专利名称：一种强心苷化合物的新用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及强心苷化合物,具体涉及一种强心苷化合物12 β -hydroxycalotropin及其用途。
背景技术：
肿瘤对人类健康和生命的威胁很大，它和心血管疾患已成为医学上的两大难关，在全世界构成死亡原因的头两位。全世界52亿人口中，每年约有700万人新患肿瘤，每年约有500多万人死于肿瘤，几乎每6秒钟就有一名肿瘤患者死亡。我国目前每年平均约有150万人新患肿瘤，每年约有80万人死于肿瘤。现有的抗肿瘤药物都不能彻底有效地治愈。同时由于新型肿瘤的不断发现，迫使人们努力寻找新的抗肿瘤药物。长期以来，从药用植物尤其是热带药用植物中寻找抗肿瘤药物成为各国医学、药学、化学及生物学家的一个共同愿望。研究表明，抗肿瘤药物70%来源于热带或亚热带植物。继长春花新碱之后，紫杉醇及其衍生物Epothilones的发现，使此项工作取得了突破性的进展。然而，由于有些抗肿瘤成分在植物体内含量极低，有些植物还是濒危珍稀物种，且植物生长缓慢，过度采挖可能导致该物种的灭绝，这些因素限制了抗肿瘤植物药的发展。牛角瓜\_Calotropis gigantea (L.) Dryand ex Ait.f.]为萝蘑科(Asclepiadaceae)牛角瓜属iCalotropis)植物。在我国主要分布于海南、广东、四川和云南等地。牛角瓜全株有毒，其根、茎、叶、花、果及各部位的白色汁液均可药用，具有抗菌、消炎、驱虫、化痰、解毒等功效，是一种民间常用药。国内外研究表明牛角瓜主要含强心苷类化合物，为其毒性成分。但是关于牛角瓜中的强心苷化合物12 β -hydroxycalotropin是否具有抗肿瘤作用目前还 是未知的。
发明内容
本发明的目的在于提供一种强心苷化合物12 β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途。本申请发明人对牛角瓜中的强心苷类化合物12 β -hydroxycalotropin进行了提取、分离、纯化和抗肿瘤活性测试发现，该牛角瓜中的强心苷化合物12 β -hydroxycalotropin具有抗肿瘤的新用途。本发明的上述目的是通过如下技术方案来实现的:强心苷化合物12 β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途,所述强心苷化合物12 β-hydroxycalotropin的分子式为C29H4tlOltl,结构式如下:
权利要求
1.强心苷化合物12β-hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，所述强心苷化合物12 β-hydroxycalotropin的分子式为C29H4tlOltl,结构式如下:
2.根据权利要求 1所述的强心苷化合物12β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，其特征是:所述肿瘤为胆管癌、肾癌、胰腺癌、结肠直肠癌、膀胱癌、乳腺癌、子宫癌、卵巢癌、大肠癌、肝癌、胆癌、胆道癌、急性白血病、恶性淋巴瘤、脑瘤、骨肿瘤、黑素瘤、神经胶质瘤、口腔癌、鼻咽癌、肺癌或胃癌。
3.根据权利要求1所述的强心苷化合物12β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，其特征是:所述强心苷化合物12 β-hydroxycalotropin的制备方法如下: A、选取牛角瓜茎，粉碎后，加入乙醇，浸提3 4次，每次6 8天，合并浸提液，减压浓缩至无醇味得到牛角瓜的乙醇提取物； B、将牛角瓜的乙醇提取物分散于水中制成牛角瓜悬浊液，分别按牛角瓜悬浊液与石油醚的体积比为1:3、1:2和1:1，用石油醚对牛角瓜悬浊液重复萃取后，保留石油醚萃取后的水相； C、将石油醚萃取后的水相过滤，将滤液用D-1Ol大孔吸附树脂柱色谱分离，并依次用水和甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，减压浓缩回收甲醇后，得到甲醇浸膏； D、将甲醇浸膏经减压硅胶柱层析，以氯仿与甲醇的体积比分别为100:1、50:1、25:1、10:1、5:1、2:1和0:100作为洗脱剂，对减压硅胶柱进行梯度洗脱，分别得粗提物Fr.1 Fr.7 ； E、将步骤D所得粗提物Fr.4经硅胶柱层析，以氯仿与甲醇的体积比分别为10:1、8: 1、6:1、4:1、2:1、0:1作为洗脱剂，对硅胶柱进行梯度洗脱，得到6个部分Fr.4_fFr.4-6 ； F、将E步骤的Fr.4-2经硅胶柱层析，采用氯仿和丙酮作为洗脱剂进行洗脱，洗脱时采用TLC薄层色谱收集相同的成分，得到6个部分Fr.4-2-rFr.4-2-6 ;将Fr.4-2-3依次进行Sephadex LH-20凝胶柱层析、反相柱层析、以及再次硅胶柱层析，最终得到强心苷化合物12β —hydroxycalotropin。
4.根据权利要求1所述的强心苷化合物12β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，其特征是:步骤A中牛角瓜茎与乙醇的质量体积比为Ikg:1 3L ;所述乙醇的体积百分含量为92 98%。
5.根据权利要求1所述的强心苷化合物12β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，其特征是:步骤B中用石油醚对牛角瓜悬浊液重复萃取3次后，保留石油醚萃取后的水相。
6.根据权利要求1所述的强心苷化合物12β -hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，其特征是:步骤F中氯仿和丙酮的体积比为4:5 ;凝胶柱层析时采用的凝胶柱为Sephadex LH-20凝胶柱，凝胶柱层析时洗脱溶剂采用体积百分含量为95%的乙醇；再次硅胶柱层析时采用的洗脱溶剂为体积比为11:1:1的氯仿、甲醇和丙酮混合溶剂 。
全文摘要
本发明公开了强心苷化合物12β-hydroxycalotropin在制备具有治疗和预防肿瘤作用的药物中的用途，该强心苷化合物12β-hydroxycalotropin具有显著的抗肿瘤活性，可作为治疗肿瘤的先导化合物；同时，本发明提供的强心苷化合物12β-hydroxycalotropin的提取分离方法简单易行，成本低，效率和得率高，提取物质量好。
文档编号A61P35/00GK103191143SQ20131012421
公开日2013年7月10日 申请日期2013年4月11日 优先权日2013年4月11日
发明者王茂媛, 晏小霞, 王祝年, 王建荣, 王清隆, 王鹏 申请人:中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所