一种天蚕素抗菌肽生产工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种天蚕素抗菌肽生产工艺，它的步骤如下：（1）携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌复壮：从-70℃冰箱取出冻干粉保存的携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌种，以斜面培养方式复活菌种，接种于斜面培养基上，在斜面生长条件下生长；（2）种子培养与扩大：将斜面上活化好的菌种接种于250ml的锥形瓶上，装30ml摇瓶培养基，摇瓶培养条件下培养；（3）枯草芽孢杆菌的发酵。本发明工艺简单，使生产天蚕素抗菌肤的工艺流程缩短，简便，节约耗料量40%以上，大大降低了原材料的消耗，节约了成本。
【专利说明】一种天蚕素抗菌肽生产工艺
【技术领域】
[0001 ] 本发明涉及一种天蚕素抗菌肽生产工艺。
【背景技术】
[0002]天蚕素(cecropins)是第一个被发现的动物抗菌肽，1980年，由Boman等从天蚕蛹中分离得到。该类多肽抗生素一般含有37~39个氨基酸残基，不含半胱氨酸，其N端区域具有强碱性，可形成近乎完美的双亲螺旋结构，而在C端区域可形成疏水螺旋，两者之间有甘氨酸和脯氨酸形成的铰链区，多数多肽的C端被酰胺化，酰胺化对其抗菌活性具有重要作用。
[0003]此后，人们相继从家蚕、昨蚕、果蝇、麻蝇中分离到了 cecropins类抗菌肽。1989年,Lee等人从猪小肠中分高到了 cecropin Pl,说明了 cecropins可能在动物中广泛存在。天蚕素(cecropins)对革兰氏阳性菌、部分革兰氏阴性菌具有很强的杀伤力，而对真菌和真核细胞没有毒性。
【发明内容】
[0004]本发明要解决的技术问题是提供一种天蚕素抗菌肽生产工艺。
[0005]本发明的技术方案是:一种天蚕素抗菌肽生产工艺，它的步骤如下:
(O携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌复壮:从-70°C冰箱取出冻干粉保存的携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌种，以斜面培养方式复活菌种，接种于斜面培养基上，在斜面生长条件下生长；
(2)种子培养与扩大:将斜面上活化好的菌种接种于250ml的锥形瓶上，装30 ml摇瓶培养基，摇瓶培养条件下培养；
(3)枯草芽孢杆菌的发酵:从种子培养到最后30M3发酵罐发酵培养需要3级种子扩大，一级种子扩大:将摇瓶培养好的种子按1:100分别扩大于3个500 ml的锥形瓶，装50 ml种子培养基，种子培养条件下培养；二级种子扩大:将一级种子扩大的种子按1:100比例扩大于30 L种子发酵罐，装15 L种子培养基，种子培养条件下培养；三级种子扩大:将二级扩大的种子按1:100扩大于3 M3种子发酵罐,装1.5 M3种子培养基,种子培养条件下培养,将二级种子扩大培养好的种子按1:20接种于30M3发酵罐，装21M3发酵培养基，发酵培养条件下培养。
[0006]本发明的有益效果是:本发明工艺简单，使生产天蚕素抗菌肤的工艺流程缩短，简便，节约耗料量40%以上，大大降低了原材料的消耗，节约了成本。
【具体实施方式】
[0007]—种天蚕素抗菌肽生产工艺，它的步骤如下:
(O携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌复壮:从_7(TC冰箱取出冻干粉保存的携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌种，以斜面培养方式复活菌种，接种于斜面培养基上，在斜面生长条件下生长；
(2)种子培养与扩大:将斜面上活化好的菌种接种于250ml的锥形瓶上，装30 ml摇瓶培养基，摇瓶培养条件下培养；
(3)枯草芽孢杆菌的发酵:从种子培养到最后30M3发酵罐发酵培养需要3级种子扩大，一级种子扩大:将摇瓶培养好的种子按1:100分别扩大于3个500 ml的锥形瓶，装50 ml种子培养基，种子培养条件下培养；二级种子扩大:将一级种子扩大的种子按1:100比例扩大于30 L种子发酵罐，装15 L种子培养基，种子培养条件下培养；三级种子扩大:将二级扩大的种子按1:100扩大于3 M3种子发酵罐,装1.5 M3种子培养基,种子培养条件下培养,将二级种子扩大培养好的种子按1:20接种于30M3发酵罐，装21M3发酵培养基，发酵培养条件下培养。`
【权利要求】
1.一种天蚕素抗菌肽生产工艺，其特征在于，它的步骤如下: (O携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌基因工程菌复壮:从-70°C冰箱取出冻干粉保存的携带天蚕素抗菌肽的枯草芽孢杆菌种，以斜面培养方式复活菌种，接种于斜面培养基上，在斜面生长条件下生长； (2)种子培养与扩大:将斜面上活化好的菌种接种于250ml的锥形瓶上，装30 ml摇瓶培养基，摇瓶培养条件下培养； (3)枯草芽孢杆菌的发酵:从种子培养到最后30M3发酵罐发酵培养需要3级种子扩大，一级种子扩大:将摇瓶培养好的种子按1:100分别扩大于3个500 ml的锥形瓶，装50 ml种子培养基，种子培养条件下培养；二级种子扩大:将一级种子扩大的种子按1:100比例扩大于30 L种子发酵罐，装15 L种子培养基，种子培养条件下培养；三级种子扩大:将二级扩大的种子按1:100扩大于3 M3种子发酵罐,装1.5 M3种子培养基,种子培养条件下培养,将二级种子扩大培养好的种子按1:20接种于30M3发酵罐，装21M3发酵培养基，发酵培养条件下培养 。
【文档编号】C12P21/00GK103849667SQ201210502586
【公开日】2014年6月11日 申请日期:2012年11月30日 优先权日:2012年11月30日
【发明者】郭文江 申请人:中农颖泰林州生物科园有限公司