°C温水，充分搅拌，完全溶解;第三组每天晚餐冲饮本发明实施例2的枸 杞提取物冻干粉80g，按质量比1:5加入55-65 °C温水，充分搅拌，完全溶解;期间每天食用同 样的食物，食物包括肉、蛋、蔬菜和水果。分别在实验开始的前一天和第20、40、60天采集试 验者的血液，测定血液中的总胆固醇含量，结果如表2:
[0145] 表2:血液中总胆固醇含量检测结果
[0147] 由上表可知冲饮本发明实施例2的枸杞提取物冻干粉后，成年人血液中的总胆固 醇的含量发生明显变化。与普通市售枸杞提取物冻干粉相比，本发明枸杞提取物冻干粉对 成年人血液中的总胆固醇的含量明显的降低，而矿泉水组成年人血液中的总胆固醇的含量 明显的增加，市售枸杞提取物冻干粉虽然有所降低，但与本发明产品相比，效果不显著，由 此可知，本发明采用具有降低胆固醇特性的特定菌株制备的冻干粉具有很好的降低胆固醇 的保健效果。
[0148] 需要说明的是:本发明实施例3-6所制备的益生性药食同源食品提取物冻干粉同 样具有上述技术效果，各实施例之间差异性不显著。
[0149] 实施例9本发明益生性药食同源食品提取物冻干粉保质期内植物乳杆菌活菌含量 稳定性试验
[0150] 取本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉于室温22-25Γ、通风条件下分别储藏 3个月、6个月、12个月、24个月、36个月并测定植物乳杆菌活菌含量，结果如表3:
[0151] 表3:保质期内植物乳杆菌活菌含量检测结果
[0154] 以上结果表明：本发明冻干粉的储存稳定性极好，抗环境(冷热温度、湿度、氧气、 光照、水分等）影响因素能力大，保质期内植物乳杆菌活菌含量损失率最大（36个月）为 10%，比现有的同类产品活菌含量高、损失率低、保质期长，同时反映出冻干粉的其它生物 活性成分具有同样的储存稳定性。
[0155] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的益生性药食同源食品提取物冻干粉同样 具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0156] 实施例10本发明益生性药食同源食品提取物冻干粉的感官品评试验
[0157] 邀请24名人员对本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉与市售两种同类相同生 产日期的冻干粉进行品评，感官打分，其中专业和非专业人员各12名，专业人员青年、中年、 老年各4名，男女各半，非专业人员少年、青年、中年、老年各3名，男女各半；打分包括外观 (20分）、质地(25分）、风味（30分）、口感(25分）四个方面，打分人员独立进行，互不影响，以 保证品评结果准确。对品评结果进行了统计，均分值取近似值，保留整数，具体见表4:
[0158] 表4:感官品评统计结果
[0160] 注：同一行内标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，标不同大写字母表示差异 极显著(P<〇.01)，标有相同字母表示差异不显著(P>〇.05)。
[0161 ]以上结果表明，本发明制备的冻干粉从外观、质地、风味和口感任何一方面都要明 显优于市售冻干粉，特别是外观、风味和口感极好，最大限度地保留了药食同源食品原料的 天然色泽、口感和风味，同时也适合不同年龄段、不同消费层次的消费者食用。
[0162] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的益生性药食同源食品提取物冻干粉同样 具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0163] 实施例11本发明益生性药食同源食品提取物冻干粉益生性试验
[0164] 将本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉，用无菌水制备成活菌数为2 X 101()CFU/mL的植物乳杆菌溶液，于4°C保存备用；
[0165] 1、取保存好的IOmL植物乳杆菌溶液注入到试管1中，采用十倍逐级稀释至10Λ取 ImL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45°C的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌)上，迅速摇 匀。再将装有IOmL植物乳杆菌溶液的试管2置于80-90°C水浴锅中加热15-25min，取加热后 的植物乳杆菌溶液进行十倍逐级稀释至10- 8,取ImL稀释液在平板上，将灭菌后冷却至45°C 的MRS琼脂培养基倾注在平板(灭菌）上并迅速摇匀。最后将加热前和加热后的平板均在35 °C条件下培养24h，计算加热前后的数量。
[0166] 结果表明，活菌存活率达到了88%以上。
[0167] 2、模拟胃液及肠液的耐受试验：取100g/L的盐酸16.4mL加蒸馏水稀释，使pH值分 别为1.5、2.5和3.5,取IOOmL稀盐酸溶液，分别加入Ig胃蛋白酶，使其充分溶解，得模拟胃 液，微孔滤膜除菌(0 · 22μπι)备用。取磷酸二氢钾6 · 8g，加水500mL使溶解，用0 · ImoL/L氢氧化 钠溶液调节pH值至6.8;另取胰蛋白酶IOg，加水IOOmL使溶解，将两液混合后，加水稀释至 1000ml，得模拟肠液，微孔滤膜除菌(0.22μπι)备用。取ImL保存好的植物乳杆菌溶液加入到 9mL的模拟胃液中（即十倍逐级稀释），并迅速在振荡器上充分混匀，然后置于30-45Γ静置 培养2-4h。分别在11 1、211、311、411的时候取出培养液并立即计数残存活菌数，与原活菌数进行 比较，结果表明，活菌存活率为98 %。然后取在人工胃液中消化不同时间的培养液各ImL，分 别接种于9mL pH值为6.8的人工肠液中，置于30-45°(：静置培养2-411，并分别在0、3、6、2411取 样，测定其活菌数，与原活菌数进行比较，结果表明活菌存活率为99%。
[0168] 3、模拟胆盐的耐受试验:用胰液素制成lg/L的溶液，并在溶液中加入0.8%的猪胆 盐，用10 %的NaOH调整pH为8.0，然后用0.45μπι微滤膜过滤并除菌。将0.5mL保存好的植物乳 杆菌溶液接种到4.5mL模拟胆盐中，培养24h后得到培养液，计数残存的活菌数。将培养液在 灭菌生理盐水中十倍逐级稀释至10-8,并用MRS倾注，然后置于35°C静置培养24h。结果表明 活菌存活率为99 %。
[0169] 以上试验结果表明，本发明冻干粉中的植物乳杆菌益生性(耐热性、耐pH性、耐胆 盐)较强，非常适合人体胃肠环境，在模拟胃肠环境中存活率大，可有效改善胃肠功能。
[0170] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的益生性药食同源食品提取物冻干粉同样 具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0171] 实施例12本发明益生性药食同源食品提取物冻干粉小鼠肠道性能试验
[0172] 将本发明实施例2制备的枸杞提取物冻干粉，用无菌水制备成活菌数为2 X 101()CFU/mL的植物乳杆菌溶液，于4°C保存备用；
[0173] 选取普通昆明小白鼠60只，雌雄各半，18_20g，常规词养。从中随机挑选40只，每天 早晨9:00灌胃盐酸林可霉素0.2mL(20mg)/只，其它作为对照组，每天同一时间灌胃等量灭 菌生理盐水，连续一周，制备肠道菌群失调的小鼠模型。模型组小鼠饮食下降，未出现死亡 和明显的腹泻现象，排软粪，外形正常含水分较多，垫料潮湿。将40只肠道菌群失调小鼠，随 机分为2组，一组20只作为治疗组，每天灌胃保存好的植物乳杆菌溶液0.5ml (2 X IO1t3Cfu/ ml)/只，另20只作为自然恢复组，每天同一时间灌胃等量灭菌生理盐水，连续两周。整个试 验期21天，每天观察小白鼠的生长和排便情况，于第8、21天对冻干粉治疗组和自然恢复组 的小鼠进行称重，计算各组体重平均增长率，结果如表5;每5天测各组小鼠粪便大肠杆菌数 量，计算平均数，结果如表6。取小鼠粪便约0.1 g，于无菌操作台内加入3粒玻璃珠（以0.1 g粪 样加0.5mL稀释液），稀释并接种麦康凯琼脂培养基，计算每克湿便中的大肠杆菌数。
[0174] 表5:小鼠增重情况
[0178] 冻干粉治疗组小鼠体重平均增长率(67.96%)显著高于自然恢复组(32.14%);饲 喂溶液后肠道大肠杆菌数量显著下降，降低97.07%，显著低于自然恢复组(24.78%)，表明 本发明冻干粉中的植物乳杆菌在小白鼠肠道内迅速定植，形成优势菌群，并有效抑制大肠 杆菌等病原菌的生长繁殖，并且定植时间长，持续、有效改善了肠道性能。
[0179] 需要说明的是:本发明实施例3-6制备的益生性药食同源食品提取物冻干粉同样 具有上述实验效果，各实施例之间及与上述实验效果差异性不大。
[0180] 实施例13本发明益生性药食同源食品提取物冻干粉对机体免疫力的影响
[0181] 1实验目的
[0182] 通过运动耐力测试(小鼠游泳试验），验证本发明益生性药食同源食品提取物冻干 粉的提高免疫力、抗疲劳作用。
[0183] 2实验材料与试剂
[0184] 2.1供试药物：
[0185] 市售益生性药食同源食品提取物冻干粉(Gl);市售益生性药食同源食品提取物冻 干粉(G2);本发明实施例2-6制备的益生性药食同源食品提取物冻干粉(G3-G7)。
[0186] 2.2试剂：
[0187] 肝/肌糖原测试盒，购自南京建成生物制品研究所;浓硫酸(AR)，南京化学试剂有 限公司；生理盐水，山东长富洁晶药业有限公司。
[0188] 3.实验动物
[0189] ICR小鼠，清洁级，体重18_22g，由宁夏医科大学比较医学中心提供，实验期间小 鼠自由饮食。
[0190] 4.主要仪器
[0191 ] 错制游泳箱（50cm X 50cm X 40cm)，铅丝，低温高速离心机：5804R型，Eppendrof公 司；水浴锅:DK-S26型，上海精宏实验设备有限公司；电子称:BS224S型，Sartorius公司；秒 表，温度计
[0192] 5.实验分组
[0193] 5.1剂量分组及受试样品给予时间随机将小鼠分为8组，每组10只，第1组至第7组 分别给Gl~G7的药物，第8组为空白对照组，给予等体积的双蒸水，每组每日均灌胃1次，灌 胃体积为0.2ml/10g，连续给予受试样品30天。
[0194] 5.2样品配制第1组至第7组:称取2.25g药物样品，用蒸馏水配至150ml;空白对照 组:双蒸水150ml。
[0195] 6.实验方法
[0196] 6.1负重游泳实验末次给药30min后，置小鼠于游泳箱中，水深不少于30cm，水温25 ± TC，鼠尾根部负荷5%体重的铅皮，记录小鼠游泳开始至死亡的时间，作为小鼠游泳时 间。
[0197] 6.2小鼠血清尿素测定末次给药3〇11^11后，在温度为30°(：的水中不负重游泳9〇1^11， 休息60min后摘眼球采血0.5mL (不加抗凝剂），置4°C冰箱3h，血凝固后2000r/min离心 15min，取血清送宁夏医科大学附属医院检验科检测。
[0198] 6.3肝糖原的测定末次给药3〇11^11后，在温度为25±1°(：的水中不负重游泳9〇1^11， 颈椎脱臼处死小鼠，用生理盐水洗净，并用滤纸吸干水分后，准确称取肝脏l〇〇mg，肝糖原检 测试剂盒检测小鼠肝糖原含量。
[0199] 6.4血乳酸的测定末次给药30min后采血，然后不负重在温度为30 °C的水中游泳 IOmin后停止。乳酸仪测定方法:分别在游泳前、游泳后、游泳后休息20min后各采血20yL加 入40yL破膜液中，立即充分振荡破碎细胞用乳酸仪测定。（血乳酸曲线下面积= 5X(游泳前 血乳酸值+3 X游泳后Omin的血乳酸值+2 X游泳后20min的血乳酸值）
[0200] 7.观察指标负重游泳时间，血乳酸、尿素、肝糖原值
[0201 ] 8.统计方法实验数据用^± s表示，采用t检验进行组间比较
[0202] 9.实验结果
[0203] 9.1本发明益生性药食同源食品提取物冻干粉对小鼠体重的影响
[0204] 各组小鼠在给予Gl~G9药物后，前、中，后期体重分别见下表所示，各组小鼠的初 始体重和增重体重与对照组比较均无统计学差异(P>〇.05)，表明Gl~G9药物均无明显的 毒性。实验结果详见表7。
[0205] 表7负重游泳实验小鼠的初始体重、中期体重和结束体重(I±.s'）
[0207] 9.2本发明益