专利名称：一种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法
一种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法
技术领域：
本发明涉有机化合物制备技术领域。更具体地，本发明涉及一种从烟叶中提取糖 苷类化合物的方法，还涉及采用该制备方法制备的糖苷类化合物。
背景技术：
烟草糖苷类的分析始于70年代末。Green等人发现，烟草中的非挥发性香气前体 以糖苷形式存在，这些物质通过水解释放出一些香气物质，如3-羟基二氢大马酮和3-酮基 紫罗兰醇。随后，Heckman对烤烟中的香气成分及糖苷成分进行了比较，不但验证了 Green 等人的实验结果，还发现烤烟中的苯甲醇、苯乙醇和4-羟基-α-紫罗兰醇等成分，有相当 大一部分是以不挥发的糖苷形式存在。在最初的对化学键结合态物质的研究阶段，Francis和Allcock就公布了单萜组 成的糖苷物质，并且在鉴别植物中存在的非挥发性香味化合物前体物方面进行了很多探 索。特别是Anderson和Gunn，Kodama和Heckman也都分离出烟草中的化学键结合态香气 化合物并对其进行了描述。在决定植物的品种、质量和部位以及技术参数方面，烟草含有大 量的化学键结合态香气化合物。而且，糖苷结合的香气化合物对烟气的香味有正面影响。很 明显配糖的成分是根据香精和烟草的品质而变化的。然而，这些化合物与烟气风味的关系 还没有具体的研究成果。随着提取分离和分析技术的不断进步，发现结合态糖苷类香味前体不具挥发性或 挥发性很低，在加工或储放条件下一般不会挥发损失，但是在燃吸的剧烈条件下，糖苷键断 裂释放出香味成分，对烟气香味产生贡献，这可以避免因直接添加增香剂造成的香味损失 和破坏卷烟的烟草自然香韵等问题，烟草中糖苷类香气前体物质对改善卷烟香气、吃味等 具有显著功效。因此，对于糖苷类物质的作用，香精香料行业已将其作为重要的香气前体来研究， 而对于烟草中的糖苷结合态香味成分的研究并不多见。这可能是由于一方面行业内对糖苷 类香味前体对烟草的香吃味质量的影响，没有引起重视，另一方面，糖苷类物质作为烟叶次 级代谢产物，其种类繁多，并且与寡糖、果胶、氨基酸、色素等物质性质非常接近，难以获得 完整的标样，使用液相色谱法进行定性定量研究，开发应用难度较大。因此，本发明人经过多次试验，提出一种分离烟叶中糖苷键结合态香气化合物的 方法，从而为改善烟叶香气品质、提高烟叶可用性提供参考依据。
发明内容[发明要解决的问题]本发明的目的是提供一种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法。本发明的另一个目的是提供采用所述制备方法制备的糖苷类化合物。[技术方案]为了实现本发明的目的，本发明通过下述技术方案实现。
(1)将烟叶放入提取容器，然后加入乙醚，在常温、常压、搅拌状态下萃取8小时， 过滤分离得到烟叶残渣；(2)往步骤⑴得到的固体烟叶残渣中加入混合溶液，萃取15小时，过滤得到澄清 提取液，并调节提取液PH值至弱碱性；(3)将步骤⑵得到的提取液通过减压蒸馏去除甲醇，并调节残留液pH值；(4)将步骤C3)得到的浓缩液用泵打入色谱柱，然后用水洗涤，接着用甲醇洗脱色 谱柱中的残留化合物；(5)步骤(4)得到的有机溶液进行浓缩，往得到的浓缩液中加入水，然后用乙醚溶 液洗脱三次，去除萃取液后的残留液通过减压蒸发除去乙醚和大部分的水，得到浓缩的糖 苷类化合物水溶液。根据本发明的一种优选实施方式，步骤(1)中萃取所用的乙醚的加入量是烟叶质 量的3-5倍。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤O)中混合溶液由甲醇和水按照质量比 1 1混合而成的，混合溶液的加入量是所述固体烟叶残渣质量的15-20倍。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤O)中使用Na2HPO4将提取液的pH调节 到 7. 1-8. 0。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤(3)中使用浓度为10%的盐酸溶液将残 留液的最终PH值调节到7.0。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤中所用色谱柱为规格200X^mm的 Lichroprep RP-18。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤中，以浓缩液体积计，水的用量是 2-4倍，甲醇的用量是浓缩液体积的0. 2-0. 4倍。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤(5)中往浓缩液中加入水的量是以浓缩 液体积计0. 5-1倍。根据本发明的另一种优选实施方式，步骤(5)中用乙醚洗脱三次，每次50mL。本发明还涉及根据以上制备方法制备的糖苷类化合物。[有益效果]本发明的制备方法在提取烟叶中糖苷类物质方面，工艺操作相对简单，容易实现 工业化，切能耗低，污染小，所得产物纯度较高，适合下游产业应用。
具体实施方式
下面非限制性实施例用于更详细地说明本发明。实施例1一种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法，该方法的步骤如下(1)取40g烟叶放入提取容器，然后加入120ml乙醚，在常温、常压、搅拌状态下萃 取8小时，过滤分离得到烟叶残渣；(2)往步骤(1)得到的烟叶固体残渣中加入IL甲醇与水的混合物，甲醇与水的质 量比为1 1，然后在常规条件下萃取15小时，过滤得到澄清提取液，并用Na2HPO5将提取 液PH值调至7. 1-8. 0 ；
(3)将步骤⑵得到的提取液通过减压蒸馏去除甲醇，并用HCl将残留液的pH值 调至7. 0 ；(4)将步骤(3)得到的浓缩液用泵打入规格200 X 26mm的RP-18柱子(由 Lichroprep公司生产销售)，然后用2L水洗涤，再用200mL甲醇洗脱色谱柱中的残留化合 物；(5)步骤(4)得到的有机溶液进行浓缩，残留液中加入150mL水，然后再用乙醚溶 液洗脱三次，每次50mL，除去干扰香气释放的化合物，除去萃取液后的残留液通过减压蒸发 除去乙醚，剩余水溶液150ml，即为本发明的糖苷类化合物水溶液。实施例2—种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法，该方法的步骤如下(1)取40烟叶放入提取容器，然后加入160mL乙醚，在常温、常压、搅拌状态下萃取 8小时，过滤分离得到烟叶残渣；(2)往步骤(1)得到的烟叶固体残渣中加入1. 2L甲醇与水的混合物，甲醇与水的 质量比为1 1，然后在常规条件下萃取15小时，过滤得到澄清提取液，并用Na2HPO5将提 取液PH值调至7. 1-8. 0 ；(3)将步骤⑵得到的提取液通过减压蒸馏去除甲醇，并用HCl将残留液pH值调 至 7.0 ； (4)将步骤(3)得到的浓缩液用泵打入规格200 X 26mm的RP-18柱子(由 Lichroprep公司生产销售)，然后用2. 5L水洗涤，再用200mL甲醇洗脱色谱柱中的残留化 合物； (5)步骤(4)得到的有机溶液进行浓缩，残留液中加入200mL水，然后再用乙醚溶 液洗脱三次，每次50mL，除去干扰香气释放的化合物，除去萃取液后的残留液通过减压蒸发 除去乙醚，剩余水溶液150ml，即为本发明的糖苷类化合物水溶液。
权利要求
1.一种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法，其特征在于所述方法步骤如下(1)将烟叶放入提取容器，然后加入乙醚，在常温、常压、搅拌状态下萃取8小时，过滤 分离得到烟叶残渣；(2)往步骤(1)得到的固体烟叶残渣中加入混合溶液，萃取15小时，过滤得到澄清提取 液，并调节提取液PH值至弱碱性；(3)将步骤(2)得到的提取液通过减压蒸馏去除甲醇，并调节残留液pH值；(4)将步骤C3)得到的浓缩液用泵打入色谱柱，然后用水洗涤，接着用甲醇洗脱色谱柱 中的残留化合物；(5)步骤(4)得到的有机溶液进行浓缩，往得到的浓缩液中加入水，然后用乙醚溶液洗 脱三次，去除萃取液后的残留液通过减压蒸发除去乙醚和大部分水，得到浓缩的糖苷类化 合物水溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中萃取所用的乙醚的加入量是烟 叶质量的3-5倍。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤O)中混合溶液由甲醇和水按照质量 比1 1混合而成的，混合溶液的加入量是所述固体烟叶残渣质量的15-20倍。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤O)中使用Na2HPOJf所述提取液的 PH 调节到 7. 1-8. 0。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤C3)中使用浓度为10%的盐酸溶液将 所述残留液的最终PH值调节到7. 0。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤中所用色谱柱为规格200X ^toirn 的 Lichropr印 RP-18。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(4)中，以浓缩液体积计，水的用量是 浓缩液体积的2-4倍，甲醇的用量是浓缩液体积的0. 2-0. 4倍。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(5)中往浓缩液中加入水的量是以浓 缩液体积计0. 5-1倍。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(5)中用乙醚洗脱三次，每次50mL。
10.根据权利要求1-9中任一权利要求所述方法得到的糖苷类化合物。
全文摘要
本发明涉及一种从烟叶中提取糖苷类化合物的方法，其特征在于所述方法包括用有机溶剂萃取烟叶，过滤分离得到的烟叶残渣再进行萃取，得到的澄清提取液进行减压蒸馏，其浓缩液过色谱柱，然后洗涤，再用甲醇洗脱色谱柱中的残留化合物，得到有机溶液，再进行萃取，得到的残留液通过减压蒸发，最终得到本发明的糖苷类化合物水溶液。
文档编号C07G3/00GK102127121SQ20101061981
公开日2011年7月20日 申请日期2010年12月29日 优先权日2010年12月29日
发明者伍阳, 袁毅, 谷向春 申请人:华宝食用香精香料(上海)有限公司