一种益生性药食同源食品提取物冻干粉及其制备方法_2

文档序号:9926012阅读:来源:国知局
物提取物是以冬黑麦、洋葱、沙地柏、沙冬青的种子中的一种或几 种为原料,经高压静电、高压脉冲电场辅助水杨酸浸泡、冷藏冷冻处理后再经复合酶分段酶 解而制得;
[0026] 更优选地,所述植物提取物的制备方法,包括如下步骤:将冬黑麦、洋葱、沙地柏、 沙冬青的种子按质量比13-17:5-11:3-5:1-3均匀混合,装盘,首先于电场强度5-7kV/cm高 压静电处理2-4min;接着在浓度为40-60mg/L的水杨酸溶液中室温浸泡2-4h,同时在电场强 度10-20kV/cm,脉冲时间150-250ys,脉冲频率150-250HZ条件下进行高压脉冲电场处理;漂 洗、浙干,于3_5°C静置18_24h,然后依次在1_3°C冷藏2_4d,-3-5°0冷冻1 -3(1、-15-18°C冷 冻20-30h,立即放在室外于光照强度0.5-5万Lx自然光照2-4h,使混合料半解冻后立即进行 粉碎,粉碎物粒径0.5-1.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水,用乳酸调节pH值为3.5-5.5; 最后加入混合料液质量1-2%的复合酶,首先于35-50 °C酶解10_30min,然后于50-60 °C酶解 20-40min;酶解液过滤、滤液减压浓缩至固形物含量为15-25 %即得植物提取物;
[0027] 所述复合酶为纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、脂肪酶按质量比5-7:2-4:1-3: 1-2:1-2均匀混合。
[0028] 进一步地,所述益生因子重量组成为:低聚异麦芽糖15-25份,低聚半乳糖15-25 份,低聚果糖10-20份,低聚木糖10-20份,水苏糖5-11份,大豆低聚糖5-11份,棉子糖4-10 份,低聚麦芽糖3-7份。
[0029]进一步地,所述植物乳杆菌粉是以植物乳杆菌CGMCC NO. 11763为出发菌株按常规 方法制备的,其活菌含量为:7 X 1012-9 X 1012cfu/g;
[0030] 优选地,所述植物乳杆菌粉制备时冷冻干燥工艺采用的冷冻保护剂为本发明制备 的抗冻剂,可显著提高植物乳杆菌粉在冷冻干燥过程活菌存活率至94%以上。
[0031] 更优选地,植物乳杆菌CGMCC NO. 11763湿菌体与抗冻剂混合的质量比为1:0.6- 1.4。
[0032] 本发明另一目的是提供上述益生性药食同源食品提取物冻干粉的制备方法,包括 如下步骤:
[0033] 1)提取液的制备:按照配方,称取各组份原料,首先将药食同源食品放入装有0.8- 1.2 %碳酸氢钠溶液的超声波清洗机中于200-400W、20-40KHZ清洗3-5min,沥干,预处理,置 微波干燥中于功率3-5kW、料层厚度2-4cm、50-70 °C、干燥4-6min,然后浸泡在质量百分比为 8-12%的丝胶肽溶液中10-15min,取出,于-18-22°C冷冻30-50min后立即进行粉碎,冷冻 料层厚度3-5cm,粉碎物粒径0.3-0.5mm,接着加入粉碎物质量4-6倍的水,用乳酸调节pH值 为3.5-5.5,于室温下在电场强度25-35kV/cm,脉冲时间300-500ys,脉冲频率200-300HZ条 件下进行高压脉冲电场处理20_30min;然后于室温在功率150-300W条件下进行微波辐照提 取15-20min,同时在功率200-300W,频率30-40KHZ条件下进行超声波辅助提取;最后真空脱 气得果蔬汁,加入其质量〇. 2-0.6 %的混合酶,于40-50°C酶解30-50min,取酶解液质量0.5-1 %的蛋清,放入搅拌机中于转速800-1000r/min搅拌10-12min,直至蛋清全部成为泡沫得 到蛋清泡沫,将蛋清泡沫加入酶解液中,常压煮沸l_3min,迅速降至室温,80-100目筛网过 滤,滤液减压浓缩至固形物含量至30-50 %得药食同源食品提取液;
[0034] 所述混合酶为纤维素酶、蛋白酶、果胶酶、脂肪酶按质量比2-4:1-3:1-2:1-2均匀 混合;
[0035] 2)混料:将抗冻剂和膳食纤维粉质量的4-6 %依次加入提取液中,均匀混合,在功 率300-500W,频率35-45KHZ条件下进行超声溶解10-15min,得混合液;
[0036] 3)冻干:混合液置冻干仓内速冻至-40~-50 °C,并在-40~-50 °C下预冻2~3h;然 后将冻干仓内抽真空至15~20Pa后,在8-10h内逐步升温并控制混合液最终温度在-15~-18°C;接着在冻干仓内真空度不变的情况下,调节冻干仓内温度使其在5-7h内逐步升温至 室温,到冻干粉水分小于4%时出料,无菌条件下与植物乳杆菌粉、剩余的膳食纤维粉、益生 因子均匀混合得益生性药食同源食品提取物冻干粉。
[0037] 本发明植物乳杆菌(LactobaciIlus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏号为CGMCC NO. 11763,保藏 地址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101。 [0038] 植物乳杆菌益生特性如下:
[0039]本发明所提供的植物乳杆菌CGMCC NO. 11763经实验发现能够在pH为1.50的条件 下存活,在1%胆盐培养4小时后仍处于存活状态;植物乳杆菌CGMCC NO. 11763降解亚硝酸 盐速度快,分解能力达到10.9mg/h/kg,该菌种在生产泡菜时,整个发酵过程中亚硝酸盐浓 度在4.8mg/kg以下;CGMCC NO. 11763在发酵60h小时后,对胆固醇降解率可达到64.76%。 CGMCC NO · 11763黏附能力测定的自凝集率为95 · 71 %。
[0040] 植物乳杆菌CGMCC NO. 11763对胆固醇降解能力研究和测定:
[0041 ] 取Iml CGMCC NO. 11763母液接种于IOmL的MRS胆固醇液体培养基(胆固醇含量 0.1mg/ml,pH 6.2)中,37°C的恒温静置分别培养20h、40h、60h备用,以接入ImL无菌水的MRS 胆固醇培养基为对照,取以上培养不同时间的菌液样品及对照液各lml,9000r/min,4°C下 离心10min,得到发酵上清液,邻苯二甲醛法测定上清液中胆固醇含量(具体为:取各上清液 O . Iml于相应的试管中,加冰醋酸O . 3ml,lmg/ml的邻苯二甲醛O . 15ml,缓缓加入浓硫酸 I.Oml,混合均匀。室温静置IOmin,于550nm下测吸光值)。每一处理3个重复,以同样方法制 作胆固醇标准曲线,计算上清液中胆固醇含量及降解率,结果见表1。可知,CGMCCNO. 11763 对胆固醇有很好的降解作用,在发酵60h小时后,降解率可达到64.76%。
[0042]表1对胆固醇的降解情况。
[0044] 植物乳杆菌CGMCC NO. 11763菌株的耐胆盐试验:
[0045] 取CGMCCNO. 11763菌液ImL接种菌种于含有不同胆盐(含量梯度为0.0%、0.2%、 0.4%、0.6%、0.8%、1%)的1011^]\?5液体培养基(?!1=6.4),置于37°(:下分别培养0、2、411, 每个处理3个重复。各取Iml样品菌液于9ml生理盐水中混匀,制备稀释度溶液,取0.1ml稀释 液于MRS中涂布,于37°C生化培养箱中倒置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录计算平 板上的菌数个数。结果见表2。可知该菌在胆盐浓度为1 %处理4h后菌的生长量依然达到 0· 59±0·92 X 107(cfu/ml),有很好的耐胆盐能力。
[0046] 表2耐胆盐能力检测[(土s) X 107cfu/ml]
[0048] 植物乳杆菌CGMCC NO. 11763菌株的耐酸试验
[0049] 取HLX37母液按Iml接种菌种于不同pH值(pH梯度为1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0)的 IOmLMRS液体培养基,置于37 °C下分别培养0、2、4h,每一处理3个重复。各取Iml样品菌液于 9ml生理盐水中混匀,制备稀释溶液,取0 . Iml稀释液于MRS中涂布,于37 °C生化培养箱中倒 置培养48小时(每个稀释度做3个平行)记录平板上的菌落个数。结果见表3。说明该菌具有 很强的耐酸能力。
[0050] 表3耐酸能力检测[(土s) X 107cfu/ml]
[0052] 植物乳杆菌CGMCC NO. 11763的黏附能力测定
[0053] 培养CGMCC NO. 11763(MRS液体培养基)、大肠杆菌DH5a(LB液体培养基)24h得发酵 液,分别置于3000r/min、4°C下离心10min,收集菌泥,分别用pH = 7.0的无菌磷酸盐缓冲液 (PBS)洗涤菌泥2次(即在菌落中加入PBS,震荡混合均匀后,置于3000r/min、4°C下离心 IOmin,收集菌体)。自凝集率(% :用无菌的I3BS将菌泥CGMCC NO. 11763制成在波长600nm处 的吸光值为0.4 ±0.1 (A 0)的悬浮菌液及菌悬液,静置24h后测定吸光值A 24,自凝集率 (%)公式为(A 0-A 24)/A 0。;他凝集率(%):将CGMCC如.11763和大肠杆菌0耶€[的悬菌 液调节成在波长600nm处的吸光值为0.6±0.1(A 0)的混合悬浮菌液。静置24H后测定吸光 值A 24,他凝集率(% )公式为(A 0 -A 24)/A 0。测定结果见表5,可知CGMCC NO. 11763的自 凝集率为95.71 %,有很强的黏附能力。
[0054]表4黏附能力表
[0056] 植物乳杆菌CGMCC NO. 11763的菌株生理特性
[0057] 所述植物乳杆菌(LactobaciIlus plantarum)XH于2015年11月30日保藏于中国微 生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC),保藏号为CGMCC NO. 11763,保藏地 址为:中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所,邮编:100101。 [0058]该菌株特点如下:在显微镜下观察,该菌株为短杆状,革兰氏染色呈阳性,无鞭毛, 不产芽孢;在固体培养基上,该菌菌落为白色,表面光滑,致密,形态为圆形,边缘较整齐。
[0059] 理化特征为:过氧化氢酶(-),明胶液化(-),吲哚实验( + ),运动性(-),发酵产气 (_),亚硝酸盐还原(_),发酵产气(_),产硫化氢气体(_),pH4.0MRS培养基中生长(+ )。经过 生理生化鉴定为为植物乳杆菌(Lactobaci Ilus plantarum),命名为植物乳杆菌 (Lactobacillus plantarum)XH〇
[0060] 菌株能够在57°C下生长良好,葡萄糖耐受能力为275g/L。
[0061] 本发明植物乳杆菌由采集人李建树,从新疆维吾尔族老乡家中酸奶中分离得到, 采集时间2015年6月2日。
[0062]本发明植物乳杆菌CGMCC NO. 11763经实验发现能够在pH为1.50的条件下存活,在 1 %胆盐培养4小时后仍处于存活状态;植物乳杆菌CGMCC NO. 11763降解亚硝酸盐速度快, 分解能力达到10.9mg/h/kg,该菌种在生产泡菜时,整个发酵过程中亚硝酸盐浓度在4.8mg/ kg以下;CGMCCN0.11763在发酵60h小时后,对胆固醇降解率可达到64.76 % XGMCC NO. 11763黏附能力测定的自凝集率为95.71 %,菌株能够在57°C下生长良好,葡萄糖耐受能 力为 275g/L。
[0063] 有益效果:
[0064]本发明以药食同源食品为原料,首先采用超声清洗对药食同源食品药食同源食品 进行杀虫灭卵、杀灭微生物、去除农药残留和重金属离子等,大大提高了冻干粉的食品安全 性;采用微波干燥在使得药食同源食品短时、低温膨化干燥的同时主要是灭酶、固色,最大 限度地保留了药食同源食品的天然色泽,经微波固色后的药食同源食品天然色泽在后续的 加工过程中非常稳定,不会变色、褪色,色泽非常鲜艳,可保持药食同源食品的天然色泽;在 含有丝胶肽的水溶液中浸泡复水,可最大限度地减少经冷冻而造成的药食同源食品活性物 质及冷敏性成分的损失,提高了药食同源食品有效成分的提取率,全程采用低温提取工艺, 将超声清洗、微波灭酶固色和膨
当前第2页1 2 3 4 5 6 
网友询问留言 已有0条留言
  • 还没有人留言评论。精彩留言会获得点赞!
1