(一)技术领域
本发明涉及一种喹唑啉类化合物及其应用，特别涉及一种吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
(二)
背景技术：
喹唑啉类化合物具有许多较好的生物活性，在医药领域有着广泛的应用，尤其一些特殊结构的喹唑啉类衍生物具有明显的抗病毒活性、抗菌活性、抗肿瘤活性等，喹唑啉类化合物作为抗肿瘤药物已经上市了一些品种。例如上市的用于治疗肺癌的吉非替尼(gefitinib)和厄洛替尼(erlotinib)，以及用于治疗乳腺癌的拉帕替尼(lapatinib)，它们都属于喹唑啉类化合物。新型的喹唑啉类化合物及其生物活性也常见文献报道(参阅y.-y.ke,h.-y.shiao,y.c.hsu,c.-y.chu,w.-c.wang,y.-c.lee,w.-h.lin,c.-h.chen,j.t.a.hsu,c.-w.chang,c.-w.lin,t.-k.yeh,y.-s.chao,m.s.coumar,h.-p.hsieh,chemmedchem2013,8,136-148；a.garofalo,a.farce,s.ravez,a.lemoine,p.six,p.chavatte,l.goossens,p.depreux,j.med.chem.2012,55,1189-1204)。当然多数喹唑啉类化合物并不具有抗肿瘤活性。
(三)
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种具有抗癌活性的新型喹唑啉类化合物—吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
为实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种式(ⅰ)所示的吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
第二方面，本发明提供一种式(ⅰ)所示的吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
(2)式(ⅳ)所示的化合物在有机溶剂d中,于还原剂e作用下，在25～100℃反应完全(tlc跟踪监测，展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v)，优选40～80℃反应0.5～12h)，反应液过滤，滤液减压浓缩后的浓缩物干燥(优选25℃真空干燥)，制得式(ⅴ)所示的化合物；所述有机溶剂d为下列之一：氯仿、甲苯、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、乙腈或n,n-二甲基甲酰胺；所述还原剂e为下列之一：铁粉/浓盐酸，铁粉/醋酸，钯碳/甲酸铵或钯碳/水合肼；所述铁粉/浓盐酸是指铁粉与浓盐酸任意比例的混合、铁粉/醋酸是指铁粉与醋酸任意比例的混合，所述钯碳/甲酸铵是指钯碳与甲酸铵任意比例的混合，所述钯碳/水合肼是钯碳与水合肼任意比例的混合物；
(3)将式(ⅴ)所示化合物与氯乙酰氯或氯乙酸酐混合，在碱性催化剂f作用下，于有机溶剂g中，-10～50℃反应完全(tlc跟踪监测，展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v)，优选-10～50℃反应3～12h)，反应液经后处理a，制得式(ⅵ)所示的化合物；所述的碱性催化剂f为下列之一：吡啶、二乙胺、三乙胺、喹啉、n,n-二甲苯胺、4-二甲氨基吡啶、4-吡咯烷基吡啶或碳酸钠；所述有机溶剂g为下列之一：四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、乙腈、甲苯或苯；
(4)将式(ⅵ)所示化合物与吗啉混合，在有机溶剂j中，于碱性催化剂k的作用下，25～120℃进行反应(tlc跟踪监测，展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v)，优选40～100℃反应0.5～36h)，反应完全后，将反应液经后处理b，制得式(ⅰ)所示化合物；所述有机溶剂j选自下列之一：氯仿、甲苯、甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、乙腈或n,n-二甲基甲酰胺；所述的碱性催化剂k选自下列之一：吡啶、三乙胺、喹啉、n,n-二甲苯胺、4-二甲氨基吡啶、4-吡咯烷基吡啶或碳酸钠(优选吡啶、喹啉、三乙胺、n,n-二甲苯胺或4-二甲氨基吡啶)。
进一步，步骤(1)中，所述式(ⅲ)所示化合物与式(ⅱ)所示化合物、碱性催化剂b的投料物质的量之比为1.0﹕0.8～1.2﹕1.0～8.0。
进一步，步骤(1)中，所述有机溶剂a的用量以式(ⅲ)所示化合物的质量计为10～50ml/g。
进一步，本发明步骤(1)中所述反应液分离纯化的方法为：反应完全后，将反应液蒸除溶剂，取浓缩物用有机溶剂c将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入浓缩物1.0～2.0倍重量的柱层析硅胶，混匀后，蒸除溶剂，干燥，获得浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：0.1～10的石油醚与乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，收集含目标组分的流出液(优选以乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v)为展开剂跟踪检测，收集目标组分，优选收集rf值为0.5的组分)，减压浓缩，干燥(优选50℃干燥)，获得式(ⅳ)所示的化合物；所述有机溶剂c为下列之一：乙醇、氯仿、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述有机溶剂c用量以能够溶解残留物即可。
进一步，步骤(2)中，当所述的还原剂e为铁粉/浓盐酸或者铁粉/醋酸时，式(ⅳ)所示的化合物与还原剂e中的铁粉、浓盐酸或醋酸的投料质量比为1.0﹕1.0～3.0﹕0.2～1.0。本发明中，浓盐酸质量浓度为36％～38％，醋酸采用冰醋酸。
进一步，步骤(2)中，当所述的还原剂e为钯碳/甲酸铵或钯碳/水合肼时，式(ⅳ)所示的化合物与还原剂e中的钯碳、甲酸铵或水合肼的投料质量比为1.0﹕0.1～0.5﹕1.0～3.0。本发明中适用的钯碳中钯的质量负载量为2～10％，优选5％，水合肼质量浓度为40～80％，优选80％。
进一步，步骤(2)中，所述有机溶剂d的用量以式(ⅳ)所示的化合物的质量计为10～50ml/g。
进一步，步骤(3)中，所述的式(ⅴ)所示化合物与氯乙酰氯或氯乙酸酐、碱性催化剂f的投料物质的量之比为1﹕1.0～8.0﹕1.0～3.0。
进一步，步骤(3)中，所述有机溶剂g的用量以式(ⅴ)所示化合物的质量计为11～100ml/g。
进一步，本发明具体推荐步骤(3)按照如下方法进行：于-10～10℃条件下，往式(ⅴ)所示化合物和碱性催化剂f的有机溶剂g溶液中或者往式(ⅴ)所示化合物和碱性催化剂f中滴加氯乙酰氯或氯乙酸酐的有机溶剂g溶液，滴毕，-10～50℃反应3～12小时，所得反应液经后处理a得到式(ⅵ)所示化合物；溶解氯乙酰氯或氯乙酸酐的有机溶剂体积用量对本发明没影响，所述有机溶剂g的总用量以式(ⅴ)所示化合物的质量计为11～100ml/g。有机溶剂g的总用量是指溶解碱性催化剂f和式(ⅴ)所示化合物的有机溶剂g与溶解氯乙酰氯或氯乙酸酐有机溶剂g的总体积。
进一步，本发明步骤(3)所述反应液分离纯化的方法为：反应完全后，将反应液过滤，滤液蒸除溶剂，取浓缩物用有机溶剂h将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入浓缩物1.0～2.0倍重量的柱层析硅胶，混匀后，蒸除溶剂，干燥，获得浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：0.1～10的石油醚与乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，收集含目标组分的流出液(优选以乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v)为展开剂跟踪检测，收集目标组分，优选收集rf值为0.5的组分)，减压浓缩，干燥(优选50℃干燥)，获得式(ⅵ)所示的化合物；所述有机溶剂h为下列之一：乙醇、氯仿、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述有机溶剂h用量以能够溶解残留物即可。
进一步，步骤(4)中，所述式(ⅵ)所示化合物与吗啉、碱性催化剂k的投料物质的量之比为1.0﹕0.8～8.0﹕1.0～8.0。
进一步，步骤(4)中，所述有机溶剂j的用量以式(ⅵ)所示化合物的质量计为10～60ml/g。
进一步，本发明步骤(4)中所述反应液后处理b的方法为：反应完全后，将反应液蒸除溶剂，取浓缩物用有机溶剂m将其溶解，获得溶解液，然后向溶解液中加入浓缩物1.0～2.0倍重量的柱层析硅胶，混匀后，蒸除溶剂，干燥，获得浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：0.1～10的石油醚与乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，收集含目标组分的流出液(优选以乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v)为展开剂跟踪检测，收集目标组分，优选收集rf值为0.5的组分)，减压浓缩，干燥(优选50℃干燥)，获得式(ⅰ)所示的化合物；所述有机溶剂m为下列之一：乙醇、氯仿、四氢呋喃或乙酸乙酯。所述有机溶剂m用量以能够溶解残留物即可。
第三方面，本发明还涉及式(ⅰ)所示吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
优选地，所述药物为具有抑制人乳腺癌细胞株mcf-7活性的药物。本发明提供的化合物(ⅰ)对人乳腺癌细胞株mcf-7具有较好的抑制效果。
本发明所述式(ⅰ)所示吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
本发明所述有机溶剂a、c、d、g、h、j和m均为有机溶剂，为了便于区分不同步骤所用有机溶剂不同而命名，字母本身没有含义；所述催化剂b、还原剂e、催化剂f和催化剂k均为催化剂，为了便于区分不同步骤所用催化剂不同而命名，字母本身没有含义；所述后处理a、后处理b均为后处理，为了便于区分不同步骤所用后处理不同而命名，字母本身没有含义。
本发明的有益效果主要体现在：(1)本发明所述的吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
(四)具体实施方式
本发明结合具体实施例作进一步的说明，以下的实施例是说明本发明的，而不是以任何方式限制本发明。
化合物(ⅱ)的制备参照文献(weinstock,j.etal.j.med.chem.,1986，29(11),2315-2325)的方法制备得到。4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)的制备参照文献(fernandes,c.etal.bioorg.med.chem.,2007,15(12),3974-3980)的方法制备得到。
本发明实施例使用的钯碳(pd/c)型号d5h5a，购于陕西瑞科新材料股份有限公司。
实施例1：6-硝基喹唑啉(ⅳ)的制备
依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)和2.39克(6.87mmol)化合物(ⅱ)，3.62克(45.76mmol)吡啶，12毫升氯仿加入50毫升的反应瓶中，加热至40℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，搅拌反应10小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入10毫升乙酸乙酯将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入3.0克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：10的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅳ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅳ)所示的淡黄色固体产物，收率85.1％，熔点164～166℃。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ:3.32-3.38(m,1h),3.63(dt,j＝3.4,15.5hz,1h),3.75(s,3h),3.82(s,6h),3.91(dd,j＝8.1,14.3hz,1h),4.03(td,j＝4.1,11.7hz,1h),4.15(d,j＝11.5hz,1h),4.72(dd,j＝8.3,14.2hz,1h),5.14(t,j＝8.9hz,1h),6.60(s,1h),6.90(d,j＝8.7hz,2h),7.08(d,j＝8.6hz,2h),7.93(d,j＝9.1hz,1h),8.48(dd,j＝2.4,9.2hz,1h),8.71(s,1h),8.96(d,j＝2.4hz,1h)。ir(kbr,cm-1)ν:2917,2848,1616,1580,1510,1463,1355,1327,1249,1038,847。
实施例2：6-硝基喹唑啉(ⅳ)的制备
依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)和1.59克(4.57mmol)化合物(ⅱ)，1.67克(22.83mmol)二乙胺，60毫升甲苯加入100毫升的三口烧瓶中，加热至100℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，搅拌反应2小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升乙醇将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入2.5克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：5的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅳ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅳ)所示的淡黄色固体产物，收率72.6％，熔点164～166℃。1hnmr和ir同实施例1。
实施例3：6-硝基喹唑啉(ⅳ)的制备
依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)和1.99克(5.72mmol)化合物(ⅱ)，0.58克(5.73mmol)三乙胺，60毫升乙醇加入100毫升的三口烧瓶中，加热至60℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，搅拌反应8小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升氯仿将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入2.5克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为10：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅳ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅳ)所示的淡黄色固体产物，收率77.2％，熔点164～166℃。1hnmr和ir同实施例1。
实施例4：6-硝基喹唑啉(ⅳ)的制备
依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)和2.20克(6.32mmol)化合物(ⅱ)，1.40克(11.46mmol)4-二甲氨基吡啶，60毫升异丙醇加入100毫升的三口烧瓶中，室温25℃搅拌，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，反应12小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升四氢呋喃将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入4.0克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为5：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅳ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅳ)所示的淡黄色固体产物，收率80.2％，熔点164～166℃。1hnmr和ir同实施例1。
实施例5：6-硝基喹唑啉(ⅳ)的制备
依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)和1.79克(5.15mmol)化合物(ⅱ)，1.04克(8.58mmol)n,n-二甲苯胺，12毫升n,n-二甲基甲酰胺加入50毫升的反应瓶中，加热至120℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，搅拌反应0.5小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升四氢呋喃将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入5.0克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅳ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅳ)所示的淡黄色固体产物，收率89.6％，熔点164～166℃。1hnmr和ir同实施例1。
实施例6：6-硝基喹唑啉(ⅳ)的制备
依次将1.20克(5.73mmol)4-氯-6-硝基喹唑啉(ⅲ)和2.39克(6.87mmol)化合物(ⅱ)，3.62克(45.76mmol)吡啶，20毫升丙醇加入50毫升的反应瓶中，加热至40℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，搅拌反应10小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升乙酸乙酯将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入3.5克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：3(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅳ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅳ)所示的淡黄色固体产物，收率78.3％，熔点164～166℃。1hnmr和ir同实施例1。
实施例7：6-氨基喹唑啉(ⅴ)的制备
依次将实施例1方法制备的0.40克(0.77mmol)6-硝基喹唑啉(ⅳ)，0.40克(6.34mmol)甲酸铵，0.04克5％pd/c，4.0毫升氯仿加入到反应瓶中，室温25℃搅拌，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，反应12小时，过滤，滤液浓缩，25℃真空干燥得到淡黄色固体产物6-氨基喹唑啉(ⅴ)，收率98.2％，熔点122～126℃。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ:3.40-3.48(m,2h),3.71(s,3h),3.82(s,3h),3.83(s,3h),3.87-3.98(m,5h),4.45(dd,j＝6.3,13.8hz,1h),4.95(dd,j＝6.5,9.2hz,1h),6.47(s,1h),6.90(d,j＝8.7hz,2h),6.95(d,j＝2.5hz,1h),7.11(d,j＝8.6hz,2h),7.15(dd,j＝8.9,2.5hz,1h),7.69(d,j＝8.9hz,1h),8.50(s,1h)。ir(kbr,cm-1)ν:3368,3215,2932,2825,1628,1566,1512,1487,1353,1248,1036,834。
实施例8：6-氨基喹唑啉(ⅴ)的制备
依次将实施例2方法制备的0.40克(0.77mmol)6-硝基喹唑啉(ⅳ)，1.20克(19.18mmol)80wt％水合肼，0.20克5％pd/c，20.0毫升甲苯加入到50毫升的反应瓶中，加热至100℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应0.5小时，冷却过滤，滤液浓缩，25℃真空干燥得到淡黄色固体产物6-氨基喹唑啉(ⅴ)，收率100.0％，熔点122～126℃。1hnmr和ir同实施例7。
实施例9：6-氨基喹唑啉(ⅴ)的制备
依次将实施例3方法制备的0.40克(0.77mmol)6-硝基喹唑啉(ⅳ)，0.08克浓盐酸(质量浓度36～38％)，0.40克铁粉，20.0毫升甲醇加入到50毫升的反应瓶中，加热至40℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应8小时，冷却过滤，滤液浓缩，25℃真空干燥得到淡黄色固体产物6-氨基喹唑啉(ⅴ)，收率94.1％，熔点122～126℃。1hnmr和ir同实施例7。
实施例10：6-氨基喹唑啉(ⅴ)的制备
依次将实施例4方法制备的0.40克(0.77mmol)6-硝基喹唑啉(ⅳ)，0.40克醋酸，1.20克铁粉，20.0毫升异丙醇加入到50毫升的反应瓶中，加热至80℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应3小时，冷却过滤，滤液浓缩，25℃真空干燥得到淡黄色固体产物6-氨基喹唑啉(ⅴ)，收率97.5％，熔点122～126℃。1hnmr和ir同实施例7。
实施例11：氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)的制备
依次将实施例7方法制备的0.27克(0.55mmol)6-氨基喹唑啉(ⅴ)，0.13克(1.64mmol)吡啶，3毫升四氢呋喃加入到反应瓶中，-10℃搅拌条件下滴加0.497克(4.40mmol)氯乙酰氯，滴毕，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1)，-10℃条件下反应12小时，过滤，滤液蒸除溶剂，浓缩物加入10毫升乙酸乙酯将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入0.60克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：10的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅵ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅵ)所示的氯乙酰氨基喹唑啉黄色固体，收率95.6％，熔点255～258℃。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ:3.26-3.33(m,1h),3.54(dt,j＝3.7,15.4hz,1h),3.74(s,3h),3.81-3.82(m,7h),3.95-4.05(m,2h),4.28(s,2h),4.64(dd,j＝8.2,14.4hz,1h),5.24(t,j＝8.8hz,1h).6.64(s,1h),6.88(d,j＝8.8hz,2h),7.07(d,j＝8.7hz,2h),7.53(dd,j＝2.3,9.0hz,1h),7.83(d,j＝9.0hz,1h),8.54(s,1h),8.60(s,1h),8.69(d,j＝2.2hz,1h)。ir(kbr,cm-1)ν:3396,2998,2937,2835,1694,1557,1525,1510,1489,1463,1349,1249,1179,1036,840。
实施例12：氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)的制备
依次将实施例8方法制备的0.27克(0.55mmol)6-氨基喹唑啉(ⅴ)，0.04克(0.55mmol)二乙胺，10.0毫升氯仿加入到50毫升的反应瓶中，10℃搅拌条件下滴加0.07克(0.55mmol)氯乙酰氯和5.0毫升氯仿混合溶液，滴毕，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，10℃条件下反应8小时，过滤，滤液蒸除溶剂，浓缩物加入20毫升乙醇将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入0.26克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：5的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅵ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅵ)所示的氯乙酰氨基喹唑啉黄色固体，收率83.4％，熔点255～258℃。1hnmr和ir同实施例11。
实施例13：氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)的制备
依次将实施例9方法制备的0.27克(0.55mmol)6-氨基喹唑啉(ⅴ)，0.111克(1.10mmol)三乙胺，10.0毫升乙酸乙酯加入到50毫升的反应瓶中，0℃搅拌条件下滴加0.14克(1.09mmol)氯乙酰氯和5.0毫升乙酸乙酯溶液，滴毕，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1)，25℃条件下反应6小时，过滤，滤液蒸除溶剂，浓缩物加入20毫升氯仿将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入0.30克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为10：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅵ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅵ)所示的氯乙酰氨基喹唑啉黄色固体，收率70.5％，熔点255～258℃。1hnmr和ir同实施例11。
实施例14：氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)的制备
依次将实施例10方法制备的0.27克(0.55mmol)6-氨基喹唑啉(ⅴ)，0.067克(0.55mmol)4-二甲氨基吡啶，20.0毫升甲苯加入到50毫升的反应瓶中，5℃搅拌条件下滴加0.376克(2.20mmol)氯乙酸酐和7.0毫升甲苯的溶液，滴毕，加热至50℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1)，反应3小时，过滤，滤液蒸除溶剂，浓缩物加入20毫升四氢呋喃将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入0.40克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为5：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅵ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅵ)所示的氯乙酰氨基喹唑啉黄色固体，收率85.3％，熔点255～258℃。1hnmr和ir同实施例11。
实施例15：氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)的制备
依次将实施例7方法制备的0.27克(0.55mmol)6-氨基喹唑啉(ⅴ)，0.213克(1.65mmol)喹啉，15.0毫升苯加入到50毫升的反应瓶中，-10℃搅拌条件下滴加0.28克(2.19mmol)氯乙酰氯和5.0毫升苯的溶液，滴毕，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1)，-10℃条件下反应12小时，过滤，滤液蒸除溶剂，浓缩物加入20毫升四氢呋喃将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入0.40克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅵ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅵ)所示的氯乙酰氨基喹唑啉黄色固体，收率82.1％，熔点255～258℃。1hnmr和ir同实施例11。
实施例16：氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)的制备
依次将实施例7方法制备的0.27克(0.55mmol)6-氨基喹唑啉(ⅴ)，0.164克(1.10mmol)4-吡咯烷基吡啶，15.0毫升二氯甲烷加入到50毫升的反应瓶中，10℃搅拌条件下滴加00.14克(1.09mmol)氯乙酰氯和5.0毫升二氯甲烷溶液，滴毕，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1)，10℃条件下反应8小时，过滤，滤液蒸除溶剂，浓缩物加入20毫升乙醇将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入0.50克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为10：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅵ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅵ)所示的氯乙酰氨基喹唑啉黄色固体，收率90.2％，熔点255～258℃。1hnmr和ir同实施例11。
实施例17：吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
依次将实施例11方法制备的3.25克(5.73mmol)氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)和0.598克(6.86mmol)吗啉，3.626克(45.84mmol)吡啶，32.5毫升甲醇加入50毫升的反应瓶中，加热至40℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应10小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入10毫升乙酸乙酯将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入1.5克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：10的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅰ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅰ)所示的灰白色固体产物，收率65.4％，熔点122～125℃。1hnmr(500mhz,cdcl3)δ:2.65-2.72(m,4h),3.19(s,2h),3.30(m,1h),3.54(d,j＝15.3hz,1h),3.74(s,3h),3.81-3.84(m,11h),3.99-4.01(m,2h),4.64(dd,j＝8.2.14.2hz,1h),5.27(t,j＝8.6hz,1h),6.67(s,1h),6.87(d,j＝8.6hz,2h),7.07(d,j＝8.6hz,2h),7.40(dd,j＝2.0,8.9hz,1h),7.81(d,j＝8.9hz,1h),8.58(s,1h),8.84(s,1h),9.29(s,1h)。hrms-esim/z:618.2477[m+h]+。ir(kbr,cm-1)ν:2933,2833,1692,1609,1523,1568,1523,1488,1461,1348,1248,1116,1035,838。
实施例18：吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
依次将实施例12方法制备的3.25克(5.73mmol)氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)和0.398克(4.57mmol)吗啉，2.95克(22.84mmol)喹啉，80毫升甲苯加入100毫升的三口烧瓶中，加热至100℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应2小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升乙醇将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入2.5克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：5的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅰ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅰ)所示的灰白色固体产物，收率61.6％，熔点122～125℃。1hnmr和ir同实施例17。
实施例19：吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
依次将实施例13方法制备的3.25克(5.73mmol)氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)和0.499克(5.73mmol)吗啉，0.58克(5.73mmol)三乙胺，80毫升乙醇加入100毫升的三口烧瓶中，加热至60℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应8小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升氯仿将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入2.5克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为10：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅰ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅰ)所示的灰白色固体产物，收率57.7％，熔点122～125℃。1hnmr和ir同实施例17。
实施例20：吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
依次将实施例14方法制备的3.25克(5.73mmol)氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)和1.997克(22.92mmol)吗啉，1.40克(11.46mmol)4-二甲氨基吡啶，60毫升异丙醇加入100毫升的三口烧瓶中，室温25℃搅拌，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，反应36小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升四氢呋喃将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入3.0克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为5：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅰ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅰ)所示的灰白色固体产物，收率71.3％，熔点122～125℃。1hnmr和ir同实施例17。
实施例21：吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
依次将实施例15方法制备的3.25克(5.73mmol)氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)和0.449克(5.15mmol)吗啉，1.04克(8.58mmol)n,n-二甲苯胺，33毫升n,n-二甲基甲酰胺加入50毫升的反应瓶中，加热至120℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应0.5小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升四氢呋喃将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入4.0克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅰ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅰ)所示的灰白色固体产物，收率55.2％，熔点122～125℃。1hnmr和ir同实施例17。
实施例22：吗啉基乙酰氨基二甲氧基苯并[d]氮杂
依次将实施例16方法制备的3.25克(5.73mmol)氯乙酰氨基喹唑啉(ⅵ)和3.994克(45.84mmol)吗啉，3.626克(45.84mmol)吡啶，195毫升丙醇加入500毫升的反应瓶中，加热至40℃，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，搅拌反应10小时，关闭反应，反应液蒸除溶剂，得到的浓缩物中加入20毫升乙酸乙酯将其溶解，获得溶解液，向溶解液中加入6.0克柱层析硅胶(300～400目柱层析硅胶)，混匀后，蒸除溶剂，得干燥的浓缩物与硅胶的混合物，将混合物装柱，然后以体积比为1：1的石油醚/乙酸乙酯混合溶液为洗脱剂，洗脱，tlc跟踪检测(展开剂为乙酸乙酯/石油醚＝1：1(v/v))，根据tlc检测收集含式(ⅰ)所示的化合物的洗脱液(rf值为0.5)，收集液浓缩，50℃干燥得到式(ⅰ)所示的灰白色固体产物，收率75.7％，熔点122～125℃。1hnmr和ir同实施例17。
实施例23：抗癌活性体外测试
(1)将制得的化合物(ⅰ)、(ⅳ)、(ⅴ)和(ⅵ)进行了人乳腺癌细胞株mcf-7生物活性测试。
测试方法：四氮唑盐还原法(mtt法)。
细胞株：人乳腺癌细胞株mcf-7。上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(a)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用40μldmso溶解，取2μl用1000μl培养基稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。
(b)细胞的培养
①培养基的配制:每1000mldmem培养基(gibco)中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。
②细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。
③测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将第10代细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×106/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，分别加入用培养基稀释的100μg/ml、10μg/ml和1μg/ml样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育3h，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件下不含样品、含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的ic50。
测试的结果如表1所示：
表1.化合物(ⅰ)、(ⅳ)、(ⅴ)和(ⅵ)对癌细胞株mcf-7生长的抑制作用
(2)根据实施例11，将氯乙酰氯分别用4-碘苯甲酰氯、3-甲氧基苯甲酰氯或肉桂酰氯代替，其他操作同实施例11，分别合成了喹唑啉类化合物(a)，(b)和(c)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(a)，(b)和(c)进行了人乳腺癌细胞株mcf-7生物活性测试，测试结果表明喹唑啉类化合物(a)，(b)和(c)对人乳腺癌细胞株mcf-7抑制效果均不明显，化合物(a)，(b)和(c)对人乳腺癌细胞株mcf-7的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表2所示：
表2.化合物(a)、(b)和(c)对癌细胞株mcf-7生长的抑制作用
上述抗癌活性体外测试实验表明：其它3个结构类似的化合物(a)，(b)和(c)对人乳腺癌细胞株mcf-7生长的抑制作用均不明显。化合物(ⅰ)对人乳腺癌细胞株mcf-7生长的抑制作用显著，明显优于化合物(a)，(b)和(c)。
(3)根据实施例17，将吗啉分别用3,4-二甲苯胺、3,4-二甲氧基苯胺或二正丙胺代替，其他操作同实施例17，分别合成了喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)进行了人乳腺癌细胞株mcf-7生物活性测试，结果表明喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)对人乳腺癌细胞株mcf-7的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表3所示：
表3.化合物(d)、(e)和(f)对癌细胞株mcf-7生长的抑制作用
(4)参照文献(rao,g.-w.etal.chemmedchem,2013,8(6),928-933)的方法制备得到4-氯喹唑啉，再根据实施例1，将4-氯-6-硝基喹唑啉用4-氯喹唑啉代替，其他操作同实施例1，合成了喹唑啉类化合物(g)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(g)进行了人乳腺癌细胞株mcf-7生物活性测试，测试结果表明喹唑啉类化合物(g)对人乳腺癌细胞株mcf-7的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表4所示：
表4.化合物(g)对癌细胞株mcf-7生长的抑制作用
实施例24：抗癌活性体外测试
(1)将制得的化合物(ⅰ)、(ⅳ)和(ⅵ)进行了人肺癌细胞株a-549生物活性测试。
测试方法：四氮唑盐还原法(mtt法)。
细胞株：人肺癌细胞株a-549。上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(a)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用40μldmso溶解，取2μl用1000μl培养基稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。
(b)细胞的培养
①培养基的配制:每1000mldmem培养基(gibco)中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。
②细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。
③测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将第2代细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×106/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，分别加入用培养基稀释的100μg/ml、10μg/ml和1μg/ml样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育3h，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件下不含样品，含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的ic50。
测试的结果如表5所示：
表5.化合物(ⅰ)、(ⅳ)和(ⅵ)对癌细胞株a-549生长的抑制作用
(2)根据实施例11，将氯乙酰氯分别用4-碘苯甲酰氯、3-甲氧基苯甲酰氯或肉桂酰氯代替，其他操作同实施例11，分别合成了喹唑啉类化合物(a)，(b)和(c)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(a)，(b)和(c)进行了人肺癌细胞株a-549生物活性测试，测试结果表明喹唑啉类化合物(a)，(b)和(c)对人肺癌细胞株a-549抑制效果均不明显，化合物(a)，(b)和(c)对人肺癌细胞株a-549的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表6所示：
表6.化合物(a)、(b)和(c)对癌细胞株a-549生长的抑制作用
上述抗癌活性体外测试实验表明：其它3个结构类似的化合物(a)，(b)和(c)对人肺癌细胞株a-549生长的抑制作用均不明显。化合物(ⅰ)对人肺癌细胞株a-549生长的抑制作用显著，明显优于化合物(a)，(b)和(c)。
(3)根据实施例17，将吗啉分别用3,4-二甲苯胺、3,4-二甲氧基苯胺或二正丙胺代替，其他操作同实施例17，分别合成了喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)进行了人肺癌细胞株a-549生物活性测试，结果表明喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)对人肺癌细胞株a-549的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表7所示：
表7.化合物(d)、(e)和(f)对癌细胞株a-549生长的抑制作用
(4)参照文献(rao,g.-w.etal.chemmedchem,2013,8(6),928-933)的方法制备得到4-氯喹唑啉，再根据实施例1，将4-氯-6-硝基喹唑啉用4-氯喹唑啉代替，其他操作同实施例1，合成了喹唑啉类化合物(g)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(g)进行了人肺癌细胞株a-549生物活性测试，测试结果表明喹唑啉类化合物(g)对人肺癌细胞株a-549的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表8所示：
表8.化合物(g)对癌细胞株a-549生长的抑制作用
实施例25：抗癌活性体外测试
(1)将制得的化合物(ⅰ)进行了人早幼粒白血病细胞株hl-60生物活性测试。
测试方法：四氮唑盐还原法(mtt法)。
细胞株：人早幼粒白血病细胞株hl-60。上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(a)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用40μldmso溶解，取2μl用1000μl培养基稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。
(b)细胞的培养
①培养基的配制:每1000mldmem培养基(gibco)中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。
②细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。
③测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将第2代细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×106/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，分别加入用培养基稀释的100μg/ml、10μg/ml和1μg/ml样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育3h，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件下不含样品，含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的ic50。
测试的结果如表9所示：
表9.化合物(ⅰ)对癌细胞株hl-60生长的抑制作用
(2)根据实施例11，将氯乙酰氯分别用3-甲氧基苯甲酰氯或肉桂酰氯代替，其他操作同实施例11，分别合成了喹唑啉类化合物(b)和(c)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(b)和(c)进行了人早幼粒白血病细胞株hl-60生物活性测试，测试结果表明喹唑啉类化合物(b)和(c)对人早幼粒白血病细胞株hl-60抑制效果均不明显，化合物(b)和(c)对人早幼粒白血病细胞株hl-60的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表10所示：
表10.化合物(b)和(c)对癌细胞株hl-60生长的抑制作用
上述抗癌活性体外测试实验表明：其它2个结构类似的化合物(b)和(c)对人早幼粒白血病细胞株hl-60生长的抑制作用均不明显。化合物(ⅰ)对人早幼粒白血病细胞株hl-60生长的抑制作用显著，明显优于化合物(b)和(c)。
(3)根据实施例17，将吗啉分别用3,4-二甲苯胺、3,4-二甲氧基苯胺或二正丙胺代替，其他操作同实施例17，分别合成了喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)进行了人早幼粒白血病细胞株hl-60生物活性测试，结果表明喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)对人早幼粒白血病细胞株hl-60的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表11所示：
表11.化合物(d)、(e)和(f)对癌细胞株hl-60生长的抑制作用
实施例26：抗癌活性体外测试
(1)将制得的化合物(ⅰ)进行了人宫颈癌细胞株siha生物活性测试。
测试方法：四氮唑盐还原法(mtt法)。
细胞株：人宫颈癌细胞株siha。上述肿瘤细胞株购自中国科学院上海生命科学院细胞库。
实验步骤如下：
(a)样品的准备：对于可溶样品，每1mg用40μldmso溶解，取2μl用1000μl培养基稀释，使浓度为100μg/ml，再用培养液连续稀释至使用浓度。
(b)细胞的培养
①培养基的配制:每1000mldmem培养基(gibco)中含80万单位青霉素，1.0g链霉素，10％灭活胎牛血清。
②细胞的培养：将肿瘤细胞接种于培养基中，置37℃，5％co2培养箱中培养，3～5d传代。
③测定样品对肿瘤细胞生长的抑制作用
将第2代细胞用edta-胰酶消化液消化，并用培养基稀释成1×106/ml，加到96孔细胞培养板中，每孔100μl，置37℃，5％co2培养箱中培养。接种24h后，分别加入用培养基稀释的100μg/ml、10μg/ml和1μg/ml样品，每孔100μl，每个浓度加3孔，置37℃，5％co2培养箱中培养，72h后在细胞培养孔中加入5mg/ml的mtt，每孔10μl，置37℃孵育3h，加入dmso，每孔150μl，用振荡器振荡，使甲臢完全溶解，用酶标仪在570nm波长下比色。以同样条件下不含样品，含同样浓度dmso的培养基培养的细胞作为对照，计算样品对肿瘤细胞生长的ic50。测试的结果如表12所示：
表12.化合物(ⅰ)对癌细胞株siha生长的抑制作用
(2)根据实施例11，将氯乙酰氯分别用3-甲氧基苯甲酰氯或肉桂酰氯代替，其他操作同实施例11，分别合成了喹唑啉类化合物(b)和(c)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(b)和(c)进行了人宫颈癌细胞株siha生物活性测试，测试结果表明喹唑啉类化合物(b)和(c)对人宫颈癌细胞株siha抑制效果均不明显，化合物(b)和(c)对人宫颈癌细胞株siha的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表13所示：
表13.化合物(b)和(c)对癌细胞株siha生长的抑制作用
上述抗癌活性体外测试实验表明：其它2个结构类似的化合物(b)和(c)对人宫颈癌细胞株siha生长的抑制作用均不明显。化合物(ⅰ)对人宫颈癌细胞株siha生长的抑制作用显著，明显优于化合物(b)和(c)。
(3)根据实施例17，将吗啉分别用3,4-二甲苯胺、3,4-二甲氧基苯胺或二正丙胺代替，其他操作同实施例17，分别合成了喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)，结构如下所示：
根据上述方法将制得的喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)进行了人宫颈癌细胞株siha生物活性测试，结果表明喹唑啉类化合物(d)、(e)和(f)对人宫颈癌细胞株siha的抗癌活性远不如化合物(ⅰ)。具体结果如表14所示：
表14.化合物(d)、(e)和(f)对癌细胞株siha生长的抑制作用