作为通道活化蛋白酶抑制剂的化合物和组合物的制作方法

专利名称：：作为通道活化蛋白酶抑制剂的化合物和组合物的制作方法
技术领域：
：本发明通常涉及通道活化蛋白酶(CAP)抑制剂。
背景技术：
：前列腺蛋白酶是一种存在于多种哺乳动物组织中的胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶。它是在细胞的胞外膜表达的膜锚定蛋白酶，但是也可以分泌到体液中，所述的体液例如精液、尿液和气道表面液体。前列腺蛋白酶(PRSS8)与蛋白酶例如蛋白裂解酶(matriptase)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11、组织蛋白酶A和嗜中性细胞弹性蛋白酶一起可以刺激氨氯吡"秦脒敏感的上皮钠通道(ENaC)的活性。抑制这些酶可以诱导上皮离子转运的改变，并且因而诱导穿过上皮细胞膜的液体内稳态的改变。例如，肾中的CAP抑制被认为促进利尿，同时气道中的CAP抑制促进肺中粘液和痰的清除。因此，肾中的CAP抑制可以治疗性地用于治疗高血压。气道中的CAP抑制阻止了呼吸分泌物的停滞，否则会4吏患者易受次级细菌感染。发明公开本发明提供了化合物、药物组合物以及应用该化合物调节通道活化蛋白酶(CAP)的方法。例如，本发明的化合物和组合物可以用于调节前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP誦2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、组织蛋白酶A和嗜中性细胞弹性蛋白酶。一方面，本发明提供了式(l)化合物及其可药用盐、7jC合物、溶剂化物和立体异构体R3—(CR4R5):其中J是5-12元单环或稠合的碳环、芳基、杂芳基或包含N、0和/或S的杂环；R1是-(CR2)rNR2、-(CR2VNRC(=NR)-NR2、-(CR2)rC(=NR)-NR2或5-7元含氮非芳族杂环；W-W是在环A任何位置上的取代基；W是或-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k-、-S02(CR2)k-或-OC(0)(CR2)k-;R2是d_6烷基、C2-6链烯基、C2—6炔基、R6、-CR9=CR9-R6或或者W-R2—起形成C，-6烷基、5-7元芳基或-OC(0)NR7R8;R3是NR7R8或R6;R4和R5独立地是H、Cw烷基、OH或C，-6烷氧基；R7和R8独立地是H、d-6烷基、C2—6链烯基、C2-6炔基或-(CR2)，-R6;或者R7和R8与N—起可以形成任选取代的5-7元单环或稠合的杂环；r9是H或Cl6坑基；R'。是卣素、C,—6烷基、Cw烷氧基、OR"或画(CR2)广R";R6、R"和X独立地是任选取代的5-7元碳环、杂环、芳基或杂芳基；或者R"是H或cl6烷基；每个R是H或d-6烷基、C2—6链烯基或C2-6炔基，其中碳可以任选被NR、O或S取代或代替；，其中环E是任选取代的5-7元单环或稠合的碳环或杂环;i是0画1;k和l独立地是0-6;m和n独立地是1-6;并且p是0-3。在以上式(l)中，R1是國(CH2)广NH2、(CH2),-NHC(^NH)-NH2或-(CH2),-C(-NH)-NH2NH2，其中每个1是0-1;或者R1是哌咬基。在特别的实例中，R1是-(CH2)「NH2、-(CH2)广NHC^NH)画NH2或(CH2)广C(:NH)-NH2NH2。在以上式(l)中，W是-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k-、-S02(CR2)k-或-OC(0)(CR2)k-;并且k是l。在特别的实例中，W是-0(CR2)k-。在某些实施方案中，W是任选取代的苯基、C5—7环烷基、噻吩基、呋喃基、哌啶基、亚甲基环己基、飞^^、》a》。在特别的实例中，R2是苯基或Cs-7环烷基。在其它实施方案中，W是任选取代的苯基、吡咬基、噻唑基、哌#或nr71^其中R和r8都是H,或者r"和rs与n—起形成任选取代的哌淀基。在某些实例中，R、R4、R5、r7和R8各自是H。在其它实施方案中，W是任选取代的苯基、C^环烷基、吡咬基、噻唑基、哌啶基、环己醇、咪唑基、噻吩基、呋喃基、飞—<—CH=^NH■/。在特别的实例中，W是任选取代的苯基、Cw环烷基、吡咬基、噻唑基或哌咬基。在其它实施方案中，X是环己基、苯基或哌"定基，其中各自可以任选被d—6烷基、Cw烷氧基、卣素或它们的組合取代。在某些实例中，X是环己基或苯基。在以上式(l)中，-J-(R,p—起可以是Z是O或S;Z1、Z2、Z3或Z4独立地是N、CH或当与R"连接时是C;Z5、Z6或Z"虫立地是N、O、S、CH或当与R"连接时是C;R"是C^烷基或-(CR2)rR";R"是苯基或C5,环烷基；并且p是0-l。在某些实例中，J是苯并噻哇基、苯并鳴唑基、噻唑基或喁二唑基。在一个实施方案中，本发明提供式(2A)或(2B)化合物R2w(Rl2)q—丫-(CR4R5),W(R12)—丫—(CR4R5)m"^n其中Z是O或S;R1是NH2、-NHC(=NH)NH2或-C^NH)-NH2;W是-0(CH2)k-或-S(0)(CH2)k-;R"是任选取代的苯基，或者W-W—起形成d—6烷基或任选取代的苯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>基；R、R4和R5独立地是H;Y是5-7元芳基、杂芳基或包含N、O或S的杂环；R'2是卤素、C!-6烷基或-L-(CH2)rR";L是键、O、S02、NHCO、NHSOjS02NH;R"是任选闺代的Ci—6烷基，或任选取代的Cw环烷基，或5-7元芳基、杂芳基或杂环；i是0;k是l;l是0-l;m和n独立地是1-4;并且q是0-3。在以上式(2A)或(2B)中，Y可以是苯基、吡究基、噻喳基或哌咬基。在某些实例中，R"是-L-(CH2)广R";并且R"是任选卤代的C"烷基、C3_7环烷基、吗啉基、苯基或哌咬基。另一方面，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包含具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物和可药用赋形剂。本发明还提供了调节通道活化蛋白酶的方法，该方法包括给需要的系统或个体施用治疗有效量的具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物或其可药用盐或药物组合物，从而调节所述通道活化蛋白酶。另一方面，本发明提供了改善由通道活化蛋白酶介导的病症的方法，该方法包括给需要该治疗的系统或个体施用有效量的具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物或其可药用盐或药物组合物，并且任选与第二种治疗剂组合，从而治疗所述病症。可以与本发明化合物一起应用的第二种治疗剂的实例包括但不限于抗炎药、支气管扩张药、抗组胺药、止咳药、抗生素或DNA酶。可以应用本发明化合物调节的通道活化蛋白酶的实例包括但不限于前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、组织蛋白酶A或嗜中性细胞弹性蛋白酶。在特别的实例中，本发明提供了调节前列腺蛋白酶的方法，或治疗前列腺蛋白酶介导的病症的方法。在以上应用本发明化合物的方法中，具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物可以施用于包含细胞或组织的系统。例如，具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物可以与支气管上皮细胞接触，其可以是人细胞。在其它实施方案中，具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物可以施用于人或动物个体。在一个实施方案中，本发明提供了改善与液体经离子转运上皮的移动或呼吸组织中粘液和痰的聚集或它们的组合有关的病症的方法。例如，病症可以是囊性纤维化、原发性睫运动障碍、肺癌、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘或呼吸道感染。另外，本发明提供了式(l)、(2A)或(2B)化合物或其可药用盐或药物组合物以及任选与第二种治疗剂组合在调节通道活化蛋白酶(例如在抑制前列腺蛋白酶)中的用途。本发明还提供了具有式(l)、(2A)或(2B)的化合物或其可药用盐或药物组合物以及任选与笫二种治疗剂组合在制备用于治疗通道活化蛋白酶介导的病症(例如前列腺蛋白酶介导的病症)的药物中的用途。定义"烷基"指的是基团或作为其它基团的结构元素，所述的其它基团例如卣素—取代的-烷基和烷氧基，并且可以是直链的或支链的。本文所用的任选取代的烷基、链烯基或链烯基可以是任选卣代的(例如CF3)，或者可以具有一个或多个净支杂原子(例如NR、O或S)取代或代替的碳(例如-OCH2CH20-、烷基硫醇、硫代烷氧基、烷基胺等)。"芳基，，指的是包含碳原子的单环或稠合的二环芳环。例如芳基可以是苯基或萘基。"亚芳基，，指的是衍生自芳基的二价基团。本文所用的"杂芳基"如以上芳基定义的，其中一个或多个环成员是杂原子。杂芳基的实例包括但不限于吡梵基、吲咪基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、苯并[1,3]间二氧杂环戊烯、咪唑基、苯并-咪唑基、嘧咬基、呋喃基、喷、唑基、异巧恶唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、瘗吩基等。本文所用的"碳环"指的是包含碳原子的饱和的或部分不饱和的单环、稠合的二环或桥连的多环，其可以任选被取代，例如被=0取代。碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环丙烯、环己酮等。本文所用的"杂环"如以上碳环定义的，其中一个或多个环碳是杂原子。例如，杂环可以包含N、O、S、-N=、-S-、-S(O)、-S(0)2-或-NR画,其中R可以是氯、Cw烷基或保护基。杂环的实例包括但不限于吗啉代、吡咯烷基、吡咯烷基-2-酮、哌溱基、哌梵基、哌咬基酮、1，4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基等。本文所用的术语"共同施用"或"组合施用"等指的是包括给单一患者施用选择的治疗剂，以及旨在包括治疗方案，其中药物不必须通过相同施用途径或在相同时间施用。本文所用的术语"药物组合"指的是通过将活性成分混合或组合而获得的产物，并且包括活性成分的固定组合和非固定组合。术语"固定组合"指的是将活性成分例如式(l)、(2A)或(2B)化合物与共同药物以单一实体或剂型的形式同时施用于患者。术语"非固定组合"指的是将活性成分例如式(l)、(2A)或(2B)化合物与共同药物以分开的实体或者同时、共同或者依次施用于患者，没有特别的时间限制，其中此类施用在患者体内提供了治疗有效水平的活性成分。后者也应用于鸡尾酒疗法，例如施用三种或多种活性成分。术语"治疗有效量，，指的是在研究者、兽医、医生或其它临床医生探索的细胞、组织、器官、系统、动物或人类中引起生物学或医学响应的目标化合物的量。术语目标化合物的"施用"应当被理解为指的是给需要治疗的个体提供本发明化合物及其前药。本文所用的术语"治疗"指的是减轻或緩和疾病和/或其伴随症状的方法。术语"前列腺蛋白酶，，也可以称为人通道活化蛋白酶(hCAP);通道活化蛋白酶-l;和PRSS8、MERPOPSIDS01.159。进行本发明的方式本发明提供了化合物、药物组合物以及应用该化合物调节通道活化蛋白酶(CAP)的方法。一方面，本发明提供了式(l)化合物及其可药用盐、水合物、溶剂化物和立体异构体<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>(1)其中J是5-12元单环或稠合的碳环、芳基、杂芳基或包含N、0和/或S的杂环；R1是-(CR2)rNR2、(CR;0「NRC—NR)-NR2、(CR2)「C^NR)-NR2或5-7元含氮非芳族杂环；W-W是在环A任何位置上的取代基；W是或-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k_、-S02(CR2)k-或-OC(0)(CR2)k-;R2是d-6烷基、C2-6链烯基、C2—6炔基、R6、-CR9=CR9-R6或—oi=c:^),其中环E是任选取代的5-7元单环或稠合的碳环或杂环；或者W-r2—起形成d-6烷基、5-7元芳基或-OC(0)NR7r8;r3是NR7r8或R6;R4和R5独立地是H、Cw烷基、OH或Cw烷氧基；R7和R8独立地是H、d-6烷基、C2—6链烯基、C2-6炔基或-(CR2)「R6;或者R和Rs与N—起可以形成任选取代的5-7元单环或稠合的杂环；R9是H或d—6烷基；R"是卤素、d—6烷基、C"烷氧基、OR"或-(CR2),-R";R6、RH和X独立地是任选取代的5-7元碳环、杂环、芳基或杂芳基；或者R"是H或d—6烷基。每个R是H或C^烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基，其中碳可以任选被NR、O或S取代或代替；i是o-i;k和l独立地是0-6;m和n独立地是l-6;并且p是0-3。在一个实施方案中，本发明提供了式(2A)或(2B)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage15</formula>其中Z是O或S;R1是NH2、-NHC(=NH)-NH2或画C(^NH)-NH2;W是-0(CH2V或-S(0)(CH2)k-;R2是任选取代的苯基，或者W-R2—起形成Cw烷基或任选取代的苯基；R、R4和R5独立地是H;Y是5-7元芳基、杂芳基或包含N、O或S的杂环；R"是卤素、C"烷基或-L-(CH2)「R13，，L是键、O、S02、NHCO、NHSOJS02NH;R"是任选卣代的d-6烷基，或任选取代的C3-7环烷基，或5-7元芳基、杂芳基或杂环；i是0;k是l;l是0-l;m和n独立地是l-4;并且q是0-3。在以上每个式中，X、W和R"可以选择地是任选取代的Cw环烷基。在以上每个式中，R1可以是NR，R，，、NH-C(NR，R")=NH、NH-C(NHR，)=NR，，、NH-C(R，)=NR，，、S-C(NR,R，，)-NH、S-C(NHR，)-麼，、C(NR，R""NH、C(NHR，)-NR"或CR=NR，，；其中R，R，，是相同的或不同的并且是H、d—6烷基、Cw芳基烷基、芳基或其中R，R"形成包含(CH2)p的环，其中p是从2至5的整数。在以上每个式中，每个任选取代的基团可以被以下基团取代囟素、-O、氨基、胍基、脒基、C,—6烷氧基；d—6烷基、C2—6链烯基或C2-6炔基，其中每个可以任选被卣代或可以任选具有可以被N、O或S代替或取代的碳；C02R"、0-(CR2)m曙C(0)-R11;(CR^m-R11、(CR2)m-C(0)-R11或-(CR2)m-S02-R";或它们的组合，其中每个R"是H、d-6烷基或任选取代的碳环、杂环、芳基或杂芳基。本发明的化合物和组合物可以用于调节通道活化蛋白酶。可以应用本蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、组织蛋白酶A或嗜中性细胞弹性蛋白酶。本发明的新化合物还可以抑制刺激离子通道(例如上皮钠通道)活性的蛋白酶的活性，并且可以用于治疗CAP相关疾病。药理学和用途本发明化合物调节通道活化蛋白酶的活性，所述的通道活化蛋白酶例如胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶，例如前列腺蛋白酶等，并且因此用于治疗其中前列腺蛋白酶引起疾病的病理学和/或症状学的疾病或障碍。通过抑制通道活化蛋白酶、例如通过胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶、例如前列腺蛋白酶介导的疾病包括与穿过上皮细胞膜的液体体积调节有关的疾病。例如，气道表面液体的体积是粘膜纤毛清除和保持肺健康的关键调节器。通道活化蛋白酶的抑制将促进气道上皮粘膜侧的液体聚集，从而促进粘液清除并且防止呼吸组织(包括肺气道)中粘液和痰的聚集。此类疾病包括呼吸疾病例如嚢性纤维化、原发性睫运动障碍、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病(COPD)、哮喘、呼吸道感染(急性和慢性；病毒性和细菌性)和肺癌。通过抑制通道活化蛋白酶介导的疾病还包括除呼吸疾病外的疾病，该疾病与经过上皮的异常液体调节有关，可能涉及在它们表面的保护表面液体的异常生理学，例如口干燥症(口干燥)或干燥性角膜结膜炎(keratoconjunctivitissire)(干目艮)。另外，肾中ENaC的CAP调节可以用于促进利尿并且因而诱导低血压作用。慢性阻塞性肺疾病包括慢性支气管炎或与"M目关的呼吸困难、肺气肿以及其它药物治疗(特别是其它吸入药物治疗)后的气道高反应性恶化。本发明还适用于治疗任何类型或起源的支气管炎包括例如急性、花生仁吸入性、卡他性、格鲁布性、慢性或结核性支气管炎。本发明化合物可以用于治疗哮喘，包括但不限于内源性(非过敏性)哮喘和外源性(过敏性)哮喘、轻度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支气管哞喘、运动诱导的哮喘、职业性孝喘和细菌感染后诱导的哮喘。津喘的治疗还应当理解为包括对例如小于4或5岁的个体的治疗，这些患者出现喘息症状并且被确诊或可能被诊断为"喘鸣婴儿"，这是医学界重点关注的一类患者群并且现在通常被确诊为初始或早期哮喘或"喘鸣嬰儿综合征"。用于治疗由抑制通道活化蛋白酶介导的疾病的通道活化蛋白酶抑制剂(例如前列腺蛋白酶抑制剂)的适合性可以根据下文描述的试验和本领域已知的方法通过确定通道活化蛋白酶抑制剂的抑制作用来试验。与前述一致，本发明进一步提供了在需要该治疗的个体中预防或治疗上述任何疾病或障碍的方法，该方法包括给所述个体施用治疗有效量的式(1)、(2A)或(2B)化合物或其可药用盐。对于以上任何用途，所需剂量将取决于施用方式、待治疗的特别病症和预期作用而不同。施用和药物组合物通常，本发明化合物以治疗有效量通过本领域已知的任何常规的和可接受的方式单独施用或与一种或多种治疗剂组合施用。本发明的通道活化蛋白酶抑制剂还用作共同治疗剂，用于与其它药物组合，所述的其它药物例如抗炎药、支气管扩张药、抗组胺药或止咳药，特别用于治疗嚢性纤维化或者阻塞性或炎性气道疾病(例如上文提及的那些)，例如作为该药物治疗活性的增效剂或者作为减少该药物所需剂量或潜在副作用的方法。通道活化蛋白酶抑制剂可以在固定的药物组合物中与其它药物混合或者它可以在其它药物之前、同时或之后单独施用。因此，本发明可以包括通道活化蛋白酶抑制剂与抗炎药、支气管扩张药、抗组胺药、止咳药、抗生素和DNA酶药物的组合，所述的通道活化蛋白酶抑制剂和所述的药物在相同或不同的药物组合物中。适合的抗炎药包括类固醇，特别是糖皮质激素例如布地奈德、丙酸倍氯米松、丙酸氟替卡松、环索奈德或莫米松糠酸酯，或在国际专利申请WO02/88167、WO02/12266、WO02/100879、WO02/00679(例如，实施例3、11、14、17、19、26、34、37、39、51、60、67、72、73、90、99和IOI)、WO03/35668、WO03/48181、WO03/62259、WO03/64445、WO03/72592、WO04/39827和WO04/66920中描述的类固醇；非类固醇类糖皮质激素受体激动剂，例如在DE10261874、WO00/00531、WO02/10143、WO03/82280、WO03/82787、WO03/86294、WO03/104195、WO03/101932、WO04/05229、WO04/18429、WO04/19935和WO04/26248中描述的那些；LTD4拮抗剂例如孟鲁司特和扎鲁司特；PDE4抑制剂例如西洛司特(ARIFLOGlaxoSmithKline)、ROFLUMILAST⑧(BykGulden)、V國11294A(Napp)、BAY19-8004(Bayer)、SCH-351591(Schering-Plough)、AROFYLL腿⑧(Almira11Prodesfarma)、PD189659/PD168787(Parke画Davis)、AWD曙12画281(AstaMedica)、CDC-801(Celgene)、SelCID(TM)CC-10004(Celgene)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe)、KW-4490(KyowaHakkoKogyo)，以及在WO92/19594、WO93/19749、WO93/19750、WO93/19751、WO98/18796、WO99/16766、WO01/13953、WO03/104204、WO03/104205、WO03/39544、WO04/000814、WO04/000839、WO04/005258、WO04/018450、WO04/018451、WO04/018457、WO04/018465、WO04/018431、WO04/018449、WO04/018450、WO04/018451、WO04/018457、WO04/018465、WO04/019944、WO04/019945、WO04/045607和WO04/037805中/〉开的那些；以及腺甘众28受体拮抗剂例如在WO02/42298中描述的那些，其中每个以其整体并入本文。适合的支气管扩张药包括P-2肾上腺素受体激动剂，例如沙丁胺醇、奥西那林、特布他林、沙美特罗、非诺特罗、丙卡特罗、福莫特罗或卡莫特罗及其可药用盐，以及在WO00/75114中描述的式(l)化合物(游离或盐或溶剂化物形式)，将其整体并入本文作为参考，例如下式化合物及其可药用盐；WO04/16601的式(l)化合物；以及EP1440966、JP05025045、WO93/18007、WO99/64035、US2002/0055651、WO01/42193、WO01/83462、WO02/66422、WO02/70490、WO02/76933、WO03/24439、WO03/42160、WO03/42164、WO03/72539、WO03/91204、WO03/99764、WO04/16578、WO04/22547、WO04/32921、WO04/33412、WO04/37768、WO04/37773、WO04/37807、WO04/39762、WO04/39766、WO04/45618、WO04/46083和WO04/80964的化合物，每个都是游离或盐或溶剂化物形式。这些出版物中的每个以其整体并入本文。适合的支气管扩张药还包括抗胆碱能药或抗毒蕈碱药，特别是异丙托溴铵、氧托溴铵、瘗托溴铵和CHF4226(Chiesi)、格隆溴铵，以及在EP424021、US3714357、US5171744、WO01/04118、WO02/00652、WO02/51841、WO02/53564、WO0層840、WO03/33495、WO03/53966、WO03/87094、WO04/018422和WO04/05285中描述的那些，其中每个以其整体并入本文。适合的双重抗炎和支气管扩张药包括双重|3-2肾上腺素受体激动剂/毒蕈碱拮抗剂，例如在US2004/0167167、WO04/74246和WO04/74812中公开的那些，其中每个以其整体并入本文。适合的抗组胺药包括盐酸西替利溱、对乙酰氨基酚、富马酸氯马斯汀、异丙溱、氯雷他定、地氯雷他定、苯海拉明和盐酸非索非那定、activastine、阿司咪唑、氮箪斯汀、依巴斯汀、依匹斯汀、咪唑斯汀和特芬那定(tefenadine)，以及在JP2004107299、WO03/099807和WO04/026841中公开的那些，其中每个以其整体并入本文。适合的抗生素包括大环内酯类抗生物，例如妥布霉素(TOBF，。适合的DNA酶药物包括阿法链道酶(PULMOZYMET^，其是重组人脱氧核糖核酸酶I(rhDNase)的高纯度溶液，选择性裂解DNA。阿法链道酶用于治疗嚢性纤维化。通道活化蛋白酶抑制剂和抗炎药的其它有用的组合是与趋化因子受体拮抗剂的組合，所述的趋化因子受体例如CCR-1、CCR-2、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR腳6、CCR-7、CCR國8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5，特别的CCR-5拮抗剂例如先灵葆雅(Schering-Plough)拮抗剂SC-351125、SCH-55700和SCH-D，Takeda拮抗剂例如N-[[4-[[6,7-二氢-2-(4-甲基-苯基)-5H-苯并-环庚烯-8-基]羰基l氨基]苯基I-甲基1四氢-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-氯化铵(TAK-770)和在US6166037、WO00/66558、WO00/66559、WO04/018425和WO04/026873中描述的CCR-5拮抗剂，其中每个以其整体并入本文。在根据本发明治疗由前列腺蛋白酶的抑制介导的疾病中，游离形式或可药用盐形式的本发明的通道、活4匕蛋白酶抑制齐1可。20施用，例如口服，例如以片剂、胶嚢剂或液体形式施用；非肠道，例如以可注射溶液剂或混悬剂形式施用；鼻内，例如应用适合的鼻内传递装置以气雾剂或其它可雾化制剂形式施用，例如鼻腔喷雾剂例如本领域已知的那些；或通过吸入施用，例如应用喷雾器。通道活化蛋白酶抑制剂可以在药物組合物中与可药用稀释剂或载体一起施用。该组合物可以是例如干粉、片剂、胶嚢剂和液体，但也可以是注射溶液剂、输液或吸入混悬剂，其可以应用本领域已知的其它配制成分和技术制备。游离形式或可药用盐形式的通道活化蛋白酶抑制剂的剂量可以取决于多种因素例如活性成分的活性和作用持续时间、待治疗病症的严重程度、施用方式、个体的种类、性别、种族起源、年龄和体重和/或其个体情况而不同。在正常情况中，施用例如口服施用于温血动物、特别是重约75kg的人的日剂量估计约0.7mg至约1400mg;或在某些实例中，约5mg至约200mg。该剂量可以以单个剂量施用或分为几部分剂量施用，例如5至200mg。当组合物包含气雾剂时，其可以包含氢-氟-烷(HFA)抛射剂例如HFA134a或HFA227或它们的混合物；一种或多种本领域已知的共溶剂例如乙醇(至多20。/。重量)；一种或多种表面活性剂例如油酸或失水山梨醇三油酸酯；和/或一种或多种膨胀剂例如乳糖。当组合物包含干粉制剂时，其可以包含例如粒径至多10微米的通道活化蛋白酶抑制剂，任选包含所需粒度分布的稀释剂或栽体(例如乳糖)，以及有助于保护产物免受湿气破坏的化合物(例如硬脂酸镁)。当組合物包含雾化制剂时，其可以包含例如溶于或悬浮于含水载体中的通道活化蛋白酶抑制剂、共溶剂(例如乙醇或丙二醇)以及稳、定剂(其可以是表面活性剂)。本发明包括(A)可吸入形式的本发明化合物，例如气雾剂或其它可雾化組合物或可吸入颗粒，例如孩￡粒化形式，(B)可吸入药物，其包含可吸入形式的本发明化合物；(C)药物产品，其包含可吸入形式的本发明化合物以及吸入装置；以及(D)包含可吸入形式的本发明化合物的吸入装置。制备本发明化合物的方法本发明还包括制备本发明化合物的方法。在描述的反应中，在终产物中希望的反应的官能团(例如羟基、氨基、亚氨基、硫代或羧基)可以应用本领域已知的保护基保护，以避免它们参与不希望的反应。常规的保护基可以根据标准程序例如参见T.W.Greene和P.G.M.Wuts的"ProtectiveGroupsinOrganicChemistry(有机化学中的保护基)"，JohnWiley和Sons,1991而应用。本发明化合物可以按照以下反应流程图I制备流程图I其中W是(CR2)n-Xi-R、R2l(CR2)kR2;R1、R2、R3、X、Z、i、k和n如在式(l)中定义的；R是M甲酸烷基酯保护基(例如曱基、乙基、叔丁基或苄基等)。中间体化合物II可以通过将中间体化合物Iaa与R"-Y(其中Y是离去基团)型烷基试剂在适合的碱和适合的有机溶剂存在下反应而合成。烷基试剂R2'-Y中的离去基团的实例包括但不限于卣化物例如氯化物和溴化物或甲M酸酯、甲磺酸酯或苯磺酸酯离去基团等。这些反应可以在约(TC至约60X:的温度范围内进行，并且可以进行约24小时以完成。中间体化合物IV可以通过将中间体化合物II与试剂III和适合的肽偶联试剂及适合的碱在适合的溶剂存在下反应而合成。适用于该反应的碱包括但不限于三乙胺、DIEA、吡啶、2，4，6-可力丁以及其它本领域技术人员已知的适合的碱。该反应可以在约0。C至约40。C的温度范围内进行，并且可以进^f于约24小时以完成。在以上反应流程I中，中间体化合物V可以通过用适合的酸，并且任选在适合的有机溶剂存在下，从中间体化合物IV中将氨基曱酸酯保护基除去而合成。适合的酸包括但不限于TFA、p-TsOH、TfOH、HC1、HBr、HF、HBF4以及其它本领域技术人员已知的适合的酸。该反应可以在约-20。C至约40。C的温度范围内进行，并且可以进行约24小时以完成。可选择的是，中间体化合物V可以通过在适合的催化剂和适合的溶剂或水存在下用氢气从中间体化合物IV(例如，其中W是千基或任何千基衍生物)中除去氨基甲酸酯保护基而合成。适合的催化剂的实例包括但不限于Pd/C、Pt、Pt02、Pt/C、Rh/C以及其它本领域技术人员已知的适合的催化剂。该反应可以在约0'C至约80"C的温度范围内进行，氢气压力约15psi至约80psi，并且可以进4亍约48小时以完成。可选择的是，中间体化合物V可以通过在适合的催化剂(例如Pd2(dba)3、PdCl2、Pd(PPh3)4等)和适合的溶剂(例如水、甲醇、乙醇、异丙醇、叔丁醇、正丙醇、正丁醇、环己醇以及它们的混合物等)存在下，通过将式IV化合物与适合的烯丙基清除剂(例如Et2NH、吗啉、哌啶、吡咯烷、NaBEU等)反应，从中间体化合物IV(例如，其中if是烯丙基或任何烯丙基衍生物)中除去氨基甲酸酯保护基而合成。中间体化合物VII可以在适合的肽偶联试剂和适合的碱(Et3N、DIEA、吡啶、2，4，6-可力丁等)以及适合的溶剂存在下通过将中间体化合物V与试剂VI反应而合成。该反应可以在约(TC至约40。C的温度范围内进行，并且可以进行约24小时以完成。物与适合的氧化剂反应而合成。适合的氧化剂包括但不限于Dess-Martin过椟烷(periodinane)、2-碘苯甲酸(含过硫酸氢钾)、TEMPO(含三氯异氰脲酸)、TEMPO(含NaOCI)、DMSO(含草酰氯)、氯铬酸吡啶錄、Mn02、002以及其它本领域技术人员已知的适合的氧化剂。该反应可以在约0。C至约40'C的温度范围内进行，并且可以进行约24小时以完成。适用于反应流程图I中描述的反应中的肽偶联试剂包括但不限于DCC、DIC、HATU、BOP、PyBOP、EDC和其它本领域技术人员已知的偶联试剂。适用于反应流程图I中描述的反应中的碱包括但不限于氢氧化物例如NaOH、KOH或LiOH;碳酸盐例如K2C03或CsC03;氢化物例如NaH或KH等。其它适合的碱是胺、DIEA、吡啶、2，4，6-可力丁和其它本领域技术人员已知的适合的碱。适用于反应流程图I中描述的反应中的有机溶剂包括但不限于DMSO、THF、DMF、DMAc、乙腈、丙酮、2-丙酮、丁酮、HMPA、NMP、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、乙醚、甲醇、乙醇、叔丁醇、异丙醇、丙醇、正丁醇、环己醇、乙腈、二5恶烷、MTBE、苯、甲苯以及它们的混合物和其它本领域技术人员已知的适合的溶剂。制备本发明化合物的另外的方法可以通过将游离碱形式的化合物与可药用的无冲几或有才几^A应而将本发明化合物制备成可药用酸加成盐。可选择的是，本发明化合物的可药用碱加成盐可以通过将游离酸形式的化合物与可药用无机或有M反应而制备。可选择的是，本发明化合物的盐形式可以应用原料或中间体的盐制备。游离酸或游离碱形式的本发明化合物可以分别从相应的碱加成盐或酸加成盐形式制备。例如通过用适合的碱(例如氢氧化铵溶液、氢氧化钠等)处理，可以将酸加成盐形式的本发明化合物转化为相应的游离碱。通过用适合的酸(例如盐酸等)处理，可以将碱加成盐形式的本发明化合物转化为相应的游离酸。在0。C至80。C下，在适合的惰性有机溶剂(例如乙腈、乙醇、含水二p恶烷等)中，通过用还原剂(例如辟u、二氧化硫、三苯膦、硼氢化锂、硼氢化钠、三氯化踌、三溴化磚等)处理，可以从本发明化合物的N-氧化物制备非氧化形式的本发明化合物。本发明化合物的前药衍生物可以通过本领域普通技术人员已知的方法制备(例嗦口，详见Saulnier等人(1994)，BioorganicandMedicinalChemistryLetters,第4巻，第1985页)。例如，适合的前药可以通过将非衍生的本发明化合物与适合的氨甲酰化试剂(例如1,1-酰基氧基烷基碳酰氯(carbanochloridate)、碳酸对-硝基苯基酯等)反应而制备。制备。可应用于保护基的引入和脱去的技术的详细描述可参见T.W.Greene,"ProtectingGroupsinOrganicChemistry(有机化学中的保护基)"，第3版，JohnWiley和Sons,Inc,，1999。在本发明的制备过程中，本发明化合物可以方便地制备或形成溶剂化物(例如水合物)。本发明化合物的水合物可以通过应用有机溶剂(例如二氧芑、四氢呋喃或甲醇)从水/有机溶剂混合物中重结晶而方便地制备。本发明化合物可以通过以下方法制备成其单独的立体异构体将化合对，将非对映异构体分离并且回收旋光纯的对映异构体。对映异构体的拆分可以应用本发明化合物的共价非对映异构体衍生物进行，或者通过应用可离解的络合物(例如结晶的非对映异构体盐)进行。非对映异构体具有独特的物理学特性(例如熔点、沸点、溶解性和反应性等)并且可以通过利用这些不同容易地分离。可以通过色谱，或者通过基于溶解性不同的分离/拆分技术将非对映异构体分离。然后，通过不会引起外消旋化的任何实用的方法，应用拆分试剂，回收旋光纯的对映异构体。可应用于将化合物的见JeanJacques,AndreCollet,SamuelH.Wilen，"Enantiomers，RacematesandResolutions(对映异构体、夕卜消》走体和拆分)"，JohnWiley和Sons,Inc.,1981。筒而言之，式(l)化合物可以通过以下方法制备，该方法涉及(a)反应流程图I的方法；(b)任选将本发明化合物转化为可药用盐；(c)任选将本发明化合物的盐形式转化为非盐形式；(d)任选将本发明化合物的非氧化形式转化为可药用N-氧化物；(e)任选将本发明化合物的N-氧化物形式转化为其非氧化形式；(f)任选将本发明化合物的单一异构体从异构体混合物中拆分出来；(g)任选将非衍生化的本发明化合物转化为可药用前药衍生物；以及(h)任选将本发明化合物的前药衍生物转化为其非衍生化形式。在原料的制备没有特殊地描述的范围内，化合物为已知的或可以通过与本领域已知的方法类似的方法或下文的实施例中公开的方法制备。本领域的技术人员之一将意识到以上转化仅是制备本发明化合物的方法的代表，并且也可以类似地应用其它众所周知的方法。通过以下说明本发明化合物的制备的中间体(参考化合物)和实施例，进一步列举了本发明，但不对本发明构成限制。在以下合成方法学中，应用以下本领域已知的常用缩略语DCM(二氯甲烷)；THF(四氢呋喃)和DIEA(二异丙基乙基胺)。参考化合物1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>在以上反应流程图中，试剂和条件是(a)异-BuOCOCl，Et3N，THF;NaBH4，H20。(b)Dess-Martin过捵烷，CH2C12;(c)异-PrMgCl，苯并巧I唑，THF,-20X:，30分钟，然后l-C，-20。C至室温。(d)H2(40psi)，EtOH，Pd/C10%,室温，18小时。l-B:将粗原料Z-Lys(Boc)OH1-A(320g，842mmol)溶于THF(2.5L)中，并且将溶液冷却至-10。C，然后加入三乙胺(115.2mL，l.O当量)并且滴加氯甲酸异丁酯(118.7mL，1.1当量)。将产生的悬浮液在0。C下搅拌2小时。将反应混合物过滤并且冷却至-10。C。将NaBHU(64.6g，2.1当量)在0。C下溶于水(500mL)中，并且将溶液分批加入至THF溶液中(大量C02放出)。将反应混合物温热至室温并且搅拌l小时。将反应混合物用1NHC1溶液酸化，并且将水相用EtOAc萃取数次。将合并的有机层用水、饱和的NaHC03水溶液和盐水洗涤；在MgS04上干燥，并且将溶剂真空除去。将产物通过快速柱色镨(己烷/乙酸乙酯)纯化，得到预期产物，为白色泡沫状物。l-C:将醇l-B(200g，545.8mmol)溶于DCM(2.0L)中并且冷却至O。C。分批加入Dess-Martin试剂(231g，1.0当量)的DCM(2.0L)'溶液。将悬浮液温热至室温并且搅拌直至转化完成(l-4小时)。加入饱和NaHC03水溶液和1M贾328203溶液的1:1混合物，并且将产生的^Uf目体系剧烈搅拌20分钟。将有机层分离并且将水层用DCM萃取一次。将合并的有机层真空蒸馏，并且将产生的油状物溶于EtOAc中并且用NaHC03/Na2S203混合物、水和盐水洗涤6次；在MgS04上干燥；并且将溶剂真空除去，得到粗醛，为淡黄色油状物。将物质直接用于下一步而无需进一步纯化。l-D:在-20。C下，在异丙基-氯化镁(1.67当量，相对于酪，3卯mL的2M画THF溶液，来自Sigma-Aldrich)的THF(1.5L)溶液中加入在THF(l.OL)中的苯并嗜、唑(92.8g，1.67当量)。将反应混合物在-20。C下搅拌30分钟(颜色改变至深红色)并且緩t曼加入醛l-C(170g，466mmol)的THF(1.5L)溶液，同时温度控制在-20X:至-15。C。将反应混合物温至室温并且搅拌直至完成。将反应混合物用饱和的NH4C1水溶液猝灭并且将溶剂真空除去。将7K相用EtOAc萃取三次，并且将合并的有机层用1NHC1溶液、水和盐水充分洗涤；在MgS04上干燥，并且将溶剂真空除去，得到粗苯并恶唑，为深红色油状物。在珪胶上用EtOAc/己烷(l:5至1:1)纯化，得到苯并巧悉唑，为黄色固体。l-E:将中间体l-D(25.0g，51.7mmol)溶液溶于乙醇(150mL)中。加入Pd/C(10%，湿润，Degussa型)，并且将烧瓶置于Parr振荡器上过夜并且通入40psi的氢气。将催化剂通过硅藻土过滤并且将溶剂真空除去。将粗物质通过快速色i普纯化，首先应用梯度为己烷/EtOAc以除去较低极性有色杂质，然后梯度为DCM/MeOH以洗脱预期化合物。将溶剂真空除去，并且将化合物在醚中研磨数次，得到预期参考化合物1,为白色粉末。'H-匪R(匪SO-d6,400MHz)57.73-7.70(2H，m)，7.40-7.34(2H,m)，6.78-6.73(lH，m)，4.55-4.51(lH，m)，3.05-3.01(lH，ni)，2.92-2.83(2H，m)，1.48-1.18(14H，m)。LCMS:350.5(M+H)+。参考化合物2流程图2在以上流程图2中，试剂和M是a)Cbz-OSu,Et3N,THF，H20，室温，18小时，(b)i.异曙BuOCOCl，Et3N，THF;ii.NaBH4，H20;(c)Dess-Martin过橫烷，CH2C12;(d)异-PrMgCl，苯并^悉峻、THF，-20°C，30分钟，然后2-D，-20匸至室温；(e)铟，NH4C1，EtOH，回流，5小时；(f)N，N-二(叔丁氧基羰基)-lH-吡唑誦l-甲脒，DIEA，MeOH;(g)H2(40psi)，10%Pd/C，EtOH。2-B:将L-硝基苯基丙氨酸盐酸盐(4.45g，18,0mmol)和N-(千基氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺(Cbz-OSu)(4.49g，18.0mmol)加入至包含THF(60mL)和水(20mL)的圆底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌并且加入Et3N(10.1mL，72.0mmol),并且将反应在室温下搅拌过夜。将澄清的溶液用EtOAc(200mL)稀释并且用1NHCl(3xl00mL)和盐水(lx100mL)洗涤，并且用MgS04干燥。将溶剂真空蒸发，得到2-B，为白色固体，将其应用而无需进一步纯化。2-C至2-E:这些中间体分别按照制备参考化合物1的中间体l-B至l-D中描述的类似方法制备。2-F:将硝基苯基类似物2-E(1.85g,4.15mmol)溶于EtOH(50mL)中并且加热至回流。加入饱和的NH4C1水溶液(5mL)，然后加入粉末状铟(3.2g,27.9mmo1)。将反应混合物在回流温度下搅拌5小时，冷却至室温，并且将溶剂真空除去。将粗物质悬浮于EtOAc(100mL)中并且用饱和的NaHCO3(3xl00)洗涤，用MgS04干燥并且通过硅藻土过滤。将溶剂真空除去，得到苯胺2-F，为类白色蜡状固体，将其应用而无需进一步纯化。2-G:将苯胺2-F(1.52g，3.67mmol)溶于MeOH(10mL)中，并且加入DIEA(0.7mL，4.4mmol)和N，N-二(叔丁氧基羰基)-lH-吡唑-l-甲脒(1.37g，4.4mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌。4小时后，加入另外的0.5当量的N,N-二(叔丁氧基羰基)-lH-吡唑-l-甲脒(0.685g，2.2mmol)，然后将反应在室温下搅拌过夜。加入EtOAc(100mL)并且将有机层用水和盐水洗涤；并且在MgS04上干燥。将溶剂真空除去并且将粗物质通过硅胶色谱用EtOAc/己烷(0至100%梯度)纯化，得到预期产物2-G,为油状物。2-H:该化合物应用参考化合物1的中间体1-E的制备中描述的类似方法从2-G制备。参考化合物3Boc'H.N、O、OHBoc'HOBoc裁rBoc3-D流程图3在以上流程图3中，试剂和条件是(a)HN(OMe)Me.HCl，BOP,Et3N，DMF，(TC至室温；(b)正-BuLi(2.5M在己烷中)，苯并蓬唑，THF,-78°C，然后3-B，THF，-70"C至室温;(c)NaBH4，MeOH;(d)对-TsOH,CH2C12，6小时。3-B:在氩气、0。C下，将BOP(50g，112mmol)—次性加入至搅拌的3-A(49.92g，102.6mmol)、N，0-二甲基盐酸羟胺(30.4g，224mmol)和三乙胺(88mL,616mmol)的干燥的DMF(200mL)溶液中。历经2小时，将反应混合物緩'隄温至室温，通过硅藻土过滤，并且真空浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯中，用H20、1MKHS04水溶液、饱和的NaHC03水溶液和盐水洗涤；干燥并且真空浓缩。将残留物通过柱纯化，得到化合物3-B。3-C:在-78。C、氩气下，将正丁基锂(2.5M在己烷中，272.2mL，681.4mmol)滴加入搅拌的苯并蓬唑(l15.72g，850.7mmol)的干燥的THF(1660mL)溶液中，速率保持在反应温度低于-64。C。加入完成后，将反应混合物在-70。C下搅拌30分钟，并且加入化合物3-B(45g，85.7mmol)的干燥的HN-c3争0>rHNH陽3r+1-N-NHATHF(300mL)溶液，速率保持反应温度低于-70。C。将反应搅拌15分钟，用饱和的NH4C1水溶液猝灭，并且在室温下搅拌16小时。将产生的有机层分离，用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤；干燥并且真空浓缩，并且通过硅胶色谱纯化，得到化合物3-C。3-D:在0。C下，在3-C(33.7g,55.82mmol)的MeOH(407mL)溶液中加入NaBH4(9.98g)。历经1小时，将反应混合物緩慢温至室温，然后加热至45。C达1小时，然后冷却至室温。将反应用丙酮(60mL)醉灭并且真空浓缩。将残留物溶于乙酸乙酯中，用盐水洗涤，经MgS04干燥。将粗物质通过硅胶色镨纯化，得到产物3-D。3-E:在室温下，将p-TsOH加入至搅拌的化合物3-D(28.2g)的CH2C12(300mL)溶液中直至溶液饱和。将反应在室温下搅拌6小时。加入水，并且将有机层用EtOAc萃取，用盐水和10%Na2CO3水溶液的1:1混合物(VAO洗涤，经Na2S04干燥，并且通过硅胶色谱纯化，得到产物3-E。参考化合物4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage31</formula>流程图4为了制备中间体4-B，将正丁基锂(1.6M在己烷中，11.3mL,17.9mmol)滴加至冷却至-78。C的异-Pr2NH(2.53mL,17.9mmol)的THF(25mL)溶液中并且搅拌10分钟。滴加入酮4-A(3.25g，16.3mmol)并且将溶液在-78。C下继续再搅拌25分钟。滴加入溶于THF(25mL)中的N-苯基-二-(三氟曱氨磺酰)(6.26g，17.5mmo1)，并且将反应混合物置于0°C的7JC/水浴中并且搅拌4小时。将溶剂蒸发，并且将粗残留物溶于最少量己烷中，然后通过氧化铝填料过滤，应用己烷:EtOAc/9:l作为洗脱剂。将溶剂真空除去，得到预期的三氟曱磺酸酯4-B。将中间体4-B(715mg,2.16mmol)和4-C(514mg，1.96mmol)在微波反应瓶中溶于二悉烷(10mL)中。加入溶于水(2.5mL)中的K3P04(874mg，4.12mmol)，并且将溶液通过三个液氮冷冻-泵-融化循环脱气。加入催化剂PdCl2(dppf)(143mg，0.196mmol)，并且将小瓶用氮气吹扫并且密封。将反应在EmrysPersonalChemistry微ilt^应器中加热至150。C达25分钟。将二噍烷真空蒸发，并且将残留物溶解并且在EtOAc(50mL)和10。/。柠檬酸水溶液(50mL)之间分配。分离各层，并且将有机相用10%柠檬酸水溶液(2x50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层用Na2S04干燥并且蒸发，并且将粗残留物通过硅胶色谱(己烷/EtOAc梯度)纯化，得到中间体4-D。将中间体4-D(45mg，0.142mmol)在安装有橡胶隔板的25mL烧瓶中溶于EtOH(10mL)中。加入催化量的Pd/C(10%)，并且将氢气从安装有通过隔板插入的针的气球中引入。将反应在室温下搅拌直至原料耗尽(通过LCMS指示)。然后将催化剂过滤，并且将溶剂蒸干，得到参考化合物4。参考化合物5<formula>formulaseeoriginaldocumentpage32</formula>流程图5在以上流程图5中，试剂和条件是a)Cbz-OSu，Et3N，THF，H20，室温，18小时；(b)i.异-BuOCOCl，Et3N，THF;ii.NaBH4，H20;(c)Dess-Martin过碘烷，CH2C12;(d)异-PrMgCl，苯并哺'唑，THF，-20。C,30分钟，然后5-D，画20。C至室温；(e)NaBH4，NiCl2,Boc20，MeOH,0。C，(f)H2(40psi)，10%Pd/C，EtOH。5-B至5-E:该化合物应用制备参考化合物2的中间体2-B中描述的类似方法从L-4-氰基苯基丙氨酸(5-A)制备。中间体5-C至5-E分别按照制备参考化合物1的中间体1-B至1-D中描述的类似方法制备。5-F:将腈5-E(3.68g，8.64mmol)溶于甲醇(60mL)中，并且冷却至0°C。加入Boc20(3.77g，2当量)，然后加入NiCl2(210mg，0.1当量)。将混合物搅拌并且分小部分緩慢加入NaBH4(2.29g,7.0当量)。将混合物温至室温并且撹拌l小时。加入二亚乙基三胺(0.94mL,1当量)，并且将混合物再搅拌30分钟，然后将溶剂真空蒸发。将残留物溶于EtOAe中，并且用饱和的NaHCO3(2xl00mL)洗涤。将溶液用MgS04干燥并且将溶剂真空蒸发。将粗物质通过珪胶快速色谱纯化，梯度为0-100%的EtOAc和己烷，得到标题化合物，为油状物。5-G:该化合物应用制备参考化合物1的中间体l-E中描述的类似方法从5-F制备。参考化合物6流程图66-B:将(R)-Boc-3-哌啶甲酸(2.50g,10.9mmol)和HOBt(1.77g，13.1mmol)溶于DMF(50mL)中，并且加入EDC(2.30g，12.0mmol)。将反应混合物搅拌l小时，并且加入30%氨水溶液(2.8mL)，并且将反应再搅拌2小时。然后将反应用EtOAc(200mL)稀释并且用水(100mL)分配。将有机层用饱和的NaHC03水溶液(3x200mL)洗涤，然后用MgS04干燥。将溶剂真空除去，得到酰胺6-B，为蜡状固体。6-C:将酰胺6-B(2.40,10.5mmol)溶于THF(50mL)中。加入Lawesson氏试剂(2.64g，6.54mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌4小时。将溶剂蒸发，并且将粗物质通过硅胶色谱纯化，应用梯度为0-5%在CH2C12中的MeOH作为洗脱剂。将溶剂蒸发，得到预期的硫代酰胺。6-D:将疏代酰胺6-C(1.27g，5.20mmol)溶于CH2C12(50mL)中。加入乙基-4-氯乙酸乙酯(0.8mL，5.72mmo1)，并且将溶液在室温下搅拌5小时。将溶剂真空除去，然后将粗残留物溶于EtOH(50mL)中。加入活化的粉末状分子篩(1.2g)并且将反应混合物在回流下加热18小时。然后将混合物冷却至室温并且通过珪藻土过滤。将饱和的NaHC03水溶液(50mL)加入至过滤液中，然后用EtOAc(3x50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(IOOmL)洗涤并且干燥(MgS04)。将溶剂真空蒸发并且将粗物质通过硅胶快速色i脊纯化，应用梯度为0-100%的EtOAc和己烷，得到噻唑6-D。参考化合物6:将LiOH'H20(65mg，1.55mmol)溶于水(5mL)中并且滴加至撹拌的溶于二喁烷(20mL)中的乙酯6-D溶液中。将反应搅拌2小时，并且将二5恶烷蒸发。将粗残留物在EtOAc和lMNaHS04之间分配；将合并的有机层干燥(MgS04)并且真空蒸发；并且将粗物质通过反相HPLC(H20/MeCN为流动相)純化。参考化合物7<formula>formulaseeoriginaldocumentpage35</formula>流程图7在以上流程图7中，试剂和条件是a)i.异-BuOCOCl,Et3N,THF;ii.NaBH4，H20;(b)三氯异氰脲酸、TEMPO,0'C至室温，CH2C12,(c)Cbz-a-膦酰基甘氨酸三甲酯，DBU，DCM;(d)H2(60psi)，(S，S)-Me-BPE-Rh(COD)+OTf，MeOH,96小时；(e)LiOH，二嗜、烷，水；(f)i.异-BuOCOCl,Et3N，THF;ii.NaBH4,H20;(g)Dess-Martin过珙烷，CH2C12;(h)异-PrMgCl,苯并S悉唑，THF，-20°C，30分钟，然后7-G，-20。C至室温；(i)H2(40psi)，10%Pd/C，EtOH。7-A:该化合物应用制备流程图1中的参考化合物1的中间体1-B中描述的类似方法从反式-4-(叔丁氧基羰基氨基甲基)环己烷甲酸(7-A)制备。7-B:将醇7-A(4.14g，17.0mmol)溶于CH2C12(35mL)中并且将溶液冷却至0。C。加入三氯异氰脲酸(4.15g,17.8mmoI)，然后加入TEMPO(28mg,0,17mol)。然后将反应温至室温并且在室温下再搅拌15分钟。形成沉淀，并且将反应混合物通过硅藻土过滤并且用CH2C12洗涤。将合并的CH2C12溶液(~100mL)用饱和的NaHC03水溶液(2x50mL)、1MHCl(2x50mL)和盐水(50mL)洗涤，干燥(MgS04)并且将溶剂蒸发，并且将其直接应用于下一步而无需进一步纯化。7-C:将N-节基氧基羰基-a-膦酰基甘氨酸三曱酯(5.63g，17mmol)溶于CH2C12(35mL)中；加入DBU(5.1mL，34mmol)并且将溶液搅拌20分钟。将醛7-B(4.09g，17.0mmol)作为在CH2C12(10mL)中的溶液滴加入。将反应搅拌过夜，然后将溶剂蒸发并且将残留物溶于EtOAc(lOOmL)中并且用1MNaHSO4(2x50mL)和盐水洗涤，然后干燥(MgS04)并且真空蒸发。将粗物质通过快速色谱应用梯度为0-100。/。EtOAc/己烷纯化，得到预期产物，为白色固体。7-D:将烯经7-C(2.04g，4.56mmol)溶于MeOH(100mL)中并且将溶液脱气，然后加入催化剂(-)-l，2-二-((2S，3S)-2，5-二甲基phospholano)乙烷(环辛二烯)-铑(1)-三氟-曱磺酸盐(28mg,1mol%)。将反应混合物置于Parr振荡器上并且在60psiH2下振摇4天。然后将溶剂真空蒸发，并且将粗物质通过快速色谙应用梯度0-100。/。EtOAc/己烷纯化，得到预期产物，为白色固体。7-E:将甲酯7-D(1.81g，4.04mmol)溶于二嗜、烷(50mL)中并且在0"C下搅拌。滴加溶于水(10mL)中的LiOH(203mg，4，84mmo1)，然后将溶液温至室温。原料消失(通过LCMS)后，将溶剂蒸发，并且将粗物质溶于EtOAc(100mL)中，用1NNaHSO4(2x50mL)和盐水(50mL)洗涤，并且干燥(MgSCM。将溶剂真空除去并且将产物直接用于下一步而无需进一步纯化。7-F至7-H:中间体7-F至7-H按照制备参考化合物1的中间体中描迷的类似方法制备。7-1:该化合物应用制备参考化合物1的中间体l-E中描述的类似方法从7-H制备。MSm/z404.2(M+l);，H-NMR(CDCb，400MHz)d7.66-7.64(lH,m),7.49-7,47(lH，m)，7.31-7.26(2H，m)，4.85-4.64(lH，m),3.44-3.16(lH，m)，2.96-2.88(2H，m),1.80-1.55(4H，m)，1.39-1.14(13H,m)，0.89-0.72(4H,m)。参考化合物8参考化合物8应用制备参考化合物6中描述的类似方法从(S)-Boc-3-36哌啶甲酸制备。参考化合物9参考化合物9应用制备参考化合物5中描述的类似方法从3-M苯基丙氨酸开始制备。参考化合物10参考化合物10应用制备参考化合物6中描述的类似方法从Boc-异-3.哌啶甲酸开始制备。参考化合物11<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>11-D将Boc-异-3-吡啶甲酸(3,24g，14.1mmol)、DL-4-t^-3-羟基-丁酸甲酯盐酸盐(2.40g,14.1mmol)和DIEA(7.0mL，42.3mL)溶于CH2C12(50mL)中。加入HATU(5.9g，15,5mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌2小时。将溶剂蒸发，并且将粗残留物溶于EtOAc(100mL)中。将有机相用0.1MHCl(2xl00mL)和盐水(100mL)洗涤，用MgS04干燥，并且真空蒸发。将粗物质通过硅胶快速色镨(EtOAc/己烷梯度)纯化，得到中间体ll-B。ll-C:应用制备实施例l-F中的类似条件将醇ll-B氧化为酮。ll画D:将酮ll-C(l.lOg，3.21mmol)溶于THF(100mL)中。加入Lawesson氏试剂(650mg,1.61mmol)，并且将反应混合物在室温下搅拌48小时。将溶剂真空除去，并且将粗物质通过珪胶快速色谦(EtOAc/己烷0:100梯度)纯化。11:应用制备参考化合物6中描述的类似方法将甲酯ll-D皂化。参考化合物1212-A12召以上参考化合物12的反应中的试剂和条件是a)(环己基羰基氧基)琥珀酰亚胺，吡啶，DMAP，室温，THF;(b)在水中的1NNaOH。将(4-#^-苯基)乙酸乙酯(0.895g，5.0mmol)和N-(环己基羰基氧基)琥珀酰亚胺(1.051g，5.0mmol)加入至含有THF(20mL)、吡啶(0,60mL)和DMAP(10mg)的圆底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌过夜。将澄清溶液用EtOAe(200mL)稀释，用1NHCl(3xl00mL)和盐水(100mL)洗涤，并且用MgS04干燥。将溶剂真空蒸发，得到中间体12-B，为白色固体，将其应用而无需进一步纯化。将乙酯12-B(l,46g，5mmol)溶于lNNaOH(15mL，15mmol)中。原料消失(通过LCMS)后，将反应用1NHC1酸化，得到参考化合物12,为白色沉淀。参考化合物1313-A13七以上参考化合物13的反应中的试剂和条件是a)MeS02Cl，吡啶，室温，THF;(b)在水中的1NNaOH。将(3-氨基-苯基)乙酸乙酯(0.895g，5.0mmol)和(0.281mL，5.0mmol)加入至含有THF(20mL)和吡啶(0.60mL)的圆底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌过夜。将澄清溶液用EtOAc(200mL)稀释，用1NHCl(3xl00mL)和盐水(100mL)洗涤，并且用MgS04干燥。将溶剂真空蒸发，得到中间体13-B，为白色固体。将乙酯13-B按照制备参考化合物12中描述的类似方法皂化，得到参考化合物13。参考化合物1414-A14-B以上参考化合物14的反应中的试剂和条件是a)CH3COCl，吡啶，DMAP，室温，THF;(b)在水中的1NNaOH。将(3-氨基-苯基)乙酸乙酯(0.895g,5.0mmol)和乙酰氯(0.26mL,5.0mmol)加入至含有THF(20mL)、吡淀(0.60mL)和DMAP(10mg)的圓底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌过夜。将澄清溶液用EtOAc(200mL)稀释，用1NHCl(3xl00mL)和盐水(100mL)洗涤，并且用MgS04千燥。将溶剂真空蒸发，得到中间体14-B,为白色固体，将其应用而无需进一步纯化。将乙酯14-B按照上述类似方法皂化，得到参考化合物14。参考化合物1515-A15-B以上参考化合物15的反应中的试剂和条件是a)EtNH2，CH2C12，DMAP;(b)在水中的1NNaOH。将(4-氯橫酰基-苯基)乙酸甲酯(0.895g，5.0mmol)和二乙胺(1mL)加入至含有CH2C12(20mL)和DMAP(10mg)的圆底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌过夜。将澄清溶液用EtOAc(200mL)稀释，用1NHCl(3xl00mL)和盐水(lxi00mL)洗涤，并且用MgS04干燥。将溶剂真空蒸发，得到中间体15-B,应用二氧化硅柱将其从反应混合物中纯化。将乙酯15-B按照上述类似方法急化，得到参考化合物15。参考化合物16<formula>formulaseeoriginaldocumentpage40</formula>以上参考化合物16的反应中的试剂和条件是a)4-Cl-PhB(OH)2，C2H4C12，Cu(OAc)2，吡啶，4A分子筛;(b)在水中的1NNaOH。将(3-羟基-苯基)乙酸曱酯(0.268g，1.6mmol)和4-氯苯基硼酸(755mg，4.84m咖l)、p比咬(0.388mL,4.8mmol)和醋酸铜(11)(477mg,2.4mmol)加入至含有1，2-二氯乙烷(10mL)和4A分子篩(300mg)的圆底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌过夜。将澄清溶液用EtOAc(200mL)稀释，用1NHCl(3xl00mL)和盐水(100mL)洗涤，并且用MgS04干燥。将溶剂真空蒸发，得到中间体16-B，应用二氧化硅柱将其从反应混合物中纯化。将甲酯16-B按照上述类似方法皂化，得到参考化合物16。实施例1l-B:将细粉KOH(35g，0.622mol)溶于DMSO中并且在室温下搅拌20分钟，然后冷却至0'C。将N-Cbz-反式-4-羟基-L-脯氨酸(Cbz-Hyp-OH,l-A)(10g,43.3mmol)溶于DMSO(10mL)中并且加入，并且将反应混合物在0'C下再搅拌10分钟。然后，加入溴甲基环己烷(33g，0.204mol),并且将反应混合物在ox:下再搅拌15分钟，随后将冰浴除去并且将反应混合物温至室温并且搅拌4小时。将反应混合物倾倒入水(300mL)中，并且将反应容器用另外部分的水(300mL)沖洗。将合并的水层用醚(2x300mL)萃取并且弃去。将水层用87。/。H3P04酸化至pH2.3,然后用醚(3x300mL)萃取。将合并的醚萃取液用水(2x400mL)和盐水(2x400mL)洗涤，经MgS04干燥，过滤，并且真空浓缩。将残留物通过色谱在硅胶上纯化，得到化合物1-B，为澄清油状物。l-C:将l-B(250mg,0.695mmol)、参考化合物1-E(243mg,0.695mmol，1当量)、HATU(291mg，0.765mmol，1.1当量)、iPr2EtN(0.15mL，0.834mmol，1.2当量)和CH2Cl2(4mL)加入至40mL的小瓶中。将反应在室温下搅拌l小时。将挥发试剂减压除去，并且将反应混合物溶于EtOAc中。将有机层用NaHS04、水饱和的NaHC03和盐水洗涤。然后将有机层用MgS04干燥，并且将产物通过珪胶色谱从反应混合物中纯化，得到化合物1-C，将其用于1-D的制备。1画D:将l-C(2.5g，3.6mmol)、Pd/C(3.6g，0.36mmol，1当量)、t-BuOH(20mL)和水(5mL)加入至Parr反应容器中。将容器置于Parr装置中并且在50psi的H2气压力下振摇18小时。将反应混合物通过硅藻土填料过滤，得到化合物1-D，将其直接用于1-E的制备。1隱E:将l-D，mg,0.18mmol)、4-苯基丁酸(30mg，0.18mmol,1当量)、HATU(75mg，0.20mmol，1.1当量)、iPr2EtN(0.04mL，0.22mmol,1.2当量)和CH2C12(2mL)加入至40mL的小瓶中。将反应在室温下搅拌1小时。将挥发试剂减压除去并且将反应混合物溶于EtOAc中。将有机层用NaHS04、水、饱和的NaHCO;3和盐水洗涤。然后将有机层用MgS04干燥，并且将产物通过珪胶色谱从反应混合物中纯化，l-E，将其用于l-F的制备。l-F:将醇l-E(127mg,0.18mmol)溶于DCM(2mL)中并且加入Dess-Martin过碘烷(85mg，0.2mmol)。将反应混合物在室温下搅拌过夜。将溶剂真空除去，并且将粗品通过快速色语(4g硅胶柱)纯化，应用梯度为EtOAc:己烷，得到酮1-F，为白色泡沫状物，将其用于1-G的制备。l-G:将酮l-F(128mg，0.18mmol)溶于DCM(lmL)中并且加入50%在DCM中的TFA(5mL)。将反应在室温下搅拌2小时并且将溶剂真空除去。将粗物质通过反相HPLC纯化，并且将溶剂冻干，得到l-G，为白色粉末。实施例2-7实施例2按照实施例1中描述的类似方法，应用3-叔丁氧基羰基#^丙酸制备，得到中间体2-E。实施例3按照实施例1中描述的类似方法，应用参考化合物l3制备，得到中间体3-E。实施例4按照实施例1中描迷的类似方法，应用参考化合物"制备，得到中间体4-E。实施例5按照实施例1中描述的类似方法，应用(4-乙磺酰基氨基-苯基)乙酸(应用参考化合物13中描述的类似方法制备)制备，得到中间体5_E。实施例6按照实施例1中描述的类似方法，应用参考化合物l2制备，得到中间体6-E。实施例7按照实施例1中描述的类似方法，应用4-(甲磺酰基M)苯基乙酸制备，得到中间体7-E。实施例88-GNH8-HNH:Boc8-B:将反式-4-羟基脯氨酸(Hyp-OH)(7.90g，60.1mmol)和N-(烯丙基氧基羰基氧基)琥珀酰亚胺(12.0g,60.1mmol)加入至含有THF(220mL)、三乙胺(21mL,150.3mmol)和水(55mL)的圆底烧瓶中。将混合物在室温下搅拌过夜。将澄清溶液用1NHC1(100mL)酸化并且用EtOAc(4x150mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤并且用MgS04干燥。将溶剂真空蒸发，得到预期产物，为白色固体，将其应用而无需进一步纯化。8-C:该化合物应用制备实施例1的中间体l-B中描述的类似方法通过将8-B和l-氯-4-氯甲基-苯进行坑基化而制备。8-D:该化合物应用制备实施例1的中间体l-C中描迷的类似方法通过将8-C和参考化合物l-E进行HATU偶联而制备。8-E:将醇8-D(780mg,1.16mmol)、Et2NH(1.8mL,17.43mmol，15当量)、Pd2(dba)3(55mg,0.06mmol,0.05当量)、膦酉己体dppe(26mg，0.06mmol，0.05当量)和THF(5mL)加入至50mL的圆底烧瓶中。将试剂在室温下搅拌15分钟，然后浓缩至干。将产物(非对映异构体混合物)从反应混合物中通过硅胶色谱純化，应用梯度为2-9。/。在CH2Cl2中的MeOH。然后将8-E用于8-F的制备。8-F:按照制备实施例1的中间体l-E中描述的类似方法，化合物8-F通过将8-E和(4-乙磺酰基M-苯基)-乙酸(应用制备(4-曱磺酰基氨基)苯基乙酸中描述的类似方法制备，其应用制备参考化合物13中描述的类似方法制备)进4亍HATU偶联而制备。8-G:该化合物应用制备实施例1的中间体l-F中描述的类似方法通过将8-F氧化而制备。8-H:该化合物应用制备实施例1中描述的类似方法通过将8-G脱保护而制备。实施例9-30实施例9按照实施例8中描述的类似方法，应用参考化合物15制备，得到中间体9-F。实施例IO按照实施例8中描述的类似方法，应用(4-甲氧基-苯基)-乙酸制备，得到中间体10-F。实施例11按照实施例8中描述的类似方法，应用吡咬-4-基-乙酸制备，得到中间体11-F。实施例12按照实施例8中描述的类似方法，应用(3-氯-苯基)-乙酸制备，得到中间体12-F。实施例13按照实施例8中描述的类似方法，应用[4-(吗#~4-磺酰基)-苯基l-乙酸制备，得到中间体13-F。实施例14按照实施例8中描述的类似方法，应用(3，5-二氯-苯基)-乙酸制备，得到中间体14-F。实施例15按照实施例8中描述的类似方法，应用(4-苯基-苯基)-乙酸制备，得到中间体15-F。实施例16按照实施例8中描述的类似方法，应用(2-氯-苯基)-乙酸制备，得到中间体16-F。实施例17按照实施例8中描迷的类似方法，应用(3-苯氧基-苯_&)-乙酸制备，得到中间体17-F。实施例18按照实施例8中描述的类似方法，应用(2-苯基-瘗唑-4-基)-乙酸制备，得到中间体18-F。实施例19按照实施例8中描述的类似方法，应用(4-苯基曱磺酰基氨基-苯基)-乙酸(应用参考化合物13中描述的类似方法制备)制备，得到中间体19-F。实施例20按照实施例8中描述的类似方法，应用[4-(哌咬-1-磺酰基)-苯基]-乙酸制备，得到中间体20-F。实施例21按照实施例8中描述的类似方法，应用[3-(4-氯-苯氧基)-苯基l-乙酸参考化合物16制备，得到中间体21-F。实施例22按照实施例8中描述的类似方法，应用[4-(三氟-乙磺酰基氨基)-苯基卜乙酸(按照参考化合物13中描述的类似方法)制备，得到中间体22-F。实施例23:该化合物按照制备实施例8中描述的类似方法从l-Boc-哌梵-4-基-丙酸制备。实施例24:该化合物按照制备实施例8中描述的类似方法从N-Boc-4-哌啶-4-基-丁酸制备。实施例25:该化合物按照制备实施例8中描述的类似方法从l-Boc-哌啶-4-基-乙酸制备。实施例26:该化合物按照制备实施例8中描述的类似方法从l-Boc-哌啶-3-基-乙酸制备。实施例27:该化合物按照制备实施例8中描迷的类似方法从l-Boc-哌啶-3-基-丙酸制备。实施例28-30按照制备实施例8中描述的类似方法制备。实施例3131-B:将细粉KOH(19.4g，0.346mol)溶于DMSO中并且在室温下搅拌20分钟，然后冷却至0"C。将N-Boc-反式-4-羟基-L-脯氨酸(Boc-Hyp-OH,l-A)(10g，43.3mmol)溶于DMSO(10mL)中并且加入，并且将反应混合物在0。C下再搅拌10分钟。然后，加入4-氯千基氯(33g，0.204mol)，并且将反应混合物在0'C下再搅拌15分钟，随后将水浴除去并且将反应混合物温至室温并且搅拌4小时。将反应混合物倾倒入水(300mL)中，并且将反应容器用另外部分的水(300mL)冲洗。将合并的水层用醚(2x300mL)萃取并且弃去。将水层用87°/。H3P04酸化至pH2.3，然后用醚(3x300mL)萃取。将合并的醚萃取液用水(2x400mL)和盐水(2x400mL)洗涤，经MgS04干燥，过滤并且真空浓缩。将残留物通过色语在硅胶上纯化，应用EtOAc/己烷(梯度0至100%),得到化合物l-B，为澄清油状物。MSm/z256.1(M+l-Boc);NMR(DMSO-D6，400MHz)57.39-7.31(4H,m)，4.52画4.40(2H，m)，4.16画4.10(2H，m)，3.48-3.41(2H，m)，2.40誦2.30(1H，m)，2.03-1.94(lH，m),1.39-1.34(9H，m)。^i^将(三甲基甲硅烷基)二氮杂甲烷(2M在乙醚中)(4.7mL，9.45mmol)溶液加入至溶于DCM/MeOH(5:l，25mL)中的羧酸l-B(2.4g，8.6mmol)中。当LCMS确定原料耗尽后，将反应混合物真空浓缩，并且将粗残留物通过快速色谦(梯度EtOAc:己烷)纯化，得到甲酯，为澄清油状物。31-D:将搅拌棒和1-C(510mg,1.38mmol)加入至圓底烧瓶中。加入在DCM(6mL)中的TFA(50。/o)并且将溶液在室温下搅拌1小时。将溶剂真空除去，加入己烷，然后在真空中再蒸发至干，并且如果需要将剩余的THF共沸。将粗物质直接用于下一步而无需进一步纯化。31-E:该化合物应用制备实施例l-E中描述的类似方法从31-D和可商购的{2-[1-(叔丁氧基羰基)哌啶-4-基卜5-甲基-1，3-噻唑-4-基}乙酸制备。31-F:该化合物按照制备参考化合物6中描述的类似方法通过皂化从31-E制备。31-G:该化合物应用制备实施例l-C中描述的类似方法从31-F和参考化合物3制备。31-H:该化合物应用制备实施例l-F中描述的类似方法从31-G制备。31:参考化合物31应用制备实施例l-G中描述的类似方法从31-H制备。实施例32-43实施例32按照制备实施例31中描述的类似方法从参考化合物10制备。实施例33按照制备实施例31中描述的类似方法制备。实施例34按照制备实施例8中描述的类似方法从参考化合物11制备。实施例35按照制备实施例8中描述的类似方法从参考化合物8制备。实施例36按照制备实施例8中描述的类似方法从参考化合物6制备。实施例37按照制备实施例8中描述的类似方法从参考化合物2制备。实施例38按照制备实施例8中描述的类似方法从参考化合物2制备。实施例39按照制备实施例8中描述的类似方法从参考化合物2制备。实施例40按照实施例8中描述的类似方法从参考化合物5和{2-[1-(叔丁氧基羰基)派梵-4-基1-5-曱基-1,3-噻唑-4-基}乙酸制备。实施例"按照实施例8中描述的类似方法从参考化合物9和{2-[1-(叔丁氧基羰基)哌吱-4-基-5-曱基-1，3-噻唑_4-基}乙酸制备。实施例42按照实施例8中描述的类似方法从参考化合物7和{2-1-(叔丁氧基0哌啶-4-基-5-曱基_1，3-噻唑-4-基}乙酸制备。实施例43按照实施例8中描述的类似方法从参考化合物2和{2-[1-(叔丁氧基羰基)哌淀-4-基卜5-曱基-1，3-噻唑-4-基}乙酸制备。表1给出了如实施例1-42中描述的式(l)化合物。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage48</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage49</column></row><table>实施例结构物理数据MS(m/z)，元素分析和'H匪R楊MHz(DMSO誦d6)4MSm/z632.4(M+1);'H醒RS830(s，1H)，7.91(d，1HJ=8.0Hz)，7.67(d，1HJ=8.0Hz)，7,47-7.59(m，2H)，7.37(s，1H)，7.30(d，1HJ=8.0Hz)，7.17-7.19(m,3H)，7.97-7.99(m，1H)，5.71-5.77(m，1H)，4.40-4.44(m,1H)，4.20(s，1H)，3.84-3.87(m,2H)，3.16-3.26(m，2H)，2.844(s，1H)，2.69(s，1H),2.23-2.37(m，2H)，2.17(s，3H)，1.14-1.27(m，4H)，0.86-0.97(m，3H)。MSm/z682.4(M+1);'H醒R57.92(d，1HJ=8.0Hz)，7.76(d,1HJ=8.0Hz)，7.61-7.65(m，1H)，7,52-7.55(m，1H)，7.20-7.23(ra，6H)，5.58-5.61(m，1H)，4.51-4.55(m，1H)，4.10-4.14(m,2H)，3.66-3.79(m，5H)，3.19-3.23(m，2H)，3.06-3，13(m，5H)，2,92-2.95(m，2H)，2.66(s，1H)，2.32-2.37(ni，1H)，2.17-2.24(m，1H)，1.94-2.01(m，1H),1.27-1.32(m，7H)，0.84-0.98(m，3H)。<table>tableseeoriginaldocumentpage51</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage52</column></row><table>实施例结构物理数据MS(m/z),元素分析和醒R400MHz(DMSO-d6)11N、〈itlU0、~\—/MSm/z604.3(M+1);^醒R57.93(d),8'72(s，IH)，7.78-7.81(m，IH)，7.50-7.67(m,2H),7.34-7.41(m，3H)，7.02(s，2H)，5，47漏5.53(m，IH)，4.46-4.56(m，2H)，4.29-4.31(m，IH)，3.95-4.02(m，2H)，3.73-3.82(m，2H)，2.86(s，2H)，2.54(s，2H)，2.31隱2.37(m)，2.06-2.15(m，1H)，1.52-1.74(m，3H)。12NH2MSm/z637.2(M+1)13o，A=/NH2MSm/z752.3(M+1)14CI，NH2MSm/z671.2(M+1)<table>tableseeoriginaldocumentpage54</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage55</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage56</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage57</column></row><table>实施例结构物理数据MS(m/z)，元素分析和'H醒R400MHz(DMSO-d6)28工z\rw。MSm/z707.3(M+1)29i、.。。、Z工r"^=。一MSm/z693.3(M+1)30o〈\=/NH—MSm/z686.3(M+1)31工工。Tt)m工Z工1$。1MSm/z651.3(M+1)329So0〈\=/HNH2NMSm/z637.3(M+1)<table>tableseeoriginaldocumentpage59</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage61</column></row><table>实施例结构物理数据MS(m/z)，元素分析和]HNMR400MHz(DMSOd6)48〇、、'、111MSm/z686，3(M+1)49工2。、、'、1MSm/z754.4(M+1)50J_^r、、。、。f2工MSm/z748.4(M+1)实施例51-53表2中的实施例51-53是本发明的实例化合物，其具有包含3-烷基或3-芳基取代的脯氨酸的式(1),其可以通过重复以上实施例中描述的步骤，应用本领域技术人员显而易见的适合的原料制备。<table>tableseeoriginaldocumentpage63</column></row><table>通道活化蛋白酶抑制剂例如前列腺蛋白酶抑制剂在治疗通道活化蛋白酶的抑制介导的疾病中的适宜性可以通过确定通道活化蛋白酶抑制剂对以下的抑制作用而测定(l)天然的、分离的、純化的或重组的通道活化蛋白酶，应用适合的生物化学试验形式，应用Shipway等人；Biochem.Biophys.Res.Commun.2004;324(2):953-63中描述的方法；和/或(2)在适合的分离细胞或融合上皮中的离子通道/离子转运功能，应用Bridges等人；Am.丄Physiol.LungCellMol.Physiol.2001;281(l):L16-23和Donaldson等人；J.Biol.Chem.2002;277(10):8338-45中描述的方法。生物化学试验重组人前列腺蛋白酶和蛋白裂解酶以及豚鼠前列腺蛋白酶是根据Shipway等人；Biochem.Biophys.Res.Commun.2004;324(2):953-63中描述的方法产生的。将重组酶在适合的多孔试验板例如96或384孔板上在包含试验化合物或栽体的电解质緩冲液中培养。在酶与化合物或栽体混合后的指定时间，将适合的荧光肽底物加入至试验混合物中。当底物被活性酶裂解后，荧光(用适合的荧光板读数器测定)增加并且底物的转换率(即酶活性)可以被定量，并且因此任何试验化合物的抑制作用可以;陂定量。试验化合物的作用表示为诱导酶活力(Ki)降低50%的浓度。通常，本发明化合物的Kj值可以为0.1nM至5^M。在某些实施例中，本发明化合物的Ki值可以为0.1nM至500nM;0.1nM至50nM;0.1nM至5nM;或0.1nM至0.5nM。在特别的实施例中，本发明化合物的K,值可以为0.1nM至0.5nM;0.5nM至5nM;5nM至50nM;50nM至500nM;或500nM至5pM。在其它实施例中，化合物的Kj值可以小于0.1nM或大于5|iM。上皮离子转运才艮据Danahay等人，Am.丄Physiol.LungCellMol.Physiol.2002;282(2):L226-36中描述的方法培养人支气管上皮细胞。当适当分化(形成顶端空气界面后14-21天)时，将上皮细胞用栽体、抑酶肽(200(ag/mL)或试验化合物处理90分钟。然后将上皮置入，应用Danahay等人，Am.J.Physiol.LungCellMol.Physiol.2002;282(2):L226画36中描述的Chamber,保持上皮顶端侧的载体、抑酶肽或试验化合物的浓度。然后通过电压钳制上皮至零毫伏来测定短路电流(ISC)。然后通过将氨氯吡嗪脒(10iaM)加入至上皮的顶端表面来测定氨氯吡溱脒敏感ISC。试验化合物的潜能表示为诱导总的抑酶肽敏感組分的氨氯吡溱脒敏感ISC抑制50%的浓度。通常，本发明化合物的ICs。值可以为1nM至10(iM。在某些实施例中，本发明化合物的lQo值可以为lnM至l^iM;或更特别的是lnM至100nM。在其它实施例中，本发明化合物的IC5Q值可以为100nM至1，或1pM至10jaM。在其它实施例中，本发明化合物的ICs。值可以小于1nM或大于10juM。气管电位差(体内)将豚鼠用短作用的吸入麻醉剂例如卣烷和N;jO麻醉。在短作用麻醉下，将口腔灌胃针通过口咽途径插入至气管中。一旦进入气管，将在适合的基于水的稀释剂中的小体积(50-200iLiL)载体或试验化合物灌入气道中。然后动物恢复并且变得完全能走动。可选择的是，可以将试验化合物用气雾剂或干粉给药施用于动物。在给药后的指定时间，将动物用适合的麻醉剂例如氯胺酮和赛拉溱外科麻醉。然后将气管暴露并且将塑料的琼脂桥电极插入气管腔中。将参比电极也插入动物颈部的肌肉层中。然后应用Takahashi等人，ToxicolApplPharmacol.1995;131(1):31-6中描述的适合的高阻伏特计测定气管电位差。试验化合物的潜能表示为在敏感组分中诱导气管电位差降低50%的剂量。应当理解的是本文描述的实施例和实施方案仅用于说明目的，并且根据其的多种修饰和改变将给本领域技术人员以建议并且包括在本申请的精神和范围以及附属权利要求的范围内。本文引用的所有出版物、专利和专利申请为了所有目的并入本文作为参考。权利要求1.式(1)化合物及其可药用盐、水合物、溶剂化物和立体异构体其中J是5-12元单环或稠合的碳环、芳基、杂芳基或包含N、O和/或S的杂环；R1是-(CR2)l-NR2、-(CR2)l-NRC(＝NR)-NR2、-(CR2)l-C(＝NR)-NR2或5-7元含氮非芳族杂环；W-R2是在环A任何位置上的取代基；W是或-O(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(O)(CR2)k-、-SO2(CR2)k-或-OC(O)(CR2)k-；R2是C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、R6、-CR9＝CR9-R6或其中环E是任选取代的5-7元单环或稠合的碳环或杂环；或者W-R2一起形成C1-6烷基、5-7元芳基或-OC(O)NR7R8；R3是NR7R8或R6；R4和R5独立地是H、C1-6烷基、OH或C1-6烷氧基；R7和R8独立地是H、C1-6烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基或-(CR2)l-R6；或者R7和R8与N一起可以形成任选取代的5-7元单环或稠合的杂环；R9是H或C1-6烷基；R10是卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、OR11或-(CR2)l-R11；R6、R11和X独立地是任选取代的5-7元碳环、杂环、芳基或杂芳基；或者R11是H或C1-6烷基；每个R是H或C1-6烷基、C2-6链烯基或C2-6炔基，其中碳可以任选被NR、O或S取代或代替；i是0-1；k和l独立地是0-6；m和n独立地是1-6；并且p是0-3。2.权利要求1的化合物，其中R1是-(CH^-NHs、-(CH2)广NHC(-NH)-NH2或-(CH2)广C(-NH)-NH2NH2，其中每个1是0-1;或R1是哌1^。3.权利要求1的化合物，其中W是-0(CR2)k-、-S(CR2)k-、-S(0)(CR2)k-、-802(€112)『或-0<:(0)(€议2)1<-;并且k是l。4.权利要求l的化合物，其中W是任选取代的苯基、Cs-7环烷基、噻吩基、呋喃基、哌啶基、亚甲基环己基、;X、-，-CH==^〉或-「CH=<NH5.权利要求1的化合物，其中W是任选取代的苯基、吡淀基、噻唑基、哌P定基或NR71^其中R和RS都是H,或者Ff和RS与N—起形成任选取代的哌梵基。6.权利要求l的化合物，其中R、R4、R5、R7和R8各自是H。7，权利要求l的化合物，其中W是任选取代的苯基、Cw环烷基、吡啶基、噻唑基、哌啶基、环己醇、咪唑基、噻吩基、呋喃基、8.权利要求l的化合物，其中X是环己基、苯基或哌咬基。9.权利要求l的化合物，其中-J-(R,p—起是Z是O或S;Z1、Z2、Z3或Z4独立地是N、CH或当与R"连接时是C;Z5、Z6或Z7独立地是N、O、S、CH或当与R"连接时是C;R"是d—6烷基或-(CR2),-R";R"是苯基或Cw环烷基；并且p是0-l。10.权利要求1的化合物，其中J是苯并噻唑基、苯并恶唑基、噻哇基或哺、二唑基。11.权利要求l的化合物，其中所述化合物是式(2A)或(2B):<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>(2B)其中Z是O或S;R1是NH2、-NHC(=NH)-NH2或-C(-NH)-NH2;W是-O(CH2)k-或-S(O)(CH;0k-;<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>R"是任选取代的苯基，或者W-R2—起形成d-6烷基或任选取代的苯基；R、R4和R5独立地是H;Y是5-7元芳基、杂芳基或包含N、O或S的杂环；R'2是卤素、d—6烷基或-L-(CH2)「R";L是键、O、S02、NHCO、NHS02或S02NH;R"是任选卣代的d-6烷基，或任选取代的C3-7环烷基，或5-7元芳基、杂芳基或杂环；i是0;k是l;l是0-l;m和n独立地是l-4;并且q是0-3。12.权利要求11的化合物，其中Y是苯基、吡淀基、噻唑基或哌#。13.权利要求ll的化合物，其中R12A-L-(CH2)rR13;并且R"是任选卣代的d—6烷基、C3—7环烷基、吗啉基、苯基或哌<^&。14.药物组合物，该药物组合物包含治疗有效量的权利要求1的化合物和可药用赋形剂。15.调节通道活化蛋白酶的方法，该方法包括给需要的系统或个体施用治疗有效量的权利要求l的化合物或其可药用盐或药物组合物，从而调节所述的通道活化蛋白酶。16.权利要求15的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、组织蛋白酶A或嗜中性细胞弹性蛋白酶。17.权利要求16的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶。18.冲又利要求15的方法，该方法包括给细胞或组织系统或者人或动物个体施用权利要求1的化合物或其可药用盐或药物组合物。19.权利要求18的方法，其中所述的细胞是支气管上皮细胞。20.改善通道活化蛋白酶介导的病症的方法，该方法包括给需要该治疗的系统或个体施用有效量的权利要求1的化合物或其可药用盐或药物组合物，并且任选与第二种治疗剂组合，从而治疗所述病症。21.权利要求20的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、組织蛋白酶A或嗜中性细胞弹性蛋白酶。22.权利要求21的方法，其中所述的通道活化蛋白酶是前列腺蛋白酶。23.权利要求20的方法，其中所述病症与液体经离子转运上皮的移动或呼吸组织中粘液和痰的聚集或它们的组合有关。24.权利要求20的方法，其中所述病症是嚢性纤维化、原发性睫运动障碍、肺癌、慢性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病、哮喘或呼吸道感染。25.权利要求20的方法，其中所述的第二种治疗剂是抗炎药、支气管扩张药、抗组胺药、止咳药、抗生素或DNA酶。26.权利要求1的化合物或其可药用盐或药物组合物并且任选与第二种治疗剂组合在调节通道活化蛋白酶中的用途。27.权利要求1的化合物或其可药用盐或药物组合物并且任选与第二种治疗剂组合在制备用于治疗通道活化蛋白酶介导的病症的药物中的用途。全文摘要本发明提供了用于调节通道活化蛋白酶的化合物及其药物组合物，以及应用该化合物治疗、改善或预防与通道活化蛋白酶有关的病症的方法，所述的通道活化蛋白酶包括但不限于前列腺蛋白酶、PRSS22、TMPRSS11(例如TMPRSS11B、TMPRSS11E)、TMPRSS2、TMPRSS3、TMPRSS4(MTSP-2)、蛋白裂解酶(MTSP-1)、CAP2、CAP3、胰蛋白酶、组织蛋白酶A或嗜中性细胞弹性蛋白酶。文档编号A61K38/55GK101443348SQ200780017230公开日2009年5月27日申请日期2007年5月15日优先权日2006年5月23日发明者A·K·查特吉,B·布尔苏拉亚,D·C·塔利,G·斯普拉贡,H·M·J·彼得拉西申请人:Irm责任有限公司