专利名称：Tie2活化剂、血管内皮生长因子抑制剂、血管生成抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂及血 ...的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制齐U、血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂，以及药物组合物。
背景技术：
血管具有血管内皮细胞与血管壁细胞(血管平滑肌细胞或周细胞)通过细胞外基质间接或直接地相粘接的结构，并具有将氧及营养物质供给至生物体组织，从生物体组织中除去废弃物的作用。一般地,血管的形 成分为血管发育(vasculogenesis)及血管生成(angiogenesis)两个阶段，所述血管发育形成新的血管，所述血管生成是已形成的现有血管通过伸展、分岔，形成新的血管网络。前者是血管内皮生长因子(VEGF)发生作用，其涉及血管形成，SP从被称为脉管形成的血管初期发育至其后的血管生成的非常广的范围，后者是血管生成素(Ang)发生作用，其涉及对血管内皮细胞与血管壁细胞之间粘接的控制及血管结构的稳定化。血管在通常的有氧状态下，血管内皮细胞与裱衬其周围的血管壁细胞牢固地粘接，保持血管结构稳定，但是当组织发生缺氧时，血管壁细胞从血管内皮细胞脱离，无序血管增生。常在以肿瘤、慢性风湿性关节病、糖尿病性视网膜病变、高脂血症、高血压等血管病变为主的疾病中观察到这样的现象(血管生成)。众所周知，通过使在血管内皮细胞中表达的受体型酪氨酸激酶Tie2 (Tyrosinekinase with Ig and EGF homology domain2)活化，能够抑制这些血管的生成(例如，参照专利文献I)。已报道有在因血管狭窄化或抑制血管扩张化而产生的缺血性疾病中，通过Tie2的活化，可扩大血管腔(例如，参照非专利文献I)。另外，还报道有通过Tie2的活化，抑制血管内皮细胞的死亡(例如，参照非专利文献2)。因此，不仅已知通过Tie2的活化，可抑制血管生成，还已知其可使血管成熟化、正
常化及稳定化。例如，已知在血管再生医疗中，可以通过Tie2的活化，诱发血管中血管内皮细胞与血管壁细胞的粘接，使血管成熟化。例如，已知在肿瘤或糖尿病性视网膜病变等中观察到的因血管壁细胞未与血管内皮细胞粘接而导致的无序血管增生的疾病中，通过Tie2的活化，可使血管壁细胞与内皮细胞粘接，从而使血管正常化。例如，已知对于各种破坏细胞内外血管结构的环境因子，通过Tie2的活化，可抑制血管的不稳定化，使血管稳定。作为通过Tie2的活化来抑制血管生成的天然物质，众所周知有桂皮提取物(例如，参照专利文献I )，但是其存在活化不充分的问题。另外，作为抑制血管生成的物质，众所周知的有苏拉明(例如，参照专利文献2)，但其存在安全性方面不优异的问题。
因此，目前的现状是强烈需求快速开发具有优异的Tie2活化作用、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用的安全性高的物质。现有技术文献专利文献专利文献1:日本特开2009-263358号公报专利文献2:日本特表平9-503488号公报非专利文献非专利文献1:科学(Science).1999.Dec.24 ；286 (5449):2511-4.
非专利文献2:Ρ.N.A.S.2004.Apr.13 ; 101 (15):5553-8.
发明内容
本发明要解决的技术问题本发明的技术问题是解决现有的各种问题，实现下述目的。即本发明的目的是提供具有优异的Tie2活化作用且安全性高的Tie2活化剂。另外，本发明的目的是提供具有优异的血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用且安全性高的血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂。另外，本发明的目的是提供具有优异的血管生成抑制作用且安全性高的血管生成抑制剂。另外，本发明的目的是提供具有优异的血管成熟化作用且安全性高的血管成熟剂。另外，本发明的目的是提供具有血管正常化作用且安全性高的血管正常化剂。另外，本发明的目的是提供具有血管稳定化作用且安全性高的血管稳定剂。另外，本发明的目的是提供具有优异的Tie2活化作用、血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳 定化作用中至少任意一种作用且安全性高的药物组合物。解决技术问题的技术手段为了解决上述技术问题，本发明人反复进行了潜心研究，结果发现下述提取物具有Tie2活化作用、血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用，进而完成了本发明。本发明是由本发明人基于上述发现而完成的，作为用于解决上述技术问题的手段如下所述。即，(I) 一种Tie2活化剂，其特征在于，其含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物(4τ>抽出物)、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物为有效成分。(2) 一种血管生成抑制剂，其特征在于，其含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物为有效成分。(3)—种血管成熟剂、血管正常化剂或血管稳定剂，其特征在于，其含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物为有效成分。(4) 一种血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂，其特征在于，其含有山楂提取物为有效成分。(5)—种药物组合物，其特征在于，其含有上述(I)所述的Tie2活化剂、上述(2)所述的血管生成抑制剂、上述(3)所述的血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂、上述(4)所述的血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂中的至少任意一种。发明效果根据本发明的Tie2活化剂，能够提供一种可解决现有的上述各种问题，并具有优异的Tie2活化作用且安全性高的Tie2活化剂。根据本发明的血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂，能够提供一种可解决现有的上述各种问题，并具有优异的血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用且安全性高的血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂。根据本发明的血管生成抑制剂，能够提供可解决现有的上述各种问题，并具有优异的血管生成抑制作用且安全性高的血管生成抑制剂。根据本发明的血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂，能够提供可解决现有的上述各种问题，并具有优异的血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用中的至少任意一种作用，且安全性高的血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂。根据本发明的药物组合物，能够提供可解决现有的上述各种问题，并具有优异的Tie2活化作用、血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用中的至少 任意一种作用且安全性高的药物组合物。
图1是表示通过蛋白质印迹法(Western Blot)检测各试样中的Tie2磷酸化的结果的图。图2是表示通过蛋白质印迹法检测各试样中的Tie2磷酸化的结果的图。图3是表示通过蛋白质印迹法检测各试样中的Tie2磷酸化的结果的图。图4是表示通过蛋白质印迹法检测各试样中的Tie2磷酸化的结果的图。图5是表示通过蛋白质印迹法检测各试样中的Tie2磷酸化的结果的图。图6是表示通过蛋白质印迹法检测各试样中的Tie2磷酸化的结果的图。图7是表示测定血管分支数量的结果的图。
具体实施例方式(Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂，以及药物组合物)本发明的Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂、血管稳定剂以及血管生成抑制剂，以及药物组合物，是含有下述至少任意一种提取物为有效成分，并根据需要还含有其他成分。
所述Tie2活化剂具有Tie2活化作用，该Tie2活化作用是通过将Tie2磷酸化，转换成其活化体(磷酸化Tie2)。当所述Tie2被活化时，会引发细胞内酪氨酸激酶结构域的自磷酸化，诱发血管内皮细胞与血管壁细胞之间的粘接。在因血管狭窄化或抑制血管扩张化而产生的缺血性疾病中，通过Tie2的活化，可扩大血管腔。另外，通过Tie2的活化，可抑制血管内皮细胞的死亡。所述血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂具有抑制VEGF作用的VEGF抑制作用。所述VEGF是分子量为34kDa 46kDa的糖蛋白，其作用于血管内皮细胞，具有促进细胞增殖及游走的作用，以及促进血管生成的作用。所述血管生成抑制剂具有血管生成抑制作用，其抑制由现有血管形成新的血管网络。在缺氧状态下，Tie2的活化暂时受到抑制，血管内皮细胞与血管壁细胞之间的粘接发生脱离，由脱离粘接的血管内皮细胞形成新的血管网络。血管生成抑制剂能够抑制因这样的血管壁细胞未与内皮细胞粘接而导致的无序血管的增生。所述血管成熟剂具有成熟化作用，其诱发血管内皮细胞与血管壁细胞之间的粘接，形成使血管内环境因子(细胞及体液因子)不容易向血管外漏出的血管内皮细胞间的粘接斑。另外，在血管再生医疗中，可通过Tie2的活化，诱发血管中血管内皮细胞与血管壁细胞之间的粘接，使血管成熟化。所述血管正常化剂具有正常化作用，其通过提高血管内皮细胞相互之间的粘接，促进血管壁细胞对内皮细胞的裱衬，使血管透过性破坏的血管或导致血管无序增生等异常血管形成正常的状态。另外，在如肿瘤或糖尿病性视网膜病变等中观察到的血管壁细胞不与血管内皮细胞粘接，导致血管无序增生等的疾病中，通过Tie2活化，能够使血管壁细胞与内皮细胞粘接，使血管正常化。所述血管的稳定剂具有抑制对现有血管的阻碍、抑制血管内皮细胞相互之间的脱离及抑制血管内皮细胞与血管壁细胞的脱离的作用，以及抑制血管内皮细胞的死亡的稳定化作用。另外，对于各种破坏细胞内外血管结构的环境因子，通过Tie2的活化，能够抑制血管的不稳定化，使血管稳定化。所述药物组合物是含有上述Tie2活化剂、上述血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、上述血管生成抑制剂、上述血管成熟剂、上述血管正常化剂及上述血管稳定剂中的至少任意一个的组合物，其具有Tie2活化作用、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用中的至少任意一种作用。(山楂提取物)所述山楂是蔷薇科山楂属落叶灌木,学名为CrataeRUs cuneata。从中国中南部地区可容易地得到所述山楂。所述山楂的茎的高度为30cm 90cm，在8月 9月开紫色或白色的花。所述山楂的药用部位是果实，被广泛用作健胃消食药。所述山楂提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述山楂提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述山楂的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述山楂放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌 ，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣得到提取液。
作为所述山楂的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部等，但其中，优选果实部和叶部。作为所述山楂的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。作为所述山楂的提取条件，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但提取时间优选I小时 3小时，提取温度优选常温 95°C。作为所述山楂的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。此外,所述山楂的提取溶剂,优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述山楂的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但相对于作为原料的山楂，优选5倍量 15倍量(质量比)。作为所述山楂提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。
作为所述山楂提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选50 μ g/mL 400 μ g/mL,更优选 100 μ g/mL 400 μ g/mL。(杨桃提取物)所述杨桃是酢衆草科五敛子属常绿木本,学名为Averrhoacarambola (日语名称:^ > >'>)。所述杨桃的原产地除了东南亚全域外，还有中国南部、台湾、巴西、圭亚那、特立尼达和多巴哥、佛罗里达、夏威夷等热带至亚热带地区，从这些地区能够容易地得到。所述杨桃有甜果实的甜味种和酸味果实的酸味种，除了生食，还可以用于果酱、果冻或酱菜等。所述杨桃的叶可以用作风热感冒、急性肠胃炎、小便不畅、产后浮肿等的预防及治疗药物。作为所述杨桃的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、花部、果实部、根部等，但其中，优选叶部。作为所述杨桃的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述杨桃提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述杨桃提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。
作为所述杨桃的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述杨桃的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣，得到提取液。作为所述杨桃的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述杨桃的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述杨桃的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲 基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。此外,所述杨桃的提取溶剂,优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述杨桃提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述杨桃提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选100 μ g/mL 400 μ g/mL,更优选 200 μ g/mL 400 μ g/mL。(艳山姜提取物)所述艳山姜是姜科山姜属常绿多年生草本,学名为Alpiniaspeciosa (别名:月桃)。所述艳山姜的原产地为九州南端至冲绳、小笠原沿岸部、台湾至中国南部、东南亚、印度等，从这些地区能够容易地得到。所述艳山姜的株高为2m 3m，茎为束生直立，叶为纸质并互生为2列，成椭圆状披针形，花为下垂的大型总状花序。作为所述艳山姜的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、花部、果实部、根部等，但其中，优选叶部。作为所述艳山姜的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述艳山姜提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述艳山姜提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述艳山姜的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述艳山姜的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣得到提取物。作为所述艳山姜的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述艳山姜的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。
作为所述艳山姜的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述艳山姜的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述艳山姜提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布 提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述艳山姜提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选50 μ g/mL 400 μ g/mL,更优选 200 μ g/mL 400 μ g/mL。(莲提取物)所沭蓮为蓮科蓮属多年牛水牛棺物，学名为Nelumbo nucifera (别名:荷)。所述莲的原产地是印度次大陆及其周边地区，从这些地区能够容易地得到。所述莲是由地里的地下茎伸出茎，且叶露出水面，叶具有疏水性，成圆形并在中央具有叶柄，株高大约I米。作为所述莲的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、胚芽部、花部、果实部、根部等，但其中，优选胚芽部。作为所述莲的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述莲提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述莲的提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述莲的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述莲的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述莲的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述莲的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述莲的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述莲的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述莲提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述莲提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选100 μ g/mL 400 μ g/mL,更优选为 200 μ g/mL 400 μ g/mL。(博士茶提取物)所述博士荼是豆科阿斯巴拉妥(Aspalathus)属，学名为Aspalathus linearis(N.L.Barum) R.Dahlgr (Leguminosae)(植物名称:南非红树茶 Aspalathus linearis)。所述博士茶的栽培地是南非塞德伯格山脉，从这些地区能够容易地得到。所述博士茶的发酵后的嫩叶和树枝的干燥物被认为对镇痉、强壮剂、呕吐、腹泻及其他的轻微胃部不适等有效。所述博士茶的茶中有甜味，不含咖啡因，单宁浓度也极低，被认为具有抗氧化作用。作为所述博士茶的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、嫩叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选嫩叶部及树枝部，具体地，优选嫩叶部与树枝部的干燥粉末(博士茶)。作为所述博士茶的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述博士茶提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述博士茶提取物，无特别限定，可以 根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述博士茶的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述博士茶的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述博士茶的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述博士茶的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述博士茶的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述博士茶的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下被使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述博士茶提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述博士茶提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选50 μ g/mL 400 μ g/mL,更优选 200 μ g/mL 400 μ g/mL。(印度枣提取物)所述印度車是苏木科酸豆属常绿乔木棺物，学名为Tamarindus indica L.。所述印度枣也称为罗望子，野生于亚洲、非洲等热带地区，在印度、泰国等地区有栽培，从这些地区能够容易地得到。在日本，将所述印度枣种子的胚乳部分所含有的多糖类(罗望子胶)用于增稠剂等食品类中，同时将种皮部分所含的单宁用作色素。作为所述印度枣的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、种子部、种皮部、根部等，但其中，优选种皮部。作为所述印度枣的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述印度枣提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述印度枣提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。
作为所述印度枣的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述印度枣的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液的方法。作为所述印度枣的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述印度枣的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述印度枣的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述印度枣的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述印度枣提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述印度枣提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选为 10 μ g/mL 100 μ g/mL,更加优选为 10 μ g/mL 20 μ g/mL。(木瓜提取物)所沭木瓜是蔷薇科木瓜属落叶乔木，学名为Chaenomeles sinensis。所述木瓜原产于中国东部，在以日本为首，包括中国、朝鲜、美国、法国等地均有栽培，从这些地区能够容易地得到。所述木瓜的果实，草药名被称为木瓜(7 〃力)，自古以来其被广泛用作抑制咽喉发炎的镇咳药。作为所述木瓜的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部等，但其中，优选果实部。作为所述木瓜的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述木瓜提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述木瓜提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述木瓜的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述木瓜的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述木瓜的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述木瓜的提取溶剂的使用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述木瓜的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的 混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述木瓜的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下被使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述木瓜提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述木瓜提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选10 μ g/mL 400 μ g/mL,更优选 200 μ g/mL 400 μ g/mL。(番石榴提取物)所沭番石檣是桃金娘科番石檣属灌木,学名为Psidium Ruaiava L.。所述番石榴原产于热带美洲，从这些地区能够容易得到。所述番石榴也称为番石榴子，含有作为多酚化合物的单宁、叶绿素、叶酸、维生素类、矿物质、蛋白质、多糖类等，被广泛用作健康食品。
作为所述番石榴的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选果实部。作为所述番石榴的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述番石榴提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述番石榴的提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述番石榴的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述番石榴的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述番石榴的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述番石榴的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述番石榴的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂 或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述番石榴的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述番石榴提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述番石榴提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选100 μ g/mL 800 μ g/mL,更加优选 400 μ g/mL 800 μ g/mL。(荜茇提取物)所述荜茇是胡椒科胡椒属蔓性常绿木本，学名为Piper 1nRum0所述荜茇能够从东南亚地区容易地得到。所述荜茇的果穗为多肉质圆筒状，其干燥物被广泛用作香辛料。作为所述荜茇的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举果穗部、叶部、茎部、花部、根部等，但其中，优选果穗部。作为所述荜茇的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述荜茇提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述荜茇提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述荜茇的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述荜茇的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述荜茇的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述荜茇的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述荜茇的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进 行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述荜茇的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为上述荜茇提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述荜茇提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选50 μ g/mL 400 μ g/mL,更加优选 200 μ g/mL 400 μ g/mL。(皂树提取物)所述桌树是蔷薇科桌树属常绿小乔木,学名为Quillaia Saponaria0所述阜树野生于南美的智利、玻利维亚、秘鲁地区，从这些地区能够容易地得到。在其树皮中含有单宁和三萜类皂苷。众所周知所述皂树的皂甙(皂树皂甙)与从其他植物得到的皂甙相比，具有优异的表面活化与均质性，被广泛用于食品乳化剂、维生素E、香料的增溶、牙膏或饮料发泡剂、化妆品、摄影胶片等工业领域。作为所述皂树的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选树皮部。作为所述皂树的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述皂树提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述皂树提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述皂树的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述皂树的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述皂树的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述皂树的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述皂树的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述皂树的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述皂树的提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述皂树提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选6.25 μ g/mL 12.5 μ g/mL。(黄杞提取物)所述黄紀是胡桃科黄紀属常绿乔木，学名为Engelhardtia chrysolepis。所述黄杞野生于中国南部地区，从这些地区能够容易地得到。由于所述黄杞的叶呈淡甜味，因此自古就有饮用以解热、减肥、解毒等。作为所述黄杞的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选叶部。作为所述黄杞的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述黄杞提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述黄杞提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为上述黄杞的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述黄杞的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述黄杞的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述黄杞的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述黄杞的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂 。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述黄杞的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述黄杞提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述黄杞提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选200 μ g/mL 400 μ g/mL。(银杏提取物)所述银杏是银杏科银杏属落叶乔木，学名为Ginkgo biloba。所述银杏通过人为移植分布于世界各地，从这些地区能够容易地得到。所述银杏的茎高为20m 30m，其是裸子植物的一种。作为所述银杏的成分，含有银杏内酯、黄酮等，其添加于健康食品。作为所述银杏的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选叶部。作为所述银杏的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述银杏提取物可 以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述银杏提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述银杏的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述银杏的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述银杏的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述银杏的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述银杏的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述银杏的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述银杏提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述银杏提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选100 μ g/mL 200 μ g/mL。(牡蛎提取物)所述牡蛎是属于珍珠贝目牡蛎科的双壳贝的总称。所述牡蛎，使用的是取自广岛县的牡蛎，但从世界各地的沿海地区都能够容易地得到。所述牡蛎富含优质蛋白质、牛磺酸、糖原、锌和矿物质类等，自古以来被广泛用作中药原料。所述牡蛎提取物可以通过一般用于牡蛎提取的方法容易得到。作为所述牡蛎提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述牡蛎的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如(I)将冷藏生牡蛎及冷冻牡蛎装在提取锅中，加入80°C 100°C的热水进行加热提取，澄清过滤加热提取后的液体，然后减压浓缩而得到；(2)将牡蛎热水提取残渣加入带有搅拌桨的反应釜中，在30°C 50°C进行蛋白酶降解处理，在90°C进行加热使其失活并澄清过滤后，减压浓缩而得到。作为所述牡蛎的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述牡蛎的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述牡蛎的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述牡蛎提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述牡蛎提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选200 μ g/mL 400 μ g/mL。(姜黄提取物)所述姜黄是姜科姜黄(姜黄)属多年生草本，学名为Curcuma 1nRa0所述姜黄分布在亚洲热带地区， 在印度、冲绳、中国东南部和东南亚有栽培，从这些地区能够容易地得到。众所周知所述姜黄的块根部所含的黄色色素姜黄素，具有抗氧化作用、改善肝功能作用、抑制前列腺肥大作用等。另一方面，所述姜黄中，还含有被称为倍半萜的精油成分。所述姜黄的多肉质根茎除了药用，还作为重要的香料、黄色素被用于咖喱粉中。作为所述姜黄的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、花部、果实部、根茎部、根部等，但其中，优选根茎部。作为所述姜黄的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述姜黄提取 物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述姜黄提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述姜黄的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述姜黄的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述姜黄的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述姜黄的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述姜黄的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述姜黄的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述姜黄提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述姜黄提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选25 μ g/mL 40 μ g/mL。(菊提取物)所述菊是菊科菊属短日照棺物，学名为Chrysanthemum morifolium syn.。所述菊在日本野生，能够容易地得到。所述菊的花部在中国自古以来就被用作药用，在日本也被作为茶或酒饮用，或者作为食用用于料理中，其被认为对眩晕、头痛、眼疲劳等有效。作为所述菊的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、花部、果实部、根部等，但其中，优选花部。作为所述菊的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。
所述菊提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述菊提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述菊的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述菊的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述菊的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述菊的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述菊的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述菊的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述菊的提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述菊提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选200 μ g/mL 400 μ g/mL。(枣提取物) 所述車是鼠李科車属落叶乔木,学名为Ziziphus jujuba。所述車的原产地为北非至欧洲西部地区，从这些地区能够容易地得到。所述枣的果实自古以来被用于药用，作为其成分，含有维生素C等。作为所述枣的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选果实部。作为所述枣的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述枣提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述枣提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述枣的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述枣的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述枣的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述枣的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述枣的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述枣的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。 其中，优选使用热水进行提取。作为所述枣提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述枣提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选200 μ g/mL 400 μ g/mL。(枸杞提取物)所述拘祀是前科拘祀属落叶灌木,学名为Lycium Chinese。所述拘祀分布于日本、朝鲜、中国、台湾等，从这些地区能够容易地得到。所述枸杞的果实除了泡在酒中制作枸杞酒外，还可作为生食、干果或药膳广泛用于粥等中。另外，所述枸杞的柔软嫩叶被广泛用于食用。作为所述枸杞的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、树枝部、树干部、树皮部、花部、果实部、根部等，但其中，优选果实部。作为所述枸杞的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述枸杞提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述枸杞提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述枸杞的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述枸杞的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述枸杞的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述枸杞的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述枸杞的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述枸杞的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述枸杞提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述枸杞提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选100 μ g/mL 400 μ g/mL。(洋甘菊提取物)所述洋甘菊是菊科母菊属的耐寒性一年生草本，学名为Matricaria chamomilla(别名:甘菊(chamomile))。所述洋甘菊的原产地为欧洲至西亚地区，从这些地区能够容易地得到。所述洋甘菊的叶为羽状复叶，花的直径为3cm左右，中心的管状花为黄色，舌状花为白色，具有类似于苹果的特有强烈香味。所述洋甘菊被用作胃药、发汗药、消炎药、妇科药
等的草药。作为所述洋甘菊的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、花部、果实部、根部等，但其中，优选花部。作为所述洋甘菊的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。 所述洋甘菊提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述洋甘菊提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述洋甘菊的提取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述洋甘菊的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述洋甘菊的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述洋甘菊的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述洋甘菊的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述洋甘菊的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述洋甘菊提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。作为所述洋甘菊提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选200 μ g/mL 400 μ g/mL。(假叶树提取物)所述假叶树是百合科假叶树属多年生常绿灌木，学名为Ruscus aculeatus (日语名称:f ￥ 4力夕''，别名:假叶树)。所述假叶树的原产地是欧洲，从这些地区能够容易地得至IJ。所述假叶树为雌雄异株，自春至夏开花，到冬天结红色的果实。所述假叶树的叶发生退化，末端的茎如叶一样扁平，前端有尖锐的刺。作为所述假叶树的提取部位，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举叶部、茎部、花部、果实部、根部、根茎部等，但其中，优选根茎部。作为所述假叶树的提取部位的制备方法，可以将各部位干燥后，直接或使用粗碎机粉碎后提供给溶剂提取而得到。所述干燥，可以用太阳进行晒干，也可以使用通常所用的干燥机。所述假叶树提取物可以通过一般用于植物提取的方法容易地得到。作为所述假叶树提取物，无特别限定，可以根据目的进行适当地选择，例如，可列举提取液的稀释液、浓缩液、提取液的干燥物等。作为所述假叶树的提 取方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举如下方法等，如将作为提取原料的所述假叶树的上述提取部位放入填满提取溶剂的加工槽中，根据需要进行适当搅拌，同时溶出可溶性成分，然后过滤除去提取残渣而得到提取液。作为所述假叶树的提取条件(提取时间及提取温度)，及所述假叶树的提取溶剂的用量，无特别限定，可以根据目的进行适当选择。作为所述假叶树的提取溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举水、亲水性溶剂或它们的混合溶剂。作为所述水，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举纯水、自来水、井水、矿泉水、矿物水、温泉水、泉水、淡水、纯净水、热水、去离子水、生理盐水、磷酸缓冲液、磷酸缓冲生理盐水等。作为所述亲水性溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇等碳原子数I 5的低级醇；丙酮、甲基乙基酮等低级脂肪酮；1，3- 丁二醇、丙二醇、甘油等碳原子数2 5的多元醇等。作为所述混合溶剂，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选地，在使用低级醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份；在使用低级脂肪酮的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 40质量份；在使用多元醇的情况下，相对于10质量份的水添加I质量份 90质量份。另外，所述假叶树的提取溶剂，优选在室温至溶剂的沸点以下的温度下使用。其中，优选使用热水进行提取。作为所述假叶树提取物的提纯方法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举液-液分布提取法、各种色谱法、膜分离法等提纯方法。
作为所述假叶树提取物的浓度，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，但优选50 μ g/mL 200 μ g/mL,更优选 100 μ g/mL 200 μ g/mL。(其他成分)作为上述其他成分，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举赋形剂、防潮剂、防腐剂、强化剂、增稠剂、乳化剂、抗氧化剂、甜味剂、酸味剂、调味剂、着色剂、香料等、增白剂、保湿剂、油性成分、紫外线吸收剂、表面活化剂、增稠剂、醇类、粉末成分、着色材料、水性成份、水、皮肤营养剂等。另外，作为上述其他成分，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，具体地，可以列举透明质酸、透明质酸水解物、胶原蛋白、胶原蛋白水解物、抗坏血酸、抗坏血酸衍生物、抗坏血酸糖甙、辅酶Q10、蜂胶、蜂王浆、蜂王浆蛋白水解物、褐藻糖胶(fucoidan)、芦荟粉、芦荟提取物、蓝莓粉、蓝莓提取物、异黄酮、诺丽粉、诺丽果提取物、大蒜粉、大蒜提取物、姜黄粉、壳聚糖、葡萄糖胺、小球藻粉、小球藻提取物、肉毒碱、玛咖粉、玛咖提取物、黑醋栗粉、黑醋栗提取物、绣球菌粉、绣球菌提取物及其他对美容有效的植物的粉末和/或提取物等。(用途)由于本发明的Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂、以及药物组合物具有优异的Tie2活化作用、血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用，因此可用作以肿瘤、慢性风湿性关节病、糖尿病性视网膜病变、高脂血症、高血压等血管病变为主的疾病、特应性皮炎及花粉过敏等过敏性疾病的药物，以及适合用作关于这些疾病的安全的预防药物，作为其添加量、用法及剂型，可根据其使用目的进行适当选择。由于已确认了本发明的Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂为非消化道消化，因此可适用于美容用食品和饮料、健康用食品和 饮料等，作为其添加量、用法及剂型，可以根据其使用目的进行适当选择。作为上述添加量，可以根据提取物的生理活化等进行适当调整，换算成所述山楂提取物、所述杨桃提取物、所述艳山姜提取物、所述莲提取物、所述博士茶提取物、所述印度枣提取物、所述木瓜提取物、所述番石榴提取物、所述荜茇提取物、所述皂树提取物、所述黄杞提取物、所述银杏提取物、所述牡蛎提取物、所述姜黄提取物、所述菊提取物、所述枣提取物、所述枸杞提取物、所述洋甘菊提取物及所述假叶树提取物中至少任意一种的提纯物，优选为0.0001质量％ 20质量％，更优选为0.0001质量％ 10质量％。作为上述用法，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如，可以列举经口、非经口、外用等给药方式。作为上述剂型，无特别限定，可以根据目的进行适当选择，例如可以列举片剂、粉齐 、胶囊剂、颗粒剂、提取溶剂及糖浆剂等经口给药剂，注射剂、点滴剂及栓剂等非经口给药齐U，软膏、乳霜、乳液、洗涤剂、面霜y及沐浴剂、头发化妆品等外用剂等。实施例下面，对本发明的实施例进行说明，但本发明并不限定于这些实施例。[试验例1:Tie2活化作用(蛋白质印迹法)试验]
(实施例1:山楂提取物)通过检测磷酸化后的Tie2蛋白质的量来评价上述山楂提取物的药理作用。关于所述磷酸化后的Tie2蛋白质的量，通过使用SDS-PAGE及蛋白质印迹法的免疫化学方法进行检测。其步骤如下所示。首先，在6孔培养板(6well culture plate)上接种2X IO5人脐静脉内皮细胞(HUVEC),使用Humedia EG2培养基(仓敷纺绩公司生产)，在37°C的CO2恒温箱内培养12小时。除去培养液，用PBS洗涤细胞，在RPM1-1640培养基(SIGMA公司生产、R-8755)中培养2小时。使用DMSO溶解山楂提取物(果实部)(丸善制药株式会社生产、山楂提取物粉末MF)，使其最终浓度为100 μ g/mL,并添加至所述培养基中。培养10分钟后，将细胞在冰上冷却，用冷PBS洗漆。在含有蛋白质分解酶抑制剂(亮抑酶肽(Leupeptin),抑酶肽(Aprotinin),胃蛋白酶抑制剂(P印statin)，PMSF, Na3VO4)的RIPA缓冲剂(buffer)中，对细胞进行超声波粉碎。添加样品缓冲液(sample buffer) (0.2MTris-HCl (pH6.8)、4 质量 ％SDS、20 质量％甘油、5mM EDTA、0.01质量％BPB)，得到试样I。使用得到的试样1，在下述条件下进行SDS-PAGE (7.5质量％聚丙烯酰胺凝胶，12孔，NPU-7.5L，ATTO株式会社生产)。.凝胶:7.5质量％丙烯酰胺凝胶(NPU-7.5L，ATTO株式会社生产).电泳条件:40mA (75分钟，2张凝胶).Phospho-Tie2 抗体:# 4221 (Cell Sigma 社生产)接着使用蛋白质印迹法(Western blotting)(20V, 4°C,整夜)转录至PVDF膜上。使用5质量％的脱脂牛奶/TBST进行封端(I小时)。然后，添加磷酸化Tie2(Cell Signaling,□ 4221)，在室温下放置I小时。接着添加山羊抗兔Ig’ s HRP (BIOSOURCE ALI3404)，在室温下放置I小时。通过化学发光检测(ECL)，检测出蛋白质带(〃> F)。结果表示在图1中(实施例2:杨桃提取物)通过检测磷酸化后的Tie2蛋白质的量，评价上述杨桃提取物的药理作用。关于所述磷酸化后的Tie2蛋白质的量，通过使用SDS-PAGE及蛋白质印迹法的免疫化学方法进行检测。其步骤如下所示。使用在小鼠pro-B细胞(Ba/F3)上使人Tie2 (Ba/F3_人Tie2)过量表达的细胞，进行Tie2磷酸化解析。小鼠pro-B细胞的刺激是通过在37°C下，在普通培养用培养基(10%FBS RPMI1640 (SIGMA公司生产，R-8755)+lpg/mL小鼠IL-3)中添加规定浓度(图2所述的浓度，浓度单位:μ g/mL)杨桃提取物(丸善制药株式会社生产,杨桃叶提取物粉末-MF)(浓度单位:μ g/mL)来进行的。经过15分钟后，用冷PBS洗涤细胞，使用RIPA裂解缓冲液(lysis buffer)(50mM Tris-HCl (ρΗ7.5)、150mM NaCl、I 质量 ％ΝΡ_40、0.5 质量 ％脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate)、0.1质量％SDS)回收细胞提取液。使细胞提取液在
7.5质量％SDS凝胶(NPU-7.5L，ATTO株式会社生产)中进行电泳，并转录至尼龙膜(nylonmembranes)上。使用5质量％的脱脂牛奶/TBST对非特异性蛋白进行60分钟的阻断，使用抗-Tie2抗体(Ab33:Upstate公司生产)、抗磷酸化_Tie2抗体(Tyr992:细胞信息技术公司(Cell Signaling Technology公司)生产)对转录的尼龙膜进行封端。接着,使用HRP标记的二次抗体进行封端，通过电化学发光(ECL)溶液，使得到的反应物的蛋白质带可视化，并摄影。结果表示在图2中。
(实施例3:艳山姜提取物)除了将实施例2中的所述杨桃提取物变更为艳山姜提取物(丸善制药株式会社生产，艳山姜叶干燥提取物F)，并使用图2所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2相同，进行试验。结果表示在图2中。(实施例4:莲提取物)除了将实施例2中的所述杨桃提取物变更为莲提取物(丸善制药株式会社生产，莲子提取物粉末-MF)，并使用图2所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2相同，进行试验。结果表示在图2中。(实施例5:博士茶提取物)除了将实施例2中的所述杨桃提取物变更为博士茶提取物(丸善制药株式会社生产，博士茶干燥提取物F)，并使用图3所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2相同，进行试验。结果表示在图3中。(实施例6:印度枣提取物)除了将实施例2中的所述杨桃提取物变更为印度枣提取物(丸善制药株式会社生产，印度枣提取物粉末MF)，并使用图4所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2相同，进行试验。结果表示在图4中。(实施例7:木瓜提取物)除了将实施例2中的所述杨桃提取物变更为木瓜提取物(丸善制药株式会社生产，木瓜提取物粉末MF)，并 使用图5所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2相同，进行试验。结果表示在图5中。(实施例8:番石榴提取物)除了将实施例2中的所述杨桃提取物变更为番石榴提取物(丸善制药株式会社生产，番石榴干燥提取物F)，并使用图5所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2相同，进行试验。结果表示在图5中。(实施例9:荜茇提取物)通过检测磷酸化后的Tie2蛋白质的量，评价上述荜茇提取物的药理作用。关于所述磷酸化后的Tie2蛋白质的量，通过使用SDS-PAGE及蛋白质印迹法的免疫化学方法进行检测。其步骤如下所示。使用人胳静脉内皮细胞(Humanumbilical vein endothelial cells:HUVECs)进行Tie2磷酸化分析。基于Angl及待检测体的HUVEC刺激，首先将细胞在含有1%FBS的RPM1-1640培养液中培养3小时。然后，以各种浓度添加检测体，20分钟后用冷PBS洗涤细胞，使用 RIPA 裂解缓冲液(lysis buffer) (50mM Tris-HCl (ρΗ7.5) ；150mM NaCl ;1 质量％NP_40 ；0.5质量％脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate) ；0.1质量％SDS)回收细胞提取液。使细胞提取液在7.5质量％SDS凝胶中进行电泳,并转录至尼龙膜(nylon membranes)上。使用5质量％脱脂牛奶/TBST对非特异性蛋白进行60分钟的阻断，使用抗-Tie2抗体(Ab33 =Upstate公司生产)、抗磷酸化_Tie2抗体(Tyr992:细胞信息技术公司生产)对转录的尼龙膜进行封端。接着，使用HRP标记的二次抗体进行封端，使用电化学发光(ECL)溶液，使得到的反应物的蛋白质带可视化，并摄影。使用Las3000-mini的Malti Guage-1mage软件测定带的浓度，以P_Tie2 (各检测体)/p_Tie2 (对照)进行计算。结果表示在图6中。
(比较例1:桂皮提取物)除了将实施例1中的所述山楂提取物变更为桂皮提取物(丸善制药株式会社生产，桂皮提取物粉末MF)以外，与实施例1相同，进行试验。此外，使用DMSO将所述桂皮提取物(丸善制药株式会社生产，桂皮提取物粉末MF)的最终浓度调节为100 μ g/mL。结果表示在图1中。(参考例1:阳性对照)除了将实施例1中的所述山楂提取物变更为血管生成素-1 (Angiopoietin-1)(R&D系统公司生产)作为阳性对照以外，与实施例1相同，进行试验。此外，使用DMSO将所述血管生成素-1 (R&D系统公司生产)的最终浓度调节为300ng/mL。结果表示在图1中。(参考例2:阴性对照)除了将实施例1中的所述山楂提取物变更为二甲基亚砜(DMSO)作为阴性对照以夕卜，与实施例1相同，进行试验。结果表示在图1中。(参考例3:阳性对照)除了将实施例2 9中的各提取物变更为血管生成素-1 (Angiopoietin-1) (R&D系统公司生产)作为阳性对照，并使用各图所示的浓度(浓度单位:μ g/mL)以外，与实施例2 9相冋,进彳丁试验。结果表不在各图中。(参考例4:阴性对照)除了将实施例2 9中的各提取物变更为二甲基亚砜(DMSO)作为阴性对照以外，与实施例2 9相同，进行试验。 结果表 示在各图中。[试验例1:试验结果]对Tie2活化作用(蛋白质印迹法)的试验结果进行说明。图1 图6表示由蛋白质印迹法检测出的各试样中磷酸化的Tie2蛋白质带。检测出的带的浓度，与磷酸化的Tie2蛋白质的量成正比。带越浓，表示磷酸化的Tie2蛋白质的量越多。由图1可知，实施例使用的山楂提取物与血管生成素-1相同，可引起Tie2的显著磷酸化。虽然从前报道有可使Tie2磷酸化的桂皮也确认可诱发Tie2磷酸化，但山楂提取物可更强地诱发活化。另一方面，在添加了作为阴性对照的DMSO的体系中，实际上没有确认到Tie2的磷酸化。另外，使用Tie2抗体(Santa Cruz, sc_324)的蛋白质印迹法中，Tie2的表达量自身与全部试样相同。另外，由图4 图6可知，番石榴提取物、印度枣提取物及荜茇提取物可诱发Tie2活化达到作为生理活性物质的血管生成素-1的程度。其中，印度枣提取物即使在低浓度下也可达到与血管生成素-1相近的活化水平。由图2 3及图5可知，杨桃提取物、艳山姜提取物、博士茶提取物、莲提取物及木瓜提取物，虽然Tie2活化水平弱，但确认到可诱发Tie2活化。此外，番石榴提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、博士茶提取物及莲提取物，使用HUVEC进行了蛋白质印迹法，但得到的结果与本次分析结果相同。由上可知，对于实施例中所使用的提取物，可以确认到诱发Tie2的活化。[试验例2:Tie2活化作用(免疫分析法)试验](实施例10:山楂提取物)
通过检测磷酸化后的Tie2蛋白质的量，评价上述山楂提取物的药理作用。关于所述磷酸化的Tie2蛋白质的量，通过使用免疫分析法的免疫化学方法进行检测。其步骤如下所示。首先，将培养至满培养皿的正常人脐静脉内皮细胞(HUVEC)以2.0XlO4细胞/0.1mL/孔接种至96孔板中，使用低血清血管内皮细胞增殖用培养基(仓敷纺织株式会社生产、Humedia-EG2)培养一夜。接着，将培养一夜后的所述HUVEC在进行细胞刺激(添加待试试样)3小时前转移至0.1mL血管内皮细胞基础培养基(仓敷纺织株式会社生产、Humedia-EB2)中，再次进行培养。然后，在所述孔内添加0.1mL作为待试试样的以所述Humedia-EB2调节至表I所示浓度的山楂提取物(叶部)(丸善制药株式会社生产，山楂叶提取物粉)，进行10分钟培养。培养后，使用免疫检测试剂盒(R&D系统公司生产HumanPhospho-Tie2 (Y992)免疫分析)，根据实验计划，测定细胞内的磷酸化型Tie2量及总Tie2量，计算磷酸化型Tie2相对于总Tie2的比例。另外，关于用作阴性对照的二甲基亚砜(DMS0)，同样计算磷酸化型Tie2相对于总Tie2的比例。接着，根据下述公式(I)计算Tie2活化率，评价磷酸化作用。结果表示在表I中。Tie2活化率(％) = [ {(添加待试试样时的磷酸化型Tie2的测定值)/ (添加待试试样时的总Tie2的测定值)} / {(阴性对照中磷酸化型Tie2的测定值)/ (阴性对照中总Tie2的测定值)}] XlO0...式(I)(实施例11:杨桃提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为杨桃提取物(丸善制药株式会社生产，杨桃叶提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例12:艳山姜提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为艳山姜提取物(丸善制药株式会社生产，艳山姜叶干燥提取物F)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例13:莲提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为莲提取物(丸善制药株式会社生产，莲子提取物粉末MF)，并使用表I所示浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例14:博士茶提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为博士茶提取物(丸善制药株式会社生产，博士茶干燥提取物F)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例15:印度枣提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为印度枣提取物(丸善制药株式会社生产，印度枣提取物粉末MF)，并使用表I所示浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中 。(实施例16:木瓜提取物)
除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为木瓜提取物(丸善制药株式会社生产，木瓜提取物粉末MF)，并使用表I所所示浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例17:番石榴提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为番石榴提取物(丸善制药株式会社生产，番石榴干燥提取物F)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例18:荜茇提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为荜茇提取物(丸善制药株式会社生产，荜茇提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例19:皂树提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为皂树提取物(丸善制药株式会社生产)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例20:黄杞提取物)
除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为黄杞提取物(丸善制药株式会社生产，黄杞叶提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例21:银杏提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为银杏提取物(丸善制药株式会社生产，银杏叶干燥提取物F)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例22:牡蛎提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为牡蛎提取物(丸善制药株式会社生产，牡蛎提取物粉末)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例23:姜黄提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为姜黄提取物(丸善制药株式会社生产，姜黄浓缩提取物粉末M)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例24:菊提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为菊提取物(丸善制药株式会社生产，菊花提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例25:枣提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为枣提取物(丸善制药株式会社生产，枣提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(实施例26:枸杞提取物)
除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为枸杞提取物(丸善制药株式会社生产，枸杞子提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例27:洋甘菊提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为洋甘菊提取物(丸善制药株式会社生产，洋甘菊提取物粉末MF)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表不在表I中。(实施例28:假叶树提取物)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为假叶树提取物(丸善制药株式会社生产，假叶树提取 液)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。(参考例5:阳性对照)除了将实施例10中的所述山楂提取物变更为作为阳性对照的血管生成素-1 (R&D系统公司生产)，并使用表I所示的浓度以外，与实施例10相同，进行试验。结果表示在表I中。[表 I]
权利要求
1.一种Tie2活化剂，其特征在于，其含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物作为有效成分。
2.—种血管生成抑制剂，其特征在于，其含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物作为有效成分。
3.—种血管成熟剂、血管正常化剂或血管稳定剂，其特征在于，其含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物作为有效成分。
4.一种血管内皮生长因子抑制剂，其特征在于，其含有山楂提取物作为有效成分。
5.一种药物组合物，其特征在于，其含有权利要求1所述的Tie2活化剂、权利要求2所述的血管生成抑制剂、权利要求3所述的血管成熟剂、血管正常化剂及血管稳定剂、权利要求4所述的血管内皮生长因子·抑制剂中的至少任意一种。
全文摘要
本发明提供一种具有优异的Tie2活化作用、血管内皮生长因子(VEGF)抑制作用、血管生成抑制作用、血管成熟化作用、血管正常化作用及血管稳定化作用且安全性高的Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂，血管稳定剂以及药物组合物。所述Tie2活化剂、血管内皮生长因子(VEGF)抑制剂、血管生成抑制剂、血管成熟剂、血管正常化剂、血管稳定剂以及药物组合物，它们含有山楂提取物、杨桃提取物、艳山姜提取物、莲提取物、博士茶提取物、印度枣提取物、木瓜提取物、番石榴提取物、荜茇提取物、皂树提取物、黄杞提取物、银杏提取物、牡蛎提取物、姜黄提取物、菊提取物、枣提取物、枸杞提取物、洋甘菊提取物及假叶树提取物中的至少任意一种提取物为有效成分。
文档编号A61K36/28GK103249422SQ201180058079
公开日2013年8月14日 申请日期2011年10月28日 优先权日2010年12月2日
发明者大户信明, 木曾昭典 申请人:丸善制药株式会社