者湿性方法或其他特殊操作。制备其他给药剂型的常规方法，例如，胶囊，栓剂等等也是公知的。
本发明另一个实施方案公开了上面公开的药物组合物用于治疗疾病，例如丙肝等，的用途。所述方法包括对患有这样疾病或者需要这样治疗的患者施用治疗有效量的本发明药物组合物。
在另一个实施方案中，本发明的化合物可以以单一治疗方式或联合治疗(例如，双重组合，三联组合等)方式，例如，与抗病毒和/或免疫调节剂联合，被用于治疗人HCV。这样的抗病毒和/或免疫调节剂的例子包括利巴韦林(购自Schering-Plough Corporation，Madison，新泽西)和LevovirinTM(购自ICN Pharmaceuticals，Costa Mesa，加利福尼亚)，VP50406TM(购自Viropharma，Incorporated，Exton，宾夕法尼亚)，ISIS 14803TM(购自ISIS Pharmaceuticals，Carlsbad，加利福尼亚)，HeptazymeTM(购自Ribozyme Pharmaceuticals，Boulder，科罗拉多)，VX497TM(购自Vertex Pharmaceuticals，Cambridge，麻萨诸塞州)，ThymosinTM(购自SciClone Pharmaceuticals，San Mateo，加利福尼亚)，MaxamineTM(Maxim Pharmaceuticals，San Diego，加利福尼亚)，霉酚酸酯(购自Hoffman-LaRoche，Nutley，新泽西)，干扰素(例如干扰素-α，PEG-干扰素α偶联物)等等。″PEG-干扰素α偶联物″是与PEG分子共价连接的干扰素α分子。详细说明的PEG-干扰素α偶联物包括PEG化干扰素α-2a形式的干扰素α-2a(RoferonTM，购自HoffmanLa-Roche，Nutley，新泽西)(例如，以PegasysTM商品名出售)，PEG化干扰素α-2b形式的干扰素α-2b(IntronTM，购自Schering-PloughCorporation)(例如，以PEG-IntronTM商品名出售)，干扰素α-2c(Berofor AlphaTM，购自Boehringer Ingelheim，Ingelheim，德国)或者通过测定天然存在的干扰素α的共有序列确定的共有区干扰素(InfergenTM，购自Amgen，Thousand Oaks，加利福尼亚)。
如上文所述，本发明还包括本发明化合物的互变异构体，旋转异构体，对映体和其他立体异构体。因此，本领域技术人员明白，本发明化合物中的一些可以以合适的异构体形式存在。合适的变异也包括在本发明范围内。
本发明另一个实施方案公开了制备这里公开的化合物的方法。化合物可以通过本领域公知的几种技术制备。下面反应方案中略述了代表性说明的步骤。通过制备实施例进一步举例说明这里公开的本发明，但是这些实施例不应该解释为限制本发明的范围，本发明的范围是后面权利要求书中定义的。其他途径和类似结构对于本领域技术人员是显而易见的。
应该明白，下面详细说明的方案描述几个本发明代表性化合物的制备，任何天然和非天然氨基酸的合适的取代会导致根据这样的取代作用的期望的化合物的生成。这样的改变包括在本发明范围内。
对于下面的描述步骤，使用下面的缩写AcOH乙酸；ADDP1，1′-(偶氮dicarbobyl)二哌啶Boc叔丁基氧或叔丁氧羰基；tBu，TBu或But叔丁基；Cbz苄氧羰基；Bop苯并三唑-1-基-氧-三(二甲基氨基)六氟磷酸酯Bn或Bzl苄基Bz苯甲酰基Chg环己基甘氨酸Cp环戊基二烯基DCM二氯甲烷；DCC1，3-二环己基碳化二亚胺；DEAD二乙基偶氮二羧酸DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶DMFN，N-二甲基甲酰胺；DMSO二甲亚砜；
EDCI1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐；Et乙基；EtOAc乙酸乙酯；Et2O乙醚；HATUO-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基uroniumHOOBt3-羟基-1，2，3-苯并三嗪-4(3H)-酮；HOBtN-羟基苯并三唑；iBoc异丁氧羰基；iPr异丙基；KHMDS六甲基二甲硅烷基酰胺钾；LiHMDS六甲基二硅叠氮化物；Me甲基；MS质谱；NBuLi正丁基锂；NMMN-甲基吗啉；NMR核磁共振Phg苯基甘氨酸；Ph苯基；Pd/C炭钯催化剂；PyBrOP溴-三-吡咯烷磷瓮六氟磷酸盐；TBuNCO异氰酸叔丁酯；TEMPO2，2，6，6-四甲基-1-哌啶基氧；THF四氢呋喃；THP四氢呋喃；TMSI三甲基甲硅烷碘；T3N三乙胺；Ts对-甲苯磺酰。
WO 01/77113；WO01/081325；WO 02/08198；WO 02/08256；WO02/08187；WO 02/08244；WO 02/48172；WO 02/08251；和2002年1月18日申请的审而未决美国专利申请系列号No.10/052,386中公开了下面合成仪程序中使用的几种中间体和/或制备实施例。这些申请的公开内容在此引作参考。
一般制备方案和制备实施例的步骤方案1 方案2
方案3 制备实施例的步骤制备实施例1 步骤A 利用(1)Myers，A.G.；Gleason，J.L.；Yoon，T.；Kung，D.W.；J.Am.Chem.Soc 1997，119，656；(2)Myers，A.G.；Schnider，P.；Kwon，S.；Kung，D.W.；J.Org.Chem.，1999，64，3322.；或(3)Myers，A.G.；Gleason，J.L.；Org.Synth.1998，76，57的方法能完成1b的合成。
用无水LiCl(16.80克，400毫摩尔)处理胺1a(24克，120毫摩尔)的THF(300毫升)溶液0.5小时并且搅拌直到反应混合物变得均匀，反应混合物冷却至0℃，并且用LiHMDS(66.80克，400毫摩尔的300毫升THF的溶液)的THF溶液处理20分钟。反应混合物在0℃下搅拌0.5小时并且用6-溴己烯(19.44克，120毫摩尔)处理并且在室温下搅拌24小时。
反应混合物溶解于1M HCl水溶液中，并且真空浓缩去除THF。大多数含水层进一步用3M HCl(300毫升)水溶液稀释，并且用乙醚(2×200毫升)萃取。使用NaOH水溶液(50％)将含水层碱化至pH 14并且用CH2Cl2(3×300毫升)萃取。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到粗产物1b(15.1g)，其不用进一步纯化即可在下一步骤中使用。
步骤B 1b(12.5克，41.2毫摩尔)的溶液溶解于NaOH水溶液(1M，88.0毫升，88毫摩尔)并且加热回流3小时。反应混合物冷却至室温并且用CH2Cl2萃取(3×100毫升)。含水层用100毫升二烷处理之后用NaHCO3(8.00克，95.2毫摩尔)和二碳酸二叔丁酯(8.95克，41毫摩尔)处理。并且在室温下搅拌5小时。反应混合物用乙醚萃取(2×250毫升)并且用HCl水溶液将含水层酸化至pH-2并且用CH2Cl2萃取(2×200毫升)。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，得到酸1c(10.8克)，为无色油状物。
步骤C 0℃下用HATU(8.87克，23.31毫摩尔)和NMM(4.91克，5.33毫升)处理CH2Cl2(30毫升)，DMF(30毫升)中酸1c(5克，19.44毫摩尔)和胺1d(3.98克，19.44毫摩尔)的溶液，并且在0℃下搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩并且用650毫升CH2Cl2稀释。含水层用HCl水溶液(1M，2×300毫升)，NaHCO3水溶液(1M，2×300毫升)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷5∶1)，得到1e，为无色油状物(5.5克)。
1H NMR(CD3OD，300MHz)δ5.87-5.76(m，1H)，4.97-4.92(dd，2H)，4.26(bt，1H，J＝7.8Hz)，3.98(d，1H，J＝10.2Hz)，3.61(dd，2H，J＝5.1，5.1Hz)，3.73(s，3H)，2.14-2.07(m，2H)，1.74-1.42(m，9H)，1.41(s，9H)，1.12(s，3H)，0.92(s，3H).
13C NMR(CD3OD，75MHz)，d 173.8，173.2，158.0，139.8，115.0，80.4，60.91，53.42，52.80，34.7，33.5，32.3，31.4，29.8，28.7，26.4，26.1，20.6，12.9.
步骤D 用LiOH-H2O(575毫克，14毫摩尔)处理THF(20毫升)，H2O(20毫升)和MeOH(10毫升)中酯1e(4克，9.79毫摩尔)的溶液并且在室温下搅拌4小时。将反应混合物真空浓缩去除THF和MeOH。用HCl水溶液将大部分含水层酸化并且用CH2Cl2萃取(3×100毫升)。合并的有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且就此使用。
用HATU(4.46克，11.84毫摩尔)和NMM(3.5克，35毫摩尔)处理0℃的DMF(40毫升)，CH2Cl2(40毫升)中的1e水解得到的酸，胺片段1f(2.02克，9.79毫摩尔)的溶液并且在0℃下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物并且用HCl水溶液(100毫升)稀释。用CH2Cl2(3×75毫升)萃取含水层。合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(3×100毫升)洗涤，盐水用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过硅胶色谱法纯化(EtOAc/己烷1∶3)，得到1g(4.5克)，为无色泡沫状物质。
步骤E
用Grubbs催化剂[(Cy)3RuCl2＝CHC6H5，83.8毫克，0.1毫摩尔]处理二烯1g(1.1克，2.0毫摩尔)的无水CH2Cl2(20毫升)的溶液并且室温下搅拌24小时。将反应混合物真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶3)，得到1h(501毫克)，为无色固体，是E/Z异构体的混合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ，7.38(d，1H，J＝8.1Hz)，5.30-5.18(m，2H)，4.55(dt，1H，J＝2.4，9.6Hz)，3.92(bs，1H)，3.77(s，3H)，3.79-3.77(bm，1H)，2.06-2.1(bm，3H).1.95-1.81(m，2H)，1.79-1.77(m，13H)，1.31(s，9H)，1.05(s，3H)，0.85(s，3H).
MS(ESI)，m/z，相对强度542[(M+Na)+45]，464(20)，448(25)420(100).
步骤F 用LiBH4(2M的THF溶液，0.2毫升)处理酯1h(100毫克，0.19毫摩尔)的无水THF(1毫升)溶液，并且在室温下搅拌16小时。反应混合物用HCl水溶液(1M，30毫升)中止反应并且用CH2Cl2(3×30mL)萃取。合并的有机层用NaHCO3(100毫升)盐水溶液洗涤，用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶3)，得到1i(70毫克)，为无定形固体。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.96(d，1H，J＝8.1Hz)，5.32-5.21(m，2H)，4.43-4.37(m，2H)4.01-3.93(m，1H)，3.77(dd，1H，J＝5.7，4.8Hz)，3.65(dd，1H，J＝3.9，6.6Hz)，3.53(dd，1H，J＝6.0，10.8Hz)，2.11-1.77(m，6H)，1.55-1.31(m，12H)，1.45(s，9H)，1.05(s，3H)，0.87(s，3H).
MS(ESI)，m/z，相对强度530[(M+K)+，10]，514[(M+Na)+，70]，492[(M+1)+，20]，392(100).
步骤H 用Dess Martin试剂(85毫克，0.2毫摩尔)处理醇li(70毫克，0.15毫摩尔)的CH2Cl2(3毫升)溶液，并且在室温下搅拌2小时。用Na2S2O3溶液(10％，10毫升)和饱和NaHCO3溶液(10毫升)中止反应混合物并且在室温下搅拌0.5小时。用CH2Cl2(50毫升)萃取反应混合物。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷4∶1)，得到1j(50毫克)，为无色蓬松状固体。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ9.54(s，1H)，7.43(d，1H，J＝7.8Hz)，5.30-5.19(m，2H)，4.55-4.40(m，2H)，3.93(d，1H，J＝10.2Hz)，3.77(dd，1H，J＝5.4，5.1Hz)，2.04-1.78(m，4H)，1.55-1.27(m，14)，1.31(s，9H)，1.02(s，3H)，0.95(s，3H).
MS(ESI)，m/z，相对强度512[(M+Na)+，80]，490[(M+1)+，10]，434(20)，390(100)，步骤I 用CH3COOH(19毫克，0.31毫摩尔)和异氰基乙酸甲酯(31毫克，0.31毫摩尔)处理醛1j(50毫克，0.11毫摩尔)的无水CH2Cl2(2mL)溶液。反应混合物在室温下搅拌48小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到1k(50毫克)，为非对映体混合物。
MS(ESI)，m/z，相对强度671[(M+Na)+，45]，649[(M+1)+，30]，549(100)。
步骤J 用LiOH-H2O(20毫克，0.5毫摩尔)处理THF(2毫升)，H2O(2毫升)和CH3OH(2毫升)中甲酯1k(50毫克，0.078毫摩尔)的溶液并且在室温下搅拌2小时。反应完成后用HCl水溶液(2毫升)酸化并且真空浓缩。真空干燥残余物并且不用进一步纯化即可就此使用。
将酸溶解在CH2Cl2(2毫升)，DMF(2毫升)中并且用H-Phg-N(CH)2-HCl(26毫克，0.12毫摩尔)，NMM(32毫克，0.32毫摩尔)HATU(45毫克，0.12毫摩尔)处理，并且在0℃下搅拌24小时。将黄色溶液真空浓缩并且用CH2Cl2(70毫升)稀释。有机层用饱和NaHCO3水溶液，HCl水溶液和盐水洗涤。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且就此在下一步中使用(47毫克)。
步骤K 用Dess-Martin试剂(60毫克，0.14毫摩尔)处理醇1l(50毫克，0.066毫摩尔)的CH2Cl2(2毫升)溶液，并且室温下搅拌2小时。反应用Na2S2O3水溶液和NaHCO3水溶液(各20毫升)稀释并且用CH2Cl2(50毫升)萃取。有机层用饱和NaHCO3溶液，盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(丙酮/己烷2∶3)，得到化合物1(22毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度773[(M+Na)+，80]，751[(M+1)+，60]，651(100)。
制备实施例2 步骤A 用Pd/C(10％w/w，100毫克)处理醇li(1.1克，2.25毫摩尔)的甲醇(30毫升)溶液并且在60psi下氢化3小时。反应混合物通过C矿塞过滤，真空浓缩，得到2a，其不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。
步骤B 根据类似步骤H(制备实施例1)的步骤，使用Dess-Martin试剂(1.14克，2.68毫摩尔)氧化来自步骤A的粗产物2a，得到2b(760毫克)，为无色泡沫。
MS(ESI)，m/z，相对强度1005[(2M+Na)+，10]，530[(M+K)+，20]，514[(M+Na)+，90]，492[(M+1)+，30]，436(40)，392(100).
步骤C 根据类似于步骤I的方法(制备实施例1)，使用CH3COOH(60毫克)和异氰基乙酸甲酯(99毫克，1毫摩尔)将来自步骤B的化合物2b(200毫克，0.41毫摩尔)转化为2c(250毫克)，为非对映体的混合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz，非对映体的混合物)8.05，7.93(d，1H)，6.60(d，1H，J＝7.8Hz)，5.20，5.09(d，1H)，4.58-4.49(bt，1H)，4.34(s，1H)，4.34-4.31(bt，1H)，4.11-4.06(m，1H)，3.95-3.86(m，3H)，3.73，3.71(s，3H)，2.21，2.19(s，3H)，1.99-1.06(m，31H)，0.99-0.94(6H).
MS(ESI)，m/z，相对强度689[(M+K)+，5]，673[(M+Na)+，30]，651[(M+1)+，35]，551(100).
步骤D 根据制备实施例1，步骤J的描述，使用LiOH-H2O(42毫克，1毫摩尔)将甲酯2c(250毫克，0.39毫摩尔)水解成酸，并且使用NMM(126毫克，1.26毫摩尔)和HATU(160毫克，0.42毫摩尔)与H-Phg-N(CH)2·HCl(90毫克，0.42毫摩尔)偶联，得到粗产物2d，直接用于氧化作用。
步骤E
使用Dess-Martin试剂(200毫克，0.48毫摩尔)氧化羟基酰胺2d，通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/CH2Cl21∶4)，得到化合物2(110毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度775[(M+Na)+，60]，753[(M+1)+，50]，653(100)，277(80)，232(60)，162(30)，162(40)，148(80)，217(95).
制备实施例3 步骤A 室温下将2(40毫克，0.0053毫摩尔)的HCOOH(2毫升)溶液搅拌2小时并且真空浓缩。将残余物反复溶解于甲苯并且真空干燥去除残余物甲酸。残余物溶解于CH2Cl2/DMF(各1毫升)，并且用tBuNCO(10微升)和NMM(15微升)在0℃下处理并且放在电冰箱中12小时。真空浓缩反应混合物并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到3(21毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度774[(M+Na)+，50]，752[(M+1)+，70]，653(90)，420(30)，297(30)，148(100)，134(40).
制备实施例4 步骤A 用Et3N(50毫克，0.5毫摩尔)和丙酮氰醇(43毫克，0.5毫摩尔)处理醛2b(100毫克，0.2毫摩尔)的CH2Cl2(2毫升)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌2小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，丙酮/己烷1∶4)，得到4a(100毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度541[(M+Na)+，60]，519[(M+1)+，10]，463(30)，419(100)。
步骤B 用H2O2(35％，0.3毫升)和K2CO3(43毫克，0.3毫升)处理氰醇4a(100毫克，0.2毫摩尔)的DMSO(3毫升)溶液，并且在室温下搅拌4小时。反应混合物用CH2Cl2(150毫升)稀释，并且用Na2S2O3水溶液(10％，30毫升)和盐水(30毫升)洗涤。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且不用进一步纯化即可在步骤C中使用。
步骤C 0℃下用EDCI(356毫克，1.86毫摩尔)和Cl2CHCOOH(120毫克，0.93毫摩尔)处理羟基酰胺4b(100毫克，0.18毫摩尔)的甲苯/DMSO(1∶1.5毫升)的溶液并且在0℃下搅拌3小时。反应混合物用EtOAc(150毫升)稀释并且用饱和NaHCO3水溶液(100毫升)和盐水(100毫升)洗涤。干燥乙酸乙酯层(MgSO4)，浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷2∶3)，得到化合物4(20毫克)，为无色固体。MS(ESI)，m/z，相对强度435[(M+1)+，85]，390(100)。
制备实施例5 步骤A 根据与制备实施例3，步骤A的步骤，将氨基甲酸酯4(40毫克，0.1毫摩尔)转化为脲5(7.5毫克)。
制备实施例6 步骤A 利用类似于5的合成的方法，实现6的合成。室温下将4(180毫克，0.34毫摩尔)的HCOOH(3.0毫升)溶液搅拌3小时并且真空浓缩。将残余物真空干燥并且溶解于CH2Cl2(4毫升)并且用环己基异氰酸甲酯(72毫克，0.52毫摩尔)和Et3N(52毫克，0.52毫摩尔)处理。0℃下将反应混合物搅拌16小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，丙酮/己烷1∶3)，得到6(10毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度574[(M+1)+，20]，435(100)，390(50)。
制备实施例7
步骤A 利用与5的合成相似的步骤实现7的合成。室温下将4(180毫克，0.34毫摩尔)的HCOOH(3.0毫升)溶液搅拌3小时并且真空浓缩。将残余物的50毫克(0.12毫摩尔)真空干燥并且溶解于CH2Cl2(4毫升)并且用异氰酸叔丁基甘氨酸叔丁酯(74毫克，0.035毫摩尔)和Et3N(35毫克，0.35毫摩尔)处理。0℃下将反应混合物搅拌16小时并且真空浓缩。残余物用CH2Cl2稀释并且用HCl水溶液，饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶3)，得到7(15毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度648[(M+1)+，45]，592(25)，435(100)。
制备实施例8 步骤A 用LiOH-H2O(41毫克，1.0毫摩尔)处理THF(2毫升)，H2O(2毫升)和CH3OH(2毫升)中甲酯2c(100毫克，0.15毫摩尔)的溶液并且在室温下搅拌2小时。反应完全后用用HCl水溶液(2毫升)酸化并且真空浓缩。真空干燥残余物并且不用进一步纯化即可就此使用。
将所述酸溶解于CH2Cl2(2毫升)，DMF(2毫升)并且用苄基胺(107毫克，0.22毫摩尔)，NMM(42毫克，0.42毫摩尔)，HATU(53毫克，0.14毫摩尔)处理并且在0℃下搅拌24小时。将黄色溶液真空浓缩并且用CH2Cl2(100毫升)稀释。有机层用饱和NaHCO3水溶液，HCl水溶液和盐水洗涤。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且就此在下面的步骤中使用(63毫克)。
步骤B 用Dess-Martin试剂(62毫克，0.15毫摩尔)处理羟基酰胺8a(62毫克)的CH2Cl2溶液(3毫升)并且在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用CH2Cl2(20毫升)稀释并且用Na2S2O3水溶液(10％，25毫升)和饱和NaHCO3(25mL)处理，并且搅拌20分钟。分离含水层并且用CH2Cl2萃取一次。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到8，为无色固体(21毫克)。
MS(ESI)，m/z，相对强度704[(M+Na)+，40]，682[(M+1)+，20]，582(100)，150(70)，117(30)。
制备实施例9
步骤A 0℃下将CH2Cl2(50毫升)，DMF(50毫升)中的酸9a(3.6克，18.1毫摩尔)，胺9b(5.53克，18.1毫摩尔)HATU(8.59毫摩尔，22.62毫摩尔)和NMM的溶液搅拌过夜。将反应混合物真空浓缩并且用HCl水溶液(1M，500毫升)稀释并且用CH2Cl2萃取(3×250毫升)。合并的有机层用HCl水溶液(500毫升)，饱和NaHCO3水溶液(500毫升)，盐水(300毫升)洗涤，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶4)，得到9c(6.7克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度495(M+Na)+，90]，473[(M+1)+，60]，429(70)，391(40)，200(100)，140(30)。
步骤B 用LiOH.H2O(700毫克，16.7毫摩尔)处理CH3OH/THF/H2O(300毫升)中的甲酯9c(5.5克，11.59毫摩尔)溶液，并且在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用HCl水溶液稀释并且用CH2Cl2(700毫升)萃取。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且就此在下面的步骤中使用。
用HATU(5.5克，17.35毫摩尔)，NMM(4.07克，40.32毫摩尔)处理CH2Cl2(50毫升)，DMF(50毫升)中的粗产物的溶液，并且在0℃下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物并且溶解于HCl水溶液(300毫升)。将酸性层萃取到CH2Cl2(2×200毫升)中，并且用饱和NaHCO3，盐水洗涤合并的有机层，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷4∶1)，得到9d(7.1克)，为无色固体。
步骤C 用Grubbs催化剂([(Cy)3RuCl2＝CHC6H5，404毫克，0.48毫摩尔]处理二烯9d(2.0克，3.2毫摩尔)的CH2Cl2(64毫升)的溶液，并且在室温下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶3)，得到9e(1.1克)，为棕色固体，是E/Z异构体的混合物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)□，7.36(bm，5H)，7.13(d，1H，4.5Hz)，5.73(d，1H，J＝8.1Hz)，5.28(m，2H)，5.10(s，2H)，4.75(m，1H)，4.65(m，2H)，4.52-4.46(m，1H)，3.90(bd，1H)，3.74(s，3H)，3.61(dd，1H，J＝15.6，11.1Hz)，3.44(dd，1H，J＝6.9，7.2Hz)，2.12-2.01(m，5H)，1.79-1.67(m，3H)，1.49-1.43(m，3H)，1.36-1.34(m，4H)，1.26(bs，5H)，1.16(bs，3H).
MS(ESI)，m/z，相对强度606[(M+Na)+70]，584(100)，540(30).
步骤D 用LiBH4(2M的THF溶液，0.32毫升)处理酯9e(200毫克，0.32毫摩尔)的无水THF(5毫升)溶液，并且室温下搅拌3小时。反应混合物用HCl水溶液(1M，100毫升)中止反应并且用CH2Cl2(3×50毫升)萃取。合并的有机层用NaHCO3(100毫升)盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶3)，得到9f(2.1克)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ。
MS(ESI)，m/z，相对强度578[(M+Na)+，40]，556[(M+1)+，80]，512，(30)，295(100)。
步骤E 用Dess Martin试剂(106毫克，0.25毫摩尔)处理醇9f(100毫克，0.19毫摩尔)的CH2Cl2(3毫升)溶液，并且室温下搅拌2小时。用Na2S2O3溶液(10％，10毫升)和饱和NaHCO3溶液(10毫升)中止反应混合物，并且在室温下搅拌0.2小时。用CH2Cl2萃取反应混合物。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷3∶1)，得到9g(80毫克)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ9.52(s，1H)，7.36(bs，5H)，7.11(d，1H，J＝7.2Hz)，5.67(d，1H，J＝7.8Hz)，5.24-5.11(m，2H)，5.11(s，2H)，4.77-4.45(m，5H)，3.92(d，1H，J＝12Hz)，3.58(dd，1H，J＝6.6，5.5Hz)，3.51-3.46(m，1H)，2.17-1.00(m，25H).
MS(ESI)，m/z，相对强度576[(M+Na)+，15]，554[(M+1)+，100]，510(40).
步骤F 用CH3COOH(30毫克，0.50毫摩尔)和异氰基乙酸甲酯(50毫克，0.50毫摩尔)处理醛9g(80毫克，0.15毫摩尔)的无水CH2Cl2溶液(2毫升)。将反应混合物在室温下搅拌24小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，丙酮/己烷1∶3)，得到9h，为非对映异构体的混合物。
MS(ESI)，m/z，相对强度735[(M+Na)+，70]，713[(M+1)+，100]。
步骤F 使用LiOH-H2O将甲酯9h(600毫克，0.92毫摩尔)水解成酸，并且根据制备实施例1，步骤J的描述，使用NMM(303毫克，3.0毫摩尔)和HATU(437毫克，1.15毫摩尔)，与H-Phg-N(CH)2·HCl(235毫克，1.09毫摩尔)偶联，得到9i，其被直接用于氧化作用。
步骤G 根据与步骤H(制备实施例1)相似的方法，使用Dess-Martin试剂(424毫克，1.00毫摩尔)氧化来自步骤F的粗产物9j(470毫克，0.58毫摩尔)，得到9j(310毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度869[(M+CH3OH+Na)+，100]，815[(M+1)+，40]，770(30)。
制备实施例10
步骤A 用Pd(OH)2/C(湿，10％)处理9h(200毫克，0.3毫摩尔)的甲醇(5毫升)溶液，并且氢化3小时。反应混合物通过C矿塞过滤并且真空浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷并且用二碳酸二叔丁酯(200毫克，0.92毫摩尔)处理。将反应混合物在室温下搅拌24小时并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到10a(85毫克)，为无色固体。
步骤B 使用LiOH-H2O(41毫克，1毫摩尔)将甲酯10a (80毫克，0.15毫摩尔)水解成酸，并且根据制备实施例1，步骤J的描述，使用NMM(40毫克，0.40毫摩尔)和HATU(64.6毫克，0.17毫摩尔)，与H-Phg-N(CH)2·HCl(32毫克，0.15毫摩尔)偶联，得到10b，其被直接用于氧化作用。
步骤C
使用Dess-Martin试剂(60毫克，0.14毫摩尔)氧化羟基酰胺10b(60毫克，0.08毫摩尔)，通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/CH2Cl21∶2)得到10c(21毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度805[(M+Na)+，20]，783[(M+1)+，20]，683(30)，369(40)，210(70)，116(100)。
制备实施例11 步骤A 用Et3N(150毫克，1.5毫摩尔)和丙酮氰醇(170毫克，1.5毫摩尔)处理醛9g(400毫克，0.73毫摩尔)的CH2Cl2溶液。室温下将反应混合物搅拌3小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，丙酮/己烷1∶4)，得到4a(286毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度603[(M+Na)+，60]，581[(M+1)+，70]，464(50)，420(100)。
步骤B
用H2O2(35％，1.0毫升)和K2CO3(43毫克，0.3毫升)处理氰醇11a(600毫克，1.1毫摩尔)的DMSO(12毫升)溶液，并且室温下搅拌8小时。用CH2Cl2(150毫升)稀释反应混合物，并且用Na2S2O3水溶液(10％)和盐水(30毫升)洗涤。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且不用进一步纯化即可在步骤C中直接使用。
MS(ESI)，m/z，相对强度621[(M+Na)+，70]，599[(M+1)+，100]，554(40)。
步骤C 0℃下用EDCI(1.1克，5.40毫摩尔)和Cl2CHCOOH(350毫克，2.7毫摩尔)处理羟基酰胺11b(320毫克，0.54毫摩尔)的甲苯/DMSO(1∶1，10毫升)溶液，并且在室温下搅拌4小时。用CH2Cl2(150毫升)稀释反应混合物，并且用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到11(173毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度619[(M+1)+，20]，597(100)。
制备实施例12
步骤A 使用Pd/C氢化11的溶液并且将获得的胺溶解于CH2Cl2，并且在0℃下用叔丁基异氰化物处理。室温下将反应混合物搅拌12小时并且用水稀释。用CH2Cl2(30毫升)萃取反应混合物并且将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，获得11b，其不用进一步纯化即可在氧化作用中使用。
步骤B 0℃下，用EDCI(1.1克，5.40毫摩尔)和Cl2CHCOOH(350毫克，2.7毫摩尔)处理羟基酰胺11b(320毫克，0.54毫摩尔)的甲苯/DMSO(1∶1,10毫升)溶液，并且在室温下搅拌4小时。用CH2Cl2(150毫升)稀释反应混合物，并且用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到11(173毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度619[(M+1)+，20]，597(100)。
制备实施例13
步骤A 用CH3COOH(21毫克，0.3毫摩尔)和TOSMIC(59毫克，0.3毫摩尔，3.0当量)处理醛2b(50毫克，0.1毫摩尔)的无水CH2Cl2(5毫升)溶液。将反应混合物在室温下搅拌40小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到1k(60毫克)，为非对映体的混合物。
MS(ESI)，m/z，相对强度769[(M+Na)+，30]，747[(M+1)+，20]，647(100)。
步骤B 用8滴浓盐酸处理13a(60毫克，0.08毫摩尔)的甲醇溶液，乙酸乙酯被水解，Boc基团被部分去保护，用二碳酸二叔丁酯(16毫克，0.073毫摩尔)再保护。
用Dess-Martin试剂(55毫克，0.13毫摩尔)处理羟基酰胺(46毫克，0.07毫摩尔)的CH2Cl2溶液并且在室温下搅拌10分钟。加入饱和Na2S2O3水溶液，并且用CH2Cl2萃取反应混合物。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化，得到13(61毫克)。
MS(ESI)，m/z，相对强度703[(M+1)+，11]，603(100)。
制备实施例14 步骤A -78℃下，向KHMDS(4.65克，23.5毫摩尔)的THF溶液滴加异丁酸甲酯(2.0克，19.5毫摩尔)的THF溶液，并且搅拌0.5小时。用5-溴-1-戊烯(3.5克，23.5毫摩尔)处理反应混合物，并且在室温下搅拌1小时。用HCl水溶液将反应混合物中止反应并且萃取到乙醚(150毫升)中。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(EtOAc/己烷1∶19)，得到2.1克14b，为无色液体。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ，5，83-5，70(m，1H)，5.00-4.91(dd，2H)，3.65(s，3H)，2.01(dt，2H)，1.53-1.48(m，2H)，1.35-1.30(m，2H)，1.1(s，9H).
步骤B -78℃下，用LiAIH4(1M的THF溶液，20毫升)处理酯(2.6克，16毫摩尔)的乙醚(30毫升)溶液，并且温热至室温。反应混合物用KHSO4溶液中止反应，并且通过C矿和MgSO4塞过滤。真空浓缩滤液并且就此在下一步中使用。
步骤C
-78℃下，用DMSO(1.53克，19.5毫摩尔)处理草酰氯(1.48克，11.7毫摩尔)的无水CH2Cl2溶液并且搅拌15分钟。向该混合物加入醇14c(1.1克，7.8毫摩尔)并且在-78℃下搅拌15分钟。加入三乙胺(5.0毫升，35.5毫摩尔)并且将反应混合物温热至室温。将反应混合物酸化并且用EtOAc(200毫升)萃取。合并的有机层用HCl水溶液洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且在下一步反应中使用。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ9.42(s，1H)，5.82-5.68(m，1H)，5.00-4.91(m，2H)，2.03(dt，2H)，1.48-1.23(m，4H)，1.03(s，3H).
步骤D 用(R)-苯基甘氨酸醇(20.33克，148.3毫摩尔)处理醛14d(18克，129毫摩尔)的CH2Cl2(150mL)溶液，并且在0℃下搅拌1小时。用TMS-CN(25.6克，258毫摩尔)处理反应混合物并且在室温下搅拌12小时。反应混合物用饱和NaHCO3水溶液中止反应并且用EtOAc(3×150毫升)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且将残余物溶解于THF(100毫升)并且用HCl水溶液(100毫升)处理。含水层用NaOH水溶液(1M)碱化并且EtOAc(450毫升)萃取。将合并的有机层干燥，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷6∶1)，得到21克14e，为无色油状物。
步骤E
0℃下，用H2O2(60毫升)和LiOH.H2O(5.88克，209.6毫摩尔)处理14e(20克)的CH3OH(200毫升)溶液。室温下将反应混合物搅拌12小时并且冷却至0℃，并且用Na2S2O3水溶液(10％)小心中止反应。将反应混合物真空浓缩，并且用EtOAc(600毫升)萃取含水层。用Na2S2O3水溶液充分洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，真空浓缩，并且通过结晶纯化(EtOAc/己烷)，得到纯的非对映体，在下面的反应中直接使用。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.30(bs，5H)，6.25(s，1H)，6.17(s，1H)，5.79-5.66(m，2H)，4.98-4.89(m，2H)，3.71-3.60(m，3H)，2.68(bs，1H)，1.98-1.90(3H)，1.03(s，3H)，0.99(s，3H)，1.03-0.99(m，1H).
步骤F 0℃下，用Pb(OAc)4(13.45毫摩尔，30.3毫摩尔)处理CH2Cl2(160毫升)，CH3OH(80毫升)中酰胺14f(8.00克，26.3毫摩尔)的溶液1小时。用NaHCO3水溶液(250毫升)处理黄色溶液并且搅拌15分钟。将反应混合物过滤并真空浓缩。用CH2Cl2(3×300毫升)萃取大部分含水层，真空浓缩，并且在下面的反应中直接使用。
将粗产物亚胺的溶液溶解于THF(200毫升)，并且用HCl水溶液(1M，200毫升)处理，并在室温下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩并且用乙醚萃取(2×250毫升)。0℃下，含水层用NaOH水溶液(50％)碱化，并且用CH2C12(600毫升)萃取。合并的有机层用盐水萃取，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且在下面的反应中直接使用。
残余物溶解于CH2Cl2(200毫升)并且冷却至-78℃，并且用NMM(4.2克，40毫摩尔)和Cbz-Cl(5.4克，31.58毫摩尔)处理。室温下将反应混合物搅拌12小时并且用HCl水溶液洗涤。分离有机层并且用CH2Cl2(200毫升)萃取含水层。合并的有机层用盐水萃取，干燥并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷2∶3)，得到14g(6.8克)，为无色固体。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.37-7.30(m，5H)，6.23(bs，1H)，5.86(bs，1H)，5.82-5.64(m，1H)，5.63(d，1H，J＝9.3Hz)，5.12-4.93(m，4H)，4.07(d，1H，J＝9Hz)，2.0-1.9(m，2H)，1.42-1.30(m，4H)，0.96(s，6H).
MS(ESI)，m/z，相对强度 341[M+Na)+，100]，319[(M+1)+，30]，274(50)，230(70)，213(30)，140(30).
步骤G 用Me3OBF4(10.36克，69.9毫摩尔)和K3PO4(12.11克，69.52毫摩尔)处理酰胺14g(6.8克，21.4毫摩尔)的CH2Cl2(200毫升)溶液，并且在室温下搅拌12小时。将反应混合物真空浓缩并且溶解于CH3OH(280毫升)和HCl水溶液(140毫升，1M)，并且在回流下加热1小时。将反应混合物浓缩并且用CH2Cl2进一步萃取含水层(3×150毫升)。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶19)，得到14h(5.6克)，为无色油状物。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.36(bs，5H)，5.85-5.71(m，1H)，5.32(d，1H，J＝9.9Hz)，5.10(dd，2H，J＝12，3.9Hz)，5.03-4.93(m，2H)，4.27(d，1H，J＝9.9Hz)，3.72(s，3H)，2.05-1.98(m，2H)，1.47-1.24(m，4H)，0.93(s，9H).
MS(ESI)，m/z，相对强度 356[M+Na]+，95]，334[(M+1)+，10]，290(100)，230(60)，213(20)。
步骤H 0℃下，用HATU(8.39克，22.05毫摩尔)和NMM(5.35克，52.92毫摩尔)处理CH2Cl2(50毫升)，DMF(50毫升)中酸14i(4.5克，17.64毫摩尔)和胺1f(3.66克，17.64毫摩尔)的溶液并且在0℃下搅拌过夜。真空浓缩反应混合物并且用450毫升CH2Cl2稀释。用HCl水溶液(1M，2×300毫升)，NaHCO3水溶液(1M，2×300毫升)洗涤含水层。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷5∶1)，得到14j，为无色油状物(5.8克)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.03，6.39(d，1H，J＝7.5Hz)，5.8-5.7(m，1H)，4.99-4.90(m，2H)，4.66-4.54(m，1H)，3.72(s，3H)，3.62-3.42(m，2H)，2.01(bs，2H)，1.88-1.63(m，4H)，1.61，1.43(s，9H)，1.6-1.3(m，4H)，1.02(s，3H)，0.90(s，3H).
MS(ESI)，m/z，强对强度 431[(M+Na)+，60]，409[(M+1)+，40]，353(40)，309(100)，110(80)。
步骤I 将H2O(30毫升)，THF(30毫升)和CH3OH(30毫升)中酯14h(5.4克，16.2毫摩尔)的溶液与LiOH-H2O(1.36克，32.42毫摩尔)搅拌24小时并且真空浓缩。含水层用HCl水溶液(1M)酸化并且萃取到CH2Cl2(400毫升)中。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且就此在下面的反应中使用。
用HATU(7.15克，18.79毫摩尔)和NMM(4.5克，45.0毫摩尔)处理CH2Cl2(30毫升)，DMF(30毫升)中酸(4.0克，12.5毫摩尔)和去保护胺*的溶液，并且在0℃下搅拌48小时，25℃下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物并且用300毫升CH2Cl2稀释。含水层用HCl水溶液(1M，3×100毫升)和NaHCO3(饱和，3×100毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷3∶1)，得到14k，为无色油状物(4克纯14k和2克部分不纯14k)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.32(bs，5H)，6.92(d，1H，J＝7.5Hz)，5.48-5.69(m，2H)，5.37(d，1H，J＝9.9Hz)，5.08-4.92(m，6H)，4.56-4.33(M，1h)，3.97-3.93(m，2H)，3.84-3.80(m，2H)，3.74(s，3H)，2.03-1.97(m，4H)，1.86-1.87-1.39(m，12H)，1.12(s，3H)，0.98(s，6H)，084(s，3H)MS(ESI)，m/z，相对强度 632[(M+Na)+，20]，610[(M+1)+，100]，309(60).
*用二烷中4M HCl溶液去除14j。
步骤J 向室温的二烯14k(4.00克，6.57毫摩尔)的CH2Cl2(65.0毫升)溶液通入氮气饱和，并且用Grubbs催化剂(551毫克，0.657毫摩尔)处理，并且搅拌24小时。真空浓缩反应混合物并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶3)，得到141(1.7克)，为黄褐色固体。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ7.34-7.31(bs，5H)，7.08(d，1H，J＝7.8Hz)，5.43(d，1H，J＝10.2Hz)，5.28(m，2H)，5.13-5.02(m，2H)，4.56-4.32(m，1H)，4.49-4.28(m，2H)，3.96-3.79(m，2H)，3.74(s，9H)，2.05-1.29(m，16H)，1.0(s，3H)，0.96(s，3H)，0.94(s，3H)，0.86(s，3H).
MS(ESI)，m/z，相对强度 550[(M+1)+，50]，450(100)。
步骤K 用Pd/C(5％，200毫克)，二碳酸二叔丁酯(200毫克，0.92毫摩尔)处理烯141(200毫克，0.35毫摩尔)的CH3OH(20毫升)溶液，并且在室温下氢化12小时。将反应混合物通过C矿塞过滤，并且真空浓缩。通过色谱法纯化反应混合物(SiO2，丙酮/己烷1∶5)，得到14m(81毫克)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ6.84(d，1H，J＝7.8Hz)，5.14(d，1H)，4.61-4.55(m，1H)，4.31(s，1H)，4.22(d，1H，J＝10Hz)，4.03(d，1H，J＝10.5Hz)，3.88-3.85(m，1H)，3.75(s，3H)，1.89-1.76(m，1H)，1.59-1.76(m，28H)，1.02(s，3H)，0.97(s，3H)，0.94(s，3H)，0.86(s，3H).
MS(ESI)，m/z，相对强度 610[(M+AcOH+1)+，40]，550[(M+1)+，50]，450(100)，309(20).
步骤L 用LiBH4(2M THF溶液，0.1毫升)处理酯14m(80毫克，0.15毫摩尔)的无水THF(2毫升)溶液，并且室温下搅拌4小时。反应混合物用HCl水溶液人(1M，滴)中止反应并且用CH2Cl2(3×30毫升)萃取。合并的有机层用NaHCO3水溶液(100毫升)盐水洗涤，MgSO4干燥，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶3)，得到14n(70毫克)，为非晶形固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度 544[(M+Na)+，30]，522[(M+1)+，40]，422(100)。
步骤M 用Dess Martin试剂(30毫克，0.07毫摩尔)处理醇14n(30毫克，0.05毫摩尔)的CH2Cl2(2毫升)溶液，并且在室温下搅拌2小时。反应混合物用Na2S2O3溶液(10％，10毫升)和饱和NaHCO3溶液(10毫升)中止反应，并且在室温下搅拌0.5小时。用CH2Cl2(3×10毫升)萃取反应混合物。有机层用MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，并且就此在下面的反应中使用。
MS(ESI)，m/z，相对强度 552[(M+1)+，100]，248(40)。
步骤N 根据与步骤I(制备实施例1)相似的方法，使用CH3COOH(20微升)和异氰酸乙酸甲酯(20微升)将步骤M获得的化合物14o转化为14p(40毫克)，为非对映体的混合物。
MS(ESI)，m/z，相对强度711[(M+1)+，100]，240(20)。
步骤O 用LiOH-H2O(41毫克，1毫摩尔)处理THF(3毫升)，H2O(3毫升)和CH3OH(3毫升)处理甲酯14p(80毫克，0.12毫摩尔)溶液并且在室温下搅拌2小时。反应完全后，用HCl水溶液(15毫升)酸化并且用CH2Cl2(3×30毫升)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤并且真空浓缩。真空干燥残余物并且就此在下面的纯化作用中使用。
将酸溶解于CH2Cl2(2毫升)，DMF(2毫升)并且用H-Phg-N(CH)2·HCl(40毫克，0.2毫摩尔)，NMM(40毫克，0.4毫摩尔)，HATU(68毫克，0.16毫摩尔)处理，并且在0℃下搅拌24小时。将黄色溶液真空浓缩并且用CH2Cl2(75毫升)稀释。有机层用饱和NaHCO3水溶液，HCl水溶液和盐水洗涤。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且就此在下面的步骤中使用(90毫克)。
步骤P
用Dess-Martin试剂(100毫克，0.24毫摩尔)处理醇14q(90毫克，0.11毫摩尔)的CH2Cl2(2毫升)溶液并且在室温下搅拌2小时。用Na2S2O3水溶液(30毫升)和NaHCO3水溶液(各30毫升)稀释反应，并且用CH2Cl2(50毫升)萃取。有机层用饱和NaHCO3，盐水洗涤，MgSO4干燥，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(丙酮/己烷2∶3)，得到14(22毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度813[(M+1)+，100]，768(20)。
制备实施例15 步骤A -78℃，氮气下，向45毫升THF，二异丙基胺(4.70毫升，33.51毫摩尔，2当量)和LiCl(4.26克，6当量)加入nBuLi(20.4毫升，1.95当量)。10分钟之后，用10分钟将1a/30毫升THF溶液转移到上述溶液中。20分钟之后，呈褐黄色的混合物温热至0℃。又20分钟之后，溶液变成不透明亮黄色，滴加4-碘-1-丁烯(3.35克，1.1当量)。溶液变得更亮，60分钟之后，加入115毫升1M HCl中止反应。去除THF，并且加入150毫升EtOAc用于萃取。有机层进一步用115毫升1M HCl洗涤。合并含水层，并且0℃下加入6M NaOH调节至pH 14。用二氯甲烷萃取，110毫升×4。用碳酸钠干燥有机层。用C矿过滤并去除溶剂，得到4克油状物，静置变成固体。使用5∶5∶90Et3N/MeOH/DCM进行急骤层析，得到2.63克纯15a，产率57％。(Rf＝0.64，5∶5∶90 Et3N/MeOH/DCM)1H NMR(4∶1旋转异构体比例。*指示小的旋转异构体峰。CDCl3)δ0.96*(d，3H，J＝6.7Hz)1.15(d，3H，J＝6.9Hz)1.45-1.55(m，2H)2.05-2.20(m，2H)2.80(s，3H)2.92*(s，3H)3.55-3.60(m，2H)4.00*(m，1H)4.35-4.45*(m，1H)4.60-4.65(m，2H)4.92-5.02(m，2H)5.68-5.80(m，1H)7.20-7.40(m，5H).
13C NMR(CDCl3)δ11.26 15.68 31.11 35.67 47.17 52.22 76.92 116.46127.50 128.67 129.34 138.60 143.19 178.08.
MSC16H24N2O2277(M+H)+；HRMS计算值77.1916；实测值277.1917.
步骤B 用2N NaOH(7.0毫升，2当量)，7毫升水处理1.9克15a(6.88毫摩尔，1当量)并且在100℃回流3小时。混合物冷却至室温。加入20毫升DCM，10毫升水，并且分离有机层。用20毫升DCM洗涤含水层。用10毫升水进一步洗涤合并的有机层。用1.3毫升12N HCl处理合并的含水层。加入20毫升二烷并且通过加入饱和NaHCO3而将溶液调节至pH 8-9。加入1.48克iBOC-OSU(1当量)并且将混合物搅拌过夜。将溶剂体积减小至一半之后，加入10毫升水和10毫升DCM用于萃取。然后滴加12N HCl处理含水层直到沉淀(pH 2)。用EtOAc 40毫升×2萃取，接着用MgSO4干燥，并且通过C矿过滤，得到1.52克无色油状物15b，产率90％。
1H NMR(CDCl3)δ0.88(d，6H，J＝6.6Hz)1.78-2.00(m，3H)2.10-2.20(m，2H)3.80-3.82(m，2H)4.40(m，1H)5.00-5.06(m，2H)5.10(m，1H)5.80(m，1H).
13C NMR(CDCl3)δ20.0 26.2 29.0 32.8 54.2 72.8 117.0 138.0 157.8177.6.
MS for C11H19NO4230(M+H)+.
步骤C 150毫升DCM中，亚胺15c(9.42克，31.88毫摩尔，1当量)与Corey′s催化剂(J.Am.Chem.Soc.，1997，119，12414)(1.93克，0.1当量)，氢氧化铯一水合物(53.55克，10当量)混合。将溶液冷却至-60℃，然后氮气下加入5-碘-1-戊烯(25克，4当量)。加入100毫升乙醚，将粗产物搅拌60小时。用水100毫升×2和盐水70毫升×1洗涤之后，有机层用MgSO4干燥。C矿过滤并且去除溶剂，得到粗产物28.56克。对5.1克粗产物进行色谱法纯化，先使用纯己烷，然后使用1∶40至1∶20EtOAc/己烷。得到2.56克15d，5-碘-1-戊烯和二苯酮的混合物(1∶2.5∶0.8)(15d∶Rf＝0.39，1∶20EtOAc/己烷)。
步骤D 用4毫升HOAc/THF/水1∶1∶1处理0.5克上述粗产物15d(2.56克)90分钟，此时TLC显示起始物消失。加入两管饱和NaHCO3。加入10毫升水和20毫升己烷用于萃取。将含水层进一步碱化为pH 9-10。加入(Boc)2O(0.15克)和二烷4毫升，2.5小时之后，去除溶剂并且将溶液的pH调节至3-4。用乙醚萃取，接着使用1∶10EtOAc/己烷进行色谱分离，得到0.16克15e，从15c的总产率是48％。(Rf＝0.44，1∶10EtOAc/己烷)。
步骤E -78℃下，将4.88克15e(13.87毫摩尔)溶解于20毫升甲苯，并且用21毫升LiAIH4(1M Et2O溶液，1.6当量)处理40分钟。混合物温热至0℃，并且加入EtOAc和20毫升5％NaHSO4中止反应。用乙醚萃取，通过C矿过滤，去除溶剂，得到残余物。用1/5EtOAc/己烷进行色谱纯化。得到2.8克期望的醛15f(Rf＝0.4)和醇(1.43克，Rf＝0.04)。后者通过Dess-Martin反应被转化为醛。
步骤F 在20毫升DCM中混合1.26克15f(5.55毫摩尔，1当量)，异氰酸乙酸甲酯(0.50毫升，1当量)，乙酸(0.32毫升，1当量)，并且搅拌80小时。去除溶剂并且进行急骤层析，得到1.10克15g，产率51％。(Rf＝0.29，1∶1 EtOAc/己烷)。
1H NMR(CDCl3)δ1.42(s，9H)1.50-1.60(m，2H)1.99-2.20(m，4H)2.18(s，3H)3.76和3.78(两个单峰，3H，1∶1非对映体)3.90-4.20(m，4H)4.90-5.00(m，2H)5.20(br s，1H)5.70(m，1H)6.62(br s，1H).
13C NMR(CDCl3)δ21.93 26.26 29.46 31.25 34.41 41.99 52.53 53.5075.57 80.41 115.74 139.14 156.28 168.91 169.38 170.79.
HRMSC18H30N2O7计算值387.2131(M+H)+；实测值387.2133.
步骤G 将6毫升MeOH中化合物15g(1.08克，2.8毫摩尔，1当量)，60毫克K2CO3(0.15当量)在室温下搅拌1小时，然后在40℃下又搅拌2小时。去除固体，接着进行急骤层析，得到期望的产物15h，为白色固体(0.65克，68％产率)。
1H NMR(CDCl3)δ1.40(s，9H)1.40-1.70(m，4H)1.99-2.10(m，2H)3.70(s，3H)3.80(br，1H)4.00-4.25(m，4H)4.90-5.00(m，2H)5.10(br s，1H)5.30(m，1H)5.78(m，1H)7.40(br s，1H).
13C NMR(CDCl3)δ26.83 29.48 30.76 34.53 42.03 53.51 54.95 75.0581.07 115.76 139.30 157.92 170.84 174.16.
C16H28N2O6345(M+H)+.
HRMS计算值345.2026；实测值345.2033.
步骤H 室温下，将化合物15h(0.39克，1.13毫摩尔)和4M HCl二烷溶液(4毫升)搅拌2小时，此时生成固体沉淀。去除溶剂并且加入20毫升DCM。使用Hunig′s碱将pH调节至7。然后去除溶剂，并且用10毫升THF，Boc-Pro-OH(0.73克，3当量)，HATU(1.29克，3当量)，Hunig′s碱(1.18毫升，6当量)和1毫升DMF处理残余物。室温下搅拌7小时之后，真空去除溶剂。将残余物溶解于20毫升EtOAc中，并且用10毫升饱和NaHCO3，10毫升0.5M HCl洗涤两次，用水20毫升和盐水5毫升洗涤。经色谱法纯化得到0.68克15i(Rf＝0.31，5％MeOH的DCM溶液)。
步骤I 用2毫升DCM，3毫升4M HCl二烷溶液处理15i 1小时。加入30毫升DCM，接着0℃下用Hunig′s碱中和。去除溶剂，并且将粗产物溶解于5毫升DCM，10毫升THF。加入15b(0.26克，1当量)，HATU(0.43克，1当量)和Hunig′s碱(0.41mL，2.1eq)之后搅拌4小时，去除溶剂并且加入30毫升EtAOc。然后用10毫升饱和NaHCO3，10毫升1M HCl，10毫升0.5M HCl，水20毫升，盐水5毫升洗涤溶液。色谱法得到期望的产物15j(0.3克，自15h的产率48％)。
13C NMR(CDCl3)；δ20.20 26.26 26.72 29.18 29.55 30.58 33.25 34.6041.95 48.57 52.90 53.00 53.40 54.68 61.56 72.34 75.68 115.64 116.73138.07 139.33 157.47 171.04 171.15 173.06 174.23C27H44N4O6553(M+H)+.
HRMS计算值553.3237；实测值553.3259.
步骤J 氩气下，在223毫升DCM中用0.138克Grubbs′催化剂(0.25当量)处理化合物15j(0.37克，0.67毫摩尔)。室温下搅拌65小时之后，NMR显示混合物含有S.M.15j，期望的产物15k(大约20％产率)和PO(C6H11)3。这三种物质在5％HOAc/EtOAc中的Rf分别是0.34，0.24，0.74。反复急骤层析得到15k纯样品。
1H NMR(CDCl3)δ0.90(d，6H，J＝6.6Hz)1.40-2.00(m，14H)2.05-2.50(m，3H)3.60(m，1H)3.70(s，3H)3.75-4.00(m，3H)4.00-4.20(m，2H)4.50(m，1H)4.70(d，1H，J＝7.5Hz，非对映体)4.81(d，1H，J＝7.9Hz，另一种非对映体)5.38(m，1H)5.58(m，1H)5.65(br s，1H)7.20(d，1H J＝7.0Hz)7.38(d，1H，J＝7.1Hz).
13C NMR(CDCl3)δ20.26 23.05 26.54 27.02 27.67 27.73 29.21 31.0634.03 41.97 48.71 52.40 52.80 53..53 60.54 72.43 75.08 130.44 130.56157.02 171.13 172.01 173.13 173.38.
LC/MSTr＝5.11分钟(梯度A(乙腈)/B(含有0.1％TFA的水)10分钟之内自5％A/B至95％A/B)C25H4ON4O8525(M+1)+HRMS计算值525.2924；实测值525.2908。
步骤K
40℃下，将5毫升MeOH中化合物15k(92毫克，0.18毫摩尔，1当量)，60毫克K2CO3(2.5当量)搅拌2小时，此时TLC显示S.M.完全消失。去除溶剂之后，加入44毫升0.01M HCl的DCM溶液(2.5当量)中和溶液。去除溶剂之后加入10毫升THF，1毫升DMF，PhG-O-tBu(盐酸盐，51毫克，1.2当量)，80毫克HATU(1.2当量)，0.11毫升Hunig′s碱(3.5当量)。将混合物搅拌12小时。去除溶剂之后，直接进行色谱法，得到产物151(97毫克，自15j的产率是79％。Rf＝0.32，5％MeOH/DCM)。
1H NMR(CDCl3)δ0.90(d，6H，J＝6.6Hz)1.30(s，9H)1.40-2.00(m，14H)2.15-2.20(m，1H)3.60(m，1H)3.75-3.90(m，3H)4.00-4.09(m，1H)4.10-4.35(m，2H)4.50(m，1H)4.62(d，1H，J＝7.5Hz，非对映体)4.72(d，1H，J＝7.9Hz，另一种非对映体)5.20-5.38(m，1H)5.44(d，1H，J＝6.6Hz)5.50(m，1H)5.98(m，1H)7.30(m，5H)7.45(d，1H，J＝7.0Hz)7.55(d，1H，J＝7.1Hz)7.70(br s，1H).
13C NMR(CDCl3)δ20.30 23.35 26.38 26.78 27.29 28.02 29.18 31.4234.89 43.97 48.70 51.90 52.93 58.22 60.40 72.44 74.96 75.93 83.80120.88 128.10 128.12 129.63 129.70 130.33 137.74 157.20 169.32170.69 173.70 174.47.
LC/MSTr＝6.61分钟(梯度A(乙腈)/B(含有0.1％TFA的水)10分钟内5％A/B至95％A/B)MSC36H53N5O9700(M+H)+。
步骤L 室温下，用10毫升DCM中109毫克Dess-Martin试剂(2当量)处理化合物151(90毫克，0.13毫摩尔)12小时。去除溶剂之后，使用7∶3EtOAc/己烷直接进行色谱法，得到15m(40％)，为白色固体。
1H NMR(CDCl3)δ0.95(d，6H，J＝6.6Hz)1.40(s，9H)1.50-2.10(m，14H)2.20-2.30(m，1H)3.60(m，1H)3.75-3.90(m，3H)3.93(dd，1H，J＝5.9，16.8Hz)4.10(m，1H)4.50(dd，1H，J＝8.0，13.9Hz)4.80(d，1H，J＝6.6Hz)5.20-5.40(m，3H)5.41(d，1H，J＝6.6Hz)5.60(dd，1H，J＝7.3，10Hz)6.82(d，1H，J＝7.3Hz)7.30(m，5H)7.50(m，1H)7.80(d，1H，J＝6.7Hz).
13C NMR(CDCl3)δ20.2923.6526.3426.7529.0229.2030.3730.9531.56 35.07 43.71 48.83 52.95 54.20 58.14 60.23 72.54 84.15 128.03129.41 129.68 129.87 130.62 137.60 156.99 160.33 167.41 171.37173.84 187.26 196.36.
LC/MSTr＝6.81分钟(梯度A(乙腈)/B(含有0.1％TFA的水)10分钟之内从5％A/B至95％A/B)MSC36H51N5O9698(M+H)+HRMS计算值698.3765实测值698.3762。
步骤M 氮气球下，用5毫升MeOH，2毫克Pd-C处理化合物15m(4毫克)1.5小时。溶液通过C矿过滤。真空干燥滤液，NMR显示唯一生成化合物15。
1H NMR(CDCl3)δ0.95(d，6H，J＝6.6Hz)1.40(s，9H)1.50-2.10(m，16H)2.20-2.30(m，1H)3.60(m，1H)3.75-3.90(m，3H)3.93(dd，1H，J＝5.9，16.8Hz)4.10(m，1H)4.50(dd，1H，J＝8.0，13.9Hz)4.80(d，1H，J＝6.6Hz)5.30(m，1H)5.41(d，1H，J＝6.6Hz)5.55(d，1H，J＝7.0Hz)6.82(d，1H，J＝7.3Hz)7.30(m，5H)7.50(m，1H)7.80(d，1H，J＝6.7Hz).
LC/MSTr＝5.26分钟(梯度A(乙腈)/B(含有0.1％TFA的水)10分钟之内5％A/B至95％A/B)MSC36H53N5O9700(M+H)+。
HRMS计算值700.3922；实测值700.3925。
制备实施例16
步骤A 使用Et3N(240毫克，2.4毫摩尔)和丙酮氰醇(240毫克，2.82毫摩尔)处理醛14o(590毫克，1.15毫摩尔)的CH2Cl2(10毫升)溶液。室温下将反应混合物搅拌2小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，丙酮/己烷1∶4)，得到16a(600毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度569[(M+Na)+，20]，547[M+1]+，40]，447(100)。
步骤B 用H2O2(35％，1.5毫升)和K2CO3(252毫克，1.83毫摩尔)处理氰醇16a(600毫克，1.1毫摩尔)的DMSO(10毫升)的溶液，并且在室温下搅拌15小时。反应混合物用CH2Cl2(200毫升)稀释，并且用饱和Na2S2O3溶液(10％，50毫升)和盐水(30毫升)洗涤。将反应混合物干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且不用进一步纯化即可在氧化作用中使用。
用EDCI(1.9克，10.00毫摩尔)和Cl2CHCOOH(317毫克，2.49毫摩尔)处理羟基酰胺的甲苯/DMSO(2∶1，15毫升)的溶液，并且在0℃下搅拌3小时。反应混合物用CH2Cl2(300毫升)稀释，并且用饱和NaHCO3水溶液(2×100毫升)和盐水(100毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶5)，得到16，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度617[(M+CH3OH+Na)+，20]，595[(M+CH3OH+1)+，40]，507[(M+1)+，20]，463(100)。
制备实施例17 步骤A 室温下，将16(300毫克，0.54毫摩尔)的HCOOH(10.0毫升)溶液搅拌2小时并且真空浓缩。将残余物真空干燥并且不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
步骤B 用t-BuNCO(50毫升)和NMM(52毫克，0.52毫摩尔)处理17a(100毫克)的DMF/CH2Cl2(1∶1，3毫升)的溶液。室温下将反应混合物搅拌16小时并且真空浓缩，并且用CH2Cl2(60毫升)稀释，用HCl水溶液洗涤(1M，2×30毫升)，干燥，真空浓缩。残余物通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到17(34毫克)，为无色固体。MS(ESI)，m/z，相对强度584[(M+1)+，30]，463(100)。
制备实施例18 步骤A 用叔丁基甘氨酸的异氰酸叔丁酯(100毫克，0.46毫摩尔)和NMM(52毫克，0.52毫摩尔)处理17a(100毫克)的DMF/CH2Cl2(1∶1，3毫升)溶液。室温下将反应混合物搅拌16小时并且真空浓缩，并用CH2Cl2(60毫升)稀释，用HCl水溶液洗涤(1M，2×30毫升)，干燥，真空浓缩。残余物通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到18(42毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度698[(M+Na)+，40]，676[(M+1)+，100]，463(20)。
制备实施例19
步骤A 用α-甲基-环己基胺的异氰酸酯(100微升)和NMM(52毫克，0.52毫摩尔)处理17a(100毫克)的DMF/CH2Cl2(1∶1，3毫升)溶液。室温下将反应混合物搅拌16小时并且真空浓缩，并用CH2Cl2(60毫升)稀释，用HCl水溶液洗涤(1M，2×30毫升)，干燥，真空浓缩。残余物通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到20(21毫克)，为无色固体。
MS(ESI)，m/z，相对强度624[(M+Na)+，30]，602[(M+1)+，15]，463(100)，449(20)，129(30)。
制备实施例20 步骤A 用氩气将无环二烯20a(6.00克，10.954毫摩尔)的无水甲苯(500毫升)溶液脱气0.5小时，并且用Grubbs催化剂(1.35克，1.643毫摩尔)处理，并且在60℃加热12小时。真空浓缩反应混合物并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/己烷1∶3)，得到20b，为棕色泡沫。
步骤B 用Pd/C(1.2克，5％w/w)处理烯烃20b(5.00克，0.865毫摩尔)的甲醇(100mL)溶液，并且在50psi下氢化3小时。反应通过C矿塞过滤并且真空浓缩。残余物通过色谱法纯化，使用10-40％THF/己烷梯度，分离20c(3.00克)，为无色固体。
步骤C 用LiBH4(2M THF溶液，3.5毫升，6.90毫摩尔)处理酯20c(3.00克，5.75毫摩尔)的无水THF(50毫升)溶液，并且在室温下搅拌3小时。用TLC(EtOAc/己烷1∶2)跟踪反应。用甲醇(2毫升)中止反应，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)稀释并且萃取到CH2Cl2(3×100毫升)中。合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(30毫升)，盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到20d(2.21克)，为无色固体。
MS(m/z，相对强度)518[(M+K)+，15]，480[(M+H)+，75]，380(100)。
步骤D
用Dess-Martin试剂(2.91克，6.880毫摩尔)A处理醇20d(2.2克，4.58毫摩尔)的无水CH2Cl2(50毫升)并且在室温下搅拌2小时。反应混合物用Na2S2O3水溶液(5％，50毫升)和饱和NaHCO3水溶液(50毫升)稀释，并且在室温下搅拌15分钟。用CH2Cl2(500毫升)萃取反应混合物，并且将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，得到粗产物20e(1.9克)，其不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
步骤E 将粗产物20e(1.00克，2.094毫摩尔)的CH2Cl2(15毫升)溶液冷却至0℃，并且用丙酮氰醇(356毫克，4.187毫摩尔)和三乙胺(424毫克，4.187毫摩尔)处理。0℃下将反应混合物搅拌12小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，EtOAc/己烷1∶5--＞1∶1)，的20f(500毫克)为无色油状物。
步骤F 用H2O2(5毫升)，K2CO3(276毫克，2.00毫摩尔)处理氰醇20f(500毫克，～1.00毫摩尔)的DMSO(5毫升)溶液，并且在室温下搅拌12小时。反应混合物用Na2S2O3水溶液(5％，100毫升)稀释，并且用CH2Cl2(2×100毫升)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，得到20q，其不用进一步纯化即可就此在下面的氧化作用中使用。
步骤G
用EDCI(3.117克，16.26毫摩尔)，和二氯乙酸(1.048克，8.13毫摩尔，698微升)处理羟基胺20g(850毫克，1.626毫摩尔)的甲苯(5毫升)和DMSO(5毫升)的溶液，并且在室温下搅拌3小时。反应混合物用CH2Cl2(200mL)稀释，并且用饱和NaHCO3水溶液(200毫升)，HCl水溶液(1M，200毫升)，盐水(30毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷1∶2)，得到20h(300毫克)，为无色固体。
步骤H 室温下将Boc保护的酮基酰胺20h的甲酸(5毫升)溶液搅拌3小时，并且真空浓缩，其不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。
用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺20i(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液并且冷却至0℃。加入异氰酸酯的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，20→50％)，得到20，为无色固体。
MS(m/z，相对强度)588[(M+H)+，100]，421(40)。HRMS(ESI)，C31H50N5O6的计算值588.3761(M+H)+；实测值588.3751。
制备实施例21 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺20i(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液并且冷却至0℃。加入2-环己基-1-环丙基-2-异氰酸基乙酮(0.15毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，20→50％)，得到21，为无色固体。
制备实施例22
步骤A 用烯丙基异氰化物(28.01毫克，0.411毫摩尔)和乙酸处理醛20e(100毫克，0.210毫摩尔)的二氯甲烷(4毫升)溶液，并且在室温下搅拌12小时。将反应真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，1∶4→1∶1)，得到22a(75毫克)，为无色固体。MS(m/z，相对强度)605[(M+H)+，100]，505(98)。
步骤B 用LiOH-H2O(22毫克，0.55毫摩尔)处理甲醇(4毫升)，THF(4.0毫升)和水(4.0毫升)中的22b(275毫克，0.454毫摩尔)的溶液，并且在室温下搅拌2小时。反应混合物用HCl水溶液(1M，30毫升)稀释，并且萃取到CH2Cl2(2×40毫升)中。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，其不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。
步骤C 用Dess-Martin试剂(453毫克，1.06毫摩尔)处理醇22b(300毫克，0.534毫摩尔)的无水CH2Cl2(15毫升)的溶液并且在室温下搅拌2小时。反应混合物用Na2S2O3水溶液(5％，30毫升)和饱和NaHCO3水溶液稀释(30毫升)并且在室温下搅拌15分钟。用CH2Cl2(3×50毫升)萃取反应混合物并且蒋合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷0∶1→1∶1)，得到22，为无色固体。MS(m/z，相对强度)561[(M+H)+，100]，461(99)。HRMS(ESI)C31H50N5O6的计算值588.3761(M+H)+；实测值588.3751。
制备实施例23 步骤A 用NMM(511毫克，5.10毫摩尔)和甲磺酰氯(585毫克，5.10毫摩尔)处理0℃的胺23a(900毫克，3.40毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在0℃下搅拌12小时。反应混合物用CH2Cl2(300毫升)稀释并且用过量HCl水溶液洗涤(1M，500毫升)。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，Hex/EtOAc 1∶9→1∶1)，得到甲磺酰胺23b(1.00克)。
步骤B 用钯(200毫克，10％wt/C)处理甲磺酰胺23b(1.0克，2.9毫摩尔)的甲醇(30毫升)溶液并且在60psi下氢化3小时。反应混合物通过C矿塞过滤并且真空浓缩滤液。残余物不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
用光气(5毫升，15％甲苯溶液)处理0℃的去保护胺的CH2Cl2(10毫升)和饱和NaHCO3水溶液(10毫升)的溶液，并且在0℃下搅拌2小时。反应混合物用CH2Cl2(50毫升)稀释，并且用冷的NaHCO3水溶液洗涤有机层。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，进一步用10毫升甲苯稀释，浓缩二氯甲烷层，并且用作23c的溶液。
步骤C 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺20i(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)的溶液并且冷却至0℃。加入异氰酸酯的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，20→50％)，得到23。MS(m/z，相对强度)693[(M+K)+，10]，677[(M+Na)+，20]，655[(M+H)+，100]，449(30)，421(30)；HRMS(ESI)，C31H54N6O7SNa的计算值677.3672(M+Na)+；实测值677.3685。
制备实施例24
步骤A 室温下，将Boc保护的酮基酰胺22(220毫克，0.39毫摩尔)的甲酸溶液(5毫升)搅拌3小时，并且真空浓缩，其不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。
步骤B 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺24a(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)的溶液并且冷却至0℃。加入异氰酸酯的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，20→50％)，得到24(27毫克)。MS(m/z，相对强度)734[(M+K)+，10]，695[(M+H)+，100]，461(20)，443(20)；HRMS(FAB)C34H59N6O7S的计算值695.4166(M+H)+；实测值695.4161。
制备实施例25
步骤A 用NMM(511毫克，5.10毫摩尔)和噻吩磺酰氯(928毫克，5.10毫摩尔)处理0℃的胺23a(900毫克，3.40毫摩尔)的二氯甲烷溶液，并且在0℃下搅拌12小时。反应混合物用二氯甲烷(300毫升)稀释，并且用过量HCl水溶液(1M，500毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，Hex/EtOAc1∶9→1∶1)，得到磺酰胺25a(1.00克)，为无色固体。
步骤B 0℃下，用TFA(30毫升)和二甲基硫化物(7.78毫升)处理Cbz-保护的化合物25a(1.00克，2.118毫摩尔)并且在室温下搅拌3小时。真空浓缩反应混合物并且用NaOH水溶液(100毫升)稀释。用二氯甲烷(2×100毫升)萃取胺，并且将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，得到25b(800毫克)，其不用纯化即可在下面的反应中使用。
MS(m/z，相对强度)277[(M+H)+，100]，190(50)。
步骤C 0℃下，用光气(5毫升，15％甲苯溶液)处理CH2Cl2(10毫升)和饱和NaHCO3水溶液(10毫升)中去保护胺25b(800毫克，2.9毫摩尔)的溶液，并且在0℃下搅拌2小时。用CH2Cl2(50毫升)稀释反应混合物，并且用冷NaHCO3水溶液洗涤有机层。将有机层干燥，过滤，并且进一步用10毫升甲苯稀释，浓缩二氯甲烷，并且作为25c的溶液使用。
步骤D 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺24a(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷20→50％)，得到25(39毫克)，为无色固体。MS(m/z，相对强度)801[(M+K)+，10]，763[(M+H)+，100]，461(15)，277(20)；HRMS(ESI)，C37H58N6O7S2Na的计算值785.3706(M+Na)+；实测值785.3706。
制备实施例26 步骤A
用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺24i(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷20→50％)，得到26(31毫克)，为无色固体。MS(m/z，相对强度)761[(M+K)+，10]，720[(M+H)+，100]，421(20)；HRMS(ESI)，C34H54N6O7S2Na的计算值745.3393(M+Na)+；实测值745.3396。
制备实施例27 步骤A 用DPPA(116.5毫克，0.425毫摩尔)和Et3N(42.5毫克，0.425毫摩尔)处理酸27a(100毫克，0.385毫摩尔)的甲苯(5毫升)溶液并且在回流下搅拌1.5小时。反应混合物用饱和NaHCO3(30毫升)稀释，并且萃取到CH2Cl2中(2×20mL)。合并的有机相用NaHCO3水溶液(30毫升)，盐水(30毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且作为异氰酸酯的甲苯溶液使用。
步骤B
用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺24a(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯27b(3当量)的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷20→50％)，得到27，为无色固体。MS(m/z，相对强度)720[(M+H)+，85]，461(100)；HRMS(ESI)，C37H61N5O7SNa的计算值742.4189(M+Na)+；实测值742.4200。
制备实施例28 步骤A 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺20i(40毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯27b(3.00当量)的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷20→60％)，得到28(29毫克)，为无色固体。MS(m/z，相对强度)718[(M+K)+，10]，702[(M+Na)+，20]，680[(M+H)+，80]，421(100)；HRMS(ESI)，C34H57N5O7SNa的计算值702.3876(M+Na)+；实测值702.3889。
制备实施例29 步骤A 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺24a(50毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷20→50％)，得到29(41毫克)，为无色固体。MS(m/z，相对强度)628[(M+H)+，100]，129(35)。
制备实施例30
步骤A 用NMM(30毫克，0.3毫摩尔)处理胺24a(50毫克，0.1毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯(3.0当量)的CH2Cl2溶液，并且将反应混合物在室温下搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷20→50％)，得到30，为无色固体。MS(m/z，相对强度)668[(M+H)+，100]，169(50)，128(80)。
制备实施例31下式的制备 步骤A 根据制备实施例1，步骤C，Boc-Glu-OBn 31a(1.8克，5.36毫摩尔)和胺1d(1克，4.87毫摩尔)反应，并且通过硅胶色谱法纯化(10％至25％EtOAc/己烷)，得到31b(1.28克)。
步骤B 用10％Pd/C的EtOH溶液处理苄酯31b(1.25克，2.56毫摩尔)并且氢化(1大气压，室温)12小时。反应混合物通过C矿塞过滤并且真空浓缩，得到31c(997毫克)，其不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
步骤C 将酸31c(20.4克，48.7毫摩尔)的THF(300毫升)溶液冷却至0℃，并且用Et3N(7.47毫升，53.6毫摩尔)和氯甲酸乙酯(4.89毫升，51.2毫摩尔)处理并且搅拌2小时。过滤时形成白色沉淀并且用冷THF洗涤。将滤液冷却至0℃，并且加入NaBH4(2.39克，63.4毫摩尔)。用1小时滴加MeOH(20毫升)并且再搅拌2.5小时。真空去除溶剂，加入CH2Cl2，用水，盐水洗涤并且用Na2SO4干燥。过滤Na2SO4，并且去除溶剂至干。残余物通过硅胶色谱法纯化(50％至90％EtOAc/己烷)，得到31d(8.15克)。
步骤D
室温下，用LiOH·H2O(2.62克，62.5毫摩尔)处理MeOH(120毫升)和H2O(24毫升)中的酯31d(8克，20.8毫摩尔)的溶液12小时。真空去除溶剂至干。加入CH2Cl2，并且与1N.HCl(72.9毫摩尔)搅拌5分钟。分离CH2Cl2层，用盐水洗涤并且用Na2SO4干燥。过滤Na2SO4，并且去除溶剂至干，得到白色固体31e(7.65克)。
步骤E 将无水DMF(75毫升)和无水CH2Cl2(75毫升)中酸31e的溶液冷却至0℃，并且与HOOBt(3.68克，22.5毫摩尔)，NMM(6.77毫升，61.6毫摩尔)和EDCI(5.11克，26.7毫摩尔)搅拌5分钟。加入H-Lys(Z)-OMe·HCl(7.13克，21.5毫摩尔)并且在0℃下搅拌3.5小时。反应在5℃下保持12小时，然后去除CH2Cl2，加入EtOAc，并且用饱和NaHCO3，5％H3PO4，盐水洗涤，并且通过Na2SO4过滤。真空去除溶剂至干，得到31f(12.7克)。
步骤F
用10％Pd/C的EtOH(100毫升)溶液处理31f(5.5克，8.51毫摩尔)并且氢化(1大气压，室温)12小时。反应混合物通过C矿塞过滤并且真空浓缩，得到31g(4.25克)。
步骤G 室温下，胺31g(4.25克，8.3毫摩尔)的无水CH2Cl2(750毫升)溶液与三乙胺(1.5毫升，10.7毫摩尔)和4-硝基苯基氯甲酸(2.0克，9.96毫摩尔)搅拌5小时。真空去除溶剂达～200毫升，然后用饱和NaHCO3，水，5％H3PO4，盐水洗涤，并且通过Na2SO4过滤。过滤Na2SO4，去除溶剂，得到31h(5.82克)。
步骤H 室温下，用60％NaH(996毫克，24.9毫摩尔)处理31h(5.8克，8.3毫摩尔)的无水THF(600毫升)溶液22小时。通过经3分钟加入H2O(5毫升)，然后加入1N.HCl(50毫升)中止反应，真空去除溶剂，加入CH2Cl2，并且用5％H3PO4，盐水洗涤，并且通过Na2SO4过滤。过滤Na2SO4，去除溶剂，残余物在硅胶柱上色谱纯化，使用0.25％至3％MeOH/CH2Cl2，得到31i(2.86克，64％产率)。
步骤I 31i(613毫克，1.13毫摩尔)的溶液根据制备实施例1，步骤F进行反应，通过硅胶色谱法纯化(3％至6％MeOH/CH2Cl2)，得到醇31j(500毫克)。
步骤J 醇31j(480毫克，0.94毫摩尔)的溶液根据制备实施例1，步骤H进行反应，通过硅胶色谱法纯化(30％至60％丙酮/己烷)，得到醛31k(383毫克)。
步骤K
醛31j(365毫克，0.71毫摩尔)的溶液根据制备实施例22，步骤A进行反应，通过硅胶色谱法纯化(30％至60％丙酮/己烷)，得到31k(426毫克)。
步骤L 31l(357毫克，0.56毫摩尔)的溶液根据制备实施例22，步骤B反应，得到31m(426毫克)。
步骤M 31m(350毫克，0.59毫摩尔)的溶液根据制备实施例22，步骤C反应，并且通过硅胶色谱法纯化(30％至50％丙酮/己烷)，得到31(335毫克)。MS(ES)m/z，相对强度492[(M-BOC+1)+，80]；592[(M+1)+，100]。C29H46N5O8的计算值[M+1]+592.3346；实测值592.3359。
制备实施例32下面的制备
步骤A 用环丙基甲基异氰化物(66.5毫克，4.11毫摩尔)和乙酸(50毫克，0.82毫摩尔)处理醛20e(200毫克，0.42毫摩尔)的二氯甲烷(10毫升)溶液，并且在室温下搅拌12小时。真空浓缩反应，残余物通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，1∶9→1∶1)，得到32a(230毫克)。
MS(ES)m/z，相对强度 641[(M+Na)+，70]；619[(M+1)+，100]，519(50)。
步骤B 用LiOH·H2O(25毫克，0.55毫摩尔)处理甲醇(5.0毫升)，THF(5.0毫升)和水(5.0毫升)中的乙酸酯32a(230毫克，0.371毫摩尔)的溶液，并且在室温下搅拌1小时。反应混合物用HCl水溶液(1M，30毫升)稀释，并且用CH2Cl2(2×50毫升)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，不用进一步纯化即可在下一步中就此使用。
用Dess-Martin试剂(237毫克，0.558毫摩尔)处理醇的无水CH2Cl2(15毫升)溶液，并且在室温下搅拌2小时。反应混合物用Na2S2O3水溶液(5％，30毫升)和饱和NaHCO3水溶液(30毫升)稀释，并且在室温下搅拌15分钟。用CH2Cl2(3×50毫升)萃取反应混合物，将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，0∶1→1∶1)，，得到32，为无色固体(275毫克)。
MS(ES)m/z，相对强度629[(M+异丁烯)+，40]，575([M+1]+，100)，475(90)。
利用相似方法合成化合物33和34，制备实施例32步骤中A中使用环丙基和乙基异氰化物，制备实施例35下面的制备 步骤A 通过溶解于甲酸20毫升中并且静置2小时，将32(200毫克，0.39毫摩尔)去保护。真空浓缩反应混合物，得到35a，并且不用纯化即可在下面的反应中使用。
步骤B 用NMM(50毫克，0.5毫摩尔)处理胺35a(70毫克，0.13毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯25c(1毫升，0.25毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(150毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/CH2Cl2，50→100％)，得到35，为无色固体。
MS(ES)m/z相对强度799[(M+Na)+，60]；777[(M+1)+，100]。
制备实施例36下面的制备
步骤A 通过溶解于甲酸20毫升中并且静置2小时而将33(200毫克，0.39毫摩尔)去保护。将反应混合物真空浓缩，得到36a，并且不用进一步纯化即可使用。
步骤B 用NMM(50毫克，0.5毫摩尔)处理胺36a(70毫克，0.13毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯25c(1毫升，0.25毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(150毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/CH2Cl2，0→100％)，得到36，为无色固体。
MS(ES)m/z 相对强度 785[(M+Na)+，50]；763[(M+1)+，100]；593(60)。
制备实施例37下面的制备
步骤A 通过溶解于甲酸20毫升中并且静置2小时而将34(200毫克，0.39毫摩尔)去保护。将反应混合物真空浓缩，得到37a，并且不用进一步纯化即可使用。
步骤B 用NMM(50毫克，0.5毫摩尔)处理去保护胺37a(70毫克，0.13毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯25c(1毫升，0.25毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(150毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/CH2Cl2，50→100％)，得到37。
MS(ES)m/z 相对强度 773[(M+Na)+，100]；751[(M+1)+，70]。
制备实施例38下面的制备
步骤A 用NMM(50毫克，0.5毫摩尔)处理去保护胺37a(70毫克，0.13毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯27b(1.5毫升，0.25毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(150毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/CH2Cl2，50→100％)，得到38，为无色固体。
MS(ES)m/z 相对强度 730[(M+Na)+，30]；708[(M+1)+，100]；409(30)。
制备实施例39下面的制备 步骤A 用NMM(50毫克，0.5毫摩尔)处理胺36a(70毫克，0.13毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯27b(1毫升，0.25毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(150毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/CH2Cl2，50→100％)，得到39。
MS(ES)m/z 相对强度 742[(M+Na)+，70]；720[(M+1)+，100]；461(40)。
HRMSC37H62N5O7S的计算值[M+1]+720.4370；实测值720.4350。
制备实施例40下面的制备 步骤A 用NMM(50毫克，0.5毫摩尔)处理胺32a(70毫克，0.13毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯27b(1毫升，0.25毫摩尔)的CH2Cl2溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌1.5小时。反应混合物用二氯甲烷(150毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，30毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，EtOAc/CH2Cl2，50→100％)，得到40。
1H NMR(dmso，500MHz)，δ，8.80(t，1H，J＝6.0Hz)，8.37(d，1H，J＝9.5Hz)，6.22(d，1H，J＝8.8Hz)，5.88(s，1H)，5.31(dt，1H，J＝2.8&9.5Hz)，4.35(s，1H)，4.28-4.22(m，1H)，3.85(d，1H，J＝10Hz)，3.76(q，1H，J＝5.4Hz)，3.59(t，1H，J＝13.5Hz)，3.41(d，1H，J＝13.9Hz)，3.07-2.95(m，2H)，2.22-2.15(m，2H)，1.69-1.00(b，23H)，1.25(s，9H)，0.99(s，3H)，0.99-0.70(m，1H)，0.88(s，3H)，0.42-0.38(m，2H)，0.21-0.18(m，2H).
13C NMR(dmso，125MHz)δ，198.5，172.1，171.3，162.0，157.3，60.5，60.1，54.4，52.8，51.5，47.6，43.8，35.4，35.1，34.8，32.3，31.6，31.4，28.3，28.0，27.9，27.3，26.9，26.6，25.8，25.6，24.6，23.4，22.4，21.5，19.5，13.7，11.5.MS(ES)m/z 相对强度 756[(M+Na)+，45]；734[(M+1)+，100]；475(20).
HRMS计算值for C38H64N5O7S[M+1]+734.4526；实测值734.4535.
制备实施例41下面的制备 步骤A 将中间体22b(300毫克，0.54毫摩尔)的溶液溶解于甲醇(25毫升)，并且用10％Pearlman′s催化剂处理，并且在50psi下氢化4小时。反应混合物通过C矿塞过滤，并且真空浓缩，得到还原产物，其不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
用Dess-Martin试剂(350毫克，0.82毫摩尔)处理还原醇的无水CH2Cl2(5毫升)溶液，并且在室温下搅拌2小时。反应混合物用Na2S2O3水溶液(5％，30毫升)和饱和NaHCO3水溶液(30毫升)稀释，并且在室温下搅拌15分钟。用CH2Cl2(3×75毫升)萃取反应混合物，将合并的有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，0∶1→1∶1)，得到41(270毫克)，为无色固体。
制备实施例42下面的制备 步骤A 通过溶解于甲酸20毫升中并且静置2小时而将41去保护。将反应混合物真空浓缩，得到42a，并且不用纯化即可在下面的反应中使用。
步骤B 用NMM(60毫克，0.196毫摩尔)处理胺42a(100毫克，0.196毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯25c(1.5毫升，0.25毫摩尔，0.38毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0)，得到42(65毫克)，为无色固体。
1H NMR(dmso，500MHz)，δ，8.71(t，1H，J＝6.3Hz)，8.36(d，1H，J＝9Hz)，8.00(dd，1H，J＝1.3&5.0Hz)，7.65(dd，1H，J＝1.3&2.5Hz)，7.25(dd，1H，J＝3.8&1.3Hz)，6.15(d，1H，J＝9.0Hz)，5.88(d，1H，J＝10Hz)，5.31(m，1H)，4.34(s，1H)，4.30(m，1H)，3.93(d，1H，J＝10.5Hz)，3.79-3.75(q，1H，J＝5.0Hz)，3.67-3.62(dt，1H，J＝4.1&5.6Hz)，3.12-3.05(m，2H)，2.95-2.91(m，2H)，2.67(s，3H)，1.70-1.61(m，2H)1.40-1.00(b，20H)，0.99(s，3H)，0.85(s，3H)，0.83(s，9H)，0.83(t，3H).13CNMR(dmso，125MHz)□，198.5，172.0，171.7，162.2，158.3，137.7，133.9，133.1，129.0，60.5，55.8，55.7，52.7，51.6，51.5，47.6，36.0，35.0，32.2，31.6，31.3，28.5，27.9，27.4，27.1，26.9，26.7，26.3，24.4，22.8，22.3，19.5，13.7，12.1.MS(ES)m/z 相对强度788 [(M+Na)+，50]；765[(M+1)+，100].
制备实施例43下面的制备 步骤A 用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺42a(100毫克，0.196毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯27b(3毫升，0.1M溶液，0.3毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0)，得到43(42毫克)，为无色固体。
1H NMR(dmso，500MHz)δ，8.71(t，1H，J＝6.0Hz)，8.36(d，1H，J＝9.0Hz)，6.22(d，1H，J＝8.5Hz)，5.88(s，1H)，5.29(dt，1H，J＝9.5&2.5Hz)，4.34(s，1H)，4.23(t，1H，J＝9.0Hz)，3.86(d，1H，J＝10.5Hz)，3.76(dd，1H，J＝5.0&5.5Hz)，3.60(d，1H，J＝13.5Hz)，3.41(d，1H，J＝13.5Hz)，3.13-3.04(m，2H)，2.23-2.15(m，2H)，1.67-0.9(bm，30H)，1.25(s，9H)，0.99(s，3H)，0.88(s，3H)，0.83(t，3H，J＝7.0Hz).13C NMR(dmso，125MHz)δ，198.5，172.1，171.3，162.1，157.3，60.5，60.1，55.8，54.3，52.8，51.0，47.6，35.4，35.1，32.3，31.7，31.3，28.3，28.0，27.9，27.3，26.9，26.6，26.2，25.8，24.6，23.3，22.8，21.5，19.5，13.7，12.2.MS(ES)m/z相对强度 744[(M+Na)+，40]；722[(M+1)+，100].
制备实施例44下面的制备 步骤A 0℃下，用光气(5毫升，15％甲苯溶液)处理CH2Cl2(10毫升)饱和NaHCO3水溶液(10毫升)中的去保护胺44a(Busacca，C.A.；Grossbach，D.；Spinell，E.TetrahedronAsymmetry，2000，9，1907)的溶液，并且在0℃下搅拌2小时。反应混合物用CH2Cl2(50毫升)稀释，并且用冷的NaHCO3水溶液洗涤有机层。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，并且用10毫升甲苯进一步稀释，浓缩二氯甲烷层，并且使用其溶液。
步骤B
用NMM(60毫克，0.196毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.196毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯44b(2.5毫升，0.25毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0)，得到44(31毫克)，为无色固体。
MS(ES)m/z相对强度755[(M+Na)+，40]；733[(M+1)+，100]。
制备实施例45下面的制备 步骤A 用(C2H5)3N(3.7克，37毫摩尔)和2-吡啶磺酰氯(2.4克，11.2毫摩尔)处理0℃的胺45a*(2.00克，9.20毫摩尔)的二氯甲烷溶液，并且在室温下搅拌12小时。反应混合物用二氯甲烷(300毫升)稀释，并且用过量NaHCO3水溶液(1M，500毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，0∶1→1∶1)，得到磺酰胺(2.3克)。
通过(2.1克，5.7毫摩尔)溶解于4M HCl的二烷溶液这种而将Boc-保护的胺溶液去保护，并且在室温下搅拌2小时。将反应混合物真空浓缩，并且不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。
*通过用二碳酸二叔丁酯保护叔-亮氨酸-N-甲基酰胺(TCI-Jpn)，并且接着用BH3·DMS的THF溶液还原(回流，2h)而获得。
步骤B
0℃下，用光气(2.5毫升，15％甲苯溶液)处理CH2Cl2(3毫升)饱和NaHCO3水溶液(3毫升)中的胺45b(300毫克，1毫摩尔)的溶液，并且在0℃下搅拌2小时。反应混合物用CH2Cl2(30毫升)稀释，并且用冷的NaHCO3水溶液洗涤有机层。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，并且用3毫升甲苯进一步稀释，浓缩二氯甲烷层，并且使用其溶液。
步骤C.
用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.197毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯45c(2.5毫升，0.25毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0)，得到产物45，为无色固体。利用HPLC将粗产物混合物进一步纯化，得到纯产物45(27毫克)。
1H NMR(dmso，500MHz)δ8.89(t，1H，J＝7.0Hz)，8.72(d，1H，J＝6.0Hz)，8.37(d，1H，J＝10.5Hz)，8.07(t，1H，J＝9.0Hz)，7.88(d，1H，J＝9.0Hz)，7.66(dd，1H，J＝6.5&3.5Hz)，6.12(d，1H，J＝11Hz)，5.84-5.75(m，2H)，4.27(s，1H)，4.22(bt，1H，J＝11.5Hz)，3.92(d，1H，J＝13Hz)，3.77-3.60(m，4H)，3.33(bd，1H)，3.06(bt，1H，J＝12.5Hz)，2.75(s，3H)，1.68-1.59(m，2H)，1.44-1.12(m，18H)，0.98(s，3H)，0.83(s，3H)，0.78(s，9H).13C NMR(dmso，125MHz)δ，198.3，172.1，171.7，162.1，158.3，157.1，151.0，139.6，135.0，127.9，123.3，116.4，60.5，55.8，52.8，52.2，51.5，36.4，35.0，28.0，27.1，26.9，26.3，19.5，13.7.MS(ES)m/z相对强度780[(M+Na)+，50]；758[(M+1)+，100].
制备实施例46下面的制备 步骤A 用氯甲酸苯甲酯(6.7毫升，47.0毫摩尔)处理0℃的(S)-叔-leucinol(5.0克，42.7毫摩尔，Aldrich)46a的CH2Cl2溶液(100.0毫升)，接着用Hunig′s碱(9.3毫升，53.3毫摩尔)处理。让反应混合物温热至室温并且搅拌过夜。反应混合物用乙酸乙酯(500毫升)稀释，用10％KH2PO4洗涤，接着用饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，并且浓缩，得到保护的leucinol(10.7克，100％)，其不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
向0℃的被保护leucinol(粗产物)(10.7克，42.7毫摩尔)的CH2Cl2(100.0毫升)溶液加入吡啶(20.0毫升)和甲磺酰氯(3.63毫升，47.0毫摩尔)。让反应混合物温热至室温并且搅拌过夜，浓缩，再溶解于乙酸乙酯(500毫升)，用饱和NaHCO3和盐水洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，浓缩，并且通过色谱法经SiO2纯化，使用乙酸乙酯/己烷(1∶4)，得到46b(14.0克，100％)。
步骤B 用(C4H9)4NBr(582毫克，1.8毫摩尔)，K2CO3(2.72克，1.97毫摩尔)和2-羟基吡啶(937毫克，9.85毫摩尔)处理含有水(400微升)的甲苯(72毫升)中46b(3.1克，9.9毫摩尔)的溶液。搅拌下将反应混合物回流过夜，过滤，并且真空浓缩滤液。通过急骤层析法经SiO2纯化残余物，使用乙酸乙酯/CH2Cl2(1∶9至1∶1)，得到46c(1.15克，35％)，为无色油状物。
步骤C 用Pd/C(10％w/w，450毫克)处理吡啶酮46c(1.15克)的MeOH(50毫升)溶液，并且置于Pare摇动器中并且在40psi下氢化4小时。反应混合物通过C矿塞过滤，并且真空浓缩，得到46d，其不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。
步骤D 用光气(5毫升，15％甲苯溶液)处理0℃的CH2Cl2(10毫升)饱和NaHCO3水溶液(10毫升)中的胺46d(600毫克，3.03毫摩尔)的溶液，并且在0℃下搅拌2小时。反应混合物用CH2Cl2(50毫升)稀释，并且用冷的NaHCO3水溶液洗涤有机层。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，并且用3毫升甲苯进一步稀释，浓缩二氯甲烷层，并且使用其甲苯溶液。
步骤E 用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.197毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯46e(2.5毫升，0.25毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0，和100％乙酸乙酯)，得到产物46(30毫克)，为无色固体。
1H NMR(dmso，500MHz)δ，8.92(t，1H，J＝6.5Hz)，8.39(d，1H，J＝9.0Hz)，6.17(d，1H，J＝9.0Hz)，5.81(m，1H)，5.69(d，1H，J＝10.5Hz)，5.29(bt，1H，J＝10.0Hz)，5.13-5.10(m，2H)，4.33(s，1H)，4.30-4.26(m，1H)，3.86-3.65(m，6H)，3.50(bt，1H，J＝12Hz)，3.15-3.08(m，2H)，2.21-2.05(m，2H)，1.74-1.54(bm，6H)，1.46-1.11(bm，18H)，0.99(s，3H)，0.84(s，3H)，0.82(s，9H).13C NMR(dmso，125MHz)δ，198.2，172.1，171.3，169.3，162.1，158.2，135.0，116.4，60.5，55.8，55.1，52.8，51.5，48.3，47.6，47.0，41.7.34.6，33.0，32.4，31.5，28.3，28.0，27.8，27.2，26.9，26.2，24.5，23.7，22.4，21.9，19.5，13.7.
制备实施例47下面的制备 步骤A 将胺，47a，(C.A.Busacca等，TetrahedronAsymmetry；(2000)9，1907)(1.5克，6.9毫摩尔，1当量)溶解于无水二氯甲烷(20毫升)并且冷却至-78℃，直到加入完成，然后搅拌过夜，使其升至室温。用二氯甲烷稀释并且用水，1N HCl并且最后用盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤，并真空浓缩。通过急骤层析柱纯化分离的粗产物(10→30％EtOAc-己烷)，得到1.27克(58％)47b。
1H NMR(CDCl3，300MHz)δ4.6(d，1H)，3.45(m，1H，)，3.25(d，1H)，2.89(s，6H)，1.89(bs，NH)，1.22(s，9H)，0.98(s，9H).
MS(ESI)，m/z，相对强度324[(M+1)85]，268(100)，224(50).
步骤B 惰性气体下，向0℃的DMF(10毫升)中的Boc保护磺酰基脲47b(440毫克，1.25毫摩尔，1当量)加入Cs2CO3(613毫克，1.5当量，1.88毫摩尔)和Mel(6.36毫摩尔，5当量，0.601毫升)。将反应混合物在室温下搅拌90分钟并且用水中止反应。用EtOAc萃取含水层，用水和盐水洗涤4次。用无水硫酸钠干燥有机层，过滤，蒸发溶剂，得到420毫克(91％)47c，其不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
1H NMR(CDCl3，300MHz)□.4.59(d，1H)，3.62-3.58(m，1H，)，3.29-3.22(m，1H)，2.80(s，3H)，2.79(s，6H)，1.89(bs，NH)，1.22(s，9H)，0.98(s，9H).MS(ESl)，m/z，相对强度 338[(M+1)60l，282(100)，238(90).
步骤C 室温下，向Boc-保护磺酰基脲47c(890毫克，1当量)加入4MHCl的二烷溶液(25毫升)并且搅拌1小时。起始物小时之后(TLC)，浓缩反应混合物，并且与己烷和乙醚共沸。残余物用乙醚研磨，过滤分离的固体并且真空干燥，得到浅黄色固体(720毫克，～100％)。其不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。
步骤D
向胺盐酸盐47d(720毫克，2.63毫摩尔)的二氯甲烷(15毫升)溶液加入15毫升饱和NaHCO3水溶液并且在0℃下剧烈搅拌5分钟。向下层通入光气溶液(2当量，20％甲苯溶液)，并且立刻恢复剧烈搅拌。在几个时间点检查TLC，2小时之后，其显示起始物反应完全。分离二氯甲苯层，并且用二氯甲烷(30毫升)萃取含水层。用无水硫酸钠干燥合并的有机层，过滤，并且使用旋转蒸发器室温下减压浓缩至体积减半，然后通入N215分钟。用二氯甲烷将溶液稀释至130毫升，并且在下面的反应中以0.02M溶液使用。
步骤E 用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.197毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯47e(1.5毫升，0.25毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0，和100％乙酸乙酯)，得到产物47(49毫克)，为无色固体。
1H NMR(dmso，500MHz)δ，8.89(t，1H，J＝6Hz)，8.37(d，1H，J＝9.0Hz)，6.15(d，1H，J＝9.0Hz)5.83-5.76(m，2H)，5.31-5.27(m，2H)，4.33(s，1H)，4.30-4.28(m，1H)，3.91(d，1H，J＝10.5Hz)，3.80-3.70(m，4H)，3.63-3.59(m，1H)，2.93(dd，1H)，2.7(s，3H)，2.69(s，6H)，1.73-1.65(m，2H)，1.51-1.02(m，18H)，0.99(s，3H)，0.84(s，3H)，0.81(m，9H)13C NMR(dmso，125MHz)δ，198.3，172.1，171.7，162.1，158.2，135.0，116.5，60.5，55.8，52.8，51.7，1.3，47.6，41.1，38.5，36.0，34.9，32.3，31.6，31.3，28.5，28.4，27.9，27.4，27.4，27.1.MS(ES)m/z 相对强度 746[(M+Na)+，40]；724[(M+1)+，100].
制备实施例48下面的制备 步骤A 根据对于化合物45b的制备方法的描述，从48a和2-碳甲氧基-3-噻吩磺酰氯化合物制备化合物48b。
步骤B 向-78℃的酯48b(4.65克，11.1毫摩尔)的无水甲苯(40毫升)溶液加入DIBAL-H甲苯溶液(23.0毫升，34.5毫摩尔)。将混合物在-78℃下搅拌20分钟并且在室温下搅拌2小时。加入甲醇(20毫升)后加入10％柠檬酸水溶液(100毫升)。搅拌5分钟之后，加入EtOAc(200毫升)并且分离各层。用EtAOc(2×100毫升)萃取含水层。合并有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过急骤柱层析纯化残余物，使用10-50％丙酮/己烷，得到4.6克(定量)48c。
步骤C
向0℃的48c(1.04克，2.65毫摩尔)的CH2Cl2(50毫升)溶液加入甲磺酰氯(0.23毫升，2.97毫摩尔)和三乙胺(0.80毫升，5.74毫摩尔)。用冰浴将混合物温热至室温并且搅拌18小时。加入EtOAc(200毫升)和5％H3PO4溶液(100毫升)。并且分离各层。用1N碳酸钠溶液(100毫升)洗涤有机溶液，过滤并浓缩，通过急骤柱色谱法纯化残余物，使用10-50％丙酮/己烷，得到0.80克(73％)48d。
步骤D 室温下，将无水DMF(100毫升)中48d(1.17克，2.85毫摩尔)和碳酸铯(1.40克，4.30毫摩尔)搅拌18小时。加入水(50毫升)，盐水(50毫升)和EtOAc(300毫升)并且分离各层。用水洗涤有机溶液(3×150毫升)，然后将其干燥，过滤并浓缩，得到0.99克期望的产物48e(93％)。
步骤E 根据对于化合物45b和45c的制备方法的描述，从48e制备化合物48f。
步骤F
用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.197毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯48f(2毫升，0.25毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0，和100％乙酸乙酯)，得到产物48，为无色固体。
制备实施例49下面的制备 步骤A 将2M LDA/THF-庚烷(Acros Chemical Co.)的50毫升THF的溶液冷却至-70℃，＜-60℃下滴加环己烷羧酸酯49a。-70℃下再搅拌0.5小时，＜-60℃下滴加2-吡啶甲基氯的40毫升乙醚溶液。然后让温度经2小时缓慢升至室温，再搅拌2小时。在200毫升20％KH2PO4水溶液和5毫升12NHCl的冷的混合物中中止反应，用EtOAc萃取混合物，萃取液用盐水洗涤，然后用MgSO4干燥。将混合物过滤，蒸发滤液，残余物从二甲苯中蒸发两次，最后的残余物在硅胶上进行色谱法(1∶3Et2O-CH2Cl2至1∶1丙酮-CH2Cl2)，得到49b。
步骤B
用30毫升1N LiOH水溶液处理酯49b的20毫升二烷溶液，将混合物在100℃下搅拌6小时。混合物在冰-水中中止反应，用乙醚萃取，使用3N HCl将冷的含水相缓慢酸化至pH大约为4。过滤沉淀物，用水洗涤，并且干燥，得到产物酸，其不用进一步纯化即可在下面的步骤中使用。酸向异氰酸酯49c的转化与制备实施例27中27b的合成相同。
步骤C 用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.197毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯49c(2.9毫升，0.25毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，乙酸乙酯/己烷，1∶1→1∶0，和100％乙酸乙酯)，得到产物49，为无色固体。
制备实施例50下面的制备
步骤A 0℃下，将150毫升无水二氯甲烷和150毫升无水DMF中吡嗪羧酸50a(Aldrich，3克)的溶液搅拌并且用HATU(1.4当量，6.03克)处理。小批量加入L-环己基甘氨酸-甲酯盐酸盐(1.2当量，6.03克)。然后滴加N-甲基吗啉(4当量，10毫升，d 0.920)。将反应混合物逐渐温热至室温并且搅拌20小时。减压去除所有的挥发物并且将残余物溶解于500毫升乙酸乙酯。有机层用水(100毫升)，1N HCl水溶液(100毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(100毫升)，和盐水(100毫升)洗涤。用硫酸镁干燥有机层，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；5∶95至3∶7)，得到产物50b(6.5克，95％)，为白色固体。
步骤B 将270毫升THF/MeOH/H2O的1∶1∶1混合物中甲酯50b(6.5克)的溶液冷却至0℃并且用氢氧化锂一水合物处理(2.5当量，2.45克)。搅拌混合物并且通过TLC(丙酮/己烷；2∶8)监测。当所有的起始物反应完全之后，用100毫升1N HCl水溶液处理反应混合物，并且将混合物真空浓缩。加入二氯甲烷(250毫升)并且分离各层。用二氯甲烷(3×80毫升)萃取含水层。将合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到酸50c。
步骤C
将无水CH2Cl2(2毫升)和DMF(2毫升)的酸24a(100毫克，0.197毫摩尔)的溶液冷却至0℃，并且用酸50c(51.8毫克，0.197毫摩尔)，HATU(94毫克，0.25毫摩尔)和NMM(45毫克，0.45毫摩尔)处理。0℃下将反应搅拌12小时并且真空浓缩。残余物溶解于CH2Cl2(100毫升)并且用HCl水溶液(1M，2×30毫升)，饱和NaHCO3水溶液(2×30毫升)，盐水(30毫升)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩。粗产物二肽通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷0∶1→1∶1)得到50。
1H NMR(dmso，400MHz)δ，9.16(δ，1H，J＝12Hz)，8.89(d，1H，J＝2.4Hz)，8.74(s，1H)，8.59(d，1H，J＝7.4Hz)，8.43-8.38(m，2H)，5.81-5.75(m，1H)，5.28(t，1H，J＝10.8Hz)，5.11-5.03(m，2H)，4.45-4.31(m，3H)，3.88-3.70(m，5H)，1.65-1.22(m，31H)，0.97(s，3H)，0.83(s，3H).MS(ES)m/z相对强度728[(M+Na)+，4]；706[(M+1)+，80].
制备实施例51下面的制备 步骤A 用三苯基膦(1.52克，5.75毫摩尔)和二甲基戊二酰亚胺(780毫克，5.52毫摩尔)处理惰性气体保护的醇51a(1.00克，4.6毫摩尔)的无水CH2Cl2(30毫升)溶液。将反应混合物冷却至0℃并且滴加DIAD(930毫克，4.60毫摩尔，在4毫升CH2Cl2中)处理并且温热至室温。室温下搅拌5小时并且真空浓缩。通过色谱法纯化残余物(SiO2，己烷/丙酮1∶0→1∶1)，得到51b(600毫克)，为无色固体。
步骤B 室温下将51b(500毫克，1.5毫摩尔)的HCl(15毫升，4M二烷溶液)溶液搅拌1小时并且真空浓缩。残余物不用进一步纯化即可在下面的反应中使用。用光气(5毫升，15％甲苯溶液)处理0℃的CH2Cl2(10毫升)和饱和NaHCO3水溶液(10毫升)中去保护胺的溶液并且0℃下搅拌2小时。用CH2Cl2(50毫升)稀释反应混合物并且用冷的NaHCO3水溶液洗涤有机层。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，并且进一步用3毫升甲苯稀释，浓缩二氯甲烷层并且使用其溶液。
步骤C 用NMM(60毫克，0.6毫摩尔)处理胺24a(100毫克，0.197毫摩尔)的二氯甲烷(3.0毫升)溶液，并且冷却至0℃。加入异氰酸酯51c(2毫升，0.5毫摩尔)的甲苯溶液，并且在室温下将反应混合物搅拌2小时。反应混合物用二氯甲烷(100毫升)稀释，并且用HCl水溶液(1M，50毫升)洗涤。将有机层干燥(MgSO4)，过滤，真空浓缩，并且通过色谱法纯化(SiO2，丙酮/己烷，0∶1→1∶1)，得到产物51，为无色固体。
1H NMR(dmso，500MHz)δ，8.91(d，1H)，6.19(d，1H，J＝8.5Hz)，5.84-5.57(m，1H)，5.58(d，1H，J＝10.5Hz)，5.28(t，1H，J＝7.0Hz)，5.10-5.05(m，2H)，4.31(s，1H)，4.18(t，1H，J＝8.5Hz)，3.83-3.57(m，7H)，2.44-2.38(AB，4H)，1.66-1.62(m，2H)，1.44-1.03(m，18H)，0.98&0.96(2s，9H)，0.84&0.81(2s，12H).13C NMR(dmso，125MHz)δ，198.2，172.7，172.1，171.3，162.1，158.1，135.0，116.4，60.5，55.5，52.9，51.3，47.5，46.4，41.7，39.6，35.0，32.4，31.5，31.3，29.3，28.3，27.9，27.0，26.9，26.6，26.1，24.5，22.4，19.5，13.7.MS(ES)m/z 相对强度 749[(M+Na)+，20]；727[(M+1)+，100].
制备实施例52下面的制备 步骤A 将N-Boc-L-Ser-OMe(3.6克，Aldrich)的150毫升无水THF溶液脱气(真空/充满N2)，并且用碳酸烯丙酯甲酯(1.4当量，2.6毫升，d 1.022)处理。加入催化剂量的四(三苯基膦)钯(0.02摩尔％，379毫克)。再将稍微有些黄的混合物脱气并且在60℃下加热大约3小时，直到TLC分析(丙酮/己烷；2∶8)显示没有起始物剩余(反应混合物变成棕色)。减压去除THF，残余物用300毫升乙酸乙酯稀释并且用80毫升饱和碳酸氢钠水溶液和80毫升盐水洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；5∶95至2∶8)，得到产物52b，为澄清油状物(2.7克，64％)。
步骤B
用氢氧化锂一水合物(2.5当量，630毫克)处理90毫升THF/MeOH/H2O(1∶1∶1)混合物中甲酯52b(1.5克)的溶液。将反应在室温下搅拌并且通过TLC监测(丙酮/己烷；1∶9)。45分钟之后，减压去除所有的挥发物。残余物分配在80毫升1N HCl水溶液和200毫升二氯甲烷中。用二氯甲烷回萃含水层(2×80毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并且减压浓缩，得到产物52c，为澄清油状物(1.4克，95％)。
步骤C 0℃下搅拌40毫升无水二氯甲烷和40毫升无水DMF中酸52c(6毫摩尔)的溶液，并且用HATU(1.4当量，3.2克)处理。依次加入胺盐酸盐1d(1.3当量，1.6克)和N-甲基吗啉(4当量，2.6毫升，d 0.920)。将反应混合物逐渐温热至室温并且搅拌过夜。减压去除所有的挥发物，残余物溶解于300毫升乙酸乙酯。有机层用1N HCl水溶液(50毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)和盐水(50毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；5∶95至2∶8)，得到期望的产物52d(2.23克，93％)，为澄清油状物。
步骤D
0℃下用氢氧化锂一水合物(2.5当量，300毫克)处理45毫升THF/MeOH/H2O(1∶1∶1)混合物中甲酯52d(2.23克)的溶液。去除冷却浴并且将反应混合物在室温下搅拌并且通过TLC监测(丙酮/己烷；2∶8)。1小时之后，加入10毫升1N HCl，减压去除所有的挥发物。残余物分配在30毫升1N HCl水溶液和100毫升二氯甲烷中。用二氯甲烷回萃含水层(2×50毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并且减压浓缩，得到产物52e(1.88克，88％)，为澄清油状物。
步骤E 0℃下搅拌20毫升无水二氯甲烷和20毫升无水DMF中酸52e(830毫克)的溶液，并且用HATU(1.4当量，1.15克)处理。在10毫升二氯甲烷中加入胺盐酸盐1f(1.1当量，227毫克)接着加入N-甲基吗啉(4当量，0.95毫升，d 0.920)。将反应混合物在冰箱(-20℃)中保持48小时。减压去除所有的挥发物，残余物溶解于200毫升乙酸乙酯。有机层用水(50毫升)，1N HCl水溶液(50毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)和盐水(50毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；5∶95至3∶7)，得到为白色固体的期望的产物52f(680毫克)，和少量非对映体产物(130毫克)，总产率70％。
步骤F
将0.01M二烯52f(670毫克)的甲苯溶液脱气30分钟(通入氩气)并且用Grubb′s催化剂(0.2当量，205毫克)处理。将粉色溶液加热至60℃反应16小时(加热10分钟之后溶液变暗)。减压去除溶剂并且残余物在硅胶上进行色谱法(梯度乙酸乙酯/己烷；2∶8至1∶1)，得到烯烃产物52g(570毫克，90％)，为E-和Z-异构体混合物(大约4∶1)。
步骤G 用碳上二氢氧化钯(0.1摩尔％，78毫克20％Pd(OH)2/C)处理20毫升甲醇中烯烃52g(570毫克)的溶液。50psi下将混合物氢化，直到所有的起始物反应完全。反应混合物用100毫升二氯甲烷稀释并且通过短路径C矿过滤。浓缩滤液，残余物在硅胶上进行色谱法，得到产物52h(590毫克，70％)，为澄清油状物。
步骤H
用氢硼化锂(2.1当量，1.2毫升2M THF溶液)处理20毫升无水THF中甲酯52h(580毫克)的溶液。室温下搅拌反应混合物并且通过TLC(丙酮/己烷；3∶7)监测起始物的消失。5小时之后，通过加入饱和氯化铵水溶液(3毫升)中和过量氢硼化锂。混合物分配在乙酸乙酯(100毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(50毫升)中。用乙酸乙酯(2×30毫升)和二氯甲烷(2×30毫升)回萃含水层。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至5∶5)，得到产物52i(360毫克，68％)，为白色固体。
步骤I 用Dess-Martin全碘烷(3当量，925毫克)处理20毫升无水二氯甲烷中醇52i(350毫克)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌45分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(15毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(15毫升)处理混合物并且搅拌15分钟。用二氯甲烷萃取混合物(3×50毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物52j(285毫克，83％)，为无色固体。
步骤J 用烯丙基异氰化物(2当量，77毫克)和乙酸(2当量，0.064毫升，d1.049)处理10毫升无水二氯甲烷中醛52j(270毫克)溶液。将混合物搅拌大约5小时。减压去除所有的挥发物，残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，得到产物52k(303毫克，90％)，为白色固体。
步骤K 乙酸酯52k(300毫克)溶解于15毫升1∶1∶1THF/MeOH/H2O的混合物中，并且用氢氧化锂一水合物(2.5当量，51毫克)处理。通过TLC(丙酮/己烷；4∶6)监测反应的进行。15分钟之后，在旋转蒸发器中浓缩反应混合物，并且残余物分配在二氯甲烷(80毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)之间。用二氯甲烷回萃含水层(3×50毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。粗产物52l(276毫克，98％)不用进一步纯化即可使用。
步骤L 用Dess-Martin全碘烷(3当量，424毫克)处理20毫升无水二氯甲烷中羟基酰胺52l(276毫克)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(20毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(10毫升)处理混合物并且搅拌10分钟。用二氯甲烷萃取混合物(3×20毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物52(236毫克，86％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ，7.47(d，1H，J＝7.56Hz)，7.03(dd，1H，J＝5.68，5.99Hz)，5.88(ddt，1H，J＝5.6，10.0，17.0Hz)，5.50(d，1H，J＝8.83Hz)，5.46(m，1H)，5.28(dd，1H，J＝0.9，17.0Hz)，5.25(dd，1H，J＝0.9，10.0Hz)，4.61(m，1H)，4.51(s，1H)，3.99(dt，2H，J＝1.2，5.6Hz)，3.88(dd，1H，J＝5.0，10.8Hz)，3.83(d，1H，J＝11.0Hz)，3.66(m，2H)，3.48(dd，2H，J＝4.7，5.6Hz)，1.95(m，1H)，1.81(d，1H，J＝7.56Hz)，1.47(s，9H)，1.27-1.63(m，12H).1.09(s，3H)，0.93(s，3H)13C NMR(CDCl3，125MHz)δ196.7，170.9，170.7，159.3，155.6，133.2，117.9，80.4，71.0，70.8，61.2，54.5，52.9，48.2，42.1，31.4，29.3，28.7，27.8，26.8，26.6，26.4，23.6，23.4，19.2，13.2ppm；HRMS C29H47N4O7[M+H]+计算值563.3445，实测值563.3457.
制备实施例53下面的制备 步骤A N-Boc保护的胺52(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中并且在室温下搅拌1小时。减压去除所有的挥发物并且将产物放置在高真空下3小时。对于产物53a(99％)没有进行进一步纯化。
步骤B 胺盐53a(31毫克)溶解于5毫升无水二氯甲烷中并且冷却至0℃。然后滴加10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后加入异氰酸酯27b(2.5当量，0.8毫升0.2M甲苯溶液)溶液并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴，并且在室温下将混合物搅拌3小时。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至4∶6)，得到产物53(25毫克，58％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ，7.90(d，1H，J＝8.5Hz)，7.38(br s，1H)，5.9(ddt，1H，J＝5.6，10.4，17.0Hz)，5.61(ddd，1H，J＝1.6，8.8，10.4Hz)，5.27(dd，1H，J＝1.26，17.3Hz)，5.24(dd，1H，J＝1.26，10.0Hz)，4.9(dd，1H，J＝3.4，8.8Hz)，4.53(s，1H)，3.94-4.08(m，4H)，3.62(dd，1H，J＝8.5，8.8Hz)，3.56(m，1H)，3.47(dd，1H，J＝4.0，7.9Hz)，3.37(ddd，1H，J＝2.2，7.2，9.4)，3.15(d，1H，J＝13.5Hz)，2.4(m，1H)，2.24(m，1H)，1.95(m，1H)，1.85(m，1H)，1.27-1.70(m，20H)，1.4(s，9H)，1.2(m，1H)，1.07(s，3H)，0.94(s，3H)，0.92(m，1H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.0，172.1，171.0，159.5，157.0，133.3，117.7，70.8，70.5，61.0，60.8，54.9，53.8，51.0，48.4，42.2，36.2，32.0，30.5，28.7，27.9，27.2，27.0，26.8，25.9，24.1，23.9，23.5，21.9，21.8，19.3，13.4ppm；HRMSC36H60N5O8S[M+H]+计算值722.4163，实测值722.4193.
制备实施例54下面的制备 步骤A 胺盐53a(17毫克)溶解于2毫升无水二氯甲烷中并且用固体碳酸氢钠(3当量，8毫克)处理，然后加入异氰酸酯54a(2.5当量，0.26毫升0.307M甲苯溶液)。将得到的不均匀混合物在室温下搅拌大约3小时。混合物用50毫升乙酸乙酯稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)，和盐水(10mL)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至1∶1)，得到产物54(8毫克，34％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ，7.91(br s，1H)，7.40(m，1H)，6.37(br s，1H)，5.91(ddt，1H，J＝5.6，10.4，17.3Hz)，5.88(br s，1H)，5.62(dt，1H，J＝1.26，9.45Hz)，5.28(dd，1H，J＝1.26，17.3Hz)，5.23(dd，1H，J＝1.26，10.4Hz)，4.92(ddd，1H，J＝3.46，8.5，8.5Hz)，4.77(dd，1H，J＝4.7，8.8Hz)，4.55(s，1H)，3.94-4.06(m，4H)，3.63(t，1H，J＝8.2Hz)，3.54(ddd，1H，J＝3.4，6.6，9.7Hz)，3.47(m，1H)，3.38(m，1H)，2.09(ddd，1H，J＝4.4，7.8，12.3Hz)，1.91(m，2H)，0.91-1.83(m，27H)，1.07(s，3H)，0.94(s，3H)；HRMSC36H56N5O7[M+H]+计算值670.4180，实测值670.4177.
制备实施例55下面的制备 步骤A 用固体碳酸氢钠(3当量，8毫克)处理2毫升无水中胺盐53a(17毫克)的溶液，然后加入异氰酸酯25c(2.5当量，0.45毫升0.18M甲苯溶液).室温下将得到的不均匀混合物搅拌大约3小时。用50毫升乙酸乙酯稀释混合物并且用1M HCl水溶液(10毫升)，和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至1∶1)，得到产物55(8毫克，30％)，为白色固体。
HRMSC36H57N6O8S2[M+H]+计算值765.3679，实测值765.3687。
制备实施例56下面的制备
步骤A 将200毫升无水THF中4，4-二甲基戊二酰亚胺56a(Aldrich，1.5当量，4.86克)的溶液冷却至0℃，并且用三苯基膦(3当量，18.07克)和S-Boc-叔丁基甘氨酸醇56b(Aldrich，5克)处理。
滴加二异丙基偶氮二羧酸(2.5当量，11.3毫升，d 1.027)，并且将得到的溶液在0℃下搅拌。10分钟之后，混合物变成浆液，继续搅拌过夜(0至25℃)。减压浓缩混合物并且将残余物溶解于80毫升乙醚。加入己烷(100毫升)并且过滤出沉淀物，将滤液浓缩至其一半的体积并且再次加入己烷(100毫升)。过滤出沉淀物，减压浓缩滤液。残余物在硅胶上进行色谱法(乙酸乙酯/己烷；2∶8)，得到产物56c(4.0克，51％)，为白色固体。
步骤B 将N-Boc保护的胺56c(4.0克)溶解于200毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌混合物，10分钟之后沉淀出白色固体。将混合物进一步搅拌2小时。减压去除所有的挥发物，得到产物56d(3.24克，98％)，为白色固体。
步骤C
用50毫升饱和碳酸氢钠水溶液处理胺盐酸盐56d(1.5克)的60毫升的二氯甲烷溶液并且在0℃下剧烈搅拌10分钟。停止搅拌让各层分离。通过探针向一部分中有机层(下层)通入光气(15毫升，20％甲苯溶液)。加入之后立刻在0℃下剧烈搅拌混合物10分钟并且在室温下搅拌2.5小时。混合物用100毫升二氯甲烷稀释并且分离各层。有机层用40毫升冷的饱和碳酸氢钠水溶液洗涤并且用硫酸镁干燥。过滤有机层并且用50毫升甲苯稀释。产物56e(1.44克，98％)以0.216M甲苯溶液保存。
步骤C 将N-Boc胺52(200毫克)溶解于20毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后，滴加异氰酸酯56e溶液(1.2当量，1.97毫升0.216M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；15∶85至55∶45)，得到产物56(172毫克，66％)，为白色固体。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ，7.95(d，1H，J＝8.8Hz)，7.59(br s，1H)，5.91(br s，1H)，5.84(ddt，1H，J＝5.8，10.2，16.8Hz)，5.61(ddd，1H，J＝1.5，8.7，10.2Hz)，5.21(dd，1H，J＝1.4，17.5Hz)，5.17(dd，1H，J＝1.4，10.2Hz)，5.13(br s，1H)，4.86(br s，1H)，4.52(s，1H)，4.05(d，1H，J＝10.2Hz)，3.80-3.99(m，6H)，3.50(m，2H)，3.27(m，2H)，2.51(d，2H，J＝16.8Hz)，2.43(d，2H，J＝16.8Hz)，1.88(m，1H)，1.77(m，1H)，0.84-1.58(m，12H)，1.05(s，6H)，0.97(s，3H)，0.92(s，9H)，0.81(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.6，172.8，172.0，171.2，159.3，157.8，133.4，117.7，71.4，70.8，60.7，57.0，53.5，48.5，46.8，42.2，40.0，34.9，32.1，30.9，29.4，28.7，28.1，27.7，27.4，26.9，24.3，19.3，13.5ppm；HRMSC38H61N6O8[M+H]+计算值729.4551，实测值729.4529.
制备实施例57下面的制备 步骤A N-Boc保护的胺52(101毫克)溶解于10毫升甲酸并且在室温下搅拌1小时。在旋转蒸发器中去除所有的挥发物，残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到甲酰化产物57(35毫克，40％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ，8.24(s，1H)，7.35(d，1H，J＝7.8Hz)，7.07(br s，1H)，6.83(d，1H，J＝6.9Hz)，5.89(ddt，1H，J＝5.6，10.0，17.0Hz)，5.47(m，1H)，5.28(dd，1H，J＝1.2，17.3Hz)，5.25(dd，1H，J＝1.2，10.4Hz)，4.95(ddd，1H，J＝3.1，5.9，8.5Hz)，4.51(s，1H)，3.99(m，2H)，3.92(dd，1H，J＝5.3，11.0Hz)，3.75(d，1H，J＝11.0Hz)，3.74(m，1H)，3.70(dd，1H，J＝5.6，9.1Hz)，3.48(m，2H)，1.96(m，1H)，1.77(d，1H，J＝7.8Hz)，1.76(m，1H)，1.27-1.63(m，11H)，1.10(s，3H)，0.92(s，3H)；13CNMR(CDCl3，125MHz)δ196.8，170.5，169.4，160.8，159.3，133.1，117.9，71.3，70.0，61.5，54.4，50.8，48.2，42.1，32.0，31.5，29.4，28.6，27.8，26.7，26.6，23.6，23.5，19.3，14.5，13.2ppm；HRMSC25H39N4O6[M+H]+计算值491.2870，实测值491.2882.
制备实施例58下面的制备 步骤A 将N-Boc保护的胺52(80毫克)溶解于5毫升4M HCl的二烷溶液中，并且室温下搅拌45分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于3毫升无水二氯甲烷并且用N-甲基吗啉(3当量，0.05毫升，d 0.920)处理。加入异氰酸酯58a溶液(2当量，3.8毫升0.075M甲苯溶液)。室温下搅拌混合物大约3小时。混合物用乙酸乙酯(50毫升)稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(10毫升)和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；3∶7至7∶3)，得到产物58(16毫克，16％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ，8.19-8.39(br s，1H)，8.05(d，1H，J＝8.5Hz)，6.22(br s，1H)，5.91(ddt，1H，J＝5.6，10.0，17.0Hz)，5.71(dd，1H，J＝9.4，10.0Hz)，5.33(d，1H，J＝9.4Hz)，5.28(m，1H)，5.26(dd，1H，J＝1.2，17.0Hz)，5.20(dd，1H，J＝1.2，10.4Hz)，4.96(ddd，1H，J＝4.0，9.4，9.4Hz)，4.60(s，1H)，4.32(t，1H，J＝12.6Hz)，4.12(d，1H，J＝10.7Hz)，3.86-4.07(m，4H)，3.49-3.63(m，3H)，3.38(dd，1H，J＝4.1，7.9Hz)，3.31(m，1H)，3.16(m，1H)，2.66(dd，1H，J＝2.8，13.8Hz)，2.39(dt，1H，J＝5.6，17.3Hz)，2.27(dt，1H，J＝6.6，17.3Hz)，1.89-2.04(m，2H)，1.71-1.87(m，4H)，0.88-1.64(m，11H)，1.03(s，3H)，0.93(s，9H)，0.90(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ196.2，171.8，171.3，159.5，158.2，133.7，117.3，71.4，70.8，60.6，55.7，53.5，51.0，48.3，48.1，46.5，42.2，34.3，32.7，31.8，31.0，28.7，27.8，27.6，27.0，26.9，24.6，24.4，23.5，21.7，19.2，13.5ppm；HRMSC36H59N6O7[M+H]+计算值687.4445，实测值687.4434.
制备实施例59下面的制备 步骤A 将N-Boc胺52(56毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中，并且室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后，滴加异氰酸酯59a溶液(1.0当量)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用乙酸乙酯(50毫升)稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)，和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物59(35毫克，50％)，为白色固体。HRMSC38H63N6O7[M+H]+计算值715.4758，实测值715.4739。
制备实施例60下面的制备
步骤A 用环丙基异氰化物(Oakwood Prod.，2当量，117毫克)和乙酸(2当量，0.1毫升，d 1.049)处理醛52j(405毫克)的15毫升无水二氯甲烷的溶液。室温下将混合物搅拌过夜。减压去除所有的挥发物，残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，得到产物60a 500毫克，98％)，为白色固体。
步骤B 将15毫升THF/MeOH/H2O的1∶1∶1混合物中乙酸酯60a(500毫克)的溶液用氢氧化锂一水合物(2.5当量，86毫克)处理，并且搅拌大约30分钟，直到通过TLC分析(乙酸乙酯/己烷；6∶4)监测所有的起始物消耗完全。反应混合物用30毫升饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且用二氯甲烷(3×50毫升)萃取。将合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到粗产物60b(464毫克，98％)，为无色半固体，其不用进一步纯化即可使用。
步骤C
用Dess-Martin全碘烷(2.0当量，698毫克)处理羟基酰胺60b(0.824毫摩尔)的20毫升无水二氯甲烷溶液。室温下将反应混合物搅拌30分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(15毫升)处理混合物，并且搅拌5分钟。还加入饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)并且再继续向搅拌10分钟。用二氯甲烷(3×50毫升)萃取混合物。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；5∶95至35∶65)，得到产物60c(333毫克，72％)，为白色固体。
步骤D 将N-Boc胺60c(70毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下过夜。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。接着加异氰酸酯56e溶液(1.3当量，0.7毫升的0.241M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(50毫升)稀释并且用饱和碳酸氢钠水溶液(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至55∶45)，得到产物60(70毫克，77％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.95(brs，1H)，7.56(br s，1H)，5.86(brs，1H)，5.65(t，1H，J＝8.8Hz)，5.09(br s，1H)，4.91(br s，1H)，4.56(s，1H)，4.07(d，1H，J＝10.4Hz)，3.98(dd，1H，J＝5.0，10.7Hz)，3.91(m，3H)，3.54(m，2H)，3.34(m，2H)，2.88(ddd，1H，J＝3.7，7.5，15.1Hz)，2.56(d，2H，J＝16.7Hz)，2.50(d，2H，J＝16.7Hz)，1.94(m，1H)，0.87-1.76(m，15H)，1.11(s，6H)，1.03(s，3H)，0.97(s，9H)，0.86(s，3H)，0.70(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.0，172.9，172.0，171.2，160.8，157.7，71.5，70.8，60.7，56.9，53.4，51.1，48.4，46.8，39.9，34.9，32.1，30.8，29.4，28.7，28.1，27.7，27.5，26.9，26.8，24.4，23.0，19.2，13.5，6.8，6.7ppm.HRMSC38H61N6O8[M+H]+计算值729.4551，实测值729.4558.
制备实施例61下面的制备 步骤A 将N-Boc胺60c(56毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液，然后加异氰酸酯59a甲苯溶液(1.3当量)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物61(52毫克，73％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.30-8.53(br s，1H)，8.15(d，1H，J＝8.8Hz)，6.13(brs，1H)，5.74(dd，1H，J＝8.8，9.7Hz)，5.38(d，1H，J＝9.1Hz)，4.96(brs，1H)，4.59(s，1H)，4.35(dd，1H，J＝12.9，12.9Hz)，4.10(d，1H，J＝10.4Hz)，4.01(dd，1H，J＝5.0，10.4Hz)，3.94(m，1H)，3.56(m，2H)，3.50(dd，1H，J＝8.5，8.8Hz)，3.31(m，2H)，3.17(ddd，1H，J＝5.6，6.0，12.3Hz)，2.91(ddd，1H，J＝4.0，7.8，15.4Hz)，2.67(dd，1H，J＝3.4，13.5Hz)，2.17(d，1H，J＝17.0Hz)，2.10(d，1H，J＝17.0Hz)，1.94(m，3H)，1.24-1.70(m，12H)，1.14(m，1H)，1.04(s，3H)，1.02(s，3H)，1.00(s，3H)，0.91(s，9H)，0.89(s，3H)，0.84(m，2H)，0.73(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ199.9，171.9，171.3，171.0，160.9，158.0，71.4，70.9，60.4，55.4，53.2，48.2，46.3，45.0，35.8，34.6，31.7，30.3，28.8，28.7，27.8，27.7，27.6，27.1，26.9，26.8，24.8，24.7，23.2，19.1，13.4，6.4ppm.HRMSC38H63N6O7[M+H]+计算值715.4758，实测值715.4768.
制备实施例62下面的制备 步骤A 将N-Boc胺60c(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液，然后加异氰酸酯27b甲苯溶液(1.2当量)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物62(65毫克，85％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.84(d，1H，J＝8.2Hz)，7.28(br s，1H)，5.73-6.02(brs，1H)，5.57(ddd，1H，J＝1.9，8.2，8.5Hz)，5.22(brs，1H)，4.88(dd，1H，J＝3.4，8.5Hz)，4.51(s，1H)，4.01(m，3H)，3.62(dd，1H，J＝8.5，8.5Hz)，3.55(ddd，1H，J＝3.7，6.3，9.7Hz)，3.48(dd，1H，J＝4.0，8.1Hz)，3.38(m，1H)，3.18(d，1H，J＝13.5Hz)，2.86(ddd，1H，J＝3.8，7.2，14.8Hz)，2.41(d，1H，J＝11.6Hz)，2.24(d，1H，J＝11.6Hz)，1.93(m，1H)，1.72-1.89(m，4H)，1.40(s，9H)，1.28-1.70(m，16H)，1.21(m，1H)，1.06(s，3H)，0.93(s，3H)，0.91(m，2H)，0.70(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ197.9，172.0，171.0，160.9，157.0，70.8，70.6，61.0，60.8，54.9，53.7，51.1，48.4，36.2，32.0，30.5，28.7，27.9，27.2，26.9，26.8，25.9，24.1，23.8，23.5，23.0，21.9，21.8，19.3，13.4，6.9，6.8ppm.
制备实施例63下面的制备 步骤A 将胺63a(2.0克)的100毫升无水二氯甲烷的溶液冷却至0℃并且用吡啶(3.0当量，2.24毫升，d 0.978)和乙磺酰氯(1.2当量，1.05毫升，d 1.357)处理。将得到的黄色均匀溶液搅拌过夜(温度0-25℃)。混合物用200毫升乙醚稀释并且用1M HCl水溶液(100毫升)和盐水(100毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度二氯甲烷至乙酸乙酯/二氯甲烷3∶7)，得到产物63b(850毫克，30％)，为白色固体。
步骤B
用碳酸铯(3.0当量，2.74克)和碘甲烷(3.0当量，0.51毫升，d 2.280)处理乙磺酰胺63b(850毫克)的无水DMF(30毫升)溶液。将反应混合物搅拌大约4小时。TLC分析(丙酮/己烷；2∶8)表明所有的起始物已经消耗完。混合物用乙酸乙酯(300毫升)稀释并且用水(3×50毫升)和盐水(1×50毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到产物63c(860毫克，97％)，为白色固体。对于产物没有进行进一步纯化。
步骤C N-Boc保护的胺63c(850毫克)溶解于100毫升4M HCl二烷溶液。室温下将得到的溶液搅拌，直到根据TLC测定(丙酮/己烷；2∶8)，起始物被消耗完全。减压去除所有的挥发物并且将残余物放置在高真空下，得到产物63d(680毫克，98％)。
步骤D 用40毫升饱和碳酸氢钠水溶液处理胺盐酸盐63d(2.636毫摩尔)的40毫升的二氯甲烷溶液并且在0℃下剧烈搅拌10分钟。停止搅拌让各层分离。通过探针向一部分中有机层(下层)通入光气(10毫升，20％甲苯溶液)。加入之后立刻在0℃下剧烈搅拌混合物10分钟并且在室温下搅拌2.5小时。混合物用100毫升二氯甲烷稀释并且分离各层。有机层用30毫升冷的饱和碳酸氢钠水溶液洗涤并且用硫酸镁干燥。过滤有机层并且用50毫升甲苯稀释。浓缩产物63e(654毫克，98％)，并且以0.131M甲苯溶液保存(溶液含有大约2毫升二氯甲烷)。
步骤E 将N-Boc胺52(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后，滴加异氰酸酯63e溶液(1.2当量，0.97毫升，0.131M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物63(49毫克，65％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.04(d，1H，J＝8.5Hz)，7.52(br s，1H)，6.04(br s，1H)，5.89(ddt，1H，J＝5.6，10.4，17.0Hz)，5.65(dd，1H，J＝8.8，10.4Hz)，5.26(dd，1H，J＝1.2，17.0Hz)，5.22(dd，1H，J＝1.2，10.0Hz)，5.17(d，1H，J＝10.0Hz)，4.99(br s，1H)，4.61(s，1H)，4.19(d，1H，J＝10.7Hz)，4.02(m，2H)，3.95(m，2H)，3.60(dd，1H，J＝8.1，9.1Hz)，3.54(m，1H)，3.49(d，1H，1.9Hz)，3.44(m，1H)，3.32(m，1H)，3.07(m，3H)，2.94(s，3H)，1.93(m，1H)，1.35(t，3H，J＝7.5Hz)，1.27-1.62(m，15H)，1.16(m，1H)，1.03(s，3H)，0.92(s，9H)，0.91(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ，198.6，172.3，171.3，159.4，158.0，133.4，117.6，71.1，70.6，60.7，54.7，53.5，51.0，50.6，48.4，45.8，42.2，34.8，34.5，32.0，30.9，28.7，27.8，27.3，27.0，26.9，24.3，24.2，19.2，13.5，8.6ppm；HRMSC34H59N6O8S[M+H]+计算值711.4115，实测值711.4133.
制备实施例64下面的制备
步骤A 将N-Boc胺60c(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后，滴加异氰酸酯63e溶液(1.2当量，0.97毫升，0.131M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物64(62毫克，82％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.10(br s，1H)，7.47(br s，1H)，5.94-6.19(br s，1H)，5.65(dd，1H，J＝8.8，10.7Hz)，5.21(d，1H，J＝7.8Hz)，5.00(dd，1H，J＝3.7，9.4Hz)，4.59(s，1H)，4.21(d，1H，J＝10.7Hz)，4.02(dd，1H，J＝5.0，10.7Hz)，3.93(dd，1H，J＝9.1，9.7Hz)，3.55(m，2H)，3.48(d，1H，J＝12.6Hz)，3.40(m，1H)，3.29(m，1H)，3.07(q，2H，J＝7.2Hz)，3.06(m，1H)，2.93(s，3H)，2.85(dddd，1H，J＝1.8，4.0，7.5，15.1Hz)，1.91(m，1H)，1.34(t，3H，J＝7.2Hz)，1.25-1.61(m，12H)，1.13(m，1H).1.01(s，3H)，0.90(s，9H)，0.89(s，3H)，0.87(m，2H)，0.69(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.9，172.3，171.4，160.9，158.0，71.0，70.6，60.6，53.2，50.9，50.6，48.4，45.9，34.8，34.5，32.1，31.1，28.7，27.8，27.5，27.0，26.9，24.4，23.0，19.2，13.6，8.6，6.7ppm；HRMSC34H59N6O8S[M+1]+计算值711.4115，实测值711.4133.
制备实施例65下面的制备
步骤A 将(S)-异-苏氨酸-Ome盐酸盐65a(Chem-Impex，5克)的无水二氯甲烷(150毫升)溶液冷却至0℃并且用二碳酸二-叔丁酯(1.1当量，7.0克)的50毫升无水二氯甲烷溶液处理。滴加N-甲基吗啉(2.5当量，8.1毫升，d 0.920)并且将混合物搅拌30分钟。去除冷却浴并且将混合物再搅拌30分钟。将混合物浓缩至其三分之一体积后用乙酸乙酯(300毫升)稀释，并且用1M HCl水溶液(100毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(80毫升)和盐水(80毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到产物65b(6.78克，98％)，为无色油状物。
步骤B 将Boc-L-allo-Thr-OMe 65b(6.8克)的250毫升无水THF溶液脱气(真空/N2-充满)并且用碳酸烯丙酯甲酯(1.3当量，4.3毫升，d 1.022)处理。加入催化量的四(三苯基膦)钯(0.02摩尔％，673毫克)。再次将微黄色混合物脱气并且在60℃加热大约3小时，直到TLC分析(丙酮/己烷；2∶8)表明不再有起始物剩下(反应混合物变成棕色)。有机层经减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(乙酸乙酯/己烷；1∶9)，得到产物65c(5.72克，72％)，为无色油状物。
步骤C
将甲酯65c(1.45克)的250毫升4∶2∶1THF/H2O/MeOH的混合物中的溶液冷却至0℃，并且用氢氧化锂一水合物(2.5当量，2.19毫克)处理。30分钟之后去除冷却浴并且将混合物在室温下再搅拌4小时，直到通过TLC分析(丙酮/己烷；15∶85)测定所有的起始物反应完全。用200毫升1M HCl水溶液(混合物的pH＝1)处理反应混合物，产物溶解于二氯甲烷(4×100毫升)。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩得到产物。产物65d(5.42克，98％)没有进一步纯化。
步骤D 0℃下搅拌200毫升无水二氯甲烷和100毫升无水DMF中酸65d(20.92毫摩尔)的溶液，并且用HATU(1.4当量，11.16克)处理。加入胺1d(1.2当量，5.16克)，然后加入N-甲基吗啉(4当量，9.19毫升，d0.920)。将反应混合物搅拌过夜。真空去除所有的挥发物，残余物溶解于500毫升乙酸乙酯。有机层用水(200毫升)，1M HCl水溶液(100毫升)，饱和NaHCO3水溶液(100毫升)，和盐水(100毫升)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷2∶8)，得到65e(7.6克，88％)，为无色油状物，带有少量其相应的非对映体产物。
步骤E
将甲酯65e(7.6克)的300毫升2∶1THF/H2O的混合物中的溶液冷却至0℃，并且用氢氧化锂一水合物(2.5当量，1.93毫克)处理。30分钟之后去除冷却浴并且将混合物在室温下再搅拌4小时，直到通过TLC分析(乙酸乙酯/己烷；25∶75)测定所有的起始物反应完全。用200毫升1M HCl水溶液(混合物的pH＝1)处理反应混合物，产物溶解于二氯甲烷(4×100毫升)。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩得到产物65f(6.86克，93％)，为无色固体。
步骤F 0℃下搅拌100毫升无水二氯甲烷和100毫升无水DMF中酸65f(6.86克)的溶液，并且用HATU(1.4当量，9.23克)处理。加入胺盐1f(1.1当量，4.21克)的100毫升二氯甲烷溶液，然后加入N-甲基吗啉(4当量，7.6毫升，d 0.920)。将反应混合物0℃下搅拌过夜。真空去除所有的挥发物，残余物溶解于500毫升乙酸乙酯。有机层用水(2×100毫升)，1M HCl水溶液(100毫升)，饱和NaHCO3水溶液(100毫升)，和盐水(100毫升)洗涤。有机层用MgSO4干燥，过滤，减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷3∶7)，得到65g(8.17克，84％)，为无色油状物。
步骤G
将二烯65g(8.17克)的1.5L甲苯溶液脱气30分钟(氩气泡)并且用Grubb′s催化剂(0.2当量，2.38克)处理。将粉色溶液在60℃下加热18小时(加热10分钟之后溶液变暗)。减压去除溶剂，残余物在硅胶上进行色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷3∶7)，得到烯烃产物65h(7.0克，90％)，为E-和Z-异构体的混合物(大约4∶1)。
步骤H 用碳钯(0.1摩尔％，1.37克10％Pd/C)处理300毫升甲醇中烯烃65h(7.0克)溶液。35psi下将混合物氢化，直到起始物反应完全(大约3小时)。反应混合物用300毫升二氯甲烷稀释并且通过C矿短径过滤。浓缩滤液，残余物在硅胶上进行色谱法纯化(乙酸乙酯/己烷3∶7)，得到产物65i(5.33克，76％)，为白色固体。
步骤I 用硼氢化锂(2.1当量，10.4毫升2M THF溶液)处理乙酯65i(5.33克)的100毫升无水THF溶液。室温下搅拌反应混合物并且用TLC(丙酮/己烷；3∶7)监测起始物的消失。2小时之后，加入更多的硼氢化锂溶液(1当量)并且继续搅拌1小时。加入饱和氯化铵水溶液中和过量的硼氢化锂。混合物分配在乙酸乙酯(300毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(100毫升)之间。用乙酸乙酯回萃含水层(2×100毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法纯化(丙酮/己烷3∶7)，得到产物65j(3.93克，80％)，为白色固体。
步骤J 用Dess-Martin全碘烷(1.5当量，1.28克)处理40毫升无水二氯甲烷中醇65j(1.0克)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌3小时。用1M硫代硫酸钠水溶液(10毫升)处理混合物并且搅拌5分钟。还加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)并且继续搅拌10分钟。用二氯甲烷萃取混合物(3×80毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度乙酸乙酯/己烷；4∶6至8∶2)，得到产物65k(750毫克，75％)，为无色固体。
步骤K 用烯丙基异氰化物(2当量，0.26毫升，d0.8)和乙酸(2当量，0.17毫升，d 1.049)处理20毫升无水二氯甲烷中醛65k(750毫克)溶液。将混合物在室温下搅拌大约5小时。真空去除所有的挥发物，残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到产物65l(700毫克，74％)，为白色固体。
步骤L
用氢氧化锂一水合物(2.5当量，118毫克)处理乙酸酯65l(700毫克)的20毫升2∶1THF/H2O的混合物的溶液，并且搅拌大约30分钟，直到通过TLC(乙酸乙酯/己烷；8∶2)监测所有的起始物反应完全。反应混合物用50毫升饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且用二氯甲烷萃取(3×80毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到产物65m(651毫克，98％)，为无色半固体，其不用进一步纯化即可使用。
步骤M 用Dess-Martin全碘烷(2.0当量，956毫克)处理25毫升无水二氯甲烷中羟基酰胺65m(1.127毫摩尔)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(20毫升)处理混合物，还加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)并且继续搅拌10分钟。用二氯甲烷萃取混合物(3×80毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到产物65n(585毫克，90％)，为白色固体。
步骤N
将N-Boc胺65n(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后，滴加异氰酸酯56e溶液(1.2当量，0.57毫升，0.216M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；15∶85至5∶5)，得到产物65(50毫克，65％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.13(br s，1H)，7.42-7.82(br s，1H)，6.30(br s，1H)； 5.90(ddt，1H，J＝5.6，10.4，17.0Hz)，5.71(br s，1H)，5.38(br s，1H)，5.27(dd，1H，J＝1.2，17.0Hz)，5.23(dd，1H，J＝1.2，10.4Hz)，4.63(dd，1H，J＝7.8，8.1Hz)，4.50(br s，1H)，4.23(d，1H，J＝10.4Hz)，4.05(m，2H)，3.98(dd，1H，J＝5.6，5.9Hz)，3.95(d，1H，J＝11.0Hz)，3.88(dd，1H，J＝10.7，10.8Hz)，3.82(q，1H，J＝11.6Hz)，3.71(m，1H)，3.62(ddd，1H，J＝5.0，5.3，9.4Hz)，3.20(m，1H)，2.55(d，2H，J＝16.7Hz)，2.47(d，2H，J＝16.7Hz)，1.73-1.97(m，4H)，1.14(d，3H，J＝6.0Hz)，1.10(s，6H)，1.00(s，3H)，0.99(s，9H)，0.83(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.0，172.8，171.5，159.4，157.8，117.7，75.5，68.1，60.8，57.2，55.9，48.7，46.8，42.3，35.2，29.3，28.7，28.3，27.8，27.6，26.9，26.8，24.7，24.4，19.4，16.3，13.6ppm；HRMSC39H63N6O8[M+H]+计算值743.4707，实测值743.4717.
制备实施例66下面的制备 步骤A
将N-Boc胺65n(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下过夜。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后，滴加异氰酸酯63e溶液(1.2当量，0.95毫升，0.131M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物66(55毫克，73％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.20(d，1H，J＝6.6Hz)，7.58-7.77(br s，1H)，6.13(br s，1H)，5.90(ddt，1H，J＝5.6，10.0，17.0Hz)，5.76(br s，1H)，5.27(dd，1H，J＝1.2，17.0Hz)，5.22(dd，1H，J＝1.2，10.0Hz)，5.15(d，1H，J＝9.1Hz)，4.69(dd，1H，J＝8.8，8.8Hz)，4.57(s，1H)，4.29(d，1H，J＝10.7Hz)，3.91-4.09(m，4H)，3.61(m，2H)，3.47(dd，1H，J＝11.9，13.5Hz)，3.19(m，1H)，3.07(m，3H)，2.94(s，3H)，1.95(m，1H)，1.35(t，3H，J＝7.5Hz)，1.27-1.69(m，12H)，1.22(d，3H，J＝6.3Hz)，1.14(m，1H)，1.02(s，3H)，0.93(s，9H)，0.89(s，3H)；13CNMR(CDCl3，125MHz)δ199.0，172.8，171.5，159.3，158.1，133.5，117.5，75.8，68.4，60.7，56.2，50.4，48.6，45.6，42.2，34.7，34.5，32.0，31.6，28.6，27.7，27.0，26.9，26.7，24.8，24.6，19.3，16.2，14.5，13.5，8.5ppm；HRMSC35H61N6O8S[M+H]+计算值725.4272，实测值725.4285.
制备实施例67下面的制备 步骤A
将N-Boc胺33(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下过夜。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入N-甲基吗啉(2当量，0.03毫升，d 0.920)。10分钟之后，滴加异氰酸酯56e溶液(1.5当量，0.8毫升，0.2M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用乙酸乙酯(50毫升)稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至1∶1)，得到产物67(50毫克，64％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.14(d，1H，J＝6.9Hz)，7.66-7.82(br s，1H)，6.11(br s，1H)，5.70(br s，1H)，5.32(br s，1H)，4.63(br s，1H)，4.60(s，1H)，4.19(d，1H，J＝10.0Hz)，3.96(dd，1H，J 5.0，10.0Hz)，3.91(m，3H)，2.91(ddd，1H，J＝3.7，7.8，15.1Hz)，2.57(d，2H，J＝16.7Hz)，2.50(d，2H，J＝16.7Hz)，1.86(m，3H)，1.69(m，1H)，1.18-1.61(m，16H)，1.10(s，6H)，1.01(s，3H)，0.95(s，9H)，0.89(m，2H)，0.87(s，3H)，0.71(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ199.2，173.5，172.9，171.9，160.7，158.0，60.5，56.6，51.5，48.5，46.8，39.9，35.0，34.2，31.4，29.4，28.1，27.8，27.6，27.4，27.3，27.0，26.9，26.5，26.1，23.4，23.1，19.4，13.6，6.8，6.7ppm.
制备实施例68下面的制备 步骤A 将N-Boc胺34(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入N-甲基吗啉(2当量，0.02毫升，d 0.920)。10分钟之后，滴加异氰酸酯56e溶液(1.4当量，0.6毫升，0.241M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用乙酸乙酯(50毫升)稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到产物68(44毫克，56％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.08(br s，1H)，7.52-7.77(br s，1H)，6.06(br s，1H)，5.70(br s，1H)，5.26(br s，1H)，4.63(m，2H)，4.20(d，1H，J＝10.0Hz)，3.97(dd，1H，J＝5.0，10.0Hz)，3.92(m，3H)，3.43(m，2H)，2.57(d，2H，J＝16.7Hz)，2.50(d，2H，J＝16.7Hz)，1.90(m，1H)，1.74(m，2H)，1.27(t，3H，J＝7.2Hz)，1.20-1.62(m，17H)，1.11(s，6H)，1.02(s，3H)，0.96(s，9H)，0.88(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ199.1，173.5，172.9，171.8，159.3，157.9，60.6，56.6，51.5，48.5，46.8，40.0，34.9，34.8，34.1，32.8，29.4，28.1，27.8，27.5，27.4，27.3，27.0，26.9，26.5，26.0，25.1，23.4，19.4，14.8，13.6ppm；HRMSC38H63N6O7[M+H]+计算值715.4758，实测值715.4751.
制备实施例69下面的制备 步骤A 将N-Boc胺XX(93毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入N-甲基吗啉(2当量，0.04毫升，d 0.920)。10分钟之后，滴加异氰酸酯59a甲苯溶液(1.2当量)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用乙酸乙酯(50毫升)稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到产物69(45毫克，38％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.26-8.67(br s，1H)，8.17(br s，1H)，6.19(br s，1H)，5.92(ddt，1H，J＝5.6，10.4，17.3Hz)，5.74(dd，1H，J＝8.8，9.1Hz)，5.41(br s，1H)，5.26(dd，1H，J＝1.2，17.3Hz)，5.20(d，1H，J＝10.0Hz)，4.67(br s，1H)，4.62(s，1H)，4.35(dd，1H，J＝1.9，12.9Hz)，4.20(d，1H，J＝9.8Hz)，3.99(m，4H)，3，58(ddd，1H，J＝5.9，6.9，12.6Hz)，3.18(ddd，1H，J＝5.9，5.9，11.9Hz)，2.69(d，1H，J＝10.7Hz)，2.18(d，1H，J＝17.0Hz)，2.12(d，1H，J＝17.0Hz)，1.96(m，1H)，1.18-1.89(m，20H)，1.12(m，1H)，1.04(s，3H)，1.03(s，3H)，1.00(s，3H)，0.92(s，9H)，0.91(s，3H)；13CNMR(CDCl3，125MHz)δ199.3，173.3，171.8，171.1，159.4，158.2，133.7，117.3，60.4，55.3，51.5，48.3，46.3，45.0，42.3，35.8，34.6，34.0，31.2，30.3，28.6，27.8，27.7，27.6，27.3，27.2，27.0，26.3，25.9，25.4，23.2，19.3，13.5ppm.
制备实施例70下面的制备 步骤A 将N-Boc胺34(73毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入N-甲基吗啉(2当量，0.03毫升，d 0.920)。10分钟之后，滴加异氰酸酯59a甲苯溶液(1.2当量)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用乙酸乙酯(50毫升)稀释并且用1M HCl水溶液(10毫升)和盐水(10毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至45∶55)，得到产物70(63毫克，69％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.20-8.43(br s，1H)，8.17(br s，1H)，6.20(br s，1H)，5.75(dd，1H，J＝8.2，9.4Hz)，5.41(br s，1H)，4.66(d，1H，J＝9.1Hz)，4.63(s，1H)，4.36(dd，1H，J＝12.6，13.2Hz)，4.18(d，1H，J＝10.4Hz)，3.96(m，2H)，3.57(m，1H)，3.41(m，2H)，3.18(ddd，1H，J＝5.9，11.9Hz)，2.69(d，1H，J＝13.2Hz)，2.19(d，1H，J＝17.0Hz)，2.14(d，1H，17.0HZ)，1.76-1.99(m，4H)，1.25(t，3H，J＝7.2Hz)，1.18-1.75(m，17H)，1.12(m，1H)，1.04(s，3H)，1.02(s，3H)，1.01(s，3H)，0.92(s，9H)，0.91(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ199.9，173.3，171.8，171.1，159.4，158.2，60.4，55.2，53.5，51.5，48.3，46.3，35.8，34.8，34.6，31.3，30.3，28.7，27.8，27.7，27.6，27.3，27.0，26.4，26.0，23.2，19.3，14.8，13.5ppm；HRMSC38H65N6O6[M+H]+计算值701.4966，实测值701.4960.
制备实施例71下面的制备 步骤A
室温下，将31(100毫克，0.169毫摩尔)的4N.HCl二烷(5毫升)溶液搅拌1小时。去除溶剂至干，得到71a(120毫克)，其不用进一步纯化即可使用。
步骤B 用异氰酸酯27b(3当量)，饱和NaHCO3(3毫升)处理71a(89毫克，0.169毫摩尔)的CH2Cl2(10毫升)溶液并且剧烈搅拌2小时。让溶液在5℃下静置12小时。分离CH2Cl2层，用水、盐水洗涤，并且通过Na2SO4过滤。将溶剂去除至干，残余物在硅胶柱上纯化(40％至60％丙酮/己烷)，得到71(73毫克)。MS(ES)m/z相对强度773[(M+Na)+，20]；751[(M+1)+，100]。C36H59N6O9S[M+1]+计算值751.4064；实测值751.4075。
制备实施例72下面的制备 步骤A
用异氰酸酯51c(1.5当量)，饱和NaHCO3(4毫升)处理71a(89毫克，0.169毫摩尔)的CH2Cl2(10毫升)溶液并且剧烈搅拌30分钟。让溶液在5℃下静置12小时。分离CH2Cl2层，用水、盐水洗涤，并且通过Na2SO4过滤。将溶剂去除至干，残余物在硅胶柱上纯化(40％至50％丙酮/己烷)，得到72(95毫克)。MS(ES)m/z相对强度790[(M+CH3OH+1)+，40]；758[(M+1)+，100。C38H59N7O9[M+1]+计算值758.4453；实测值758.4449。
制备实施例73下面的制备 步骤A 根据Vederas及其同事描述的方法(Arnold，L.D.；Kalantar，T.H.；Vederas，J.C.J.Am.Chem.Soc.1985，107，7105-7109)，从商业上可获得的N-Boc-L-Ser-OH起始，制备N-(叔丁氧羰基)-L-丝氨酸-β-内酯73a。
步骤B 室温下，经1小时，向搅拌的烯丙胺(25毫摩尔)的30毫升无水乙腈的溶液滴加20毫升无水乙腈中N-(叔丁氧羰基)-L-丝氨酸-β-内酯73a(1毫摩尔)的溶液。2小时之后，将溶液减压浓缩。残余物用乙腈制成浆液，过滤回收酸产物73b。
步骤C 用丙酮(1毫升)中的氯甲酸苯甲酯(1.12毫摩尔)处理室温下饱和碳酸氢钠水溶液(4毫升)和水(1毫升)中的酸2(1毫摩尔)的溶液。将反应混合物搅拌2小时。混合物分配在乙醚(20毫升)和水(20毫升)之间。在冰水浴中冷却含水层，用5％HCl水溶液调节pH 2，并且用二氯甲烷萃取(3×30毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到酸产物73c。
步骤D 0℃下搅拌10毫升无水二氯甲烷和10毫升无水DMF中酸73c(1毫摩尔)的溶液，并且用HATU(1.4当量)处理。依次加入胺盐酸盐(1.3当量)和N-甲基吗啉(4当量)。将反应混合物逐渐温热至室温并且搅拌过夜。减压去除所有的挥发物，残余物溶解于100毫升乙酸乙酯。有机层用水(20毫升)，1N HCl水溶液(20毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)和盐水(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。通过在硅胶上进行柱色谱法纯化产物73d。
步骤E
0℃下用氢氧化锂一水合物(2.5毫摩尔)处理15毫升THF/MeOH/H2O(1∶1∶1)混合物中甲酯73d(1毫摩尔)的溶液。去除冷却浴并且将反应混合物在室温下搅拌并且通过TLC监测(丙酮/己烷；2∶8)。1小时之后，加入10毫升1N HCl水溶液，减压去除所有的挥发物。残余物分配在30毫升1N HCl水溶液和100毫升二氯甲烷中。用二氯甲烷回萃含水层(2×50毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并且减压浓缩，得到酸产物73e。
步骤F 0℃下搅拌10毫升无水二氯甲烷和10毫升无水DMF中酸73e(1毫摩尔)的溶液，并且用HATU(1.4当量，1.15克)处理。在10毫升二氯甲烷中加入胺盐酸盐7(1.2毫摩尔)接着加入N-甲基吗啉(4毫摩尔)。将反应混合物搅拌过夜(0-25℃的温度)。真空去除所有的挥发物，残余物溶解于100毫升乙酸乙酯。有机层用水(20毫升)，1N HCl水溶液(20毫升)，饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)和盐水(20毫升)洗涤。有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。通过在硅胶上进行柱色谱法纯化产物73f。
步骤G
将0.01M二烯73f(1毫摩尔)的甲苯溶液脱气30分钟(通入氩气)并且用Grubb′s催化剂(0.2毫摩尔)处理。将粉色溶液加热至60℃反应16小时。减压去除溶剂并且残余物在硅胶上进行色谱法，得到烯烃产物73g，为E-和Z-异构体混合物。
步骤H 用5％碳钯(0.1摩尔％)处理20毫升甲醇中烯烃73g(1毫摩尔)溶液。50psi下将混合物氢化，直到起始物反应完全。反应混合物用100毫升二氯甲烷稀释并且通过C矿短径过滤。浓缩滤液，通过在硅胶上进行柱色谱法纯化产物73h。
步骤I 用碳酸钾(2毫摩尔)和(三甲基甲硅烷基)乙磺酰氯(1毫摩尔)处理大环胺73h(1毫摩尔)的10毫升二氯甲烷溶液。将混合物搅拌一天并蒸发溶剂。通过在硅胶上进行柱色谱法纯化产物73i。
步骤J 用硼氢化锂(2.1毫摩尔)处理甲酯73i(1毫摩尔)的10毫升无水THF溶液。室温下搅拌反应混合物。5小时之后，加入饱和氯化铵水溶液(3毫升)中和过量的硼氢化锂。混合物分配在乙酸乙酯(50毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)之间。用乙酸乙酯回萃含水层(2×30毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法纯化，得到产物73j。
步骤K 用Dess-Martin全碘烷(1.5毫摩尔)处理20毫升无水二氯甲烷中醇73j(1毫摩尔)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌45分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(20毫升)处理混合物并且搅拌15分钟。用二氯甲烷萃取混合物(3×40毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法，得到醛产物73k。
步骤L
用烯丙基异氰化物(2毫摩尔)和乙酸(2毫摩尔)处理10毫升无水二氯甲烷中醛73k(1毫摩尔)溶液。将混合物搅拌大约5小时。真空去除所有的挥发物，残余物在硅胶上进行色谱法，得到乙酸酯产物73l。
步骤M 乙酸酯73l(1毫摩尔)溶解于16毫升1∶1 THF/H2O的混合物，用氢氧化锂一水合物(2.5毫摩尔)处理。30分钟之后，混合物分配在二氯甲烷(50毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(20毫升)之间。用二氯甲烷反萃取(3×30毫升)含水层。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，羟基酰胺73m不用进一步纯化即可使用。
步骤N 用Dess-Martin全碘烷(2.5毫摩尔)处理20毫升无水二氯甲烷中羟基酰胺73m(1毫摩尔)的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(20毫升)和饱和碳酸氢钠水溶液(10毫升)处理混合物，并且搅拌15分钟。用二氯甲烷萃取混合物(3×30毫升)。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。通过柱色谱法纯化酮基酰胺产物73n。
步骤O
将N-Boc保护胺73n(0.1毫摩尔)溶解于5毫升4M HCl的二烷溶液中。搅拌得到的混合物30分钟。减压蒸发，得到的胺盐酸盐产物73o。
步骤P 胺盐酸盐73o(0.1毫摩尔)溶解于5毫升二氯甲烷并且用20滴饱和碳酸氢钠水溶液处理，然后用异氰酸酯51c溶液(0.12毫摩尔)甲苯溶液处理。将混合物搅拌5小时，然后用50毫升二氯甲烷稀释并且用硫酸镁干燥，将混合物过滤并减压浓缩。产物73p在硅胶上进行柱色谱法纯化。
步骤Q SES-保护的胺73p(0.1毫摩尔)溶解于2毫升DMF并且用氟化铯(0.4毫摩尔)处理。室温下将反应混合物搅拌4小时并且倒入水(10毫升)中。混合物用乙酸乙酯(3×20毫升)萃取。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。大环胺73在硅胶上进行柱色谱法纯化。
制备实施例74下面的制备
步骤A 将N-Boc胺65n(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下搅拌得到的混合物30分钟。减压去除所有的挥发物，残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后，加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液，然后加入异氰酸酯27b甲苯溶液(1.2当量，0.6毫升0.2M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，得到产物74(45毫克，59％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.11(br s，1H)，7.40-7.69(br s，1H)，6.08-6.43(br s，1H)，5.91(ddt，1H，J＝5.6，10.4，17.3Hz)，5.70(br s，1H)，5.29(dd，1H，J＝1.2，17.3Hz)，5.24(dd，1H，J＝1.2，10.4Hz)，4.66(d，1H，J＝9.4Hz)，4.46(br s，1H)，4.38(m，1H)，4.25(d，1H，J＝10.7Hz)，4.06(m，2H)，3.98(m，1H)，3.71(dq，5.6，11.6Hz)，3.64(ddd，1H，J＝5.0，5.3，9.7Hz)，3.25(m，1H)，2.88(d，1H，J＝13.5Hz)，2.47(br s，1H)，2.19(d，1H，J＝11.6Hz)，1.39(s，9H)，1.28-1.99(m，22H)，1.21(d，3H，J＝5.6Hz)，1.13(m，1H)，1.04(s，3H)，0.91(s，3H)；13CNMR(CDCl3，125MHz)δ198.7，173.0，171.3，159.4，157.0，133.4，117.7，75.2，67.7，61.2，60.8，55.6，54.6，48.7，42.2，36.3，31.6，28.9，27.9，27.8，27.1，26.8，25.9，24.8，24.0，23.6，21.9，21.5，19.4，15.8，13.4ppm；HRMSC37H62N5O8S[M+H]+计算值736.4319，实测值736.4325.
制备实施例75下面的制备
步骤A 用环丙基异氰化物(Oakwood Prod.，2当量，0.25毫升，d 0.8)和乙酸(2当量，0.16毫升，d 1.049)处理醛65k(710毫克)的30毫升无水二氯甲烷的溶液。室温下将混合物搅拌5小时。减压去除所有的挥发物，残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；15∶85至55∶45)，得到产物75a(740毫克，83％)，为白色固体。
步骤B 用氢氧化锂一水合物(2.5当量，125毫克)处理20毫升THF/H2O的2∶1混合物中乙酸酯75a(740毫克)的溶液，并且搅拌大约30分钟，直到通过TLC分析(乙酸乙酯/己烷；8∶2)监测所有的起始物消耗完全。反应混合物用50毫升饱和碳酸氢钠水溶液稀释并且用二氯甲烷(3×80毫升)萃取。将合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到产物75b(688毫克，98％)，为无色半固体，其不用进一步纯化即可使用。
步骤C
用Dess-Martin全碘烷(2.0当量，1.01克)处理羟基酰胺75b(1.192毫摩尔)的25毫升无水二氯甲烷溶液。室温下将反应混合物搅拌30分钟。用1M硫代硫酸钠水溶液(30毫升)处理混合物，并且搅拌5分钟。还加入饱和碳酸氢钠水溶液(30毫升)并且再继续向搅拌10分钟。用二氯甲烷(3×80毫升)萃取混合物。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；5∶95至4∶6)，得到产物75c(476毫克，69％)，为白色固体。
步骤D 将N-Boc胺75c(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后滴加异氰酸酯56e溶液(1.2当量，0.59毫升的0.216M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，得到产物75(41毫克，53％)，为白色固体。
1HNMR(500MHz，CDCl3)δ8.12(brs，1H)，7.40-7.70(br s，1H)，6.28(br s，1H)，5.68(brs，1H)，5.37(br s，1H)，4.62(s，1H)，4.49(br s，1H)，4.22(d，1H，J＝10.7Hz)，4.05(dd，1H，J＝5.0，10.4Hz)，3.94(d，1H，J＝1.6Hz)，3.88(dd，1H，J＝10.4，10.7Hz)，3.82(q，1H，J＝11.0Hz)，3.69(m，1H)，3.62(ddd，1H，J＝5.0，5.6，9.4Hz)，3.20(m，1H)，2.89(ddd，1H，J＝3.4，7.2，14.8Hz)，2.55(d，2H，J＝17.0Hz)，2.48(d，2H，J＝17.0Hz)，1.79-1.99(m，4H)，1.28-1.69(m，10H)，1.14(d，3H，J＝6.0Hz)，1.10(s，6H)，1.00(s，3H)，0.99(s，9H)，0.90(m，2H)，0.83(s，3H)，0.71(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.8，172.8，171.5，160.9，157.8，75.5，68.1，60.8，57.2，55.9，48.7，46.8，35.2，29.3，28.6，28.3，27.7，26.9，26.8，24.8，24.4，23.1，19.3，16.3，13.6，6.8ppm；HRMSC39H63N6O8[M+H]+计算值743.4707，实测值743.4686.
制备实施例76下面的制备 步骤A 将N-Boc胺75c(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下过夜。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入10滴饱和碳酸氢钠水溶液。10分钟之后滴加异氰酸酯63e溶液(1.2当量，0.95毫升的0.131M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(70毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物76(54毫克，72％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.22(br s，1H)，7.58(br s，1H)，6.13(br s，1H)，5.75(br s，1H)，5.15(d，1H，J＝8.5Hz)，4.68(br s，1H)，4.56(s，1H)，4.28(d，1H，J＝10.7Hz)，4.06(dd，1H，J＝4.7，10.4Hz)，3.99(dd，1H，J＝9.1，9.7Hz)，3.60(m，2H)，3.47(dd，1H，J 12.2，13.2Hz)，3.19(m，1H)，3.07(m，3H)，2.94(s，3H)，2.87(ddd，1H，J＝4.0，7.8，15.1Hz)，1.72-1.99(m，4H)，1.37(t，3H，J＝7.5Hz)，1.27-1.68(m，9H)，1.21(d，3H.J＝6.0Hz)，1.13(m，1H)，1.01(s，3H)，0.92(s，9H)，0.89(s，3H)，0.87(m，2H)，0.71(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ199.5，172.8，171.6，160.8，158.1，75.8，68.4，60.6，56.2，54.4，50.4，48.5，45.7，34.7，34.5，32.1，31.6，28.6，27.8，27.7，27.0，26.9，26.7，24.9，24.6，23.0，19.2，16.2，13.5，8.5，6.7ppm；HRMSC35H61N6O8S[M+H]+计算值725.4272，实测值725.4292.
制备实施例77下面的制备 步骤A 将N-Boc胺75c(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯27b甲苯溶液(1.2当量，0.6毫升的0.2M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物2小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物77(50毫克，65％)，为白色固体。
1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.12(br s，1H)，7.33-7.63(br s，1H)，6.07-6.47(br s，1H)，5.67(br s，1H)，4.65(d，1H，J＝9.7Hz)，4.45(br s，1H)，4.37(m，1H)，4.24(d，1H，J＝10.7Hz)，4.07(dd，1H，J＝5.0，10.7Hz)，3.70(dq，1H，5.9，9.7Hz)，3.64(ddd，1H，J＝5.0，5.6，9.7Hz)，3.24(m，1H)，2.89(ddd，1H，J＝3.7，7.5，14.5Hz)，2.88(m，1H)，2.47(br s，1H)，2.18(d，1H，J＝12.6Hz)，1.74-1.97(m，5H)，1.39(s，9H)，1.27-1.73(m，17H)，1.20(d，3H，J＝6.3Hz)，1.11(m，1H)，1.04(s，3H)，0.91(s，3H)，0.90(m，2H)，0.73(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.7，173.0，171.3，161.0，157.0，75.2，67.8，61.1，60.8，55.5，54.6，50.1，48.6，36.3，31.6，28.8，27.9，27.0，26.9，25.9，24.8，24.0，23.6，23.1，21.9，21.5，19.4，15.8，13.4，6.9，6.8ppm.HRMSC37H62N5O8S[M+1]+计算值736.4319，实测值736.4329.
制备实施例78 步骤A 将N-Boc胺65n(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯59a甲苯溶液(1.2当量，0.6毫升的0.2M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/(己烷-二氯甲烷；1∶1)；1∶9至1∶1)，得到产物78(51毫克，67％)，为白色固体。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ8.17(br s，1H)，6.42-6.79(br s，1H)，5.90(ddt，1H，J＝5.6，10.7，17.0Hz)，5.73(br s，1H)，5.57(br s，1H)，5.27(d，1H，J＝17.0Hz)，5.22(d，1H，J＝10.0Hz)，4.62(dd，1H，J＝9.1，9.7Hz)，4.52(br s，1H)，4.29(m，2H)，3.86-4.11(m，4H)，3.64(m，3H)，3.17(m，2H)，2.74(d，1H，J＝11.9Hz)，2.24(d，1H，J＝17.3Hz)，2.10(d，1H，J＝17.0Hz)，1.95(m，4H)，1.24-1.68(m，11H)，1.16(d，3H，J＝5.9Hz)，1.11(m，1H)，1.02(s，3H)，1.01(s，6H)，0.95(s，9H)，0.87(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ196.8，172.9，171.6，170.7，159.4，158.2，133.6，117.5，75.7，68.2，60.8，56.0，55.3，48.5，46.8，46.2，44.9，42.3，35.7，34.8，32.3，31.6，30.2，28.6，28.4，27.8，27.7，27.1，27.0，26.8，24.8，24.5，19.3，16.5，13.6ppm.HRMSC39H65N6O7[M+1]+计算值729.4915，实测值729.4917.
制备实施例79 步骤A 将N-Boc胺75n(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯59a甲苯溶液(1.2当量，0.6毫升的0.2M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/(己烷-二氯甲烷；1∶1)；1∶9至1∶1)，得到产物79(36毫克，48％)，为白色固体。
1H NMR(CDCl3.500MHz)δ8.19(br s，1H)，6.38-6.70(br s，1H)，5.73(br s，1H)，5.55(d，1H，J＝7.8Hz)，4.61(t，1H，J＝9.7Hz)，4.51(br s，1H)，4.27(m，2H)，4.05(dd，1H，J＝5.0，10.4Hz)，3.95(dd，1H，J＝9.4，9.7Hz)；3.62(m，3H)，3.18(m，2H)，2.90(ddd，1H，J＝3.7，7.2，14.8Hz)，2.73(d，1H，J＝12.6Hz)，2.21(d，1H，J＝17.0Hz)，2.09(d，1H，J＝17.3Hz)，1.93(brs，4H)，1.27-1.68(m，11H)，1.15(d，3H，J＝5.9Hz)，1.11(m，1H)，1.02(s，3H)，1.00(s，6H)，0.94(s，9H)，0.87(m，2H)，0.86(s，3H)，0.73(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ197.1，172.9，171.6，170.6，160.9，158.2，75.6，68.3，60.7，56.0，55.3，48.5，46.7，46.3，44.9，35.7，34.8，32.4，31.6，30.2，29.7，28.6，28.5，27.8，27.7，27.0，26.7，24.8，24.7，23.1，19.3，16.5，13.6，6.7，6.6ppm.HRMSC39H65N6O7[M+1]+计算值729.4915，实测值729.4926.
制备实施例80 步骤A 将N-Boc胺52(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯80a甲苯溶液(1.2当量，0.8毫升的0.155M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物80(41毫克，61％)，为白色固体。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ，8.01(d，1H，J＝8.2Hz)，7.65(br s，1H)，6.01(br s，1H)，5.91(ddt，1H，J＝5.6，10.0，17.0Hz)，5.68(dd，1H，J＝9.1，9.4Hz)，5.27(dd，1H，J＝1.2，17.0Hz)，5.23(dd，1H，J＝1.2，10.0Hz)，5.20(m，1H)，4.98(br s，1H)；4.59(s，1H)，4.13(d，1H，J＝10.7Hz)，4.01(m，3H)，3.89(ddd，1H，J＝2.2，10.4，10.7Hz)，3.79(dd，1H，J＝3.4，12.9Hz)，3.76(m，1H)，3.56(m，2H)，3.36(dd，1H，J＝4.1，7.5Hz)，3.31(m，1H)，3.18(brs，1H)，3.14(br s，1H)，2.22(d，1H，J＝10.7Hz)，2.07(br s，2H)，1.73-2.00(m，5H)，1.25-1.70(m，11H)，1.16(m，1H)，1.02(s，3H)，0.96(s，9H)，0.86(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.8，177.4，172.1，171.3，159.3，157.9，133.4，117.7，71.4，70.7，60.7，56.7，53.4，50.8，48.6，45.4，45.2，42.2，39.4，34.7，33.1，32.2，31.0，28.7，27.7，27.5，27.3，26.9，24.3，19.3，13.5ppm.HRMSC38H59N6O8[M+1]+计算值727.4394，实测值727.4387.
制备实施例81 步骤A 将N-Boc胺65n(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯80a甲苯溶液(1.2当量，0.8毫升的0.155M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物81(54毫克，70％)，为白色固体。
1H NMR(CDCl3.500MHz)δ，8.12(br s，1H)，7.39-7.79(br s，1H)，6.29(br s，1H)，5.91(ddt，1H，J＝5.9，10.4，17.0Hz)，5.71(brs，1H)，5.40(brs，1H)，5.27(dd，1H，J＝1.2，17.0Hz)，5.23(dd，1H，J＝1.2，10.4Hz)，4.67(dd，1H，J＝7.8，8.1Hz)；4.50(brs，1H)，4.24(d，1H，J＝10.7Hz)，4.07(dd，1H，J＝5.3，10.4Hz)，4.03(m，1H)，3.97(ddd，1H，J＝5.6，5.9，15.7Hz)，3.81(m，2H)，3.73(m，1H)，3.67(d，1H，J＝12.2Hz)，3.62(m，1H)，3.20(s，2H)，3.07(s，1H)，2.29(d，1H，J＝11.0Hz)，2.07(brs，3H)，1.93(brs，2H)，1.83(br s，3H)，1.28-1.68(m，10H)，1.17(d，3H，J＝5.9Hz)，1.11(m，1H)，1.01(s，3H)，0.99(s，9H)，0.83(s，3H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.5，177.1，172.8，171.5，159.4，158.0，133.4，117.7，75.5，68.1，60.8，57.4，55.9，48.7，45.4，42.3，40.4，34.8，32.8，31.7，28.6，27.8，27.6，27.4，26.9，26.8，24.7，24.4，19.4，16.2，13.5ppm.HRMSC39H61N6O8[M+1]+计算值741.4551，实测值741.4543.
制备实施例82 步骤A 将N-Boc胺75c(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯80a甲苯溶液(1.2当量，0.8毫升的0.155M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；2∶8至6∶4)，得到产物82(50毫克，65％)，为白色固体。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δ8.12(br s，1H)，7.38-7.68(br s，1H)，6.28(br s，1H)，5.68(br s，1H)，5.39(br s，1H)，4.66(dd，1H，J＝7.5，7.5Hz)，4.49(br s，1H)，4.23(d，1H，J＝10.4Hz)，4.06(dd，1H，J＝5.0，10.4Hz)；3.81(m，2H)，3.71(m，1H)，3.67(d，1H，J＝12.2Hz)，3.61(m，1H)，3.19(br s，2H)，3.07(s，1H)，2.89(ddd，1H，J＝3.7，7.5，14.8Hz)，2.29(d，1H，J＝11.0Hz)，1.98-2.13(m，3H)，1.75-1.96(m，6H)，1.26-1.67(m，9H)，1.17(d，3H，J＝5.9Hz)，1.10(m，1H)，1.00(s，3H)，0.98(s，9H)，0.90(m，2H)，0.83(s，3H)，0.72(m，2H)；13C NMR(CDCl3，125MHz)δ198.9，178.8，172.8，171.5，160.9，158.0，75.5，68.1，60.8，57.4，55.9，48.7，45.4，40.2，34.8，32.8，31.7，28.6，27.8，27.7，27.4，26.9，26.8，24.8，24.4，23.1，19.3，16.2，13.5，6.9，6.8ppm.
制备实施例83 步骤A 将N-Boc胺33(60毫克)溶解于10毫升4M HCl的二烷溶液中。室温下将得到的溶液搅拌30分钟。减压去除所有的挥发物，并且残余物放在高真空下3小时。得到的胺盐溶解于5毫升无水二氯甲烷并且冷却至0℃。然后加入20滴饱和碳酸氢钠水溶液。之后加入异氰酸酯80a甲苯溶液(1.2当量，0.8毫升的0.155M甲苯溶液)并且继续搅拌10分钟。去除冷却浴并且在室温下搅拌混合物3小时。反应混合物用二氯甲烷(60毫升)稀释并且用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩。残余物在硅胶上进行色谱法(梯度丙酮/己烷；1∶9至1∶1)，得到产物83(36毫克，81％)，为白色固体。
下面的表1和2给出举例的化合物。如下评定化合物的Ki值Ki值″A″是小于100nM，Ki值″B″是大于或等于100nM但是小于1uM，Ki值″C″是大于或等于1uM。
表1




下面表2给出表现出极好HCV蛋白酶抑制活性的本发明其他代表性化合物。
表2






表2A给出另外的化合物表2A

表3给出本发明一些代表性化合物的活性(Ki*)表3.具有抑制活性的代表性化合物

根据上述一般方法，也能制备下面的化合物并且用作HCV蛋白酶抑制剂

本发明涉及新的HCV蛋白酶抑制剂。通过下面的体外测试证明它们抑制HCV NS3/NS4a丝氨酸蛋白酶的能力，表明它们的实用性。HCV蛋白酶抑制活性分析分光光度分析通过R.Zhang等，Analytical Biochemistry，270(1999)268-275描述的程序对本发明化合物进行HCV丝氨酸蛋白酶的分光光度分析，这篇文献的公开内容在此引作参考。以产色酯底物的蛋白水解作用为基础的这项分析适合连续监测HCV NS3蛋白酶活性。底物衍生自NS5A-NS5B连接序列(Ac-DTEDVVX(Nva)，其中X＝A或P)的P侧，其C-末端羧基被四个不同发色团醇(3-或4-硝基苯酚，7-羟基-4-甲基-香豆素，或4-苯基偶氮苯酚)中的一个酯化。下面给出的是这些新的分光光度分析酯底物的合成，表征和高通量筛选应，以及HCVNS3蛋白酶抑制剂的详细动力学评价。
材料和方法材料用于分析的化学试剂相关的缓冲液从Sigma ChemicalCompany(St.Louis，密苏里州)购得。肽合成试剂从Aldrich Chemicals，Novabiochem(San Diego，California)，Applied Biosystems(Foster City，California)和Perseptive Biosystems(Framingham，Massachusetts)购得。人工合成肽或者在自动ABI型431A合成仪(购自AppliedBiosystems)上合成。UV/VIS分光计LAMBDA 12型从PerkinElmer(Norwalk，Connecticut)购得，96-孔UV板从Corning(Corning，NewYork)购得。预热模块从USA Scientific(Ocala，Florida)购得。96-孔板涡流器从Labline Instruments(Melrose Park，Illinois)购得。单色Spectramax Plus微量滴定板读数器从Molecular Devices(Sunnyvale，加利福尼亚)获得。
酶制剂应用先前公开的方法(D.L.Sali等，Biochemistry，37(1998)3392-3401)制备重组异源二聚体HCV NS3/NS4A蛋白酶(菌株1a)。利用通过氨基酸分析事先定量测定的重组HCV蛋白酶标准物，通过Biorad染料方法测定蛋白质浓度。分析开始之前，应用Biorad Bio-Spin P-6预装柱，用酶储存缓冲液(50mM磷酸钠，pH 8.0，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麦芽甙和10mM DTT)替换分析缓冲液(25mMMOPS pH 6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麦芽甙，5μMEDTA和5μM DTT)。
底物合成和纯化根据R.Zhang等的报道(上文)进行底物合成，并且应用标准方案(K.Barlos等，Int.J.Pept.Protein Res.，37(1991)，513-520)通过将Fmoc-Nva-OH固定到2-氯三苯甲基氯树脂上开始。应用Fmoc化学法，或者手工或者在自动AB1型431肽合成仪上顺序组装肽。通过在10％乙酸(HOAc)和10％三氟乙醇(TFE)的二氯甲烷(DCM)溶液中水解30分钟，或者通过2％三氟乙酸(TFA)的DCM溶液水解10分钟，从树脂上裂解N-乙酰化和完全保护的肽片段。共沸蒸发合并的滤液和DCM洗液(或者反复用Na2CO3水溶液萃取)去除在裂解中使用的酸。将DCM相用Na2SO4干燥并蒸发。
利用标准酸-醇偶联方法组装酯底物(K.Holmber等，Acta Chem.Scand.，B33(1979)410-412)。将肽片段溶解于无水吡啶(30-60毫克/毫升)，向其中加入10摩尔当量的生色团和催化剂量的(0.1当量)的对-甲苯磺酸(pTSA)。加入二环己基碳化二亚胺(DCC，3当量)起始偶联反应。通过HPLC监测产物生成并且发现室温下反应12-72小时完成反应。真空蒸发吡啶溶剂并且通过用甲苯共沸蒸发进一步去除溶剂。用95％TFA的DCM溶液对肽酯进行2小时去保护反应，并且用无水乙醚萃取三次去除过量的生色团。通过在C3或C8柱子上使用30％至60％乙腈梯度(使用六柱体积)进行反相HPLC来纯化去保护底物。HPLC纯化后的总产率是大约20-30％。通过电子喷射离子化质谱证实分子量。底物在干燥下以干燥粉末形式保存底物和产物的光谱在pH 6.5分析缓冲液中获得底物和相应发色团产物的光谱。使用多个稀释物，在1-cm比色杯中在最佳非高峰波长下测定消光系数(对于3-Np和HMC是340nm，对于PAP是370nm，对于4-Np是400nm)。最佳非高峰波长确定是获得底物和产物之间吸光度最大分级差异的波长(产物OD-底物OD)/底物OD)。
蛋白酶分析30℃下使用200微升反应混合物在96-孔微量滴定板上进行HCV蛋白酶分析。对NS3/NS4A异源二聚体(D.L.ali等，上文))优化分析缓冲液条件(25mM MOPS pH 6.5，300mM NaCl，10％甘油，0.05％月桂基麦芽糖苷，5μM EDTA和5μM DTT)。典型地，向孔中加入缓冲液、底物和抑制剂的混合物100微升(DMSO的最终浓度≤4％v/v，并且在30℃下温育大约3分钟。然后使用50微升在分析缓冲液中预热(30℃)的蛋白酶(12nM，30℃)引发反应(最终体积200微升)。通过使用装有单色(使用平板读数器使用滤光器能获得可接受结果)SpectraMax Plus微量滴定板读数器，在适当波长下(对于3-Np和HMC是340nm，对于PAP是370nm，对于4-Np是400nm)，对平板监测分析时间(60分钟)的吸光度变化。以酶空白样品作为非酶水解对照物，在合适的波长监测Nva和发色团之间酯键的蛋白裂解。在30-倍底物浓度范围(～6-200μM)进行底物动力学参数评价。利用线性回归获得初始速度，通过利用线性回归分析(Mac Curve Fit 1.1，K.Raner)，通过将数据带入Michaelis-Menten等式，获得动力学常数。假设酶有完全活性，计算转化数(kcat)。
抑制剂和灭活剂评价以固定浓度的酶和底物试验测定竞争抑制剂Ac-D-(D-Gla)-L-I-(Cha)-C-OH(27)，Ac-DTEDVVA(Nva)-OH和Ac-DTEDWP(Nva)-OH的抑制常数(Ki*)，根据对于竞争抑制作用动力学的重排Michaelis-Menten方程式以vo/vi对抑制剂浓度([I]o)做图vo/vi＝1+[I]o/(Ki(1+[S]o/Km))，其中vo是没有抑制的初始速度，vi是任何抑制剂浓度抑制剂存在下的起始速度([I]o)，和[S]o是使用的底物浓度。利用线性回归和得到的斜率带入得到的数据，利用1/(Ki(1+[S]o/Km)，计算Ki*值。
表1，2和2A以及表3，给出对本发明的各种大环化合物获得的Ki值，其中以Ki*值范围顺序排列化合物。从这些试验结果，对于本领域技术人员显而易见的是，本发明的化合物具有作为NS3-丝氨酸蛋白酶抑制剂的杰出的实用性。
权利要求
1.具有式1所示通式结构的化合物 结构式1或者所述化合物的药学可接受盐，溶剂合物或酯，其中(1)R1是-C(O)R5或-B(OR)2；(2)R5是H，-OH，-OR8，-NR9R10，-C(O)OR8，-C(O)NR9R10，-CF3，-C2F5，-C3F7，-CF2R6，-R6，-C(O)R7或NR7SO2R8；(3)R7是H，-OH，-OR8，或-CHR9R10；(4)R6，R8，R9和R10可以相同或不同，各自独立地选自H，烷基，烯烃基，芳基，杂烷基，杂芳基，环烷基，芳基烷基，杂芳基烷基，R14，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)OR11，-[CH(R1’)]pC(O)OR11，-[CH(R1’)]pC(O)NR12R13，-[CH(R1′)]pS(O2)R11，-[CH(R1’)]pC(O)R11，-[CH(R1’)]pS(O2)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)(R′)，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)R11，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)R11，-[CH(R1’)]pCH(OH)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)OR11，-C(O)N(H)CH(R2’)C(O)OR11，-C(O)N(H)CH(R2’)C(O)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)R′，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)CH(R3’)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)N(H)CH(R5’)C(O)OR11，和-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)N(H)CH(R3’)C(O)N(H)CH(R4’)C(O)N(H)CH(R5’)C(O)NR12R13；其中R1’，R2’，R3’，R4’，R5’，R11，R12和R13可以相同或不同，各自独立地选自H，卤原子，烷基，芳基，杂烷基，杂芳基，环烷基，烷氧基，芳氧基，烯烃基，炔烃基，烷基-芳基，烷基-杂芳基，杂环烷基，芳基-烷基和杂芳烷基；或者R12和R13连接在一起使得这样的化合是环烷基，杂环烷基，芳基或杂芳基；R14存在或不存在，如果存在，则选自H，烷基，芳基，杂烷基，杂芳基，环烷基，烷基-芳基，烯丙基，烷基-杂芳基，烷氧基，芳基-烷基，烯烃基，炔烃基和杂芳烷基；(5)R和R′存在或不存在，如果存在，则可以是相同或不同的，各自独立地选自H，OH，C1-C10烷基，C2-C10烯烃基，C3-C8环烷基，C3-C8杂环烷基，烷氧基，芳基氧，烷硫基，芳基硫，烷基氨基，芳基氨基，氨基，酰胺基，芳基硫氨基，芳基羰基氨基，芳基氨基羧基，烷基氨基羧基，杂烷基，烯烃基，炔烃基，(芳基)烷基，杂芳基烷基，酯，羧酸，氨基甲酸酯，脲，酮，醛，氰基，硝基，卤原子，(环烷基)烷基，芳基，杂芳基，(烷基)芳基，烷基杂芳基，烷基-杂环基和(杂环烷基)烷基，其中所述环烷基由3-8个碳原子和0-6个氧原子、氮原子、硫原子或磷原子构成，并且所述烷基有0-6个碳原子；(6)L′是H，OH，烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，环烷基，或杂环基；(7)M′是H，烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，环烷基，芳基烷基，杂环基或氨基酸侧链；或者L′和M′连接在一起形成环结构，使得下式代表的结构式1的部分 (加上编号1和2分别表明一些碳原子和一些氮原子的位置)由结构式2代表 结构式2其中在结构式2中E存在或不存在，如果存在，则是C，CH，N或C(R)；J存在或不存在，并且当J存在时，J是(CH2)p，(CHR-CHR′)p，(CHR)p，(CRR′)p，S(O2)，N(H)，N(R)或O；当J不存在并且G存在时，L直接连接标记位置2的氮原子；p是0至6的数；L存在或不存在，并且当L存在时，L是C(H)或C(R)；当L不存在时，M存在或不存在；如果M存在而L不存在，则M直接地并且独立地连接E，并且J直接地并且独立地连接E；G存在或不存在，并且当G存在时，G是(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p或(CRR′)p；当G不存在时，J存在并且E直接连接标记位置1的碳原子；Q存在或不存在，并且当Q存在时，Q是NR，PR，(CR＝CR)，(CH2)p，(CHR)p，(CRR′)p，(CHR-CHR′)p，O，NR，S，SO，或SO2；当Q不存在时，M是(i)直接连接A或者(ii)是L上一个独立的取代基，所述独立的取代基选自-OR，-CH(R)(R′)，S(O)0-2R或-NRR′或者(iii)不存在；当Q和M两个都不存在时，A直接连接L，或者A是E上独立的取代基，所述独立的取代基选自-OR，-CH(R)(R′)，S(O)0-2R或-NRR′或者A不存在；A存在或不存在，如果存在，则A是O，O(R)，(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p，(CRR′)p，N(R)，NRR′，S，S(O2)，-OR，CH(R)(R′)或NRR′；或者A连接M形成环烷基，脂肪族或杂环桥；M存在或不存在，当M存在时，M是卤原子，O，OR，N(R)，S，S(O2)，(CH2)p，(CHR)p(CHR-CHR′)p，或(CRR′)p；或者M连接A形成环烷基，脂肪族或杂环烷基桥；(8)Z′由下面所示(i)，(ii)，(iii)，(iv)或(v)代表(i) 结构式A其中R44选自 并且R77选自 其中R78选自甲基，乙基，异丙基，叔丁基和苯基； 结构式B其中R79选自 结构式C其中砜环任选地被烷基和环烷基取代；(iv)下面的部分 (v)下面的部分 其中W是-C(＝O)-或-S(O2)-；Z是O或N；并且Y选自 其中Y11选自H，-C(O)OH，-C(O)OEt，-OMe，-Ph，-OPh，-NHMe，-NHAc，-NHPh，-CH(Me)2，1-三唑基，1-咪唑基和-NHCH2COOH；Y12选自H，-C(O)OH，-C(O)OMe，-OMe，F，Cl和Br；Y13选自下面的部分 Y14是MeS(O2)-，-Ac，-Boc，-iBoc，-Cbz，或-Alloc；Y15和Y16可以是相同或不同的，并且各自独立地选自烷基，芳基，杂烷基，和杂芳基；Y17是-CF3，-NO2，-C(O)NH2，-OH，-C(O)OCH3，-OCH3，-OC6H5，-C6H5，-C(O)C6H5，-NH2，或-C(O)OH；和Y18是-C(O)OCH3，-NO2，-N(CH3)2，F，-OCH3，-C(H2)C(O)OH，-C(O)OH，-S(O2)NH2，或-N(H)C(O)CH3；(9)X由结构式4代表 结构式4其中在结构式4中，a是2，3，4，5，6，7，8或9；b，c，d，e和f可以是相同或不同的，各自独立地是0，1，2，3，4或5；A是C，N，S或O；R29和R29’独立地存在或不存在，如果存在，则可以是相同或不同的，各自独立地是一个或两个取代基，独立地选自H，卤原子，烷基，芳基，环烷基，环烷基氨基，环烷基氨基羰基，氰基，羟基，烷氧基，烷硫基，氨基，-NH(烷基)，-NH(环烷基)，-N(烷基)2，羧基，-C(O)O-烷基，杂芳基，芳烷基，烷基芳基，芳烯烃基，杂芳烷基，烷基杂芳基，杂芳烯基，羟基烷基，芳基氧，芳烷氧基，酰基，芳酰基，硝基，芳基氧羰基，芳烷氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，芳基硫，杂芳基硫，芳烷基硫，杂芳烷基硫，环烯烃基，杂环基，杂环烯基，Y1Y2N-烷基-，Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以是相同或不同的并且独立地选自氢，烷基，芳基和芳烷基；或者R29和R29’连接在一起使得化合成0-6个碳原子的脂肪族或杂脂肪族链；R30存在或不存在，如果存在，则是一个或两个取代基，独立地选自H，烷基，芳基，杂芳基和环烷基；(10)结构式1中的D由结构式5代表 结构式5其中在结构式5中，R32，R33和R34存在或不存在，如果存在，则独立地是一个或两个取代基，独立地选自H，卤原子，烷基，芳基，环烷基，环烷基氨基，螺烷基，环烷基氨基羰基，氰基，羟基，烷氧基，烷硫基，氨基，-NH(烷基)，-NH(环烷基)，-N(烷基)2，羧基，-C(O)O-烷基，杂芳基，芳烷基，烷基芳基，芳烯烃基，杂芳烷基，烷基杂芳基，杂芳烯烃基，羟基烷基，芳基氧基，芳烷氧基，酰基，芳香烃酰基，硝基，芳基氧羰基，芳烷氧羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基亚磺酰基，芳基亚磺酰基，杂芳基亚磺酰基，芳基硫，杂芳基硫，芳烷基硫，杂芳烷基硫，环烯烃基，杂环基，杂环烯烃基，Y1Y2N-烷基-，Y1Y2NC(O)-和Y1Y2NSO2-，其中Y1和Y2可以相同或不同，并且独立地选自氢，烷基，芳基，和芳烷基；或者R32和R34连接在一起使得化合形成环烷基的一部分；g是1，2，3，4，5，6，7，8或9；h，i，j，k，l和m可以是相同或不同的，并且各自独立地是0，1，2，3，4或5；和A是C，N，S或O，(11)条件是，在结构式1中，当结构式2 结构式2是 并且W′是CH或N，排除下面两种情况(i)和(ii)有条件的排除(i)Z′不是-NH-R36，其中R36是H，C6芳基，C10芳基，杂芳基，-C(O)-R37，-C(O)-OR37或-C(O)-NHR37，其中R37是C1-6烷基或者C3-6环烷基；和有条件的排除(ii)R1不是-C(O)OH，-C(O)OH的药学可接受盐，-C(O)OH的酯或者-C(O)NHR38，其中R38选自C1-8烷基，C3-6环烷基，C6芳基，C10芳基，或C7-16芳烷基。
2.根据权利要求1的化合物，其中结构式2代表结构式1的部分 结构式2 G和J可以存在或不存在，如果存在，可以是相同或不同的，并且独立地选自(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p，和(CRR′)p；A和M可以存在或不存在，如果存在，可以是相同或不同的，并且独立地选自O，S，S(O2)，N(R)，(CH2)p，(CHR)p，(CHR-CHR′)p，和(CRR′)p；或者A和M连接在一起形成环烷基或杂环桥；和Q可以存在或不存在，如果存在，则是(CH2)p，N(R)，O，S，S(O2)，(CHR)p，或(CRR′)p。
3.根据权利要求2的化合物，其中结构式2代表的部分选自下面的结构 其中n＝0-4。
4.根据权利要求3的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构
5.根据权利要求4的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构 其中X′是H，F，Cl或Br。
6.根据权利要求1的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分 结构式2是 Q可以存在或不存在，如果Q不存在，则M直接连接A。
7.根据权利要求6的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构
8.根据权利要求1的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构 结构式2是
9.根据权利要求8的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构
10.根据权利要求9的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分选自下面的结构
11.根据权利要求1的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分 结构式2是 并且R20选自下面的结构
12.根据权利要求1的化合物，其中结构式2代表的结构式1的部分 结构式2是 并且R21和R22可以相同或不同并且独立地选自下面的结构
13.根据权利要求1的化合物，其中L和M不存在，并且J直接连接E。
14.根据权利要求1的化合物，其中L，J和M不存在并且E直接连接N。
15.根据权利要求1的化合物，其中G和M不存在。
16.根据权利要求1的化合物，其中M′是
17.根据权利要求1的化合物，其中X选自下面的结构 并且R55是烷基，环烷基，氨基甲酸酯或脲；并且n＝0-5。
18.根据权利要求17的化合物，其中X选自下面的结构
19.根据权利要求1的化合物，其中R1是酮酰胺，酮醛，二酮，酮酸或酮酸酯。
20.根据权利要求19的化合物，其中R1是-C(O)C(O)NR9R10；R9是H；并且R10是H，-R14，-[CH(R1’)]pC(O)OR11，-[CH(R1’)]pC(O)NR12R13，-[CH(R1’)]pS(O2)R11，-[CH(R1’)]pS(O2)NR12R13，-[CH(R1’)]pC(O)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)C(H)(R2’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)C(H)(R2’)C(O)NR12R13，或-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2)(R′)。
21.根据权利要求20的化合物，其中R10是H，-R14，-CH(R1’)C(O)OR11，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)R11，-CH(R1’)CH(R1’)S(O2)NR12R13，-CH(R1’)CH(R1’)C(O)R11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)OR11，-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)C(O)NR12R13，或-CH(R1’)C(O)N(H)CH(R2’)(R′)；R1’是H或烷基；并且R2’是苯基，取代的苯基，杂原子取代的苯基，环烷基，杂环烷基，哌啶基或吡啶基。
22.根据权利要求21的化合物，其中R1’是H。
23.根据权利要求20的化合物，其中R11是H，甲基，乙基，烯丙基，叔丁基，苄基，α-甲基苄基，α，α-二甲基苄基，1-甲基环丙基或1-甲基环戊基；R′是羟甲基或-CH2C(O)NR12R13；R2’独立地选自下面的结构 其中U1和U2可以相同或不同，并且独立地选自H，F，-CH2C(O)OH，-CH2C(O)OMe，-CH2C(O)NH2，-CH2C(O)NHMe，-CH2C(O)NMe2，叠氮基，氨基，羟基，取代的氨基和取代的羟基；U3和U4是相同或不同，并且独立地选自O或S；U5是烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂烷基磺酰基，杂芳基磺酰基，烷基羰基，芳基羰基，杂烷基羰基，杂芳基羰基，烷氧羰基，芳基氧羰基，杂芳基氧羰基，烷基氨基羰基，芳基氨基羰基，或杂芳基氨基羰基或者它们的组合；NR12R13选自下面的 U6是H，OH，或CH2OH，并且R14选自H，-CH3，Et，正丙基，甲氧基，环丙基，正丁基，1-丁-3-炔，苄基，α-甲基苄基，苯乙基，烯丙基，1-丁-3-烯基，-OCH3和环丙基甲基。
24.根据权利要求1的化合物，其中R1选自下面的结构
25.根据权利要求1的化合物，其中D和X一起形成二价C7-C12没有支化的烃连接链，形成14-19元大环的一部分。
26.根据权利要求25的化合物，其中D和X一起形成C8或C9没有支化的烃连接链，形成15或16元杂环的一部分。
27.根据权利要求1的化合物，其中D和X一起形成二价C7-C12没有支化的烯连接链，形成具有一个不饱和度的14-19元大环的一部分。
28.根据权利要求27的化合物，其中D和X一起形成C8或C9没有支化的烯连接链，形成具有一个不饱和度的15或16元杂环的一部分。
29.根据权利要求1的化合物，其中D和X一起形成二价C2-C12没有支化的脂肪族链，形成9-19元杂环的一部分。
30.根据权利要求1的化合物，其中D选自下面的结构
31.根据权利要求1的化合物，其中结构式1的部分 中，下面部分 所代表的部分，选自下面的结构
32.根据权利要求1的化合物，其中Z′选自
33.根据权利要求1的化合物，其中W是C＝O。
34.根据权利要求1的化合物，其中Z是N。
35.根据权利要求1的化合物，其中Y选自下面的结构 其中Y17是CF3，NO2，C(O)NH2，OH，NH2或C(O)OH；并且Y18是F或C(O)OH。
36.根据权利要求37的化合物，其中Y选自下面的结构
37.根据权利要求1的化合物，其中Y选自下面的结构 W′是N或O；R23是H，烷基，芳基，杂芳基，环烷基或杂环烷基，其中各个所述芳基，杂芳基，环烷基，杂环烷基可以被烷基部分取代；R24是H，烷基，芳基，杂芳基，环烷基或杂环烷基，其中各个所述芳基，杂芳基，环烷基，杂环烷基可以被烷基部分取代；或者R23和R24一起形成含有碳环或杂环的环；R25是H，烷基，杂烷基，芳基，杂芳基，烷基氨基，芳基氨基，杂烷基氨基或环烷基，R26选自H，氨基甲酸酯，磺酰胺，烷基羰基，烷基磺酰基，芳基磺酰基，杂芳基，磺酰基，杂烷基磺酰基，芳基氧羰基，杂烷氧羰基，杂芳基氧羰基，烷基氨基羰基，芳基氨基羰基和脲；R27是H，烷基，环烷基，芳基或杂芳基；R28是H，烷基，杂烷基，芳基或杂芳基；和X′-O-是醚，酯或氨基甲酸酯。
38.根据权利要求1的化合物，其中(a)下面的部分 结构式2是 (b)R1选自下面的结构 (c)Z′由下面所示的(i)，(ii)，或(iii)之一代表(i) 结构式A其中R44选自 并且R77选自 其中R78选自甲基，乙基，异丙基，叔丁基和苯基；(ii) 结构式B其中R79选自 结构式C其中砜环任选地被烷基和环烷基取代；和(d)下式代表的式1的部分 选自下面的结构 并且n＝0至3。
39.根据权利要求1的化合物，选自 或者所述化合物的药学可接受盐，溶剂合物或酯。
40.根据权利要求39的化合物，选自 或者所述化合物的药学可接受盐，溶剂合物或酯。
41.权利要求1的化合物，其中R1是酮酰胺，酸，酮酸，酮酯，酮醛，二酮，硼酸或三氟酮。
42.含有根据权利要求1的化合物作为活性成分的药物组合物。
43.适合在治疗与HCV相关疾病中使用的根据权利要求42的药物组合物。
44.根据权利要求42的药物组合物，另外含有药学可接受载体。
45.根据权利要求46的药物组合物，另外含有抗病毒剂。
46.根据权利要求45的药物组合物，另外含有干扰素或PEG化干扰素。
47.根据权利要求46的药物组合物，其中所述抗病毒剂是利巴韦林而所述干扰素是α-干扰素。
48.一种治疗与HCV蛋白酶相关疾病的方法，所述方法包括对需要这样治疗的患者施用治疗有效量的根据权利要求1的化合物。
49.一种治疗与HCV蛋白酶相关疾病的方法，所述方法包括对需要这样治疗的患者施用含有治疗有效量的根据权利要求1的化合物的药物组合物。
50.根据权利要求49的方法，其中所述给药是皮下给药。
51.根据权利要求1的化合物用于制备治疗与HCV蛋白酶相关疾病的药物的用途。
52.一种用于治疗与HCV蛋白酶相关疾病的药物组合物，所述组合物含有治疗有效量的权利要求40中的一种或几种化合物和药学可接受载体。
53.权利要求52的药物组合物，另外含有抗病毒剂。
54.根据权利要求53的药物组合物，另外含有干扰素或PEG化干扰素。
55.根据权利要求54的药物组合物，其中所述抗病毒剂是利巴韦林而所述干扰素是α-干扰素。
全文摘要
本发明公开了具有HCV蛋白酶抑制活性的新的化合物和含有这样的化合物的药物组合物，以及使用它们治疗与HCV蛋白酶相关疾病的方法。新的化合物一般包括15－20元大环并且具有结构式(1)的通式其中各基团如说明书中的定义。
文档编号A61K31/33GK1894274SQ200480034923
公开日2007年1月10日 申请日期2004年9月23日 优先权日2003年9月26日
发明者S·范卡卓曼, F·G·恩裘吉, 吴万里, V·M·吉里佳瓦拉汉, B·麦克崔克, 苏兢, F·维拉奎斯, P·A·宾图 申请人:先灵公司