用于治疗或预防退行性和炎症性疾病的药物组合物的制作方法

专利名称：：用于治疗或预防退行性和炎症性疾病的药物组合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种药物组合物和方法，所述的药物组合物和方法用于治疗或预防在炎症性疾病中出现的发炎和细胞损伤，所述炎症性疾病例如胃炎、胃溃疡、胰腺炎、大肠炎、关节炎、糖尿病、动脉硬化、肾炎、肝炎、阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症(LouGehrig'sdisease)。
背景技术：
：炎症是一种血细胞膜和细胞抵抗由受损细胞和进入体内的外来物质引起的损伤因子而产生的反应。已知干预炎症反应的物质有l)花生四烯酸的代谢物，即，前列腺素、白三烯和脂氧素(lipoxins);2)血小板活化因子；3)细胞因子，例如肺瘤坏死因子-a、白细胞介素-l(IL-l)等，以及趋化因子，例如单核细胞趋化蛋白(MCP-1)、巨噬细胞炎症蛋白-la(MCP-la)等；4)一氧化氮(NO);5)活性氧；6)血管舒张因子(vasodilatingfactors),例如组胺、5-羟色胺等。炎症反应的主要目的是消除外来物质和受损细胞(或细胞组织)，但是炎症反应也可能导致像风湿性关节炎和动脉硬化这样的慢性病。如果炎症损伤的程度是轻微、有限和暂时的，炎症反应的终止显示，损伤因子被消除，组织恢复正常状态。炎症反应发生在有大的损伤的位置，或伴随有主要组织损伤的再生能力较弱的位置，其有可能导致功能障碍。在风湿性关节炎、动脉硬化、肺结核、慢性肺部疾病等疾病中，长时间发生的慢性炎症反应可能是造成致死组织损伤的原因(PathologicalBasisofDisease(疾病病理基础)，pp47-86,第7版)。另外，有很多文献公开了炎症在退行性脑疾病(degenerativebraindisease)的病例生理学方面起到关键性作用。在阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症中，存在于脑中的小胶质细胞在神经元损伤发生的位点被激活(LiuB和HongJS.JPharmacolExpTher.2003;304(1):1-7;OrrCF等，ProgNeurobiol.2002;68(5):325-40;和HenkelJS等,AnnNeurol.2004;55(2):221-35)。有活性的小胶质细胞产生前列腺素、细胞因子、趋化因子、活性氧和NO等，这些物质开始在脑部引起炎症反应(MinghettiL.CurrOpinNeurol.2005;18(3):315-21;GaoHM,TrendsPharmacolSci.2003;24(8):395-401;WeydtP和MollerT.Neuroreport.2005;16(6):527-31;J丄M.HoozemansInt.J.DeviNeuroscience.2006;24:157-165)。因此，据报道，通过给予药物抑制炎症的方法抑制了阿尔茨海默病动物模型中15-淀粉样蛋白和鼠疫的产生(TownsendKP和PraticoD.FASEBJ.2005;18:315-21)，保护了帕金森病动物模型中的多巴胺神经细胞(FergerB等，NaunynSchmiedebergsArchPharmacol.1999;360(3):256-61;TeismannP,FergerB.Synapse.2001;39(2):167-74)，在肌萎缩性脊髓侧索硬化症才莫型中防止脊髓运动神经元的死亡以及减小胶质纟田胞的活性(KiaeiM等，JNeurochem.2005;93(2):403-ll)。实际上，在由挫伤等引起脑炎症反应的患者中，阿尔茨海默病的罹患率很高(BreitnerJC.Neurology.1994;44(2):227-32)，而在长时间给予非甾体抗炎药(NSAIDs)的风湿性关节炎患者中阿尔茨海默病的罹患率很低(McGeerPL等.，Lancet.1990;335(8696):1037)。另夕卜，据报道，给予NSAID不仅预防阿尔茨海默病，还延緩了损伤认知功能的发展(Rich等.，Neurology.1995)。这些结果表明，药物抑制炎症反应可以用于预防和治疗退行性脑疾病。NSAIDs是抑制参与产生前列腺素的环氧合酶活性的药物，该药物已经研发并广泛用于减轻炎症性疾病包括疼痛在内的症状，但是由于具有不良反应而阻碍了NSAIDs的应用。特别是，在给予药物后发生的不良反应通常为胃肠病，例如消化不良、胃炎、溃疡、出血和穿孔。实际上，据报道，仅在美国就有107,000人由于NSAIDs的副作用而住院接受治疗，并且有16,500人死亡。选择性COX-2(环氣合酶-2)酶抑制剂塞来昔布(Celecoxib)和罗非昔布(Rofecoxib),对于胃肠损伤具有较低的不良反应，已经被研发和用于治疗关节炎和疼痛。但是，据U.S.FDA报道，长期给予塞来昔布、罗非昔布和伐地昔布(valdecoxib)6可能会导致心脏疾病，因而禁止了这些药物作为治疗关节炎药物的使用。此外，由于其安全问题，评价塞来昔布、罗非昔布和伐地昔布对痴呆症疗效的临床试验也被中止。另外，在炎症性疾病中由中性粒细胞、巨嗟细胞、单核细胞等产生的活性氧被认为是导致由介导炎症反应造成组织损伤的主要原因。事实上，据报道通过给予药物来消除活性氧能有效治疗由炎症性疾病产生的下列各种损伤胃损伤(Ma他ewsGM等，Helicobacter.2005;10(4):298-306)、胰腺损伤(ShiC等，Pancreatology.2005;5(4-5):492-500)、动脉粥样石更化(TardifJC.CurrAtherosclerRep.2005;7(1):71國7)、结肠损伤(OzHS等，JNutrBiochem.2005;16(5):297-304)、关节损伤(HenrotinYE等，OsteoarthritisCartilage.2003;11(10):747-55)、肾损害(TianN等，Hypertension.2005;45(5):934-9)、流域损伤(riverdamage)(LoguercioC等，FreeRadicBiolMed.2003;34(l):l-10)和心血管损伤(HaidaraMAetal.，CurrVasePharmacol.2006;4(3):215-27)。此外，给予NSAlDs造成活性氧的产生，并且诱导胃粘膜的损伤。据报道，通过给予抗氧化物质，这种胃损伤会有所减少(GrazianiG等，Gut2005;54(2):193-200)。炎症在消化系统疾病、呼吸系统疾病或神经元系统疾病的病理生理学中起到了重要作用，但是由于药物的不良反应，现有的有效药物的使用是有限的。作为一种抗炎药，阿司匹林(乙酰水杨酸)^皮iL为抑制了NF-kB和c-Jun氨基末端激酶的作用(KoHW等，JNeurochem.1998;71(4):1390-5),并且柳氮磺胺吡咬被认为通过其抗氧化活性来保护细胞(RyuBR等，JPharmacolExpTher.2003;305(l):48-56)。然而，还存在一个缺点，阿司匹林和柳氮磺胺吡咬只有在高浓度下才会表现其细胞保护作用
发明内容技术问题有鉴于此，本发明的目的是提供一种用于治疗或预防炎症性疾病的药物组合物，该药物組合物没有例如胃损伤和心血管病这样的不良反应；本发明还提7供了该药物组合物对炎症性疾病的治疗或预防的用途；本发明还提供了一种包含给予该组合物在内的治疗或预防炎症性疾病的方法。为了实现本发明的目的，本发明提供了一种用于治疗或预防炎症性疾病的药物组合物，该药物组合物的有效成分包括由下列化学式1表示的2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐[化学式1]其中，n为2到5的整数；Rj为氢或烷基；R2为氢、烷基或醛基(alkanoyl);R3为氢或乙酰氧基；以及X为独立的氢、硝基、卣素、烷基、卣代烷基、烷氧基、卣代烷氧基。优选的，本发明的提供的药物组合物所治疗的炎症性疾病，选自以下列疾病构成的组中的任意一种胃炎、大肠炎、关节炎、糖尿病炎症、动脉硬化、肾炎、肝炎、阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症。本发明还提供了一种用于治疗或预防炎症性疾病的方法，该方法包括给予患有炎症性疾病的病人或动物有效治疗剂量的、由下列化学式1表示的2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐。本发明制备和评价了许多化合物，成功发现了以下事实2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐对治疗或预防炎症性疾病更为有效，并且也很安全。以下，将更详细地说明用于治疗或预防炎症性疾病的药物组合物，以及治疗或预防炎症性疾病的方法。技术方案本发明提供了一种新用途，即，由下列化学式1表示的2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐治疗或预防炎症性疾病的用途，并且还^^供了一种使用2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐治疗或预防炎症性疾病的方法。-苯曱酸(化合物2)、2-羟基-5-[2-(3-三氟甲基-苯基)-乙氨基]-苯甲酸(化合物3)、5-[2-(3,5-双-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸(化合物4)、2-羟基-5-[2-(2-硝基-笨基)-乙氨基]-苯甲酸(化合物5)、5-[2-(4-氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸(化合物6)、5-[2-(3,4-二氟-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯甲酸(化合物7)、5-[2-(3,4-二氯-笨基)-乙氨基]-2-羟基-苯甲酸(化合物8)、5-[2-(4-氟-2-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯甲酸(化合物9)、5-[2-(2-氟-4-三氟甲基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸(化合物10)、2-羟基-5-[2-(4-曱氧基-苯基)-乙氨基]-苯甲酸(化合物11)、2-羟基-5-(2-0-甲苯基-乙氨基)-苯曱酸(化合物12)、2-羟基-5-(3-苯基-丙氨基)-苯曱酸(化合物13)、2-羟基-5-[3-(4-三氟曱基-苯基)-丙氨基]-苯曱酸(化合物14)、5-[3-(4-氟-苯基)-丙氨基]-2-羟基-苯曱酸(化合物15)、5-[3-(3，4-二氯-笨基)-丙氨基]-2-羟基-苯曱酸(化合物16)、2-羟基-5-(3-p-曱苯基-丙氨基)-苯甲酸(化合物17)、2-乙酰氧基_5_[2—(4-三氟甲基_苯基)_乙氨基]-苯甲酸(化合物18)、5-[2-(2-氯-苯基)-乙氨基]_2_羟基_苯曱酸(化合物19)。在上述优选化合物中，作为治疗炎症性疾病的治疗剂，2-羟基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸(化合物2)和2-乙酰氧基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯甲酸(化合物18)比其他2-羟基苯甲酸衍生物更为优选。特别是，当用于治疗细胞损伤和退行性脑疾病的炎症时，化合物2比其他2-羟基苯曱酸衍生物更为优选。与一些具有类似化学结构的化合物相比，化合物2显示出更好的抗炎症作用和对fJ-淀粉样蛋白的产生更好的抑制效果。当仅考虑类似对NO的产生的抑制作用这样的一项试验时，即使有些化合物显示出比化合物2更好的效果，但是由于该化合物在其他试验中表现出相关的较差作用，故作为治疗退行性脑病的治疗剂，比不上化合物2(例如，一些化合物对NO的产生显示出比化合物2更好的抑制作用，但是这些化合物对fi-淀粉样蛋白的产生表现出非常弱的抑制作用，而！5-淀粉样蛋白对于治疗退^f亍性脑病是非常重要的因素)。另外，一些化合物虽然在所有药效试验中都表现出很好的疗效，但是与化合物2相比，在以下的毒性试验中表现出较差的安全性结果。同样地，在优选的化合物中，化合物18在治疗炎症性疾病方面比其他2-羟基笨甲酸衍生物更为优选。与具有类似化学结构的化合物相比，化合物18在抗炎药效试验中表现出更优秀的效果，但在下列毒性试验中化合物2比化合物18更为优选。本发明的2-羟基苯曱酸衍生物可通过但不限于下列反应方案制备。本发明的2-羟基苯曱酸衍生物也可通过现有技术中已知的常规合成方法来制备。<反应方案1><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反应条件三乙胺，四丁基嫌化铵，N,N-二曱基甲酰胺，室温，3小时<反应方案2><formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>反应条件(a)乙醇，H2S04,回流，6小时；(b)乙酸酐，曱醇，0°C,30分钟；(c)乙酸酐，H2S04，0°C,30分钟另夕卜，本发明的一个优选实施例中，2-羟基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸(化合物2)可通过但不限于下列反应方案3制备。<反应方案3〉<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>化肉桂酸，PC15，二甲苯，回流，12小时；(b)乙酰氯，DMF/K2C03，室温，2小时；(c)NaBH4,乙H，4-二氧六环，95°C,50分钟；(d)HCl/H20，乙酸本发明涉及的"药学上可接受的盐"是指由无毒或毒性小的碱生成的盐。如果本发明的化合物是酸性的，可通过使该化合物的游离碱与足量的想要的碱以及充足的惰性溶剂反应，来制备本发明的化合物的碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐包括但不限于钠盐、钾盐、钙盐、铵盐、镁盐或由有机氨制成的盐。如果本发明的化合物是碱性的，可通过使该化合物的游离碱与足量并适当的酸和充足的惰性溶剂反应，来制备该化合物的酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐包括但不限于丙酸盐、异丁酸盐、草酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、富马酸盐、扁桃酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、曱基磺酸盐、盐酸盐、溴酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、硫酸盐、硫酸氢盐、氬^f典酸盐和亚磷酸盐。另外，本发明的药学上可接受的盐包括但不限于氨基酸盐，例如精氨酸盐；以及有机酸盐的类似物，例如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸(galactunoric)。例如，本发明的一个优选实施例中，2-羟基-5-[2-(4-三氟甲基-苯基)-乙氨基]-苯甲酸(化合物2)的一种药学上可接受的盐可通过下列反应方案4来制备。但是，下列反应方法是说明性的，并非用来限制本发明的范围。<反应方案4>12在该反应方案中，M为药学上可接受的金属或碱性有机化合物，例如二乙胺、锂、钠和钾。更详细地，二乙胺盐可采用下列方法制备将化合物溶解于乙醇中，滴加二乙胺，搅拌混合物，真空蒸馏，加入醚而使残留物质结晶。碱金属盐可通过下列方法制备在溶剂中用无机试剂制备适当的盐，之后经冷冻干燥，所述无机试剂例如可为氢氧化4里、氢氧化钠、氢氧化钾，所述)容剂例如可为乙醇、丙酮、乙腈。另外，依照类似的方法，锂盐可用醋酸锂制备，钠盐可用2-乙基己酸钠或醋酸钠制备，钾盐可用醋酸钾制备。本发明的一些化合物可为水合式，并且能以溶剂化形态或非溶剂化形态存在。根据本发明得到的一部分化合物以晶型或非晶型存在，并且任何物质形态都被包含于本发明的范围内。另外，本发明的一些化合物可能包含了一个或更多个的不对称碳原子或双键，因此，会存以两个或更多的立体异构形态存在，例如外消旋体、对映体、非对映异构体、几何异构体等。本发明包括了这些本发明的化合物单独的立体异构体。本发明也提供了一种药物组合物，该药物组合物包含由上述化学式1表示的2-羟基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐，以及药学上可接受的赋形剂或添加剂。本发明的化合物或其药学上可接受的盐可单独给药，或者与任何便利的载体或稀释剂等一同给药，并且给药的剂型可以是单剂量单位或者多剂量单位。本发明的药物组合物能以固体形态或液体形态给药。固体剂型包括粉末、颗粒、片剂、胶囊、栓剂等，但并非仅限于此。并且，固体剂型还可以进一步包括稀释剂、增味剂、粘结剂、防腐剂、崩解剂、润滑剂、填料等，但并非仅限于此。液体剂型包括^象水溶液和丙二醇溶液这样的溶液、悬浮液、乳剂等，但并非仅限于此，还可以通过添加适当的添加剂来制备，所述添加剂例如可为着色剂、增味剂、稳定剂、增稠剂等。例如，粉末可通过简单地混合本发明的2-羟基苯曱酸衍生物和药学上可接受的赋形剂来制备，其中药学上可接受的赋形剂例如可为乳糖、淀粉、微晶纤维素。颗粒可由下列方法制备混合化合物或其药学上可接受的盐、药学上可接受的稀释剂和药学上可接受的粘结剂；用适当的溶剂进行湿法造粒，或用压缩力进行直接压缩。其中，药学上可接受的粘结剂例如可为聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基纤维素，适当的溶剂例如可为水、乙醇、异丙醇等。另外，片剂可通过用像硬脂酸镁这样的药学上可接受的润滑剂来混合颗粒，再对混合物进4亍压片而制成。根据要治疗的疾病和病人的状态，本发明的药物组合物可以采用但不限于下列形式给药口服制剂、注射剂(例如肌肉、腹腔、静脉、灌注、皮下、植入)、吸入、鼻腔、阴道、直肠、舌下、透皮、局部等，。根据给药途径，本发明的组合物可制备成适当剂量单位，其包括可药用并且无毒的载体、添加剂和/或赋形剂，这些物质均常在现有技术中使用。本发明的范围还包括能够在适当时间内持续释放药物的储存型制剂(Depottypeofformulation)。本发明还提供了2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐用于治疗和/或预防炎症性疾病的用途。即，本发明提供了一种用于治疗或预防炎症性疾病的药物组合物，该药物组合物包含由上述化学式1表示的2-羟基笨曱酸衍生物或其药学上可接受的盐。更明确地，2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐可用于治疗或预防下列疾病胃炎、胃溃疡、胰腺炎、大肠炎、关节炎、糖尿病、动脉硬化、肾炎和肝炎，以及细胞损伤或在退行性脑病中产生的炎症，例如阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症。但是，根据本发明，2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐的用途并非仅限于上述具体疾病的名称。为了治疗炎症性疾病，本发明的化合物可采用每日给药的方式，给药剂量为大约0.01mg/kg至大约100g/kg，优选为大约0.1mg/kg至大约10g/kg。但是，也可根据患者的条件(年龄、性别、体重等)、患者严重程度的需要、使用的有效成分、饮食等情况而采用各种不同的给药剂量。根据需要，本发明的化合物可以每日给药一次或每日若干次分次给药。附图简述图1表示化合物2没有对胃粘膜造成损伤，表明化合物2是安全的。通过口服给予不同剂量的测试样品来评价胃粘膜损伤的程度。将阿司匹林作为对照O口O0图2表示胃粘膜损伤程度的结果。以所说明的剂量口服测试样品。高剂量的化合物18没有对胃粘膜造成损伤。将吲咮美辛(Indomethacine)、布洛芬(ibuprofen)以及塞来昔布(celecoxib)作为对照品。图3表示化合物2对由幽门螺杆菌(Helicobacter)诱导的胃粘膜损伤的细胞保护作用的结果。将幽门螺杆菌(43504，5xl()ScfWml)单独或与具有所说明浓度的样品来一起加入到培养的AGS(人胃癌)细胞中。加入后24小时，用MTT法测定胃粘膜细胞的存活率。图4表示化合物2对由舒林酸(sulindac)(—种NSAID)诱导的胃粘膜损伤的细胞保护作用的结果。将100pM的舒林酸单独或与具有所说明浓度的样品一起加入到培养的AGS细胞中。加入后16小时，用MTT法测定胃粘膜细胞的存活率。图5表示化合物2对由H202(氧化应激)诱导的胃粘膜损伤的细胞保护作用的结果。单独使用或与具有所说明浓度的样品一起使用10(VMH202来处理培养的AGS细胞8小时，，并用培养基洗涤。24小时后用MTT法测定胃粘膜细胞的存活率。图6表示化合物2对由酒精(乙醇)诱导的胃粘膜损伤的细胞保护作用的结果。单独使用或与具有所说明浓度的样品一起使用25mM乙醇来处理培养的AGS细胞24小时，。然后用MTT法测定胃粘膜细胞的存活率。图7是表示TNF-amRNA表达程度的照片。将培养的AGS细胞，单独使用或与具有所说明浓度的化合物2—起使用25mM乙醇处理24小时。然后提取mRNA，并用RT-PCR法进行测定。图8表示化合物2对乙醇/盐酸(EtOH/HCl)诱导的消化道出血的保护作用的结果。A是正常大鼠胃的照片。B是对200250g大鼠禁食24小时后口服给予60%EtOH/150mMHC1造成消化道出血的大鼠胃的照片。C是在给予大鼠乙醇/盐酸之前30分钟预先给予化合物2,并在消化道出血90分钟后取出大鼠胃的照片。D是通过定量损伤区域来评价胃损伤程度的图表。图9表示化合物2对酒精性胃炎的保护作用的结果。A是正常大鼠胃的照片。B是对250g大鼠禁食24小时后口服给予乙醇(4ml/kg)造成消化道出血的大鼠胃的照片。C是在诱导消化道出血之前1小时预先给予化合物2，并在消化道出血90分钟后取出大鼠胃的照片。D是对胃损伤程度进行定量的图表。图10表示化合物2对NSAID诱导的胃炎的保护作用的结果。对250g大鼠禁食24小时后，口服给予吲哚美辛造成消化道出血(A和C)。NSAID诱导消化道出血之前1小时预先给予化合物2(B和D),并在消化道出血6小时(A和B)或12小时(C和D)后取出大鼠胃。图ll是通过角叉菜胶诱导的热痛觉过敏(一种关节炎动物模型)考察化合物2有效性的结果。对大鼠足跖皮内注射2%角叉菜胶诱导热痛觉过敏。口服给予化合物2(B和D),将布洛芬作为对照品。图12是通过酵母聚糖(zymosan)诱导的TNF-a水平(一种关节炎动物才莫型)考察化合物2有效性的结果。用气嚢(airpouch)给予大鼠1%酵母聚糖，并在给予酵母聚糖之前1小时按指示剂量口服给予化合物2。4小时后用ELISA法测定气嚢渗出物中的TNF-a水平。图13是表示化合物2对酵母聚糖诱导的IL-la水平(一种关节炎动物才莫型)减少程度的图表。用气嚢给予大鼠1%酵母聚糖，并在给予酵母聚糖之前l小时按指示剂量口服给予化合物2。4小时后用ELISA法测定气囊渗出物中的IL-la水平。图14是通过胶原(collagen)诱导的关节炎动物模型考察有效性的结果。图14显示了"交原导致的足肺胀。假手术正常小鼠胶原给予胶原的小鼠化合物18:腹腔注射25mg/kg化合物18的小鼠图15是通过胶原诱导的关节炎动物模型考察有效性的结果。在给予胶原后，腹腔注射25mg/kg化合物2、3、18以及曱氨嘌呤(对照，MTX,lmg/kg/week)。然后棵眼观察小鼠4周，并用关节炎指标评价结果。图16是通过胶原诱导的关节炎动物模型考察化合物6和ll有效性的结果。隔两周皮内注射胶原两次。一周后，腹腔注射化合物6、化合物11和曱氨嘌呤(对照)。然后，每天观察动物23周，并用关节炎指标评价结果。图17是通过5%葡聚糖硫酸钠(DDS)模型(炎性肠病动物模型)考察有效性的结果。用DDS处理后，口服10、25和50mg/kg的悬浮于于10%载体中的化合物18。假手术表示正常小鼠的结肠，DSS表示用5%DSS处理后的小鼠结肠。其它的是给予指示剂量化合物18的小鼠结肠照片。图18和图19对图17的结果进行定量的图表。图18是结肠的长度，图19是结肠的宽度。图20是使用DSS考察化合物18有效性的测试结果。在用DDS处理后，口服给予混悬于10%介质中的化合物18(25mg/kg)。然后，将结肠损伤导致的血<更(bloodyexcrement)、腹泻和污秽(dirtiness)的程度作为粪^更评分(fecesscore)来进行评价。图21是使用雨蛙肽(cerulein)诱导的急性胰腺炎模型考察有效性的测试结果。给予50|ig/kg雨蛙肽。2小时后，给予LPS诱导肿胀。A-C是结果图，D是表示胰腺重量的图表。A:正常Wistar大鼠B:纟会予雨蛙肽的Wistar大鼠C:给予化合物18(25mg/kg)的Wistar大鼠图22是使用雨蛙肽诱导的急性胰腺炎模型考察有效性的测试结果。给予50lig/kg雨蛙肽。2小时后，给予LPS诱导肺胀。然后给予25mg/kg化合物18,并对淀粉酶和脂肪酶这两种胰消化酶的变化进行定量。图23和24是使用雨蛙肽诱导的胰腺炎模型考察有效性的测试结果。给予50pg/kg雨蛙肽。评价本发明2-羟基苯甲酸衍生物对炎症标志物TNF-a,IL-113andPGE2的作用。图25是表示10.5个月大的APP/PS1老年痴呆小鼠(dementiamouse)(Tg+)脑中的TNF-a、IL-1J3及IL-6水平的图表。该水平是使用ELISA法测定的。用混合了化合物2(25mg/kg/day)或布洛芬(62.5mg/kg/day)的饲料，将3个月大的小鼠喂养7个月。图26是表示化合物2对脑血管屏障(brain-bloodvesselbarrier)的保护作用的照片(低和高的放大倍率)。A:正常小鼠B/F:APP/PS1老年痴呆小鼠C/G:给予化合物2的小鼠(25mg/kg/day)D/H:给予布洛芬的小鼠(62.5mg/kg/day图27是表示10.5个月大的正常小鼠(A)、10.5个月大的APP/PS1老年痴呆d、鼠(B，Tg+)脑中产生的淀粉样蛋白斑块(amyloidplaque)的照片。APP/PS1老年痴呆小鼠是用混合了化合物2(25mg/kg/d,C)或布洛芬(62.5mg/kg/d,D)的饲料，将3.5个月大的小鼠喂养7个月后的小鼠。使用硫代磺色素S(Thioflavin-Spigment)着色。E是对A-D的结果进行定量的图表。图28是表示对10.5个月大的正常小鼠、10.5个月大的APP/PS1老年痴呆小鼠以及用混合了化合物2(25mg/kg/d)的饲料将3.5个月大的小鼠喂养7个月的APP/PS1老年痴呆小鼠进行高架十字迷宫实验的实验结果。记录在开臂内的停留时间，并作为有效性结果。图29是表示G93A小鼠小胶质细胞(一种炎症标志物)活性的照片。用番茄凝集素对结果进行免疫组化染色。A:正常小鼠B:G93A小鼠C:给予化合物2(5mg/kg/day)的G93A小鼠图30是表示G93A小鼠炎性细胞因子(TNF-aandIL-1B)(—种炎症标志物)的mRNA水平的结果。试验中使用了RT-PCR法(逆转录-聚合酶链式反应)。图31是表示化合物2在帕金森病动物模型中对炎症抑制作用的照片。用CD1lb对结果进行免疫组化染色。A:给予MPTP的小鼠B:给予化合物2(50mg/kg/d)的小鼠图32是根据本发明对多个2-轻基苯甲酸衍生物进行单剂量毒性试验的结果。实施发明的方式以下，为了帮助本领域技术人员理解本发明，将对本发明进行非常详细地说明。但是以下提出的实施例是说明性的，且并非限制本发明的范围。明显地，在不背离本发明的本质和不超出本发明的范围，或者不损害其所有的实质性优点的情况下，可以对本发明作出各种修改。<合成实施例1>2-羟基-5-(4-(三氟曱基-苯基)-乙氨基)苯曱酸(化合物2)的制备在室温和氮气环境下，将5-氨基水杨酸(0.51g，3.90毫摩尔)加入到N,N-二甲基曱酰胺(20.0ml)中，并搅拌反应混合物。然后加入三乙胺(0.50ml)和四丁基碘化铵(10.1mg),搅拌30分钟。再加入l-(2-(溴乙基)-4-三氟曱基)苯，室温下搅拌3小时。加冰终止反应。过滤产生的晶体，再次用丙酮和己烷搅拌，并再次过滤。然后将过滤后的固体用醋酸乙酯溶解，再用0.5N盐酸和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，并真空蒸馏，得到0.54g(收率21%)2-羟基-5-(4-(三氟曱基-苯基)-乙氨基)笨甲酸。'HNMR(DMSO-d6):7.62(d,2H)，7.48(d,2H),6.98(d，1H)，6.88(q,1H),6.76(d,1H),3.24(t，2H),2.91(t，2H)<合成实施例2>2-羟基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯甲酸钾盐的制备向合成实施例1中制备的2-羟基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸19(10g,30.7毫摩尔)中加入无水乙醇(100ml),并加热到50°C至完全溶解。再将溶液冷却至0。C。然后用85%氢氧化钟(2.03g,30.7毫摩尔)和无水乙醇(20ml)溶液调pH至6.8~7.0，并在室温下搅拌2小时。过滤并干燥析出的晶体，得到10.4g(收率93%)2-羟基-5-(4-(三氟曱基)苯乙氨基)苯甲酸钾盐。力NMR(DMSO-d6):7.62(d,2H)，7.48(d，2H),6.98(d,1H),6.90(q，1H),6.84(d,1H),3.24(t,2H)，2.91(t,2H)<合成实施例3>2-羟基-5-[2-(4-硝基苯)乙氨基]-苯曱酸的制备按照与合成实施例l相似的步骤，通过使用5-氨基水杨酸(500mg,3.26毫摩尔)和4-硝基苯溴乙烷(900mg,3.92毫摩尔)，获得890mg(收率50%)2-羟基-5-[2-(4-硝基苯)乙氨基]-苯曱酸淡黄色固体。熔点234-236°C。<:151114>1205的元素分析<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><合成实施例4>2-羟基-5-[3-(4-硝基苯)-n-丙氨基]-苯曱酸的制备按照与合成实施例1相似的步骤，通过使用5-氨基水杨酸(500mg,3.26毫摩尔)和3-(4-硝基苯)溴丙烷(950mg，3.92毫摩尔)，获得520mg(收率50%)2-羟基-5-[3-(4-硝基笨)-n-丙氨基]-苯曱酸淡黄色固体。熔点229-231°C。(:161116化05的元素分析[表2]<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>〈合成实施例5>按照与合成实施例l相似的步骤来制备其它化合物。分析结果如表3所示。[表3]<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>化合物47.97(s,2H),7.88(s,1H),7.28(s,1H)，7.15(t，1H),6.82(d,1H),3.42(t,2H),3.09(t,2H)化合物57.91(d，1H),7.58(t,1H),7.51(d,1H),7.43(t，1H)，7.10(d,1H)，6.64(q,1H)，6.51(d,1H),3.21(t,2H),3.04(t,2H)化合物67.31(d，2H)，7.26(d,2H)，7.05(s,1H)，6.58(d，1H)，6.49(d,1H)，3.18(t，2H),2.81(t,2H)化合物77.31(m,2H),7.11(s,1H)，6.94(d,1H),6.87(d,1H),6.74(d,1H)，3.17(t,2H),2.87(t，2H)化合物87.51(q,2H),7.19(d,1H),6.97(t,1H),6.75(t，1H)，6.44(d，1H)，3.22(t,2H)，2.91(t,2H)化合物97.94(s,1H),7.64(q,2H),7.45(q,2H)，7.10(d，1H)，3.48(t，2H),3.21(t,2H)化合物107.83(t,1H),7.64(d,1H),7.35(t，1H)，6.96(q，1H)，6.52(t,1H),3.20(t，2H)，3.11(t，2H)化合物117.32(d，1H)，7.14(d，2H),6.82(d,2H)，6.78(q,1H),6.64(d,1H)，3.79(s,3H),3.24(t,2H),2.80(t，2H)化合物127.21-7.11(m,5H),6.93(d,1H)，6.78(d,1H)3.17(t,2H)，2.82(t，2H)化合物137.27-7.11(m，5H),6.95(d,1H),6.81(q,1H)，6.70(m,1H),2.97(t，2H),2.64(t，2H),1.82(m,2H)化合物147.61(d,2H),7.43(d,2H)，6.97(s,1H),6.85(t，1H),6.78(d，1H),3.04(t，2H)，2.78(t,2H)，1.87(m,2H)化合物157.17(t，3H),7.02(t,2H)，6.94(d,1H)，6.78(d,1H),2.99(t,2H),2.63(t,2H)，1.82(m,2H)化合物167.45(q,2H),7.15(d,1H),7.05(d,1H),6.92(q,1H)，6.77(d1H)，2.96(t,2H),2.66(t,2H),1.82(m，2H)化合物177.32(s,1H),7.18(d,1H),7.06(s,4H),6.84(d，1H)，3.01(t，2H),2.61(t,2H)，2.20(s，3H),1.83(m,2H)<合成实施例6〉2-乙酰氧基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯甲酸(化合物18)的制备通过以下反应方案来制备化合物18。化合物b化合物18化合物a:室温下，向溶于200mL^120:1,4-二恶烷(l:l)溶液的化合物2(50.0g,154毫摩尔)溶液中加入Na2C03(32.6g,307毫摩尔)、双碳酸二叔丁酯(40.3g,185毫摩尔)。搅拌8小时后，再加入另外的双碳酸二叔丁酯(16.8g,76.9毫摩尔)。室温下再搅拌8小时后，用2NHC1水溶液中和反应混合物(pH~6)。之后用乙酸乙酯(2x200mL)萃取得到的混合物。合并有机相并用盐水(100mL)洗涤，再用MgS04干燥并过滤。浓缩得到黄色泡沫化合物a。粗提物a不进行进一步纯化。&画R(400MHz,CDC13)S10.52(1H,brS),7.53(d,2H,/=8Hz),7.53(br,1H)，7.28(d,2H,/=8Hz),7.26(br，1H)，6.94(d，1H,8.8Hz)，3.85(t,2H,/=7.2Hz),2.94(t，2H,/=7.2Hz)，1.43(brs,9H).化合物b:(TC下，向溶于二氯曱烷(200mL)的由上述方法得到的化合物a溶液中加入A^V-二异丙基乙胺(80.3mL，461毫摩尔)和乙酰氯(21.9mL，307毫摩尔)。将反应混合物加热至室温并搅拌5小时。然后将1NHC1(100mL)水溶液加入反应混合物中。溶液分层后用二氯曱烷(100mL)萃取水层。合并有机相并用盐水(100mL)洗涤，再用MgS04干燥、过滤并浓缩。之后在二乙醚中重结晶粗产物，得到白色固体22(51.5g,两个步骤71.7%)。!H画R(400MHz,CDC13)S7.82(brs,1H),7.54(d,2H,/=8Hz),7.38-7.24(m，1H),7.28(d,1H,J=8Hz),7.08(d，1H，/=7.6Hz),3.91(t，2H,/=7.2Hz),2.98(t，2H，7.2Hz)，2.34(s,3H),1.42(brs,9H).化合物18:(TC下，用溶于1，4-二恶烷(200mL)的4NHC1溶液处理溶于二氯曱烷(200mL)的化合物b(51.5g,110毫摩尔)溶液。将反应混合物加热至室温。搅拌5小时后浓缩悬浮液。在二乙醚(500mL)中磨碎(triturate)残余物。过滤，并用二氯曱烷(500mL)和二乙醚(500mL)洗涤，得到白色固体化合物18(46.0g,82.5mmol,92.3%)。丽R(400MHz,DMSO-d6)S7.66(d,2H,/=7.6Hz),7.52(d,2H，《/=7.6Hz),7.15(s，1H),6.91(d,1H，《/=8.6Hz),6.85(d,1H，8.6Hz),3.32(t,2H,/=7Hz),2.95(t,2H,/=7Hz)，2.18(s，3H));LCMScalc.C18H16F3N04(M+H+):368，测定值368.22<实施例1>细胞中的抗炎症作用1-1.对NO产生的抑制作用制作用。BV2小胶质细胞系采用诱导细胞毒性的脂多糖(LPS)处理，同时加入1030或者100的本发明化合物。24小时醉育后，将50pl培养液收集于96孔板中。然后加入50^格里斯试剂，室温赙育10分钟。ELISA检测仪测定540nm的吸光值。每个化合物的ICso值经过计算，结果见下表4("NO"在"BV"中)。如表4所示，化合物9和14的IC5o值分别为1.79pM和6.7这些值处于最高的水平。IC5o值用于评价对NO产物的抑制作用时，大多数化合物的值都比100pM低。如结果所示，本发明的2-羟基苯曱酸衍生物可以作为抗炎症试剂，因为化合物抑制了NO诱导的炎症反应。1-2对基因表达的抑制作用2-羟基苯曱酸衍生物对BV2细胞系中iNOS基因表达的抑制作用进行了评估。1x106BV2细胞系的细胞在100mm皿培养，采用炎症诱导物质的脂多糖和本发明110(VM的2-羟基苯甲酸衍生物同时处理，浓度为常规的浓度区间。经过24小时的孵育，提取RNA。提取得到的RNA用于逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)，基因表达对照组为肺瘤坏死因子TNF-a、IL-ll3和iNOS。结果见下表4。如表4所见，炎性细胞因子的基因表达与对照(LPS)相比，化合物2使TNF-a基因的表达减少了63.24%，化合物8使其减少77.05%，化合物9使其减少61.67%。化合物2使IL-lfi基因的表达减少了75.1%,化合物5使其减少67.7%。化合物8、9、10和14使其减少超过50%。而且，化合物2，5,8,10,15和17抑制iNOS基因的表达超过50%。表4<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>、"ND"表示"未确定"。1-3对细胞因子产物的抑制作用2-羟基苯甲酸衍生物对BV2细胞系中细胞因子产物的作用进行了评估。1x106BV2细胞系的细胞接种于24孔板，采用炎症诱导物质的脂多糖和1OOuM样本(2-羟基苯曱酸衍生物或者对照药)同时处理。经过24小时的孵育，收集培养液。培养液中细胞因子TNF-a和IL-6的水平采用ELISA的方法测定。结果见下表5。如表5所示，TNF-a水平与对照(LPS)相比，化合物2使TNF-a的产生减少了62.26%，化合物34吏其减少31.90%,化合物14使其减少62.6%。然而，相同浓度的对照药(布洛芬和阿司匹林)并未显示出相同的减少效果。类似的，化合物也使IL-6产生的水平显著减少，但布洛芬和阿司匹林只减少了IL-6极其少的部分。表5<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>表5中，"ND"表示"未确定"。<实施例2〉基本毒性试验2-羟基苯曱酸衍生物的单剂量毒性被进行评估。结果如图32所示。如图32所示，本发明的较优例，化合物2和18的LD5。超过3g/kg,这说明化合物是安全的。化学物19的035()为0.5-1g/kg,化学物19的安全性较差。另外，化合物4显示出较好的抗炎症效果等，但化合物4在毒性试验中没有显示剂量依赖结果，因为它在3g/kg的剂量试验中引起小鼠的猝死。化合物3和14与化合物2有类似的化学结构，也在抗炎症试验中表现出与化合物2类似的治疗效果，但显示出较强的毒性或与剂量无关的毒性。<实施例3>关于诱导胃粘膜损伤的安全性试验传统的非甾体抗炎药具有两面性，会引起胃粘膜的损伤。因此，化合物2是否在抗炎症的同时引起胃粘膜损伤被进4亍评估。30,100或300mg/kg的阿司匹林口服作为对照组。本发明的化合物2甚至在口服1000mg/kg时也未引起胃粘膜损伤。由此可见，本发明的2-羟基苯甲酸衍生物相信是非常安全的(图1)。另外，化合物18的安全性也进行了评估，对照是p引，味美辛和布洛芬(其他的非甾体抗炎药)和塞来昔布(一种选择性COX-2抑制剂)。化合物18在口服大剂量时也未引起胃粘膜损伤(图2)。<实施例4>细胞保护作用本发明2-羟基苯曱酸衍生物的细胞保护作用被进行评估。AGS细胞系(人胃癌细胞，lx105细胞)接种于96孔板。分别经过24小时的幽门螺杆菌的处理(图3)、16小时的舒林酸(sulindoc)处理(图4)，8小时恥2处理(图5)，或24小时酒精处理(图6)引发胃粘膜的死亡。另外，一些AGS细胞系一起用1OuM,30uM或1OOuM的化合物2处理。这些细胞孵育24小时。四曱基偶氮唑盐液加入到每一个孔中，37。C孵育4小时。之后，用ELISA检测仪测定吸光值，计算胃粘膜细胞存活率。结果，1uM和10uM化合物2表现出超过50%的细胞保护作用，100uM的化合物2在大多数细胞致死模型中表现出超过70%的细胞保护效果。作为炎症的一个标志，TNF-amRNA的表达水平通过RT-PCR的方法测定。样品经过24小时处理后待用。1~100uM的化合物2彻底抑制TNF-amRNA的表达(图7)。从这些结果中可以看出，本发明2-羟基苯曱酸衍生物对炎症疾病具有有效的抑制作用，特别对胃部由各种原因引起的细胞保护和炎症抑制。另外，本发明2-羟基笨甲酸衍生物表现出比膜固思达和PPI更好的效果，膜固思达和PPI作为治疗炎症的试剂而广为人知。<实施例5〉胃肠道出血的保护效果5-1盐酸和酒精引起的胃炎2-羟基苯曱酸衍生物对酒精和盐酸引起的胃炎的作用进行评估。200250gSD雄性大鼠禁食24小时，口服60%EtOH/150mMHC1以诱导胃出血(胃损伤)。化合物2根据预防剂量，于胃出血前30分钟口服，胃出血后90分钟检测胃损伤程度。结果，化合物2保护胃出血量的减少，也没有表现出任何毒性。结果见图8。5-2酒精性胃炎2-羟基苯曱酸衍生物对酒精性胃炎的作用进行评估。250g的大鼠禁食24小时，口服酒精以引起胃出血(B)。部分大鼠在口服酒精前1小时采用化合物2预处理，这些大鼠表现出显著的出血量减少(D)。从这些结果可以看出，本发明的化合物2对酒精性胃炎具有强的保护作用。治疗酒精性胃炎比治疗其他原因引起的胃炎难，因为采用抑制胃液分泌或者加强胃保护因子都不容易。这是因为酒精引起各种疾病包括直接介导毒性和炎症，包括出血等。本发明化合物2被认为显著减少这种类型的酒精直接毒性。5-3非甾体抗炎药引起的胃炎2-羟基苯曱酸衍生物对非甾体抗炎药引起的胃炎的作用进行评估。在由非甾体抗炎药(indomethacine消炎痛)施用6小时引起的弱胃损伤才莫型(图10中A),和由indomethacine施用12小时引起的弱胃损伤模型(图10中C),化合物2在胃(图10中B和D)表现出卓越的保护效果。<实施例6>动物关节炎模型的功效试验6-l卡拉胶诱导炎症一莫型止痛效果的评估作为2-羟基苯曱酸衍生物的一个例，化合物2的止痛效果通过关节炎模型来评估。2%卡拉胶皮内注射入大鼠的左足，口服3-300mg/kg的化合物2以检测化合物2在热痛觉过^:关节炎it型中的效果。结果见图10。化合物2减少了在剂量依赖模式中的热痛觉过敏。300mg/kg的化合物2减少热痛觉过敏超过90%。另外，50mg/kg的布洛芬的减少效果，与100mg化合物处理的效果水平相当。6-2酵母多糖诱导的炎症模型:细胞因子的评估化合物2的抗炎症效果在酵母多糖引起的关节炎模型中被评估。0.5ml的1%酵母多糖和airpouch—起施用，在施用酵母多糖的1小时前口服3-300mg/kg化合物2。水肿，关节炎的一个主要症状，和细胞因子水平在4小时后观测到。结果，超过30mg/kg的化合物2减少TNF-alpha的水平优于对照组，减少的水平到300mg/kg符合剂量依赖模式。作为一个比较例，布洛芬(50mg/kg),—种著名的抗炎症药物，也被施用(图12)。类似的，IL-1alpha也减少，符合剂量依赖模式(图13)。从这些结果可知，本发明2-羟基苯曱酸衍生物被认为能够用于治疗炎症疾病，特别是关节炎。6-3胶原引起的关节炎动物评估模型为评估2-羟基苯曱酸衍生物的作用，胶原引起的关节炎模型(风湿性关节炎动物模型)被使用。牛II型胶原与弗氏完全佐剂充分混合成乳液后，皮内注射入8-10周DBA/lLacJ小鼠尾部原点。两周后进行同样的皮内注射。在第二次胶原皮下注射后，腹腔注射25mg/kg/day的化合物2,3和18,1mg/kg/week的甲氨蝶呤(对比例)或者10%媒介物(对照)(图15)。普通大鼠、注射胶原的大鼠(胶原)和注射化合物18的大鼠(化合物18,注射25mg/kg/day)的足部水肿的照片见图14。另外，50mg/kg/day的化合物6和11、5mg/kg/2days的曱氨蝶呤(对比例)被皮内注射入大鼠。磷酸緩冲盐溶液作为对照注射(图16)。2-3周后，根据下列的水肿参数每天观测关节炎的程度。如关节炎参数结果所示，化合物2、3和18,和化合物6和ll表现出显著的减小效果(图15和16)。-关节炎参数-4足以0-4分计数，总分16O分-正常足l分-轻微水肺和房水闪光，仅限于跗骨2分-轻微水胂和房水闪光，从踝骨到跗骨3分-中度水肿和房水闪光，从踝骨延伸到跖骨4分-水肿和房水闪光，从踝骨到脚趾<实施例7>炎症性肠病动物模型中的功效测定5%葡聚糖硫酸钠(DSS)模型用于炎症性肠病动物模型。5%葡聚糖硫酸钠与水混合后口服。模型中主要观察5%葡聚糖硫酸钠引起的上皮细胞损伤、左结肠溃疡和结肠长度的减少。该模型简单，可重复，并且可以通过剂量调控炎症的程度。因此，该模型经常用于评估药物候选物。葡聚糖硫酸钠在水瓶中继续施用。2-幾基苯甲酸衍生物在10%的媒介物中暂停和口服。葡聚糖硫酸钠的施用改变了结肠的长度和宽度。化合物18的疗效显著改善j活鹏的tc厌7p见乂x、园丄/、丄87f口丄y入饧结禾衣明夺反明^^、i^》丁i夏结/坊火模型具有保护效果。另外，每天的粪便情况包括便血、腹泻和污秒程度也进行了评估。柳氮磺胺吡啶和化合物18比单纯使用葡聚糖硫酸钠的显著减少粪便分数(图20)。<实施例8>急性胰腺炎动物模型的功效测定雨蛙肽引起的胰腺炎模型作为急性胰腺炎模型。雨蛙肽是一种缩胆嚢素类似物和胰腺中激素引起分泌的胰腺消化酶。腹腔注射雨蛙肽(50ug/kg)引起消化酶过分分泌进入胰腺。2小时后注射LPS以引起水肿。当雨蛙肽施用后，可以观察到脾脏的大量水肿。另外，当25mg/kg的化合物18施用是，水肿减少(图21)。图21的D是胰腺因为水肺而增重。化合物18的施用组显著减少胰腺重量。图22显示了血浆中的淀粉酶、脂肪酶和胰消化酶的水平。该模型过分增加消化酶，使得消化酶进入血液中。也就是说，血液中的消化酶减少可以作为减小胰腺炎的间接证据。如图22所示，淀粉酶和脂肪酶在胰腺炎动物^=莫型中的血液增加，施用25mg/kg的化合物18显著减少了这种增加。为了确认这种对炎症的^f呆护效果，；险测了炎症细力包因子TNF-a和IL-1J3的水平。COX-2(炎症酶)的产物——PGE2,通过ELISA的方法检测。TNF-a、IL-1I3和PGE2在胰腺炎模型中过分增长，化合物18可以显著减少这些炎症制造者(图23和24)。<实施例9〉化合物2在APP^e/PSlAE9双转基因痴呆小鼠模型中的功效测定9-1ELISA方法确定细胞因子的減少量APP/PS1转基因痴呆小鼠以含有25mg/kg/day的化合物2或者62.5mg/kg/day布洛芬的食物(chow)饲养，饲养7个月后处死(从3.5-10.5个月)。施用药物7个月后，TNF-a,IL-1B和IL-6采用ELISA(mean士SEM,n=3-5)定量检测。*，与对照(仅用普通食物饲养的APP/PS1转基因痴呆小鼠)有显著差异，才艮据Student-Neuman-Keuls，测试，采用单因素方差分析/K0.05。结果，与对照(仅用普通食物饲养的APP/PS1转基因痴呆小鼠)相比，化合物2的施用显著减少了TNF-a,IL-1J3和IL-6的水平(图25)。9-2化合物2对脑血栓的保护作用在阿尔茨海默病中脑血栓的损害是众所周知的。化合物2和布洛芬(对比例)对脑血栓的保护作用进行了评估。3ml/g的2%伊文思蓝施用于5个月大的APP/PS1转基因痴呆小鼠的血栓中。提供有2个月大到5个月大的含有25mg/kg/day的化合物2或者62.5mg/kg/day布洛芬的chow。结果，如图26的B和F所示，与普通小鼠相比，伊文思蓝的渗透性在皮层、海马区和丘脑部分有增加。另外，如图26所示，施用化合物2和施用布洛芬的实验组对脑血栓都具有保护作用。9-3硫代磺色素-S染色法分析化合物2对淀粉样斑块的减少2-羟基苯甲酸衍生物对痴呆的效果采用硫代磺色素-S染色法分析。与对照(仅用普通食物饲养的APP/PS1转基因痴呆小鼠)相比，25mg/kg/day的化合物2对祠养7个月(从3.5个月饲养到10.5个月的APP/PS1)的疗效，减少了53%的淀粉样斑块(图27)。另外，与对照(仅用普通食物饲养的APP/PS1转基因痴呆小鼠)相比，25mg/kg/day的化合物2对饲养4个月(/人8.5个月饲养到3012.5个月的APP/PS1)的疗效，显著减少了49.3%的淀粉样斑块。9-4在高架十字迷宫模型中化合物2的行为改善作用仅用食物或含有含有25mg/kg/day的化合物2的食物饲养APP/PS1转基因痴呆小鼠7个月(从3.5个月饲养到10.5个月)。经过7个月后的施用，高架十字迷宫测验用以确定行为改善作用。高架十字迷宫有两个开放臂(30cmx6cmx0.5cm)和两个闭合臂(30cmx6cmx15cm),也具有一个6cmx6cm的中心平台。在高架十字迷宫模型中，小鼠被小心地放置于平台上，小鼠的头部靠近开放臂。小鼠在开放臂上的时间被记录5分钟(mean±SEM,n=3-5)。*,与对照(仅用普通食物飼养的APP/PS1转基因痴呆小鼠)具有显著不同，根据Student-Neunian-Keuls测试，采用单因素方差分析p<0.05。结果，与对照(仅用普通食物飼养的APP/PS1转基因痴呆小鼠)相比，含有25mg/kg/day的化合物2伺养7个月的APP/PS1转基因痴呆小鼠减少了在开放臂上的时间(图28)。<实施例10>化合物2在G93AALS动物实验中的功效测定10-1小胶质细胞活化的减少具有与病人的l几萎缩侧索^&更化症ALS相似症状的G93A(甘氨酸—丙氨酸)转基因小鼠，被用于评估药物对ALS的治疗效果，ALS是一种主要的脑退化疾病。表达在腹侧的G93A小鼠的小胶质细胞(脑炎模型的一种标志物)的活化程度采用番茄凝集素染料评估。G93A小鼠的小胶质细胞比野生型小鼠的活化程度要高。另外，施用5mg/kg/day的化合物2，能够减少小胶质细胞的数量和活化程度(图29)。10-2细月包因子表达的减少仅以普通食物饲养的16周G93A小鼠和以含有5mg/kg/day化合物2的食物饲养的16周G93A小鼠，其腰段被提取并分离其RNA。炎症细胞因子TNF-a和IL-1J3的mRNA表达水平通过RT-PCR检测。结果，化合物2的施用有效减少了炎症细月包因子(图30)。<实施例12〉化合物2在帕金森动物模型的功效测定MPTP(40mg/kg)皮下注射进入C57/BL6小鼠(雄性/8周龄)。部分小鼠每天在注射MPTP前30分钟先皮下注射50mg/kg的化合物2。2天后，脑组织净皮提取并用CDllb进行免疫印迹。反应后，DAB(二氨基联苯胺)用于色谱法，采用光学显微镜测定小胶质细胞(脑炎模型的一种标志物)的活化程度(图31)。结果，MPTP引起的小胶质细胞的活化在施用化合物2后减少。本发明的化合物或者其药学上可接受的盐的具体适用症描述如下。但，这些适用症不能用于限制本发明的范围。<应用实施例1>胃炎本发明2-鞋基苯曱酸衍生物能在培养细胞的实验中有效地抑制细胞凋亡，引起凋亡的原因可以是酒精、幽门螺杆菌、非甾体抗炎药和H202。本发明的化合物表现出比膜固思达(Mucosta)或者PP1更好的效果，膜固思达和PPI是在胃炎细胞保护效果方面的知名药物。另外，本发明的化合物在酒精诱导胃炎动物模型和非甾体抗炎药诱导的轻微胃炎中，表现出更好的治疗效果。本发明的化合物在比阿司匹林高得多的剂量中也未引起胃出血，表现出良好的安全性。因此，本发明的2-羟基苯曱酸衍生物能够有效治疗和预防胃炎。<应用实施例2>炎症性肠病(InflammatoryBowlDisease,IBD)前列腺素(环氧化酶的产物)和白三烯(脂氧酶的产物)在炎症疾病中起到重要作用，例如溃疡性结肠炎。齐留通(zileuton),5-脂氧酶的一种抑制剂，和柳氮磺胺吡咬减少MPO(髓过氧物酶)的活性，MPO作为肠道损伤动物模型中的发炎程度的标志物((SinghVP等，IndianJExpBiol.2004;42(7):667-73)。另外，尼美舒利(一种选择性COX-2抑制剂)在两个模型(乙酸引起的IBD和LTB4引起的IBD)中表现出保护效果。尼美舒利在炎症反应中过分抑制MPO的活性(SinghVP等，ProstaglandinsOtherLipidMediat.2003;71(3-4):163-75)。因此，本发明的化合物具有抗炎症的效果，能够有效治疗炎症性肠病。<应用实施例3>风湿性关节炎本发明2-羟基苯曱酸衍生物在胶原诱导关节炎模型中，比曱氨蝶呤(对照)有相似或更好的治疗效果。曱氨蝶呤用于治疗关节炎，但有副作用。另外，本发明化合物对卡拉胶引起的痛觉过敏有止痛作用，也对酵母多糖引起的炎症细胞因子产物有抑制作用。因此，本发明化合物与已知的抗炎药有相近似的疗效，同时具有良好的安全性，能够作为治疗关节炎的药物。<应用实施例4〉胰腺炎急性胰腺炎是胰腺自身消化相关的炎症，原因是胰液或者胆汁的消化酶倒灌进入胰腺中。胰腺炎表现出各种症状，从水钟到严重出血，这些都损伤胰腺。有许多证据证明胰腺炎与炎症有关，有报道COX抑制剂在胰腺炎模型中有保护作用，抑制炎症因子TNF-a和前列腺素的产生(SongAM等，AmJPhysiolGastrointestLiverPhysiol.2002;283(5):G1166-74)。因此，本发明的化合物可以有效用于治疗胰腺炎。<应用实施例5>糖尿病炎症和疼痛炎症和疼痛在二型糖尿病中正扮演越来越重要的角色。有许多文献报道很多抗炎药物能减轻二型糖尿病症状或者延迟二型糖尿病的发作(DeansKA等，DiabetesTechnolTher.2006;8(1):18-27)。Lisofylline,—种抗炎症化合物，通过施用链脲霉素抑制IFN-y和TNF-a，减轻小鼠50。/。的糖尿病症状(Yangz等，Pancreas.2003;26(4):e99-104)。因此，本发明化合物能够有效治疗和预防糖尿病炎症和疼痛。<应用实施例6>动脉硬化在栽脂蛋白￡-基因缺陷(&0￡(-/-))小鼠动脉粥样硬化的形成初期，选择性COX-2抑制剂(例如罗非昔布和NS-398)和非选择性COX抑制剂(例如消炎痛)分别减少动脉硬化的约35-38%和约38-51%(BurleighMEJMolCellCardiol.2005Sep;39(3):443-52)。因此，本发明化合物的抗炎症效果能够有效治疗动脉硬化。<应用实施例7〉阿尔茨海默病阿尔茨海默病是最常见的成人痴呆症。阿尔茨海默病的特征为神经元纤维紊乱、淀粉样斑块和严重神经元坏死。也有大量的文献表明阿尔茨海默病与炎症有关。经常有报道小胶质细胞和炎症因子在痴呆动物模型中被检测到数量增加(MinghettiL.CurrentOpinioninNeurology2005,18:315-321)。在阿尔茨海默病动物模型中，抑制炎症药物的施用可能有保护效果(TownsendKP和PraticoD.FASEBJ.2005;19(12):1592-601)。因此，本发明化合物有细胞保护作用和抗炎症作用，可以用于有效治疗阿尔茨海默病。<应用实施例8〉ALS洛盖赫里格病是肌萎缩侧索硬化或运动神经元病，运动神经元的持续退化是该病的病理学特点。有大量的文献表明ALS与炎症有关。经常有报道小胶质细胞和炎症细胞因子在ALS动物模型G93A小鼠中增力口(WeydtP和MollerT.Neuroreport.2005，25;16(6):527-31)。在ALS动物模型中，抑制炎症药物的施用可能有保护效果(WestMetal.,JNeurochem.2004;91(1):133-43)。因此，本发明化合物可以用于有效治疗ALS。<应用实施例9>帕金森病帕金森病，原型运动障碍，其临床特点为震颤、僵化、运动徐缓和姿势不稳定，病理诊断学上表现为黑质中的多巴胺神经元的选择性凋亡。有大量的文献表明帕金森病与炎症有关。有报道小细胞胶质和炎症细胞因子在帕金森病例中数量增加(GaoHM,TrendsPharmacolSci.2003;24(8):395-401;MinghettiL.CurrOpinNeurol.2005;18(3):315-21)。在帕金森病动物才莫型中，抑制炎症药物的施用有保护效果(GaoHM,TrendsPharmacolSci.2003;24(8):395-401)。因此，本发明化合物有细胞保护作用和抗炎症作用，可以用于有效治疗帕金森病。工业上的可利用性本发明提供了一种制药学上的化合物，能有效预防和治疗炎症疾病，该化合物包含2-轻基苯曱酸衍生物，以其化学形式或其制药上可以接受的盐为代表，还提供了一种采用该制药化合物治疗或者预防炎症疾病的方法。本发明的制药上的化合物能够非常有效地治疗和预防炎症疾病，例如胃炎、胰腺炎、结肠炎、关节炎、糖尿病的炎症、动脉硬化、肾炎、肝炎、阿尔茨海默病、帕金森病和洛盖赫里格病，同时，作为药物也是安全的。权利要求1.一种用于治疗或预防炎症性疾病的药物组合物，所述药物组合物包含作为有效组分的、由化学式1表示的2-羟基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐[化学式1]其中，n为2到5的整数；R1为氢或烷基；R2为氢、烷基或醛基；R3为氢或乙酰氧基；以及X独立地为氢、硝基、卤素、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基。2.如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述2-羟基苯曱酸衍生物为选自以下列物质构成的组中的任意一种2-羟基-5-苯乙氨基-苯曱酸、2-羟基_5_[2_(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(3-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、5-[2-(3,5-双-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(2-硝基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、5-[2-(4-氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、5-[2-(3,4-二氟-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、5-[2-(3,4-二氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、5-[2-(4-氟-2-三氟曱基-苯基)-乙tt]-2-羟基-苯曱酸、5-[2-(2-氟-4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(4-曱氧基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、2-羟基-5-(2-o-曱苯基-乙氨基)-苯曱酸、2-羟基-5-(3-苯基-丙氨基)-苯曱酸、2-羟基_5_[3_(4-三氟曱基-苯基)-丙氨基]_苯曱酸、5-[3-(4-氟-苯基)-丙氨基]-2-羟基-苯甲酸、5-[3-(3，4-二氯-苯基)-丙氨基]-2-羟基-苯曱酸、2-羟基-5-(3-p-曱苯基-丙氨基》苯曱酸、2-乙酰氧基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸和5-[2-(2-氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯甲酸。3.如权利要求1所述的药物组合物，其中，所述炎症性疾病为选自以下列疾病构成的组中的任意一种胃炎、大肠炎、胰腺炎、关节炎、糖尿病炎症、动脉硬化、肾炎、肝炎、阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症。4.一种用于治疗或预防炎症性疾病的方法，该方法包括给予有需要的主体治疗有效量的、由化学式1表示的2-羟基苯曱酸衍生物或其药学上可接受的盐[化学式1]其中，n为2到5的整数；为氬或烷基；R2为氢、烷基或醛基；R3为氢或乙酰氧基；以及X独立地为氢、硝基、卣素、烷基、卣代烷基、烷氧基、卣代烷氧基。5.如权利要求4所述的方法，其中，所述2-羟基苯曱酸衍生物为选自以下列物质构成的组中的任意一种2-羟基-5-苯乙氨基-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(3-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、5-[2-(3,5-双-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(2-硝基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、5-[2-(4-氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、5-[2-(3,4-二氟-苯基)-乙氨基]-2-羟基-笨曱酸、5-[2-(3,4-二氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、5-[2-(4-氟-2-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯甲酸、5-[2-(2-氟-4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸、2-羟基-5-[2-(4-曱氧基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸、2-羟基-5-(2-0-曱苯基-乙氨基)-苯曱酸、2-羟基-5-(3-苯基-丙氨基)-苯曱酸、2-羟基-5-[3-(4-三氟曱基-苯基)-丙氨基]-苯曱酸、5-[3-(4-氟-苯基)-丙氨基]-2-羟基-苯曱酸、5-[3-(3，4-二氯-苯基)-丙氨基]-2-羟基-苯曱酸、2-羟基-5-(3卞-甲苯基-丙氨基)-苯甲酸、2-乙酰氧基-5-[2-(4-三氟曱基-苯基)-乙氨基]-苯曱酸和5-[2-(2-氯-苯基)-乙氨基]-2-羟基-苯曱酸。6.如权利要求4所述的方法，其中，所述炎症性疾病为选自以下列疾病构成的组中的任意一种胃炎、大肠炎、胰腺炎、关节炎、糖尿病炎症、动脉硬化、肾炎、肝炎、阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症。全文摘要本发明涉及用于治疗或预防炎症性疾病和细胞损伤的药物组合物，和一种治疗或预防炎症性疾病和细胞损伤的方法。本发明使用由具体化学式表示的2-羟基苯甲酸衍生物或其药学上可接受的盐。本发明的化合物用于治疗或预防细胞损伤和炎症性疾病，包括胃炎、胃溃疡、胰腺炎、大肠炎、关节炎、糖尿病炎症、动脉硬化、肾炎、肝炎、阿尔茨海默病、帕金森病和肌萎缩性脊髓侧索硬化症。文档编号A61P19/02GK101426484SQ200780013120公开日2009年5月6日申请日期2007年4月13日优先权日2006年4月13日发明者任斗淳,卞汉烈,咸基白,安春山,尹福仙,权宁培,李晋焕,李英爱,柳根宝,赵成益,赵济英,郭秉周申请人:纽若泰克株式会社