猪samhd1基因、蛋白、单克隆抗体及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种猪SAMHD1基因，该基因序列包含编码SEQIDNO.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明还公开了猪SAMHD1蛋白质，该蛋白质具有SEQIDNO.1所示氨基酸序列。本发明还公开了抗猪SAMHD1蛋白的单克隆抗体。本发明的猪SAMHD1基因、蛋白质，具有抗病毒活性，适于研制抗病毒药物，应用前景广阔。本发明的单克隆抗体，与猪SAMHD1蛋白具有很好的特异性反应，为进一步研究猪SAMHD1蛋白的生物学功能奠定了重要的基础。
【专利说明】猪SAMHD1基因、蛋白、单克隆抗体及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及生物工程【技术领域】，尤其涉及一种猪SAMHDl基因、蛋白、单克隆抗体及其应用。
【背景技术】
[0002]先天性免疫在机体抵抗病原感染过程中发挥重要作用，其在病原入侵机体后能够做出快速的应答，控制病原的扩散，进而诱导特异性免疫应答来消除病原。机体在长期进化的过程中，形成了具有抵抗病原入侵的天然限制性因子。目前已经发现4种天然限制性因子，TRIM5a、Tetherin、AP0BEC3G 和 SAMHDl(Neiletal.，2008;Sheehyetal.，2002; Stremlauetal.，2004)。最近研究证实，SAMHDl作为一种天然限制性因子，在髓源细胞中表达量较高，能够阻止HIV-1型病毒在髓源细胞中的复制(Chenetal., 2012; Goldstoneetal., 2011; Laguette et al.，2011)。SAMHDl蛋白能够调控机体的先天性免疫，明显上调机体抗病毒免疫应答，介导由干扰素引起的炎症反应，参与宿主对侵入病原的防御体系。然而，目前SAMHDl的生物学特性还知之甚少。最近研究表明，SAMHDl蛋白具有脱氧核苷三磷酸水解酶的功能，可以水解细胞内的dNTP,从而抑制HIV-1病毒的反转录和cDNA的形成过程,进而阻止病毒的感染与复制(Franzolinetal., 2013;Goldstoneetal., 2011)。而 HIV-2 和某些猴免疫缺陷病毒(SIVsm/mac)则能够通过其编码的Vpx蛋白降解SAMHDl，Vpx蛋白与DCAFl相互作用，进而形成Cullin4A/DDBl和E3泛素-连接酶复合体，通过泛素-连接酶复合体靶向降解SAMHDl蛋白，从而导致病毒对该类细胞的感染，这种降解作用可以通过蛋白酶抑制剂来解除(Ahnetal., 2012; Hreckaetal., 2011; Srivastavaetal., 2008)。除 HIV 外，是否有其他病毒能够与其相互作用并不清楚。此外，SAMHDl蛋白还与Aicard1-Goutieres (ASG)疾病相关(Rice etal.，2009)。
[0003]SAMHDl蛋白是否能够拮抗其他病毒的感染，目前并不十分清楚。近几年来，猪瘟病毒(CSFV)、高致病性蓝耳病病毒(HP-PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)等猪重大疫病病毒一直危害我国养猪业的健康、持续发展。如何防控重大疫病的发生，降低其造成的损失，提高畜禽机体抗病毒反应，是科研人员致力追求的目标。SAMHDl作为天然免疫限制性因子，其功能和特性目前知之甚少。因此，对其开展功能与特性研究，对防控重大疫病的发生与发展具有重要意义。
[0004]对于SAMHDl蛋白功能的研究，需要获得其全基因序列、重组蛋白以及具有良好反应性的单克隆抗体。目前，人、猴、马等SAMHDl已经获得其全基因序列，但无准确的猪SAMHDl全基因序列，并且人源SAMHDl制备的单抗或者多抗与猪SAMHDl蛋白反应性很差，几乎没有反应性。因此，需要获得准确的猪SAMHDl的全基因序列，并制备具有良好反应性的单克隆抗体，可以实现对SAMHDl蛋白功能更深入的研究。
【发明内容】
[0005]本发明要解决目前没有准确的猪SAMHDl全基因序列的技术问题，提供一种猪SAMHDl基因，该基因的全基因序列可用于研制防控猪重大疫病的药物或生物制品。
[0006]为此，还需要提供一种猪SAMHDl蛋白和单克隆抗体，用于制备防治猪重大疫病的药物或生物制品。
[0007]为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现:
[0008]在本发明的一个方面，提供了一种猪SAMHDl基因，该基因序列包含编码SEQIDN0.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。
[0009]优选的，所述猪SAMHDl基因序列为SEQIDN0.2所示的核苷酸序列。
[0010]优选的，本发明的猪SAMHDl全基因序列除了 3’端的poly (A)序列之外含有3951个核苷酸，其中包含一个开放阅读框，该开放阅读框位于第68位和1951位核苷酸之间，长度为1884个核苷酸，编码627个氨基酸。
[0011]在本发明的另一方面，还提供了一种猪SAMHDl蛋白质，该猪SAMHDl蛋白质具有SEQIDN0.1所示氨基酸序列。
[0012]在本发明的另一方面，还提供了一种重组载体，其包含编码SEQIDN0.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。
[0013]所述重组载体的空载体包括原核表达载体或真核表达载体。
[0014]在本发明中，原核表达载体优选pcoldTFDNA原核表达载体，真核表达载体优选P3XFLAGCMV7.1真核表达载体。
[0015]在本发明的另一方面，还提供了一种宿主细胞，其包含上述重组载体。
[0016]在本发明的另一方面，还提供了一种重组蛋白，该重组蛋白是由上述重组载体经表达而制得。
[0017]在本发明的另一方面，还提供了一种抗猪SAMHDl蛋白的单克隆抗体。
[0018]优选的，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞系CCTCCN0.C201422分泌的单克隆抗体。
[0019]在本发明的另一方面，还提供了一种检测猪SAMHDl蛋白的试剂盒，该试剂盒包含上述抗猪SAMHDl蛋白的单克隆抗体。
[0020]在本发明的另一方面，还提供了一种抗病毒药物，该药物含有猪SAMHDl蛋白质。
[0021]本发明的猪SAMH Dl基因，具有猪SAMHDl基因的全基因序列，在MARC-145细胞中过表达猪SAMHDl蛋白，能明显抑制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖，说明猪SAMHDl蛋白具有抗病毒活性，适于研制抗病毒药物。利用本发明猪SAMHDl基因原核表达获得的重组可溶性猪SAMHDl蛋白，免疫小鼠后制备出与猪SAMHDl蛋白具有特异性反应的单克隆抗体，该单克隆抗体为进一步研究猪SAMHDl蛋白的特性与功能奠定了重要的基础。
【专利附图】
【附图说明】
[0022]下面结合附图和【具体实施方式】对本发明作进一步详细的说明。
[0023]图1是本发明实施例1扩增猪SAMHDl基因序列的电泳结果图；
[0024]图2是本发明实施例2猪SAMHDl基因编码序列的扩增与重组蛋白的表达纯化结果图；
[0025]图3是本发明实施例2猪SAMHDl拮抗HP-PRRSV增殖的Westernblot与病毒滴定结果图；
[0026]图4是本发明实施例4猪SAMHDl单抗ELISA效价鉴定图；
[0027]图5是本发明实施例5猪SAMHDl单克隆抗体特异性鉴定图。
[0028]本发明的单克隆抗体杂交瘤细胞系，已于2014年I月14日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称0^0:，地址:湖北省武汉市武昌珞珈山武汉大学保藏中心)，保藏号为CCTCC N0.C201422，其分类命名为杂交瘤细胞株5M1。
【具体实施方式】
[0029]下列实施例中，未注明具体条件的实验方法，通常按常规条件，如《精编分子生物学实验指南》(F.M.奥斯伯，R.E.金斯顿，J.G.塞德曼等主编，马学军，舒跃龙的译.北京:科学出版社，2004)中所述的方法进行。
[0030]为了研制防控猪重大疫病的药物或生物制品，本发明采用RACE方法获得了猪SAMHDl全基因序列。在猪SAMHDl全基因序列基础上，扩增猪SAMHDl编码基因，将其插入P3XFLAGCMV7.1真核表达载体，在MARC-145细胞中表达猪SAMHDl，能够显著抑制高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒的感染，说明本发明的猪SAMHDl蛋白具有抗病毒活性。将猪SAMHDl编码基因插入pcoldTFDNA原核表达载体，诱导表达、纯化获得可溶性重组猪SAMHDl蛋白，免疫BALB/c小鼠后制备获得抗猪SAMHDl蛋白的单克隆抗体。本发明获得的单克隆抗体，与猪源细胞中SAMHDl蛋白具有较好的特异性反应，与人源、猴源SAMHDl蛋白反应特异性较差。
[0031 ] 实施例1采用RACE方法扩增获得猪SAMHDl全基因序列
[0032]通过对比GenBank中已提交的猪SAMHDl预测序列(GenbankID:XM_003483952，XM_003361435，AK236802)，设计一对引物扩增SAMHDl部分核酸序列，该对引物序列为s880-forward:5’ -TCAAAGCAGACCCTTACAT-3，(SEQIDN0.3)，S880-reverse:5’ -TTGCCTAATTCCTGTTTCT-3’ (SEQIDN0.4)。结果扩增出长度约880bp的猪SAMHDl部分基因序列(见图1A)。序列测序、对比正确后，根据扩增出的880bp序列设计一对SAMHDl基因特异性引物，GSP1-forward:5’ -AGATGCCTTCCTCAAAGCAGACCCT-3’ (SEQIDN0.5)，GSPl-reverse:5’ -TATGCCCTAAATTGATTGGGGGGGC-3’ (SEQIDN0.6)，并在其内部设计一对长约220bp的内部套式引物，S220-forward:5，-GCTGAACTGAAGGCTGAAGAT-3，(SEQIDN0.7), S220-forward:5，-AAACAGACTCTTTTCATCCGT-3’ (SEQIDN0.8)，用于鉴定 RACEPCR 扩增序列的特异性。采用 Clontech公司SMARTer?RACEcDNA扩增试剂盒，利用基因特异性引物GSP扩增猪SAMHDl全基因序列。结果显示，5’卩0?产物长度约200(^?(图1B)，3’PCR产物长度约2700bp (图1C)，PCR产物纯化后，连接PBlunt克隆载体，上海生工进行测序。通过序列拼接比对，获得猪SAMHDl全基因序列(SEQIDN0.2)及其编码序列。序列分析表明，猪SAMHDl全基因序列含有3981个核苷酸，其中包含一个开放阅读框。开放阅读框位于第68位和1951位核苷酸之间，长度为1884个核苷酸，编码627个氨基酸(SEQIDN0.1)。
[0033]实施例2重组表达猪SAMHDl蛋白
[0034]根据实施例1扩增出的猪SAMHDl全基因序列，设计特异性引物，扩增SAMHDl编码序列，扩增编码基因的特异性引物如下，pcold-pigSAMHDl (pcold-pigSAMHDl-forward:5，-CCAAGCTTATGCAGAGTGCCGACTCC-3，(SEQIDN0.9),pcold-pigSAMHDl-reverse:5，-CGGGATCCTCACACCGAGTCCTTTGCA-3，(SEQIDN0.10))，其中上、下游引物分别含有 HindIII 和 BamHI限制性内切酶位点，pcoId-PigSAMHDI引物扩增的SAMHDl编码序列，用于插入pcoldTFDNA原核表达载体；pFLAG-pigSAMHDl (pFLAG-p i gSAMHD I forward: CAAGCTTATGCAGAGTGCCGACTCCCAGCAG(SEQIDN0.11) ；pFLAG-pigSAMHDlreverse:GCTCTAGATCACACCGAGTCCTTTGCAAA(SEQIDN0.12) )，pFLAG-p i gSAMHD I引物扩增的SAMHDl编码序列，用于插入p3XFLAGCMV7.1真核表达载体。PCR扩增产物为1884bp的猪SAMHDl编码序列片段(见图2A，图2A中，M为DNA分子量标准DL2000 ;1为阴性对照，2为PCR扩增产物)。PCR产物经回收纯化、内切酶双酶切后，分别与pcoldTFDNA原核表达载体和p3 X FLAGCMV7.1真核表达载体连接，构建猪SAMHDl原核表达载体与猪SAMHDl真核表达载体，分别命名为pcold-pSAMHDl和pFLAG-pSAMHDl，阳性质粒经测序、酶切鉴定正确。
[0035]Pcold-pSAMHDl转化Rosseta感受态细胞。原核表达纯化重组猪SAMHDl蛋白程序如下:含有阳性质粒的菌液接种2XYT培养基，接种比例1:100，经37°C振荡摇菌至菌液OD值达到0.6后，加入IPTG至终浓度为0.5mM, 16°C继续诱导5h。离心收集菌液并用PBS清洗2遍后，PBS重悬后，超声至菌液澄清，离心去除超声沉淀，上清与镍柱4°C作用过夜，按照说明书进行蛋白纯化。纯化蛋白以鼠抗His标签单克隆抗体进行Westernblot鉴定。SDA-PAGE与Weaternblot结果显示,原核表达纯化的重组蛋白大小约为130kDa,与预期蛋白大小相符(见图2B、2C)。图2B为pcoldTFDNA原核表达载体表达重组猪SAMHDl蛋白的SDA-PAGE电泳结果图，其中M为预染蛋白Marker ；1为PcoldTFDNA空载体全菌；2为
0.5mMIPTG诱导空载体全菌；3为IPTG未诱导重组质粒全菌；4为0.5mMIPTG诱导重组质粒全菌；5为0.5mMIPTG诱导表达菌液超声上清；6为0.5mMIPTG诱导表达菌液超声沉淀；7为纯化重组猪SAMHDl蛋白。图2C为鼠抗His标签单克隆抗体Westernblot鉴定重组蛋白结果图，其中M为预染蛋白Marker ；1为PcoldTFDNA空载体全菌；2为0.5mMIPTG诱导空质粒全菌；3为纯化重组猪SAMHDl蛋白。由这些实验结果可知，IPTG诱导pcold-pSAMHDl表达获得了可溶性重组猪SAMHDl蛋白，该可溶性重组蛋白可以作为制备后续单克隆抗体的免疫原。
[0036]pFLAG-pSAMHDl转染MARC-145细胞，获得瞬时表达重组猪SAMHDl蛋白的Marc-145细胞，该细胞中高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒增殖受到明显抑制。具体实验步骤如下=MARC-145细胞铺6孔板，3 X 15/孔。次日，2 μ gpFALG-pSAMHDl转染细胞。转染48h后，0.1MOI高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒HuM株感染细胞。感染24后，分别收取细胞培养上清与细胞，分别进行病毒滴定与Westernblot鉴定。结果显示，MARC-145细胞中过表达猪SAMHDl蛋白后，标签抗体检测到重组蛋白的表达，同时HP-PRRSV病毒增殖受到明显抑制(图3A)。上清中病毒滴度出现明显的下降，表明猪SAMHDl蛋白具有明显的抗病毒活性(图3B)。图3A为westernblot检测猪SAMHDl抑制HP-PRRSV增殖的结果图，其中Ant1-FLAG为FLAG标签抗体检测重组猪SAMHDl蛋白表达；Anti_N为PRRSVN蛋白单克隆抗体检测HP-PRRSV增殖；β -actin为内参对照。图3B为病毒滴度检测猪SAMHDl抑制HP-PRRSV在MARC-145细胞中增殖的结果图。
[0037]实施例3猪SAMHDl鼠源单克隆抗体的制备
[0038]将实施例2原核表达纯化后的SAMHDl蛋白作为免疫原，免疫小鼠，用于制备单克隆抗体。选择8周龄BABL/c雌性小鼠，免疫原核表达纯化的猪SAMHDl蛋白。免疫剂量为第一次100微克蛋白，第二至四次分别免疫50微克，总体积为lOOul，皮下多点注射，间隔两周。第一次免疫用弗氏完全佐剂乳化，SAMHDl蛋白与弗氏完全佐剂1:1比例混合，第二次免疫用弗氏不完全佐剂乳化，SAMHDl蛋白与弗氏不完全佐剂1:1比例混合，第三、四次免疫不加入佐剂，直接免疫重组SAMHDl蛋白。四次免疫后，眼眶采血，ELISA鉴定抗体效价。抗体效价达到一定水平后，取免疫鼠脾脏细胞与SP2/0细胞按5:1的比例融合，进行单克隆抗体制备。融合两周后，间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞，具体方法如下:
[0039]1、包被:纯化重组猪SAMHDl蛋白与PcoldTFDNA表达载体His标签蛋白分别包被ELISA酶标板，每孔包被量为I μ g/100 μ L，4°C包被过夜。
[0040]2、洗涤:用含有0.5%o tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。[0041 ] 3、封闭:5%脱脂乳37 0C孵育2小时，200 μ L/孔。
[0042]4、洗涤:用含有0.5%0 Tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0043]5、加细胞培养上清:细胞培养上清分别加入包被重组猪SAMHDl蛋白与His标签蛋白的酶标板，每孔50yL，37°C作用I小时。
[0044]6、洗涤:用含有0.5%0 Tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0045]7、加入二抗:用PBS按1:10000倍稀释后，每孔50μ L加入酶标板，37°C孵育40分钟。
[0046]8、洗涤:用含有0.5%0 Tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0047]9、显色:每孔加入50 μ LTMB显色液，避光室温孵育10分钟。
[0048]10、终止:每孔加入 50 μ L2MH2S04。
[0049]11、OD值检测:酶标仪测定OD45tl值。
[0050]经过重组猪SAMHDl蛋白与PcoldTFDNA载体标签蛋白双重ELISA筛选后，选取载体标签蛋白反应阴性、重组SAMHDl蛋白反应阳性的克隆，扩大培养后进行5次亚克隆，每次亚克隆后均进行双重ELISA筛选鉴定阳性克隆。5次亚克隆后，获得3株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株5M1、5M2、5M5。最终将一个优选的分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞系于2014年I月14日保藏于中国典型培养物保藏中心(简称CCTCC)，保藏号为CCTCCN0.C201422，其分类命名为SAMHDl蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系，株号:5M1。筛选的阳性杂交瘤细胞经扩大培养，用于单抗腹水制备。
[0051]单抗腹水制备，具体步骤如下:选取8周龄BABL/c雌性小鼠，腹腔注射降植烷，200 μ L/只。免疫降植烷一周后，阳性杂交瘤细胞计数，基础DMEM培养基重悬，106/只接种小鼠腹腔。一周后观察小鼠腹部变化，若出现腹部胀大，即进行腹水采集，采集腹水，
4,000rpm/min离心1min,上清分装_80°C保存。
[0052]实施例4猪SAMHDl单抗ELISA效价鉴定
[0053]将实施例3制备的单抗腹水作为一抗，用间接ELISA方法检测腹水的ELISA效价，具体方法如下:
[0054]1、包被:纯化重组猪SAMHDl蛋白与PcoldTFDNA表达载体His标签蛋白分别包被ELISA酶标板，每孔包被量为I μ g/100 μ L，4°C包被过夜。
[0055]2、洗涤:用含有0.5%o tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0056]3、封闭:5%脱脂乳37 0C孵育2小时，200 μ L/孔。
[0057]4、洗涤:用含有0.5%0 Tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0058]5、加入一抗:采用PBS将采集的腹水按照1:2000稀释后，分别加入包被重组猪SAMHDl蛋白与His标签蛋白的酶标板，每孔50yL，37°C作用I小时。
[0059]6、洗涤:用含有0.5%0 Tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0060]7、加入二抗:用PBS按1:10000倍稀释后，每孔50μ L加入酶标板，37°C孵育40分钟。
[0061]8、洗涤:用含有0.5%0 Tween-20的PBST洗涤3次，200 μ L/孔。每次5分钟。
[0062]9、显色:每孔加入50 μ LTMB显色液，避光室温孵育10分钟。
[0063]10、终止:每孔加入 50 μ L2MH2S04。
[0064]11、OD值检测:酶标仪测定OD45tl值。
[0065]结果如图4所示，实施例3制备的杂交瘤细胞免疫小鼠后获得的腹水效价最高为1:58。图4中，1、MAb为猪SAMHDl单克隆抗体；阳性血清为纯化猪SAMHDl重组蛋白免疫4周后BABL/c小鼠血清；阴性血清为未免疫BABL/c小鼠血清；His标签蛋白为pcold空载体诱导纯化后获得的标签蛋白。
[0066]实施例5
[0067]将实施例3中制备的单抗腹水，作为一抗，检测猪SAMHDl单克隆抗体的特异反应性。具体操作如下:
[0068]收取细胞样品:6孔细胞培养板中铺满猪肺泡原代巨噬细胞-PAM细胞、猪肾传代细胞系-PK-15细胞、非洲绿猴肾传代细胞-MARC-145细胞、幼仓鼠肾传代细胞-BHK-21细胞、人宫颈癌细胞-HeLa细胞、人肺癌细胞-A549细胞、人胶质瘤细胞-U251细胞，细胞总数为I X 106。弃掉上清，预冷PBS洗涤两次后，加入200 μ LThermo公司ThermoScientificPierceCelILysis buffer,冰浴5min后，收集细胞至 1.5mL离心管中。4°C，12000rpm/min，离心10min，取上清转移至新管。用考马斯亮蓝法检测收集蛋白质浓度。按照4:1体积比混合5X样品缓冲液，煮沸1min后，_20°C保存备用。
[0069]Western blotting:20 μ g等量总蛋白上样进行SDS-PAGE电泳，电泳完毕后，采用伯乐半干转膜仪，电压15V，转印lh，将蛋白进行至硝酸纤维膜(NC膜)上。转印完毕后进行后续实验，具体操作如下:
[0070]封闭:用5%脱脂乳室温封闭NC膜I小时。
[0071]洗涤:用含有0.5%o Tween-20的TBST洗涤NC膜3次，每次5分钟。
[0072]加入一抗:实施例3中制备的单抗腹水，按照1:500-1000的比例稀释至含有5%BSA的TBST缓冲溶液中，室温作用I小时。
[0073]洗涤:用含有0.5%o Tween-20的TBST洗涤NC膜3次，每次5分钟。
[0074]加入二抗:中杉金桥公司HRP标记山羊抗小鼠IgG抗体，用TBST按1:5000倍稀释后加入，室温作用Ih。
[0075]洗涤:用含有0.5%o Tween-20的TBST洗涤NC膜3次，每次5分钟。
[0076]显影:米用Thermo公司ECL发光试剂盒(货号:34080)进行曝光显影。
[0077]结果如图5所示，实施例3制备的猪SAMHDl单抗的的特异性好。图5中，1、PAM细胞为猪肺泡原代巨噬细胞；PK细胞为猪肾传代细胞；MARC-145细胞为非洲绿猴肾传代细胞；BHK-21细胞为幼仓鼠肾传代细胞；HeLa细胞为人宫颈癌细胞；A549细胞为人肺癌细胞；U251细胞为人胶质瘤细胞。
[0078]以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。
【权利要求】
1.一种猪SAMHDl基因，其特征在于，所述猪SAMHDl基因的序列包含编码SEQ ID N0.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。
2.根据权利要求1所述的猪SAMHDl基因，其特征在于，所述猪SAMHDl基因序列为SEQIDN0.2所示的核苷酸序列。
3.一种猪SAMHDl蛋白质，其特征在于，所述猪SAMHDl蛋白质具有SEQ ID N0.1所示氨基酸序列。
4.一种重组载体，其特征在于，包含编码SEQ ID N0.1所示氨基酸序列的核苷酸序列。
5.一种宿主细胞，其特征在于，包含权利要求4所述的重组载体。
6.一种重组蛋白，其特征在于，该重组蛋白是由权利要求4所述重组载体经表达而制得。
7.一种抗猪SAMHDl蛋白的单克隆抗体。
8.根据权利要求7所述的单克隆抗体，其特征在于，该抗体是由杂交瘤细胞系CCTCCN0.C201422分泌的单克隆抗体。
9.一种检测猪SAMHDl蛋白的试剂盒，其特征在于，包含权利要求7所述的单克隆抗体。
10.一种抗病毒药物， 其特征在于，该药物含有权利要求3所述的猪SAMHDl蛋白质。
【文档编号】C07K16/40GK104164442SQ201410028266
【公开日】2014年11月26日 申请日期:2014年1月22日 优先权日:2014年1月22日
【发明者】童光志, 杨莘, 周艳君, 姜一峰, 单同领, 童武, 郑浩 申请人:中国农业科学院上海兽医研究所