多重PCR引物、试剂盒及用途的制作方法

文档序号:12697969阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种多重PCR引物,其特征在于,由以下四对引物对组成:

所述四对引物为与SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示引物对、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示引物对、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示引物对以及SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示引物对分别对应的引物序列,所述四对引物对中的至少一条引物序列比SEQ ID NO:1-8中的相应序列的3’端多或者少0~3个核苷酸。

2.权利要求1的多重PCR引物,其特征在于,所述四对引物对为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示引物对、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示引物对、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示引物以及SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8所示引物对。

3.权利要求1或2的多重PCR引物,其特征在于,所述多重PCR引物还包括以下引物对中的至少一对:

SEQ ID NO:9和SEQ ID NO:10所示引物对、以及SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12所示引物对。

4.一种试剂盒,其包括权利要求1-3任一多重PCR引物。

5.权利要求1-3任一多重PCR引物或者权利要求4的试剂盒在获得和/或检测HBB基因序列中的用途。

6.一种获取HBB基因序列的方法,其特征在于,所述方法包括利用权利要求1-3任一多重PCR引物进行多重PCR,以获得HBB基因序列。

7.一种检测HBB基因序列的方法,其特征在于,包括:

(1)利用权利要求6的方法对待测样品中的至少一部分核酸进行扩增,获得扩增产物;

(2)分析所述扩增产物,以获得HBB基因序列检测结果。

8.权利要求7的方法,其特征在于,所述核酸为DNA和/或RNA。

9.权利要求8的方法,其特征在于,所述核酸为RNA,步骤(1)包括:

(1-1)利用所述多重PCR引物中的上游或下游引物将所述RNA反转录为cDNA;

(1-2)利用所述多重PCR引物中相应的下游或上游引物对所述cDNA进行扩增,获得双链DNA;

(1-3)利用所述多重PCR引物对所述双链DNA进行扩增,获得所述扩增产物。

10.如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤(2)包括:

(2-1)对所述扩增产物进行测序;以及

(2-2)将测序结果与HBB基因野生型序列比对,以确定HBB基因的突变位点。

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