替莫唑胺纳米缓释微球及其制备方法
【专利摘要】本发明涉及替莫唑胺纳米缓释微球及采用自组装方式制备替莫唑胺纳米缓释微球的方法，特别涉及一种以树枝状大分子聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron-聚L-丙交酯为材料、以分子自组装的方式制备替莫唑胺载药纳米缓释微球的方法。该方法制备得到的替莫唑胺载药微球的平均粒径为100nm~1000nm，可根据临床的需要，通过替莫唑胺和聚合物投料比的调节、内相和外相溶剂的选择、温度和pH值的控制、洗涤方式等，得到的纳米微球最优载药量可达85%以上，并且具有缓释、缓释靶向功能。
【专利说明】替莫唑胺纳米缓释微球及其制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及化工制药领域，更进一步地是涉及替莫唑胺纳米缓释微球及以分子自组装方式制备替莫唑胺纳米缓释微球的方法。
【背景技术】
[0002]替莫唑胺是近年来出现的用于治疗脑胶质瘤和恶性黑色素瘤的新型药物，其是由英国Schering-Plough公司首先研发并生产，于1999年8月11日通过FDA批准在美国上市，其化学名为3，4-二氢-3-甲基-4-氧代咪唑并[5，l-d]-l，2，3，5-四嗪_8_酰胺，微溶于水，pH < 5下稳定，pH > 7时易分解。该药物的优点是可口服，可以透过血脑屏障，具有广谱的抗肿瘤性，与其它药物没有叠加毒性，是目前单药疗效最好的脑胶质瘤化疗药物。但是在临床研究中发现，替莫唑胺的半衰期只有1.3小时左右，在脑内难以维持有效的药物浓度，且口服剂量通常较大，治疗时产生一定的副作用，因此临床应用上受到了一定的限制。各种缓释药物制剂的开发，为脑胶质瘤局部缓释化疗提供了条件，其中缓释纳米微球(胶囊)就是一种很好的缓释药物制剂，替莫唑胺制成缓释微球后，可以降低给药频率，提高病变部位的药物浓度，极大减少替莫唑胺对病人产生的毒副作用，提高疗效。临床上由于给药方式的不同，对微胶囊粒径大小有着显著不同的要求，脑部植入、经肺吸入和静脉注射是替莫唑胺较为理想的给药方式。
[0003]国内外有许多研究者对替莫唑胺药物载体进行了研究，总体的效果都不理想，虽然有的载体体外释放时间可达到30天以上，但这些微球的粒径都比较大，只能口服，或作为植入体内使用 ；而粒径小于1000nm (在医学上，可归入纳米微球的范围)可通过血液输送的，则都载药量低，释放速度快。例如，Michael Aiello等使用羟丙基纤维素-聚丙烯酸-硒化镉混合凝胶制成的替莫唑胺载药颗粒和使用Ag-Au双金属纳米粒子同PEG修饰的羟丙基纤维素聚丙烯酸水凝胶制成的替莫唑胺载药颗粒，其粒径均小于lOOnm，载药量分别达到了55.4%和46.2%，但是其释放速度很快，在2h内释放80%，这是因为替莫唑胺分子的酰胺基和混合凝胶的羟基、羧酸基之间的络合作用，由于是化学键的作用，所以载药量会有所提高但释放会很难控制，很难达到缓释的要求。而张翮，高申等使用聚乳酸羧基醋酸TM饱和水制备的替莫唑胺载药颗粒，粒径124.4 μ m，载药量仅为7.47%。
【发明内容】
[0004]本发明可针对不同的给药方式，制备出不同粒径大小、不同载药量和不同缓释速度的替莫唑胺纳米缓释微球。制成的替莫唑胺纳米缓释微球可以解决目前替莫唑胺原料药对病患者疗效不佳的问题，以及克服文献报道中的替莫唑胺缓释制剂载药量低、释放较快且不稳定的缺点，期望为肿瘤患者提供一种有实际疗效的药物制剂，使众多肿瘤患者能得到有效的治疗。
[0005]一种替莫唑胺纳米缓释微球，其采用自组装的方式制备得到，该纳米微球最高载药量可达85%以上，并且具有缓释、缓释靶向功能，在体内具有长效缓释特点，可以应用于局部而有效地降低全身的毒副作用。
[0006]为达到上述目的，本发明采用以下技术方案:
一种替莫唑胺纳米缓释微球，其有效成分包含替莫唑胺，此外其载药体为树枝状大分子聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯。
[0007]优选的是，聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的平均粒径为 100-1000nm。
[0008]如上所述的替莫唑胺载药纳米缓释微球采用透析法制备，其制备方法包含有以下步骤: (1)将替莫唑胺与聚合物(聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯)溶于内相溶剂中作为油相；
(2)将油相放入外相溶剂中进行透析处理；
(3)透析后，待内相溶剂挥发完毕，得到载药胶束溶液；
(4)将替莫唑胺载药胶束溶液进行分离，得到的沉淀物洗涤后冷冻干燥制成得到替莫唑胺载药纳米缓释微球干粉。
[0009]如上所述的制备方法，优选的是，步骤(1)中替莫唑胺与聚合物(聚L-丙交酯_dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯)的质量比例为10-100:100。
[0010]如上所述的制备方法，优选的是，步骤(2)的透析处理过程中，其处理条件为温度10-38°C。更优选的是，步骤(2)的透析处理过程中，其处理条件为温度15-35°C。
[0011]如上所述的制备方法，优选的是，步骤(2)的透析处理过程中，其处理条件为pH为3.5-7。更优选的是，步骤(2)的透析处理过程中，其处理条件为pH为4-5。
[0012]如上所述的制备方法，优选的是，步骤(3)采用减压干燥促进内相溶剂的挥发。更有选的是，在真空恒温烘箱内减压干燥。
[0013]如上所述的干燥，还可以为其它任一常见的方法干燥。
[0014]作为一优选的实施方式，替莫唑胺载药纳米缓释微球的制备方法包含有以下步骤:
(1)将替莫唑胺与聚合物(聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯)按10-100:100溶于内相溶剂中，超声混均后作为油相，其中超声功率为Ι-lOOOw，超声时间为 0.1-1Omin ；
(2)将油相放入透析袋后，将透析袋放入外相溶剂中，在一定搅拌速度和温度的恒温水浴中透析，所述温度为10-40°C，搅拌速度为30-1000r/min，所述的外相溶剂，其体积为内相溶剂的1-10倍，pH为4-5，透析8-24个小时；
(3)透析后，再减压干燥至内相溶剂挥发完毕后，透析袋内得到载药胶束溶液；
(4)将替莫唑胺载药胶束溶液进行分离，除去上层清液，将得到的沉淀物洗涤后，冷冻干燥制成得到替莫唑胺载药纳米缓释微球干粉。
[0015]如上所述的替莫唑胺载药微球，其平均粒径为lOO-lOOOnm，载药量最高可达85%以上。
[0016]如上所述的聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯,其分子结构式通式为P(pllay-gx-pegz-gx-pllay)表示，其中x为树状高分子的合成代数，Y代表聚乳酸链的相对分子量，Z代表PEG的相对分子量，聚乙二醇(PEG)的分子量为1000-30000 ；合成代数X=2~6 ;聚乳酸链的分子量Υ=500-50000。例如，Χ=4,分子量为10000的PEG两端各接有16个PLLA接枝链段，每个链段R的分子量Υ=18000，其化学结构式为:
【权利要求】
1.一种替莫唑胺纳米缓释微球，有效成分包含替莫唑胺，其特征在于:载药体为树枝状大分子聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯。
2.如权利要求1所述的替莫唑胺纳米缓释微球，其特征在于:聚L-丙交酯-dendron-聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的平均粒径为100-1000nm。
3.制备如权利要求1或2所述的替莫唑胺载药纳米缓释微球方法，其采用透析法制备，所述制备方法包含有以下步骤: 将替莫唑胺与聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯溶于内相溶剂中作为油相； 将油相放入外相溶剂中进行透析处理； 透析后，待内相溶剂挥发完毕，得到载药胶束溶液； 将替莫唑胺载药胶束溶液进行分离，得到的沉淀物洗涤后干燥制成得到替莫唑胺载药纳米缓释微球干粉。
4.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:步骤(1)中替莫唑胺与聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的质量比例为10-100:100。
5.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:步骤(2)的透析处理过程中，其处理条件为温度10-38°C。
6.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:步骤(2)的透析处理过程中，其处理条件为PH3.5-7。
7.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:制备得到的替莫唑胺纳米缓释微球的平均粒径为100-1000nm。
8.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:聚L-丙交酯-dendron -聚乙二醇-dendron -聚L-丙交酯的分子结构式通式为P (PLLAY-Gx-PEGz-Gx-PLLAY)表示，其中，合成代数X=2~6 ;聚乳酸链的分子量y=500-50000 ；聚乙二醇的分子量Ζ=1000-30000。
9.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:内相溶剂为四氢呋喃、丙酮、甲醇和乙腈中的一种或几种。
10.如权利要求3所述的替莫唑胺纳米缓释微球的制备方法，其特征在于:外相溶剂为水、饱和替莫唑胺的水溶液、甲醇、乙醇、丙醇和异丙醇中的一种或几种。
【文档编号】A61P35/00GK103961321SQ201310040194
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2013年2月1日 优先权日:2013年2月1日
【发明者】戎宗明, 钟平, 范霄宇, 龚飞荣, 徐健, 程树军 申请人:华东理工大学, 复旦大学附属华山医院